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M细胞靶向融合肽SAM-GFP的原核表达、纯化及靶向性质鉴定
1
作者 吴静 张乐乐 +5 位作者 张富蕊 刘昆梅 李润乐 汤锋 刘菁 郭乐 《中国生物制品学杂志》 2025年第7期796-801,共6页
目的 原核表达M细胞靶向融合肽SAM-GFP,纯化后进行靶向性质鉴定,以期为M细胞靶向性幽门螺杆菌口服疫苗的研究奠定基础。方法 采用基于PCR的精确合成(PCR-based accurate synthesis,PAS)法合成GFP基因,克隆至载体pCzn1-SAM中,构建重组质... 目的 原核表达M细胞靶向融合肽SAM-GFP,纯化后进行靶向性质鉴定,以期为M细胞靶向性幽门螺杆菌口服疫苗的研究奠定基础。方法 采用基于PCR的精确合成(PCR-based accurate synthesis,PAS)法合成GFP基因,克隆至载体pCzn1-SAM中,构建重组质粒pCzn1-SAM-GFP。将重组质粒转化至感受态E.coli Arctic Express,经IPTG诱导表达后,通过Ni-NTA亲和层析进行纯化,获得融合蛋白SAM-GFP,并进行12%SDS-PAGE、Western blot及荧光显微镜鉴定。利用小鼠回肠袢模型,通过免疫荧光染色法验证融合蛋白SAM-GFP的M细胞靶向性。结果 重组质粒pCzn1-SAMGFP经双酶切及测序鉴定,证明构建正确。融合蛋白SAM-GFP相对分子质量约54 900,主要以可溶性形式表达,纯化后纯度达94.5%,可与鼠抗6×His/GFP单克隆抗体特异性结合,荧光显微镜下可见绿色荧光。SAM-GFP能被小肠M细胞特异性摄取。结论 成功表达并纯化了具有M细胞靶向功能的融合蛋白SAM-GFP,为后续幽门螺杆菌口服疫苗的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 m细胞靶向肽 原核表达 融合蛋白
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Survivin-siRNA对前列腺癌PC-3M细胞增殖的抑制作用 被引量：11
2
作者 刘艳波 赵丽娟 +4 位作者 赵丽晶 赵丹 刘喜春 高丽芳 赵雪俭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1873-1876,共4页
目的:探讨survivin-siRNA对前列腺癌细胞株PC-3M的增殖抑制作用。方法:构建两个针对survivin siRNA表达载体,与脂质体和空质粒两个对照组一起分别转染前列腺癌PC-3M细胞后,利用半定量RT-PCR和Western blotting分别检测细胞survivin mRN... 目的:探讨survivin-siRNA对前列腺癌细胞株PC-3M的增殖抑制作用。方法:构建两个针对survivin siRNA表达载体,与脂质体和空质粒两个对照组一起分别转染前列腺癌PC-3M细胞后,利用半定量RT-PCR和Western blotting分别检测细胞survivin mRNA及蛋白表达水平,MTT法测定细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果:转染72h后,两个实验组细胞的survivin mRNA水平是脂质体组的48%±6%(n=3)和30%±5%(n=3),蛋白表达水平是脂质体组的38%±4%(n=3)和36%±4%(n=3)。MTT检测实验组细胞的生长速度分别是脂质体组的44.20%±2.08%(n=3)和39.20%±1.93%(n=3),流式细胞术发现实验组G1期细胞比例明显高于两个对照组,而G2期和S期细胞比例减少,细胞出现凋亡。结论:利用survivin-siRNA可明显抑制前列腺癌PC-3M细胞的增殖,细胞受阻于G1期,诱导细胞凋亡,为进一步进行动物体内研究奠定了基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 前列腺肿瘤 PC-3m细胞 细胞凋亡 SURVIVIN
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维生素K_3对雄激素非依赖性前列腺癌PC-3M细胞的凋亡诱导作用 被引量：11
3
