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葛根素通过NLRP3-Caspase-1-GSDMD通路抑制高糖诱导的MIN6细胞焦亡 被引量:2
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作者 王璐 陈秋燕 +2 位作者 梁韬 黄仁彬 徐小惠 《中国医院药学杂志》 北大核心 2025年第11期1221-1227,共7页
目的:探究葛根素对高糖诱导MIN6细胞焦亡的调控作用及作用机制。方法:通过33 mmol·L-1葡萄糖刺激72 h建立MIN6细胞焦亡模型,使用焦亡抑制剂(necrosulfonamide,NSA)和焦亡诱导剂Nigericin及葛根素高、中、低浓度(100、50、25μmol&#... 目的:探究葛根素对高糖诱导MIN6细胞焦亡的调控作用及作用机制。方法:通过33 mmol·L-1葡萄糖刺激72 h建立MIN6细胞焦亡模型,使用焦亡抑制剂(necrosulfonamide,NSA)和焦亡诱导剂Nigericin及葛根素高、中、低浓度(100、50、25μmol·L-1)处理细胞,将MIN6细胞分成不同处理组,CCK-8法检测细胞活力;试剂盒测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和焦亡相关炎症因子白介素-18(IL-18)、白介素-1β(IL-1β)的表达;流式细胞技术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)表达量;免疫印迹法检测焦亡相关蛋白IL-18、IL-1β、Caspase-1、GSDMD及NLRP3的表达;免疫荧光法检测炎症小体NLRP3的表达。结果:高糖及焦亡诱导剂可显著降低MIN6细胞活力,升高细胞的炎症因子和ROS水平,上调焦亡相关蛋白及NLRP3炎症小体的表达,引起MIN6细胞焦亡;经葛根素及焦亡抑制剂处理细胞后,MIN6细胞活力升高,LDH、IL-18、IL-1β水平及细胞内ROS含量下降,焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-18、IL-1β及NLRP3炎症小体表达下调。结论:葛根素可改善高糖诱导的MIN6细胞焦亡,可能的机制是通过抑制NLRP3-Caspase-1-GSDMD通路实现。 展开更多
关键词 葛根素 min6细胞 2型糖尿病 细胞焦亡 NLRP3炎症因子
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维生素C、E对邻苯二甲酸二酯所致的胰岛MIN6β细胞毒性损伤的保护作用
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作者 赵紫婷 孙静 +1 位作者 竺晶 何继瑞 《河北医药》 2025年第9期1490-1493,共4页
目的对邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯[di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]所致的胰岛MIN6β细胞毒性损伤进行维生素C(Vitamin C,Vit C)和维生素E(Vitamin E,Vit E)干预,研究其干预效果及可能机制。方法研究对象为小鼠胰岛MIN6β细胞株,分为对... 目的对邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯[di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]所致的胰岛MIN6β细胞毒性损伤进行维生素C(Vitamin C,Vit C)和维生素E(Vitamin E,Vit E)干预,研究其干预效果及可能机制。方法研究对象为小鼠胰岛MIN6β细胞株,分为对照组、DEHP组、干预组、Vit C+Vit E组。对照组采用0.1%二甲基亚砜(DMSO)处理;DEHP组分别采用0.25、0.5、1.0、2.0 mmol/L的DEHP作用;干预组采用0.25、0.5、1.0、2.0 mmol/L的DEHP与Vit C(50μmol/L)和Vit E(50μmol/L)共同作用。Vit C+Vit E组采用50μmol/L的Vit C和50μmol/L Vit E共同作用。干预时间为16、48、72 h。MTT实验分析细胞生长活力,流式细胞计数测定细胞凋亡率、细胞周期。结果与对照组比较,干预组细胞生长活力在48 h无明显变化(P>0.05),在16、72 h仍然偏低(P<0.05);干预组细胞凋亡率及G0/G1期细胞比例仍然偏高(P<0.05)。与DEHP组比较,干预组(0.25、0.5、1.0 mmol/L DEHP)胰岛MIN6β细胞生长活力在16、48及72 h均明显上升(P<0.05)。干预组(2.0 mmol/L DEHP)胰岛MIN6β细胞生长活力在16 h上升(P<0.05),在48、72 h无明显变化(P>0.05);干预组细胞凋亡率明显下降(P<0.01);干预组胰岛MIN6β细胞G0/G1期细胞比例明显降低(P<0.01),G2/M期与S期细胞比例明显升高(P<0.01)。结论Vit C和Vit E对DEHP引起的细胞增殖抑制、细胞凋亡及细胞周期阻滞有一定的保护作用。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯 胰岛min6β细胞 维生素C 维生素E
