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植物NCEDs基因家族在种子休眠与萌发中的分子机制 被引量：1
1
作者 康琳 李丽娟 +3 位作者 朱安妮 黄纯倩 姚丽 黄艳飞 《耕作与栽培》 2025年第5期41-47,共7页
9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cisepoxycarotenoid dioxygenase,NCED)是脱落酸(Abscisic acid,ABA)生物合成途径中的关键限速酶。NCEDs通过调控ABA合成代谢从而进一步影响种子的休眠与萌发。通过阐述NCEDs基因家族在植物种子休眠与... 9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cisepoxycarotenoid dioxygenase,NCED)是脱落酸(Abscisic acid,ABA)生物合成途径中的关键限速酶。NCEDs通过调控ABA合成代谢从而进一步影响种子的休眠与萌发。通过阐述NCEDs基因家族在植物种子休眠与萌发调控方面的研究与应用,为NCEDs的研究和应用方向提供参考。 展开更多
关键词 nceds 种子 休眠 萌发 功能
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甜瓜NCED基因家族的鉴定及CGMMV侵染后的表达模式
2
作者 林涛 任丹丹 +2 位作者 张克岩 马国斌 李菊芬 《分子植物育种》 北大核心 2025年第13期4262-4271,共10页
脱落酸(ABA)作为胁迫响应激素,在植物应对逆境胁迫的过程中发挥重要作用。9'-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶(NCED)是调控ABA生物合成途径的关键酶。本研究利用生物信息学的方法筛选到11个甜瓜CmNCED基因,分布在10条染色体上;NCED蛋... 脱落酸(ABA)作为胁迫响应激素,在植物应对逆境胁迫的过程中发挥重要作用。9'-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶(NCED)是调控ABA生物合成途径的关键酶。本研究利用生物信息学的方法筛选到11个甜瓜CmNCED基因,分布在10条染色体上;NCED蛋白分子量介于15.03~76.52 kD,均包含RPE65结构域,亚细胞定位显示NCED蛋白主要位于叶绿体和细胞质中。构建水稻、拟南芥和甜瓜的NCED蛋白进化树,发现甜瓜NCED蛋白聚类在4个亚族中,其中聚类到亚族Ⅰ的蛋白数量最多。同时,在甜瓜NCED基因的启动子中发现与激素和抗逆相关的顺式作用元件。组织特异性表达分析表明,8个甜瓜NCED基因在不同组织及不同生长发育阶段存在不同的表达模式;利用RT-qPCR技术对甜瓜接种CGMMV后NCED基因的表达水平进行检测,发现CmNCED03表达量先上升后下降,可能参与了对CGMMV侵染的应答;而大部分基因的表达量下调,表明与抗病性呈负相关。本研究可为甜瓜NCED基因的功能鉴定及抗病分子育种提供理论依据。 展开更多
关键词 甜瓜 nced基因 进化分析 基因表达
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NCEDs基因家族与环境因子和激素互作调控种子休眠萌发的研究进展
3
作者 康琳 李丽娟 +3 位作者 朱安妮 黄纯倩 姚丽 黄艳飞 《南方农业》 2025年第13期141-145,共5页
9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoiddioxygenase,NCED)是脱落酸(Abscisicacid,ABA)从头合成过程中的关键限速酶,是小家族蛋白。NCEDs通过调控ABA合成代谢从而进一步影响了种子的休眠与萌发。重点阐述了NCEDs基因家族... 9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoiddioxygenase,NCED)是脱落酸(Abscisicacid,ABA)从头合成过程中的关键限速酶,是小家族蛋白。NCEDs通过调控ABA合成代谢从而进一步影响了种子的休眠与萌发。重点阐述了NCEDs基因家族与环境因子和激素互作调控植物种子休眠与萌发方面的研究与应用,并对NCEDs的研究前景作了展望。 展开更多
关键词 nceds 环境因子 激素 种子 休眠 萌发
