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Fusion of Dual-targeting Peptides with MAP30 Promotes the Apoptosis of MDA-MB-231 Breast Cancer Cells
1
作者 YANG Yi-Xuan WANG Xin-Yi +5 位作者 CHEN Wei-Wei GAN Li SUN Yu LIN Tong ZHAO Wei-Chun ZHU Zhen-Hong 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第2期260-272,共13页
Momordica antiviral protein 30 kD(MAP30)is a type I ribosome-inactivating protein(RIP)with antibacterial,anti-HIV and antitumor activities but lacks the ability to target tumor cells.To increase its tumor-targeting ab... Momordica antiviral protein 30 kD(MAP30)is a type I ribosome-inactivating protein(RIP)with antibacterial,anti-HIV and antitumor activities but lacks the ability to target tumor cells.To increase its tumor-targeting ability,the arginine-glycine-aspartic(RGD)peptide and the epidermal growth factor receptor interference(EGFRi)peptide were fused with MAP30,which was named ELRL-MAP30.The efficiency of targeted therapy for triple-negative breast cancer(TNBC)MDA-MB-231 cells,which lack the expression of estrogen receptor(ER),Progesterone receptor(PgR)and human epidermal growth factor receptor-2(HER2),is limited.In this study,we focus on exploring the effect and mechanism of ELRL-MAP30 on TNBC MDA-MB-231 cells.First,we discovered that ELRL-MAP30 significantly inhibited the migration and invasion of MDA-MB-231 cells and induced MDA-MB-231 cell apoptosis.Moreover,ELRL-MAP30 treatment resulted in a significant increase in Bax expression and a decrease in Bcl-2 expression.Furthermore,ELRL-MAP30 triggered apoptosis via the Fak/EGFR/Erk and Ilk/Akt signaling pathways.In addition,recombinant ELRL-MAP30 can inhibit chicken embryonic angiogenesis,and also inhibit the tube formation ability of human umbilical vein endothelial cells(HUVECs),indicating its potential therapeutic effects on tumor angiogenesis.Collectively,these results indicate that ELRL-MAP30 has significant tumor-targeting properties in MDA-MB-231 cancer cells and reveals potential therapeutic effects on angiogenesis.These findings indicate the potential role of ELRL-MAP30 in the targeted treatment of the TNBC cell line MDA-MB-231. 展开更多