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生长分化因子15减轻高糖诱导小鼠胰岛β细胞MIN6凋亡的研究
3
作者 李欢 吴梦琪 +2 位作者 文志强 邓华菲 罗顺蓉 《中国现代医生》 2025年第23期32-35,共4页
目的探讨生长分化因子15(growth differentiation factor 15,GDF15)对高糖条件下MIN6细胞凋亡和胰岛素分泌的影响。方法将小鼠胰岛β细胞株(MIN6细胞)分为4组:NG组、NG+rGDF15组、HG组、HG+rGDF15组。观察比较4组细胞形态,检测细胞凋亡... 目的探讨生长分化因子15(growth differentiation factor 15,GDF15)对高糖条件下MIN6细胞凋亡和胰岛素分泌的影响。方法将小鼠胰岛β细胞株(MIN6细胞)分为4组:NG组、NG+rGDF15组、HG组、HG+rGDF15组。观察比较4组细胞形态,检测细胞凋亡率,Bcl-2、Bax蛋白表达及胰岛素水平。结果HG组细胞损伤显著,表现为促凋亡蛋白Bax表达上调及抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降,细胞凋亡率明显增加,胰岛素分泌量显著降低(P<0.01)。重组GDF15蛋白干预可改善MIN6细胞形态,Bax蛋白相对表达量明显降低,Bcl-2蛋白相对表达量明显升高,细胞凋亡率显著降低,胰岛素分泌量有所提高(P<0.01)。结论GDF15可减轻高糖环境诱导的MIN6细胞损伤。 展开更多
关键词 高糖 min6细胞 生长分化因子15 Β细胞
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琥珀酸受体SUCNR1对Min6细胞胰岛素分泌功能的影响
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作者 杨国伟 张金金 +1 位作者 韩亚凡 吴英杰 《山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报》 2025年第9期513-519,共7页
目的 探讨琥珀酸受体SUCNR1对小鼠胰岛素瘤Min6细胞胰岛素分泌功能的影响。方法 采用体外细胞培养模型,将Min6细胞分为实验组(使用20μmol/L SUCNR1拮抗剂7a处理)和对照组(未处理),分别使用2.8、5.6、11.2和16.8 mmol/L葡萄糖刺激2组细... 目的 探讨琥珀酸受体SUCNR1对小鼠胰岛素瘤Min6细胞胰岛素分泌功能的影响。方法 采用体外细胞培养模型,将Min6细胞分为实验组(使用20μmol/L SUCNR1拮抗剂7a处理)和对照组(未处理),分别使用2.8、5.6、11.2和16.8 mmol/L葡萄糖刺激2组细胞。通过检测2组细胞胰岛素分泌水平,以及葡萄糖刺激胰岛素分泌过程中关键基因和蛋白质表达的变化,评估SUCNR1对Min6细胞胰岛素分泌功能的影响,并初步探索其机制。结果 与对照组相比,实验组在高浓度葡萄糖(11.2、16.8 mmol/L)刺激下的胰岛素分泌水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR, RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹法结果显示,7a处理上调了胰岛素合成相关基因(如Neurod1)的表达,而编码葡萄糖转运蛋白、糖酵解及三羧酸循环关键酶的基因和胰岛素囊泡分泌相关基因的表达均无显著变化。结论 SUCNR1可能通过调节胰岛素合成相关基因的表达,影响Min6细胞的胰岛素分泌能力。 展开更多
关键词 琥珀酸受体 min6细胞 胰岛素分泌
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棕榈酸诱导胰岛素瘤细胞MIN6细胞凋亡 被引量:28
5
作者 王威 曹翠平 +3 位作者 陈颖 张丹 韩玲玲 刘国良 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2010年第4期401-405,共5页