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苹果NCED基因家族鉴定及表达分析 被引量：1
4
作者 李嘉伟 徐佳灿 +4 位作者 崔建华 王欣 刘卓 张旭珠 吴瑞刚 《山东农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第2期285-292,共8页
植物在应对非生物胁迫时,脱落酸(ABA)发挥着关键的调节作用。生物体合成ABA的过程中9-顺式-环氧类胡萝卜素加双氧酶蛋白(9-cis-epoxycarotenoids dioxygenase,NCED)具有重要调控作用。本研究通过生物信息学方法开展苹果NCED基因家族成... 植物在应对非生物胁迫时,脱落酸(ABA)发挥着关键的调节作用。生物体合成ABA的过程中9-顺式-环氧类胡萝卜素加双氧酶蛋白(9-cis-epoxycarotenoids dioxygenase,NCED)具有重要调控作用。本研究通过生物信息学方法开展苹果NCED基因家族成员鉴定,进而通过表达图谱分析了在干旱和盐胁迫条件下苹果MdNCEDs基因的表达情况。结果表明,本研究鉴定得到MdNCED基因家族成员18个,染色体定位分析显示18个MdNCEDs分布在10条染色体上;理化性质分析显示MdNCEDs分子量为46.47-76.36 kD,等电点介于5.2-7.63之间。苹果MdNCED启动子序列中检测到多种与逆境激素、响应非生物胁迫反应功能元件;基因结构分析显示,MdNCED基因结构有较高一致性;共线性分析结果显示,部分基因之间发生了复制事件;苹果MdNCEDs基因响应干旱、高盐胁迫的表达数据显示,与CK(0 h)相比,在高盐和干旱两种非生物胁迫处理下3个基因(MdMYB3、MdMYB11、MdMYB18)上调表达,4个基因(MdMYB1、MdMYB6、MdMYB13、MdMYB17)下调表达,2个基因(MdMYB4、MdMYB14)表达无明显规律,4个基因(MdMYB5,MdMYB8,MdMYB9,MdMYB16)无显著性差异。本文为后续深入解析苹果MdNCEDs基因的功能提供了基础理论依据。 展开更多
关键词 苹果 脱落酸 nced基因家族 生物信息学分析
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小麦NCED基因家族鉴定及其在干旱胁迫下的表达模式分析
5
作者 刘浩 马于翌 +2 位作者 孙欣 赵欣奔 崔法 《鲁东大学学报(自然科学版)》 2025年第4期335-342,共8页
脱落酸(Abscisic acid, ABA)在植物响应干旱胁迫中发挥着重要作用,其中,9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase, NCED)是ABA生物合成的关键限速酶。本研究在小麦全基因组范围内鉴定出13个NCED基因家族成员,... 脱落酸(Abscisic acid, ABA)在植物响应干旱胁迫中发挥着重要作用,其中,9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase, NCED)是ABA生物合成的关键限速酶。本研究在小麦全基因组范围内鉴定出13个NCED基因家族成员,并对其系统进化关系、基因结构、保守结构域及在不同组织和干旱胁迫下的表达模式进行了分析。结果表明,TaNCED基因的进化关系越近,它们的内含子-外显子结构特征和保守结构域越相似。转录组数据表明,不同TaNCED基因对干旱胁迫的响应模式各异。其中,TaNCED2-A、TaNCED3-B/D和TaNCED4-A/B/D在干旱胁迫后表达显著上调,且TaNCED4-A/B/D在干旱胁迫的表达量最高;TaNCED1-A/D在所有检测时间点均未表达;TaNCED5-A随着干旱胁迫时间的延长,其表达量逐渐降低。本研究为深入解析小麦NCED基因家族在干旱胁迫响应中的作用机制提供了理论基础,也为小麦抗旱分子育种提供了潜在的基因靶点。 展开更多
关键词 小麦 nced基因家族 干旱胁迫 表达模式
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甜樱桃果实NCED基因的克隆及其表达 被引量：16
6
作者 任杰 吴洁芳 +2 位作者 冷平 孙亮 赵胜利 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期891-898,共8页