作者 周磊 李扬 +6 位作者 苏静 康劲松 穆桂芳 王志 许莉 赵雪俭 孙连坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1339-1342,共4页
目的:观察维生素K3对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M的凋亡诱导作用。方法:MTT增殖抑制实验;吖啶橙染色检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化;NAC抗氧化试验;DCFH-DA荧光分光光度法检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;RT-PCR检测G... 目的:观察维生素K3对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M的凋亡诱导作用。方法:MTT增殖抑制实验;吖啶橙染色检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化;NAC抗氧化试验;DCFH-DA荧光分光光度法检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;RT-PCR检测GSH-Px和CAT基因表达的改变。结果:60μmol/L剂量以上的VK3均可以有效抑制PC-3M细胞的增殖,并且呈时间剂量依赖性;联合应用不同剂量NAC(5、10、20、40、80μmol/L)与VK3(60μmol/L)共同作用于PC-3M细胞后,结果显示与单独应用VK3相比各浓度的NAC能不同程度增加细胞存活率;吖啶橙染色证明在VK3(60μmol/L)作用12h后,PC-3M细胞出现凋亡的形态学改变;流式细胞计数结果显示VK3(60μmol/L)作用12h后细胞出现凋亡峰,细胞周期被阻滞于G0/G1期;DCFH-DA荧光染色,在VK3作用后1-2h,细胞内即出现了较强的荧光表达;RT-PCR结果显示,在VK3作用后细胞内的CAT和GSH-Px两种主要的抗氧化酶类表达降低。结论:VK3可能主要通过引起PC-3M细胞内氧化应激诱导细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 维生素K3 前列腺肿瘤 细胞凋亡 PC-3m细胞
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M细胞模型及其在生物大分子药物口服递药研究中的应用 被引量：5
4
作者 李亨芬 邹金 +3 位作者 白如玉 邢永梅 聂金梅 刁勇 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1429-1435,共7页
如何克服胃肠道吸收屏障是蛋白质、多肽和核酸等生物大分子药物口服给药面临的重大挑战。M细胞是胃肠道上皮细胞内一种特殊的抗原摄取细胞,具有高内吞和低降解特征,可能对生物大分子药物的口服吸收发挥重要作用。M细胞体外共培养系统的... 如何克服胃肠道吸收屏障是蛋白质、多肽和核酸等生物大分子药物口服给药面临的重大挑战。M细胞是胃肠道上皮细胞内一种特殊的抗原摄取细胞,具有高内吞和低降解特征,可能对生物大分子药物的口服吸收发挥重要作用。M细胞体外共培养系统的开发,以及在其基础上建立的体外模型,促进了对M细胞本身以及大分子药物口服给药系统的研究。本文综述了M细胞特殊的结构、功能、形成及生物标志特点,讨论了M细胞体外模型在开发生物活性大分子药物口服给药系统的应用。 展开更多
关键词 m细胞 体外模型 大分子药物 口服递药系统 口服疫苗
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仔猪回肠绒毛M细胞的形态、分布及其与猪流行性腹泻病毒感染的关系 被引量：5
5
作者 李任峰 田香勤 +3 位作者 乔松林 郭军庆 周恩民 张改平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期581-586,共6页
