3种溺死相关浮游生物检验方法用于诊断溺死的比较

1

作者 张晓峰 苏秦 +6 位作者 陈晓晖 吴伟斌 郑冬云 赵建 陈玲 徐曲毅 刘超 《法医学杂志》 北大核心 2025年第3期244-251,共8页

目的比较浮游生物多重聚合酶链反应-毛细管电泳检测法(polymerase chain reaction-capillary electrophoresis,PCR-CE)、SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法(real-time quantitative PCR,qPCR)及微波消解-真空抽滤-自动扫描电子显微镜法(mic... 目的比较浮游生物多重聚合酶链反应-毛细管电泳检测法(polymerase chain reaction-capillary electrophoresis,PCR-CE)、SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法(real-time quantitative PCR,qPCR)及微波消解-真空抽滤-自动扫描电子显微镜法(microwave digestion-vacuum filtration-automated scanning electron microscopy,MD-VF-Auto SEM)在溺死诊断中的应用效果。方法采用3种溺死相关浮游生物检验方法对212例溺死尸体及30例非溺死尸体的肺、肝、肾组织进行检验,比较3种方法在各组织中浮游生物的检出率。结果对于溺死尸体,PCR-CE法、qPCR法、MD-VF-Auto SEM法在溺死组尸体中的总检出率分别为93.9%、96.2%、95.3%,三者间总检出率差异无统计学意义(P>0.05);MD-VF-Auto SEM法在肺组织中的检出率(100.0%)高于PCR-CE法及qPCR法(P<0.05),3种方法在肝、肾组织中的检出率差异无统计学意义(P>0.05)。对于非溺死尸体,仅MD-VF-Auto SEM法在部分肝、肾组织中检出少量硅藻(小于10个/10 g),其余两种方法检测结果均为阴性。结论3种方法对溺死尸体均有良好的检验效能。MD-VF-Auto SEM法通过扫描电镜直接观察硅藻的形态特征且定性定量分析直观准确,对疑难降解检材的检验具有较大优势。PCR-CE法和qPCR法检材需求量少(0.5 g)、操作简单、检测时间短(4~7 h),易于在基层推广,适用于水中尸体的快速溺死诊断。两种DNA方法与MD-VF-Auto SEM法相结合,可以提高浮游生物的检出率,确保检验结果的可靠性,联合使用在溺死诊断应用中具有重要意义。 展开更多

关键词 法医病理学 溺死 多重聚合酶链反应-毛细管电泳检测法 实时荧光定量PCR 微波消解-真空抽滤-自动扫描电子显微镜法 浮游生物

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1例土鸡禽白血病病毒与马立克病病毒混合感染诊断与分析

2

作者 胡晓苗 殷冬冬 +7 位作者 沈学怀 潘孝成 戴银 赵瑞宏 周学利 侯宏艳 尹磊 刘亚云 《安徽农业科学》 CAS 2024年第18期58-60,66,共4页

[目的]对安徽某土鸡场送检的疑似肿瘤病的病料进行鉴定。[方法]采集病死鸡的肝脏,提取病毒DNA,根据Genbank已登录的基因序列设计引物,通过PCR检测,对扩增出的ALV env与MDV meq基因序列进行测序和序列分析。[结果]检测到禽白血病和马立... [目的]对安徽某土鸡场送检的疑似肿瘤病的病料进行鉴定。[方法]采集病死鸡的肝脏,提取病毒DNA,根据Genbank已登录的基因序列设计引物,通过PCR检测,对扩增出的ALV env与MDV meq基因序列进行测序和序列分析。[结果]检测到禽白血病和马立克目的条带,序列比对结果发现,禽白血病病毒为J亚群,马立克为野毒强毒株。[结论]研究结果为了解该地区禽白血病和马立克混合感染情况提供了参考数据。 展开更多

关键词 禽白血病 马立克 PCR 序列分析

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应用等位基因特异性PCR和多重差别PCR检测肺癌患者CYP1A1和GSTM1的遗传多态性 被引量：13

3

作者 陈森清 许林 +2 位作者 马国建 吴建中 薛开先 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 1999年第3期119-122,共4页

