NICD过表达对人牙髓干细胞细胞增殖及细胞迁移的影响 被引量：7

1

作者 胡超 李适廷 +1 位作者 张纲 谭颖徽 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2014年第4期196-201,共6页

目的:利用Notch1的胞内段(Notch1 intracellular domain,NICD)基因过表达载体建立稳定过表达NICD的人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)株,观察NICD过表达对DPSCs增殖、迁移能力的影响。方法:构建含NICD过表达的慢病毒颗粒,并... 目的:利用Notch1的胞内段(Notch1 intracellular domain,NICD)基因过表达载体建立稳定过表达NICD的人牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)株,观察NICD过表达对DPSCs增殖、迁移能力的影响。方法:构建含NICD过表达的慢病毒颗粒,并将其转染至DPSCs构建过表达NICD的细胞株(DPSCs/NICD);以DPSCs/NICD为实验组,正常细胞株(DPSCs/wt)和空病毒转染的空载组(DPSCs/vector)作为对照,通过RT-PCR和Western Blot检测NICD mRNA及其蛋白的表达;细胞免疫荧光观察NICD在DPSCs上的表达位置;CCK8法检测细胞的增殖情况;流式细胞技术检测细胞周期中S期的改变;Transwll检测细胞的迁移能力。结果:与DPSCs/wt组和DPSCs/vector组相比,DPSCs/NICD组的NICDmRNA及其蛋白表达水平均明显增强(P<0.05),表达位置在胞膜、胞浆及胞核;细胞的增殖速度加快、细胞周期中S期比例升高、迁移能力增强。结论:NICD过表达使DPSCs细胞的增殖和迁移能力增强。 展开更多

关键词 牙髓干细胞 nicd 转染 增殖 迁移

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NICD及COX-2在胃癌组织中的表达及临床生物学意义 被引量：5

2

作者 孙国羊 骆定海 +5 位作者 吴建胜 潘钰婷 金嵘 马升高 张行 郑建建 《医学研究杂志》 2011年第3期61-66,共6页

目的本文旨在研究NICD与COX-2在胃癌组织中的表达及其临床生物学意义。方法通过免疫组化方法检测109例胃癌组织和57例胃癌前病变组织及72例慢性浅表性胃炎组织中NICD和COX-2的表达,分析两者的表达水平与临床病理特征的关系以及两者的相... 目的本文旨在研究NICD与COX-2在胃癌组织中的表达及其临床生物学意义。方法通过免疫组化方法检测109例胃癌组织和57例胃癌前病变组织及72例慢性浅表性胃炎组织中NICD和COX-2的表达,分析两者的表达水平与临床病理特征的关系以及两者的相互关系。结果 NICD在胃癌组中的阳性率为74.31%(81/109),明显高于癌前病变组31.58%(18/57)及慢性浅表性胃炎组23.61%(17/72)(χ2=53.45,P<0.01),与肿瘤大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关(χ2=5.51,P<0.05;χ2=4.76,P<0.05;χ2=4.44,P<0.05;χ2=4.62,P<0.05)。COX-2在胃癌组中的阳性率为71.56%(78/109),明显高于癌前病变组1.75%(1/57)及慢性浅表性胃炎组0.00%(0/72)(χ2=133.50,P<0.01),与肿瘤的分化程度、淋巴结转移有关(χ2=20.78,P<0.01;χ2=4.15,P<0.05)。NICD和COX-2在胃癌中表达呈正相关(r=0.30,χ2=9.38,P<0.01)。Ka-plan-Meier分析显示:NICD阳性组2年生存率50.50%,阴性组2年生存率72.80%;COX-2阳性组2年生存率55.10%,阴性组2年生存率71.40%;NICD阳性COX-2阳性组、NICD阳性COX-2阴性组、NICD阴性COX-2阳性组、NICD阴性COX-2阴性组2年生存率分别为43.10%、100.00%、66.7%、100.00%。生存曲线的log-rank检验显示:NICD与COX-2阳性对胃癌患者生存率影响有统计学意义(χ2=9.70,P<0.01;χ2=7.95,P<0.01)。Cox回归分析显示:NICD与COX-2可以作为影响胃癌预后的独立因素(χ2=7.55,P<0.05;χ2=4.45,P<0.05)。结论 NICD、COX-2在胃癌的发生发展过程中可能起着促癌作用,这两项指标的表达水平可作为评价胃癌预后的指标,联合检测这两项指标在评估胃癌预后方面具有一定的临床价值。 展开更多

关键词 胃肿瘤 nicd COX-2 免疫组化 预后指标

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绵羊NICD基因的克隆、真核表达及其序列分析 被引量：1

3

作者 陈红玲 刘晨曦 +1 位作者 孙亚伟 刘明军 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期7-13,共7页