为了进一步研究ABA在甜樱桃果实成熟过程中的作用,通过RT-PCR以及RACE-PCR方法从甜樱桃果实克隆得到了ABA合成关键酶NCED基因片段PacNCED1及其3′末端序列,从乙烯利处理果实中克隆得到了乙烯合成关键酶ACO基因片段PacACO1。推测的PacNC... 为了进一步研究ABA在甜樱桃果实成熟过程中的作用,通过RT-PCR以及RACE-PCR方法从甜樱桃果实克隆得到了ABA合成关键酶NCED基因片段PacNCED1及其3′末端序列,从乙烯利处理果实中克隆得到了乙烯合成关键酶ACO基因片段PacACO1。推测的PacNCED1和PacACO1氨基酸序列与其它物种的NCEDs和ACOs氨基酸序列具有很高的同源性。通过半定量RT-PCR及定量RT-PCR方法分析了PacNCED1和PacACO1的表达模式,发现PacNCED1在甜樱桃果实发育的整个过程以及不同部位都有表达,在果肉和种子中的表达不断增加,在果实成熟之前达到最高峰,而在果柄中的表达则在果实完熟时达到最大。PacNCED1在未失水的叶片和根中有微弱表达,但在失水叶片中的表达急剧上升,表现出与失水的相关性。外源ABA和乙烯利能促进PacNCED1在果实中的表达,而NDGA和IAA对PacNCED1在果实中的表达没有显著影响。在甜樱桃果实发育过程中并没有检测到PacACO1的表达信号,但是外源乙烯利和ABA处理能诱导其在果实中的表达。 展开更多
关键词 甜樱桃 nced ACO ABA 基因 克隆 表达
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牡丹NCED基因的克隆和表达分析 被引量：16
7
作者 王晓庆 张超 +1 位作者 王彦杰 董丽 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期2033-2044,共12页
通过RT-PCR和RACE技术克隆得到了牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)中编码9–顺式–环氧类胡萝卜素加双氧酶蛋白(NCED)的一条cDNA基因全长(暂命名为Ps-NCED1)。进化树分析显示Ps-NCED1的氨基酸序列与葡萄、马铃薯、胡萝卜等植物中的NCE... 通过RT-PCR和RACE技术克隆得到了牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)中编码9–顺式–环氧类胡萝卜素加双氧酶蛋白(NCED)的一条cDNA基因全长(暂命名为Ps-NCED1)。进化树分析显示Ps-NCED1的氨基酸序列与葡萄、马铃薯、胡萝卜等植物中的NCED一致性均达到了70%以上。通过与拟南芥中CCD(类胡萝卜素分解加双氧酶)家族氨基酸序列比对后发现,Ps-NCED1与调控ABA合成的At-NCED3一致性最高。对花朵中内源ABA的研究发现,ABA在花朵蕾期及衰老期含量较高,盛开期时含量较低,表明ABA对于植物的开放衰老具有促进作用。相对荧光定量PCR分析发现:在花朵完全开放的牡丹植株中,Ps-NCED1在根、茎、叶、花托、萼片、花瓣、心皮、雄蕊中的表达量以在根和雄蕊中较高,在叶和萼片中最低。在外源ABA处理的牡丹花瓣中,Ps-NCED1表达量变化与内源ABA含量变化具有相同的趋势,推测该基因是调控内源ABA含量的主要基因。 展开更多
关键词 牡丹 ABA nced 基因 实时定量PCR
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茶树CsNCED2基因的克隆和表达分析 被引量：10
8
作者 王赞 陈丹 +2 位作者 岳川 曹红利 郭雅玲 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期994-1002,共9页
该研究以铁观音茶树品种叶片为材料,通过RT-PCR技术,克隆了茶树脱落酸(ABA)合成途径关键限速酶——9-顺式环氧类胡萝卜素裂解双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase,NCED)基因的全长cDNA序列。该基因cDNA全长1931bp,包含1821bp完... 该研究以铁观音茶树品种叶片为材料,通过RT-PCR技术,克隆了茶树脱落酸(ABA)合成途径关键限速酶——9-顺式环氧类胡萝卜素裂解双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase,NCED)基因的全长cDNA序列。该基因cDNA全长1931bp,包含1821bp完整开放阅读框,共编码606个氨基酸残基。NCBI同源分析结果表明,与葡萄VvNCED2相似性最高(78%),命名为CsNCED2(NCBI登录号:MF765770)。氨基酸序列分析显示,其具有NCED家族的FLNO2258保守结构域,以及MIAHPKxDP和HDFAITE保守结构域序列;在保守区存在4个Fe2+活性组氨酸结合位点,N-端含有叶绿体转运肽。实时荧光定量PCR分析表明,CsNCED2基因在铁观音叶、茎和花中表达量较高;白茶萎凋和乌龙茶做青均可以诱导CsNCED2基因显著上调表达;除干旱胁迫抑制CsNCED2表达外,ABA和低温胁迫均能够诱导CsNCED2基因显著上调表达。表明CsNCED2基因在茶树ABA合成代谢以及胁迫响应中发挥重要作用。 展开更多
