期刊文献+
共找到89篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
用两步MS-PCR结合ELISA检测HIV-1逆转录酶基因的耐药性突变 被引量:2
1
作者 何红秋 程绍辉 +2 位作者 刘斌 陈慰祖 王存新 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期42-46,共5页
高效抗逆转录病毒治疗法(HAART)的推广使用有效地抑制了HIV-1病毒的传播和艾滋病(AIDS)的发病率、死亡率。近年来,HIV-1逆转录酶基因突变所导致的耐药性已成为HAART治疗失败的主要原因,耐药性突变的检测对于指导病人用药以及新药开发具... 高效抗逆转录病毒治疗法(HAART)的推广使用有效地抑制了HIV-1病毒的传播和艾滋病(AIDS)的发病率、死亡率。近年来,HIV-1逆转录酶基因突变所导致的耐药性已成为HAART治疗失败的主要原因,耐药性突变的检测对于指导病人用药以及新药开发具有重要意义。发展了一种检测HIV-1逆转录酶基因耐药性突变的新方法。采用两步MS-PCR方法检测HIV-1B亚型野生型和耐药突变型逆转录酶基因突变,检测点包括M41L、K70R、K103N、Y181C和T215,并在两步MS-PCR基础上,设计比野生型引物长的突变型引物,结合微孔板杂交ELISA呈色技术检测各点突变。结果显示,简化的两步MS-PCR能保持灵敏度和特异性高的优点,ELISA的阳性结果与阴性结果的比值(P/N)达到要求,两步MS-PCR结合ELISA方法灵敏度高,操作简单、结果直观、成本低、相对耗时短且能进行高通量检测,使其无论在HIV-1耐药性突变及其它的点突变检测中都具有较好的临床应用前景。 展开更多
关键词 两步ms-pcr ELISA HIV-1 逆转录酶基因 耐药性
在线阅读 下载PDF
MS-PCR法检测血管紧张素原基因M235T多态性 被引量:2
2
作者 耿茜 杨笛 +1 位作者 张寄南 马文珠 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期251-253,共3页
目的 建立新型突变基因分离聚合酶链反应 (MS PCR)法检测血管紧张素原 (AgT)基因M 2 35T多态性 ,以正确评估其与家族性原发性高血压的关系。方法 建立PCR RFLP和MS PCR法最佳实验体系 ,验证敏感性及特异性。结果  ( 1)PCR RFLP体系... 目的 建立新型突变基因分离聚合酶链反应 (MS PCR)法检测血管紧张素原 (AgT)基因M 2 35T多态性 ,以正确评估其与家族性原发性高血压的关系。方法 建立PCR RFLP和MS PCR法最佳实验体系 ,验证敏感性及特异性。结果  ( 1)PCR RFLP体系中 ,随内切酶量和消化时间的增加 ,消化反应越彻底 ,以 0 0 75 μg基因组DNA扩增产物、30UnitTth111 Ⅰ酶消化 3小时为最佳反应体系。 ( 2 )MS PCR法一次扩增即可确定AgT基因型。 ( 3) 10个标本以PCR RFLP法检测者基因型均为MT ,而MS PCR法仅 1例为MT型 ,余 9例均为TT型 ( 90 % )。结论 传统的PCR RFLP可能因消化不彻底而造成结果判断的误差 ;MS PCR以其高敏感性和特异性成为检测基因多态性的快速、简便。 展开更多
关键词 ms-pcr 血管紧张素原 基因多态性 M235T多态性 原发性高血压 基因诊断
暂未订购
MS-PCR法评估家族性原发性高血压病人血管紧张素原基因M235T多态性 被引量:1
3
作者 耿茜 杨笛 +1 位作者 张寄南 马文珠 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2001年第4期336-339,共4页