采用RT-PCR技术扩增绵羊Notch基因胞内段功能结构域(NICD),将其克隆到慢病毒表达载体中,在293T细胞中对其进行真核表达,通过Western blotting鉴定其蛋白表达,进一步对NICD核酸和氨基酸序列进行分析。结果表明,首次克隆获得绵羊NICD基因... 采用RT-PCR技术扩增绵羊Notch基因胞内段功能结构域(NICD),将其克隆到慢病毒表达载体中,在293T细胞中对其进行真核表达,通过Western blotting鉴定其蛋白表达,进一步对NICD核酸和氨基酸序列进行分析。结果表明,首次克隆获得绵羊NICD基因,该基因序列为2 388bp(GenBank登录号为KF318190.1),编码795个氨基酸,重组蛋白分子质量为110ku左右。序列分析结果显示,核酸序列与牛、马、人和小鼠的同源性分别为96%、90%、87%和83%,进化上与牛的关系最近;蛋白序列与牛、马、人和小鼠的同源性分别为96%、90%、87%和84%,预测二级结构可能存在26个α-螺旋、13个β-折叠、66个转角和64个无规则卷曲。 展开更多

关键词 绵羊 nicd基因 序列分析 真核表达

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Tet-On调控NICD稳定表达的骨髓间充质干细胞治疗肾缺血再灌注损伤 被引量：1

4

作者 习小庆 胡红林 +4 位作者 邹丛 方周青 匡仁锐 叶真逢 黄雅为 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第25期4035-4040,共6页

背景:肾缺血再灌注损伤是诱发急性肾损伤的主要原因。骨髓间充质干细胞治疗肾缺血再灌注损伤一直是研究的热点。目的:探讨Tet-On系统调控NICD稳定表达的骨髓间充质干细胞(NICD-Tet-BMSCs)对肾缺血再灌注损伤的修复作用。方法:采用密度... 背景:肾缺血再灌注损伤是诱发急性肾损伤的主要原因。骨髓间充质干细胞治疗肾缺血再灌注损伤一直是研究的热点。目的:探讨Tet-On系统调控NICD稳定表达的骨髓间充质干细胞(NICD-Tet-BMSCs)对肾缺血再灌注损伤的修复作用。方法:采用密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,体外构建Tet-On系统强力霉素调控NICD稳定表达的骨髓间充质干细胞,然后将此细胞移植至肾缺血再灌注损伤大鼠体内,术后检测血清肌酐水平、肾组织中骨髓间充质干细胞分布以及血管内皮生长因子和肿瘤坏死因子α表达变化。结果与结论:(1)NICD蛋白在NICD-Tet-BMSCs中稳定表达并受强力霉素调控;(2)与肾缺血再灌注损伤组相比,NICD-Tet-BMSCs组大鼠术后血清肌酐水平明显降低(P<0.05);(3)外源性骨髓间充质干细胞在NICD-Tet-BMSCs组大鼠肾组织中增殖持续时间更长;(4)NICD-Tet-BMSCs组肾组织中血管内皮生长因子蛋白表达升高,肿瘤坏死因子α蛋白表达降低,差异有显著性意义(P<0.05);(5)体外能够成功构建Tet-On系统调控NICD稳定表达的大鼠骨髓间充质干细胞,此细胞可促进大鼠肾缺血再灌注损伤的修复。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 nicd TET-ON 强力霉素 肾缺血再灌注损伤 肌酐 血管内皮生长因子 肿瘤坏死因子α 国家自然科学基金 骨髓 间质干细胞 肾 再灌注损伤 组织工程

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外磁场作用下特异性磁性NICD对脊髓神经干细胞增殖与凋亡的影响

5

作者 张衣北 夏春 陈安民 《华中医学杂志》 2009年第6期297-299,共3页

目的研究Notch信号通路在脊髓损伤部位高表达后,对内源性脊髓神经干细胞再生能力的影响,探讨其在脊髓损伤修复中的作用。方法构建鼠NICD(Notch intracellular domain,NICD)质粒,用经典的氧化还原法将NICD质粒结合至葡聚糖磁性纳米颗粒(d... 目的研究Notch信号通路在脊髓损伤部位高表达后,对内源性脊髓神经干细胞再生能力的影响,探讨其在脊髓损伤修复中的作用。方法构建鼠NICD(Notch intracellular domain,NICD)质粒,用经典的氧化还原法将NICD质粒结合至葡聚糖磁性纳米颗粒(dextran magnetic nanoparticles,DMN)上,参照Alivisatos和Conwell方法构建纳米化目的基因,在外磁场作用下转染体外培养鼠脊髓神经干细胞,检测转染前后细胞增殖与凋亡情况。结果纳米化NICD-DMN转染体外培养内源性脊髓神经干细胞后,细胞明显增多,而凋亡明显减少,统计学有显著意义(P<0.05)。结论特异性磁性NICD在外磁场协助下明显促进内源性脊髓干细胞增殖,抑制其凋亡。 展开更多

关键词 脊髓神经干细胞 纳米颗粒 nicd

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Notch基因胞内活化部分真核表达载体p3XFLAG-CMV7-NICD1的构建与鉴定

