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RT-PCR法检测肾癌组织中MN/CAⅨ基因表达 被引量:4
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作者 姜耀东 郑少斌 王战会 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第8期925-927,共3页
目的评价RT-PCR法检测MN/CAⅨ基因在肾癌组织表达的可靠性。方法以5例肾癌和5例正常肾组织为研究对象,提取总RNA,两步法进行RT-PCR反应,用MN/CAⅨ的特异性引物扩增,2%琼脂糖凝胶电泳后观察并测序。结果经过测序证实5例肾癌组织的RT-PCR... 目的评价RT-PCR法检测MN/CAⅨ基因在肾癌组织表达的可靠性。方法以5例肾癌和5例正常肾组织为研究对象,提取总RNA,两步法进行RT-PCR反应,用MN/CAⅨ的特异性引物扩增,2%琼脂糖凝胶电泳后观察并测序。结果经过测序证实5例肾癌组织的RT-PCR产物中有4例可见特异的MN/CAⅨ条带,而正常肾组织的RT-PCR产物均无相应的MN/CAⅨ条带。结论RT-PCR法检测MN/CAⅨ在肾癌组织中的表达是准确、可靠的。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 肾细胞癌 基因表达 mn/caⅨ基因
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利用原核表达系统制备肾癌相关抗原G250/MN/CA Ⅸ 被引量:1
2
作者 姜耀东 郑少斌 +3 位作者 谭万龙 赵善超 任非 张宝 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期307-309,共3页
目的利用原核表达系统制备肾癌相关抗原G250/MN/CA Ⅸ。方法采用PCR法从原有质粒中扩增G250/MN/CAⅨ全长编码序列,将获得的编码序列片段插入pET32a(+)表达载体,转化Rosseta大肠杆菌,IPTG诱导蛋白表达,而后进行纯化及Westernblot鉴定。... 目的利用原核表达系统制备肾癌相关抗原G250/MN/CA Ⅸ。方法采用PCR法从原有质粒中扩增G250/MN/CAⅨ全长编码序列,将获得的编码序列片段插入pET32a(+)表达载体,转化Rosseta大肠杆菌,IPTG诱导蛋白表达,而后进行纯化及Westernblot鉴定。结果正确构建pET32a(+)/G250重组质粒,重组质粒转化Rosseta菌后,经IPTG诱导,在58000相对分子质量处有明确的条带。目的蛋白表达占菌体总蛋白的32.7%。89.9%的重组蛋白是可溶性的。Westernblot结果显示纯化后的蛋白可以与G250单克隆抗体M75特异性结合。结论在原核系统中成功进行G250/MN/CA Ⅸ的高效表达,为下一步的单克隆抗体制备和蛋白功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 肾肿瘤 G250/mn/ca Ⅸ抗原 克隆 原核表达载体
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MN/CA9蛋白在富糖原型肾细胞癌中的表达及其意义 被引量:1
3
作者 唐鸿建 贾绍昌 +3 位作者 顾康 邓安梅 陈孙孝 高勇 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2000年第3期176-177,共2页
目的:研究MN/CA9蛋白在富糖原型肾细胞癌中的表达。方法:对正常肾组织、肾损伤、肾细胞癌及非肾性富糖原癌中MN/CA9蛋白的表达进行分析。结果:仅在肾细胞癌上可见MN/CA9蛋白的表达,而其它切片中未见表达。结论:MN/CA9蛋白表达可以作为... 目的:研究MN/CA9蛋白在富糖原型肾细胞癌中的表达。方法:对正常肾组织、肾损伤、肾细胞癌及非肾性富糖原癌中MN/CA9蛋白的表达进行分析。结果:仅在肾细胞癌上可见MN/CA9蛋白的表达,而其它切片中未见表达。结论:MN/CA9蛋白表达可以作为肾细胞癌,尤其是富糖原型肾细胞癌的一种肿瘤标志物,以辅助其早期诊断。 展开更多