本文对等位基因特异性ＰＣＲ（Ａｌｅｌｅｓｐｅｃｉｆｉｃ，ＡＳ）和多重差别（Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ，ＭＤ）ＰＣＲ技术进行了优化，并用此法联合检测了１０５例江苏地区健康人群及６８例肺癌患者ＣＹＰ１Ａ１、... 本文对等位基因特异性ＰＣＲ（Ａｌｅｌｅｓｐｅｃｉｆｉｃ，ＡＳ）和多重差别（Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ，ＭＤ）ＰＣＲ技术进行了优化，并用此法联合检测了１０５例江苏地区健康人群及６８例肺癌患者ＣＹＰ１Ａ１、ＧＳＴＭ１的等位基因型。结果表明：ＡＳＰＣＲ及ＭＤＰＣＲ采用的设立双参照扩增体系，可一次同时检测ＣＹＰ１Ａ１和ＧＳＴＭ１的等位基因型。在肺癌患者组中，ＣＹＰ１Ａ１的突变型Ｖａｌ／Ｖａｌ的频率１２／６８（１７．６％）约为健康组９／１０５（８．５７％）的２０５倍，而ＧＳＴＭ１纯合缺失的频率，肺癌组为３９／６８（５７３％），与健康对照组４２／１０５（４０％）相比，亦有显著增加（Ｐ＜０．０５）。 展开更多

关键词 等位基因特异性 肺癌 CYP1A1 GSTM1 md-pcr PCR

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PCR和核酸探针技术诊断MD和RE的比较研究 被引量：2

4

作者 王桂军 韦平 +4 位作者 李康然 左天荣 刘岳龙 金文杰 秦爱建 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期479-482,共4页

分别应用聚合酶链反应 (PCR)技术和核酸探针的点杂交技术 ,对临床鸡肿瘤 /可疑肿瘤病料分别进行马立克氏病 (MD)和禽网状内皮增生症 (RE)的检测。结果MD和RE的PCR检测阳性率分别为 81.9%和 5 3.3% ,探针点杂交检测的阳性率则分别为 77.1... 分别应用聚合酶链反应 (PCR)技术和核酸探针的点杂交技术 ,对临床鸡肿瘤 /可疑肿瘤病料分别进行马立克氏病 (MD)和禽网状内皮增生症 (RE)的检测。结果MD和RE的PCR检测阳性率分别为 81.9%和 5 3.3% ,探针点杂交检测的阳性率则分别为 77.1%和 2 7.1%。研究的结果表明 ,两种检测技术都有很高的特异性 ,相比而言PCR技术检测的敏感性更高 ,而且更快速、操作更简便、成本更低。 展开更多

关键词 马立克氏病 禽网状内皮增生症 聚合酶链反应 核酸探针 比较

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axl基因在骨髓增生异常综合征患者外周血细胞的表达 被引量：2

5

作者 陈书长 吕照江 +2 位作者 朱红 扬经敏 张之南 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期63-65,共3页

为研究axl基因在骨髓增生异常综合征(MDS)及其它几种血液病患者外周血单个核细胞中的表达,用RT-PCR方法测定细胞中axl基因mRNA的表达情况。结果表明:①10/11例(91%)MDS患者和1/2例AML-M_3型患者有axl基因表达。2例再生障碍性贫血患者、... 为研究axl基因在骨髓增生异常综合征(MDS)及其它几种血液病患者外周血单个核细胞中的表达,用RT-PCR方法测定细胞中axl基因mRNA的表达情况。结果表明:①10/11例(91%)MDS患者和1/2例AML-M_3型患者有axl基因表达。2例再生障碍性贫血患者、2例球形红细胞增多症患者、2例正常人均无axl基因表达。②FAB分型与axl基因表达关系:5例RA有表达,其中强表达2例,弱表达3例;4例RAEB均有表达,其中强表达1例,弱表达3例;1例RAEB-T为强表达。以上结果说明,axl基因在MDS患者中有很高的表达率,提示其可能作为MDS患者的诊断指标之一。 展开更多