6

作者 刘蕾 肖伟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期217-220,共4页

目的构建Notch1基因胞内活化部分真核表达载体p3XFLAG-CMV7-NICD1,为进一步研究和解析Notch1基因在促进人晶状体上皮细胞间质化过程的作用做准备。方法从SRA01/04细胞中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成c DNA。特异扩增目的基因片段NICD1,... 目的构建Notch1基因胞内活化部分真核表达载体p3XFLAG-CMV7-NICD1,为进一步研究和解析Notch1基因在促进人晶状体上皮细胞间质化过程的作用做准备。方法从SRA01/04细胞中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成c DNA。特异扩增目的基因片段NICD1,与p3XFLAG-CMV7载体连接后转化大肠杆菌DH5α,LB平板培养基筛选菌落,抽提质粒。并用酶切,测序,转染细胞后检测蛋白表达等方法验证。结果获得重组的p3XFLAG-CMV7-NICD1真核表达载体质粒,经双酶切及测序检测,NICD1基因插入载体部位正确,碱基序列正确。Western blot结果显示,在转染p3XFLAG-CMV7-NICD1的细胞中有NICD1蛋白的表达。结论 p3XFLAG-CMV7-NICD1真核表达载体质粒构建成功,为进一步研究Notch1传导通路与白内障摘除术后发生后囊膜混浊的关系奠定基础。 展开更多

关键词 Notch1信号通路 nicd1 上皮间质转化 后囊膜混浊

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Notch1(NICD)过表达真核载体构建及对大鼠BMSCs增殖分化的影响 被引量：6

7

作者 杜红阳 李东宁 +2 位作者 付海燕 包翠芬 秦书俭 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第9期883-888,共6页

目的探讨过表达Notch1(NICD)基因对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖分化的影响。方法构建Notch1(NICD)过表达真核载体,实验分正常对照组(CON组,不做转染)、阳性对照组(空载体组,将质粒pEGFP-N1转染BMSCs)和转染组(将重组质粒pEGFP-N1-N... 目的探讨过表达Notch1(NICD)基因对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖分化的影响。方法构建Notch1(NICD)过表达真核载体,实验分正常对照组(CON组,不做转染)、阳性对照组(空载体组,将质粒pEGFP-N1转染BMSCs)和转染组(将重组质粒pEGFP-N1-NICD转染BMSCs)。转染48 h后观察细胞一般状态,Real-timePCR和Western blotting检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Notch1基因和蛋白表达,流式检测转染后细胞凋亡、细胞周期,MTT检测细胞增殖情况。结果重组质粒pEGFP-N1-NICD编码序列与设计完全一致。转染组和空载体组BMSCs均可表达绿色荧光。转染组GFAP、Notch1的基因和蛋白表达均高于CON组和空载体组(均P<0.05),空载体组与CON组差异无统计学意义;各组间NSE的基因和蛋白表达差异无统计学意义。转染组存活细胞比率低于CON组和空载体组,早期细胞凋亡比率、晚期细胞凋亡比率均高于CON组和空载体组;空载体组晚期细胞凋亡比率高于CON组。转染组细胞处于G1/G0期的比例高于CON组和空载体组,处于S期和G2/M期的比例低于CON组和空载体组(均P<0.05)。除转染1 d时各组MTT A490值差异无统计学意义外,其余时点转染组MTT A490值均低于CON组和空载体组(均P<0.05)。结论高表达Notch1(NICD)基因可能在一定程度上诱导BMSCs凋亡、抑制其增殖,且表现诱导向神经胶质样细胞分化。 展开更多

关键词 细胞增殖 细胞分化 转染 神经胶质原纤维酸性蛋白质 磷酸丙酮酸水合酶 NOTCH信号通路 骨髓间充质干细胞 诱导 Notch1(nicd)

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NICD/Hes1影响心肌梗死后小鼠缺血心肌的血管新生 被引量：1

8

作者 卢鹏飞 施伟丽 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第23期3635-3639,共5页