关键词 arginine-glycine-aspartic peptide(RGD) epidermal growth factor receptor interference peptide(EGFRi) momordica antiviral protein(map30) MDA-MB-231 cell tumor targeting APOPTOSIS
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苦瓜籽蛋白MAP30的聚乙二醇化学修饰及抗肿瘤活性研究 被引量:4
2
作者 何义国 赵兴秀 +1 位作者 邓静 吴华昌 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期662-666,共5页
采用硫酸铵分级沉淀、SP-Sepharose FF离子交换层析和Blue Sepharose CL-6B亲和层析获得苦瓜蛋白MAP30;采用(mPEG)2-Lys-NHS修饰MAP30;对修饰后的MAP30-PEG结合物与MAP30的抗肿瘤活性进行了比较分析。结果发现:MAP30对多数肿瘤细胞株具... 采用硫酸铵分级沉淀、SP-Sepharose FF离子交换层析和Blue Sepharose CL-6B亲和层析获得苦瓜蛋白MAP30;采用(mPEG)2-Lys-NHS修饰MAP30;对修饰后的MAP30-PEG结合物与MAP30的抗肿瘤活性进行了比较分析。结果发现:MAP30对多数肿瘤细胞株具有明显的抑制作用,而且抑制效果在一定范围内具有剂量和时效依赖关系。但是在相同条件下,MAP30对人正常胚肺二倍体细胞株WI-38的毒性极小。MAP30和MAP30-PEG结合物对小鼠黑色素瘤(B16)、人宫颈癌细胞(Hela)和人表皮癌细胞(A431)细胞均表现出抑制作用,且这种作用在一定范围内呈时效和量效依耐性。但在相同浓度下PEG-MAP30对小鼠黑色素瘤(B16)、人宫颈癌细胞(Hela)和人表皮癌细胞(A431)的抑制作用低于MAP30,约占65%~70%左右。 展开更多
关键词 苦瓜籽 核糖体失活蛋白(map30) map30-PEG结合物 抗肿瘤
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MAP30-PEG结合物对A549体外细胞增殖作用的研究 被引量:2
3
作者 邓缅 刘双凤 +4 位作者 孟尧 沈富兵 吴民泸 郑崛村 孟延发 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期395-398,共4页
目的探讨苦瓜籽核糖体失活蛋白MAP30及其聚乙二醇修饰物对人肺腺癌细胞A549增殖、细胞凋亡的影响和caspase3相关凋亡途径的诱导作用。方法用MTT法测定MAP30和MAP30-PEG结合物对人肺腺癌细胞A549的抑制率;通过Hoechst33258荧光染色观察A... 目的探讨苦瓜籽核糖体失活蛋白MAP30及其聚乙二醇修饰物对人肺腺癌细胞A549增殖、细胞凋亡的影响和caspase3相关凋亡途径的诱导作用。方法用MTT法测定MAP30和MAP30-PEG结合物对人肺腺癌细胞A549的抑制率;通过Hoechst33258荧光染色观察A549细胞凋亡形态,并用流式细胞术测定细胞凋亡率以及用western blot检测凋亡细胞caspase3表达。结果 MAP30和MAP30-PEG结合物均对A549有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性关系;MAP30-PEG结合物对A549细胞增值抑制率约为MAP30的60%;Hoechst33258荧光染色后均呈典型凋亡形态;流式细胞术检测显示,MAP30和MAP30-PEG结合物作用于A549细胞48 h后均可使A549细胞呈现Sub-G1凋亡峰,凋亡率分别为58.7%、42.7%;MAP30和MAP30-PEG结合物对胞内caspase3在凋亡过程中显示有激活作用。结论 MAP30和MAP30-PEG结合物均对A549增殖有明显的抑制作用;两者均能通过caspase3途径诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 map30 map30-PEG结合物 A549细胞 CASPASE3 细胞凋亡