目的探讨蛋白激酶B及其磷酸化在棕榈酸诱导的胰岛素瘤细胞MIN6凋亡中的作用。方法胰岛素瘤细胞MIN6分别在含有不同棕榈酸浓度(0~0.5 mmol/L)的DMEM高糖培养基中孵育,培养基中加或不加PI3K/PKB的阻断剂LY294002;TUNEL法观察凋亡并计数... 目的探讨蛋白激酶B及其磷酸化在棕榈酸诱导的胰岛素瘤细胞MIN6凋亡中的作用。方法胰岛素瘤细胞MIN6分别在含有不同棕榈酸浓度(0~0.5 mmol/L)的DMEM高糖培养基中孵育,培养基中加或不加PI3K/PKB的阻断剂LY294002;TUNEL法观察凋亡并计数凋亡率;透射电镜观察MIN6细胞超微结构;Western blot检测蛋白激酶B(PKB)及其磷酸化蛋白p-PKB(Ser473)的表达;RT-PCR法检测BAX、BCL-2mRNA的表达。结果MIN6细胞凋亡随着培养基中棕榈酸浓度的增加而增加,LY294002可增强其凋亡程度;棕榈酸抑制MIN6细胞的PKB在473位丝氨酸位点的磷酸化,抑制BCL-2mRNA的表达并促进BAXmRNA的表达。结论棕榈酸可能通过抑制PKB磷酸化的激活而诱导糖尿病时胰岛β细胞的凋亡。 展开更多
关键词 棕榈酸 蛋白激酶B 胰岛素瘤细胞株min6 凋亡
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IFN-γ和TNF-α联合对MIN6细胞caspase-3活化的影响 被引量:4
6
作者 曹朝晖 覃剑 +5 位作者 董世访 郑权友 杨菲 谭雨龙 尹卫东 李桂清 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期17-20,共4页
目的研究细胞因子IFN-γ和TNF-α对小鼠胰岛瘤细胞株MIN6中caspase-3活化的影响。方法用IFN-γ、TNF-α单独或联合刺激MIN6细胞后,Western blot分析比较caspase-3活化的情况,并用免疫细胞化学法检测了其活化产物cleaved caspase-3的产生... 目的研究细胞因子IFN-γ和TNF-α对小鼠胰岛瘤细胞株MIN6中caspase-3活化的影响。方法用IFN-γ、TNF-α单独或联合刺激MIN6细胞后,Western blot分析比较caspase-3活化的情况,并用免疫细胞化学法检测了其活化产物cleaved caspase-3的产生;酶学比色法测定细胞因子IFN-γ和TNF-α联合作用活化caspase-3的时间依赖性以及MTT法比较caspase-3特异性的抑制剂AC-DEVD预处理前后MIN6细胞活性的变化。结果 IFN-γ或TNF-α单独作用不能活化caspase-3,但两者联合作用24 h后可检测到caspase-3活化裂解片段的产生;Caspase-3的活性随着IFN-γ和TNF-α处理时间的增加而升高,呈现明显的时间依赖性;抑制caspase-3的活化可有效改善MIN6细胞的活性,并且呈剂量依赖性。结论 IFN-γ和TNF-α对MIN6细胞活性的抑制作用与caspase-3的活化密切相关。 展开更多
关键词 IFN-Γ TNF-Α min6细胞 CASPASE-3 I型糖尿病
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马尾松花粉酯化多糖对MIN6细胞胰岛素分泌和[Ca^(2+)]_i的影响 被引量:6
7
作者 刘月冉 冯潍 耿越 《药物生物技术》 CAS 2013年第2期137-140,共4页
探讨马尾松花粉硫酸酯化多糖对MIN6细胞胰岛素分泌和[Ca2+]i的作用。选取60%乙醇沉淀的马尾松花粉多糖(PPM60),氯磺酸-吡啶法得到硫酸酯化物(SPPM60);检测PPM60及SPPM60刺激后MIN6细胞胰岛素分泌量和[Ca2+]i的变化。观察钙离子抑制剂维... 探讨马尾松花粉硫酸酯化多糖对MIN6细胞胰岛素分泌和[Ca2+]i的作用。选取60%乙醇沉淀的马尾松花粉多糖(PPM60),氯磺酸-吡啶法得到硫酸酯化物(SPPM60);检测PPM60及SPPM60刺激后MIN6细胞胰岛素分泌量和[Ca2+]i的变化。观察钙离子抑制剂维拉帕米和低分子肝素的影响。PPM60对MIN6细胞胰岛素分泌几乎没有影响,SPPM60能显著促进胰岛素的分泌和[Ca2+]i升高(P<0.05)。维拉帕米和低分子肝素钠均可以降低SPPM60引起的胰岛素分泌增加,但差异不显著。同样两者均可显著性降低SPPM60引起的[Ca2+]i的升高(P<0.05)。维拉帕米可以明显抑制3.6 mg/mL葡萄糖的促胰岛素分泌(P<0.05)和升高[Ca2+]i的作用(P<0.01)。SPPM60可以单独促进胰岛素的分泌,其作用机制与葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)有一定相似性,但同时存在其他的信号通路。 展开更多
关键词 马尾松 花粉 酯化多糖 min6细胞 胰岛素 [CA2+]I
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LIGHT协同IFN-γ通过激活STAT1诱导MIN6细胞凋亡 被引量:3
8
作者 曹朝晖 胡聪 +3 位作者 吴颛 罗应 李亚林 胡小波 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期843-849,共7页