背景:心肌缺血是心肌梗死后心功能受损的主要原因之一,Notch通路参与血管新生过程,但其下游分子Notch受体胞内部分(Notch intracellular domain,NICD)/Hes1在心肌梗死后缺血心肌血管新生中发挥何种作用,研究尚少。目的:借助Notch γ分... 背景:心肌缺血是心肌梗死后心功能受损的主要原因之一,Notch通路参与血管新生过程,但其下游分子Notch受体胞内部分(Notch intracellular domain,NICD)/Hes1在心肌梗死后缺血心肌血管新生中发挥何种作用,研究尚少。目的:借助Notch γ分泌酶抑制剂RO4929097,探讨NICD/Hes1对心肌梗死后小鼠心功能及缺血心肌血管新生的影响。方法:按随机数字表法将C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组和RO4929097组,每组10只,后2组C57BL/6小鼠通过结扎左前降支冠状动脉建立心肌梗死模型,RO4929097组小鼠术后第2天按10 mg/(kg·d)每天灌胃1次,假手术组和模型组小鼠给予等体积生理盐水,灌胃20 d。第21天超声检测小鼠左室射血分数,马松染色观察心肌梗死面积及病理组织学变化,免疫荧光法检测缺血心肌CD31水平,酶联免疫吸附法检测血清血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子水平,免疫蛋白印迹技术检测心肌组织缺氧诱导因子1α、心肌营养素1及NICD、Hes1蛋白表达量。结果与结论:(1)模型组小鼠左室射血分数较假手术组显著降低(P <0.001),与模型组比较,RO492909组左室射血分数降低更明显(P <0.05);(2)马松染色后,模型组及RO492909组小鼠梗死面积较假手术组显著增加(P<0.001),RO492909组梗死面积较模型组增加明显(P<0.05);(3)模型组小鼠心肌CD31平均吸光度值较假手术组升高明显(P<0.001),RO492909组CD31平均吸光度值较模型组明显降低(P<0.001);(4)模型组、RO4929097组小鼠血清血管内皮生长因子水平较假手术组明显升高(P<0.05),RO492909组血管内皮生长因子较模型组升高明显(P <0.01);(5)模型组小鼠心肌组织缺氧诱导因子1α、心肌营养素1水平较假手术组明显增加(P <0.01),RO492909组两者表达量较模型组均降低;与假手术组比较,模型组小鼠NICD蛋白表达明显增加(P <0.01),RO492909组NICD表达量较模型组降低(P <0.01);与模型组比较,RO492909组小鼠Hes1水平降低(P <0.05);(6)结果说明,RO4929097可能通过抑制Notch γ分泌酶活性,降低NICD/Hes1表达,从而减少缺血心肌血管新生,降低心肌梗死小鼠左室射血分数。 展开更多

关键词 心肌梗死 缺血心肌 血管新生 nicd HES1

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Notch1活性分子NICD1在乳腺癌变组织中的表达及临床意义

9

作者 熊世双 穆亚男 +2 位作者 张德瑞 李军 曹玉文 《农垦医学》 2020年第4期289-292,共4页

目的:探讨NICD1 m RNA在乳腺组织中的表达及与临床病理特征的关系,初步评价其在乳腺癌发生、发展中的作用及其意义。方法:应用实时定量PCR法检测25例乳腺正常组织、15例非典型导管增生、20例导管原位癌和80例乳腺浸润性导管癌中NICD1 m ... 目的:探讨NICD1 m RNA在乳腺组织中的表达及与临床病理特征的关系,初步评价其在乳腺癌发生、发展中的作用及其意义。方法:应用实时定量PCR法检测25例乳腺正常组织、15例非典型导管增生、20例导管原位癌和80例乳腺浸润性导管癌中NICD1 m RNA表达,分析其与乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果:NICD1m RNA从乳腺正常组织到浸润癌的癌变过程中的表达量呈显著递增趋势(P<0.001),其中在ANBT组中的表达显著低于DCIS和IDC组(0.70±0.32 VS 2.09±0.75,2.19±0.97;P<0.01),在ADH组的表达明显低于IDC组(1.05±0.44 VS 2.19±0.97;P<0.05),其余组间差异无统计学意义(P>0.05);NICD1m RNA表达与乳腺癌组织学分级、淋巴结转移状态及TNM分期显著相关(P<0.05)。结论:NICD1分子在乳腺癌发生过程中可能发挥促癌作用,有望作为评估乳腺癌变进展的潜在生物标志物。 展开更多

关键词 乳腺癌 nicd1 MRNA

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NiCd /氮化碳光催化剂的制备及性能研究

10

作者 吴志军 《山东化工》 CAS 2023年第18期5-7,共3页

针对光催化剂氮化碳电子-光穴复合率高等问题进行改性,围绕通过掺杂金属元素NiCd建构异构质的方法,经过一系列实验合成NiCd/氮化碳复合光催化剂,再对其进行X射线衍射(XRD)分析,以及通过气相色谱分析它的产氢效率。经过分析后得到,NiCd/... 针对光催化剂氮化碳电子-光穴复合率高等问题进行改性,围绕通过掺杂金属元素NiCd建构异构质的方法,经过一系列实验合成NiCd/氮化碳复合光催化剂,再对其进行X射线衍射(XRD)分析,以及通过气相色谱分析它的产氢效率。经过分析后得到,NiCd/氮化碳相比纯相氮化碳催化效率显著提高,其中复合比例为15%的复合材料催化效率最佳,为纯相氮化碳的137倍,该催化剂可为氮化碳改性提供可行的思路。 展开更多

关键词 光催化剂 nicd g-C_(3)N_(4) 复合材料 光解水产氢

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过表达NICD对肿瘤坏死因子α干扰的牙周膜干细胞成骨分化的影响 被引量：1

