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内毒素致伤大鼠肺组织TNF-α、IL-6的mRNA表达及NF-IL6活化研究 被引量:47
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作者 张青 徐剑铖 +3 位作者 毛宝龄 钱桂生 陈正堂 李琦 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 2001年第9期523-526,共4页
目的 :研究内毒素 (L PS)致伤大鼠肺组织致炎因子〔肿瘤坏死因子 α(TNFα)和白介素 6 (IL 6 )〕的 m RNA表达以及核转录因子 NF IL 6活化情况 ,探讨这两种致炎因子在肺损伤及全身炎症反应综合征中的作用及其转录调控机制。方法 :采用... 目的 :研究内毒素 (L PS)致伤大鼠肺组织致炎因子〔肿瘤坏死因子 α(TNFα)和白介素 6 (IL 6 )〕的 m RNA表达以及核转录因子 NF IL 6活化情况 ,探讨这两种致炎因子在肺损伤及全身炎症反应综合征中的作用及其转录调控机制。方法 :采用逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)和凝胶阻滞电泳迁移率变动检测技术 (EMSA) ,检测不同剂量 L PS致伤大鼠肺组织 TNFα、IL 6的 m RNA表达和 NF IL 6活性。结果 :随着L PS剂量增加 ,TNFα、IL 6 m RNA表达增强 ;表达峰值时间 :TNFα为 1小时、IL 6为 4小时。低剂量L PS对 NF IL6有弱的激活作用 ,6 mg/ kg以上较大剂量 L PS可明显诱导 NF IL6活化 ;NF IL6活化高峰在 TNFα m RNA峰值同时或其后出现。结论 :内毒素致肺损伤中 ,TNFα是早期表达的致炎细胞因子 ,而IL 6对炎症进一步发展起一定作用。 NF IL6对损伤早期的 TNFα转录并不起主要作用 ,但对 IL 展开更多
关键词 内毒素 肿瘤坏死因子-Α 白介素-6 核转录因子nf-il6
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利用小干涉RNA抑制肿瘤细胞MCF-7中NF-IL6的表达 被引量:2
2
作者 李晓荣 李平 +4 位作者 杨尧 李晓明 彭丽 曹诚 马清钧 《生物技术通讯》 CAS 2005年第5期479-481,共3页
RNA干扰被证明是一项能有效而特异地抑制基因表达的新技术。转录因子NF-IL6特异地在肿瘤组织中过量表达,许多报道表明抑制它的功能对肿瘤治疗有利。构建能够沉默转录因子NF-IL6表达的小干涉RNA(siRNA)质粒,转染肿瘤MCF-7细胞后,用Wester... RNA干扰被证明是一项能有效而特异地抑制基因表达的新技术。转录因子NF-IL6特异地在肿瘤组织中过量表达,许多报道表明抑制它的功能对肿瘤治疗有利。构建能够沉默转录因子NF-IL6表达的小干涉RNA(siRNA)质粒,转染肿瘤MCF-7细胞后,用Western印迹法和荧光素酶活性实验检测NF-IL6表达水平和转录活性的改变。结果发现NF-IL6的表达水平被下调80%,转录激活能力降低了60%,转染细胞内部出现大量空洞,细胞增殖停滞。 展开更多
关键词 小干涉RNA nf-il6 蛋白表达 转录活性 肿瘤
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以pMSEx-1作为共转染质粒观察人NF-IL6过量表达对NIH3T3细胞成瘤性的影响 被引量:1
3
作者 朱敏生 刘定干 李载平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期93-95,共3页
我们曾以pSV2neo作为共转染质粒观察到NFIL6具有转化基因活性。本文以pMESx1(含neo抗性基因)质粒作为共转染质粒,发现能表达有义NFIL6的NIH3T3转染子,可同时出现转化形态的克隆和扁平形态... 我们曾以pSV2neo作为共转染质粒观察到NFIL6具有转化基因活性。本文以pMESx1(含neo抗性基因)质粒作为共转染质粒,发现能表达有义NFIL6的NIH3T3转染子,可同时出现转化形态的克隆和扁平形态的克隆,二者比例6∶4,且NFIL6的表达状态相似。我们提出,NFIL6在NIH3T3细胞表现为转化基因活性时,作用方式具有随机性。本文还提出。 展开更多
关键词 pMSEx-1 nf-il6 转化基因 肿瘤发生
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NF-IL6对iNOS基因表达的负调控
4
作者 朱敏生 沈月 +4 位作者 许祥裕 潘英 丁树标 朱有华 智刚 《自然科学进展(国家重点实验室通讯)》 1999年第8期763-765,共3页
诱生型一氧化氮合酶(iNOS)基因的调控序列中含有NF-IL6的识别元件,但NF-IL6对iNOS基因的调控功能目前尚不清楚。研究发现SP2/0骨髓瘤细胞能低剂量持续表达iNOS,并利用该模型将含有iNOS调控序列的报告基因质粒与NF-IL6的表达质粒共转染至... 诱生型一氧化氮合酶(iNOS)基因的调控序列中含有NF-IL6的识别元件,但NF-IL6对iNOS基因的调控功能目前尚不清楚。研究发现SP2/0骨髓瘤细胞能低剂量持续表达iNOS,并利用该模型将含有iNOS调控序列的报告基因质粒与NF-IL6的表达质粒共转染至SP2/0细胞,观察到NF-IL6的表达能抑制iNOS基因的表达,并呈剂量效应关系,初步认为NF-IL6是iNOS基因表达的负调控因子。 展开更多
