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广西地区凡纳滨对虾白斑综合征病毒同源重复区基因的比较分析 被引量:1
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作者 童桂香 谭红连 +6 位作者 杨明伟 陈福艳 吴铁军 黄婷 李莉萍 雷爱莹 韦信贤 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期115-124,共10页
为了解广西地区对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus, WSSV)分子变异特征,选取2010-2019年采自广西沿海地区的120份WSSV阳性凡纳滨对虾(Litopenarus vannamei)样品,进行同源重复区ORF75、ORF94和ORF125基因的扩增和测序,并比... 为了解广西地区对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus, WSSV)分子变异特征,选取2010-2019年采自广西沿海地区的120份WSSV阳性凡纳滨对虾(Litopenarus vannamei)样品,进行同源重复区ORF75、ORF94和ORF125基因的扩增和测序,并比较分析其重复单元变化差异(Variable number of tandem repeats, VNTR)及单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms, SNPs)。结果显示,ORF75的重复单元(Repeat units, RUs)是45bp(RUs-45 bp)和102 bp(RUs-102 bp),RUs数目存在3、4、6、7、8、9类型,最多的是6 RUs型;ORF94的RUs是54bp(RUs-54 bp),RUs数目有0、1、2、3、4、6、8、9、11、12类型,最多的是2 RUs型;ORF125的RUs前两个是72 bp(RUs-72 bp),第3个之后的RUs为69 bp(RUs-69 bp),RUs有3、5、6、8、9类型,最多的是6 RUs型。SNPs分析结果表明,ORF75的RUs-45 bp的第3、15、30、42、44位存在多态性,RUs-102 bp的第83位存在多态性;ORF94的RUs-54 bp的第48位具有多态性,为G、T或C;ORF125的RUs-72 bp不存在多态性,RUs-69 bp(从第1个到倒数第2个)的第2、12、19、22、37、40、48、53、60、63位具有多态性,第2位为T/C,12和22位为G/T,19位为G/A,37、40、48、53和63位为A/G,60位为C/T,出现较多的位点是第12、22、37、60、63位,其中第60、63位多态性最为普遍。结果表明,WSSV广西株同源重复区存在较大变异,序列的RUs数目和SNP存在多样性。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 白斑综合征病毒 同源重复区基因 序列分析
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2018-2019年福建省人感染布鲁氏菌分离株种型鉴定及分子特征分析 被引量:11
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作者 韩腾伟 林代华 +4 位作者 陈志平 刘菁 刘维俊 肖方震 邓艳琴 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第9期1001-1007,共7页
目的探讨福建省人感染布鲁氏菌分离株主要流行株的种型和分子特征,为制定预防控制策略提供依据。方法将布鲁氏菌分离株转种培养并提取基因组DNA,采用传统生物学鉴定和BCSP31-PCR、AMOS-PCR、MLST及MLVA-16等方法进行布鲁氏菌分离株分子... 目的探讨福建省人感染布鲁氏菌分离株主要流行株的种型和分子特征,为制定预防控制策略提供依据。方法将布鲁氏菌分离株转种培养并提取基因组DNA,采用传统生物学鉴定和BCSP31-PCR、AMOS-PCR、MLST及MLVA-16等方法进行布鲁氏菌分离株分子鉴定和分型,通过Bionumerics 6.6软件对其进行聚类分析。结果2018-2019年福建省人感染布鲁氏菌22株分离株分子检测结果与传统分型基本相符,为2个种(羊种和猪种)和2个生物型(羊3型和猪3型),其中羊种布鲁氏菌占多数(95.45%);20株布鲁氏菌分离株MLST基因型为ST8,1株为ST17型,1株为新的ST型:ST99的gap基因与已报道的等位基因型不同,被定义为一个新的等位基因型gap(32)。MLVA-16分型为羊种和猪种2个种群,21株羊种布鲁氏菌分为17种基因型,1株猪种布鲁氏菌分为1种基因型,其中15种基因型为单分离株,3种基因型为共享基因型(共7株,占31.82%)。聚类分析显示福建分离株与内蒙古、辽宁、山东和广东地区存在4种共享基因型,均为羊种布鲁氏菌,其他部分菌株与外省菌株遗传距离较近。结论福建省布鲁氏菌主要流行株为ST8型,且MLVA-16分型显示呈高度基因多样性。MLST/MLVA作为传统生物学鉴定补充技术方法,可用于布鲁氏菌遗传多样性分析和分子流行病学溯源调查,以提高布鲁氏菌病监测能力。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 多位点序列分型(MLST) 多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA-16) 福建省
