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MEIS1基因甲基化检测在膀胱癌尿液无创诊断中的价值
1
作者 张振威 佟智超 +3 位作者 王剑威 李浩楠 胡胜 王子琦 《医学新知》 2025年第5期520-526,共7页
目的分析尿液髓系生态型病毒插入位点1(myeloid ecotropic viral integration site 1,MEIS1)基因甲基化在膀胱癌早期诊断中的应用价值。方法选取2023年8月至2024年5月哈尔滨医科大学附属肿瘤医院膀胱癌患者及非肿瘤患者作为建模队列,使... 目的分析尿液髓系生态型病毒插入位点1(myeloid ecotropic viral integration site 1,MEIS1)基因甲基化在膀胱癌早期诊断中的应用价值。方法选取2023年8月至2024年5月哈尔滨医科大学附属肿瘤医院膀胱癌患者及非肿瘤患者作为建模队列,使用尿液及组织样本,联合癌症基因组图谱(TCGA)、基因表达综合数据库(GEO)中数据进行基因甲基化差异性分析,确定膀胱癌特异性甲基化标志物。选取2024年6月至2024年10月的膀胱癌患者及非肿瘤患者作为验证队列,通过与术后病理结果比较分析MEIS1的诊断价值。结果共纳入297例研究对象,其中建模队列中膀胱癌患者94例、非肿瘤患者83例,验证队列中膀胱癌患者90例、非肿瘤患者30例。建模队列、TCGA和GEO数据分析筛选出HOXA9、CRTR、TWIST1、MEIS1、IFR85个基因,以甲基化背景低且癌旁、癌组织甲基化差异程度高为标准进一步筛选(AUC≥0.9),确定MEIS1基因作为验证位点。验证队列中,MEIS1基因甲基化区分膀胱癌和正常患者的准确性、敏感度、特异度分别为89.2%、91.1%、83.3%,与金标准的阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05)。结论尿液MEIS1基因甲基化检测在膀胱癌的无创尿液诊断领域具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 膀胱癌 甲基化 液体活检 meis1基因 无创诊断
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HOXA10的辅因子Meis1、Pbx1在人子宫内膜中的表达 被引量：11
2
作者 徐蓓 钱坤 朱桂金 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期665-670,共6页
目的:探讨HOXA10的两个辅因子Pbx1和Meis1在人正常子宫内膜中的表达及其变化规律。方法:采用原位杂交进行组织学定位,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)进行半定量,在mRNA水平上检测人正常月经周期子宫内膜中Pbx1和Meis1的表达水平。结果:Meis... 目的:探讨HOXA10的两个辅因子Pbx1和Meis1在人正常子宫内膜中的表达及其变化规律。方法:采用原位杂交进行组织学定位,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)进行半定量,在mRNA水平上检测人正常月经周期子宫内膜中Pbx1和Meis1的表达水平。结果:Meis1在子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞均有表达,其中腺上皮细胞的表达高于基质细胞;增生期Meis1仅有弱表达,分泌期显著增加(P<0.05),以分泌中期表达最强(P<0.05)。在整个月经周期中并未检测到Pbx1的表达。结论:Meis1作为HOXA10的辅因子,在人正常子宫内膜中规律性的表达,可能对HOXA10介导的胚胎着床发挥着重要作用。 展开更多
关键词 meis1 PBX1 HOXA10 子宫内膜 mRNA 着床
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利用CRISPR/Cas9技术构建敲除MEIS2基因的HEK293T人胚肾细胞系 被引量：11
3
作者 卢利莎 白杨 +9 位作者 刘鑫 王洪涛 高洁 杨亦青 苏培 刘翠翠 王钰 张磊升 熊涛 周家喜 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2015年第4期535-541,共7页
