水禽细小病毒LAMP及其可视化通用检测方法的建立

1

作者 戴银 周慧琴 +9 位作者 谷思琴 胡晓苗 王洁茹 殷冬冬 尹磊 沈学怀 潘孝成 赵瑞宏 周学利 侯宏艳 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第7期63-68,共6页

为了建立鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)通用的检测方法,本试验以GPV和MDPV两种水禽细小病毒的NS基因保守序列作为靶标,设计了1组特异性引物,优化建立了水禽细小病毒的环介导等温扩增(LAMP)和LAMP-羟基萘酚蓝(HNB)可视化通用检测... 为了建立鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)通用的检测方法,本试验以GPV和MDPV两种水禽细小病毒的NS基因保守序列作为靶标,设计了1组特异性引物,优化建立了水禽细小病毒的环介导等温扩增(LAMP)和LAMP-羟基萘酚蓝(HNB)可视化通用检测方法,并对2种方法的特异性和灵敏性进行检测。采用常规PCR、LAMP和LAMP-HNB对10份水禽临床样品进行检测,以评估2种方法的实用性。结果显示,LAMP方法的最佳反应温度为65℃、反应时间为60 min。2种方法仅能扩增GPV和MDPV,而对其他5种常见水禽病毒的检测结果均为阴性,最低检出浓度均为1×10-5ng/μL。2种方法与常规PCR的检测结果一致,符合率达100%。结果表明,建立的LAMP方法和LAMP-HNB可视化方法具有灵敏性好、特异性高、仪器要求低和可视化等优点,可为水禽细小病毒的现场快速检测提供技术支撑。 展开更多

关键词 鹅细小病毒(GPV) 番鸭细小病毒(MDPV) NS基因 环介导等温扩增(LAMP) 可视化

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雏番鸭细小病毒病 被引量：6

2

作者 娄高明 陈建红 《预防兽医学进展》 1999年第1期13-16,共4页

关键词 细小病毒病 mdpvs 流行病 病理变化

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番鸭和鹅细小病毒PCR鉴别方法的建立 被引量：10

3

作者 季芳 张毓金 +1 位作者 杨增岐 宋长绪 《动物医学进展》 CSCD 2003年第5期99-101,共3页

根据基因库中番鸭细小病毒 (MDPV)FM株和鹅细小病毒 (GPV)的 B株的基因序列设计了 3个引物 PVC、MDPVdn、GPVdn,分别用 MDPV-DNA、GPV-DNA、MDPV 尿囊液、GPV尿囊液、鸭瘟病毒尿囊液、传染性喉气管炎病毒尿囊液和无离子水对照 ,以 PVC/ ... 根据基因库中番鸭细小病毒 (MDPV)FM株和鹅细小病毒 (GPV)的 B株的基因序列设计了 3个引物 PVC、MDPVdn、GPVdn,分别用 MDPV-DNA、GPV-DNA、MDPV 尿囊液、GPV尿囊液、鸭瘟病毒尿囊液、传染性喉气管炎病毒尿囊液和无离子水对照 ,以 PVC/ GPVdn和 PVC/ MDPVdn特异引物在同一条件下进行PCR扩增 ,产物经 1 0 g/ L的琼脂糖凝胶电泳分析。在 PVC/ GPVdn系统中 ,MDPV-DNA、MD-PV尿囊液、DP、IL T和无离子水对照无条带 ,其余样品均出现约 460 bp的条带 ,在 PVC/ MD-PVdn系统中 ,只有 MDPV-DNA、MDPV-GPV混合 DNA、MDPV尿囊液中出现约 90 0 bp的条带 ,其余无特异性核酸带 ,对 MDPV-DNA的敏感性达 0 .5pg,对 MDPV尿囊液敏感性为 1 0 0 0EL D50 / 5μL ,对 GPV-DNA的敏感性为 0 .5pg,对 GPV尿囊液敏感性为 1 0 EL D50 / 5μL。分别将不同时间提取 0 .5ng/ μL MDPV-DNA、0 .5ng/μL GPV-DNA、MDPV尿囊液、GPV尿囊液和无离子水对照样 ,以 PVC/ GPVdn和 PVC/MDPVdn特异引物进行 PCR扩增 3次 ,结果稳定。表明该 PCR检测技术可灵敏。 展开更多