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MAP30苦瓜抗HIV蛋白对细胞内HBeAg表达抑制作用的定量分析 被引量:9
4
作者 王九平 王临旭 +5 位作者 孙永涛 白雪帆 李谨革 陈伟红 孙利 骆抗先 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期183-184,共2页
目的 :研究Mr 为 30 0 0 0的苦瓜抗HIV蛋白 (MAP30 )对 2 .2 .15细胞内HBV基因表达的抑制作用。方法 :将HBVDNA转染的人肝癌细胞株 2 .2 .15 ,在MAP30存在的情况下培养后 ,进行间接免疫荧光染色 ,用共聚焦技术定量分析细胞内HBeAg的表... 目的 :研究Mr 为 30 0 0 0的苦瓜抗HIV蛋白 (MAP30 )对 2 .2 .15细胞内HBV基因表达的抑制作用。方法 :将HBVDNA转染的人肝癌细胞株 2 .2 .15 ,在MAP30存在的情况下培养后 ,进行间接免疫荧光染色 ,用共聚焦技术定量分析细胞内HBeAg的表达。结果 :与对照组相比较 ,MAP30培养的细胞内HBeAg荧光量明显减少。结论 :MAP30对 2 .2 .15细胞内HBeAg的表达有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 map30 苦瓜抗HIV蛋白 基因表达 共聚焦显微镜
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重组苦瓜MAP30蛋白对大肠癌LoVo细胞凋亡的影响 被引量:4
5
作者 樊剑鸣 张晓峰 +2 位作者 张巧 姚武 徐玉宝 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第1期116-119,共4页
目的:克隆及重组苦瓜蛋白MAP30,观察MAP30对大肠癌LoVo细胞凋亡的影响。方法:RT-PCR法克隆MAP30基因的cDNA序列,并表达、纯化MAP30蛋白;MTT法测定纯化的MAP30蛋白对LoVo细胞的生长抑制作用;彗星实验观察MAP30引起凋亡的LoVo细胞基因组... 目的:克隆及重组苦瓜蛋白MAP30,观察MAP30对大肠癌LoVo细胞凋亡的影响。方法:RT-PCR法克隆MAP30基因的cDNA序列,并表达、纯化MAP30蛋白;MTT法测定纯化的MAP30蛋白对LoVo细胞的生长抑制作用;彗星实验观察MAP30引起凋亡的LoVo细胞基因组的降解情况。结果:成功克隆了苦瓜蛋白MAP30基因;MAP30蛋白对LoVo细胞体外生长具有抑制作用;MAP30蛋白对LoVo细胞半数抑制质量浓度(IC50)为70.0mg/L。MAP30在体外能诱导LoVo细胞凋亡。结论:重组的苦瓜MAP30蛋白在体外能抑制LoVo细胞生长,并能诱导其凋亡。 展开更多
关键词 苦瓜蛋白map30 大肠肿瘤 LOVO细胞 细胞生长抑制率 凋亡
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MAP30抗乙型肝炎病毒的体外实验 被引量:4
6
作者 王九平 孙永涛 +6 位作者 白雪帆 陈伟红 李谨革 张岩 王平忠 骆抗先 张凌君 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第9期837-839,共3页