关键词 mn/ca9蛋白 富糖原癌
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肾癌特异性抗原G250/MN/CAⅨ的克隆及真核表达 被引量:1
4
作者 刘颖 于继云 +2 位作者 陈兴 张贺秋 凌世淦 《生物技术通讯》 CAS 2006年第4期496-499,共4页
目的:克隆人肾细胞癌特异性抗原G250基因,使其能够在真核细胞中表达并锚定修饰于细胞膜上。方法:提取人肾透明细胞癌细胞的总RNA,用RT-PCR扩增出G250基因,插入含有人Igκ链前导信号肽、IgG-Fc和GPI锚定信号肽基因序列的真核表达载体pCI-... 目的:克隆人肾细胞癌特异性抗原G250基因,使其能够在真核细胞中表达并锚定修饰于细胞膜上。方法:提取人肾透明细胞癌细胞的总RNA,用RT-PCR扩增出G250基因,插入含有人Igκ链前导信号肽、IgG-Fc和GPI锚定信号肽基因序列的真核表达载体pCI-neo-GPI中;将构建的重组质粒pCI-neo-GPI-G250转染RenCa细胞,利用RT-PCR、Western印迹和免疫荧光检测G250在细胞中的表达。结果:构建的重组质粒pCI-neo-GPI-G250经测序正确;用各种方法对筛选得到的稳定转染细胞进行检测,均可以发现G250的表达,表达部位为细胞膜。结论:克隆出人肾细胞癌特异性抗原G250基因,且G250在RenCa细胞膜上可以正常表达,为进一步研究肾癌肿瘤疫苗的免疫原性提供了必要的前期准备。 展开更多
关键词 肿瘤疫苗 肾细胞癌 G250/mn/ca 糖基磷脂酰肌醇
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RT-PCR法检测肾癌组织中MN/CAⅨ基因表达 被引量:1
5
作者 姜耀东 郑少斌 王战会 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第1期99-101,共3页
目的评价RT-PCR法检测碳酸酐酶Ⅸ(MN/CAⅨ)基因在肾癌组织的表达的可靠性。方法以5例肾癌和5例正常肾组织为研究对象,提取总RNA,两步法进行RT-PCR反应,用MN/CAⅨ的特异性引物扩增,2%琼脂糖凝胶电泳后观察并测序。结果经过测序证实5例肾... 目的评价RT-PCR法检测碳酸酐酶Ⅸ(MN/CAⅨ)基因在肾癌组织的表达的可靠性。方法以5例肾癌和5例正常肾组织为研究对象,提取总RNA,两步法进行RT-PCR反应,用MN/CAⅨ的特异性引物扩增,2%琼脂糖凝胶电泳后观察并测序。结果经过测序证实5例肾癌组织的RT-PCR产物中有4例可见特异的MN/CAⅨ条带,而正常肾组织的RT-PCR产物均无相应的MN/CAⅨ条带。结论RT-PCR法检测MN/CAⅨ在肾癌组织中的表达是准确、可靠的。 展开更多
关键词 RT-PCR法 检测 肾癌 mn/ca 基因表达 聚合酶链反应 碳酸酐酶Ⅸ
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逆转录聚合酶链反应检测小鼠MN/CA9基因的表达
6
作者 王银萍 王贵民 +1 位作者 薛世泉 邹亚斌 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期777-780,F0002,共5页