本文采用新型高敏感、特异的MS PCR法对中国苏皖地区 94例具高血压家族史和 36例无家族史者检测血管紧张素原M2 35T基因型。具有高血压家族史的原发性高血压病人 (FH组 )、具家族史的非高血压者 (FNH组 )、无家族史的正常对照 (N组 )和... 本文采用新型高敏感、特异的MS PCR法对中国苏皖地区 94例具高血压家族史和 36例无家族史者检测血管紧张素原M2 35T基因型。具有高血压家族史的原发性高血压病人 (FH组 )、具家族史的非高血压者 (FNH组 )、无家族史的正常对照 (N组 )和无家族史的高血压病人 (NFH组 )血管紧张素原 (Angiotensinogen ,AGT)基因TT型 /T等位基因频率分别为 0 5 81/ 0 77、0 5 6 3/ 0 77、0 346 / 0 5 8和 0 4/ 0 5 5。有家族史者T等位基因频率远高于无家族史者。小样本研究认为中国苏皖地区人群原发性高血压的发病与AGTM2 35T基因多态性密切相关 ,T等位基因具更高的发病风险。各组间年龄分析结果显示AGTM2 展开更多
关键词 ms-pcr 家族性原发性高血压 血管紧张素原基因多态性 PCR-RFLP
暂未订购
Gc亚型检测的复合MS-PCR法及其应用 被引量:1
4
作者 钱水 刘超 +2 位作者 黄代新 杨荣芝 杨庆恩 《中国法医学杂志》 CSCD 2005年第3期154-157,共4页
目的探讨建立Gc亚型检测的复合MS-PCR法及其应用价值。方法根据Gc基因中的2处点突变,设计2对片段相差5bp的等位基因特异性引物和1条公共引物进行复合MS-PCR,分析Gc多态性,并调查武汉地区218例汉族无关个体Gc多态性和鉴定10例亲子关系。... 目的探讨建立Gc亚型检测的复合MS-PCR法及其应用价值。方法根据Gc基因中的2处点突变,设计2对片段相差5bp的等位基因特异性引物和1条公共引物进行复合MS-PCR,分析Gc多态性,并调查武汉地区218例汉族无关个体Gc多态性和鉴定10例亲子关系。结果复合MS-PCR检测的Gc基因型,与AmpliTypePM试剂盒的分型结果一致;武汉地区汉族人群Gc基因的3个常见等位基因Gc1F、Gc1S、Gc2的基因频率分别为0.4816、0.2592、0.2592,观察杂合度(Hobs)、期望杂合度(Hexp)、多态性信息含量(PIC)、个人识别能力(DP)、非父排除率(PE)分别为0.6193、0.6359、0.6253、0.7974、0.3480,基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡;真三联体和非真三联体亲子鉴定各5例,前者不排除父子关系,与常规STR分型一致,后者经Gc-MS-PCR分型排除2例。结论建立复合MS-PCR法检测Gc亚型在法医物证鉴定中有实用价值。 展开更多
关键词 法医物证学 型特异成分 复合Ms—PcR 遗传多态性 亲子鉴定
暂未订购
MS-PCR法重新评估血管紧张素原基因M235T多态性与家族性原发性高血压的相关性 被引量:4
5
作者 耿茜 杨笛 +3 位作者 方五旺 谢勇 张寄南 马文珠 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期160-161,共2页
关键词 家族性原发性高血压 ms-pcr 血管紧张素原基因 M235T
原文传递
70株猪链球菌的分离鉴定和毒力基因检测及耐药性分析
6
作者 韦文飞 袁朝原 +5 位作者 李雪珍 农爱红 易雪丽 言天久 黄婵娟 黄伟坚 《动物医学进展》 北大核心 2025年第10期56-62,共7页
为了解广西百色市猪源猪链球菌流行分布、菌株携带毒力基因及对常用抗菌药物耐药情况,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对分离自广西百色市辖12个县(市、区)农村散养的366份健康生猪扁桃体样品的猪链球菌进行鉴定,以聚合酶链反应(P... 为了解广西百色市猪源猪链球菌流行分布、菌株携带毒力基因及对常用抗菌药物耐药情况,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对分离自广西百色市辖12个县(市、区)农村散养的366份健康生猪扁桃体样品的猪链球菌进行鉴定,以聚合酶链反应(PCR)对菌株携带毒力基因进行检测,并用微量肉汤稀释法对菌株开展常用抗菌药物耐药性分析。结果显示,共有70株分离株被鉴定为猪链球菌,样品携菌率为19.1%,检出阳性样品主要以右江河为中轴线聚集分布,并与县域生猪调运流通量呈正相关关系。