目的 :探讨MAP30 (momordicaanti HIV proteinof30ku)体外抗乙型肝炎病毒 (HBV)的作用 .方法 :以HBVDNA转染的人肝癌细胞株 (HepG2 .2 .15 )为靶细胞 ,与MAP30共同温育 10d ,观察对细胞的毒性 ;用ELISA、荧光定量PCR和Southern印迹法分... 目的 :探讨MAP30 (momordicaanti HIV proteinof30ku)体外抗乙型肝炎病毒 (HBV)的作用 .方法 :以HBVDNA转染的人肝癌细胞株 (HepG2 .2 .15 )为靶细胞 ,与MAP30共同温育 10d ,观察对细胞的毒性 ;用ELISA、荧光定量PCR和Southern印迹法分别检测培养上清中HBsAg ,HBVDNA和细胞内HBVDNA .结果 :MAP30能显著减少HepG2 .2 .15细胞培养上清液中HBsAg ,HBVDNA的分泌 ,在第 8日时 ,对HBsAg抑制率为 5 0 .4 9% ,HBVDNA定量 <1× 10 7拷贝·mL-1;Southern印迹法显示MAP30能抑制HBV复制中间体及共价环状闭合DNA .MAP30未发现对细胞有毒性作用 .结论 :MAP30具有较强的体外抗HBV作用 ,作为新的抗病毒植物蛋白 。 展开更多
关键词 map30 肝炎病毒 乙型 人肝癌细胞株 HEPG2.2.15
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苦瓜核糖体失活蛋白MAP30基因的表达及特性分析 被引量:4
7
作者 樊剑鸣 许君 +2 位作者 张巧 姚武 徐玉宝 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2008年第6期1142-1146,共5页
目的:克隆苦瓜MAP30蛋白基因的cDNA序列,并在体外进行原核表达和纯化,体外测定MAP30对镰刀菌的抑制作用并测定MAP30基因的表达模式。方法:利用RT-PCR技术扩增861 bp的苦瓜蛋白MAP30基因编码区序列,克隆至pMD18-T载体。构建苦瓜MAP30原... 目的:克隆苦瓜MAP30蛋白基因的cDNA序列,并在体外进行原核表达和纯化,体外测定MAP30对镰刀菌的抑制作用并测定MAP30基因的表达模式。方法:利用RT-PCR技术扩增861 bp的苦瓜蛋白MAP30基因编码区序列,克隆至pMD18-T载体。构建苦瓜MAP30原核表达质粒pET-28a-MAP30,SDS-PAGE和Western blot检测MAP30的表达。采用镍离子亲合层析纯化MAP30,并采用真菌抑制实验检测对镰刀菌的抑制作用,Northern blot检测其表达模式。结果:克隆片段与基因库所登录的序列一致,表达的MAP30蛋白相对分子质量约为30 000,MAP30体外能抑制镰刀菌的生长,镰刀菌能诱导MAP30基因的表达。结论:MAP30基因可能参与植物早期的过敏反应并在植物的抗病中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 苦瓜 map30蛋白 镰刀菌
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苦瓜MAP30蛋白基因克隆、表达及其抗肿瘤活性研究 被引量:13
8
作者 林育泉 周鹏 曾召绵 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期60-66,共7页
通过PCR技术,从苦瓜总DNA中扩增出编码MAP30成熟蛋白的基因,经测序鉴定后亚克隆到原核表达载体pET 30a中,构建成带有N端6His tag的融合表达载体。表达载体用CaCl2 介导的化学转化法转化E .coliBL2 1 (DE3) ,然后利用PCR筛选阳性克隆。... 通过PCR技术,从苦瓜总DNA中扩增出编码MAP30成熟蛋白的基因,经测序鉴定后亚克隆到原核表达载体pET 30a中,构建成带有N端6His tag的融合表达载体。表达载体用CaCl2 介导的化学转化法转化E .coliBL2 1 (DE3) ,然后利用PCR筛选阳性克隆。工程菌经1mmol/LIPTG诱导4h实现高效表达,而且在30℃时融合蛋白表达量最高,约占菌体总蛋白5 6%。可溶性分析表明,该融合蛋白在大肠杆菌中主要以可溶的形式存在。重组蛋白通过Ni2 +鏊合亲和层析进行纯化,纯化蛋白占上清总蛋白37. 2 % ,发酵液产率为2 5 0mg/L。Westernblot分析表明,重组蛋白可与兔抗his tag多克隆抗体发生特异性反应。利用MTT法分析重组MAP30的细胞毒性,结果表明其对小鼠3T3和S 1 80肿瘤细胞株具有明显的抑制作用,ID50 分别约为5 0 μg/ml和3 0mg/ml,而对人正常胚肺二倍体WI 38细胞株的毒性极小。 展开更多
关键词 苦瓜 map30蛋白 基因克隆 基因表达 抗肿瘤活性 基因工程药物
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苦瓜果实的药用和苦瓜蛋白MAP30的研究进展 被引量:5