目的:克隆、分析ICR小鼠MN/CA9基因序列,并检测MN/CA9基因在ICR小鼠各组织中的表达。方法:分别取ICR小鼠小肠、肝、肾、脾、胃、胸腺、心脏、卵巢、肺、胰腺、肌肉、皮肤、子宫和膀胱新鲜组织,采用胍尼啶异硫氢酸呱酚氯仿提取法(GIT)提... 目的:克隆、分析ICR小鼠MN/CA9基因序列,并检测MN/CA9基因在ICR小鼠各组织中的表达。方法:分别取ICR小鼠小肠、肝、肾、脾、胃、胸腺、心脏、卵巢、肺、胰腺、肌肉、皮肤、子宫和膀胱新鲜组织,采用胍尼啶异硫氢酸呱酚氯仿提取法(GIT)提取总RNA。合成cDNA的第1链和第2链,连接EcoRⅠ载体,EcoRⅠ末端磷酸化,XhoⅠ消化,将cDNA构建到ZAPexpressvector进行包装、种植培养,筛选、切取噬菌体,使用引物扩增后进行DNA序列分析。用逆转录聚合酶链反应检测小鼠MN/CA9基因在上述组织中的表达。结果:使用人类MN/CA9基因片段做探针,用放射性同位素32P标记探针,筛选1·47×103大肠埃希菌落,杂交后发现一阳性cDNA信号,序列测定确定其含1671bp核苷酸序列(已在GenBank登录,登录号AB086322),这个序列与人类的MN/CA9(基因序列号Z54349)有69·1%的同源性。在引物P521-P1193区间,MN/CA9基因在小鼠小肠、子宫、肌肉、胰腺、心脏、肺、胸腺、脾、肾、卵巢、胃和膀胱组织表达均较强,在皮肤和肝脏不表达。结论:MN/CA9基因在ICR小鼠组织中的表达与人类基本相同,可以用ICR小鼠进行MN/CA9基因的研究。 展开更多
关键词 mn/ca9基因 逆转录聚合酶链反应 小鼠 近交ICR
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MN/CAⅨ在肾细胞癌诊断中的价值
7
作者 姜耀东 任非 郑少斌 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期412-414,共3页
目的探讨MN/CAⅨ在肾细胞癌组织和血液中的表达情况和诊断价值。方法采用RT-PCR技术检测62例肾细胞癌患者肿瘤组织和外周血液中MN/CA IX mRNA的表达,以32例正常肾组织和非肾癌患者外周血作为对照。采用免疫组化技术检测36例肾透明细胞癌... 目的探讨MN/CAⅨ在肾细胞癌组织和血液中的表达情况和诊断价值。方法采用RT-PCR技术检测62例肾细胞癌患者肿瘤组织和外周血液中MN/CA IX mRNA的表达,以32例正常肾组织和非肾癌患者外周血作为对照。采用免疫组化技术检测36例肾透明细胞癌,17例其它肾肿瘤,16例正常肾组织标本。结果 RT-PCR结果显示62例肾细胞癌患者MN/CAⅨmRNA阳性率在癌组织中为82.3%(51/62),在外周血中为54.8%(34/62),显著高于对照组(P<0.05),在肾透明细胞癌患者癌组织和外周血中MN/CAⅨmRNA阳性率分别为98%(49/50)和66%(33/50),显著高于其它类型肾癌结果(P<0.05)。免疫组化结果显示MN/CAⅨ在肾透明细胞癌中表达阳性率为97.2%(35/36),明显高于其它类型肾肿瘤和正常肾组织(P<0.05)。结论 MN/CAⅨ在肾细胞癌尤其是透明细胞癌中有特异性的高表达,可以用于肾癌的诊断,尤其在预后和个体化治疗判断上有潜在价值。 展开更多
关键词 肾细胞癌 mn/ca 诊断
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宫颈癌特异抗原MN/CA9的多糖蛋白表达载体的构建及鉴定
8
作者 赵敬 《徐州医学院学报》 CAS 2006年第2期98-100,共3页
目的克隆宫颈癌MN/CA9抗原的多糖蛋白cDNA,并构建表达载体。方法从宫颈癌HeLa细胞中提取总RNA,RT-PCR法扩增MN/CA9抗原的多糖蛋白cDNA,将其插入载体pCA13,转化大肠杆菌JM109,构建MN/CA9抗原的多糖蛋白表达载体pCA13-MN。酶切及测序鉴定... 目的克隆宫颈癌MN/CA9抗原的多糖蛋白cDNA,并构建表达载体。方法从宫颈癌HeLa细胞中提取总RNA,RT-PCR法扩增MN/CA9抗原的多糖蛋白cDNA,将其插入载体pCA13,转化大肠杆菌JM109,构建MN/CA9抗原的多糖蛋白表达载体pCA13-MN。酶切及测序鉴定。结果酶切及序列分析结果证明,目的基因成功克隆入载体。结论成功构建了MN/CA9多糖蛋白表达载体。 展开更多
关键词 宫颈癌 mn/ca9抗原 多糖蛋白 基因克隆
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肾细胞癌MN/CA9蛋白的表达及其生物学意义
9
