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NaCS/PDMDAAC聚电解质复合膜的制备及静态接触角测定 被引量:5
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作者 李鸣明 姚善泾 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第3期654-659,共6页
A new type of NaCS/PDMDAAC polyelectrolyte complex membrane prepared by interfacial reaction of sodium cellulose sulfate as polyanions and poly(dimethylallylammonium chloride)as polycations was proposed.The static con... A new type of NaCS/PDMDAAC polyelectrolyte complex membrane prepared by interfacial reaction of sodium cellulose sulfate as polyanions and poly(dimethylallylammonium chloride)as polycations was proposed.The static contact angle of the polyelectrolyte complex(PELC)membrane surface was measured to characterize membrane wettability.The effects of concentration of polyelectrolyte,molecular weight,and reaction time on contact angle were investigated.It was found that NaCS/PDMDAAC PELC membrane was hydrophilic.Its contact angle decreased with the increasing concentration of NaCS and molecular weight of PDMDAAC,and increased with the increasing concentration of PDMDAAC and reaction time. 展开更多
关键词 纤维素硫酸钠 聚二甲基二烯丙基氯化铵 nacs/pdmdaac聚电解质复合膜 接触角
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NaCS/PDMDAAC聚电解质复合膜的制备及性质测定 被引量:3
2
作者 谢金奶 张慧敏 《嘉兴学院学报》 2006年第z1期166-173,共8页
该文以新型聚电解质复合膜的开发为背景,以纤维素硫酸钠(sodium cellulose sulfate,简称NaCS)为聚阴离子、聚二甲基二烯丙基氯化铵[Poly(dimethylallylammonium chloride),简称PDMDAAC]为聚阳离子,利用两者的界面反应制备NaCS/PDMDAAC... 该文以新型聚电解质复合膜的开发为背景,以纤维素硫酸钠(sodium cellulose sulfate,简称NaCS)为聚阴离子、聚二甲基二烯丙基氯化铵[Poly(dimethylallylammonium chloride),简称PDMDAAC]为聚阳离子,利用两者的界面反应制备NaCS/PDMDAAC聚电解质复合膜,优化了复合膜的制备条件,并对复合膜的性质进行了表征,如采用扫描电镜观察膜的表面形态及断面结构,测定其溶胀性、截留分子量等。 展开更多
关键词 纤维素硫酸钠 聚二甲基二烯丙基氯化铵 nacs/pdmdaac聚电解质合膜 复合反应
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NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化假单胞菌TS-1138从ATC合成L-半胱氨酸 被引量:5
3
作者 金永杰 杨文博 +4 位作者 刘忠 白钢 李洋 余养盛 孙丹 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期119-123,共5页