关键词 骨髓增生异常综合征 axl基因 逆转录-聚合酶链反应 基因表达

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兰州市部分地区鸡马立克病流行病学调查 被引量：2

6

作者 艾文娜 吴润 +4 位作者 刁小龙 李叙涟 何轶群 管宏伟 罗鹏 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第5期186-190,共5页

旨在了解兰州市及其周边地区鸡马立克病的流行情况及流行毒株meq基因的分子特征,对该病的进一步预防及控制提供参考。随机采集集约化养殖场950份羽髓和950份血液样品,进行琼脂免疫扩散试验、PCR检测及meq基因的检测和序列比对。结果表明... 旨在了解兰州市及其周边地区鸡马立克病的流行情况及流行毒株meq基因的分子特征,对该病的进一步预防及控制提供参考。随机采集集约化养殖场950份羽髓和950份血液样品,进行琼脂免疫扩散试验、PCR检测及meq基因的检测和序列比对。结果表明,马立克的平均抗原阳性率为1.47%,PCR检测阳性率为2.52%,meq基因检测阳性率为1.37%,此位点4株突变株与MDV各参考毒株同源性为98.8%～100.0%。可见,所得突变株都具有强毒株的特征,突变与毒力强弱存在一定相关性。 展开更多

关键词 马立克病 流行病学 琼脂免疫扩散 PCR MEQ基因

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家蝇抗菌肽Diptericin基因的克隆与分析 被引量：11

7

作者 柳峰松 王丽娜 +1 位作者 唐婷 李伟 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1078-1082,共5页

Diptericin是抗菌肽家族中的一员,在昆虫先天免疫系统中起着重要作用。本研究通过EST序列筛选并结合RACE技术克隆了家蝇Musca domestica的Diptericin基因(Md-Diptericin,MdDpt)cDNA序列,GenBank登录号为FJ794602。其全长410bp,包含一个3... Diptericin是抗菌肽家族中的一员,在昆虫先天免疫系统中起着重要作用。本研究通过EST序列筛选并结合RACE技术克隆了家蝇Musca domestica的Diptericin基因(Md-Diptericin,MdDpt)cDNA序列,GenBank登录号为FJ794602。其全长410bp,包含一个300bp的完整开放阅读框(ORF),推导的氨基酸序列C端富含甘氨酸,N端富含脯氨酸,同源性分析表明,它与厩蝇Stomoxys calcitrans的Diptericin A mRNA相似性最高(identity=74%)。以邻接法(Neighbor-Joining,NJ)构建的系统关系表明,家蝇Diptericin与其他双翅目昆虫的Diptericin起源于共同的祖先,属于Attain-C超家族(Attacin_C superfamily)。基因定量分析表明,大肠杆菌刺激后6～12h,家蝇幼体MdDpt表达出现明显上调。结果提示MdDpt基因在家蝇免疫防御过程中起着重要作用。 展开更多

关键词 家蝇 抗菌肽 双翅肽 Md-Diptericin(MdDpt) 半定量RT-PCR

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骨髓增生异常综合症患者中的NOTCH1基因变异 被引量：1

8

作者 付璐 程峰 +3 位作者 毕莉 吴悦 张云平 李琳 《中国血液流变学杂志》 CAS 2011年第3期503-505,共3页

目的 Notch1基因变异出现在半数以上的T-ALL 患者中,对T-ALL 的发生发展有着重要的意义.通过该试验在骨髓增殖异常综合症（MDS）患者中寻找Notch1基因变异.方法 20例MDS患者的骨髓细胞,应用nested-PCR法,银染色-SSCP,direct sequencing... 目的 Notch1基因变异出现在半数以上的T-ALL 患者中,对T-ALL 的发生发展有着重要的意义.通过该试验在骨髓增殖异常综合症（MDS）患者中寻找Notch1基因变异.方法 20例MDS患者的骨髓细胞,应用nested-PCR法,银染色-SSCP,direct sequencing法分析.结果 在患者1的白血病细胞中发现,在第27号外显子的第5,097个对偶基因的G变异为A.然而该变异是在基因库中可查找的SNP.结论 在MDS患者中没有发现Notch1基因的变异. 展开更多