作者 贾绍昌 殷广福 +2 位作者 苏长青 邓安梅 陈孙孝 《肿瘤防治杂志》 2000年第4期375-376,共2页
目的 :研究MN/CA9蛋白的表达和肾细胞癌的关系 ,探讨MN/CA9蛋白在肾细胞癌诊断研究中的应用。方法 :应用免疫组化和免疫印迹的方法 ,对正常肾组织、良性肾损害和肾细胞癌组织的MN/CA9蛋白的表达进行了分析。结果 :正常人肾组织和良性肾... 目的 :研究MN/CA9蛋白的表达和肾细胞癌的关系 ,探讨MN/CA9蛋白在肾细胞癌诊断研究中的应用。方法 :应用免疫组化和免疫印迹的方法 ,对正常肾组织、良性肾损害和肾细胞癌组织的MN/CA9蛋白的表达进行了分析。结果 :正常人肾组织和良性肾损害均为MN/CA9阴性 ,而在 30例肾癌中却有 2 8例为MN/CA9阳性 ,尤其是 2 6例富糖原型RCC均呈现MN/CA9强阳性。结论 展开更多
关键词 肾细胞癌 mn/ca9 表达
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MN/CA9基因检测与肾细胞癌的诊断
10
作者 张玉石 陈照彦 +2 位作者 祝青国 李翼飞 段秀英 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2003年第4期324-326,共3页
目的 探讨MN CA9基因的检测在诊断肾细胞癌 (RCC)中的价值。方法 本组共有 70例病人 (无临床转移的RCC病人 4 2例 ,有转移的RCC病人 3例 ,其他肾脏疾病病人 2 5例 ) ,采用RT PCR方法检测癌组织、正常肾组织及血液和尿液中MN CA9基因... 目的 探讨MN CA9基因的检测在诊断肾细胞癌 (RCC)中的价值。方法 本组共有 70例病人 (无临床转移的RCC病人 4 2例 ,有转移的RCC病人 3例 ,其他肾脏疾病病人 2 5例 ) ,采用RT PCR方法检测癌组织、正常肾组织及血液和尿液中MN CA9基因的表达。结果  4 2例RCC病人的癌组织中 38例检测到MN CA9基因的表达 ,其中16例外周血中有MN CA9基因表达 ,6例尿液中检测到该基因 ,3例已有转移病人中 2例血液有该基因表达 ,1例尿液中有表达 ,而其他肾脏疾病的 2 5例肾组织中仅 1例有MN CA9的表达 ,外周血及尿液中未检测到该基因。结论 MN CA9基因是RCC病人的一个有诊断意义的生物指标 。 展开更多
关键词 mn/ca9基因 检测 肾细胞癌 诊断
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MN/CA9基因检测与肾细胞癌的意义
11
作者 张玉石 陈照彦 +2 位作者 祝青国 李翼飞 段秀英 《临床泌尿外科杂志》 2003年第11期671-672,共2页
目的 :探讨MN/CA9基因的检测在诊断肾细胞癌 (RCC)中的价值。方法 :对无临床转移的RCC患者 4 2例 ,有转移的RCC患者 3例 ,其他肾脏疾病患者 2 5例 ,采用RT PCR方法检测癌组织 ,正常肾组织及血液和尿液中MN/CA9基因的表达。结果 :4 2例... 目的 :探讨MN/CA9基因的检测在诊断肾细胞癌 (RCC)中的价值。方法 :对无临床转移的RCC患者 4 2例 ,有转移的RCC患者 3例 ,其他肾脏疾病患者 2 5例 ,采用RT PCR方法检测癌组织 ,正常肾组织及血液和尿液中MN/CA9基因的表达。结果 :4 2例无临床转移的RCC患者的癌组织中 38例检测到MN/CA9基因的表达 ,其中 1 6例外周血中有MN/CA9基因表达 ,6例尿液中检测到该基因 ;3例已有肺转移患者中 2例血液有该基因表达 ,1例尿液中有表达。而其他肾脏疾病的 2 5例肾组织中仅 1例有MN/CA9的表达 ,外周血及尿液中未检测到该基因。结论 :MN/CA9基因是RCC患者的一个有诊断意义的生物指标 。 展开更多
关键词 mn/ca9基因 肾肿瘤
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Coral Ba/Ca and Mn/Ca Ratios as Proxies of Precipitation and Terrestrial Input at the Eastern Offshore Area of Hainan Island