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贵州省一起人间布鲁氏菌病疫情高危人群调查及分离菌遗传特征分析 被引量:3
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作者 王月 陈红 +8 位作者 李沛丽 刘英 马青 周敬祝 余春 黄艳 唐光鹏 王定明 李世军 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2016年第4期345-349,共5页
目的对贵州省威宁县一起人间布鲁氏菌病(布病)疫情中的高危人群进行血清学调查、菌株分离鉴定及遗传特征分析,为布病疫情的防控提供科学依据。方法采用试管凝集试验对疫情中的高危人群进行抗体检测,采用虎红平板试验检测该起疫情中羊群... 目的对贵州省威宁县一起人间布鲁氏菌病(布病)疫情中的高危人群进行血清学调查、菌株分离鉴定及遗传特征分析,为布病疫情的防控提供科学依据。方法采用试管凝集试验对疫情中的高危人群进行抗体检测,采用虎红平板试验检测该起疫情中羊群血液布鲁氏菌抗体情况,分离抗体阳性患者病原菌进行培养,应用传统方法和布鲁氏菌属特异性PCR(BCSP31-PCR)、种/型特异性PCR(AMOS-PCR)对分离菌株进行鉴定,利用多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA-16)和多位点序列分型(MLST)对菌株进行分子流行病学特征分析。结果 43名高危人群中布鲁氏菌抗体阳性6名,抽取该疫情羊群血液302份经虎红平板试验检测结果显示,阳性64份,阳性率为21.19%。1名抗体阳性者分离出布鲁氏菌可疑菌,鉴定为羊种生物3型布鲁氏菌,MLVA-16结果显示与布鲁氏菌羊种生物3型聚类最近,MLST分析显示分离菌株为ST8型。结论分离自该起疫情的菌株遗传特征和鉴定结果符合羊种生物3型布鲁氏菌,MLST结果为ST8型。尽管抗体阳性并分离出布鲁氏菌,但是无相关症状,均为布鲁氏菌隐性感染者。疑似因贩运羊只引入疫畜而导致布病疫情,应引起医生、卫生及动物检验检疫等相关部门重视。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 多位点可变数目串联重复序列分析 多位点序列分型
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北京地区宋内志贺菌分子流行病学特征分析 被引量:5
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作者 刘桂荣 曲梅 +6 位作者 张新 吴晓娜 李锡太 贾蕾 严寒秋 梁志超 王全意 《中国热带医学》 CAS 2013年第8期950-952,963,共4页
目的了解北京地区宋内志贺菌毒力基因分布及分子流行病学特征。方法采用实时荧光PCR方法检测毒力基因、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型,多位点序列分型(MLST)及多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)等方法对北京地区2001~2009年50株志贺菌... 目的了解北京地区宋内志贺菌毒力基因分布及分子流行病学特征。方法采用实时荧光PCR方法检测毒力基因、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型,多位点序列分型(MLST)及多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)等方法对北京地区2001~2009年50株志贺菌菌株进行分子流行病学特征分析。结果 50株菌中,ipaH、set1、sen三种毒力基因的携带率分别为98%,18%和78%。选取19株流行病学和遗传背景无关的菌株,进行MLST、MLVA与PFGE分型方法的比较,MLST为1个序列型ST152 complex:adk(11)、fumC(63)、gyrB(7)、icd(1)、mdh(14)、purA(7)、recA(7);MLVA被分成15个型别,D值为0.9708;PFGE分成12个型别,D值为0.9532。MLVA初筛得到的8个可变数目串联重复(VNTR)位点用于扩大菌株分析,发现50株志贺菌被分为21个MLVA的型别,TS002和TS001为主要型别。结论北京地区近年来流行的宋内志贺菌存在毒力基因的丢失,MLVA分子型别复杂,存在多克隆来源,提示需要进行连续系统的分子流行病学监测。 展开更多