关键词 nf-il6 INOS 负调控因子 基因表达 骨髓瘤细胞
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Gene expression profile favoring phenotypic reversion:a clue for mechanism of tumor suppression by NF-IL6 3'UTR 被引量:7
5
作者 DINGGANLIU QIUHONGJIANG +3 位作者 YUNYIWEI LISUN BEIBEIFU FUKUNZHAO 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2003年第6期509-514,共6页
Transfection of cDNA in 3'untranslated region of human nuclear factor for interleukin-6(NF-IL6 3'UTR)induced tumor suppression in a human hepatoma cell line.cDNA array analysis was used to reveal changes in ge... Transfection of cDNA in 3'untranslated region of human nuclear factor for interleukin-6(NF-IL6 3'UTR)induced tumor suppression in a human hepatoma cell line.cDNA array analysis was used to reveal changes in gene expression profile leading to tumor suppression The results indicate that this suppression was not due to activation of dsRNA-dependent protein kinase,nor to inactivation ofoncogenes; rather,all the changes in expression of known genes,induced by NF-IL6 3'UTR cDNA may be ascribed to the suppression of cellular malignancy.Therefore,our results imply that this 3'untranslated region may have played role of a regulator of gene expression profile. 展开更多
关键词 cDNA array nf-il6 HEPATOMA 3 'UTR tumor suppression.
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外源NF-IL6(C/EBPβ)对肝癌细胞系BEL-7404的肿瘤抑制效应 被引量:1
6
作者 傅蓓蓓 孙丽 刘定干 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第12期87-90,共4页
目的 :探讨核转录因子NF IL6对肝癌细胞系BEL 740 4恶性度的影响。方法 :用磷酸钙介导转染技术 ,将NF IL6表达载体 (pCN)和空载体质粒 (pCN 空 )分别导入肝癌细胞系BEL 740 4 ,并借助细胞生长曲线 ,软琼脂集落形成试验 ,裸鼠成瘤试验对... 目的 :探讨核转录因子NF IL6对肝癌细胞系BEL 740 4恶性度的影响。方法 :用磷酸钙介导转染技术 ,将NF IL6表达载体 (pCN)和空载体质粒 (pCN 空 )分别导入肝癌细胞系BEL 740 4 ,并借助细胞生长曲线 ,软琼脂集落形成试验 ,裸鼠成瘤试验对转染细胞的恶性度进行了检测。结果 :与原细胞系BEL 740 4和空载体转染的该细胞系相比较 ,转染了NF IL6基因的BEL 740 4的各细胞克隆生长速度减慢 ,在软琼脂中集落形成率恶性度下降 ,裸鼠成瘤试验显示成瘤性明显降低。结论 :表明外源转染的NF IL6对肝癌细胞系BEL 740 展开更多
关键词 核转录因子 细胞转染 肝癌细胞系 肿瘤抑制效应
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Preliminary evidence that overexpression of nuclearfactor for IL6 expression (NF-IL6) in NIH3T3 cells may berelated to malignant transformation
7
作者 ZHU MINSHENG DINGGAN LIU +1 位作者 SHIZUO AKIRA ZAIPING LI.(Shanghai Institute of Biochemistry, Academic Sinica,Shanghai 200031, China)(Institute of Molecular and Cellular Biology, Osaka University, Japan) 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 1994年第2期191-200,共10页