关键词 茶树 基因克隆 nced基因 脱落酸 表达模式
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枸杞脱落酸生物合成关键酶基因NCED的克隆及表达分析 被引量：12
9
作者 陆平 田跃胜 +2 位作者 王名雪 李杉 赵静雅 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期303-310,共8页
脱落酸(abscisic acid,ABA)对植物的生长发育具有独特的调控功能,并在植物适应逆境环境中发挥重要作用。9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶(NCED)是高等植物中ABA生物合成途径的一个关键酶。根据GenBank中的植物NCED基因的同源序列设计简并... 脱落酸(abscisic acid,ABA)对植物的生长发育具有独特的调控功能,并在植物适应逆境环境中发挥重要作用。9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶(NCED)是高等植物中ABA生物合成途径的一个关键酶。根据GenBank中的植物NCED基因的同源序列设计简并引物,通过RT-PCR及RACE技术从枸杞叶片中克隆到1个编码NCED的基因,命名为LbNCED。其cDNA全长为2316 bp,含有1个1824 bp的开放阅读框,编码1个含607氨基酸残基,分子量为67.38 kDa、等电点(pI)为6.43的假定蛋白,其氨基酸序列与番茄(Lycopersicon esculentum)和马铃薯(Solanum tuberosum)的同源性达90%,在N-末端具有1个含15个氨基酸的叶绿体转运肽。Southern杂交结果表明,该基因在枸杞基因组中以低拷贝形式存在。盐处理和脱水处理的枸杞叶片中LbNCED基因的表达与内源ABA的积累同步变化。 展开更多
关键词 枸杞 ABA nced基因 RACE 环境胁迫
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柱花草9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶基因(SgNCED1)的克隆及表达分析 被引量：12
10
作者 杨锦芬 郭振飞 杨静 《草业学报》 CSCD 2007年第3期21-28,共8页
9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶（NCED）是高等植物ABA生物合成途径中的关键酶，本研究以3种豆科植物NCED的同源序列设计简并引物，用RT—PCR结合RACE以及嵌套PCR的方法。从柱花草叶片中克隆了一个编码NCED的基因，命名为SgNCED1。其cDN... 9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶（NCED）是高等植物ABA生物合成途径中的关键酶，本研究以3种豆科植物NCED的同源序列设计简并引物，用RT—PCR结合RACE以及嵌套PCR的方法。从柱花草叶片中克隆了一个编码NCED的基因，命名为SgNCED1。其cDNA全长2241bp，开放阅读框架为1809bp，编码602个氨基酸。Southern杂交结果表明，该基因在柱花草基因组中以单拷贝形式存在。氨基酸序列同源比对和系统进化分析表明SgNCED1与花生的AhNCED1高度同源（92％），与另外3种豆科植物的NCED也有很高的同源性（72％～75％）。亚细胞定位预测表明SgNCED1蛋白的N-末端具有叶绿体转运肽。叶片脱水诱导的SgNCED1基因的表达与内源ABA的积累、变化同步。 展开更多
关键词 柱花草 ABA nced 脱水胁迫
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烟草NtNCED基因的鉴定分析 被引量：9
11
作者 白戈 杨大海 +1 位作者 姚恒 谢贺 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期3907-3912,共6页