70株猪链球菌的优势毒力基因型以fbps、gapdh、orf2为主,其中有4株全部携带fbps、gapdh、orf2、mrp、sly、cps2J等6种毒力基因,辖区各县(市、区)分离株毒力基因型分布略有差异。70株分离株对红霉素和克林霉素耐药最高,均为94.3%,其次为四环素耐药(92.3%),对头孢曲松耐药性最低(2.8%);分离株整体耐药情况严重,62株表现为多重耐药,占比88.6%,其中34株为三重耐药,12株四重耐药,11株五重耐药,5株六重耐药;菌株流行的耐药谱型为克林霉素、红霉素和四环素三重耐药。研究结果为临床科学用药对猪链球菌病进行预防和治疗,促进养猪业的健康发展具有参考意义。 展开更多
关键词 猪链球菌 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 毒力基因 聚合酶链反应 耐药
在线阅读 下载PDF
肺癌组织细胞FHIT基因启动子甲基化和转录表达 被引量:8
7
作者 余宗涛 袁亚莉 +2 位作者 张吉才 高琼 王元元 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期498-500,共3页
目的探讨FHIT(fragile histidine triad,脆性组氨酸三联体)基因表达水平及其启动子CpG岛甲基化状态与肺癌发生发展的关系。方法用实时定量PCR检测FHIT mRNA在肺癌组织、肺癌旁组织与去甲基化剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytid... 目的探讨FHIT(fragile histidine triad,脆性组氨酸三联体)基因表达水平及其启动子CpG岛甲基化状态与肺癌发生发展的关系。方法用实时定量PCR检测FHIT mRNA在肺癌组织、肺癌旁组织与去甲基化剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine、5-Aza-CdR)处理前后A549细胞株中的表达,用甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测FHIT启动子CpG岛甲基化状态。结果FHIT mRNA在肺癌旁组织中全部表达,在肺癌组织中表达缺失率为48.89%(22/45),且表达量低于正常肺组织(t=-15.851,P<0.001),但在不同年龄和性别、肿瘤大小、恶性程度、肿瘤分类的差异无显著性;FHIT基因启动子在肺癌组织中发生甲基化的频率为40%(18/45)、在癌旁组织中频率8.7%(2/23)(χ2=7.184,P<0.01),18份启动子区甲基化的肺癌标本中,10份同时伴有mRNA表达缺失。结论在肺癌组织中,FHIT基因启动子甲基化频率明显升高,其表达缺失或下调,提示FHIT启动子甲基化可在肺癌发生和发展中起一定作用。 展开更多
关键词 肺癌 CPG岛甲基化 ms-pcr FHIT基因
暂未订购
磁珠分离DNA技术检测HIV-1逆转录酶基因耐药性突变 被引量:1
8
作者 程绍辉 何红秋 +2 位作者 刘斌 陈慰祖 王存新 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期105-109,共5页
HIV-1逆转录酶基因突变导致的耐药性严重影响了药物对病人的治疗效果,耐药性突变的检测对于指导合理用药具有重要意义。发展了一种检测HIV-1逆转录酶基因耐药性突变的新方法,在两步MS-PCR方法的基础上,引入磁珠分离DNA技术并结合酶联免... HIV-1逆转录酶基因突变导致的耐药性严重影响了药物对病人的治疗效果,耐药性突变的检测对于指导合理用药具有重要意义。发展了一种检测HIV-1逆转录酶基因耐药性突变的新方法,在两步MS-PCR方法的基础上,引入磁珠分离DNA技术并结合酶联免疫吸附检测方法(ELISA)检测逆转录酶基因耐药性突变T215F和Y181C。结果显示:MS-PCR结合磁珠分离技术和ELISA具有较高的灵敏度和特异性,阳性/阴性比值(P/N值)达到要求,突变型模板检测限为5%左右,耗时短且能进行高通量检测。无论在HIV-1耐药性突变还是其它的点突变检测中,该方法都具有较好的临床应用前景。 展开更多
关键词 逆转录酶 耐药性突变 磁珠 ELISA ms-pcr