11

作者 邱申彩 龙晏 +1 位作者 陈晓燕 吴佩玲 《西北国防医学杂志》 CAS 2019年第4期199-204,共6页

目的:研究过表达Notch胞内结构域NICD(Notch intracellular domain,NICD)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)干扰的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨分化的影响,为临床治疗牙周病提供实验依... 目的:研究过表达Notch胞内结构域NICD(Notch intracellular domain,NICD)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)干扰的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨分化的影响,为临床治疗牙周病提供实验依据。方法:选取课题组前期构建的含NICD基因的PDLSCs细胞株(PDLSCs/NICD)及含空载体的PDLSCs细胞株(PDLSCs/K),每种细胞随机分为两组,一组加入浓度为10 ng/ml的TNF-α模拟炎症环境,另一组不加TNF-α,即TNF-α+PDLSCs/K组、TNF-α+PDLSCs/NICD组、PDLSCs/NICD组和PDLSCs/K组。采用茜素红染色、即时定量聚合酶链连锁反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,rt-qPCR)及蛋白质印迹法(western blot,WB)检测过表达NICD对TNF-α干扰的牙周膜干细胞成骨分化的影响。结果:茜素红染色结果显示,TNF-α+PDLSCs/NICD组矿化结节数量最少且面积最小,明显少于其他3组;rt-qPCR结果显示,TNF-α+PDLSCs/NICD组成骨标志基因牙骨质附着蛋白(cementum attachment protein,CAP)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)表达量明显低于其他3组(P<0.01);WB结果显示TNF-α+PDLSCs/NICD组RUNX2蛋白含量明显少于其他3组(P<0.01)。结论:过表达NICD对TNF-α干扰的PDLSCs的成骨分化能力有双重抑制作用。 展开更多

关键词 Notch胞内结构域 肿瘤坏死因子-α 牙周膜干细胞 成骨分化

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Notch-1信号通路与甲状腺乳头状癌的关系 被引量：16

12

作者 杨晶金 姚军 +5 位作者 沈峰清 陈佳玉 杨林军 张强 金晓燕 梁勇 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期120-126,共7页

研究Notch-1信号通路中Notch-1、NICD、Hes1、c-Myc与人甲状腺乳头状癌的关系,探讨Notch-1信号通路在甲状腺乳头状癌中的分子机制。对照人甲状腺乳头状癌及正常甲状腺组织标本各35例,采用Real Time PCR检测Notch-1、Hes1、c-Myc的mRNA... 研究Notch-1信号通路中Notch-1、NICD、Hes1、c-Myc与人甲状腺乳头状癌的关系,探讨Notch-1信号通路在甲状腺乳头状癌中的分子机制。对照人甲状腺乳头状癌及正常甲状腺组织标本各35例,采用Real Time PCR检测Notch-1、Hes1、c-Myc的mRNA表达情况,采用免疫组织化学、Western blot方法检测组织标本中Notch-1、NICD、Hes1、c-Myc蛋白的表达情况。Notch-1、Hes1在甲状腺乳头状癌中的mRNA表达水平明显降低,c-Myc mRNA的表达在甲状腺乳头状癌中升高,Notch-1、NICD、Hes1蛋白在人甲状腺乳头状癌中的表达低于正常甲状腺组织(P<0.05),c-Myc蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达高于正常甲状腺组织(P<0.05)。甲状腺乳头状癌组织标本中,Notch-1信号通路中Notch-1、NICD、Hes1在基因转录和蛋白质表达水平上均明显下调,而c-Myc的基因转录和蛋白质表达水平均升高,提示Notch-1信号通路在甲状腺乳头状癌的发生发展中起抑癌作用,c-Myc基因表达升高与Notch-1信号通路可能无关。 展开更多