关键词 番鸭 鹅 细小病毒 PCR检测 MDPV GPV 基因 引物 敏感性

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番鸭细小病毒免疫原蛋白基因的序列测定与分析 被引量：3

4

作者 娄华 白挨泉 +3 位作者 顾万军 陆英杰 贺东升 刘福安 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期393-393,395,共2页

关键词 番鸭细小病毒 MDPV 免疫原蛋白基因 序列分析

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高效液相色谱法同时测定三种卡西酮类精神活性物质 被引量：6

5

作者 钱振华 贾薇 花镇东 《中国司法鉴定》 2015年第1期23-26,共4页

目的建立Methylone、4-MEC和MDPV的高效液相色谱检测方法。方法采用HPLC—DAD分析方法。分析柱：ZORBAX Eclipse XDB—C18色谱柱（150mm×4．6mm，3．5μm）。流动相为缓冲液（三氟乙酸和0．005mol／L的三氟乙酸铵．pH3．5）和乙腈... 目的建立Methylone、4-MEC和MDPV的高效液相色谱检测方法。方法采用HPLC—DAD分析方法。分析柱：ZORBAX Eclipse XDB—C18色谱柱（150mm×4．6mm，3．5μm）。流动相为缓冲液（三氟乙酸和0．005mol／L的三氟乙酸铵．pH3．5）和乙腈，梯度洗脱，流速1mL／min，检测波长280nm。结果Methylone、4-MEC和MDPV在0．01～3mg／mL浓度范围内线性关系良好，R^2分别为0．9999、0．9999和0．9998，日内与日间保留时间和峰面积的相对标准偏差（RSD）均〈5％．检出限分别为0．16μg／mL、0．3μg／mL和0．7μg／mL，平均回收率均在98％以上。结论本方法峰形好，分离度好，线性范围良好，回收率高，适用于疑似违禁品中Methylone、4-MEC和MDPV的定量分析。 展开更多

关键词 高效液相色谱 Methylone 4-MEC MDPV 定量

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液相色谱-串联质谱法测定策划药物MDPV及其代谢物 被引量：3

6

作者 陈学国 张婷 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期311-316,共6页

目的：建立日益流行的策划药物亚甲二氧吡咯戊酮（MDPV）及其体外代谢产物的液相色谱-质谱（LC-MS）联用测定方法。方法：采用Thermo Gold ODS色谱柱（150 mm×2.1 mm,5μm）,以0.1 mmol·L^-1醋酸铵-甲酸缓冲溶液（p H 4.5）... 目的：建立日益流行的策划药物亚甲二氧吡咯戊酮（MDPV）及其体外代谢产物的液相色谱-质谱（LC-MS）联用测定方法。方法：采用Thermo Gold ODS色谱柱（150 mm×2.1 mm,5μm）,以0.1 mmol·L^-1醋酸铵-甲酸缓冲溶液（p H 4.5）为流动相A,甲醇为B进行梯度洗脱（0～1 min,10%B;1～6 min,10%B→90%B;6～14 min,90%B）,流速0.20 mL·min^-1;采用电喷雾离子化源,正离子检测方式,全离子扫描、选择反应监测扫描模式检测并鉴定MDPV及其代谢产物。结果：在大鼠肝微粒体S9组分中鉴定得到MDPV的4种体外代谢产物。结论：所建立的方法用于策划药物及其代谢物的分析,不仅可以节省分析时间、减少实验成本,而且具有高效、灵敏和选择性好等特点。 展开更多