NF-IL6 is a member of c/EBP family and has multiple functions in regulation of cellular gene expression. We have constructed NF-IL6 expression plasmids and trans fected the NIH3T3 cells with them. The sense NF-IL6 tra... NF-IL6 is a member of c/EBP family and has multiple functions in regulation of cellular gene expression. We have constructed NF-IL6 expression plasmids and trans fected the NIH3T3 cells with them. The sense NF-IL6 transfectants showed significantly increased tumorigenicity, and the stable integration of NF-IL6 cDNA into cellular DNA and its expression were demonstrated. Our results suggest that NF-IL6 may be related to tumorigenesis. 展开更多
关键词 nf-il6 NIH3T3 tumorigenicity
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人白细胞介素6表达的核因子蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定
8
作者 朱敏生 刘定干 +2 位作者 许祥裕 沈月 李载平 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期395-400,共6页
将NF-IL6基因与谷胱甘肽转移酶(GST)基因融合并成功地表达出具有生物活性的NF-IL6,经GelRetardation分析证实该重组蛋白能与其DNA识别元件结合。实验还发现,虽然重组蛋白的表达率较低。
关键词 nf-il6 融合表达 大肠杆菌 鉴定 核因子蛋白
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IL-6相关转录因子在急性髓系白血病细胞中的激活水平及生物学意义
9
作者 张纪岩 沈倍奋 +2 位作者 黎燕 任蕴芳 孙英勋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期449-452,共4页
目的 :探讨IL 6对急性髓系白血病 (AML)细胞产生生物学效应的信号转导基础。方法 :测定IL 6对M1,R2 ,K5 6 2 ,TF1细胞生长的影响 ,并采用凝胶阻滞电泳 (Electrophoresismobilityshiftassay ,EMSA)的方法分析IL 6对这些AML细胞信号转导... 目的 :探讨IL 6对急性髓系白血病 (AML)细胞产生生物学效应的信号转导基础。方法 :测定IL 6对M1,R2 ,K5 6 2 ,TF1细胞生长的影响 ,并采用凝胶阻滞电泳 (Electrophoresismobilityshiftassay ,EMSA)的方法分析IL 6对这些AML细胞信号转导子与转录激活子 3(Signaltransducerandactivatoroftranscription 3 ,STAT3)与核因子介素 6 (nuclearfactor IL6 ,NF IL6 )的激活情况。在此基础上 ,运用STAT3、NF IL6反义寡核苷酸 (ASODNs)阻断或减弱IL 6在M1细胞中对STAT3与NF IL6的激活 ,检测ASODNs对IL 6诱导的M1细胞生长停止效应的影响。结果 :NF IL6在所有AML细胞中均有组成型激活 ,而STAT3仅在R2、K5 6 2细胞中有弱的组成型激活。STAT3ASODN可部分拮抗IL 6对M1细胞的抑制 ,而NF IL6ASODN可加强IL 6对M1细胞的抑制。结论 :STAT3在AML细胞中可能负调控细胞生长 ,而NF IL6很可能与细胞生存。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 IL-6 STAT3 nf-il6 AS ODNs
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M1与7TD1细胞中IL-6激活核因子的比较 被引量:1
10
作者 张纪岩 沈倍奋 +1 位作者 黎燕 王建安 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期173-177,共5页