关键词 Notch蛋白 基因变异 骨髓增生异常综合症 nested PCR

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JAK2-V617F突变初步研究 被引量：2

9

作者 刘凌 庞缨 +2 位作者 周旭红 冯莹 叶絮 《中外医疗》 2010年第3期19-21,23,共4页

目的用等位基因聚合酶链反应(AS-PCR)方法检测Bcr-abl阴性的骨髓增殖性肿瘤(MPN)、骨髓增生异常综合征(MDS)、骨髓增生异常综合征/骨髓增殖性肿瘤(MDS/MPN)、急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、Bcr-abl阳性的慢性粒细胞白... 目的用等位基因聚合酶链反应(AS-PCR)方法检测Bcr-abl阴性的骨髓增殖性肿瘤(MPN)、骨髓增生异常综合征(MDS)、骨髓增生异常综合征/骨髓增殖性肿瘤(MDS/MPN)、急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、Bcr-abl阳性的慢性粒细胞白血病(CML)患者和正常健康人对照的外周血白细胞JAK2-V617F基因点突变情况,了解该突变在不同疾病中的表达,并建立敏感特异高效的JAK2-V617F突变的临床检测方法。方法采用AS-PCR方法检测基因组中JAK2-V617F突变,并经基因测序确定。所有MPN患者均行骨髓活检了解其纤维增生度。结果MPN各型中真性红细胞增多症(PV)阳性率为93.8%;原发性血小板增多症(ET)阳性率为60.0%;原发性骨髓纤维化(IMF)阳性率为0;MDS阳性率为4.5%;MDS/MPN阳性率为12.5%;AML、ALL、CML及正常对照均为阴性。MPN各型之间、MPN与其它疾病之间,阳性率差异有显著性(P<0.05)。JAK2-V617F突变阳性的PV及ET患者白细胞数较阴性患者高,差异有显著性(P<0.05)。且阳性患者骨髓纤维组织增生较阴性者明显,差异有显著性(P<0.05)。AS-PCR法检测阳性率高于直接测序法,差异有显著性(P<0.05)。结论JAK2-V617F是检测MPN尤其是PV的分子遗传学标志,同时与白细胞数、骨髓纤维化程度成正相关,有助于临床诊断及疾病预后判断。AS-PCR法是检测JAK2-V617F突变的敏感、特异的方法,可以成功应用于临床检测。 展开更多

关键词 JAK2-V617F突变 MPN MDS MDS/MPN AS-PCR

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DNA甲基转移酶基因在MDS患者中的表达及其临床意义 被引量：6

10

作者 乔淑凯 郭晓楠 +2 位作者 任金海 王颖 徐世荣 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第17期1011-1014,共4页

目的:研究DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)基因在骨髓增生异常综合征(MDS)患者中的表达及其与抑癌基因p15^(INK4B)甲基化状态的相关性,并进一步探讨其与临床预后的关系方法:采用SYBR G reen I实时定量逆转录聚合酶链反应(Rea... 目的:研究DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)基因在骨髓增生异常综合征(MDS)患者中的表达及其与抑癌基因p15^(INK4B)甲基化状态的相关性,并进一步探讨其与临床预后的关系方法:采用SYBR G reen I实时定量逆转录聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)方法对48例初治MDS患者和20例正常人骨髓进行DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA水平检测;采用甲基化特异性PCR(MSP-PCR)方法检测48例初治MDS患者和20例正常人p15^(INK4B)基因的甲基化状态。结果:低危组MDS患者3种DNMTs mRNA与正常对照组相比,表达水平差异均无统计学意义(P>0.05);高危组MDS患者3种DNMTs mRNA表达显著高于低危组和正常对照组(P均<0.01);M1DS患者DNMTsmRNA表达水平与p15^(INK4B)基因甲基化程度呈正相关12例高危MDS患者接受了地西他滨治疗,另外15例高危MDS患者接受了IA/DA联合化疗,地西他滨组疗效与联合化疗组比较差异无统计学意义(P>0.05)结论:DNMTs基因的异常高表达,导致细胞周期调控相关的p15^(INK4B)等抑癌基因启动子CpG岛过甲基化失活,在MDS患者由低危向高危转变乃至进展为急性髓系白血病(AML)过程中,起着至关重要的作用,DNMTs 展开更多

