目的观察右归饮联合MSCs介入治疗早期股骨头缺血性坏死(avascular necrosis of the femoral head,ANFH)的疗效及促进再血管化、再骨化的作用。方法取健康雄性成年毕格犬24只,体重(10.0±0.5)kg,随机分为4组:A组(模型组)、B组(右归饮...目的观察右归饮联合MSCs介入治疗早期股骨头缺血性坏死(avascular necrosis of the femoral head,ANFH)的疗效及促进再血管化、再骨化的作用。方法取健康雄性成年毕格犬24只,体重(10.0±0.5)kg,随机分为4组:A组(模型组)、B组(右归饮组)、C组(MSCs介入组)、D组(MSCs介入加右归饮组),每组6只。通过液氮冷冻法建立早期ANFH模型。分离、培养并以BrdU标记MSCs。造模3周后,C、D组动脉灌注标记后的浓度为(0.5～1.0)×106个/mL的MSCs1mL,B、D组每天予右归饮100mL灌胃,A、C组以100mL蒸馏水灌胃。连续治疗4周及8周后行股骨头大体观察,DSA和MRI观察股骨头供血血管的数量及直径的变化情况,行组织学及免疫组织化学染色观察VEGF、BrdU阳性表达情况,实时荧光定量RT-PCR检测VEGF mRNA表达。结果治疗后4、8周,A组股骨头外形扁平,呈蘑菇状;B、C、D组股骨头外形基本正常。DSA观察示C、D组治疗后供血血管分支增粗、增多,原阻塞血管再通。治疗后4、8周,C、D组间血管数和血管直径比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组血管直径与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),D组血管数与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。MRI检查示B、C、D组较A组明显改善,D组尤为明显,T1W略低信号,T2W略低信号,STIR略高信号。组织病理学及免疫组织化学染色示:B、C、D组较A组结构有明显改善,D组较其他各组的VEGF阳性表达率均明显增高(P<0.05),D组较C组的BrdU阳性率、阳性成骨细胞数、阳性血管数表达均明显增高(P<0.05)。实时荧光定量RT-PCR检测示:D组较其他各组VEGFmRNA表达量增多(P<0.05),B、C、D组的VEGF表达均高于A组(P<0.05)。结论右归饮联合MSCs介入治疗早期ANFH疗效显著,可改善坏死股骨头的血供、促进修复、预防塌陷。展开更多
目的观察缺氧预处理骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对脑缺血再灌注损伤大鼠SDF-1/CXCR4 m RNA和蛋白表达的影响及清热化瘀方的干预作用。方法采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠(MCAO)模型,将216只SD大鼠随机分为6组:假手术组(SO)、模型组(MC...目的观察缺氧预处理骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对脑缺血再灌注损伤大鼠SDF-1/CXCR4 m RNA和蛋白表达的影响及清热化瘀方的干预作用。方法采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠(MCAO)模型,将216只SD大鼠随机分为6组:假手术组(SO)、模型组(MCAO)、MSCs移植对照组(N-MSCs)、经HP处理后的MSCs移植组(HP-MSCs)、MSCs移植联合清热化瘀方组(MSCs+QRHY)、HP-MSCs移植联合清热化瘀方组(HP+QRHY)。每组大鼠36只,每组根据取材时间点7,14,28 d又可分为每组3个亚组,每个亚组12只大鼠。采用q RT-PCR和Western blot观察3个时间点SDF-1/CXCR4 m RNA及其蛋白的表达变化,并以TUNEL法检测神经细胞凋亡。结果各组缺血半暗带SDF-1/CXCR4 m RNA及其蛋白的表达均于7d达到高峰,14,28 d表达逐渐下降。其中7,14 d同一时间点组间比较,HP-MSCs组、MSCs+QRHY组及HP+QRHY组二者的表达均明显优于N-MSCs组(P<0.01,P<0.05),而以HP+QRHY组增高最为明显(P<0.05,P<0.01),28 d后,各移植组的表达趋势趋同,但仍高于模型组(P<0.05)。结论缺氧预处理MSCs移植能够显著提高脑缺血再灌注损伤大鼠SDF-1/CXCR4的表达,清热化瘀方能够进一步上调SDF/1CXCR4的表达,减少细胞凋亡。展开更多