关键词 宋内志贺菌 分子分型 多位点序列分型 多位点可变数目串联重复分析
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基于MALDI-TOF-MS和MLVA技术对军团菌的鉴定和分型研究 被引量:3
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作者 李曲文 李盈盈 +3 位作者 郑恩惠 杨劲松 徐海滨 翁顺太 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第10期1139-1142,共4页
目的了解福建省4个地区军团菌的基因特征与分布情况。方法采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对2013-2020年分离自福建省4个城市的32株9个血清型(Lp1、Lp3、Lp4、Lp5、Lp6、Lp7、Lp8、Lp9、L. micdadei)军团菌进行鉴定... 目的了解福建省4个地区军团菌的基因特征与分布情况。方法采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对2013-2020年分离自福建省4个城市的32株9个血清型(Lp1、Lp3、Lp4、Lp5、Lp6、Lp7、Lp8、Lp9、L. micdadei)军团菌进行鉴定,结合多位点串联重复序列分析(MLVA)检测分析其中8个位点(lpsm1,lpsm3,lpsm13,lpsm17,lpsm19,lpsm33,lpsm34,lpsm35)对其中的13株Lp1进行分型。结果 32株军团菌均可通过MALDI-TOF MS检测到属种水平,鉴定分值平均值为2.04±0.16;通过蛋白聚类可以分为A、B、C 3个群;对其中的13株Lp1菌株进行MLVA分型,菌株间相似度为40.9%~87.5%,按照100%的相似水平可分为13个MLVA型,无优势MLVA型。Lp1 2013-25(7号菌)和Lp1 2013-14(9号菌)在MALDI-TOF MS和MLVA两种聚类均显示亲缘关系较近,并与其他菌株均存在差异。结论 MALDI-TOF MS技术可应用于军团菌的快速鉴定,但MALDI-TOF MS与MLVA用于军团菌的分子分型并不完全一致,可联合应用分析军团菌的群体遗传关系。 展开更多
关键词 军团菌 分子分型 多位点数目可变串联重复序列分析 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
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2018年江苏省人感染布鲁氏菌分离株分子特征分析 被引量:2
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作者 谈忠鸣 汪秀斌 +6 位作者 周伟忠 董晨 周璐 洪捷 钱慧敏 胡建利 鲍倡俊 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期555-560,共6页
目的掌握江苏省2018年人感染布鲁氏菌主要流行株的种型和基因型。方法运用普通PCR及AMOS多重PCR确认分离株的生物种型;采用多位点序列分型(Multilocus sequence analysis,MLSA)和多位点串联重复序列分析(Multiple-locus variable number... 目的掌握江苏省2018年人感染布鲁氏菌主要流行株的种型和基因型。方法运用普通PCR及AMOS多重PCR确认分离株的生物种型;采用多位点序列分型(Multilocus sequence analysis,MLSA)和多位点串联重复序列分析(Multiple-locus variable number tandem repeat analysis,MLVA)鉴定基因型,并与国内外流行株进行聚类分析。结果2018年共分离到56株布鲁氏菌,MLSA分型显示一株菌为猪种布鲁氏菌ST(Sequence type)17型,其他均为羊种布鲁氏菌ST8型。MLVA将56株菌分为47个基因亚型(46个羊种,1个猪种),聚类显示羊种布鲁氏菌全部为“东地中海簇”。结论2018年江苏省人感染布病主要为“东地中海簇”的ST8型羊种布鲁氏菌,并首次发现一例人感染ST17型猪种布鲁氏菌。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 羊种布鲁氏菌 猪种布鲁氏菌 AMOS-PCR 多位点序列分析 多位点串联重复序列分析
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沈阳市2012年-2018年食源性致病菌监测金黄色葡萄球菌多位点可变数量串联重复序列分析分型 被引量:4
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作者 连英姿 侯元 +3 位作者 郝富智 赵常智 刘虎生 魏夺 《中国卫生检验杂志》 CAS 2020年第22期2810-2812,共3页