关键词 骨髓增生异常综合征 甲基转移酶 地西他滨 基因 实时定量PCR

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不同马立克氏病抗性鸡攻毒后IL-18基因的差异表达 被引量：2

11

作者 金元昌 李玉峰 张艳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期355-358,366,共5页

本试验致力于评价鸡白细胞介素-18(IL-18)基因的表达模式与马立克氏病抗性遗传性状的相关性。MDV-1分别感染7日龄普通品系和抗性品系的霞烟鸡,攻毒后第4、7、10、14、21、28、35天采集外周血并分离外周血淋巴细胞,利用实时定量PCR技术... 本试验致力于评价鸡白细胞介素-18(IL-18)基因的表达模式与马立克氏病抗性遗传性状的相关性。MDV-1分别感染7日龄普通品系和抗性品系的霞烟鸡,攻毒后第4、7、10、14、21、28、35天采集外周血并分离外周血淋巴细胞,利用实时定量PCR技术对外周血淋巴细胞中IL-18转录水平进行相对定量分析。结果表明,普通霞烟鸡外周血淋巴细胞中具有相对高水平的IL-18mRNA,而马立克氏病抗性霞烟鸡外周血淋巴细胞中则具有相对低水平的IL-18mRNA。结果显示,鸡IL-18基因的表达模式与马立克氏病(MD)抗性遗传性状可能相关。 展开更多

关键词 白细胞介素-18 马立克氏病 实时定量PCR 霞烟鸡

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骨髓增生异常综合征(MDS)基因诊断研究

12

作者 冯宝章 郝建萍 +1 位作者 雷健玲 邵宗鸿 《医学研究杂志》 2014年第2期147-149,共3页

目的根据Southern印迹杂交结果设计并合成适当引物。方法以32例MDS、13例可疑MDS、53例其他血液病和8例正常人骨髓细胞DNA为模板进行PCR。根据PCR结果和用于上述Southern印迹杂交的限制性酶切位点,设计并合成2个寡核苷酸(Oligos)经地高... 目的根据Southern印迹杂交结果设计并合成适当引物。方法以32例MDS、13例可疑MDS、53例其他血液病和8例正常人骨髓细胞DNA为模板进行PCR。根据PCR结果和用于上述Southern印迹杂交的限制性酶切位点,设计并合成2个寡核苷酸(Oligos)经地高辛标记,对33例MDS(包括转白血病者),3例可疑MDS和19例其他血液病患者骨髓细胞涂片作原位杂交(ISH)。结果 MDS有共同的PCR产物电池带型。MDS原位杂交均呈阳性反应。对照组19例中仅有1例AA阳性反应,可疑MDS 3例中有2例阳性反应,且杂交信号的增强与MDS转白血病相关(P<0.01),也与SCD阴性相关(P<0.01)。结论建立起MDS PCR基因诊断法,笔者设计的两条Oligos所包含的限制性酶切位点的确是MDS C-erbB重排位置和重排/扩增位置,为MDS基因治疗提供了靶基因的靶位置。 展开更多

关键词 MDS V-erbB PCR Oligos原位杂交基因诊断

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牦牛病毒性腹泻病PCR诊断方法的建立

13

作者 蔡其刚 叶成玉 +6 位作者 王光华 陆艳 李秀萍 张晓强 万玛单智 李万财 马利青 《青海畜牧兽医杂志》 2012年第4期1-3,共3页

采用阻断ELISA方法对来自天峻县的327份牦牛血清进行了牛BVDV特异性抗体的检测,共检出231份血清阳性,血清阳性率为70.64%。其中:在135份野牦牛血清中检出110份阳性血清,阳性率为81.48%;在192份家牦牛血清中检出阳性121份,阳性率为63.02... 采用阻断ELISA方法对来自天峻县的327份牦牛血清进行了牛BVDV特异性抗体的检测,共检出231份血清阳性,血清阳性率为70.64%。其中:在135份野牦牛血清中检出110份阳性血清,阳性率为81.48%;在192份家牦牛血清中检出阳性121份,阳性率为63.02%。从231份ELISA检测阳性血清中随机抽取了20份,采用RT-PCR方法进行检测,结果共检出18份样品为BVDV/MV RT-PCR阳性,阴性血清未扩增出E0基因,RT-PCR方法检测结果与ELISA方法符合率为90%。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻/黏膜病 阻断ELISA RT-PCR 血清抗体