目的探讨LIGHT(lymphotoxin like,exhibits inducible expression and competes with HSV glycoprotein D for HVEM,a receptor expressed by T lymphocytes)协同γ-干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡... 目的探讨LIGHT(lymphotoxin like,exhibits inducible expression and competes with HSV glycoprotein D for HVEM,a receptor expressed by T lymphocytes)协同γ-干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡的作用及机制。方法 LIGHT、IFN-γ单独或联合处理MIN6细胞。分别运用CCK-8法、流式细胞术检测MIN6细胞增殖与凋亡率。Western blot检测信号转导和转录激活子1(signal transducers and activators of transcription 1,STAT1)及STAT1的磷酸化水平,以及凋亡与增殖相关基因Bcl-xL、Bax和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。MIN6细胞经STAT1特异的抑制剂弗达拉滨(fludarabine,Flu)预处理后再用LIGHT和IFN-γ联合处理,Western blot检测STAT1、p-STAT1、Bcl-xL、Bax的变化,CCK-8法检测MIN6细胞的增殖能力。结果 LIGHT协同IFN-γ呈时间依赖性抑制MIN6细胞增殖,诱导细胞凋亡,降低抗凋亡基因Bcl-xL表达、增加促凋亡基因Bax表达,对PCNA表达无明显影响;LIGHT促进IFN-γ激活STAT1,而STAT1抑制剂fludarabine抑制STAT1活化后,Bcl-xL表达上调,Bax表达下调,MIN6细胞增殖率上升。结论 LIGHT协同IFN-γ通过激活STAT1调节Bcl-xL、Bax表达而诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡。 展开更多
关键词 LIGHT IFN-Γ STAT1 细胞凋亡 min6细胞
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胰岛β细胞株INS-1和MIN6有关糖毒性的比较研究 被引量:3
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作者 王威 张丹 +3 位作者 陈颖 曹翠萍 韩玲玲 刘国良 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第13期1940-1942,共3页
目的探讨INS-1和MIN6细胞株在有关糖毒性研究的不同表型。方法胰岛素瘤细胞株INS-1和MIN-6分别在含5和25mM糖浓度的无血浆培养基中孵育24h。MTT法测定细胞活性,细胞凋亡通过annexinV-PI双染,流式细胞仪检测分析。结果 INS-1细胞在高糖... 目的探讨INS-1和MIN6细胞株在有关糖毒性研究的不同表型。方法胰岛素瘤细胞株INS-1和MIN-6分别在含5和25mM糖浓度的无血浆培养基中孵育24h。MTT法测定细胞活性,细胞凋亡通过annexinV-PI双染,流式细胞仪检测分析。结果 INS-1细胞在高糖条件下细胞活性明显降低,细胞凋亡率、死亡率明显增加,而MIN6细胞在高糖环境下细胞活性增加,凋亡率下降,死亡率无明显变化。结论 MIN6细胞比INS-1细胞能耐受更高的糖毒性。 展开更多
关键词 胰岛Β细胞 INS-1 细胞 min6细胞 糖毒性
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IFN-γ和TNF-α协同对MIN6细胞凋亡的影响 被引量:2
10
作者 董世访 曹朝晖 +4 位作者 江伟凡 李桂清 姜曼 胡小波 许桂莲 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期191-193,199,共4页
目的研究细胞因子IFN-γ和TNF-α协同对小鼠胰岛瘤细胞株MIN6凋亡的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察比较了IFN-γ、TNF-α单独及其组合对MIN6细胞活性的影响,并进一步通过光学显微镜和激光共聚焦显微镜从形态学上对其毒性... 目的研究细胞因子IFN-γ和TNF-α协同对小鼠胰岛瘤细胞株MIN6凋亡的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察比较了IFN-γ、TNF-α单独及其组合对MIN6细胞活性的影响,并进一步通过光学显微镜和激光共聚焦显微镜从形态学上对其毒性作用进行了验证,最后通过流式细胞术区分了其对MIN6细胞的凋亡和坏死的作用。结果 IFN-γ和TNF-α单独作用对MIN6细胞活性有轻微影响,但两者组合对MIN6细胞的活性具有显著的抑制作用,并且早期凋亡的细胞百分率明显高于IFN-γ单独处理组(69.91%&13.03%),而坏死或晚期凋亡细胞的百分率两组之间没有差异(2.14%&2.41%)。结论IFN-γ和TNF-α协同可促进MIN6细胞的凋亡。 展开更多