在线阅读 下载PDF
OATP1B1基因位点521T→C的突变对瑞舒伐他汀在中国健康人体内药代动力学特征的影响 被引量:11
9
作者 隋双明 温金华 +1 位作者 李新华 熊玉卿 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期695-700,共6页
研究中国健康人体内OATP1B1基因位点521T→C的突变对瑞舒伐他汀药代动力学的影响,为临床参考遗传多态性特征来确立瑞舒伐他汀正确合理的给药方案提供依据。血浆样品应用LC-MS方法测定:采用电喷雾电离源(ESI),选择性监测瑞舒伐他汀(m/z 4... 研究中国健康人体内OATP1B1基因位点521T→C的突变对瑞舒伐他汀药代动力学的影响,为临床参考遗传多态性特征来确立瑞舒伐他汀正确合理的给药方案提供依据。血浆样品应用LC-MS方法测定:采用电喷雾电离源(ESI),选择性监测瑞舒伐他汀(m/z 480.0),内标匹伐他汀(m/z 420.0)。利用ARMS-PCR方法对40名健康受试者OATP1B1的521T→C位点的基因分型,结果显示有7名为OATP1B1基因位点521T→C突变者,占全部健康受试者的17.5%,其余OATP1B1基因野生型纯合子占全部健康受试者的82.5%。首次发现中国人体内的瑞舒伐他汀药代动力学特征在OATP1B1基因位点521T→C突变组与基因野生型组间存在显著差异。中国人体内OATP1B1基因位点521T→C突变对瑞舒伐他汀的药代动力学过程有显著影响。瑞舒伐他汀OATP1B1基因突变组与野生型组相比较,其在人体内的吸收程度增加,消除过程减慢,故在临床应用中应参考OATP1B1基因位点521T→C的突变情况来指导瑞舒伐他汀的合理用药。 展开更多
关键词 瑞舒伐他汀 药代动力学 遗传多态性 HPLC-MS OATP1B1 ARms-pcr
原文传递
同型半胱氨酸致巨噬细胞TNFSF4基因启动子去甲基化并增加其mRNA表达 被引量:3
10
作者 黄丹丹 王树人 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期614-617,共4页
目的探讨同型半胱氨酸对THP-1巨噬细胞TNFSF4基因甲基化及mRNA表达的影响。方法在由0.1μmol/L佛波脂(phorbot12-myristate13-acetate,PMA)诱导分化的THP-1巨噬细胞中加入不同浓度的高同型半胱氨酸(homocysteine,HCY),并孵育不同时间。... 目的探讨同型半胱氨酸对THP-1巨噬细胞TNFSF4基因甲基化及mRNA表达的影响。方法在由0.1μmol/L佛波脂(phorbot12-myristate13-acetate,PMA)诱导分化的THP-1巨噬细胞中加入不同浓度的高同型半胱氨酸(homocysteine,HCY),并孵育不同时间。另设空白对照组。应用MS-PCR技术检测TNFSF4基因甲基化状态,应用RT-PCR检测TNFSF4基因表达水平差异。结果与对照组比较,随时间和浓度的不断增加,各药物浓度组非甲基化条带越来越浓(P<0.01),甲基化条带越来越淡(P<0.01),72h处理组全部只出现非甲基化条带,同时各药物浓度组24hTNFSF4基因mRNA表达增加,且呈剂量依赖关系(P<0.01)。结论同型半胱氨酸可致THP-1巨噬细胞TNFSF4基因启动子区去甲基化,同时其mRNA表达水平增加。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 TNFSF4基因 DNA甲基化 ms-pcr
暂未订购
RASSF1A基因在胶质瘤组织中甲基化研究及临床意义 被引量:1
11
作者 董欣明 刘云会 潘尉然 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2008年第6期499-502,共4页