12
作者 JIANG Qiaowen CAO Zhimin +3 位作者 WANG Daoru LI Yuanchao WU Zhongjie NI Jianyu 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2017年第6期1072-1080,共9页
Geochemical ratios in coral reef skeletons could be used as proxies to reconstruct past climatological and environmental records in data-poor regions. Using a 103-year data set(1902 to 2005), the annual variations in ... Geochemical ratios in coral reef skeletons could be used as proxies to reconstruct past climatological and environmental records in data-poor regions. Using a 103-year data set(1902 to 2005), the annual variations in Ba/Ca and Mn/Ca ratios of Porites lutea skeletons at an eastern offshore area of Hainan Island(19?12'28.4''N, 110?37'38.8''E) were analyzed using inductively coupled plasma-optic emission spectrometry(ICP-OES). The analysis results showed that Ba/Ca ratios varied from a minimum of 3.120 μmol mol^(-1) in 1903 to a maximum of 10.064 μmol mol^(-1) in 1944, with an average of 5.256 μmol mol^(-1). Mn/Ca ratios varied from 0.206 to 5.708 μmol mol^(-1) with an annual average of 1.234 μmol mol^(-1), with peak values in 2001, 1964 and 1932, that correlated with strong rainfall events caused by typhoons. Variation in Ba/Ca and Mn/Ca ratios were compared with available river discharge and precipitation records, providing insight into past climatological events. Human activities and their indirect effects could impact the strength of the relationship between Ba/Ca and Mn/Ca ratios and observed precipitation and terrestrial input in the future. 展开更多
关键词 Porites lutea eastern offshore area of Hainan Island Ba/ca and mn/ca ratios TERRIGENOUS INPUT PRECIPITATION climate proxy records