CRISPR/Cas9系统作为一种新型的基因组编辑技术,利用人工设计的向导RNA(singleguide RNA,sg RNA)介导外源表达的Cas9蛋白与基因组靶点特异性结合以实现对基因组DNA的特异性切割,切割后的基因组DNA通过非同源末端连接或同源重组的方式进... CRISPR/Cas9系统作为一种新型的基因组编辑技术,利用人工设计的向导RNA(singleguide RNA,sg RNA)介导外源表达的Cas9蛋白与基因组靶点特异性结合以实现对基因组DNA的特异性切割,切割后的基因组DNA通过非同源末端连接或同源重组的方式进行修复,从而实现基因的敲除、敲入等。MEIS2属于一类高度保守的同源盒转录因子MEIS家族,研究发现,MEIS2广泛参与胚胎的早期发育及肿瘤的发生发展,但其发挥作用的机制目前还不是很清楚。该研究针对MEIS2基因作用的功能域,设计两个靶向MEIS2基因Exon3和Exon8的sg RNA,通过SURVEYOR分析及Western blot检测,确认了所设计sg RNA的有效性。进一步通过细胞分选及Western blot检测筛选出稳定敲除MEIS2基因的HEK293T细胞株。最后,通过序列测定确认MEIS2发生了移码突变。综上所述,该研究利用CRISPR/Cas9技术成功建立了完全敲除MEIS2的HEK293T细胞株,为研究MEIS2的功能和作用机制提供了有效工具。 展开更多
关键词 meis2 CRISPR/Cas9系统 基因敲除
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Meis1在子宫内膜异位症不孕患者子宫内膜中的表达研究 被引量：4
4
作者 李海霞 钱坤 +2 位作者 章汉旺 胡琳莉 张金玉 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期582-587,共6页
目的:初步探索HOXA10的辅因子(Meis1)与子宫内膜异位症(EMs)患者不孕和发病的相关性。方法:采用免疫组织化学方法进行组织学定位并进行半定量分析,采用Westernblot-ting方法在蛋白水平上进行定量分析,检测EMs不孕患者异位和在位子宫内膜... 目的:初步探索HOXA10的辅因子(Meis1)与子宫内膜异位症(EMs)患者不孕和发病的相关性。方法:采用免疫组织化学方法进行组织学定位并进行半定量分析,采用Westernblot-ting方法在蛋白水平上进行定量分析,检测EMs不孕患者异位和在位子宫内膜中Meis1的表达水平。结果:免疫组织化学结果显示,Meis1在异位内膜和在位内膜中仅有弱表达,而在正常同期内膜中呈较明显的阳性表达,差异显著(P<0.01);比较Meis1在分泌中期在位内膜与正常内膜中的表达,差异亦有显著性(P<0.01)。Westernblotting显示,Meis1在分泌中期在位内膜中仅有弱表达,而在同期正常内膜中呈高表达(P<0.001)。结论:Meis1在EMs患者分泌中期在位内膜中低表达,可能是影响子宫内膜容受性的建立,从而影响胚胎着床导致不孕的重要因素之一。同时,Meis1在异位内膜中的低表达说明异位内膜可能对体内雌、孕激素正常调控具有抵抗性,异位内膜细胞具备了对抗凋亡的能力,提示Meis1可能参与了EMs的发生与发展。 展开更多
关键词 meis1 子宫内膜异位症(EMs) 子宫内膜容受性
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多重情绪智力量表(MEIS)的信度、结构效度及应用评价研究 被引量：10
5
作者 曹蓉 王晓钧 《心理科学》 CSSCI CSCD 北大核心 2007年第2期419-421,共3页
对多重情绪智力量表(MEIS)的信度和结构效度进行了实证检验,结果发现,MEIS的内部一致性信度(α)系数偏低,各分量表的分半信度系数很低;MEIS总量表的结构效度明显不足,对七个分量表的因素分析结果显示,每个维度对总量表的贡献率很低;无... 对多重情绪智力量表(MEIS)的信度和结构效度进行了实证检验,结果发现,MEIS的内部一致性信度(α)系数偏低,各分量表的分半信度系数很低;MEIS总量表的结构效度明显不足,对七个分量表的因素分析结果显示,每个维度对总量表的贡献率很低;无法满足Mayer和Salovey情绪智力4维度理论框架。对4个维度逐一进行二阶因素分析结果均揭示,MEIS明显缺乏每个维度所设定的4因素的结构效度,项目效率明显不足,因此,MEIS尚不具备有效测量情绪智力的功能。 展开更多
关键词 多重情绪智力量表(meis) 信度 结构效度
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Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中的表达 被引量：2