文摘目的观察右归饮联合MSCs介入治疗早期股骨头缺血性坏死(avascular necrosis of the femoral head,ANFH)的疗效及促进再血管化、再骨化的作用。方法取健康雄性成年毕格犬24只,体重(10.0±0.5)kg,随机分为4组:A组(模型组)、B组(右归饮组)、C组(MSCs介入组)、D组(MSCs介入加右归饮组),每组6只。通过液氮冷冻法建立早期ANFH模型。分离、培养并以BrdU标记MSCs。造模3周后,C、D组动脉灌注标记后的浓度为(0.5～1.0)×106个/mL的MSCs1mL,B、D组每天予右归饮100mL灌胃,A、C组以100mL蒸馏水灌胃。连续治疗4周及8周后行股骨头大体观察,DSA和MRI观察股骨头供血血管的数量及直径的变化情况,行组织学及免疫组织化学染色观察VEGF、BrdU阳性表达情况,实时荧光定量RT-PCR检测VEGF mRNA表达。结果治疗后4、8周,A组股骨头外形扁平,呈蘑菇状;B、C、D组股骨头外形基本正常。DSA观察示C、D组治疗后供血血管分支增粗、增多,原阻塞血管再通。治疗后4、8周,C、D组间血管数和血管直径比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组血管直径与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),D组血管数与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。MRI检查示B、C、D组较A组明显改善,D组尤为明显,T1W略低信号,T2W略低信号,STIR略高信号。组织病理学及免疫组织化学染色示:B、C、D组较A组结构有明显改善,D组较其他各组的VEGF阳性表达率均明显增高(P<0.05),D组较C组的BrdU阳性率、阳性成骨细胞数、阳性血管数表达均明显增高(P<0.05)。实时荧光定量RT-PCR检测示:D组较其他各组VEGFmRNA表达量增多(P<0.05),B、C、D组的VEGF表达均高于A组(P<0.05)。结论右归饮联合MSCs介入治疗早期ANFH疗效显著,可改善坏死股骨头的血供、促进修复、预防塌陷。
文摘目的观察缺氧预处理骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对脑缺血再灌注损伤大鼠SDF-1/CXCR4 m RNA和蛋白表达的影响及清热化瘀方的干预作用。方法采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠(MCAO)模型,将216只SD大鼠随机分为6组:假手术组(SO)、模型组(MCAO)、MSCs移植对照组(N-MSCs)、经HP处理后的MSCs移植组(HP-MSCs)、MSCs移植联合清热化瘀方组(MSCs+QRHY)、HP-MSCs移植联合清热化瘀方组(HP+QRHY)。每组大鼠36只,每组根据取材时间点7,14,28 d又可分为每组3个亚组,每个亚组12只大鼠。采用q RT-PCR和Western blot观察3个时间点SDF-1/CXCR4 m RNA及其蛋白的表达变化,并以TUNEL法检测神经细胞凋亡。结果各组缺血半暗带SDF-1/CXCR4 m RNA及其蛋白的表达均于7d达到高峰,14,28 d表达逐渐下降。其中7,14 d同一时间点组间比较,HP-MSCs组、MSCs+QRHY组及HP+QRHY组二者的表达均明显优于N-MSCs组(P<0.01,P<0.05),而以HP+QRHY组增高最为明显(P<0.05,P<0.01),28 d后,各移植组的表达趋势趋同,但仍高于模型组(P<0.05)。结论缺氧预处理MSCs移植能够显著提高脑缺血再灌注损伤大鼠SDF-1/CXCR4的表达,清热化瘀方能够进一步上调SDF/1CXCR4的表达,减少细胞凋亡。