关键词 甲状腺乳头状癌 Notch-1信号通路 NOTCH-1 nicd HES1 C-MYC

原文传递

姜黄素下调结直肠癌细胞Notch1信号通路研究 被引量：8

13

作者 杨芳 刘少琼 +3 位作者 李春花 尹玲 刘娅 谢婉莹 《湖南中医药大学学报》 CAS 2015年第4期10-13,50,F0003,共6页

目的检测Notch1信号通路中Notch intracellular domain蛋白(NICD1蛋白)在大肠腺癌组织中表达的情况;探讨姜黄素对人结肠癌细胞SW480及HT29细胞中Notch1信号通路的影响。方法二步法免疫组化检测40例结直肠癌、31例癌旁肠组织石蜡切片中No... 目的检测Notch1信号通路中Notch intracellular domain蛋白(NICD1蛋白)在大肠腺癌组织中表达的情况;探讨姜黄素对人结肠癌细胞SW480及HT29细胞中Notch1信号通路的影响。方法二步法免疫组化检测40例结直肠癌、31例癌旁肠组织石蜡切片中Notch1 intracellular domain蛋白(NICD1)的表达情况,通过对比人结肠直肠癌与癌旁正常肠黏膜细胞中蛋白阳性表达率判断NICD1蛋白与人结直肠癌的关系;不同浓度姜黄素(0、7.5、15、30、60μmol/L)分别处理结肠腺癌细胞SW480和HT29细胞24 h和48 h后,Western blot法检测细胞内NICD1、Notch1及HES-1蛋白的表达情况。结果 NICD1在人结直肠癌组织中均表达,阳性率100%,癌旁肠组织中部分表达,阳性率为90.3%,但癌组织表达强度明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果示姜黄素能下调人结肠腺癌细胞SW480及HT29细胞中NICD1、Notch1及HES-1蛋白的表达,有时间和剂量依赖。结论 Notch1信号通路中NICD1蛋白在结直肠癌组织中的过度表达可能与肿瘤的发生发展相关,其阳性表达的部位可能与癌组织的病理分期有关;姜黄素可能通过调控Notch1信号通路抑制结直肠癌细胞增殖。 展开更多

关键词 姜黄素 Notch1通路 nicd 结直肠癌 结肠癌细胞SW480 结肠癌细胞HT29

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Notch信号通路对骨关节炎软骨细胞增殖和软骨基质合成的作用研究 被引量：3

14

作者 林飞太 林煜 +3 位作者 林钡 陈赛楠 翁艳 冯尔宥 《中国合理用药探索》 2023年第2期110-118,共9页

目的:探索Notch信号通路对白介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞增殖和软骨基质合成的调控作用。方法:培养C28/I2软骨细胞系,用10ng/ml IL-1β诱导凋亡,采用Ad-NICD感染过表达NICD和si-NICD转染沉默NICD,Real-time PCR和Western Blot检测过... 目的:探索Notch信号通路对白介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞增殖和软骨基质合成的调控作用。方法:培养C28/I2软骨细胞系,用10ng/ml IL-1β诱导凋亡,采用Ad-NICD感染过表达NICD和si-NICD转染沉默NICD,Real-time PCR和Western Blot检测过表达和沉默效率,CCK-8检测细胞增殖,检测PCNA、ColⅡ和ACAN mRNA和蛋白的表达水平。结果:Ad-NICD的病毒感染复数(MOI)为40时过表达效果最佳,si-NICD的沉默效率最佳;Ad-NICD感染C28/I2可抑制细胞增殖和抑制PCNA、ColⅡ和ACAN mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05);si-NICD3转染C28/I2可促进细胞增殖和促进PCNA、ColⅡ和ACAN mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05)。结论:过表达NICD激活Notch通路可抑制IL-1β诱导C28/I2软骨细胞增殖和软骨基质合成,沉默NICD阻遏Notch通路可促进细胞增殖和软骨基质合成。 展开更多

关键词 骨关节炎 软骨细胞 NOTCH信号通路 nicd 细胞外基质

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人角质形成细胞Notch信号通路与转化生长因子β调控受体蛋白的作用 被引量：1

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作者 薛斯亮 王晓珊 +1 位作者 李东川 张珏 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第2期296-300,共5页

背景:在皮肤中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控至关重要,而转化生长因子β似乎是其调控的上游因子,既然Notch信号和转化生长因子β信号通道如此相关,那么Notch是不是也参加了转化生长因子β信号对受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控呢?目... 背景:在皮肤中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控至关重要,而转化生长因子β似乎是其调控的上游因子,既然Notch信号和转化生长因子β信号通道如此相关,那么Notch是不是也参加了转化生长因子β信号对受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的调控呢?目的:探讨Notch信号通道在人角质形成细胞中对转化生长因子β调控受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa的作用的影响。方法:在分别用Jagged-1激活和用Γ-分泌酶抑制剂抑制Notch信号通道后,加入转化生长因子β,同时设立对照组,用Real-timePCR测试人角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappamRNA表达量。结果与结论:覆盖率为40%的角质形成细胞在加入了转化生长因子β后,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappamRNA量在各时间点均高于对照组。在用Jagged-1激活Notch通道的角质形成细胞中,单独加入Jagged-1、转化生长因子β及两者都加入时均高于对照组(P<0.05,P<0.01)。在用γ-分泌酶抑制剂抑制Notch通道的角质形成细胞中,只加入转化生长因子β显著高于对照组(P<0.01),只加入γ-分泌酶抑制剂和两者均加入时与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。说明加入转化生长因子β导致角质形成细胞中受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达增加,而分别对Notch信号进行激活和抑制后发现,受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa信号分别显著增加和显著被抑制。所以在转化生长因子β升高受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa表达过程中Notch信号通道是非常重要且不可或缺的。 展开更多

关键词 组织构建 组织构建细胞学实验 转化生长因子Β 受体蛋白酪氨酸磷酸酶kappa 人角质形成细胞 NOTCH nicd

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Notch信号通道对角质形成细胞中RPTP-κ的影响

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作者 薛斯亮 王晓珊 张珏 《医学研究杂志》 2012年第8期130-133,共4页