6
作者 张金玉 李海霞 +3 位作者 郭新宇 葛明晓 袁启龙 邓伟民 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期656-660,共5页
目的:探讨Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中的作用。方法:采用免疫组织化学定位检测Meis1在小鼠子宫内膜中的表达;采用Real-time RT-PCR和免疫印迹方法,分别在mRNA和蛋白水平定量检测Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中的表达水平。结果:免疫... 目的:探讨Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中的作用。方法:采用免疫组织化学定位检测Meis1在小鼠子宫内膜中的表达;采用Real-time RT-PCR和免疫印迹方法,分别在mRNA和蛋白水平定量检测Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中的表达水平。结果:免疫组织化学结果显示,Meis1蛋白主要表达于小鼠子宫内膜腺上皮细胞的细胞膜和胞质以及基质细胞和蜕膜细胞的细胞核中,在围着床期小鼠子宫内膜中的表达随妊娠天数的增加而增加,着床后在基质和蜕膜中的表达增强;在孕第4日显著增加,孕第5日达高峰,孕第6日表达下降。Real-time RT-PCR和免疫印迹结果显示,Meis1的表达随妊娠天数的增加逐渐增强,孕第4日明显增强,孕第5日达高峰,孕第6日开始下降。结论:Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中呈规律表达,与小鼠着床窗吻合,提示Meis1是调控围着床期子宫内膜容受性的重要因子。 展开更多
关键词 meis1 子宫内膜容受性 胚胎着床
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利用腺病毒载体过表达Meis 1基因能够上调化疗药对NSCLC细胞的杀伤作用 被引量：1
7
作者 王娜 马德宾 +1 位作者 高蕊 刘蕾 《科学技术与工程》 北大核心 2016年第25期25-29,43,共6页
新型肿瘤抑制基因Meis 1(Myeloid ecotropic viral integration site 1)最近被证实可能具有肿瘤增殖抑制活性,是肿瘤患者预后和治疗的潜在指示分子,但其功能和作用机制尚需深入分析。考察利用腺病毒载体表达Meis 1蛋白对抗肿瘤药物杀伤N... 新型肿瘤抑制基因Meis 1(Myeloid ecotropic viral integration site 1)最近被证实可能具有肿瘤增殖抑制活性,是肿瘤患者预后和治疗的潜在指示分子,但其功能和作用机制尚需深入分析。考察利用腺病毒载体表达Meis 1蛋白对抗肿瘤药物杀伤NSCLC细胞的影响。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞系A549感染Meis 1的腺病毒表达载体后,使用MTT、和软琼脂成集落实验验证其对NSCLC细胞增殖的抑制作用;进一步分别使用系列浓度梯度的抗肿瘤药物舒尼替尼(Sunitinib)、吉非替尼(Gefitinib)、紫杉醇(Paclitaxel)和吉西他滨(Gemcitabine)处理A549、Calu3、H460以及H358细胞,检测其抑制率,计算IC_(50)值。最后,利用耐药细胞系A549/ADR检测Meis 1逆转NSCLC化疗药多药耐药的作用。MTT和软琼脂成集落实验结果显示,Meis 1过表达能够抑制A549细胞的增殖与锚定非依赖性生长。抑制率实验显示Meis 1过表达能够上调抗肿瘤药物对NSCLC细胞的杀伤作用,显著下调其IC_(50)值。此外,Meis 1还具有逆转NSCLC细胞化疗药物多药耐药的作用。利用腺病毒载体表达MEIS1蛋白能够增加肿瘤细胞对化疗药物敏感型的作用,具有逆转肺癌细胞MDR的作用。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 抗肿瘤药物 化疗药耐药 meis 1基因
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HOXA10,Meis1在构建子宫内膜容受性分子网络中的作用 被引量：1
8