为了探索新生仔猪回肠绒毛上皮是否存在M细胞以及自然感染条件下猪流行性腹泻病毒(PEDV)与回肠绒毛M细胞之间的关系。采用免疫荧光、免疫组化及形态学方法研究了正常情况下仔猪回肠绒毛M细胞的分布特点和形态学特征,以及自然感染条件下P... 为了探索新生仔猪回肠绒毛上皮是否存在M细胞以及自然感染条件下猪流行性腹泻病毒(PEDV)与回肠绒毛M细胞之间的关系。采用免疫荧光、免疫组化及形态学方法研究了正常情况下仔猪回肠绒毛M细胞的分布特点和形态学特征,以及自然感染条件下PEDV与仔猪回肠绒毛M细胞之间的关系。免疫荧光结果证实正常仔猪回肠绒毛上皮存在M细胞,沿隐窝至绒毛顶端上皮方向,M细胞的数量逐渐减少。电镜下,正常仔猪的回肠绒毛M细胞具有典型的M细胞特征。自然感染PEDV的仔猪回肠绒毛M细胞病变明显,在其顶膜、细胞质、细胞核及其上皮下层均观察到成簇的PEDV颗粒,而相邻的其他上皮细胞病变不明显,且细胞内没有观察到病毒粒子。以上研究结果表明,新生仔猪回肠绒毛上皮存在M细胞,在绒毛的不同位置其分布比例存在差异。仔猪回肠绒毛M细胞可能是PEDV入侵肠道的重要通道。 展开更多
关键词 肠绒毛m细胞 新生仔猪 猪流行性腹泻病毒
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甘精胰岛素对游离脂肪酸诱导的RIN-m细胞凋亡的影响 被引量：28
6
作者 傅静奕 李焱 +3 位作者 严励 张淼 陈黎红 傅祖植 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期413-416,共4页
【目的】研究甘精胰岛素(insulinglargine)对游离脂肪酸诱导的β细胞凋亡是否具有保护作用。【方法】不同浓度的甘精胰岛素、普通人胰岛素以及IGF-1与0.3mmol/L棕榈酸分别加入RIN-m细胞培养液中,24h后,采用Hoechst33342染色、流式细胞... 【目的】研究甘精胰岛素(insulinglargine)对游离脂肪酸诱导的β细胞凋亡是否具有保护作用。【方法】不同浓度的甘精胰岛素、普通人胰岛素以及IGF-1与0.3mmol/L棕榈酸分别加入RIN-m细胞培养液中,24h后,采用Hoechst33342染色、流式细胞仪以及ELISA方法检测RIN-m细胞的凋亡。【结果】0.3mmol/L棕榈酸诱导RIN-m细胞凋亡率达42.10%±4.24%,同时加入甘精胰岛素或者普通胰岛素(均为100nmol/L)的凋亡率分别为32.00%±3.08%和35.97%±3.14%,甘精胰岛素对凋亡的抑制作用明显强于普通胰岛素,并呈剂量依赖性。【结论】甘精胰岛素对游离脂肪酸诱导的β细胞凋亡具有呈剂量依赖性的保护作用。 展开更多
关键词 甘精胰岛素 游离脂肪酸 HOECHST33342 Β细胞凋亡 普通胰岛素 剂量依赖性 保护作用 细胞培养液 IGF-1 流式细胞仪 细胞凋亡率 mol/L 不同浓度 人胰岛素 抑制作用 棕榈酸 24h m细胞
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盐酸奥洛他定滴眼液对过敏性结膜炎小鼠结膜M细胞增殖及白细胞介素4、JAK1、STAT6表达的影响 被引量：11
7
作者 杨军 何宏 钟兴武 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第11期1028-1031,共4页
目的探讨盐酸奥洛他定滴眼液对过敏性结膜炎小鼠结膜M细胞增殖及白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)、JAK1、STAT6表达的影响。方法选取SPF级Barb/c小鼠18只,随机分为空白对照组、模型组、治疗组,每组6只;用卵清蛋白和Al(OH)3对模型组和... 目的探讨盐酸奥洛他定滴眼液对过敏性结膜炎小鼠结膜M细胞增殖及白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)、JAK1、STAT6表达的影响。方法选取SPF级Barb/c小鼠18只,随机分为空白对照组、模型组、治疗组,每组6只;用卵清蛋白和Al(OH)3对模型组和治疗组小鼠造模。造模后治疗组采用盐酸奥洛他定滴眼液治疗,每天滴眼2次,每次1滴;模型组滴加等量生理盐水,空白对照组不做处理。采用免疫荧光法检测各组小鼠眼睑结膜M细胞数;ELISA检测各组小鼠血清中IL-4、JAK1、STAT6含量;RT-PCR检测眼睑组织中JAK1、STAT6 mRNA相对表达量;Western blot法检测眼睑组织中JAK1、STAT6蛋白相对表达量。