目的建立金黄色葡萄球菌监测的多位点可变数量串联重复序列分析(MLVA)分子分型数据库,提高金黄色葡萄球菌的检测和防控能力。方法筛选针对沈阳本地食源性致病菌具有高度多态性的VNTR位点,STTR1、STTR2、STTR3、STTR5、STTR6、STTR7、ST... 目的建立金黄色葡萄球菌监测的多位点可变数量串联重复序列分析(MLVA)分子分型数据库,提高金黄色葡萄球菌的检测和防控能力。方法筛选针对沈阳本地食源性致病菌具有高度多态性的VNTR位点,STTR1、STTR2、STTR3、STTR5、STTR6、STTR7、STTR8、STTR9共8个VNTR位点进行MLVA分型。结果186份样品检出金黄色葡萄球菌20株,检出率为10.8%。20株金黄色葡萄球菌共分成A和B两大聚类,分别占比65%和35%,A聚类可分为3个亚聚类,B聚类可分为2个亚聚类。表明沈阳地区流行的金黄色葡萄球菌是多克隆的,大部分菌株属于一个亲缘关系很近的克隆系。结论沈阳地区金黄色葡萄球菌MLVA分型呈较好的多态性。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 多位点可变数量串联重复序列分析 分型
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碳青霉烯类耐药鲍氏不动杆菌3种分子分型方法的对比研究 被引量:1
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作者 姚彬 徐英春 +5 位作者 王瑶 张琪 习慧明 柳爱青 张委 汪涓 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第18期2725-2730,共6页
目的通过对碳青霉烯类耐药鲍氏不动杆菌进行3种分子流行病学调查方法的对比研究,了解脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分析(MLST)和多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)3种方法在对碳青霉烯类耐药鲍氏不动杆菌复合体的流行病学调查... 目的通过对碳青霉烯类耐药鲍氏不动杆菌进行3种分子流行病学调查方法的对比研究,了解脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分析(MLST)和多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)3种方法在对碳青霉烯类耐药鲍氏不动杆菌复合体的流行病学调查中的优缺点和分辨率。方法收集某三级医院2011-2012年分离自痰标本的碳青霉烯类耐药鲍氏不动杆菌复合体212株,采用PFGE、MLST和MLVA方法对其进行分子流行病学分析,运用Simpson相关系数(Simpson's index of diversity)和Wallace coefficient,对3种方法的分辨率和同质性进行比较。结果 212株碳青霉烯类耐药鲍氏不动杆菌复合体,其中149株获得PFGE可分析结果,200株获得MLST可分析结果,205株获得MLVA可分析性结果;PFGE结果显示,B型菌株为优势菌株(102株,占68.46%)。MLST分型结果显示,ST195占优势(60株,占30%),其次为ST208(43株,占21.5%)和ST643(33株,占16.5%)。MLVA分型结果显示,D型菌株占优势(151株,占73.66%),其次为N型菌株(8株,占3.9%),K、M、T、W型菌株并列第三(均为4株,各占1.95%)。优势菌株主要分布在ICU。PFGE、MLST、MLVA的Simpson相关系数(D值)分别为0.46、0.76、0.94。MLVA与MLST的Wallace coefficient值略高为0.76。结论 PFGE是区域内分析克隆时间和空间分布的重要工具,本研究中院内流行的碳青霉烯类耐药鲍氏不动杆菌主要来自于ICU;MLST可全球范围内开展抗菌药物抵抗菌株,以及新变异菌株的流行病学研究;MLVA数据可用于不同实验室之间的相互交换、整合与分析。MLVA的分辨率较高,MLVA与MLST的同质性较高。 展开更多
关键词 鲍氏不动杆菌 脉冲场凝胶电泳 多位点序列分析 多位点可变数目串联重复序列分析
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基于基因组序列的副溶血弧菌两种分型方法比较研究
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作者 张景山 赵文轩 +10 位作者 陈美玲 杜小莉 赵林 王紫鉴 肖文静 张巍巍 赵宏群 李杰 刁保卫 阚飙 逄波 《疾病监测》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期457-461,共5页