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PCR检测NHL患者骨髓重排基因及临床意义 被引量：1

14

作者 徐兵 周淑芸 +1 位作者 孙竞 张剑 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第2期105-107,共3页

目的：为研究非霍奇金氏恶性淋巴瘤（ＮＨＬ）的骨髓微小病灶及其临床意义。方法：采用ＰＣＲ技术联合检测４２例ＮＨＬ患者骨髓标本免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）、Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）ＶγＩ－Ｊｒ及ＴＣＲＶδ２－Ｄδ３重排基因。结果... 目的：为研究非霍奇金氏恶性淋巴瘤（ＮＨＬ）的骨髓微小病灶及其临床意义。方法：采用ＰＣＲ技术联合检测４２例ＮＨＬ患者骨髓标本免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）、Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）ＶγＩ－Ｊｒ及ＴＣＲＶδ２－Ｄδ３重排基因。结果：３０．９％（１３／４２）存在ＩｇＨ重排，２３．８％（１０／４２）存在ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ重排，１９．０％（８／４２）存在ＴＣＲＶδ２－Ｄδ３重排；联合检测三个重排基因，总阳性率为４２．９％（１８／４２）。而骨髓形态学检查的阳性率仅为１９．０％（８／４２）。ＰＣＲ检测ＮＨＬ骨髓浸润的阳性率显著高于形态学检查（Ｐ＜０．０１）。对其中６例ＰＣＲ检测阳性而形态学检查阴性病例追踪观察发现，３～８月后病人形态学检查均发现骨髓浸润，ＰＣＲ检测阳性较形态学检查平均提前４．８３月。结论：ＰＣＲ检测ＮＨＬ患者骨髓重排基因能早期发现微小病灶且阳性率高，有助于预后判断。 展开更多

关键词 基因重排 检测 NHL 淋巴瘤 骨髓 聚合酶链反应

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μ型阿片受体的克隆及序列分析

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作者 孙巧玲 陈京 白波 《泰山医学院学报》 CAS 2005年第1期1-3,共3页

目的　为实现人μ型阿片受体在哺乳动物细胞中的表达以及研究其生物学特性、下游基因表达及功能研究,克隆了人全长μ型受体cDNA。方法　从人脑组织中提取总RNA ,通过逆转录巢式PCR ,扩增μ受体全长cDNA。克隆至pMD1 8 -T载体中,并进行... 目的　为实现人μ型阿片受体在哺乳动物细胞中的表达以及研究其生物学特性、下游基因表达及功能研究,克隆了人全长μ型受体cDNA。方法　从人脑组织中提取总RNA ,通过逆转录巢式PCR ,扩增μ受体全长cDNA。克隆至pMD1 8 -T载体中,并进行了酶切、PCR鉴定及测序分析。结果　获得大小1 2 2 9bp大小的μ受体全长cDNA基因,并构建到载体中,为研究受体信号转导下游基因的表达奠定理论基础。结论　利用巢式RT PCR法成功克隆了的μ受体全长cDNA序列,构建了pT -MD/hμR质粒。 展开更多

关键词 μ型阿片受体cDNA 巢式PCR 重组pT-MD/hμR质粒

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散养‘青脚麻鸡’群暴发马立克病的病理变化观察 被引量：1

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作者 于宏伟 吴润 +4 位作者 万学瑞 刘磊 刘霞 张小丽 贾晓蕊 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1-5,10,共6页