目的:探讨胶质瘤组织及脑正常组织中抑癌基因RASSF1A启动子区甲基化程度及与临床特征的关系。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)方法检测46例脑胶质瘤(其中星形细胞瘤19例,室管膜瘤16例,胶质母细胞瘤11例)及6例脑正常组织中RAS... 目的:探讨胶质瘤组织及脑正常组织中抑癌基因RASSF1A启动子区甲基化程度及与临床特征的关系。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)方法检测46例脑胶质瘤(其中星形细胞瘤19例,室管膜瘤16例,胶质母细胞瘤11例)及6例脑正常组织中RASSF1A基因启动子区甲基化状态。并对RASSF1A基因启动子区甲基化发生情况与临床各因素之间的关系进行分析。结果:(1)46例脑胶质瘤组织DNA标本中RASSF1A基因启动子区甲基化发生率为65.2%(30/46);6例脑正常组织中RASSF1A基因未发生甲基化;RASSF1A在胶质瘤和脑正常组织之间发生甲基化率比较差异有显著性(P=0.017)。在46例脑胶质瘤中RASSF1A有30例发生甲基化,其中低级别组14例(14/26),高级别组16例(16/20),两组之间甲基化率比较无明显差异(P>0.05)。其中星形细胞瘤、室管膜瘤、胶质母细胞瘤中甲基化发生率分别为63.2%(12/19)、68.8%(11/16)、63.6%(7/11),各组之间甲基化发生率比较均无统计学意义(P=0.211)。(2)RASSF1A基因启动子区甲基化程度与脑胶质瘤病理分型、肿瘤大小之间无显著相关性。结论:RASSF1A在胶质瘤中有甲基化发生,在脑正常组织中未发生甲基化,检测胶质瘤中RASSF1A基因启动子区甲基化情况对临床判断肿瘤发生发展有指导意义。 展开更多
关键词 胶质瘤 RASSF1A 甲基化 ms-pcr
暂未订购
宫颈癌患者CHFR基因异常甲基化的检测
12
作者 李文兵 余宗涛 +3 位作者 何月 王凌宇 王鹏 杨丰美 《湖北医药学院学报》 CAS 2014年第3期253-255,共3页
目的:探讨CHFR(checkpoint with FHA and ring finger)基因启动子异常甲基化在宫颈癌发生发展过程中的作用及其在宫颈癌早期诊断中的价值。方法:用甲基化特异性PCR方法检测42例宫颈癌组织、30例宫颈上皮内瘤样病变组织(cervical intraep... 目的:探讨CHFR(checkpoint with FHA and ring finger)基因启动子异常甲基化在宫颈癌发生发展过程中的作用及其在宫颈癌早期诊断中的价值。方法:用甲基化特异性PCR方法检测42例宫颈癌组织、30例宫颈上皮内瘤样病变组织(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及20例正常宫颈组织中CHFR基因启动子区CpG岛甲基化状态。结果:宫颈癌组织及CIN中CHFR基因异常甲基化检出率分别为33.3%(14/42)和6.7%(2/30),正常宫颈组织中未检出CHFR基因甲基化;三组间CHFR基因异常甲基化发生率之间比较差异具有统计学意义(χ2=10.69,P=0.005);CHFR基因甲基化发生率与年龄、病理分级、临床分期之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CHFR基因的异常甲基化参与了宫颈癌的发生和发展过程,其甲基化的检测对宫颈癌的早期诊断有一定的价值。 展开更多
关键词 宫颈癌 甲基化 ms-pcr CHFR基因
暂未订购
特异性PCR及MLST法对中成药常见污染芽孢杆菌的鉴定及溯源研究
13
作者 严卓彦 《现代中药研究与实践》 2024年第5期7-13,共7页
目的研究中成药中常见污染细菌的分离鉴定及溯源分析方法。方法结合微生物限度检查工作的实例,对检出污染菌的34批中成药及检测环境中分离得到的细菌进行鉴定,通过生物质谱法初筛、16S rDNA测序和芽孢杆菌特异性PCR法进行验证。对药品... 目的研究中成药中常见污染细菌的分离鉴定及溯源分析方法。方法结合微生物限度检查工作的实例,对检出污染菌的34批中成药及检测环境中分离得到的细菌进行鉴定,通过生物质谱法初筛、16S rDNA测序和芽孢杆菌特异性PCR法进行验证。对药品和环境中都检出的枯草芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌通过多位点序列分型(MLST)法进行溯源分析。结果生物质谱法能够鉴定绝大多数污染细菌,但无法鉴别蜡样芽孢杆菌群及某些近缘枯草芽孢杆菌群。16S rDNA测序结合芽孢杆菌特异性PCR方法能够快速鉴定所有的污染细菌。MLST结果显示药品与检测环境中存在同一类型的蜡样芽孢杆菌及不同类型的枯草芽孢杆菌,提示药品中检出的蜡样芽孢杆菌可能来源于检测环境。结论中成药中绝大多数污染细菌为芽孢杆菌,芽孢杆菌特异性PCR及MLST法可以作为药品中污染芽孢杆菌的快速鉴定和溯源方法。 展开更多