目的 :探讨IL 6在不同靶细胞中引起不同生物学效应的分子基础。方法 :检测IL 6对M1与 7TD1细胞生长及分化的影响 ,通过凝胶阻滞电脉 (EMSA)比较IL 6在M1与 7TD1细胞中激活STAT3(代表JAK STATs通路 )和NF IL6 (代表P2 1ras MAPK NF IL6通... 目的 :探讨IL 6在不同靶细胞中引起不同生物学效应的分子基础。方法 :检测IL 6对M1与 7TD1细胞生长及分化的影响 ,通过凝胶阻滞电脉 (EMSA)比较IL 6在M1与 7TD1细胞中激活STAT3(代表JAK STATs通路 )和NF IL6 (代表P2 1ras MAPK NF IL6通路 )的情况。结果 :IL 6诱导M1细胞生长停止并向巨噬细胞方向分化 ,却促进 7TD1细胞生长。在这两种细胞中 ,低剂量IL 6均可激活STAT3,但M1细胞中STAT3的激活是持续性的 ,7TD1细胞中STAT3的激活是一过性的 ;而IL 6在7TD1细胞中激活NF IL6所需的剂量 (0 .1ng ml)远低于在M1细胞中所需的剂量 (10 0 .0ng ml) ,不过活化的NF IL6在两种细胞中持续的时间均超过 6 0min。结论 :JAK STATs通路与P2 1ras MAPK NF IL6通路可能分别代表生长抑制信号与生长促进信号。 展开更多
关键词 STAT3 白细胞介素6 M1细胞 7TD1细胞
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鼠NF~IL~6反义真核表达载体的构建和鉴定
11
作者 郑小莉 谢晓东 +2 位作者 罗波 梅志强 刘佳佳 《西南军医》 2011年第5期810-813,共4页
目的构建包含鼠细胞转录因子白介素6(NF~IL6)反义基因的部分功能区的重组反义真核表达载体pcDNA3.0/NF~IL6,为进一步研究鼠巨噬细胞中NF~IL6的功能奠定基础。方法 Trizol试剂法提取体外分离培养的鼠巨噬细胞总RNA,经逆转录聚合酶... 目的构建包含鼠细胞转录因子白介素6(NF~IL6)反义基因的部分功能区的重组反义真核表达载体pcDNA3.0/NF~IL6,为进一步研究鼠巨噬细胞中NF~IL6的功能奠定基础。方法 Trizol试剂法提取体外分离培养的鼠巨噬细胞总RNA,经逆转录聚合酶链式反应(RT~PCR)扩增NF~IL6基因目的片段,PCR产物及真核表达载体pcD-NA3.0分别双酶切并进行连接,转化入大肠杆菌Ecoli Dh5α扩增后获得重组载体。结果 RT~PCR获得预期大小的特异性NF~IL6 DNA片段,经PCR、双酶切及测序分析证实已将鼠NF~IL6 cDNA片段正确的反向插入真核表达载体中。结论成功获得反义pcDNA3.0/NF~IL6重组质粒。 展开更多
关键词 NF^IL6 反义核酸 巨噬细胞
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巨噬细胞中环氧合酶-2转录调节机制的研究进展
12
作者 卢婷婷 梁统 周克元 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B03期37-39,共3页
关键词 转录水平 NFΚB nf-il6 CRE/E-box COX-2
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鼻咽癌恶性转化基因Tx中3.0kb片段序列分析 被引量:4
13
作者 黎明 任维 +3 位作者 廖伟 翁新宪 夏林庆 曹亚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第5期602-605,共4页
从中国人鼻咽癌细胞株 CNE2中克隆分离出的恶性转化基因 Tx,其基因长度为 1 6kb.在对其中 2 .8kb片段测序的基础上 ,对其中 Xho /Eco R 长度约 3.0 kb的片段 ( Tx3.0 )进一步进行了测序 ,并利用生物信息学技术分析认为 ,Tx3.0与人类免... 从中国人鼻咽癌细胞株 CNE2中克隆分离出的恶性转化基因 Tx,其基因长度为 1 6kb.在对其中 2 .8kb片段测序的基础上 ,对其中 Xho /Eco R 长度约 3.0 kb的片段 ( Tx3.0 )进一步进行了测序 ,并利用生物信息学技术分析认为 ,Tx3.0与人类免疫球蛋白 kappa( Igκ)轻链基因高度同源 ,并直接映射于 J区 .Tx3.0中除有编码免疫球蛋白 kappa链的 J2、J3、J4及 J5基因片段外 ,在各个片段间不仅有 TATA box、CAAT box和 Poly A等经典的调控序列 ,还有 NF- IL6的反应元件、某些转录因子的识别序列、以及核基质结合序列等 .据此以及 2 .8kb序列的分析结果 ,对 Tx3.0下游 1 .0 kb片段序列进行了预测 .对 Tx3.0基因片段的研究为进一步研究 Tx基因在鼻咽癌发病中的作用 ,提供了重要信息 . 展开更多
关键词 鼻咽癌 Tx基因 3.0kb片段 序列分析 发病机制
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噬菌体显示法克隆RNA结合蛋白cDNA——表达文库的构建
14
作者 何元政 倪晓东 +2 位作者 刘定干 卿国良 李载平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第5期467-470,共4页
试图用噬菌体显示法 (phagedisplay)克隆编码与人白细胞介素 6核转录因子的 3′非翻译区(NF IL63′UTR)特异结合的蛋白的cDNA .构建了回复系RR细胞的cDNA的噬粒 ( phagemid)表达文库 ,并设法除去了cDNA的大部分终止密码子 .鉴定表明 ,... 试图用噬菌体显示法 (phagedisplay)克隆编码与人白细胞介素 6核转录因子的 3′非翻译区(NF IL63′UTR)特异结合的蛋白的cDNA .构建了回复系RR细胞的cDNA的噬粒 ( phagemid)表达文库 ,并设法除去了cDNA的大部分终止密码子 .鉴定表明 ,该文库中含有各种大小的cDNA插入片段 ,并能够表达外源cDNA 。 展开更多