通过发病情况调查、临床症状观察、病理学检查及AGP和PCR诊断技术,对甘肃省康乐县某鸡场散养育成‘青脚麻鸡’群发生的疑似马立克病进行了诊断和病理学研究.结果表明:鸡群生长到8周龄开始发病、死亡,表现出典型的马立克病临床症状;病理... 通过发病情况调查、临床症状观察、病理学检查及AGP和PCR诊断技术,对甘肃省康乐县某鸡场散养育成‘青脚麻鸡’群发生的疑似马立克病进行了诊断和病理学研究.结果表明:鸡群生长到8周龄开始发病、死亡,表现出典型的马立克病临床症状;病理剖检主要表现为除肺脏外大部分内脏实质器官产生大小不等形状不规则的肿瘤结节;病理组织学变化为各组织器官可见弥漫性的淋巴细胞浸润,但肿瘤细胞的异形性不明显;AGP试验为阳性;特异性PCR检测扩增出约804bp的特异性meq基因片段,符合预期的片段大小.应用上述诊断技术确诊该鸡场‘青脚麻鸡’群暴发的是急性内脏型马立克病. 展开更多

关键词 马立克病 诊断 病理学 琼脂扩散试验 PCR检测

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恶性髓系肿瘤细胞部分岩藻糖转移酶基因表达研究 被引量：1

17

作者 花紫菱 李志强 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期113-115,共3页

目的研究恶性髓系肿瘤细胞中部分岩藻糖转移酶(FUT1-3、FUT6-7)基因的相对表达情况。方法应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HL-60细胞及31名急性髓细胞白血病(AML)患者与骨髓增生异常综合征(MDS)患者(患者组)的FUT1-3、F... 目的研究恶性髓系肿瘤细胞中部分岩藻糖转移酶(FUT1-3、FUT6-7)基因的相对表达情况。方法应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HL-60细胞及31名急性髓细胞白血病(AML)患者与骨髓增生异常综合征(MDS)患者(患者组)的FUT1-3、FUT6-7基因的相对表达情况,同时以正常CD34+细胞作为HL-60细胞的正常对照、以25名健康体检者作为患者组的正常对照。结果 FUT1-3、FUT6-7基因在HL-60细胞及其对照组的相对表达分别为:0.30±0.03 vs 1.08±0.06、0.68±0.05 vs 1.20±0.14、0.68±0.04 vs 1.00±0.05、0.82±0.03 vs 1.00±0.05、0.59±0.12 vs 1.02±0.15(P<0.01)。FUT1、FUT3基因在患者组与对照组的相对表达分别为:0.85±0.67 vs 1.31±0.5、0.53±0.48 vs 1.34±0.69(P<0.05);FUT2、FUT6、FUT7基因的相对表达量在患者组与对照组间无明显差异(P>0.05)。FUT1-3、FUT6-7基因在AML患者(n=13)与MDS患者(n=18)间的相对表达量差异亦不明显(P>0.05)。结论 FUT1-3、FUT6-7基因在恶性髓系肿瘤细胞HL-60及AML与MDS患者中出现不同程度的相对表达减弱,二者间部分具有关联性。 展开更多

关键词 岩藻糖转移酶(FUT) 恶性髓系肿瘤 HL-60细胞 急性髓细胞白血病(AML) 骨髓增生异常综合征 (MDS) RT-PCR

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连续式白腐真菌膜生物反应器处理染料废水：微生物群落结构及其与脱色效率的关系

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作者 高尚 马丽华 +2 位作者 黄民生 陶芳 陈诚 《北京大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第3期401-406,共6页

通过PCR-DGGE(变性浓度梯度凝胶电泳)分析评价了连续运行100天的白腐真菌膜生物反应器中群落结构的变化,并研究了群落结构与染料脱色效率之间的耦联关系,且通过多维尺度(MDS)方法对DGGE电泳图谱进行分析,以二维图形向量的方式显示。结... 通过PCR-DGGE(变性浓度梯度凝胶电泳)分析评价了连续运行100天的白腐真菌膜生物反应器中群落结构的变化,并研究了群落结构与染料脱色效率之间的耦联关系,且通过多维尺度(MDS)方法对DGGE电泳图谱进行分析,以二维图形向量的方式显示。结果表明,通过对系统内优势菌种的18S rDNA序列进行测定,并通过NCBI(美国国立生物技术信息中心)基因库比对确定的菌种Phanerochaete chrysosporium(P.chrysosporium)在运行期间始终是微生物群落的优势种,随着系统运行时间的延长,其优势愈加明显,但反应器中微生物群落结构Shannon-Wiener多样性指数却逐渐降低,由起始阶段的1.92降至最终的0.92。对DGGE条带进行MDS分析得知,反应器在运行阶段基本稳定维持处在一个区域,表明其微生物群落结构在运行期间较为稳定,且该反应器对染料废水始终具有良好的脱色效果,平均脱色率为82.5%,最高时可达93.2%。 展开更多