脱落酸(abscisic acid,ABA)是植物生长、发育所需的重要植物激素,ABA在植物应对干旱、盐、病原菌等胁迫过程中也起到重要作用。烟草是一种重要的经济作物,尤其对于边远地区更为重要。目前国内外极端气候多发,在烟叶生产中,面临着干旱的... 脱落酸(abscisic acid,ABA)是植物生长、发育所需的重要植物激素,ABA在植物应对干旱、盐、病原菌等胁迫过程中也起到重要作用。烟草是一种重要的经济作物,尤其对于边远地区更为重要。目前国内外极端气候多发,在烟叶生产中,面临着干旱的影响,NCED基因家族是ABA合成路径上的关键基因。本研究在基因组范围内鉴定了栽培烟草的18个Nt NCED基因。基于系统进化相似性及保守结构域,将18个栽培烟草Nt NCED蛋白分为4组,组Ⅰ含有9个成员,组Ⅱ含有5个成员,组Ⅲ含有3个成员,组Ⅳ含有2个成员。本研究还获得了Nt NCED基因在基因组染色体上的分布情况,分析了Nt NCED基因家族成员进化关系、基因结构及结构域。本研究的结果将为进一步研究栽培烟草中Nt NCED家族的功能提供有价值的分析基础。 展开更多
关键词 烟草 nced基因家族 系统进化分析
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番茄果实ABA合成酶NCED基因的克隆及其RNAi遗传转化体系的建立 被引量：7
12
作者 王玲 孙亮 +2 位作者 冷平 王永军 徐丽哲 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期54-60,共7页
以番茄为材料,根据ABA合成关键酶编码基因NCED的保守序列设计引物,通过RT-PCR方法从番茄果实中克隆了2个NCED基因片段,Le NCED1和Le NCED2。通过农杆菌介导法进一步建立了‘嘉宝’番茄Le NCED1基因的RNAi再生和转化体系,并研究影响番茄... 以番茄为材料,根据ABA合成关键酶编码基因NCED的保守序列设计引物,通过RT-PCR方法从番茄果实中克隆了2个NCED基因片段,Le NCED1和Le NCED2。通过农杆菌介导法进一步建立了‘嘉宝’番茄Le NCED1基因的RNAi再生和转化体系,并研究影响番茄遗传转化的4个因素外植体类型、预培养时间、激素组合、农杆菌侵染时间。结果表明:番茄子叶预培养2 d,用农杆菌LBA4404侵染5 min后,避光共培养2 d,在加入1mg/L 6-BA+0.05 mg/LIAA+5 mg/L潮霉素的MS培养基上可以诱导出芽,转入添加0.1 mg/LIAA+7 mg/L潮霉素的1/2 MS培养基上可以使芽生根。本实验共获得26株抗性植株。GUS染色证明,有9株抗性植株成功转入含有NCED基因RNAi载体的T-DNA,为深入了解ABA促进番茄果实成熟的机理提供了方法和材料。 展开更多
关键词 番茄 nced基因 ABA 再生 转化 RNAI
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草莓9–顺式–环氧类胡萝卜素双加氧酶基因FaNCED的克隆及表达分析 被引量：20
13
作者 朱海生 李永平 +1 位作者 花秀凤 温庆放 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期40-48,共9页
采用RT-PCR和RACE技术从草莓果实中克隆ABA合成途径中关键基因FaNCED,该cDNA全长2228bp,具有完整的开放阅读框(ORF),共1827个碱基,编码609个氨基酸。序列分析表明,FaNCED编码的氨基酸序列与其他植物的NCED蛋白有很高的同源性。系统进化... 采用RT-PCR和RACE技术从草莓果实中克隆ABA合成途径中关键基因FaNCED,该cDNA全长2228bp,具有完整的开放阅读框(ORF),共1827个碱基,编码609个氨基酸。序列分析表明,FaNCED编码的氨基酸序列与其他植物的NCED蛋白有很高的同源性。系统进化树分析显示,草莓NCED与同为蔷薇科的湖北海棠聚为一类,与橙、柠檬、温州蜜柚、葡萄等非跃变型果实NCED蛋白亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析发现,FaNCED基因在草莓根、茎、叶、花萼和果实中都有表达;在果实成熟过程中FaNCED的表达出现两次高峰,分别在大白果期和红果期,且在红果期表达量最高,并与ABA积累相吻合;FaNCED在果实采后1d表达略有下降,之后急剧上升,ABA含量变化与FaNCED基因的表达基本一致。FaNCED可能参与调控ABA的合成并在草莓成熟中起一定作用。 展开更多