结果眼睑结膜组织免疫荧光检测结果显示,模型组标本中M细胞阳性率远高于空白对照组(P<0.05);治疗组M细胞阳性率有所下降,低于模型组(P<0.05),但仍高于空白对照组(P<0.05);推测过敏性结膜炎病程与M细胞阳性率升高有关。ELISA检测结果显示,模型组血清中IL-4、JAK1、STAT6含量远高于空白对照组(均为P<0.05);治疗组IL-4、JAK1、STAT6含量均较模型组显著下降(均为P<0.05);治疗组血清中IL-4、JAK1、STAT6含量均稍高于空白对照组(均为P<0.05);推测过敏性结膜炎发病过程中伴随血清中IL-4、JAK1、STAT6含量变化。眼睑组织中,模型组JAK1、STAT6 mRNA以及蛋白相对表达量均远高于空白对照组(均为P<0.05);治疗组JAK1、STAT6 mRNA以及蛋白相对表达量较模型组显著下降(均为P<0.05),与空白对照组相比,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论M细胞增殖与过敏性结膜炎病程具有相关性,其增殖可能与IL-4-JAK1-STAT6信号通路的激活相关。 展开更多
关键词 过敏性结膜炎 m细胞 白细胞介素4 JAK1 STAT6 信号通路
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多肽K237对PC-3M细胞增殖及bax、bcl-2 mRNA表达的影响 被引量：4
8
作者 张延伦 王鹏 +1 位作者 鲁友谊 胡乃刚 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1098-1101,共4页
目的:研究多肽K237对体外培养的雄激素非依赖性前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用,及其可能的作用机制。方法:将培养的PC-3M细胞分为4组:实验组(分别以50、100、200μmol/L的多肽K237处理48h)和对照组(K237浓度为0μmol/L),采用MTT法观察多肽... 目的:研究多肽K237对体外培养的雄激素非依赖性前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用,及其可能的作用机制。方法:将培养的PC-3M细胞分为4组:实验组(分别以50、100、200μmol/L的多肽K237处理48h)和对照组(K237浓度为0μmol/L),采用MTT法观察多肽K237对前列腺癌PC-3M细胞增殖的影响,用RT-PCR法检测bax、bcl-2mRNA表达的变化。结果:不同浓度的多肽K237处理48h后,PC-3M细胞形状变圆,体积变小,胞质透亮度下降,部分细胞脱落悬浮于培养液中。在50、100、200μmol/L的多肽K237作用48h后,MTT法检测的细胞生长抑制率分别为(12.6±0.95)%、(17.8±0.99)%、(27.2±1.12)%。RT-PCR结果显示:50、100、200μmol/L实验组和对照组的bax/β-actin值分别为0.919±0.071、0.971±0.083、0.992±0.102,(0.889±0.06),bcl-2/β-actin值分别为0.896±0.085、0.791±0.084、0.764±0.702,0.922±0.097,3组中上述两项指标均较对照组有明显变化(P均<0.01),其中,baxmRNA表达水平上调,而bcl-2mRNA表达水平下调,上述作用呈现剂量效应关系。结论:多肽K237可能通过影响bax、bcl-2mRNA的表达来诱导PC-3M细胞凋亡,从而抑制前列腺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 前列腺癌 K237 BAX BCL-2 PC-3m细胞
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前列腺癌PC-3M细胞hmSD活性与细胞凋亡相关性的实验研究 被引量：4
9
作者 李扬 狄茜 +4 位作者 许莉 刘喜春 赵丹 赵雪俭 宫城妙子 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期748-751,共4页