采用非均相反应制备NaCS(硫酸纤维素钠),考察了反应液中正丙醇-硫酸的最佳比例为25∶35,NaCS和PDMDAAC的最适滴制浓度分别为4%和3%;利用NaCS-PDMDAAC微胶囊对假单胞菌TS-1138进行固定化并进行连续培养,结果表明,菌体能在胶囊内很好的生... 采用非均相反应制备NaCS(硫酸纤维素钠),考察了反应液中正丙醇-硫酸的最佳比例为25∶35,NaCS和PDMDAAC的最适滴制浓度分别为4%和3%;利用NaCS-PDMDAAC微胶囊对假单胞菌TS-1138进行固定化并进行连续培养,结果表明,菌体能在胶囊内很好的生长和繁殖,连续培养132h后菌浓可达到4.5×1011个/mL胶囊,是在相同条件下游离培养的6倍;固定化菌体以ATC为底物生成L-半胱氨酸的催化活性是游离培养菌体的2.5倍,并且固定化菌体的重复使用能力明显优于游离菌体.重新考察固定化菌体的最适催化反应时间为3h,在一定程度上弥补了微胶囊传质性相对较差的不足. 展开更多
关键词 固定化 nacs-pdmdaac微胶囊 假单胞菌 L-半胱氨酸
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大孔型NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化细胞在摇床和鼓泡塔中的培养研究 被引量:1
4
作者 张俊 姚善泾 +2 位作者 应小姣 关怡新 林东强 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期633-637,共5页
NaCS-PDMDAAC生物微胶囊囊膜较为致密,影响胶囊内外物质的交换,从而影响胶囊内细胞的生长.利用淀粉酶对致孔剂淀粉的降解作用制备了一种大孔型的纤维素硫酸钠-聚二甲基二烯丙基氯化铵(NaCS-PDMDAAC)生物微胶囊,实验表明胶囊的孔径和通... NaCS-PDMDAAC生物微胶囊囊膜较为致密,影响胶囊内外物质的交换,从而影响胶囊内细胞的生长.利用淀粉酶对致孔剂淀粉的降解作用制备了一种大孔型的纤维素硫酸钠-聚二甲基二烯丙基氯化铵(NaCS-PDMDAAC)生物微胶囊,实验表明胶囊的孔径和通透性能都有了很大的提高.将酵母和大肠杆菌作为模型细胞包埋于胶囊中分别通过摇瓶和鼓泡塔半连续培养,在鼓泡塔中胶囊内细胞的密度要高于摇床,表明氧气的传递是胶囊内好氧细胞生长的限制因素,大孔胶囊由于囊膜孔径变大,氧气的传递更为快速,在鼓泡塔中大孔型胶囊内的最大细胞密度比常规胶囊要高出20%~110%.由于对氧气的需求量的不同,大肠杆菌菌浓提高的程度要高于酵母. 展开更多
关键词 大孔型胶囊 nacs-pdmdaac 扩散 固定化
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SA/NaCS-PDMDAAC微胶囊固定化酵母细胞合成胞苷三磷酸 被引量:1
5
作者 易喻 张杨 +2 位作者 蒲通 钱捷 应国清 《氨基酸和生物资源》 CAS 2011年第2期1-4,共4页
通过海藻酸钠/纤维素硫酸钠-聚二甲基二烯丙基氯化铵(SA/NaCS-PDMDAAC)微胶囊固定化酵母细胞将胞苷一磷酸(CMP)转化为胞苷三磷酸(CTP),考察了各种因素条件对CTP转化率的影响,以提高CTP的转化率。通过考察分批补料添加葡萄糖,固定化酵母... 通过海藻酸钠/纤维素硫酸钠-聚二甲基二烯丙基氯化铵(SA/NaCS-PDMDAAC)微胶囊固定化酵母细胞将胞苷一磷酸(CMP)转化为胞苷三磷酸(CTP),考察了各种因素条件对CTP转化率的影响,以提高CTP的转化率。通过考察分批补料添加葡萄糖,固定化酵母量,CMP浓度等以达到提高CTP转化率的要求。结果在250 mL锥形瓶中加入20 mL反应液(CMP60 mmol.L-1,葡萄糖150 mmol.L-1,磷酸缓冲液250 mmol.L-1,氯化镁20 mmol.L-1,pH6.5),加入固定化酵母25g,在35℃下每反应2 h添加葡萄糖0.27 g一次,当添加2次后,即反应总时间为6 h,CTP转化率可达80%以上。该固定化酵母细胞可以反复利用5次,且转化率稳定在70%左右。 展开更多
关键词 胞苷三磷酸 SA/nacs-pdmdaac微胶囊 生物合成
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小麦耐盐相关NAC转录因子的生物信息与表达分析
6
作者 王伟伟 罗政辉 +6 位作者 邹景伟 张玉杰 钮力亚 王志 王奉芝 赵振杰 于亮 《麦类作物学报》 北大核心 2025年第3期287-299,共13页
NAC转录因子对植物抗逆境胁迫具有重要作用。为了解小麦耐盐相关NAC转录因子的生物学信息,对耐盐品种沧麦6005和盐敏感品种科农9204进行转录组测序,筛选耐盐相关NAC转录因子,并对其进行生物信息学分析;对供试材料进行盐胁迫处理,提取根... NAC转录因子对植物抗逆境胁迫具有重要作用。为了解小麦耐盐相关NAC转录因子的生物学信息,对耐盐品种沧麦6005和盐敏感品种科农9204进行转录组测序,筛选耐盐相关NAC转录因子,并对其进行生物信息学分析;对供试材料进行盐胁迫处理,提取根部分生组织RNA,反转录为cDNA,对重点候选基因进行qRT-PCR分析。结果表明,共筛选出28个耐盐相关NAC转录因子,其中10个的等电点呈碱性,其余等电点呈酸性,且均为亲水性蛋白;亚细胞定位主要定位在细胞核;蛋白质二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主。经共线性分析,小麦和水稻的NAC转录因子含有多对共线性关系,表明小麦与水稻亲缘关系较近。NAC转录因子启动子区域含有多种与激素响应和逆境胁迫诱导相关顺式作用元件,其中TaNAC24含有顺式调控元件结合位点最多,共有51个。盐胁迫处理后,9个重要基因中,4个基因表达量显著上调,5个基因表达量显著下调,与转录组测序结果一致,这些基因可能介导了小麦的抗盐性。 展开更多