关键词 亚甲二氧吡咯戊酮(MDPV) 体外代谢产物 策划药物 管制药物 液相色谱-电喷雾离子阱质谱

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番鸭细小病毒病实验室诊断方法的研究进展 被引量：1

7

作者 黎明 樊兴冬 +3 位作者 闫冰 于天飞 张喜文 于志丹 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第6期78-81,共4页

番鸭细小病毒病由番鸭细小病毒（Muscovy duck parvovirus,MDPV）引起,以1~3周龄雏番鸭为易感的一种急性传染性、高死亡率的病毒病。番鸭细小病毒病一般可根据临床症状和剖检病理变化及其流行病学等情况作出初步诊断。然而在染病番鸭表... 番鸭细小病毒病由番鸭细小病毒（Muscovy duck parvovirus,MDPV）引起,以1~3周龄雏番鸭为易感的一种急性传染性、高死亡率的病毒病。番鸭细小病毒病一般可根据临床症状和剖检病理变化及其流行病学等情况作出初步诊断。然而在染病番鸭表现出非典型症状时很容易与番鸭的鹅细小病毒感染、雏鸭病毒性肝炎等疾病混淆,容易误诊。因此,对该病的确诊主要依靠血清学或病原学等实验室诊断方法。文章从血清学和分子生物学诊断方法两个方面综合阐述了番鸭细小病毒检测方法的研究进展。 展开更多

关键词 番鸭细小病毒(MDPV) 血清学 分子生物学 诊断方法 研究进展

原文传递

GPV·MDPV和FAdV-4三重PCR检测方法的建立 被引量：1

8

作者 戴银 胡晓苗 +6 位作者 赵瑞宏 张丹俊 潘孝成 沈学怀 尹磊 周学利 侯宏艳 《安徽农业科学》 CAS 2021年第15期183-184,187,共3页

[目的]为快速地鉴别鹅细小病毒(GPV)、番鸭细小病毒(MDPV)和禽腺病毒血清4型(FAdV-4)3种病毒,建立一种特异强、敏感高、重复性好的三重PCR检测方法。[方法]根据Genbank登录的MDPV、GPV和FAdV-4的基因序列,设计3对特异性引物,以提取的核... [目的]为快速地鉴别鹅细小病毒(GPV)、番鸭细小病毒(MDPV)和禽腺病毒血清4型(FAdV-4)3种病毒,建立一种特异强、敏感高、重复性好的三重PCR检测方法。[方法]根据Genbank登录的MDPV、GPV和FAdV-4的基因序列,设计3对特异性引物,以提取的核酸为模板,进行PCR特异性、敏感性和重复性试验。[结果]采用所建立的方法能够扩增出GPV、MDPV和FAdV-4特异性片段,且不能检出鸭黄病毒(DFV)、鸭I型肝炎病毒(DVH-Ⅰ)和禽呼肠孤病毒(ARV);GPV、MDPV和FAdV-4核酸模板的最低检测量分别为20、2、2 pg;对8份阳性临床病料进行检测,可见MDPV、GPV和FAdV-4的检出率均为100%。[结论]建立的三重PCR检测方法能够对MDPV、GPV和FAdV-4这3种病毒进行快速、准确的诊断。 展开更多

关键词 鹅细小病毒(GPV) 番鸭细小病毒(MDPV) 禽腺病毒4型(FAdV-4) 三重PCR检测

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策划药物MDPV的研究进展 被引量：2

9

作者 陈学国 王新灵 +4 位作者 达卉 郭延淼 祁海均 刘磊 肖雅琼 《山东化工》 CAS 2014年第4期60-61,65,共3页

针对目前出现较多的"浴盐"中的主要成分甲卡西酮类设计药物MDPV的理化性质、药理作用、代谢、检验方法等进行综述,着重介绍了该药物的薄层色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱法、液相色谱-质谱联用法等鉴定方法的操作、... 针对目前出现较多的"浴盐"中的主要成分甲卡西酮类设计药物MDPV的理化性质、药理作用、代谢、检验方法等进行综述,着重介绍了该药物的薄层色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱法、液相色谱-质谱联用法等鉴定方法的操作、条件与结果等,为公安机关在该类药物的分析与鉴定方面提供一定的帮助。 展开更多