关键词 芽孢杆菌特异性PCR 多位点序列分型 16S rDNA测序法 生物质谱法
暂未订购
LRP15基因启动子区甲基化与其表达的关系 被引量:5
14
作者 徐周敏 于力 +6 位作者 楼方定 卢学春 窦立平 杨龙 陈焱 吕鸣 崔杰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期188-191,共4页
为了研究LRP15基因启动子区的甲基化状况及其与基因表达的关系,探讨LRP15基因的甲基化调控机 制,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测LRP15基因启动子区的甲基化状况,应用甲基化抑制剂5-杂 氮-2'-脱氧胞嘧啶(CdR)及去乙酰化... 为了研究LRP15基因启动子区的甲基化状况及其与基因表达的关系,探讨LRP15基因的甲基化调控机 制,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测LRP15基因启动子区的甲基化状况,应用甲基化抑制剂5-杂 氮-2'-脱氧胞嘧啶(CdR)及去乙酰化酶抑制刑曲古抑菌素(TSA)诱导CpG岛去甲基化及组蛋白乙酰化,观察启动 子区CpG岛甲基化与基因表达的关系。结果显示:白血病细胞系K562中LRP15基因启动子区呈高甲基化状态, 并抑制了该基因的表达。单独应用或联合TSA应用CdR均可去除该基因启动子区的高甲基化状态.并诱导该基 因的表达。这表明LRP15基因的表达受到启动子区甲基化的调控;该基因在K562细胞系中不表达与其启动子区 高甲基化及组蛋白去乙酰化密切相关。结论:甲基转移酶抑制剂与去乙酰化酶抑制剂在白血病治疗中可能具有一 定的价值。 展开更多
关键词 LRP15基因 启动子 甲基化 甲基化特异性聚合酶链反应
暂未订购
甲基化PCR作为白血病微量残留病检测方法的探索 被引量:4
15
作者 赵瑜 李红华 +6 位作者 薄剑 靖彧 王书红 王全顺 窦立萍 孙敬芬 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期455-458,共4页
本实验研究探讨以甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)作为白血病微量残留病(MRD)检测方法的可行性。将Id4基因呈完全甲基化的HL-60细胞和Id4基因呈完全非甲基化的Hek937细胞按不同比例混合,实验分为3组:A组为10%HL-60+9%Hek937,B组为1%HL... 本实验研究探讨以甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)作为白血病微量残留病(MRD)检测方法的可行性。将Id4基因呈完全甲基化的HL-60细胞和Id4基因呈完全非甲基化的Hek937细胞按不同比例混合,实验分为3组:A组为10%HL-60+9%Hek937,B组为1%HL-60+99%Hek937,C组为0.1%HL-60+99.9%Hek937。用MS-PCR方法检测不同白血病细胞比例下Id4基因甲基化情况。结果表明,HL-60细胞仅有155bp的Id4基因甲基化特异性扩增,呈Id4基因完全甲基化;Hek937细胞仅有156bp的Id4基因非甲基化特异性扩增,呈Id4基因完全非甲基化。A、B、C组同时有155bp的Id4基因甲基化和156bp的Id4基因非甲基化特异性扩增,显示Id4基因甲基化表达。结论:MS-PCR方法可从0.1%比例含量的白血病细胞样本中检测到Id4基因甲基化,加之Id4基因甲基化在不同类型白血病中差异不明显,因此用MS-PCR检测Id4基因甲基化状态可以作为一种检测各种类型白血病微量残留病的方法。 展开更多