关键词 小麦 盐胁迫 nac 转录因子 生物信息学分析
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桃NAC4基因的克隆与表达分析
7
作者 郭正兵 韩柏明 +1 位作者 李静 彭斌 《分子植物育种》 北大核心 2025年第7期2172-2179,共8页
NAC(NAM,ATAF1/2和CUC2)转录因子是植物特有的大蛋白家族,在植物发育和胁迫响应过程中发挥重要作用。本研究使用RT-PCR技术在‘新白花’桃(Prunus persica L.Batsch)果实中分离克隆获得PpNAC4基因,利用生物信息分析软件对PpNAC4进行基... NAC(NAM,ATAF1/2和CUC2)转录因子是植物特有的大蛋白家族,在植物发育和胁迫响应过程中发挥重要作用。本研究使用RT-PCR技术在‘新白花’桃(Prunus persica L.Batsch)果实中分离克隆获得PpNAC4基因,利用生物信息分析软件对PpNAC4进行基因结构及蛋白质理化性质分析。结果表明,PpNAC4共编码352个氨基酸,N端含有一个NAM保守结构域,属于NAC转录因子家族。PpNAC4蛋白为亲水性不稳定蛋白,无跨膜结构域,二级结构以无规卷曲为主。系统进化分析表明,PpNAC4在进化过程中较为保守,与同属的甜樱桃、梅花和扁桃亲缘关系比较近。RT-qPCR分析结果表明PpNAC4可能参与果实成熟。烟草亚细胞定位结果表明PpNAC4定位在细胞核。酵母激活活性结果表明PpNAC4具有转录激活活性。为进一步完善桃果实成熟调控网络提供理论依据。 展开更多
关键词 nac 基因克隆 表达分析 成熟
原文传递
蚕豆NAC转录因子家族鉴定分析及抗叶斑病基因筛选
8
作者 卞晓春 王凡 +3 位作者 刘陈玮 徐仁超 陆红臣 吴春芳 《江苏农业学报》 北大核心 2025年第9期1683-1695,共13页
NAC转录因子在植物生长发育及逆境胁迫响应中具有重要作用。为明确蚕豆(Vicia faba L.)NAC转录因子的功能,本研究利用生物信息学方法从蚕豆基因组数据库中鉴定蚕豆NAC家族基因成员,分析其基因结构、启动子顺式作用元件、染色体分布以及... NAC转录因子在植物生长发育及逆境胁迫响应中具有重要作用。为明确蚕豆(Vicia faba L.)NAC转录因子的功能,本研究利用生物信息学方法从蚕豆基因组数据库中鉴定蚕豆NAC家族基因成员,分析其基因结构、启动子顺式作用元件、染色体分布以及编码蛋白质的理化性质等,结合造成蚕豆叶斑病的病原菌链格孢菌(Alternaria alternata)侵染的蚕豆转录组数据筛选与抗病相关的候选基因。结果表明,蚕豆NAC转录因子基因家族共有77个成员,不均匀分布于6条染色体上,其编码的蛋白质大小介于133 aa至665 aa之间;VfNAC蛋白分为16个亚家族,均含有NAM保守结构域,均定位于细胞核。VfNAC基因启动子上包含光响应元件、激素响应元件、干旱响应元件等多种顺式作用元件。转录组测序结果显示,链格孢菌侵染后蚕豆中有33个VfNAC基因差异表达,筛选出4个差异表达显著的基因作为关键抗病候选基因进一步研究。本研究为蚕豆NAC转录因子后续的生物学功能解析及抗病分子机制研究提供了参考。 展开更多
关键词 蚕豆 nac转录因子 链格孢菌 抗病基因
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大孔型NaCS-PDMDAAC生物微胶囊的制备 被引量:2
9
作者 张俊 姚善泾 《化学反应工程与工艺》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期65-69,共5页
利用淀粉酶降解淀粉制备了大孔型的纤维素硫酸钠-聚二甲基二烯丙基氯化铵(NaCS-PDMDAAC)生物微胶囊,改善了该体系胶囊的扩散性能。通过对淀粉预处理方法、淀粉种类、淀粉添加方法以及浓度等制备因素的研究,得到制备大孔膜胶囊的条件为:... 利用淀粉酶降解淀粉制备了大孔型的纤维素硫酸钠-聚二甲基二烯丙基氯化铵(NaCS-PDMDAAC)生物微胶囊,改善了该体系胶囊的扩散性能。通过对淀粉预处理方法、淀粉种类、淀粉添加方法以及浓度等制备因素的研究,得到制备大孔膜胶囊的条件为:将1.2%的木薯淀粉糊化3min,冷却得到糊化淀粉的胶体溶液加入NaCS搅拌均匀,滴入PDMDAAC溶液中,待反应结束后洗涤,置于淀粉酶溶液中降解膜上淀粉以形成相应孔径。制备得到的胶囊膜的孔径和孔隙率都有了很大的提高。 展开更多