关键词 IFN-Γ TNF-Α min6细胞 凋亡
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NADPH氧化酶在高脂诱导的MIN6胰岛β细胞损伤中的作用 被引量:2
11
作者 李晶 陈丹 +1 位作者 周宇 鲍翠玉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1317-1321,共5页
目的探讨NADPH氧化酶在高脂诱导的MIN6胰岛β细胞损伤中的作用。方法不同浓度(0.1、0.3、0.5、0.8mmol·L^(-1))高脂刺激MIN6胰岛β细胞(24、48、72、96 h),MTT法检测细胞增殖情况;免疫印迹法检测细胞内p22^(phox)、p47^(phox)、p67... 目的探讨NADPH氧化酶在高脂诱导的MIN6胰岛β细胞损伤中的作用。方法不同浓度(0.1、0.3、0.5、0.8mmol·L^(-1))高脂刺激MIN6胰岛β细胞(24、48、72、96 h),MTT法检测细胞增殖情况;免疫印迹法检测细胞内p22^(phox)、p47^(phox)、p67^(phox)以及gp91^(phox)等NADPH氧化酶亚基的表达水平及凋亡相关蛋白(Bcl-2及Bax)的表达水平。结果 0.5mmol·L^(-1)高脂刺激MIN6胰岛细胞48 h时,细胞增殖率出现明显下降;p22^(phox)、p47^(phox)、p67^(phox)以及gp91^(phox)等NADPH氧化酶亚基和Bax的表达水平明显升高(P<0.05),而Bcl-2表达水平明显降低(P<0.05);NADPH氧化酶抑制剂diphenyliodonium(DPI,10μmol·L^(-1))预处理后并高脂刺激MIN6胰岛β细胞48 h,与高脂刺激组相比,DPI处理组细胞Bcl-2表达明显上升(P<0.05),Bax表达明显下调(P<0.05)。结论 NADPH氧化酶活性对高脂引起的MIN6胰岛β细胞损伤的防治有重要意义。 展开更多
关键词 NADPH氧化酶 高脂 min6 胰岛Β细胞 Bcl-2 Bax
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印楝素对min6细胞增殖及胰岛素分泌的影响 被引量:2
12
作者 张玲 王得华 +1 位作者 马义 徐汉虹 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期25-29,共5页
【目的】研究印楝素对min6细胞增殖、葡萄糖摄取及胰岛素分泌的影响,并探讨其作用机制。【方法】不同浓度印楝素处理min6细胞48 h,检测细胞增殖量。在5.5和25.0 mmol·L^(-1)葡萄糖条件下,检测印楝素处理细胞的葡萄糖摄取水平,胰岛... 【目的】研究印楝素对min6细胞增殖、葡萄糖摄取及胰岛素分泌的影响,并探讨其作用机制。【方法】不同浓度印楝素处理min6细胞48 h,检测细胞增殖量。在5.5和25.0 mmol·L^(-1)葡萄糖条件下,检测印楝素处理细胞的葡萄糖摄取水平,胰岛素ELISA检测试剂盒检测细胞胰岛素的分泌。【结果】与对照组相比,在5.5和25.0mmol·L^(-1)葡萄糖条件下,印楝素均表现促进细胞增殖活性。印楝素处理下,与25.0 mmol·L^(-1)葡萄糖条件相比,5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖表现出更显著地促进葡萄糖摄取和胰岛素分泌的作用。【结论】印楝素可能通过调控葡萄糖水平影响胰岛素的分泌。 展开更多
关键词 印楝素 min6细胞 细胞增殖 胰岛素分泌 ELISA检测
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棕榈酸对小鼠胰岛β细胞瘤MIN6细胞凋亡的影响及其机制探讨 被引量:2
13
作者 张晶晶 孔凡青 +1 位作者 李晓晶 冯若鹏 《山东医药》 CAS 2013年第2期29-31,共3页