9
作者 赵妍 丁国华 鲍宁宇 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期129-133,共5页
苦瓜是药食同源的蔬菜,其果实中含有多种有效成分,具有降血糖、抗病毒、抗肿瘤、抗生育、抗氧化、抑菌等功能特性。文章综述了近年来国内外苦瓜及苦瓜蛋白MAP30(Momordica anti-HIV Protein of 30 ku)的研究情况,阐述了苦瓜的保健功能... 苦瓜是药食同源的蔬菜,其果实中含有多种有效成分,具有降血糖、抗病毒、抗肿瘤、抗生育、抗氧化、抑菌等功能特性。文章综述了近年来国内外苦瓜及苦瓜蛋白MAP30(Momordica anti-HIV Protein of 30 ku)的研究情况,阐述了苦瓜的保健功能及其在医学领域的应用研究进展,并展望了其研究应用前景。 展开更多
关键词 苦瓜 map30 药用 研究进展
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苦瓜MAP30基因原核表达载体的构建和PCR快速检测重组子的研究 被引量:4
10
作者 庄东红 欧阳永长 胡忠 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期701-704,共4页
根据已报道的序列,把苦瓜(Momordicacharantia)MAP30基因成功克隆到原核表达载体pET28a(+)中,并对PCR快速检测阳性克隆进行了研究。结果表明,直接用菌落、菌液、酚氯仿处理过的菌液,以及提取的质粒进行PCR都可以成功地筛选阳性菌落。其... 根据已报道的序列,把苦瓜(Momordicacharantia)MAP30基因成功克隆到原核表达载体pET28a(+)中,并对PCR快速检测阳性克隆进行了研究。结果表明,直接用菌落、菌液、酚氯仿处理过的菌液,以及提取的质粒进行PCR都可以成功地筛选阳性菌落。其中,酚氯仿处理过的菌液PCR与质粒PCR的结果最接近,而且比质粒PCR简单,因此可作为方便可靠的阳性克隆筛选的新方法。 展开更多
关键词 map30 PCR 克隆子筛选 苦瓜
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苦瓜蛋白MAP30通过AKT/mTOR通路促进多发性骨髓瘤细胞的自噬和凋亡 被引量:3
11
作者 何颖 方芳 +1 位作者 颜宏利 江松福 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期299-305,共7页
目的:探讨苦瓜蛋白MAP30在多发性骨髓瘤中的作用及其机制。方法:将人骨髓瘤RPMI-8226、NCI-H929和U266细胞为靶细胞,以不同浓度(1~10μmol/L)的MAP30处理后,采用CCK-8法检测多发骨髓瘤细胞株RPMI-8226、NCI-H929和U266的增殖能力,Annex... 目的:探讨苦瓜蛋白MAP30在多发性骨髓瘤中的作用及其机制。方法:将人骨髓瘤RPMI-8226、NCI-H929和U266细胞为靶细胞,以不同浓度(1~10μmol/L)的MAP30处理后,采用CCK-8法检测多发骨髓瘤细胞株RPMI-8226、NCI-H929和U266的增殖能力,Annexin V/PI流式细胞术检测骨髓瘤细胞的凋亡情况,Wb实验检测骨髓瘤细胞凋亡相关蛋白(PARP)、自噬相关蛋白(LC3II、P62)及AKT/mTOR通路相关蛋白的表达水平,CCK-8法、流式细胞术和Wb实验检测MAP30联合自噬激动剂雷帕霉素(Rap)或自噬抑制剂巴弗洛霉素(Baf)作用后骨髓瘤细胞增殖、凋亡和自噬的变化。结果:MAP30(1~10μmol/L)抑制骨髓瘤细胞的增殖,且其对增殖的抑制呈时间和剂量依赖关系(P<0.05或P<0.01)。MAP30单独作用骨髓瘤细胞后,细胞凋亡和细胞自噬增加,PARP裂解增多,LC3II表达水平增加,P62表达明显下降(均P<0.05或P<0.01);MAP30+Rap作用骨髓瘤细胞后,较单用MAP30细胞增殖率增加、细胞凋亡率减少、细胞自噬减少、PARP裂解降低、LC3II表达降低及P62表达增加(均P<0.05或P<0.01);相反,MAP30+Baf作用骨髓瘤细胞较单用MAP30,细胞增殖率减少、细胞凋亡率增加、细胞自噬增加、PARP裂解增加、LC3II表达增加、P62表达降低(均P<0.05或P<0.01);MAP30作用骨髓瘤细胞后,AKT/mTOR通路相关蛋白p-AKT和p-mTOR表达水平明显降低(均P<0.05)。结论:MAP30可通过AKT/mTOR通路促进骨髓瘤细胞的凋亡和自噬,可能为骨髓瘤的治疗提供新的治疗策略。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 苦瓜蛋白 map30 AKT/mTOR通路 自噬 凋亡