关键词 生物微胶囊 大孔型 制备 聚二甲基二烯丙基氯化铵 pdmdaac 纤维素硫酸钠 预处理方法 降解淀粉 扩散性能 添加方法 淀粉糊化 搅拌均匀 胶体溶液 糊化淀粉 淀粉酶 降解膜 孔隙率 胶囊膜 孔径
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基于全长转录组的白蜡树NAC基因家族的鉴定与密码子偏好性分析
10
作者 孙晓春 黄文静 李会容 《中国野生植物资源》 2025年第10期36-44,共9页
目的:对白蜡树(Fraxinus chinensis Roxb.)NAC基因家族进行鉴定与系统生物信息学分析,并探究其密码子偏好性与影响因素。方法:基于白蜡树全长转录组数据对NAC基因家族进行鉴定,并对其理化性质、系统发育、保守基序、表达模式、密码子偏... 目的:对白蜡树(Fraxinus chinensis Roxb.)NAC基因家族进行鉴定与系统生物信息学分析,并探究其密码子偏好性与影响因素。方法:基于白蜡树全长转录组数据对NAC基因家族进行鉴定,并对其理化性质、系统发育、保守基序、表达模式、密码子偏好性进行分析。结果:共鉴定得到35个NAC转录因子,编码氨基酸序列长度为224~617 aa,理论等电点4.43~9.20,不稳定系数28.80~56.64,脂肪系数51.99~80.23,均定位到细胞核;二代转录组数据中筛选到的14个NAC基因在叶片和枝皮中具有显著差异表达。密码子偏好性分析结果为白蜡树NAC基因家族偏好使用以A/U结尾的密码子,ENC值在45.06~59.88之间,平均值为54.18,表明密码子的偏好性较弱;最优密码子为AGG、GCA、UCA和UAU;中性绘图分析与ENC-plot分析结果表明影响其密码子偏好性的主要因素是自然选择。结论:研究结果为后续对白蜡树NAC基因家族的功能和作用机制的深入研究提供科学依据。 展开更多
关键词 白蜡树 nac转录因子 生物信息学 密码子偏好性
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玉米赤霉烯酮致彭波半细毛羊睾丸支持细胞增殖凋亡、氧化应激及NAC保护机制
11
作者 朱爱文 王健 +6 位作者 朱戈辉 刘海霞 平措班旦 王军 德庆卓嘎 闫伟 韩大勇 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第6期2752-2764,共13页
旨在研究玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对彭波半细毛羊睾丸支持细胞的生殖毒性及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对睾丸支持细胞抗氧化应激的保护机制。本试验选取体质健康3月龄雄性彭波半细毛羊((13.87±0.46)kg)的睾丸组织用以分离支持细胞... 旨在研究玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对彭波半细毛羊睾丸支持细胞的生殖毒性及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对睾丸支持细胞抗氧化应激的保护机制。本试验选取体质健康3月龄雄性彭波半细毛羊((13.87±0.46)kg)的睾丸组织用以分离支持细胞进行体外染毒试验,试验组ZEA染毒剂量分别为25、50、100、200μmol·L^(-1),对照组(NC组)仅添加0.1%DMSO,每组3个重复,筛选ZEA试验浓度。采用组合酶消化法、差速贴壁法和免疫荧光染色(IF)法进行彭波半细毛羊睾丸组织支持细胞分离、纯化培养及特异性抗体GATA4和Vimentin鉴定。CCK-8法、EdU法检测睾丸组织支持细胞活率及增殖能力。qRT-PCR和Western blot技术从转录和翻译水平检测细胞增殖(pcna)、凋亡(bax、caspase3、caspase 9)和氧化应激(cat、gsh-px、sod 1)等相关基因和蛋白的表达变化规律以及NAC的保护作用。结果发现,组合酶消化法和差速贴壁法能够获得满足ZEA染毒试验的SCs,随ZEA染毒浓度升高,SCs细胞活性和细胞增殖数量逐渐下降,200μmol·L^(-1)ZEA处理组SCs活性和细胞增殖数量极显著低于NC组(P<0.01);细胞增殖基因pcna的mRNA相对表达量和蛋白表达量均极显著低于NC组(P<0.01);促凋亡相关基因bax、caspase3、caspase 9的mRNA相对表达量极显著高于NC组(P<0.01),CASPASE3蛋白表达量极显著高于NC组(P<0.01),BAX、CASPASE9蛋白表达量显著高于NC组(P<0.05);抗凋亡基因bcl-2的mRNA相对表达量和蛋白表达量显著低于NC组(P<0.05);氧化应激相关基因gsh-px和sod 1的mRNA相对表达量极显著高于NC组(P<0.01),cat的mRNA相对表达量显著高于NC组(P<0.05),CAT、SOD1蛋白表达量极显著于NC组(P<0.01)。