作者 李海霞 张金玉 +1 位作者 郭新宇 袁启龙 《生殖医学杂志》 CAS 2011年第6期533-537,共5页
胚胎着床是哺乳动物生殖的关键环节之一。HOXA10作为雌、孕激素直接调控的多效性核内转录因子,介导胚胎着床的多个环节。HOXA10对胚胎着床的多效性调控作用是通过对其下游基因的调控介导。转录因子Meis1可能与HOXA10结合形成异源二聚体... 胚胎着床是哺乳动物生殖的关键环节之一。HOXA10作为雌、孕激素直接调控的多效性核内转录因子,介导胚胎着床的多个环节。HOXA10对胚胎着床的多效性调控作用是通过对其下游基因的调控介导。转录因子Meis1可能与HOXA10结合形成异源二聚体,通过增强HOXA10与下游靶基因结合的特异性,从而在构建子宫内膜容受性独特的分子网络中发挥重要作用。 展开更多
关键词 HOXA10 meis1 子宫内膜容受性 胚胎着床
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刁江流域矿区环境信息系统(MEIS)的设计与开发 被引量：3
9
作者 吴欢 宋书巧 周兴 《广西师范学院学报（自然科学版）》 2003年第1期73-77,共5页
刁江流域矿区环境信息系统 (MEIS)是以Arcview为软件平台 ,结合Mapinfo和VisualFoxpro开发的专题地理信息系统 .该系统可为矿区环境管理部门及环境科学工作者提供该矿区的环境背景信息及水质污染、矿区废弃地等专题环境信息 ,为解决刁... 刁江流域矿区环境信息系统 (MEIS)是以Arcview为软件平台 ,结合Mapinfo和VisualFoxpro开发的专题地理信息系统 .该系统可为矿区环境管理部门及环境科学工作者提供该矿区的环境背景信息及水质污染、矿区废弃地等专题环境信息 ,为解决刁江流域矿区的主要环境问题提供技术支持 .本文介绍了系统的总体设计、数据库的建设以及系统建设过程中积累的经验 . 展开更多
关键词 刁江流域 矿区环境信息系统 meis 地理信息系统 系统设计 数据库 环境保护 环境管理
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通过体内基因转染改变Meis1在围着床期小鼠子宫中的表达影响胚胎着床
10
作者 徐蓓 章汉旺 +3 位作者 李豫峰 艾继辉 靳镭 朱桂金 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期152-157,共6页
通过宫腔内脂质体转染改变小鼠子宫内Meis1基因的表达水平,研究其对子宫内膜容受性的影响,从而推测Meis1基因在胚胎着床中的作用.选择8～12周龄昆明小鼠,于妊娠第2 d,通过向小鼠宫腔内注入MEIS1基因表达质粒和siRNA表达质粒及其各自的... 通过宫腔内脂质体转染改变小鼠子宫内Meis1基因的表达水平,研究其对子宫内膜容受性的影响,从而推测Meis1基因在胚胎着床中的作用.选择8～12周龄昆明小鼠,于妊娠第2 d,通过向小鼠宫腔内注入MEIS1基因表达质粒和siRNA表达质粒及其各自的对照质粒,在妊娠第5d,提取小鼠子宫mRNA和蛋白质行半定量RT-PCR和免疫组化分析,观察各组小鼠子宫内膜Meis1和整合素β3的表达变化.在妊娠第9 d,观察Meis1基因上调组及其对照组、Meis1基因下调及其对照组妊娠率和胚胎着床数的差异.结果显示,Meis1基因下调组胚胎着床率明显低于对照组(P<0.05),Meis1基因上调组胚胎着床率略高于对照组,但无统计学意义(P>0.05);Meis1基因上调组其整合素β3的表达高于其对照组,Meis1基因下调组整合素β3的表达低于其对照组,差异均有显著性(P<0.05).以上观察结果表明,Meis1基因表达下降可明显减少胚胎着床率,影响整合素β3的表达.Meis1基因表达提高则可促进整合素β3的表达.因此,Meis1可能作为1种子宫内膜容受分子,在胚胎着床中发挥重要作用. 展开更多
关键词 meis1 基因转染 子宫内膜 胚胎着床 整合素Β3
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Meis1在心肌肥厚中的负性作用
11
作者 张韫佼 梅举 +3 位作者 董莉亚 许喜乐 黄雅筠 马南 《中国心血管病研究》 CAS 2019年第7期666-670,共5页