目的观察棕榈酸对小鼠胰岛β细胞瘤MIN6细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法培养于含0.5 mM棕榈酸的培养基中的MIN6细胞为实验组,仅含5%BSA的培养基培养的MIN6细胞为对照组,采用流式细胞术和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测两组M... 目的观察棕榈酸对小鼠胰岛β细胞瘤MIN6细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法培养于含0.5 mM棕榈酸的培养基中的MIN6细胞为实验组,仅含5%BSA的培养基培养的MIN6细胞为对照组,采用流式细胞术和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测两组MIN6细胞凋亡情况。实验组于培养12(实验1组)、24(实验2组)、36(实验3组)h后,对照组于培养36 h后,采用Western blot法检测MIN6细胞中的凋亡诱导因子(AIF)及survivin。构建survivin过表达载体并转染实验组细胞,36 h后,同前法检测转染及未转染survivin过表达载体的MIN6细胞在含棕榈酸培养基中的凋亡情况。结果培养36 h后实验组MIN6细胞凋亡率为30.27%±3.15%,明显高于对照组的4.61%±0.51%(P<0.01)。实验1、2、3组MIN6细胞核中的AIF的相对表达量高于对照组,sur-vivin相对表达量低于对照组(P均<0.05)。棕榈酸培养36 h后,转染survivin过表达载体的MIN6细胞凋亡率为11.6%±2.09%,低于未转染者的31.27%±2.97%(P<0.01)。结论棕榈酸可诱导小鼠胰岛β细胞瘤MIN6细胞凋亡,可能与下调survivin表达和激活AIF凋亡信号通路有关;survivin表达上调可抑制棕榈酸诱导的MIN6细胞凋亡。 展开更多
关键词 棕榈酸 胰岛β细胞瘤min6细胞 生存素 凋亡诱导因子 细胞凋亡
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Prdx Ⅴ在链脲佐菌霉素诱导MIN6细胞凋亡过程中的调控作用 被引量:1
14
作者 王闯 孙虎男 金成浩 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第2期202-209,共8页
Prdx Ⅴ(peroxiredoxin Ⅴ)是过氧化物还原酶家族中一员,可有效地保护细胞免受氧化应激造成的氧化损伤。该文主要阐明了链脲佐菌霉素(streptozotocin,STZ)诱导MIN6小鼠胰岛瘤细胞凋亡的分子机制及Prdx Ⅴ在这一过程中的调控作用。该研... Prdx Ⅴ(peroxiredoxin Ⅴ)是过氧化物还原酶家族中一员,可有效地保护细胞免受氧化应激造成的氧化损伤。该文主要阐明了链脲佐菌霉素(streptozotocin,STZ)诱导MIN6小鼠胰岛瘤细胞凋亡的分子机制及Prdx Ⅴ在这一过程中的调控作用。该研究利用STZ处理MIN6小鼠胰岛瘤细胞,通过MTT法、荧光显微镜照相、流式细胞术、蛋白质免疫印迹分析等方法检测细胞存活率、细胞内活性氧类(reactive oxygen species,ROS)及细胞凋亡水平、一氧化氮(nitric oxide,NO)含量、凋亡相关蛋白质及相关信号通路蛋白质水平。结果表明,STZ主要通过激活p38信号通路调控NO的生成,引起MIN6细胞发生凋亡,而与细胞内增加的ROS无内在联系。与此同时,STZ可致使细胞内Prdx Ⅴ蛋白质水平明显上升,当Prdx Ⅴ基因沉默之后,发现STZ诱导的Prdx Ⅴ缺失型MIN6细胞凋亡率明显高于对照组,提示Prdx Ⅴ对STZ诱导MIN6细胞凋亡过程具有一定的调控作用。该研究结果揭示了STZ诱导MIN6细胞凋亡分子机制,同时初步探析了Prdx Ⅴ对STZ引起MIN6胰岛细胞凋亡的调控作用,为研究氧化应激引起胰岛细胞损伤及死亡机制提供了一定的理论基础。 展开更多
关键词 链脲佐菌霉素 min6细胞 一氧化氮 细胞凋亡 P38 Prdx
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胰岛β细胞株MIN6微囊胰岛素释放反应的研究 被引量:1
15
作者 王文敬 王竹平 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 2000年第2期115-116,共2页
关键词 胰岛素释放反应 糖尿病 min6微囊 胰岛Β细胞株
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胰高血糖素样肽-1抑制软脂酸诱导的MIN6细胞凋亡
16
作者 姜苏原 李小英 +1 位作者 宁光 王卫庆 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1215-1217,共3页