关键词 白腐真菌膜生物反应器 PCR—DGGE 群落结构 MDS分析 脱色率

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鸡马立克氏病病毒和疫苗毒株PCR诊断方法的建立及其应用 被引量：2

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作者 周冬玉 李国红 +3 位作者 靳泽华 徐巧霞 徐蓉 张安定 《现代畜牧兽医》 2022年第8期50-54,共5页

研究旨在快速有效地诊断鸡马立克氏病(MD),区分MD血清Ⅰ型病毒(MDV-Ⅰ)与疫苗毒株。试验对Gen Bank发表的140余株MDV序列进行全基因组比对,选定MDV-Ⅰ型特有的meq基因设计1对引物,通过优化退火温度等条件建立了MDV-Ⅰ的PCR诊断方法,评... 研究旨在快速有效地诊断鸡马立克氏病(MD),区分MD血清Ⅰ型病毒(MDV-Ⅰ)与疫苗毒株。试验对Gen Bank发表的140余株MDV序列进行全基因组比对,选定MDV-Ⅰ型特有的meq基因设计1对引物,通过优化退火温度等条件建立了MDV-Ⅰ的PCR诊断方法,评估该方法的特异性、灵敏度及重复性。结果显示,设定退火温度64℃、35个循环时,以MDV-Ⅰ型毒株为模板可扩增得到286 bp的片段;以CVI988或814疫苗毒株为模板时,可扩增得到463 bp的片段;该方法特异性强、灵敏度高,扩增结果稳定,可区分MDV-Ⅰ型毒株和疫苗毒株。应用该方法诊断1例免疫后仍有MD症状的鸡,可同时扩增约286和463 bp的片段;2个片段的测序结果显示,扩增出的片段分别与MDV-Ⅰ型毒株和疫苗毒株相匹配。研究表明,试验建立的PCR方法可快速有效地诊断MDV-Ⅰ型毒株感染鸡并筛选免疫失败的鸡群。 展开更多

关键词 鸡马立克氏病 马立克氏病病毒 疫苗毒 聚合酶链式反应

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miR-200b-3p和miR-200b-5p在马立克氏病抗性与易感SPF鸡法氏囊组织的差异表达分析

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作者 王瑞琪 廉传江 +3 位作者 易诚 韩凌霞 杨春文 陈洪岩 《实验动物与比较医学》 CAS 2017年第3期244-248,共5页

目的在前期高通量测序分析的基础上,进一步利用荧光定量PCR验证miR-200b-3p和miR-200b-5p在马立克氏病(MD)抗性(B21单倍型)与易感(B19单倍型)鸡法氏囊组织的差异表达情况。方法通过经优化后确定的最佳实时荧光定量PCR反应体系和扩增条件... 目的在前期高通量测序分析的基础上,进一步利用荧光定量PCR验证miR-200b-3p和miR-200b-5p在马立克氏病(MD)抗性(B21单倍型)与易感(B19单倍型)鸡法氏囊组织的差异表达情况。方法通过经优化后确定的最佳实时荧光定量PCR反应体系和扩增条件,进行荧光定量PCR分析。结果 miR-200b-3p和miR-200b-5p荧光定量PCR结果与高通量测序结果上下调情况基本一致,但差异表达显著性分析结果却不完全相同。结论尽管差异表达显著性分析结果不完全一致,但两种方法的结果均提示来源于同一前体的miR-200b-3p和miR-200b-5p可能与MD抗性/易感性相关。 展开更多

关键词 miR-200b 马立克氏病(MD) 抗性/易感性 高通量测序 荧光定量PCR

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