目的通过检测来自肥厚型心肌病患者、小鼠心肌肥厚模型和体外诱导心肌细胞肥大的标本,探讨Meis1在心肌肥厚发生过程中的作用.方法2015年1月至2018年6月,分别获取肥厚型心肌病患者、小鼠心肌肥厚模型和体外诱导心肌的标本,以室壁瘤患者... 目的通过检测来自肥厚型心肌病患者、小鼠心肌肥厚模型和体外诱导心肌细胞肥大的标本,探讨Meis1在心肌肥厚发生过程中的作用.方法2015年1月至2018年6月,分别获取肥厚型心肌病患者、小鼠心肌肥厚模型和体外诱导心肌的标本,以室壁瘤患者、小鼠假手术组和加入生理盐水培养的心肌细胞为对照组,通过Real-time PCR检测心肌肥厚标志物Nppa和β-MHC(Myh7) mRNA水平,同时检测Meis1mRNA水平.Western blot方法检测Nppa、β-MHC及Meis1的蛋白水平.比较分析与对照组之间的差异.结果三种模型来源的标本中Nppa和Myh7的mRNA和蛋白表达均明显增加(P<0.05),同时Meis1的mRNA和蛋白水平则低于对照组(P<0.05).Meis1与Nppa、Myh7表达的变化呈相反趋势,表明Meis1在心肌肥厚的发生过程中起着负性调节作用.结论 Meis1在心肌肥厚发生过程中起着负性调节作用,上调Meis1表达可能会抑制心肌肥厚的发展. 展开更多
关键词 meis1 心肌肥厚 Nppa Β-MHC
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Meis1在结直肠腺瘤癌中的表达及其临床意义
12
作者 邹云莲 杨慧 +2 位作者 朱军 张进萍 严新民 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第21期3533-3535,共3页
目的:探讨meis1在结直肠正常黏膜腺瘤癌发展过程中的表达变化及其临床意义。方法:应用荧光定量RT-PCR及免疫组化检测meis1在结直肠腺瘤癌中的表达及其临床意义。结果:RT-PCR结果显示meis1在正常肠黏膜中有一定程度的表达,随着腺瘤癌的... 目的:探讨meis1在结直肠正常黏膜腺瘤癌发展过程中的表达变化及其临床意义。方法:应用荧光定量RT-PCR及免疫组化检测meis1在结直肠腺瘤癌中的表达及其临床意义。结果:RT-PCR结果显示meis1在正常肠黏膜中有一定程度的表达,随着腺瘤癌的发展表达下调。免疫组化结果显示,在正常肠黏膜、腺瘤及癌中meis1的表达率分别为92.9%、87.5%及63.1%,腺癌与正常、腺瘤相比差异有显著性(P<0.05)。meis1表达部位随着正常黏膜向腺瘤癌发展过程中出现典型的胞核至胞浆异位,且异位与患者淋巴结转移相关(P<0.05)。结论:Meis1的表达下调及胞浆异位与结直肠癌的发生及进展相关。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 meis1 免疫组化
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雌、孕激素对Meis1在人子宫内膜细胞中的表达调控
13
作者 李海霞 夏正明 +3 位作者 钱坤 章汉旺 胡琳莉 夏薇 《广州医药》 2019年第3期6-10,共5页
目的探讨Meis1在人子宫内膜细胞中的表达及其受雌、孕激素调控的规律。方法通过免疫细胞化学和western blot的方法检测雌、孕激素对体外培养的在子宫内膜基质细胞(ESC)及Ishikawa细胞中Meis1的表达及调控。结果 Meis1在ESC和Ishikawa细... 目的探讨Meis1在人子宫内膜细胞中的表达及其受雌、孕激素调控的规律。方法通过免疫细胞化学和western blot的方法检测雌、孕激素对体外培养的在子宫内膜基质细胞(ESC)及Ishikawa细胞中Meis1的表达及调控。结果 Meis1在ESC和Ishikawa细胞均有表达,且均表达于细胞核中;在ESC中,E2、P4和E2+P4三组中Meis1平均蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05)。Meis1在E2、P4和E2+P4组之间的表达水平亦差异有统计学意义(P<0.05),表达强度E2+P4组>P4组>E2组;在Ishikawa细胞中,E2、P4和E2+P4使Meis1表达增强,表达强度P4组>E2+P4组>E2组,但与对照组比较无差异(P>0.05),E2、P4和E2+P4各组间亦无差异(P>0.05)。结论转录因子Meis1在ESC和Ishikawa细胞中受到雌、孕激素的调控,可能在子宫内膜容受性分子网络的构建中发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 meis1 ESC ISHIKAWA细胞 子宫内膜容受性
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Meis1作为心肌细胞周期阻滞的关键启动子调节心脏再生 被引量：1