目的探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对软脂酸(PA)诱导的MIN6细胞凋亡及分泌胰岛素功能的影响。方法传代培养处于对数生长期的胰岛β细胞MIN6细胞株分为三组。PA组:加入0.5 mmol/L PA孵育36 h;GLP-1+PA组:加入10 nmol/LGLP-1,12 h后再加入0... 目的探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对软脂酸(PA)诱导的MIN6细胞凋亡及分泌胰岛素功能的影响。方法传代培养处于对数生长期的胰岛β细胞MIN6细胞株分为三组。PA组:加入0.5 mmol/L PA孵育36 h;GLP-1+PA组:加入10 nmol/LGLP-1,12 h后再加入0.5 mmol/L PA继续孵育36 h,期间每12 h加1次相同浓度的GLP-1;对照组:未加GLP-1或PA,其他培养条件相同。MTT比色法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡百分率;放射免疫分析法测定MIN6细胞胰岛素分泌量。结果PA组MIN6细胞凋亡率为(39.41±10.16)%,细胞活力较对照组减少25.8%(P<0.05);GLP-1+PA组MIN6细胞凋亡率为(32.80±8.06)%,细胞活力较PA组增强13.88%(P<0.05),其高糖和低糖状态下胰岛素分泌均明显高于PA组(P<0.05)。结论GLP-1可以抑制PA诱导的MIN6细胞凋亡,同时改善细胞胰岛素分泌功能。 展开更多
关键词 胰高血糖素样肽-1 软脂酸 凋亡 min6细胞 胰岛素
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小鼠Reg3α基因cDNA成功转染MIN6细胞株并促其生长
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作者 崔巍 黄葶 +1 位作者 施秉银 LIU Jun-li 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期173-176,共4页
目的建立一过表达Reg3α cDNA的胰岛MIN6细胞株,研究其在低葡萄糖环境中的生长特性。方法将全长Reg3α cDNA插入到质粒载体pcDNA3.1中,并将Reg3α-pcDNA3.1和pcDNA3.1空载体用脂质体法转染胰岛MIN6细胞,分别获得Reg3α cDNA过表... 目的建立一过表达Reg3α cDNA的胰岛MIN6细胞株,研究其在低葡萄糖环境中的生长特性。方法将全长Reg3α cDNA插入到质粒载体pcDNA3.1中,并将Reg3α-pcDNA3.1和pcDNA3.1空载体用脂质体法转染胰岛MIN6细胞,分别获得Reg3α cDNA过表达和空载体pcDNA3.1MIN6细胞。应用Real—time PCR和Western blot方法检测这两种细胞在低葡萄糖培养基中Reg3α的表达,并用MTT法测定Reg3α过表达对MIN6细胞生长的影响。结果有三株Reg3α转染的细胞株显示Reg3α的高表达,在空载体转染的MIN6细胞株中未检测到Reg3α的表达,Reg3α mRNA和蛋白水平分别平均升高6~10倍。用Western blot检测发现Reg3α蛋白释放到培养液。采用MTT法测定,与空载体转染的MIN6细胞株相比,三株Reg3α稳定转染细胞株,7d后细胞数目升高2倍。结论本研究结果表明已成功地建立了过表达Reg3α cDNA的胰岛MIN6细胞。Reg3α可能具有内分泌作用,促进胰岛细胞生长。 展开更多
关键词 min6细胞株 胰岛 Reg基因 转染 生长
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应用全反射荧光显微镜对MIN6细胞分泌过程的动态研究
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作者 周建平 李昱骥 +1 位作者 李继光 寺川进 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期216-218,共3页
目的 :通过追踪胰腺 β细胞株MIN6细胞内单个分泌囊泡的运动轨迹研究胰岛素的动态分泌过程和影响因素。方法 :应用吖啶橙转染MIN6细胞 ,通过全反射荧光显微镜观察细胞膜和靠近胞膜 80nm区域内的单个囊泡运动的动态过程。结果 :在高浓度... 目的 :通过追踪胰腺 β细胞株MIN6细胞内单个分泌囊泡的运动轨迹研究胰岛素的动态分泌过程和影响因素。方法 :应用吖啶橙转染MIN6细胞 ,通过全反射荧光显微镜观察细胞膜和靠近胞膜 80nm区域内的单个囊泡运动的动态过程。结果 :在高浓度氯化钾刺激下 ,附着在细胞膜的分泌囊泡发生融合和释放 ,此分泌过程大约在1min达到高峰 ,并可持续到 4~ 5min。在高浓度葡萄糖激发下 ,前 1~ 2min主要由原来附着在细胞膜的分泌囊泡融合和释放 ,5~ 6min以后由新融合的囊泡分泌。结论 :在高浓度氯化钾刺激下 ,主要引发第一相分泌 ,在高浓度葡萄糖的刺激下 。 展开更多
关键词 胰腺细胞 分泌 全反射荧光显微镜 min6细胞
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琼脂糖/聚苯乙烯磺酸微囊化胰β细胞株MIN6体外胰岛素释放反应的研究
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作者 王文敬 王竹平 《生物医学工程与临床》 CAS 1998年第3期144-148,共5页