目的比较基于全基因组测序(WGS)SNP的分型方案和多位点串联重复序列分析(MLVA)分型方案用于我国副溶血弧菌分子分型的能力,并分析两种方法的优缺点及适用情况。方法选取我国分离的56株副溶血弧菌,使用6个数目可变串联重复序列(VNTR)位点... 目的比较基于全基因组测序(WGS)SNP的分型方案和多位点串联重复序列分析(MLVA)分型方案用于我国副溶血弧菌分子分型的能力,并分析两种方法的优缺点及适用情况。方法选取我国分离的56株副溶血弧菌,使用6个数目可变串联重复序列(VNTR)位点的MLVA方案和基于全基因组序列SNP的方案对这些菌株进行分子分型分析,通过量化指标评价这两种方法对我国分离的副溶血弧菌的分型能力。结果56株副溶血弧菌经MLVA分型,获得31种MLVA型,D值为0.949。对56株副溶血弧菌进行全基因组测序,获得33个差异明显的基因型,D值为0.967。两种分型方法对菌株的分辨能力十分接近,分型结果高度一致。结论6位点的MLVA分型方案与基于全基因组测序SNP的分型方案具有相似的分型能力,其分型能力稍弱。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 多位点串联重复序列分析 数目可变串联重复序列 单核苷酸多态性 全基因组测序 分型方法
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2007-2020年上海市布鲁氏菌分离株分型方法研究 被引量:10
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作者 高芬 陈洪友 +3 位作者 屠丽红 庄源 张曦 陈敏 《疾病监测》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期696-701,共6页
目的对2007—2020年上海市人间布鲁氏菌分离株进行分子特征分析,了解菌株基因分型和聚类,为布鲁氏菌病(布病)的预防和控制提供依据。方法收集2007—2020年上海市人感染布鲁氏菌临床分离株20株;采用生化方法和AMOS-PCR进行鉴定;运用多位... 目的对2007—2020年上海市人间布鲁氏菌分离株进行分子特征分析,了解菌株基因分型和聚类,为布鲁氏菌病(布病)的预防和控制提供依据。方法收集2007—2020年上海市人感染布鲁氏菌临床分离株20株;采用生化方法和AMOS-PCR进行鉴定;运用多位点序列分型(MLST)、多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)和基于全基因组测序的单核苷酸多态性(SNP)分析3种方法进行分子分型;并与参考株进行聚类分析。结果20株布鲁氏菌均为ST8型羊种布鲁氏菌;被MLVA-8分为4个基因型,MLVA-16分为17个基因型,panel 2B具有多态性;SNP分析表明,20株临床分离株亲缘关系较近,与羊种布鲁氏菌聚类。结论2007—2020年上海市人感染布病分离株主要为ST8型羊种布鲁氏菌,分子分型方法可为上海市布鲁氏菌的溯源研究提供依据。 展开更多
关键词 布鲁氏菌属 多位点序列分析 多位点可变数目串联重复序列分析 全基因组测序 基因型
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2008-2018年四川省肠炎沙门菌暴发的分子分型比较 被引量:8
11
作者 肖桃 雷高鹏 +4 位作者 黄伟峰 吕虹 刘丽 杨小蓉 何树森 《疾病监测》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1172-1178,共7页
目的比较四川省肠炎沙门菌暴发菌株的分子分型方法,为暴发溯源提供快速可靠的依据。方法采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点可变数目重复序列分析(MLVA)、规律间隔成簇短回文重复序列(CRISPR)、多位点序列分型(MLST)和基于全基因组测序... 目的比较四川省肠炎沙门菌暴发菌株的分子分型方法,为暴发溯源提供快速可靠的依据。方法采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点可变数目重复序列分析(MLVA)、规律间隔成簇短回文重复序列(CRISPR)、多位点序列分型(MLST)和基于全基因组测序的单核苷酸多态性(WGS-SNP)对2008—2018年四川省肠炎沙门菌暴发分离株进行分型。以辛普森多样性指数(DI)为指征,比较单一方法及方法联用的分型能力差异。结果PFGE、MLVA、CRISPR和MLST单独使用时,其DI值均<0.9,PFGE_XbaⅠ和MLVA联合使用DI值能提高到0.9以上,WGS-SNP的DI值最高,可达0.971。结论对四川省肠炎沙门菌暴发菌株进行分子分型的最适方法为WGS-SNP,在缺乏基因组分析能力的情况下,推荐使用PFGE_XbaⅠ与MLVA联合的方法。 展开更多
关键词 肠炎沙门菌 脉冲场凝胶电泳 多位点可变数目重复序列分析 全基因组测序 分子分型
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西安市与上海市婴儿感染百日咳鲍特菌基因型比较 被引量:2