N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后,与NC组对比,试验组cleaved-CASPASE-9、cleaved-CASPASE-3蛋白表达量极显著下降(P<0.01),BAX蛋白表达量显著下降(P<0.05),BCL-2蛋白表达量显著上升(P<0.05)。综上表明,ZEA暴露能够对彭波半细毛羊产生生殖毒性,抑制睾丸SCs增殖,促进SCs凋亡,导致SCs发生氧化损伤,而NAC对ZEA诱导的彭波半细毛羊睾丸SCs氧化损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 玉米赤霉烯酮 睾丸 支持细胞 增殖凋亡 氧化应激 N-乙酰半胱氨酸
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基于转录组的北乌头、芍药种子休眠NAC家族成员鉴定与分析 被引量:1
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作者 乌兰图雅 路景诗 +3 位作者 贾俊英 侯伟峰 潮乐蒙 张晓明 《种子》 北大核心 2025年第4期43-53,共11页
运用生物信息学方法对北乌头、芍药种子在低温层积下基于转录组数据的NAC基因家族进行鉴定,共鉴定出33个AKNAC和37个PLNAC家族基因。结果表明,AKNAC、PLNAC氨基酸数量分别为85~661个、80~654个;分子量分别为10.13~67.69 kD、9.38~73.87 ... 运用生物信息学方法对北乌头、芍药种子在低温层积下基于转录组数据的NAC基因家族进行鉴定,共鉴定出33个AKNAC和37个PLNAC家族基因。结果表明,AKNAC、PLNAC氨基酸数量分别为85~661个、80~654个;分子量分别为10.13~67.69 kD、9.38~73.87 kD;等电点分别为4.74~9.84、4.78~10.05;不稳定系数分别为23.13~57.46、22.91~57.53;脂溶指数分别为53.96~90.14、30.05~82.00;亲水系数分别为-0.909~0.014、-1.245~-0.072,均属亲水性蛋白。多数蛋白定位于细胞核中,NAC家族成员存在一定相似性,进化树结果显示,Motif、Domain、NAC序列结构存在一定相似性。北乌头、芍药不同NAC家族成员层积期间相对表达量、不同阶段变化趋势都有所不同,部分NAC家族成员在低温期间上调表达量,体现NAC响应非生物胁迫的特征,并且部分表达量变化趋势相似的家族成员被聚类在一起,体现结构与功能的相适应性。 展开更多
关键词 nac基因家族 北乌头 芍药 生物信息学分析
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基于WGCNA鉴定大豆抗大豆花叶病毒NAC转录因子及其诱导表达分析
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作者 牛景萍 赵婧 +5 位作者 郭茜 王书宏 赵晋忠 杜维俊 殷丛丛 岳爱琴 《生物技术通报》 北大核心 2025年第7期95-105,共11页
【目的】挖掘大豆抗大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)病相关的核心转录因子(transcription factors,TFs),为深入解析大豆抗病分子机制和创制抗病品种提供理论依据。【方法】以大豆抗病材料X149和感病材料X97受大豆花叶病毒株系S... 【目的】挖掘大豆抗大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)病相关的核心转录因子(transcription factors,TFs),为深入解析大豆抗病分子机制和创制抗病品种提供理论依据。【方法】以大豆抗病材料X149和感病材料X97受大豆花叶病毒株系SC15诱导后的转录组数据为基础,利用PlantTFDB v 5.0数据库从转录组中预测全基因组转录因子基因;基于差异表达转录因子基因,通过加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)获得抗病转录因子相关模块和抗病核心转录因子;采用String 12.0预测转录因子互作蛋白;利用RT-qPCR分析转录因子受激素(ETH、SA、MeJA和ABA)诱导表达情况。