目的探讨Notch信号通路对角质形成细胞中RPTP-κ的影响。方法采用体外细胞培养,分别激活和抑制Notch信号通道后,抽提RNA,实时荧光定量RNA检测RPTP-κmRNA含量。结果角质形成细胞在覆盖率为40%和80%的情况下,RPTP-κmRNA表达量后者为前者... 目的探讨Notch信号通路对角质形成细胞中RPTP-κ的影响。方法采用体外细胞培养,分别激活和抑制Notch信号通道后,抽提RNA,实时荧光定量RNA检测RPTP-κmRNA含量。结果角质形成细胞在覆盖率为40%和80%的情况下,RPTP-κmRNA表达量后者为前者的3.4倍(P<0.05,n=3),Hes-1则为2.9倍(P<0.01,n=6);激活Notch信号通道后,RPTP-κmRNA在1、2、4、8、24h分别是对照组的1.2、1.5、5.1(P<0.01,n=3)、2.3(P<0.05,n=3)、1.1倍。而Notch信号的目的基因Hes-1的表达在上述时间点分别为对照组的1.2、1.6(P<0.01,n=3)、2.2(P<0.01,n=3)、1.8(P<0.01,n=3)、1.3倍;覆盖率为80%角质形成细胞RPTP-κmRNA为40%者的2.3倍(P<0.01,n=4)。而抑制Notch信号后,则变为0.6倍(P<0.05,n=4)。结论①在角质形成细胞不同覆盖率的时候,Hes-1和RPTP-κ表达量有所不同,细胞覆盖率越大,细胞越多,越需要抑制细胞生长的时候,Notch信号的下游因子Hes-1表达就越多,与之相同的是RPTP-κ这一TGF-β信号的下游因子表达同样增多;②Notch信号通道激活的时候,同时会增大其自身下游因子Hes-1的表达,同时也可增加RPTP-κ的表达;③在高覆盖率的角质形成细胞中抑制Notch,本该出现升高的RPTP-κ表达反而降低了。 展开更多

关键词 RPTP-κ NOTCH nicd

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Notch-Hif-1α信号通路参与调控大鼠肝再生过程的研究 被引量：2

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作者 李博伟 李霄 +4 位作者 张卓超 孙伟 马奔 牛钢 岳树强 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第15期2806-2810,共5页

目的:探讨使用γ分泌酶抑制剂Fli-06特异性阻断Notch信号通路后,大鼠肝部分切除术后肝再生的情况并初步阐明Notch-Hif-1α信号通路调控肝再生的可能机制。方法:取SD大鼠分为对照(生理盐水注射组,n=24)和抑制剂组(γ分泌酶抑制剂注射组,n... 目的:探讨使用γ分泌酶抑制剂Fli-06特异性阻断Notch信号通路后,大鼠肝部分切除术后肝再生的情况并初步阐明Notch-Hif-1α信号通路调控肝再生的可能机制。方法:取SD大鼠分为对照(生理盐水注射组,n=24)和抑制剂组(γ分泌酶抑制剂注射组,n=24)。给予药物处理后,两组分别施行大鼠肝部分切除术,术后0 d,1 d,3 d,5 d,每个时间点分别留取对照组(n=6)及抑制剂组(n=6)再生的肝组织,并检测相应肝重体重比,免疫组化法检测再生肝PCNA(增殖细胞核抗原,Proliferation Cell Nuclear Antigen)表达,RT-PCR检测再生肝组织中的Notch1、Hes1、VEGF m RNA的变化,Western-Blot法检测NICD(Notch胞内段,Notch Intracellular Domain)、Hif-1α(低氧诱导因子-1α,Hypoxia Inducible Factor-1α)蛋白在肝再生过程的变化情况。结果:1、肝部分切除术后3 d和5 d,抑制剂组肝重体重比明显低于对照组差异有统计学意义(P<0.05);2、免疫组织化学染色结果提示:抑制剂组再生肝PCNA阳性细胞率在术后1 d,3 d,5 d均明显低于对照组(P<0.05);3、Western blot结果表明:NICD和Hif-1α蛋白水平明显低于对照组(P<0.05);同时RT-PCR结果提示:抑制剂组Hes1的m RNA表达量术后1 d,3 d明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。同时,抑制剂组VEGF m RNA水平在术后3 d,5 d明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在大鼠肝部分切除术后肝再生过程中,使用γ分泌酶抑制剂Fli-06抑制Notch信号通路后,大鼠的肝再生能力明显降低,Notch-Hif-1α信号通路可能参与调控了大鼠肝部分切除术后肝再生过程。 展开更多

关键词 肝再生 γ分泌酶抑制剂 nicd HIF-1Α

原文传递

桑芪首乌片对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制 被引量：2

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作者 谢青 魏丹霞 +3 位作者 顾力华 杨仁华 刘朵 陈鹏 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第15期3791-3796,共6页