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作者 张娟胜 林晨 +3 位作者 常玲 王小强 魏晓光 李浩 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期47-52,共6页
目的:探讨西安市与上海市临床分离百日咳鲍特菌的基因型特征。方法:收集2018—2019年在西安市和上海市哨点监测医院和社区采集的1岁以下疑似百日咳患儿的鼻咽拭子,经分离培养所得百日咳鲍特菌采用多位点抗原序列分型(MAST)和多位点可变... 目的:探讨西安市与上海市临床分离百日咳鲍特菌的基因型特征。方法:收集2018—2019年在西安市和上海市哨点监测医院和社区采集的1岁以下疑似百日咳患儿的鼻咽拭子,经分离培养所得百日咳鲍特菌采用多位点抗原序列分型(MAST)和多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)方法分析其基因型。结果:共采集到疑似百日咳患儿鼻咽拭子1200份,经分离培养得到百日咳鲍特菌60株,其中西安市34株,上海市26株。西安市百日咳鲍特菌的主要MAST型别为prn1/ptxP1/ptxA1/fim3-1/fim2-1(32/34,94.12%),而上海市百日咳鲍特菌的主要MAST型别为prn1/ptxP1/ptxA1/fim3-1/fim2-1(13/26,50.00%)和prn2/ptxP3/ptxA1/fim3-1/fim2-1(11/26,42.31%),两市百日咳鲍特菌MAST型别分布差异有统计学意义(χ2=18.642,P<0.01)。西安市百日咳鲍特菌以MT195(13/34,38.24%)、MT55(10/34,29.41%)、MT104(9/34,26.47%)型别居多,而上海市百日咳鲍特菌以MT27型为主(12/26,46.15%),两市百日咳鲍特菌MLVA型别分布差异有统计学意义(χ2=15.866,P<0.01)。结论:西安市与上海市临床分离婴儿感染百日咳鲍特菌基因型存在差异,应进一步加强中国百日咳鲍特菌基因型演变的监测。 展开更多
关键词 百日咳 百日咳鲍特菌 基因型 多位点抗原序列分型 多位点可变数目串联重复序列分析
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可变数目串联重复序列分析与多位点序列分析在伯氏疏螺旋体分型研究中的应用 被引量:1
13
作者 周鑫 侯学霞 +3 位作者 耿震 张琳 郝琴 赵素莲 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2013年第2期98-102,共5页
目的评价多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)和多位点序列分析(MLSA)两种方法在伯氏疏螺旋体分型研究中的应用。方法采用MLVA和MLSA两种方法对31株伯氏疏螺旋体分型结果进行比较分析。结果 31株伯氏疏螺旋体用MLVA方法分成4簇,24个... 目的评价多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)和多位点序列分析(MLSA)两种方法在伯氏疏螺旋体分型研究中的应用。方法采用MLVA和MLSA两种方法对31株伯氏疏螺旋体分型结果进行比较分析。结果 31株伯氏疏螺旋体用MLVA方法分成4簇,24个基因型,其中21个独立基因型,成簇率达24/31,MLVA的分辨率达到0.969;MLSA可将31株伯氏疏螺旋体分成4簇,每株都可独立分析,但有3个节点步长值(Bootstrap value)<50%。结论 MLVA和MLSA两种方法均适合于伯氏疏螺旋体的分型研究,对于部分分型有异议的菌株,将MLVA与MLSA联合可有效进行伯氏疏螺旋体的分型鉴定。 展开更多
关键词 多位点序列分析 多位点可变数目串联重复序列分析 伯氏疏螺旋体 基因分型
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2017-2022年南京市人感染羊种布鲁氏菌基因特征研究 被引量:1
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作者 王炜翔 周璐 +5 位作者 苏晶晶 张楠 洪捷 周伟忠 鲍倡俊 谈忠鸣 《中华地方病学杂志》 北大核心 2024年第10期775-782,共8页