【结果】全基因组含有转录因子的基因有3170个,其中1727个属于差异表达基因;WGCNA分析表明1727个基因被划分为6个转录因子基因共表达模块,其中brown模块和turquoise模块与X149抗性显著相关,2个模块中转录因子基因间连通度最高的核心转录因子为turquoise模块中NAC转录因子GmNAC030基因,turquoise模块中与GmNAC030具有相似表达的NAC转录因子基因有GmNAC043、GmNAC085、GmNAC092和GmNAC101;互作蛋白预测表明,GmNAC030、GmNAC043和GmNAC092互作蛋白均为转录因子,且仅有互作蛋白Glyma.02g131700(bZIP1)、Glyma.16g164800(AP2-EREBP)和Glyma.08G118200(WRKY48)位于模块中。RT-qPCR分析表明GmNAC030主要受MeJA诱导,另外4个NAC转录因子基因主要受MeJA和ETH诱导。【结论】5个NAC转录因子基因GmNAC030、GmNAC043、GmNAC085、GmNAC092和GmNAC101的表达与大豆抗SMV相关且受外源激素MeJA和ETH的诱导。 展开更多
关键词 大豆 大豆花叶病毒 加权共表达网络分析 nac转录因子 表达分析
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杉木次生壁发育调控转录因子基因ClNAC40的生物学功能
14
作者 刘明彤 庄和必 +5 位作者 王紫彤 石帅宾 刘晓娟 林二培 胡现铬 黄华宏 《林业科学》 北大核心 2025年第2期131-141,共11页
【目的】在挖掘杉木次生壁发育相关NAC调控因子基础上,分析其生物信息学特征、表达模式,以及在拟南芥中过表达的作用,以期为杉木次生壁发育分子机制解析和分子辅助育种提供重要参考价值。【方法】基于杉木不同器官和组织的转录组测序数... 【目的】在挖掘杉木次生壁发育相关NAC调控因子基础上,分析其生物信息学特征、表达模式,以及在拟南芥中过表达的作用,以期为杉木次生壁发育分子机制解析和分子辅助育种提供重要参考价值。【方法】基于杉木不同器官和组织的转录组测序数据,通过共表达网络分析(WGCNA)筛选与木质化相关的NAC基因,克隆其全长序列,进行序列比对和系统进化树分析;利用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)分析其在不同组织和应压木形成中的表达模式;构建NAC基因过表达重组载体,利用花序侵染法获得转基因拟南芥,并进行转基因植株花序茎横切面染色观察和木质素合成相关基因的表达分析。【结果】分离得到1个杉木NAC基因(ClNAC40),其cDNA序列长度为1556 bp,开放阅读框(ORF)为1344 bp,编码447个氨基酸。获得ClNAC40基因组序列共3430 bp,由6个外显子和5个内含子组成。进化树分析发现ClNAC40与已报道的次生发育相关NAC转录因子聚为一类。ClNAC40基因在木质部(XY)优势表达,而在根(RT)、雌球花(FC)、雄球花(MC)和皮层(BK)中的表达量相对较低;同时,在茎中表达呈现随木质化程度升高而递增趋势,在木质化茎(S3)中的表达量是未木质化茎(S1)的3.2倍。在应压木诱导形成过程中,ClNAC40在应压木中的表达量呈上升趋势,斜放处理30天和60天时的表达水平均显著高于直立木(对照)。在拟南芥中过表达Cl NAC40导致花序茎的高度和直径均明显增加;花序茎横切面经间苯三酚染色,显色较野生型深且染色区域占比更大,表明木质素沉积更多。RT-qPCR分析结果表明,ClNAC40过表达显著提高了拟南芥木质素合成途径关键酶基因的表达。【结论】杉木ClNAC40基因通过激活木质素生物合成相关酶基因表达,参与调控次生壁的发育。 展开更多
关键词 杉木 nac转录因子 基因功能 次生壁发育
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紫花苜蓿MsNAC053基因克隆及其对非生物胁迫的响应分析
15
作者 邹苇鹏 刘怡 +5 位作者 翟佳兴 周思懿 宫祉祎 岑慧芳 朱慧森 许涛 《草业学报》 北大核心 2025年第9期121-133,共13页
NAC(NAM、ATAF1/2、CUC1/2)转录因子是植物特有的转录因子,在调控植物生长发育、激素信号转导及胁迫响应等过程中发挥重要作用。紫花苜蓿是世界范围内重要的豆科牧草之一,营养丰富,品质优良。为探究紫花苜蓿NAC053基因功能,利用SnapGene... NAC(NAM、ATAF1/2、CUC1/2)转录因子是植物特有的转录因子,在调控植物生长发育、激素信号转导及胁迫响应等过程中发挥重要作用。紫花苜蓿是世界范围内重要的豆科牧草之一,营养丰富,品质优良。为探究紫花苜蓿NAC053基因功能,利用SnapGene及NCBI设计特异性引物并利用PCR技术克隆MsNAC053基因,利用生物信息学软件分析其蛋白质理化性质、二级结构和亚细胞定位情况等,并使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析MsNAC053基因在紫花苜蓿不同组织中的表达模式及对不同非生物胁迫的响应情况,利用农杆菌介导法将DNA酶切及连接构建的亚细胞定位载体导入烟草叶片进行亚细胞定位。