黑色素的合成是一个极为复杂的过程,多种基因及microRNAs(miRNAs)都参与其中。近年来,越来越多的研究证实miRNAs在哺乳动物毛色生成过程中发挥着重要作用,但miRNA对于贝类参与黑色素合成的调控机制研究较少。其中,长牡蛎(Crassostrea gi...黑色素的合成是一个极为复杂的过程,多种基因及microRNAs(miRNAs)都参与其中。近年来,越来越多的研究证实miRNAs在哺乳动物毛色生成过程中发挥着重要作用,但miRNA对于贝类参与黑色素合成的调控机制研究较少。其中,长牡蛎(Crassostrea gigas)外套膜与黑色素沉着密切相关,是壳色形成及黑色素产生的关键部位。本研究采用RNAhybrid预测miR-183-5p的靶基因;通过实时荧光定量PCR(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)、双荧光素酶报告基因检测、和马松丰塔纳黑色素染色技术等验证miR-183-5p对黑色素合成的影响。软件预测和双荧光素酶报告基因检测证实小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associated transcription factor,MITF)是miR-183-5p的靶基因,qRT-PCR表明miR-183-5p在长牡蛎黑色和白色外套膜中均有表达且在白色中显著表达,其miR-183-5p过表达后使黑色素形成相关基因表达量显著下调,染色结果也显示模拟物组棕色颗粒较对照组明显减少。综上,miR-183-5p可能通过调控MITF的表达影响长牡蛎黑色素的形成。展开更多
文摘黑色素的合成是一个极为复杂的过程,多种基因及microRNAs(miRNAs)都参与其中。近年来,越来越多的研究证实miRNAs在哺乳动物毛色生成过程中发挥着重要作用,但miRNA对于贝类参与黑色素合成的调控机制研究较少。其中,长牡蛎(Crassostrea gigas)外套膜与黑色素沉着密切相关,是壳色形成及黑色素产生的关键部位。本研究采用RNAhybrid预测miR-183-5p的靶基因;通过实时荧光定量PCR(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)、双荧光素酶报告基因检测、和马松丰塔纳黑色素染色技术等验证miR-183-5p对黑色素合成的影响。软件预测和双荧光素酶报告基因检测证实小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associated transcription factor,MITF)是miR-183-5p的靶基因,qRT-PCR表明miR-183-5p在长牡蛎黑色和白色外套膜中均有表达且在白色中显著表达,其miR-183-5p过表达后使黑色素形成相关基因表达量显著下调,染色结果也显示模拟物组棕色颗粒较对照组明显减少。综上,miR-183-5p可能通过调控MITF的表达影响长牡蛎黑色素的形成。