14
作者 徐玮蔚 汪思媛 刘慧雯 《解剖科学进展》 2017年第5期510-513,共4页
心脏在传统观点上是一个有丝分裂后期的器官,但心肌细胞重新进入细胞周期,激活有丝分裂,能够介导心脏的再生反应。Meis1转录因子作为一个心肌细胞周期阻滞过程中的关键启动子,调节CDK抑制剂的转录,缺失Meis1能够使心肌细胞重新进入周期... 心脏在传统观点上是一个有丝分裂后期的器官,但心肌细胞重新进入细胞周期,激活有丝分裂,能够介导心脏的再生反应。Meis1转录因子作为一个心肌细胞周期阻滞过程中的关键启动子,调节CDK抑制剂的转录,缺失Meis1能够使心肌细胞重新进入周期,开启出生后心肌细胞增殖的开关。但Meis1在心脏再生中的作用以及其作用机制仍未完全明确。 展开更多
关键词 心肌细胞增殖 细胞周期阻滞 meis1 启动子 心脏 再生 调节 有丝分裂
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利用CRISPR/Cas9技术建立诱导性敲除MEIS1基因的HEK293T细胞株
15
作者 张明智 王梦鸽 +8 位作者 王洪涛 苏培 刘鑫 张磊升 刘翠翠 王钰 吴丹 周家喜 彭莎 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2016年第8期978-985,共8页
CRISPR/Cas9是新一代基因组编辑技术,可简便快捷地在哺乳动物细胞对基因进行敲除、敲入。但常规的CRISPR/Cas9表达系统直接转染效果差、病毒包装效率低,极大地限制了CRISPR/Cas9系统的广泛使用。该研究应用Tet-on系统,建立了Dox诱导Cas... CRISPR/Cas9是新一代基因组编辑技术,可简便快捷地在哺乳动物细胞对基因进行敲除、敲入。但常规的CRISPR/Cas9表达系统直接转染效果差、病毒包装效率低,极大地限制了CRISPR/Cas9系统的广泛使用。该研究应用Tet-on系统,建立了Dox诱导Cas9表达的293T细胞株,命名为293T-i Cas9。MEIS1(myeloid ectropic viral integration site 1)是TALE(three amino acid loop extension)同源域家族的转录因子,其在白血病发生发展、胚胎造血系统发育及神经系统发育中有重要作用,但其作用机制仍未完全明确。将靶向MEIS1 Exon3的sg MEIS1表达载体转入293T-iCas9,SURVEYOR实验和Western blot检测结果表明,sg MEIS1有效地指导Cas9进行基因组编辑。最终经测序和Western blot结果证明,成功建立了MEIS1敲除细胞株,这为研究MEIS1的功能提供了重要的工具。 展开更多
关键词 meis1 CRISPR/Cas9 iCas9 基因敲除 HEK293T细胞
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MEIS1/miR-425反馈调节通路对慢性髓系白血病细胞株K562增殖的作用 被引量：2
16
作者 赵旭宏 杨桂花 李丹丹 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期802-807,共6页
目的:研究转录因子MEIS1和miR-425对人慢性髓系白血病细胞株K562增殖的调控作用及其分子机制。方法:通过生物信息学预测分析转录因子MEIS1在miR-425启动子区的结合位点情况,ChIP-qPCR结合双荧光报告基因实验检测MEIS1与miR-425启动子的... 目的:研究转录因子MEIS1和miR-425对人慢性髓系白血病细胞株K562增殖的调控作用及其分子机制。方法:通过生物信息学预测分析转录因子MEIS1在miR-425启动子区的结合位点情况,ChIP-qPCR结合双荧光报告基因实验检测MEIS1与miR-425启动子的结合情况及其对miR-425启动子的调节作用,CCK-8法检测MEIS1和miR-425对K562细胞增殖的影响,PI染色结合流式细胞术检测MEIS1和miR-425对K562细胞周期的影响,Western blot检测miR-425对MEIS1表达的影响。结果:MEIS1可以与miR-425启动子区结合,并可抑制其活性。使用针对MEIS1的shRNA转染K562细胞后,可显著抑制K562细胞增殖及细胞周期的运行。类似地,使用miR-425的模拟物转染K562细胞后,也可抑制K562细胞的增殖和细胞周期的运行。miR-425可以通过与MEIS13′UTR的结合抑制MEIS1的表达。结论:转录因子MEIS1可在转录水平抑制miR-425的转录活性,miR-425则在转录后水平抑制MEIS1蛋白的表达,因此,两者共同构成一个反馈调节通路作用于K562细胞的增殖。 展开更多