结果表明:MsNAC053基因编码区全长903 bp,编码300个氨基酸,其蛋白相对分子量为34.62 kDa,脂溶指数为73.82,理论等电点为7.05,平均亲水性为-0.604,不稳定系数为47.28,为不稳定的亲水性蛋白,不具备跨膜结构,具有响应冷胁迫及脱落酸等的顺式作用元件。亚细胞定位结果显示其定位于细胞核中,系统进化树和氨基酸序列分析表明MsNAC053与蒺藜苜蓿、长柔毛野豌豆等豆科植物亲缘关系较近。qRT-PCR结果表明,MsNAC053基因表达具有组织特异性,在幼叶中表达量最高,在子叶中表达量最低;干旱、盐及脱落酸(ABA)处理均能诱导MsNAC053基因的表达,表明MsNAC053基因参与紫花苜蓿应对干旱、盐胁迫响应。本研究为紫花苜蓿抗逆分子育种提供了理论依据及候选基因。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 nac转录因子 基因克隆 表达分析 非生物胁迫
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秋茄KoNAC 25基因的克隆、亚细胞定位及表达分析
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作者 杨党 蒋文骏 +3 位作者 王永峰 王建强 董超 杜照奎 《广西植物》 北大核心 2025年第9期1592-1606,共15页
NAC转录因子在植物中广泛存在且为植物所特有,在调节植物生长发育、激素信号转导和逆境胁迫响应等方面发挥着重要作用。前期工作中,从红树植物秋茄(Kandelia obovata)基因组中鉴定到1个受低温诱导的NAC基因KoNAC 25(GenBank登录号PP8604... NAC转录因子在植物中广泛存在且为植物所特有,在调节植物生长发育、激素信号转导和逆境胁迫响应等方面发挥着重要作用。前期工作中,从红树植物秋茄(Kandelia obovata)基因组中鉴定到1个受低温诱导的NAC基因KoNAC 25(GenBank登录号PP860407)。为探究KoNAC 25基因是否参与秋茄盐胁迫响应,该研究通过RT-PCR技术从秋茄叶片cDNA中克隆KoNAC 25基因,并对其进行序列特征、系统进化、亚细胞定位及基因表达分析。结果表明:(1)秋茄KoNAC 25基因的开放阅读框(ORF)全长为858 bp,共编码285个氨基酸,分子量为32.9 kDa,理论等电点为8.53。KoNAC25为亲水性蛋白,不含信号肽且无跨膜结构。(2)序列同源比对显示,KoNAC25蛋白N端具有1个NAM超家族结构域,由5个保守的亚结构域构成,属于NAM亚家族成员。(3)系统进化树表明,秋茄KoNAC25转录因子与大戟科的蓖麻(Ricinus communis)、木薯(Manihot esculenta)和橡胶树(Hevea brasiliensis)等植物亲缘关系较近。(4)亚细胞定位试验证实,KoNAC25蛋白定位于细胞核。(5)qRT-PCR分析结果表明,KoNAC 25基因在叶中表达量显著高于花中,同时该基因能够被盐(NaCl)和脱落酸(ABA)诱导表达上调,分别在处理12 h和6 h时达到峰值。综上认为,KoNAC 25参与了秋茄盐胁迫响应的相关调控,该结果为进一步研究秋茄KoNAC 25基因在盐胁迫下的功能及其表达调控机理提供了参考。 展开更多
关键词 秋茄 nac 25基因 基因克隆 亚细胞定位 表达模式
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盐胁迫下细叶百合酵母文库构建及LpNAC14互作蛋白筛选
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作者 刘同非 李徐斐 +1 位作者 车海涛 张彦妮 《西北林学院学报》 北大核心 2025年第1期32-41,共10页
本研究旨在探索细叶百合NAC转录因子LpNAC14应答盐胁迫的信号通路,分析其互作蛋白,奠定相关基因功能研究基础。利用盐胁迫下细叶百合的叶片和根,通过Gateway法构建了酵母双杂交cDNA文库,使用2个无自激活活性的LpNAC14基因片段构建诱饵载... 本研究旨在探索细叶百合NAC转录因子LpNAC14应答盐胁迫的信号通路,分析其互作蛋白,奠定相关基因功能研究基础。利用盐胁迫下细叶百合的叶片和根,通过Gateway法构建了酵母双杂交cDNA文库,使用2个无自激活活性的LpNAC14基因片段构建诱饵载体,分别与文库质粒共转化筛选互作蛋白,对筛选到的结果进行回转验证和GO富集分析,选取其中一个转录因子LpDi19-2与LpNAC14进行BiFC验证。结果表明,构建细叶百合酵母文库容量1.12×10^(7) CFU,重组率100%,插入片段平均长度1 000 bp以上。文库共转化初步筛选到19个与LpNAC14互作的蛋白。BiFC验证LpDi19-2与LpNAC14体内互作。研究表明盐胁迫下细叶百合酵母文库质量较高,符合筛选标准,筛选结果可靠性较高,为探究LpNAC14响应盐胁迫机制提供新方向。 展开更多