关键词 草莓 9–顺式–环氧类胡萝卜素双加氧酶 nced 脱落酸 ABA 基因 表达
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马铃薯StNCED1基因过表达载体的构建及其遗传转化 被引量：4
14
作者 马瑞 张宁 +4 位作者 杨江伟 朱熙 姚磊 武亮亮 司怀军 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期174-179,共6页
马铃薯块茎的休眠和发芽对于块茎生产和加工极为重要,延长块茎休眠期有助于降低块茎水分和养分的消耗,从而提高其应用价值。本研究用PCR方法从马铃薯中克隆了9-顺式-环氧类胡萝卜素双氧合酶(NCED)编码基因St NCED1,并构建了马铃薯块茎... 马铃薯块茎的休眠和发芽对于块茎生产和加工极为重要,延长块茎休眠期有助于降低块茎水分和养分的消耗,从而提高其应用价值。本研究用PCR方法从马铃薯中克隆了9-顺式-环氧类胡萝卜素双氧合酶(NCED)编码基因St NCED1,并构建了马铃薯块茎特异表达启动子CIPP驱动的St NCED1基因的植物过表达载体p BIC-St NCED1,然后通过根癌农杆菌介导法转化马铃薯栽培品种"陇薯3号"获得转化植株,经卡那霉素抗性筛选得到5株抗性苗,PCR检测证明St NCED1基因已整合到马铃薯的基因组中。qRT-PCR检测表明St NCED1基因在转基因植株试管薯中的表达量分别比未转基因的对照增加2.10~8.09倍。该研究有助于培育块茎休眠期延长的马铃薯新种质。 展开更多
关键词 nced基因 植物表达载体 马铃薯 块茎 休眠期
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亚洲棉NCED3基因克隆及其抗旱功能分析 被引量：4
15
作者 蔡肖 王海涛 +5 位作者 李兴河 甄军波 刘琳琳 刘迪 迟吉娜 张建宏 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1713-1722,共10页
9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶(NCED)是脱落酸(ABA)合成过程中的关键限速酶,被证实广泛参与植物的生长发育进程及对非生物胁迫的应答。为了挖掘、鉴定棉花抗旱相关的NCEDs基因,本研究克隆了亚洲棉(Gossypium arboreum)GaNCED3基因,利... 9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶(NCED)是脱落酸(ABA)合成过程中的关键限速酶,被证实广泛参与植物的生长发育进程及对非生物胁迫的应答。为了挖掘、鉴定棉花抗旱相关的NCEDs基因,本研究克隆了亚洲棉(Gossypium arboreum)GaNCED3基因,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析了干旱胁迫下该基因的表达特性;并遗传转化拟南芥(Arabidopsis thaliana),研究了该基因在干旱应答中的功能。结果显示,GaNCED3基因开放阅读框(ORF)全长为1794 bp,其编码的蛋白质包含597个氨基酸。该基因在干旱胁迫处理后上调表达,在处理3 h的根中表达量最高,是对照的27.6倍。在萌发期进行甘露醇模拟的干旱处理,超表达GaNCED3的转基因拟南芥种子萌发率和绿苗率均高于野生型。在幼苗期进行自然干旱处理后,转基因拟南芥植株叶片丙二醛含量显著低于对照(P<0.05),游离脯氨酸积累量显著高于对照(P<0.05)。本研究初步证明了外源超表达GaNCED3基因使植株抗旱能力增强,为进一步研究GaNCED3干旱应答的分子机制提供了理论依据,为抗旱育种提供了候选基因资源。 展开更多
关键词 棉花 干旱 nced3 9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶 基因功能
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黄冠梨PbpNCED3基因的克隆与表达 被引量：3
16
作者 王华 潘祺 +4 位作者 鞠萌 汪紫萸 汪王微 王瑞生 朱立武 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期82-88,共7页