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苦瓜籽核糖体失活蛋白MAP30的纯化与性质研究 被引量:3
12
作者 包凌晟 钱正旭 +2 位作者 魏波 张永明 孟延发 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第S1期107-111,共5页
采用丙酮分级沉淀、Superdex 75层析和Blue Sepharose CL-6B层析,从苦瓜籽中获得核糖体失活蛋白MAP30。纯化的MAP30经PAGE、SDS-PAGE、IEF和Periodate-Schiff分析均为单一蛋白着色带或单一糖蛋白着色带,根据SDS-PAGE计算其相对分子量为3... 采用丙酮分级沉淀、Superdex 75层析和Blue Sepharose CL-6B层析,从苦瓜籽中获得核糖体失活蛋白MAP30。纯化的MAP30经PAGE、SDS-PAGE、IEF和Periodate-Schiff分析均为单一蛋白着色带或单一糖蛋白着色带,根据SDS-PAGE计算其相对分子量为30kDa,经IEF-PAGE计算其pI为9.0,采用硫酸-苯酚法测得其含糖量为1.05%。N端测序结果为Asp-Val-Asn-Phe-Asp-LeuSer-。光谱学研究表明:最大紫外吸收峰为280nm,以278nm波长光激发时,该蛋白具有304nm荧光发射峰和316nm副峰,以295nm波长光激发时,该蛋白的最大荧光发射峰在317nm。体外试验表明其对小鼠黑色素细胞瘤B16细胞具有明显抑制作用,而对完整细胞毒性极小。 展开更多
关键词 苦瓜籽 核糖体失活蛋白(map30) 荧光光谱
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苦瓜提取物MAP30抗病毒的研究进展 被引量:24
13
作者 王先远 高兰兴 《氨基酸和生物资源》 CAS 2000年第2期6-11,共6页
苦瓜作为药食同源的植物 ,含有许多有效成分 ,其中 MA P30是近来研究比较多的一种蛋白成分。本文概述了 MAP30的提取及其氨基酸结构 ,并从 RN A N -糖苷酶活性、DN A拓扑学失活功能、HIV- 1整合酶抑制功能三个方面论述了
关键词 map30 抗病毒机理 提取 苦瓜 结构
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重组苦瓜叶蛋白MAP30诱导人食管癌细胞株EC-1.71凋亡的实验研究 被引量:3
14
作者 韩晓红 邵世和 +4 位作者 薛延军 陈德玉 黄河 李先茜 许化溪 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期354-357,共4页
目的探讨用重组苦瓜蛋白MAP30(Momordica anti-HIV protein of 30 ku)诱导人食管癌细胞株EC-1.71细胞凋亡状况。方法 MAP30诱导EC-1.71细胞后,透射电镜观察细胞凋亡的形态特征;JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm)变化;ELISA法检... 目的探讨用重组苦瓜蛋白MAP30(Momordica anti-HIV protein of 30 ku)诱导人食管癌细胞株EC-1.71细胞凋亡状况。方法 MAP30诱导EC-1.71细胞后,透射电镜观察细胞凋亡的形态特征;JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm)变化;ELISA法检测细胞培养上清液中细胞色素c(Cytc)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;免疫细胞化学法检测细胞ERK1/PERK1,AKT/PAKT和NF-κB表达;荧光微板阅读仪检测细胞caspase-12活性。结果 MAP30诱导可以使EC-1.71细胞固缩,核膜扭曲,核染色质聚集成块并靠近核膜,内质网高度膨胀、扩张;ΔΨm水平下降;Cytc和TNF-α含量增加;胞质中ERK1、AKT表达增强而胞核中PERK1、PAKT表达降低,NF-κB活性降低,caspase-12活性增强。结论 MAP30可以诱导EC-1.71细胞凋亡。 展开更多