关键词 细叶百合 cDNA文库 nac转录因子 盐胁迫 BIFC
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白麻NAC基因家族全基因组鉴定及其干旱胁迫下表达分析
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作者 谢文龙 王彦芹 《干旱地区农业研究》 北大核心 2025年第2期54-65,共12页
基于白麻基因组数据,在白麻全基因组范围内鉴定了53个NAC基因家族成员,并对其染色体分布、系统发育、基因和蛋白结构、蛋白理化性质与功能、顺式作用元件进行预测分析,并结合干旱胁迫下的转录组数据分析NAC基因的表达。结果显示,白麻的A... 基于白麻基因组数据,在白麻全基因组范围内鉴定了53个NAC基因家族成员,并对其染色体分布、系统发育、基因和蛋白结构、蛋白理化性质与功能、顺式作用元件进行预测分析,并结合干旱胁迫下的转录组数据分析NAC基因的表达。结果显示,白麻的ApNAC基因家族分布在10条染色体中,包括7对片段复制形成的共线性基因对和2对串联重复基因对。53个ApNAC家族成员可以分为15个亚家族,每个成员都含有5个以上的保守基序,同一个亚家族成员有着相似的基因结构。白麻NAC蛋白属于亲水性蛋白,亚细胞定位结果显示其以转录因子的形式发挥功能,并富集在DNA特异性结合功能以及木质部、叶片和细胞壁的发育调节功能中。启动子区域的顺式作用元件分析表明,ApNAC基因家族与脱落酸、干旱胁迫以及光响应调控相关。在30%PEG-6000诱导的干旱胁迫下,26个ApNAC成员在不同阶段发生差异表达,其中21个基因整体上调,5个基因下调。 展开更多
关键词 白麻 nac基因家族 干旱胁迫 基因差异表达
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小麦NAC转录因子的生物学功能研究进展
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作者 陈昕钰 朱玉 +4 位作者 丁媛 王可丹 陈思 胡天宇 熊飞 《麦类作物学报》 北大核心 2025年第11期1510-1520,共11页
NAC(NAM/ATAF/CUC)转录因子是一个大型的植物特异性转录因子家族,由高度保守的N端和多变的C端组成,参与多种生物学过程并调控植物的各种性状。本文总结了近年来小麦NAC转录因子的研究进展,系统概述了其在小麦生长发育和环境适应中的生... NAC(NAM/ATAF/CUC)转录因子是一个大型的植物特异性转录因子家族,由高度保守的N端和多变的C端组成,参与多种生物学过程并调控植物的各种性状。本文总结了近年来小麦NAC转录因子的研究进展,系统概述了其在小麦生长发育和环境适应中的生物学功能,主要涉及根系生长、叶片衰老、籽粒发育以及生物和非生物胁迫响应等方面,以期丰富NAC转录因子的调控网络,为小麦的产量和品质改良以及分子育种提供理论依据。 展开更多
关键词 小麦 nac转录因子 生长发育 胁迫响应
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李PsNAC基因家族鉴定及其在空腔褐变果实中的表达模式分析
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作者 邓红红 彭超 +7 位作者 梁茜 张子扬 刘俊伟 李斌奇 魏鸣康 王雪颖 李刘敏 陈发兴 《果树学报》 北大核心 2025年第1期48-62,共15页
【目的】NAC转录因子广泛参与植物生长发育和应对逆境胁迫过程,被认为是植物次生细胞壁生物合成转录调控的一级开关。鉴定李PsNAC转录因子家族,探索其与皇冠李果实空腔褐变的关系。【方法】采用生物信息学方法,分析李PsNAC家族成员、理... 【目的】NAC转录因子广泛参与植物生长发育和应对逆境胁迫过程,被认为是植物次生细胞壁生物合成转录调控的一级开关。鉴定李PsNAC转录因子家族,探索其与皇冠李果实空腔褐变的关系。【方法】采用生物信息学方法,分析李PsNAC家族成员、理化性质、系统发育和基因结构等,并通过qRT-PCR技术,分析PsNACs在空腔褐变皇冠李果实中的表达模式。【结果】李PsNACs包含115个成员,不均匀地分布在8条染色体上,可分为17个亚族,与植物次生细胞壁合成相关的OsNAC003和OsNAC7亚族分别含6和10个PsNACs。PsNACs启动子区域含有丰富的激素响应元件和MYB结合位点。10个PsNACs在皇冠李空腔褐变果实中的表达量均高于非空腔褐变果实。【结论】本结果为研究PsNAC家族成员与皇冠李果实空腔褐变的具体关联性奠定了重要基础。 展开更多
关键词 皇冠李 nac转录因子 基因家族 空腔褐变 基因表达量
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