本研究应用琼脂糖/聚苯乙烯磺酸(PSSa)微囊化胰β细胞株MIN6作为一种新型人工生物胰岛,采用静态培养胰岛素释放试验和灌流实验,探讨其在体外糖刺激时胰岛素的释放反应.静态培养胰岛素释放试验结果显示,低糖浓度(3.3mmol/L)时胰岛素的分... 本研究应用琼脂糖/聚苯乙烯磺酸(PSSa)微囊化胰β细胞株MIN6作为一种新型人工生物胰岛,采用静态培养胰岛素释放试验和灌流实验,探讨其在体外糖刺激时胰岛素的释放反应.静态培养胰岛素释放试验结果显示,低糖浓度(3.3mmol/L)时胰岛素的分泌释放量为8.824±0.698μU/(100microbeads·h);高糖浓度(16.7mmol/L)刺激时胰岛素的分泌释放量为28.045±4167μU/(100microbeads·h),约为低糖浓度时的3.2倍,有显著性差异(P<0.05).灌流实验结果显示,用16.7mmol/L糖浓度刺激,胰岛素的释放量逐渐增加,约在高糖刺激后50分钟时胰岛素的释放量达到高峰,约为38.66μU/(100microbeads·h);将糖浓度改变为3.3mmol/L,胰岛素的释放量逐渐下降.实验结果表明,琼脂糖/聚苯乙烯磺酸免疫隔离膜微囊化胰β细胞株MIN6作为一种新型人工生物胰岛,具有良好的糖刺激胰岛素释放反应,为进一步进行实验及临床移植的深入研究提供了基本的实验依据. 展开更多
关键词 琼脂糖/聚苯乙烯磺酸 微囊化 胰β细胞株min6 胰岛素释放反应
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龙牙楤木总皂苷通过调控miR-149-5p对高糖诱导的MIN6细胞损伤的影响及机制
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作者 周璇 胡苏华 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期2530-2534,共5页
目的探讨龙牙楤木总皂苷(Aralosides)通过调控miR-149-5p对高糖诱导的MIN6细胞损伤的影响及机制研究。方法体外培养小鼠胰岛素瘤细胞MIN6,采用浓度为25 mmol/L葡萄糖诱导建立细胞模型,将细胞分为对照(Control)组、高糖(HG)组、高糖+龙... 目的探讨龙牙楤木总皂苷(Aralosides)通过调控miR-149-5p对高糖诱导的MIN6细胞损伤的影响及机制研究。方法体外培养小鼠胰岛素瘤细胞MIN6,采用浓度为25 mmol/L葡萄糖诱导建立细胞模型,将细胞分为对照(Control)组、高糖(HG)组、高糖+龙牙楤木总皂苷低、中、高剂量(HG+Aralosides-L、HG+Aralosides-M、HG+Aralosides-H)组、高糖+miR-NC(HG+miR-NC)组、高糖+miR-149-5p(HG+miR-149-5p)组、高糖+龙牙楤木总皂+anti-miR-NC(HG+Aralosides+anti-miR-NC)组和高糖+龙牙楤木总皂+anti-miR-149-5p(HG+Aralosides+anti-miR-149-5p)组。通过CCK8检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;定量反转录(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测miR-149-5p表达。结果与Control组相比,HG组明显降低细胞活力、Bcl-2蛋白表达、SOD活性、GSH-Px活性、miR-149-5p表达,增加细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量(均P<0.05)。与HG组相比,HG+Aralosides-L组、HG+Aralosides-M组、HG+Aralosides-H组明显增加细胞活力、Bcl-2蛋白表达、SOD活性、GSH-Px活性、miR-149-5p表达,明显降低细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量(均P<0.05)。与HG+miR-NC组相比,HG+miR-149-5p组明显增加细胞活力、Bcl-2蛋白表达、SOD活性、GSH-Px活性、miR-149-5p表达,明显降低细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量(均P<0.05)。与HG+Aralosides+anti-miR-NC组相比,HG+Aralosides+anti-miR-149-5p组明显降低细胞活力、Bcl-2蛋白表达、SOD活性、GSH-Px活性、miR-149-5p表达,明显增加细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量(均P<0.05)。结论龙牙楤木总皂苷通过调控miR-149-5p减缓高糖诱导的MIN6细胞的凋亡和氧化应激,并促进细胞的增殖。 展开更多
关键词 龙牙楤木总皂苷 miR-149-5p min6细胞 凋亡 氧化应激
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