【目的】克隆黄冠梨Pyrus bretschneideri ‘Xuehuali’×P. pyrifolia ‘Shinsseiki’叶片中的9-顺式-环氧类胡萝卜素裂解双加氧酶(NCED)基因的全长cDNA序列,研究不同程度干旱条件下该基因的表达及与叶片内源脱落酸(ABA)的动态变... 【目的】克隆黄冠梨Pyrus bretschneideri ‘Xuehuali’×P. pyrifolia ‘Shinsseiki’叶片中的9-顺式-环氧类胡萝卜素裂解双加氧酶(NCED)基因的全长cDNA序列,研究不同程度干旱条件下该基因的表达及与叶片内源脱落酸(ABA)的动态变化关系,为明晰该基因在梨树抗旱中的分子机理提供理论依据。【方法】根据转录组数据得到的PbpNCED3序列进行同源序列扩增,通过生物信息学分析确定其属于NCED家族基因。通过酶联免疫吸附法测定不同水分条件下梨叶片内源ABA的含量,通过实时荧光定量测定Pbp NCED3基因的表达量。【结果】Pbp NCED3cDNA序列全长为1 831bp,编码603个氨基酸(GeneBank登录号为:MH749461)。该蛋白具有NCED发挥功能所依赖的4个保守的组氨酸,有NCED家族特有保守结构域序列MIAHPKxDP和HDFAITE及RPE65结构域,N-端含有靶向叶绿体的转运肽。蛋白结构预测发现,该蛋白与玉米vp14(NCED家族蛋白)比对序列相似性为70%,且具有两亲性的α螺旋结构。PbpNCED3基因的表达量与梨叶片ABA的含量成正相关关系(相关系数为0.914),且二者都受到干旱的诱导。【结论】试验所得到的黄冠梨PbpNCED3属于NCED家族基因,该基因响应干旱胁迫,其表达量与内源ABA的含量动态变化趋势一致。 展开更多
关键词 黄冠梨 nced基因 基因克隆 脱落酸 基因表达 干旱
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利用TAIL-PCR方法克隆拟南芥干旱主效基因NCED3 被引量：3
17
作者 刘浩 苏凡 王棚涛 《河南大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2009年第6期621-625,共5页
利用远红外成像技术筛选得到一株T-DNA插入的干旱敏感突变体,并成功利用TAIL-PCR技术克隆到该突变基因为NCED3,该基因编码植物体内ABA合成的关键限速酶,突变体在干旱胁迫下不能合成ABA而表现出不耐干旱的特性.最后通过PCR及RT-PCR方法... 利用远红外成像技术筛选得到一株T-DNA插入的干旱敏感突变体,并成功利用TAIL-PCR技术克隆到该突变基因为NCED3,该基因编码植物体内ABA合成的关键限速酶,突变体在干旱胁迫下不能合成ABA而表现出不耐干旱的特性.最后通过PCR及RT-PCR方法验证了TAIL-PCR结果的可靠性. 展开更多
关键词 拟南芥 干旱突变体 TAIL-PCR技术 nced3基因
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草莓NCED基因正反义表达载体和RNAi载体的构建 被引量：1
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作者 朱海生 陈敏氡 +1 位作者 李严曼 温庆放 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期459-466,共8页
根据草莓(Fragaria ananassa Duch)NCED基因序列(GenBank:HQ399498),克隆NCED基因开放阅读框,将该片段插入植物表达载体pBI 121的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,构建了正义表达载体pBI 121NCED。克隆NCED基因正义、反义片段和作为内含... 根据草莓(Fragaria ananassa Duch)NCED基因序列(GenBank:HQ399498),克隆NCED基因开放阅读框,将该片段插入植物表达载体pBI 121的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,构建了正义表达载体pBI 121NCED。克隆NCED基因正义、反义片段和作为内含子的gusA基因片段,以植物表达载体pBI 121为基础,以pCAMBIA2301作为中间载体,通过多次酶切和连接,成功构建了草莓NCED基因RNAi表达载体pBI121NCEDRNAi和反义表达载体pBI 121NCEDF。经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定后,成功将pBI121NCED、pBI 121NCEDF和pBI 121NCEDRNA 3个重组表达质粒导入农杆菌EHA105中。研究结果为进一步研究草莓NCED基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 草莓 nced 表达载体 RNA干扰