目的了解南京市分离鉴定的人源布鲁氏菌种型、生物型及基因型分布概况。方法收集2017-2022年南京市3家哨点医院微生物实验室分离鉴定的89株人源布鲁氏菌,通过生物学方法及布鲁氏菌核酸检测(BCSP31-PCR和AMOS-PCR)进行种型鉴定;结合A、M... 目的了解南京市分离鉴定的人源布鲁氏菌种型、生物型及基因型分布概况。方法收集2017-2022年南京市3家哨点医院微生物实验室分离鉴定的89株人源布鲁氏菌,通过生物学方法及布鲁氏菌核酸检测(BCSP31-PCR和AMOS-PCR)进行种型鉴定;结合A、M因子血清学检测结果,对鉴定为羊种布鲁氏菌的分离株进一步进行生物分型。同时,运用多位点可变数目串联重复序列分析(multiple-locus variable number tandem repeat analysis,MLVA)、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)及单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)方法进行基因型分析。结果2017-2022年,南京市分离鉴定的89株布鲁氏菌均为羊种布鲁氏菌。其中,羊种布鲁氏菌生物3型占82.02%(73/89),生物1型占17.98%(16/89)。MLVA分型发现,89株羊种布鲁氏菌均属于"东地中海"簇,可分为50个MLVA基因型。其中panel 1有3个基因型,分别为42型(84.27%,75/89)、63型(8.99%,8/89)、43型(6.74%,6/89)。MLST-9和MLST-21结果均为ST8型,核心基因组多位点序列分型(core genome multilocus sequence typing,cgMLST)将89株菌株分为11个基因型。SNP分析共发现4013个SNPs位点,各菌株间SNPs范围为0~409个,涉及59个SNPs基因型。结论南京市分离鉴定的人源布鲁氏菌菌株全部为羊种布鲁氏菌,以生物3型为主。MLVA聚类为"东地中海"簇。传统MLST-9和MLST-21结果全部为ST8型,而cgMLST将所有菌株分为11个基因型,具有更高的分辨力。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 多位点可变数目串联重复序列分析 多位点序列分型 单核苷酸多态性
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杭州地区伤寒及甲型副伤寒沙门菌流行菌株分子特征的研究 被引量:10
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作者 汪皓秋 潘劲草 +5 位作者 葛玉梅 俞骅 郑伟 张蔚 孟冬梅 严杰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期711-715,共5页
目的了解并确定2002-2008年杭州地区伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌优势菌株的分子特征。方法采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点串联重复序列分析(MLVA)或多位点序列分型(MLST)对2002-2008年杭州地区分离的31株伤寒沙门菌、404株... 目的了解并确定2002-2008年杭州地区伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌优势菌株的分子特征。方法采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点串联重复序列分析(MLVA)或多位点序列分型(MLST)对2002-2008年杭州地区分离的31株伤寒沙门菌、404株甲型副伤寒沙门菌进行分型并分析。结果404株甲型副伤寒沙门菌可分为6个PFGE型,P1型和P2型属于同一个克隆系,99.0%(400/404)菌株属于该克隆系,其中P1型菌株占该克隆系菌株的93.3%(373/400)。31株伤寒沙门菌株存在高度多样性,可分为14个PFGE型、28个MLVA型(分辨率90.3%)、3个MLST型。根据MLVA各型靶位点多态性差异,本地区流行的伤寒沙门菌株与东南亚地区菌株相近,但与欧洲菌株差距较大,呈高度多态性的可变串联重复序列(VNTR)位点TR1、TR2、Sal02可作为本地区伤寒沙门菌株的检测标志。伤寒沙门菌株MLST型别包括了目前国际上发现的所有3个型别,但以ST2型为主(23/31,74.2%)。结论近年杭州地区甲型副伤寒疫情由同一亚系菌株感染所致,但本地区流行的伤寒沙门菌株呈现高度多样性。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 甲型副伤寒沙门菌 脉冲场凝胶电泳 多位点串联重复序列分析 多位点序列分型
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南京市羊种布鲁菌分子特征分析 被引量:3
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作者 张颖 张之峰 +4 位作者 洪捷 周伟忠 鲍倡俊 周明浩 谈忠鸣 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期278-281,共4页