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Al对镁空气电池用挤压态Mg-Al-Ca-Mn合金阳极腐蚀和放电性能的影响
13
作者 邱玮 李玉林 +5 位作者 闫瑞 李雅文 陈维 甘浪 任延杰 陈荐 《材料研究学报》 北大核心 2025年第5期389-400,共12页
研究了Al含量对镁空气电池用Mg-Al-Ca-Mn合金挤压态阳极在3.5%NaCl电解液中腐蚀和电化学性能的影响。结果表明,AMX411合金阳极表现出优异的耐腐蚀性和放电性能。AMX411合金的72 h析氢测试结果表明,其最小的析氢量和质量损失分别为(2.25&... 研究了Al含量对镁空气电池用Mg-Al-Ca-Mn合金挤压态阳极在3.5%NaCl电解液中腐蚀和电化学性能的影响。结果表明,AMX411合金阳极表现出优异的耐腐蚀性和放电性能。AMX411合金的72 h析氢测试结果表明,其最小的析氢量和质量损失分别为(2.25±0.07)mL·cm^(-2)和(2.83±0.12)mg·cm_(-2);AMX411合金的腐蚀电位(φcorr)和腐蚀电流密度(Jcorr)分别为-1.267 V和(67.9±0.16)μA·cm^(-2),表明其具有较小的电化学活性和最佳的耐腐蚀性能。随着Al含量的提高含Al第二相的分布逐渐均匀,其在3.5%NaCl溶液中由区域性腐蚀转变为均匀腐蚀,表明耐蚀性提高了。Nyquist图中的高频容抗环最大表明其电荷转移电阻最大,可抑制腐蚀过程中的点蚀。同时,AMX411合金Bode图中的模峰值和相位角峰值最高,进一步表明其耐蚀性优异。同时,合金电极的4 h放电结果表明,在电流密度分别为5、10、20和30 mA·cm^(-2)条件下这种合金电极都保持着较负且稳定的电压,并且在放电电流密度分别为20和30 mA·cm^(-2)条件下其放电效率高达61.36%和65.35%,显著优于AMX111合金电极的41.83%和44.79%。在高电流密度条件下这种合金阳极的利用率较高。AMX411合金优异的性能源于其内部的Al第二相较小且均匀分布,降低了局部电势差和抑制了微电偶腐蚀效应。 展开更多
关键词 金属材料 Mg-Al-ca-mn合金 镁空气电池 腐蚀行为 电化学性能
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轨交用Mg-9Al-0.1Mn-xCa挤压合金的组织与力学性能研究
14
作者 敬学锐 吴雄 +4 位作者 王森巍 肖辉 佘加 汤爱涛 王敬丰 《材料导报》 北大核心 2025年第18期189-194,共6页
镁合金密度低,比强度、比刚度高,导热性优异,阻尼性以及电磁屏蔽性能良好,在结构材料方面极具应用前景。其中Mg-Al-Mn-Ca系合金由于良好的室温力学性能、成形能力和阻燃性能,在轨道交通领域表现出广阔的发展前景。然而,目前有关Mg-Al-Mn... 镁合金密度低,比强度、比刚度高,导热性优异,阻尼性以及电磁屏蔽性能良好,在结构材料方面极具应用前景。其中Mg-Al-Mn-Ca系合金由于良好的室温力学性能、成形能力和阻燃性能,在轨道交通领域表现出广阔的发展前景。然而,目前有关Mg-Al-Mn-Ca系合金的研究主要集中于微合金化或低Al成分合金,有鉴于此,本工作研究了Ca元素对高Al成分合金微观组织和力学性能的影响。光学显微镜(OM)、X射线衍射仪(XRD)、扫描电镜(SEM)、电子背散射衍射(EBSD)和力学性能测试结果表明,Ca元素的添加能够有效细化晶粒并弱化基面织构,此外,合金的强度和塑性也得到了同步提升。当Ca含量为0.5%(质量分数)时,合金具有最佳的综合力学性能,拉伸屈服强度、抗拉强度、压缩屈服强度分别为234 MPa、343 MPa、203 MPa,延伸率为14.9%。 展开更多
关键词 Mg-Al-mn-ca系合金 微观组织 力学性能 轨道交通
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利用热轧制-剪切-弯曲工艺及退火调控Mg-Al-Zn-Mn-Ca镁合金的织构
15
作者 游云翔 谭力 +2 位作者 高静静 周涛 周志明 《金属学报》 北大核心 2025年第6期866-874,共9页