关键词 慢性髓系白血病 meis1 miR-425 K562 细胞增殖
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小鼠pDsRed-Meis1真核表达载体构建及子宫内表达的鉴定
17
作者 熊敏 朱桂金 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2011年第1期33-35,共3页
目的构建小鼠Myeloid ectropic viral integration site 1(Meis1)基因和红色荧光蛋白(Red fluorescence protein,RFP)真核表达质粒,为进一步研究Meis1在生殖系统中的功能提供基础。方法设计引物,扩增含Meis1片段的克隆质粒中的meis1基... 目的构建小鼠Myeloid ectropic viral integration site 1(Meis1)基因和红色荧光蛋白(Red fluorescence protein,RFP)真核表达质粒,为进一步研究Meis1在生殖系统中的功能提供基础。方法设计引物,扩增含Meis1片段的克隆质粒中的meis1基因片段,将其插入真核表达载体pDsRed-N1,重组质粒经酶切鉴定后测序,并转染至小鼠子宫;用Western blot及免疫组织化学方法鉴定外源基因Meis1的表达。结果酶切和测序结果表明,构建的pDsRed-Meis1重组质粒正确;West-ern blot结果显示,外源性Meis1高表达于孕D2的小鼠子宫;转染后冰冻切片结果显示,带红色荧光蛋白的阳性产物表达于孕D4的小鼠子宫内膜及全层;免疫组织化学结果显示,Meis1阳性产物主要表达于孕小鼠子宫上皮、腺体和基质细胞内。结论正确构建了pDsRed-Meis1真核表达质粒,并成功转染及高表达于小鼠子宫,为进一步探讨Meis1在生殖系统中的功能提供了有利工具。 展开更多
关键词 meis1基因 重组质粒 宫腔内转染
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利用CASAAV技术诱导心肌特异性Meis1敲除实现心肌原位增殖 被引量：1
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作者 颜耀彬 张兴中 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2023年第3期5441-5449,共9页
目的 探讨基于CRISPR/Cas9/AAV的体细胞突变(CRISPR/Cas9/AAV-based somatic mutagenesis,CASAAV)技术诱导心肌细胞Meis1基因的特异性敲除实现小鼠心肌细胞原位增殖的可行性。方法 设计两条靶向小鼠Meis1基因的sg RNA序列逐个克隆至p AA... 目的 探讨基于CRISPR/Cas9/AAV的体细胞突变(CRISPR/Cas9/AAV-based somatic mutagenesis,CASAAV)技术诱导心肌细胞Meis1基因的特异性敲除实现小鼠心肌细胞原位增殖的可行性。方法 设计两条靶向小鼠Meis1基因的sg RNA序列逐个克隆至p AAV-U6g RNA1-U6g RNA2-Tn T-Cre载体中,并包装成腺相关病毒。分离RosaCas9EGFP/Cas9EGFP基因敲入小鼠的乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞进行病毒的体外感染,利用细胞免疫荧光染色检测病毒的心肌特异性。给予RosaCas9EGFP/Cas9EGFP基因敲入小鼠的乳鼠胸腔内注射病毒进行体内感染,3周后利用心脏灌流技术分离心肌细胞,利用细胞免疫荧光染色检测病毒的心肌特异性和心肌细胞的增殖水平,利用一代测序技术和实时PCR技术分别检测心肌细胞中Meis1基因的编辑水平及Meis1基因和细胞周期相关基因的mRNA相对表达量;同时制作心脏组织切片并利用组织免疫荧光染色检测心脏组织中增殖标志物KI67、PH3及AURKB的蛋白表达水平。结果 腺相关病毒可特异性诱导心肌细胞中EGFP和Cas9的表达。体内感染腺相关病毒后,心肌细胞中的Meis1基因编辑效率达到56.67%±4.16%,Meis1基因的mRNA相对表达量显著下调(P<0.05),而细胞周期相关基因的mRNA相对表达量均显著上调(P<0.05),同时EGFP+KI67+的心肌细胞比例显著上调(P<0.05);心脏组织中增殖标志物KI67、PH3及AURKB的蛋白表达水平均显著上调(P<0.05)。结论 利用CASAAV技术可实现小鼠心肌细胞Meis1基因的特异性敲除,促进小鼠心肌细胞的原位增殖,明确了CASAAV技术在快速构建体细胞基因敲除模型中的可行性以及在心脏再生领域中的临床转化潜能。 展开更多