目的分析从南京市分离的布鲁菌菌株分子特征,了解菌株基因分型和聚类,为布鲁菌病的防治提供依据。方法对南京大学医学院附属鼓楼医院2011-2016年分离的7株羊种布鲁菌(来自7例散发病例),运用多位点序列分型(MLST)和多位点可变数目串联重... 目的分析从南京市分离的布鲁菌菌株分子特征,了解菌株基因分型和聚类,为布鲁菌病的防治提供依据。方法对南京大学医学院附属鼓楼医院2011-2016年分离的7株羊种布鲁菌(来自7例散发病例),运用多位点序列分型(MLST)和多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)两种方法进行分子分型,并与江苏省的参考株数据进行聚类分析。结果分离到的7株羊种布鲁菌均为序列型(ST)8型菌株,并被MLVA分为7个基因型,且聚类在"中地中海簇"中。1株菌(NJ-2011-1株)与江苏省其他地区分离的2株菌基因位点完全相同。结论ST8型羊种布鲁菌为南京地区的优势菌,MLVA聚类在"中地中海簇"内。病例均为散发,传播途径及危险因素较为复杂,应加强各部门合作,从源头上作好布鲁菌病的防治工作。 展开更多
关键词 布鲁杆菌属 多位点序列分型 多位点可变数目串联重复序列分析
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百日咳鲍特菌的基因多样性及分子流行病学分析 被引量:6
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作者 张娟胜 王小强 +5 位作者 张弟强 李浩 魏晓光 王增国 刘莹 赵悦宛 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期687-691,共5页
目的探讨百日咳鲍特菌临床流行株的基因多样性分子流行病学特征,并分析该地区百日咳复现的可能原因。方法采用多位点抗原序列分型(MAST)和多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)对2012—2017年的临床分离株进行基因多样性和分子流行病... 目的探讨百日咳鲍特菌临床流行株的基因多样性分子流行病学特征,并分析该地区百日咳复现的可能原因。方法采用多位点抗原序列分型(MAST)和多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)对2012—2017年的临床分离株进行基因多样性和分子流行病学特征分析,并与疫苗株进行比较。结果流行株与疫苗株的分子型别特征不同。95%的流行株抗原基因型为prn1/ptxP1/ptxA1/fim3-1/fim2-1;8种MLVA型别中MT195(34%)、MT55(30%)和MT104(26%)占主导地位,其中MT195分离率连年增长。结论陕西省当前流行百日咳菌株基因特征与疫苗株不同,流行株通过基因变异发生进化可能是近年来该地区百日咳复现的原因之一。 展开更多
关键词 百日咳鲍特菌 基因多样性 分子流行病学 多位点抗原序列分型(MAST) 多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)
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河北省保定市一起人间布鲁菌病聚集性疫情分离菌株遗传学特征分析
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作者 杜文标 姜霞 +3 位作者 王春艳 赵博兰 钱振宇 刘晓丽 《中华地方病学杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期263-267,共5页
目的:分析河北省保定市1起人间布鲁菌病(简称布病)聚集性疫情的流行病学和分离菌株遗传学特征,为布病疫情防控提供科学依据。方法:采用虎红平板凝集试验和试管凝集试验对2018年保定市1起人间布病疫情中的高危人群(n=22)进行布鲁菌抗体检... 目的:分析河北省保定市1起人间布鲁菌病(简称布病)聚集性疫情的流行病学和分离菌株遗传学特征,为布病疫情防控提供科学依据。方法:采用虎红平板凝集试验和试管凝集试验对2018年保定市1起人间布病疫情中的高危人群(n=22)进行布鲁菌抗体检测;对布病患者(n=3)血液进行培养,对分离出的菌株进行传统法鉴定,运用多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)和多位点序列分析(MLST)方法分析菌株的遗传学特征。结果:高危人群血清布鲁菌抗体阳性率为4.55%(1/22)。3名患者血培养均检出布鲁菌可疑菌株(菌株编号:BDY-1、BDY-2、BDY-3),并鉴定为羊种生物3型布鲁菌。MLVA结果显示,BDY-1与BDY-2菌株是同一基因型,BDY-3菌株在Bruce04和Bruce16位点分别增加了2个串联重复序列,在Bruce30位点少了3个串联重复序列,3株菌株panel 1(MLVA-8)基因型为42,panel 1+panel 2A(MLVA-11)基因型为116,均属于"东地中海组",且与羊种生物3型布鲁菌聚类最近。MLST分析显示,3株菌株均为ST8型。结论:该起疫情的病原菌是羊种生物3型布鲁菌。今后保定市布病防控工作应加强高危人群的健康教育和行为干预。 展开更多
关键词 布鲁杆菌病 遗传特征 多位点可变数目串联重复序列分析 多位点序列分析
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