热轧制后的Mg-Al-Zn-Mn-Ca镁合金具有椭圆形织构特征。为解决该合金成形过程中展现出的对称性不足等问题,本工作通过热轧制-剪切-弯曲(HRSB)工艺,优化了Mg-2Al-2Zn-0.4Mn-0.5Ca镁合金板材的织构,进而改善了材料的室温各向异性。利用EBSD... 热轧制后的Mg-Al-Zn-Mn-Ca镁合金具有椭圆形织构特征。为解决该合金成形过程中展现出的对称性不足等问题,本工作通过热轧制-剪切-弯曲(HRSB)工艺,优化了Mg-2Al-2Zn-0.4Mn-0.5Ca镁合金板材的织构,进而改善了材料的室温各向异性。利用EBSD和XRD等表征技术,系统研究了Mg-2Al-2Zn-0.4Mn-0.5Ca镁合金板材在退火过程中的微观结构演化和非基面织构形成机理。结果表明,热轧制后退火温度高于350℃时,板材开始表现出沿横向(TD)扩展的椭圆形织构。剪切-弯曲及400℃退火处理后,变形过程产生的{1012}拉伸孪晶界未发生明显静态再结晶,导致20°~70°范围内对称织构的组分增大,甚至形成一种环形织构。当退火温度升高到450℃时,Mg-2Al-2Zn-0.4Mn-0.5Ca合金中基本无法观察到{1012}拉伸孪晶,析出相数量增多,再结晶过程中取向随机的晶粒形核,导致环形织构特征消失。HRSB变形过程中,锥面滑移被大量激活,成为几何必需位错的主要组成部分。Al、Ca等元素在晶界处共偏析引发的新低能晶界以及非基面滑移导致的取向梯度共同促进了非基面织构的形成。 展开更多
关键词 Mg-Al-Zn-mn-ca镁合金 非基面织构 热轧制 多尺度表征 结构演化
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肾癌肿瘤相关抗原G250/MN/CAⅨ基因的克隆、表达及鉴定 被引量:3
16
作者 姜耀东 郑少斌 +1 位作者 王战会 谭万龙 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期90-92,共3页
目的报道G250/MN/CAⅨ基因的克隆,蛋白表达及鉴定。方法从肾癌组织中提取总RNA,采用RTPCR法扩增G250/MN/CAⅨ全长cDNA,将获得的cDNA片段插入pET22b(+)表达载体,转化BL21大肠杆菌中,以IPTG诱导进行蛋白表达,SDSPAGE凝胶电泳观察结果,实... 目的报道G250/MN/CAⅨ基因的克隆,蛋白表达及鉴定。方法从肾癌组织中提取总RNA,采用RTPCR法扩增G250/MN/CAⅨ全长cDNA,将获得的cDNA片段插入pET22b(+)表达载体,转化BL21大肠杆菌中,以IPTG诱导进行蛋白表达,SDSPAGE凝胶电泳观察结果,实验验证。结果克隆的G250/MN/CAⅨ基因经测序证实序列正确,构建重组质粒pET22b(+)/G250并在原核系统中表达G250/MN/CAⅨ重组蛋白,该蛋白具有较好的抗原性和特异性。结论成功完成G250基因克隆,为在G250蛋白纯化基础上进行抗体制备和G250功能研究提供了实验依据。 展开更多
关键词 肾肿瘤 肾癌 基因 抗原 G250/mn/ca Ⅸ基因 克隆
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MN/CA9和Ep-cam基因检测在良恶性胸腔积液鉴别中的价值
17
作者 赖志珍 陶志华 王良兴 《浙江医学》 CAS 2012年第13期1113-1116,共4页
目的探讨MN/CA9和Ep—cam基因检测对良、恶性胸腔积液鉴别诊断的价值。方法选择35例恶性胸腔积液(MPE)和30例良性胸腔积液(BPE),采用SYBRGreenIFQRT—PCR检测胸水沉淀细胞中MN/CA9mRNA、Ep—cammRNA的表达,胸水找脱落细胞,免... 目的探讨MN/CA9和Ep—cam基因检测对良、恶性胸腔积液鉴别诊断的价值。方法选择35例恶性胸腔积液(MPE)和30例良性胸腔积液(BPE),采用SYBRGreenIFQRT—PCR检测胸水沉淀细胞中MN/CA9mRNA、Ep—cammRNA的表达,胸水找脱落细胞,免疫化学发光法检测胸水CEA水平。