目的探讨桑芪首乌片对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法将60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,桑芪首乌片低、中、高剂量组,尼莫地平片阳性对照组,每组10只。采用线栓法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。造... 目的探讨桑芪首乌片对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法将60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,桑芪首乌片低、中、高剂量组,尼莫地平片阳性对照组,每组10只。采用线栓法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。造模成功后,连续给药28 d。分别于给药开始,第14和28天,观察各组神经功能评分。给药结束后,处死动物,分别通过氯化三苯四氮唑(TTC)染色、苏木素-伊红(HE)染色和尼氏体染色分析脑梗死体积、缺血脑组织病理变化、尼氏体数量;采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹方法检测Notch1、NICD和Hes1的mRNA和蛋白表达。结果桑芪首乌片高、中、低剂量均能减轻大脑中动脉阻塞模型大鼠的神经功能缺损症状,减小脑梗死体积,改善缺血脑区的病理学表现,增加尼氏体数量,促进Notch1、NICD和Hes1的基因及蛋白水平的表达。结论桑芪首乌片对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,可有效改善大鼠神经功能缺损症状,减小脑梗死体积,改善缺血脑区的病理学表现,增加尼氏体数量,其机制可能与上调脑缺血再灌注大鼠脑组织的Notch1、NICD和Hes1的表达、促进NSCs的增殖密切相关。 展开更多

关键词 桑芪首乌片 脑缺血再灌注损伤 NOTCH信号通路 NOTCH1 nicd HES1

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Notch信号通路和miR-21在周围神经损伤修复中的交互作用机制 被引量：5

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作者 杨凯云 孙佩佩 +1 位作者 武文亮 刘海春 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第32期5139-5144,共6页

背景:神经损伤修复是外科临床和基础研究的主要热点之一。小间隙套管治疗周围神经损伤的作用在前期研究中已经得到证实,但详细机制未能明确。同时Notch信号通路和微小RNA系统逐渐成为该领域的潜在热点,但二者的相关作用尚未得到明确报... 背景:神经损伤修复是外科临床和基础研究的主要热点之一。小间隙套管治疗周围神经损伤的作用在前期研究中已经得到证实,但详细机制未能明确。同时Notch信号通路和微小RNA系统逐渐成为该领域的潜在热点,但二者的相关作用尚未得到明确报道证实。目的:观察携带骨髓间充质干细胞的小间隙套管对周围神经损伤的治疗作用,探究Notch信号通路和miR-21在治疗过程中的相互作用关系。方法:体内实验中制造SD大鼠喉返神经8 mm缺损模型,分为假手术组、小间隙组和小间隙+骨髓间充质干细胞组,治疗后测定电生理结果,Western blot测定Notch信号通路和微小RNA表达情况。体外实验中在小间隙套管内培养骨髓间充质干细胞并行神经元方向诱导,通过改变Notch/miR 21表达情况,检测神经标记物的表达情况,分析骨髓间充质干细胞活性变化。结果与结论:神经染色和肌电图结果均确认了骨髓间充质干细胞的治疗效果。在骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中,Notch信号表达明显增强,miR-21表达明显上扬。通过进一步调控两因素表达发现,人为激活Notch信号或使miR-21过表达后骨髓间充质干细胞向神经分化的能力明显增强,抑制Notch信号后,骨髓间充质干细胞神经分化能力减弱,同时miR-21的促进作用失效。发现Notch信号通路和miR-21为骨髓间充质干细胞联合小间隙套接治疗周围神经损伤可能的重要促进机制,其中Notch信号通路具有更高级别的促进或抑制作用等级。 展开更多

关键词 喉返神经 周围神经损伤 小间隙套接 MIR-21 NOTCH通路 nicd Hes-1 骨髓基质干细胞 干细胞 受体 Notch 微RNAs 周围神经 组织工程

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人源性Notch1胞内段真核表达载体的构建 被引量：1

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作者 陈龙 王丹 李红 《辽宁医学院学报》 CAS 2011年第2期102-104,I0002,共4页

目的构建人Notch1胞内段(Notch1 intracellular domain,NICD)真核表达载体pcDNA3.1-NICD。方法通过逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术从人胃粘膜上皮细胞(GES-1细胞)中获得编码NICD的cD... 目的构建人Notch1胞内段(Notch1 intracellular domain,NICD)真核表达载体pcDNA3.1-NICD。方法通过逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术从人胃粘膜上皮细胞(GES-1细胞)中获得编码NICD的cDNA,将扩增产物克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)myc-his B,酶切和测序鉴定重组质粒。结果 RT-PCR扩增NICD基因得到2391bp片段,与预期的NICD片段大小一致。酶切和测序鉴定NICD的真核表达质粒pcDNA3.1-NICD构建成功。结论成功构建了人Notch1胞内段真核表达质粒pcDNA3.1-NICD,为研究Notch信号通路在人胃癌发生发展中的作用机制奠定了基础。 展开更多

关键词 NOTCH1 胃癌 nicd pcDNA3.1(+)myc-hisB

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