关键词 白血病 微量残留病 Id4基因甲基化 MS—PCR
暂未订购
结核杆菌含信号肽的Mtb8.4真核表达质粒的构建及鉴定 被引量:5
16
作者 李晖 任小华 +1 位作者 钟森 任红 《实用预防医学》 CAS 2004年第6期1084-1086,共3页
目的 对结核杆菌新抗原—带信号肽的Mtb8.4(MS)进行基因克隆 ,构建其真核表达质粒并加以鉴定。 方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从结核分枝杆菌H 3 7Rv株基因组中扩增出带信号肽的Mtb8.4(MS)目的基因 ,经HindⅢ和EcoRⅠ消化后 ,与 pcDNA... 目的 对结核杆菌新抗原—带信号肽的Mtb8.4(MS)进行基因克隆 ,构建其真核表达质粒并加以鉴定。 方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从结核分枝杆菌H 3 7Rv株基因组中扩增出带信号肽的Mtb8.4(MS)目的基因 ,经HindⅢ和EcoRⅠ消化后 ,与 pcDNA3 .1(+ )载体进行连接重组。  结果 pcDNA3 .1(+ ) -MS真核表达质粒构建完成后 ,用限制性内切酶消化、PCR及DNA测序等多种方法进行鉴定 ,证实其构建成功。 结论 pcDNA3 .1(+ ) -MS真核表达质粒的成功构建 ,为进一步研究该质粒的免疫保护效果 ,了解信号肽序列在MS蛋白表达和分泌过程中所起的作用及制备相应的结核病DNA疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 结核杆菌 MS PCR 基因克隆
暂未订购
肺癌患者PTEN基因启动子高甲基化的检测 被引量:4
17
作者 余宗涛 高琼 +2 位作者 吕军 张吉才 袁亚莉 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第8期855-858,共4页
目的探讨肺癌患者组织、外周血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)启动子异常基因化状况及其在肺癌诊断中的价值。方法用甲基化特异性PCR方法检测组织、血浆及BALF中的PTEN基因启动子区CpG岛甲基化。结果45例... 目的探讨肺癌患者组织、外周血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)启动子异常基因化状况及其在肺癌诊断中的价值。方法用甲基化特异性PCR方法检测组织、血浆及BALF中的PTEN基因启动子区CpG岛甲基化。结果45例肺癌患者中,PTEN基因启动子异常甲基化率组织为26.67%(12/45)、血浆为15.56%(7/45),BALF为22.22%(10/45);而非肺癌组织、正常对照血浆、非肺癌患者BALF中未检出甲基化;血浆、BALF中甲基化改变与肿瘤组织甲基化状况显著相关(P<0.01)。结论血浆、BALF中PTEN基因异常甲基化改变的检测在肺癌的早期特异诊断等方面有一定的价值。 展开更多
关键词 肺癌 CPG岛甲基化 甲基化特异性聚合酶链反应 张力蛋白同源的磷酸酶基因
暂未订购
血管紧张素原基因CD235Met-Thr变异与高血压脑梗塞发病的相关性 被引量:4
18
作者 杜明艳 杜会山 +1 位作者 周桔 丁文军 《中国科学院研究生院学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期133-137,共5页
探讨汉族人群血管紧张素原(AGT)基因CD235Met-Thr变异与高血压合并脑梗塞发生的关系.采用突变基因分离聚合酶链反应(MS-PCR)方法检测82例高血压合并脑梗塞患者(BI)、67例单纯高血压患者(EH)和95例健康对照者(C)的M235T等位基因型.BI组AG... 探讨汉族人群血管紧张素原(AGT)基因CD235Met-Thr变异与高血压合并脑梗塞发生的关系.采用突变基因分离聚合酶链反应(MS-PCR)方法检测82例高血压合并脑梗塞患者(BI)、67例单纯高血压患者(EH)和95例健康对照者(C)的M235T等位基因型.BI组AGT基因T/T基因型频率和T等位基因频率(分别为0.720和0.811)显著高于C组(分别为0.516和0.700,P<0.05)和EH组(分别为0.537和0.716,P<0.05).结果提示,AGT基因CD235Met-Thr变异增加了汉族人群高血压合并脑梗塞发病的易感性. 展开更多