关键词 CASAAV CRISPR/Cas9 meis1 腺相关病毒 心肌增殖 心脏再生
原文传递
miR-125a-5p靶向MEIS2基因对垂体瘤AtT20细胞增殖、凋亡的影响 被引量：1
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作者 陈亮 秦军 +2 位作者 魏德胜 雷军荣 王璐 《临床神经外科杂志》 2022年第1期64-69,共6页
目的探讨微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)是否可靶向调控MEIS2基因表达并分析其对垂体瘤AtT20细胞增殖及凋亡的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测AtT20细胞及小鼠正常垂体细胞(NPC)中miR-125a-5p及MEIS2 mRNA表达量。采用瞬时... 目的探讨微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)是否可靶向调控MEIS2基因表达并分析其对垂体瘤AtT20细胞增殖及凋亡的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测AtT20细胞及小鼠正常垂体细胞(NPC)中miR-125a-5p及MEIS2 mRNA表达量。采用瞬时转染技术分别将miR-125a-5p mimic质粒、anti-miR-125a-5p抑制剂及si-MEIS2质粒转染至AtT20细胞。双荧光素酶报告基因检测miR-125a-5p与MEIS2的靶基因关系,同时共转染miR-125a-5p mimic与pcDNA-MEIS2验证miR-125a-5p是否通过靶向MEIS2表达发挥作用。MTT法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;蛋白免疫印迹(Western blotting)检测各组细胞MEIS2蛋白表达。结果qRT-PCR检测结果显示,与NPC比较,miR-125a-5p在AtT20细胞中表达水平显著降低,MEIS2 mRNA表达水平显著升高;与miR-NC组比较,miR-125a-5p组miR-125a-5p表达水平显著升高。Western blotting检测结果显示,与NPC比较,AtT20细胞中MEIS2蛋白表达水平显著升高;与si-NC组比较,si-MEIS2组MEIS2蛋白表达水平显著降低;与miR-125a-5p+pcDNA组比较,miR-125a-5p+pcDNA-MEIS2组MEIS2蛋白表达水平显著升高。双荧光素酶报告基因验证结果显示miR-125a-5p可直接调控MEIS2基因表达。MTT检测结果显示,与miR-NC组比较,miR-125a-5p组细胞增殖能力显著降低,抑制MEIS2表达细胞增殖能力显著降低;与miR-125a-5p+pcDNA组相比,miR-125a-5p+pcDNA-MEIS2组细胞增殖能力显著升高。流式细胞术检测结果均与MTT检测结果呈反向关系。结论miR-125a-5p通过负向调控MEIS2进而抑制垂体瘤AtT20细胞增殖能力并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 垂体瘤 微小RNA-125a-5p meis2 增殖 凋亡
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单机MEIS系统设计与实现
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作者 徐晶 《跨世纪》 2008年第12期151-151,共1页
本文介绍了针对设备管理人员开发的单机MEIS系统，并对开发中的关键技术进行阐述，包括数据库设计介绍，ADO连接方式，网格控件显示及调用EXCEL模块输出，并对该系统的应用作了评价。软件开发环境为VISUALBASIC和MSACCESS。
关键词 meis VISUAL BASIC 数据库 ACCESS
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