关键词 重组苦瓜蛋白map30 食管癌 EC-1.71细胞 凋亡
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不同苦瓜品种MAP30基因的克隆及序列分析 被引量:3
15
作者 杨洲平 黄乾明 +1 位作者 刘一江 陈平 《四川农业大学学报》 CSCD 2007年第1期58-62,共5页
采用PCR法从精选白皮苦瓜(JX)、穗农牌早优苦瓜(ZY)、碧翠苦瓜(BC)、银田牌长白苦瓜(YT)和银田牌蓝山大白苦瓜(LAN)5个品种中克隆到5个长度均为861bp的MAP30基因JX—MAP30、ZY—MAP30、BC-MAP30(Genebank accession No:DQ64... 采用PCR法从精选白皮苦瓜(JX)、穗农牌早优苦瓜(ZY)、碧翠苦瓜(BC)、银田牌长白苦瓜(YT)和银田牌蓝山大白苦瓜(LAN)5个品种中克隆到5个长度均为861bp的MAP30基因JX—MAP30、ZY—MAP30、BC-MAP30(Genebank accession No:DQ643967)、YT—MAP30(No:DQ643968)和LAN-MAP03。序列分析表明,BC-MAP30和YT-MAP30与已报道的MAP30基因分别存在2个和3个碱基的不同,均编码263个氨基酸残基组成的成熟蛋白,与其他葫芦科植物的Ⅰ型核糖体失活蛋白类以及天花粉毒蛋白、多花白树毒蛋白、肥皂草毒素的同源性分别为68.90%、82.75%、71.25%和66.45%,其90~220位氨基酸序列较为保守。二级结构预测表明,BC—MAP30和YT—MAP30编码的成熟肚在N端均有一个延伸的6个β片层。 展开更多
关键词 核糖体失活蛋白 苦瓜 map30 克隆 序列分析
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苦瓜MAP30蛋白研究现状及应用前景分析 被引量:4
16
作者 刘子记 刘维侠 +2 位作者 朱婕 牛玉 杨衍 《江苏农业科学》 2019年第6期15-19,共5页
苦瓜MAP30蛋白属于Ⅰ型核糖体失活蛋白,具有广谱的抗病毒、抗肿瘤活性,并且具有良好的特异性,对正常细胞无毒副作用。总结了MAP30蛋白结构、抗病毒活性、抗肿瘤活性及相关机制,并对其应用前景进行了分析,为进一步深入研究MAP30蛋白抗病... 苦瓜MAP30蛋白属于Ⅰ型核糖体失活蛋白,具有广谱的抗病毒、抗肿瘤活性,并且具有良好的特异性,对正常细胞无毒副作用。总结了MAP30蛋白结构、抗病毒活性、抗肿瘤活性及相关机制,并对其应用前景进行了分析,为进一步深入研究MAP30蛋白抗病毒、抗肿瘤机制及开发相关药物提供科学依据和理论基础。 展开更多
关键词 苦瓜 核糖体失活蛋白 map30 抗病毒 抗肿瘤 现状 应用前景
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MAP30蛋白结构功能的生物信息学研究 被引量:4
17
作者 周小东 沈富兵 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期560-563,542,共5页
使用protparam、PHDhtm、PredictProtein等生物信息学在线服务器,对MAP30蛋白进行全面分析预测,研究MAP30蛋白具有的抗HIV活性,为临床应用提供抗科学依据和理论基础。结果表明:MAP30蛋白为稳定的碱性疏水蛋白,序列上存在三段跨膜螺旋结... 使用protparam、PHDhtm、PredictProtein等生物信息学在线服务器,对MAP30蛋白进行全面分析预测,研究MAP30蛋白具有的抗HIV活性,为临床应用提供抗科学依据和理论基础。结果表明:MAP30蛋白为稳定的碱性疏水蛋白,序列上存在三段跨膜螺旋结构和一段无序化位区域,肽链上的二硫键可使分子间形成聚集体,是一种分泌蛋白。MAP30蛋白序列包含信号肽、低复杂度区域和RIP样活性区域3个区域,具有细胞外被膜、异构酶、免疫应答三种功能。序列上分布着N-糖基化位点、N-豆蔻酰化位点、Shiga/ricin核糖体失活蛋白活性位点和多段蛋白激酶磷酸化位点。 展开更多