关键词 毒物分析 策划药物 MDPV 进展

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策划药物MDPV的检验 被引量：1

10

作者 达卉 陈学国 +3 位作者 郭延淼 祁海均 刘磊 肖雅琼 《福建分析测试》 CAS 2014年第6期1-4,共4页

本文建立了策划药物亚甲基二氧吡咯戊酮(MDPV)的气相色谱-质谱(GC-MS)联用、液相色谱-质谱(LCMS)联用分析方法。利用GC-MS联用、LC-MS联用分析技术对MDPV进行分析,得到MDPV的GC-MS分析主要特征离子及LC-MS联用分析分子离子峰、二级质谱... 本文建立了策划药物亚甲基二氧吡咯戊酮(MDPV)的气相色谱-质谱(GC-MS)联用、液相色谱-质谱(LCMS)联用分析方法。利用GC-MS联用、LC-MS联用分析技术对MDPV进行分析,得到MDPV的GC-MS分析主要特征离子及LC-MS联用分析分子离子峰、二级质谱碎片峰、三级质谱碎片峰,并对各特征离子及碎片峰进行了归属研究,得到了MDPV的GC-MS联用、LC-MS联用分析的质谱裂解规律及特征离子。 展开更多

关键词 气相色谱-质谱 液相色谱-质谱 MDPV 策划药物

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小体积液相萃取-GC/MS法检验尿液中的MDPV 被引量：4

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作者 阎仁信 朱国玉 +1 位作者 石建忠 吴卫兵 《中国法医学杂志》 CSCD 2017年第6期639-641,共3页

目的建立小体积液相萃取-GC/MS法检验尿液中的MDPV分析方法。方法将添加MDPV标准品的尿液调p H值为9,采用小体积二氯甲烷进行提取,有机相直接进行GC/MS分析。结果 MDPV的线性范围为0.05μg/m L-0.20μg/m L(R2=0.9965),检出限为0.02μg/... 目的建立小体积液相萃取-GC/MS法检验尿液中的MDPV分析方法。方法将添加MDPV标准品的尿液调p H值为9,采用小体积二氯甲烷进行提取,有机相直接进行GC/MS分析。结果 MDPV的线性范围为0.05μg/m L-0.20μg/m L(R2=0.9965),检出限为0.02μg/m L,提取回收率高于85%,精密度小于10%。结论本文建立的方法操作简单、灵敏、快速、经济,适用于吸毒检验工作中尿液中MDPV的检验。 展开更多

关键词 法医毒物分析 MDPV 亚甲基二氧吡咯戊酮 尿液 GC/MS

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毒品MDPV的检验 被引量：6

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作者 阎仁信 石建忠 《刑事技术》 2012年第6期54-55,共2页

MDPV（3,4-Methyl—enedioxypyrovaIerone）化学名为亚甲基二氧吡咯戊酮，分子式为C16H21NO3，其分子量为275g／mol，熔点为238-239℃，结构式见图1。根据纯度不同为白色或浅黄色粉末。MDPV属于去甲肾上腺素，多巴胺重吸收抑制剂（NDRI... MDPV（3,4-Methyl—enedioxypyrovaIerone）化学名为亚甲基二氧吡咯戊酮，分子式为C16H21NO3，其分子量为275g／mol，熔点为238-239℃，结构式见图1。根据纯度不同为白色或浅黄色粉末。MDPV属于去甲肾上腺素，多巴胺重吸收抑制剂（NDRI），药理作用类似甲基苯丙胺，具有中枢兴奋作用，长期或大量服用MDPV可以形成依赖性。本世纪初在欧洲出现MDPV的滥用， 展开更多

关键词 毒品 MDPV 亚甲基二氧吡咯戊酮 GC/MS

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