结果MN/CA9和Ep—cam基因在良、恶性胸腔积液中的表达均有明显差异(均P〈001)。对MPE的诊断,用FQRT—PCR方法检测MN/CA9mRNA和Ep—cammRNA的敏感性(SN)均高于其它两项检查,差异均有统计学意义(均P〈005),而特异性(SP)无统计学差异(均P〉0.05)。细胞学阴性的MPE,MN/CA9诊断的SN为55.6%,SP为100%;Ep—cam诊断的SN为61.5%,SP为100%;两者联合检测的细胞学阴性MPE的SN为76.9%,SP为100%。结论SYBRGreenIFQRT—PCR检测MN/CA9和Ep—cam基因有助于鉴别良、恶性胸腔积液;联合检测MN/CA9和Ep—cam基因的表达有助于提高细胞学阴性MPE诊断的敏感性。 展开更多
关键词 mn/ca9 Ep—cam 胸腔积液 SYBR Green I FQ RT—PCR
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锰毒害对油菜苗期Mn、Ca、Fe含量及POD、CAT活性的影响 被引量:50
18
作者 曾琦 耿明建 +2 位作者 张志江 周文兵 朱端卫 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期300-303,共4页
采用营养液培养技术研究锰毒害对油菜苗期生长发育、Mn、Fe、Ca含量及POD和CAT活性的影响 ,结果表明 :锰毒害使油菜体内各部位Mn含量显著升高 ,生物量降低 ,根、茎、上部叶片中Ca含量显著降低 ,茎、上部及下部叶片中Fe含量显著降低 ,各... 采用营养液培养技术研究锰毒害对油菜苗期生长发育、Mn、Fe、Ca含量及POD和CAT活性的影响 ,结果表明 :锰毒害使油菜体内各部位Mn含量显著升高 ,生物量降低 ,根、茎、上部叶片中Ca含量显著降低 ,茎、上部及下部叶片中Fe含量显著降低 ,各部位Ca/Mn和Fe/Mn也明显降低。锰毒害还使苗期油菜功能叶中CAT活性显著降低 ,POD活性显著增加。 展开更多
关键词 油菜 锰毒害 ca Fe 酶活性
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Zn-Mn-Ca-Ni系中温磷化液的研究 被引量:9
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作者 向鸿照 陈伟 +1 位作者 陈天朗 肖慎修 《材料保护》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期13-15,41,共4页
为了探讨磷化体系中不同组分的作用 ,我们应用新型的复合添加剂 ,制得了可获得高耐蚀性磷化膜的Zn -Mn -Ca-Ni四元体系的磷化液 ,磷化膜为具有较高密集度的圆柱型晶体 ,并对磷化膜的微观结构与四组分的比例关系进行初步的探讨 ,从中得... 为了探讨磷化体系中不同组分的作用 ,我们应用新型的复合添加剂 ,制得了可获得高耐蚀性磷化膜的Zn -Mn -Ca-Ni四元体系的磷化液 ,磷化膜为具有较高密集度的圆柱型晶体 ,并对磷化膜的微观结构与四组分的比例关系进行初步的探讨 ,从中得到各组分最优配比关系。 展开更多
关键词 磷化 Zn—mnca—Ni系 微观结构
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ICP-AES法测定人发中Cu、Zn、Fe、Mn和Ca 被引量:7
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作者 王振原 林淑娣 赵永魁 《光谱实验室》 CAS CSCD 1998年第4期43-45,共3页
本文报导了用ICP-AES测定人发中Cu、Zn、Fe、Mn和Ca的方法。确定了仪器工作条件,并对酸度等的影响进行了探讨。人发标准物质的测定值与标准值很好地吻合。
关键词 人发 ICP-AES 测定 微量元素 电感耦合等离子体发射光谱
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