关键词 map30 抗HIV 生物信息学
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苦瓜MAP30蛋白功能区段缺失体构建及其生物活性研究 被引量:3
18
作者 刘思 林育泉 +2 位作者 周鹏 陈海宁 符兆理 《药物生物技术》 CAS CSCD 2007年第6期391-396,共6页
通过PCR技术从质粒pET30a-MAP30中分别得到编码M1(D1-K195)、M2(D1-E187)、M3(A11-K195)、M4(A11-E187)4个功能区段缺失体蛋白的序列,经测序鉴定后亚克隆到原核表达载体pET22b中,表达载体用CaCl2介导的化学转化法转化E.coliBL21(DE3)感... 通过PCR技术从质粒pET30a-MAP30中分别得到编码M1(D1-K195)、M2(D1-E187)、M3(A11-K195)、M4(A11-E187)4个功能区段缺失体蛋白的序列,经测序鉴定后亚克隆到原核表达载体pET22b中,表达载体用CaCl2介导的化学转化法转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,然后利用菌落PCR筛选阳性克隆。工程菌在28℃时经1mmol/LIPTG诱导5h时实现高效表达,4种重组蛋白在大肠杆菌中都以包涵体形式存在。利用MTT法分析4个重组蛋白复性液的抗肿瘤活性,结果表明4个功能区段缺失体重组蛋白均对人羊膜细胞系wish、鼠髓白血病细胞系NFS-60、小鼠腹水瘤细胞S-180有杀伤作用,其中对鼠髓白血病细胞系NFS-60抑制作用最明显。M1、M2、M3和M44个缺失体重组蛋白对NFS-60作用的IC50分别为2.51、2.42、1.89μg/ml和1.90μg/ml。细胞毒性分析表明,4个重组蛋白对人正常肝细胞系HL-70的细胞毒性极小,且都低于重组MAP30蛋白的细胞毒性。 展开更多
关键词 map30 功能区段 克隆 表达 活性分析
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苦瓜MAP30基因的克隆表达及对BGC-823细胞形态的影响 被引量:1
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作者 黄河 邵世和 +3 位作者 韩晓红 田树伟 韩军 黄世腾 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2010年第2期136-140,共5页
目的:克隆苦瓜蛋白MAP30基因,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,初步研究MAP30蛋白对BGC-823细胞的影响。方法:应用PCR技术从苦瓜基因组中扩增出MAP30基因片段,将其TA克隆和双酶切鉴定,再进行测序分析,并构建重组表达载体pET-28a-MAP30,... 目的:克隆苦瓜蛋白MAP30基因,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,初步研究MAP30蛋白对BGC-823细胞的影响。方法:应用PCR技术从苦瓜基因组中扩增出MAP30基因片段,将其TA克隆和双酶切鉴定,再进行测序分析,并构建重组表达载体pET-28a-MAP30,转化到表达菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,用NTA-Ni2+树脂分离纯化所表达的MAP30融合蛋白,并经SDS-PAGE电泳鉴定;纯化的蛋白作用于BGC-823细胞后通过光镜和电镜进行形态学观察。结果:成功扩增出MAP30基因为861bp,与基因库中公布的DQ643967同源性为100%,与DQ643968和S79450的同源性为99%;成功构建pET-28a-MAP30原核表达重组质粒;通过NTA-Ni2+树脂分离纯化目的蛋白,获得原核表达的大小约为30000的MAP30融合蛋白,与预测一致;蛋白作用细胞后,细胞形态有明显变化。结论:成功构建pET-28a-MAP30表达载体并获得原核表达的MAP30融合蛋白;重组MAP30蛋白能引起BGC-823细胞明显的形态学变化。 展开更多
关键词 苦瓜 map30 克隆 BGC-823细胞 凋亡 电镜
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