关键词 血管紧张素原基因 突变基因分离聚合酶链反应 高血压 脑梗塞
暂未订购
一株人血源猪链球菌的分离鉴定与毒力基因检测 被引量:11
19
作者 吕燕宁 李洁 +3 位作者 杜轶威 黎新宇 王全意 陈丽娟 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期599-603,共5页
目的对北京某医院就诊的一例疑似人感染猪链球菌病患者的血液来源菌株进行鉴定与毒力因子检测分析。方法将患者血液分离菌株接种哥伦比亚血琼脂平板,经革兰氏染色镜检、血清凝集试验、VITEK 2Compact微生物分析仪以及基质辅助激光解析... 目的对北京某医院就诊的一例疑似人感染猪链球菌病患者的血液来源菌株进行鉴定与毒力因子检测分析。方法将患者血液分离菌株接种哥伦比亚血琼脂平板,经革兰氏染色镜检、血清凝集试验、VITEK 2Compact微生物分析仪以及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测后,再用PCR技术检测猪链球菌种特异性基因(16S rRNA)和猪链球菌2型特异性荚膜多糖编码基因(cps2J)以及多个毒力基因:溶菌酶释放相关蛋白(mrp)、溶血素(sly)、细胞外蛋白因子(ef)、谷氨酸脱氢酶(gdh)、纤粘连蛋白结合蛋白(fbps)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(gapdh)的编码基因和毒力相关基因orf2。结果传统细菌鉴定方法和蛋白质谱技术以及核酸检测方法将这株患者血源性细菌分离株鉴定为猪链球菌2型,该菌株的毒力基因cps2J、sly、ef、gdh、fbps、gapdh和orf2的PCR检测均为阳性,mrp基因为阴性。结论该株人血源细菌分离株为猪链球菌2型sly+/ef+/mrp强毒株。 展开更多
关键词 猪链球菌 VITEK MALDI-TOF-MS 毒力基因 聚合酶链反应
暂未订购
杉木亲本自交系及其杂交种DNA甲基化和表观遗传变异 被引量:20
20
作者 洪舟 施季森 +4 位作者 郑仁华 杨立伟 陈孝丑 翁玉榛 黄金华 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第3期591-598,共8页
表观遗传调控包括DNA甲基化、染色质结构修饰和小分子RNA调控等机制可能在杂种优势形成过程中起重要作用。为了了解DNA甲基化对杉木杂交后代杂种优势的影响,本研究利用甲基化敏感随机扩增PCR技术(methylation-sensitive AP-PCR,MS-AP-PC... 表观遗传调控包括DNA甲基化、染色质结构修饰和小分子RNA调控等机制可能在杂种优势形成过程中起重要作用。为了了解DNA甲基化对杉木杂交后代杂种优势的影响,本研究利用甲基化敏感随机扩增PCR技术(methylation-sensitive AP-PCR,MS-AP-PCR),选取40对引物组合对杉木亲本自交及其亲本的杂交组合后代群体的基因组DNA进行了扩增和分析。结果表明:杉木基因组的DNA甲基化模式主要以内侧胞嘧啶的甲基化为主;6个正反交组合总的甲基化百分率相对于亲本的自交系而言,甲基化率呈减少的趋势;同一组合正反交组合后代之间在CCGG位点胞嘧啶的甲基化水平上无明显差异;6个杂交组合在CCGG的位点上的甲基化位点数明显低于它们的亲本自交子代。对3种甲基化的表达类型与性状表型值、杂种优势值、配合力进行的相关分析结果表明,检测位点外侧胞嘧啶半甲基化、内侧胞嘧啶甲基化位点变化与杉木树高,胸径和材积性状的杂种优势均成显著负相关,即杉木基因组外侧胞嘧啶半甲基化程度越低、内侧胞嘧啶甲基化位点越少,3个生长性状的杂种优势愈明显;而其他甲基化程度的指标与杂种优势之间的相关均没有达到统计学的显著水平。 展开更多
关键词 杉木 甲基化敏感随机扩增PCR 杂种优势
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部