关键词 RNA结合蛋白 噬菌体显示 CDNA 克隆
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植物乳杆菌NDC75017对Caco-2细胞中il-6表达的影响 被引量:3
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作者 刘颖 满朝新 +6 位作者 吕学娜 韩琳琳 薛玉清 杨相宜 单艺 张英华 姜毓君 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1237-1243,共7页
【目的】本研究通过体外实验,分析植物乳杆菌NDC75017对免疫相关基因白细胞介素6(il-6)表达的影响,并进一步揭示其机制。【方法】植物乳杆菌NDC 75017作用于Caco-2细胞0、2、4、6、8、10和12 h,采用Real Time PCR方法检测il-6基因和tol... 【目的】本研究通过体外实验,分析植物乳杆菌NDC75017对免疫相关基因白细胞介素6(il-6)表达的影响,并进一步揭示其机制。【方法】植物乳杆菌NDC 75017作用于Caco-2细胞0、2、4、6、8、10和12 h,采用Real Time PCR方法检测il-6基因和toll样受体2(tlr2)的表达。植物乳杆菌NDC 75017与Caco-2细胞共培养0、0.5、1、2和4 h,用western blot方法检测NF-κB的磷酸化水平;NF-κB的特异性抑制剂PDTC预处理Caco-2细胞30 min后,再加入植物乳杆菌NDC 75017作用2 h,用Real Time PCR方法检测il-6基因及tlr2的表达量。【结果】植物乳杆菌NDC 75017诱导Caco-2细胞中il-6和tlr2基因的表达,并且分别在诱导8 h和6 h时表达量达到最大。植物乳杆菌NDC 75017能够快速诱导NF-κB的磷酸化作用,在加入其特异性抑制剂PDTC后,il-6和tlr2基因的表达显著下降。【结论】植物乳杆菌NDC 75017能通过tlr2介导的NF-κB信号通路来诱导细胞因子il6短暂性的表达。 展开更多
关键词 植物乳杆菌NDC 75017 CACO-2细胞 白细胞介素6(il-6) toll样受体2(tlr2) NF-ΚB信号通路
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Overexpression of a reversion-related protein in the revertant RR cells 被引量:4
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作者 刘定干 李载平 +1 位作者 Shizuo Akira Tadamitsu Kishimoto 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1996年第3期300-309,共10页
The cDNA insert of the plasmid p14-6[1] is found to be the 3’-untranslatcd region (3’-UTR) of the transcription factor for human interleukin-6, NF-IL6. This 3’ -DTK is actively transcribed in the revertant cell lin... The cDNA insert of the plasmid p14-6[1] is found to be the 3’-untranslatcd region (3’-UTR) of the transcription factor for human interleukin-6, NF-IL6. This 3’ -DTK is actively transcribed in the revertant cell line RR, which contains the p14-6 plasmid integrated into its genomic DNA. Simultaneously a protein specifically bound to this 3’-UTR is expressed in significantly larger amounts. Its overexpression is apparently related to the reversion of the malignant cellular phenotype. The properties of this protein, named BNF, and possible reasons for its overexpression are discussed, and hypothesis on the mechanism of reversion of the RR cells is proposed. 展开更多
关键词 nf-il6 3’-UTR BNF PROTEIN RNA-protein BINDING reversion.
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