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甘蔗ABA生物合成关键酶SoNCED基因克隆及表达分析 被引量：1
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作者 谭秦亮 潘成列 +3 位作者 杨丽涛 李杨瑞 欧克纬 朱鹏锦 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期1-8,共8页
【目的】克隆甘蔗体内9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase,NCED)基因,分析其基本生物学信息及在逆境胁迫下的表达分析,为进一步探讨So NCED基因在甘蔗脱落酸(ABA)生物合成途径中的作用提供理论依据。【方... 【目的】克隆甘蔗体内9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase,NCED)基因,分析其基本生物学信息及在逆境胁迫下的表达分析,为进一步探讨So NCED基因在甘蔗脱落酸(ABA)生物合成途径中的作用提供理论依据。【方法】以甘蔗品种桂糖21号为材料,待蔗苗长至5~6片叶时分别进行干旱、低温、高盐和氧化胁迫处理,利用反转录PCR(RT-PCR)和c DNA未端快速扩增(RACE-PCR)克隆So NCED基因,应用生物信息学方法对获得的氨基酸序列进行分析,构建原核表达载体并进行目的蛋白的诱导表达,通过实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析So NCED基因在受到不同逆境胁迫时的表达情况。【结果】克隆获得的So NCED基因(Gen Bank登录号JQ314108),c DNA全长为2521 bp,包含1个1827 bp的开放阅读框(ORF),编码608个氨基酸。多重序列比对及系统发育进化树分析结果表明,So NCED基因编码的氨基酸序列与其他植物有一定的相似性,尤其与禾本科C4植物高粱和玉米的同源性最高,均达96%。成功构建So NCED基因的原核表达载体p ET-So NCED,且通过IPTG诱导时可得到约66.0 k D的蛋白,确定该蛋白为So NCED基因的表达蛋白。q RT-PCR结果分析表明,So NCED基因在干旱、低温、高盐和氧化胁迫下均能诱导表达,其中氧化胁迫下其表达量在6 h时达峰值,其他胁迫方式下其表达量在12 h时达峰值。【结论】成功克隆获得甘蔗So NCED基因,并从不同逆境下的表达情况推测该基因在甘蔗体内参与了干旱、低温、高盐和氧化等非生物胁迫的调控过程。 展开更多
关键词 甘蔗 基因克隆 SO nced 表达分析 原核表达
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番茄LeNCED1基因5′-侧翼序列克隆及LeNCED1p:GUS融合基因构建 被引量：1
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作者 万小荣 李玲 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期232-236,共5页
从番茄基因组中克隆LeNCED1基因5′-侧翼1456 bp调控序列,经生物信息学分析表明,LeNCED1基因上游调控序列中存在响应昼夜节律的顺式作用元件Circadian、光响应元件Box I、逆境胁迫响应元件(TC-rich repeats)、ABA响应元件ABRE等,构建了L... 从番茄基因组中克隆LeNCED1基因5′-侧翼1456 bp调控序列,经生物信息学分析表明,LeNCED1基因上游调控序列中存在响应昼夜节律的顺式作用元件Circadian、光响应元件Box I、逆境胁迫响应元件(TC-rich repeats)、ABA响应元件ABRE等,构建了LeNCED1基因上游调控序列与报告基因GUS融合的植物双元表达载体pLeNCED1p:GUS。 展开更多
关键词 番茄 nced基因 5′-侧翼序列克隆 融合基因构建
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