目的:研究前列腺癌PC - 3M细胞株hmSD的活性与细胞凋亡的相关性。方法:应用丁酸钠诱导前列腺癌PC - 3M细胞发生凋亡,吖啶橙/溴化乙锭染色检测细胞凋亡率;收集丁酸钠作用后的PC - 3M细胞,匀浆后离心取上清,与底物共同孵育,以硫代巴比妥酸... 目的:研究前列腺癌PC - 3M细胞株hmSD的活性与细胞凋亡的相关性。方法:应用丁酸钠诱导前列腺癌PC - 3M细胞发生凋亡,吖啶橙/溴化乙锭染色检测细胞凋亡率;收集丁酸钠作用后的PC - 3M细胞,匀浆后离心取上清,与底物共同孵育,以硫代巴比妥酸(TBA)显色反应检测所生成的唾液酸,计算唾液酸酶活性;将细胞凋亡率与hmSD活性进行相关性分析。结果:丁酸钠诱导PC - 3M细胞凋亡的同时显著下调hmSD的活性,凋亡率与hmSD活性呈负相关。结论:hmSD活性变化与前列腺癌细胞凋亡呈相关性。 展开更多
关键词 神经氨酸酶 前列腺肿瘤 PC-3m细胞 细胞凋亡 丁酸盐类
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血管紧张素Ⅱ对RIN-m细胞PDX-1 mRNA及蛋白表达的影响 被引量：3
10
作者 刘敏 蔡德鸿 +5 位作者 张桦 袁小澎 孙嘉 李明 张振 陈宏 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期749-751,共3页
目的探讨血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)对胰十二指肠同源盒1(PDX-1)表达的影响及其与胰岛素(Ins)分泌的关系。方法测定RIN-m细胞在基础、ATⅡ及氯沙坦作用下Ins分泌量、细胞内Ins含量及细胞内PDX-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果在100nmol/LATⅡ作用... 目的探讨血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)对胰十二指肠同源盒1(PDX-1)表达的影响及其与胰岛素(Ins)分泌的关系。方法测定RIN-m细胞在基础、ATⅡ及氯沙坦作用下Ins分泌量、细胞内Ins含量及细胞内PDX-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果在100nmol/LATⅡ作用下,葡萄糖刺激后Ins分泌量、细胞内Ins含量及PDX-1表达水平均明显降低(P均<0.05)。上述作用可被ATⅡ受体阻滞剂氯沙坦部分逆转。结论抑制PDX-1表达水平可能是ATⅡ影响胰岛β细胞Ins合成及分泌的机制之一。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ RIN—m细胞 胰岛素分泌 胰十二指肠同源盒1
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M细胞及其功能的研究进展 被引量：4
11
作者 薛海燕 李珊 +1 位作者 韩波 王战勇 《现代免疫学》 CSCD 北大核心 2017年第3期238-241,共4页
M细胞是淋巴滤泡表面的一种特殊细胞,存在于肠上皮细胞之间,它能摄取、提呈抗原,启动黏膜免疫反应。M细胞的深入研究对了解黏膜免疫反应及疫苗研制有重要意义。为进一步研究M细胞的作用机制和在疫苗中的应用,类人M细胞体外模型的建立方... M细胞是淋巴滤泡表面的一种特殊细胞,存在于肠上皮细胞之间,它能摄取、提呈抗原,启动黏膜免疫反应。M细胞的深入研究对了解黏膜免疫反应及疫苗研制有重要意义。为进一步研究M细胞的作用机制和在疫苗中的应用,类人M细胞体外模型的建立方法也在不断优化。本文主要介绍了M细胞的形态、功能及类人M细胞模型的体外建立方法。 展开更多
关键词 m细胞 抗原提呈 免疫反应 体外模型
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内皮素A受体拮抗剂BQ123对前列腺癌PC-3M细胞增殖与凋亡的影响 被引量：2
12
作者 许松 周文泉 +2 位作者 张征宇 葛京平 高建平 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期341-345,共5页
目的:观察内皮素A受体拮抗剂BQ123对转移性前列腺癌(PCa)PC-3M细胞株增殖与凋亡的影响,初步探讨内皮素A受体拮抗剂对转移性PCa细胞的体外抗肿瘤效应。方法:实验分为两组,对照组为PC-3M细胞及含灭活小牛血清的F12/RMPI1640培养液;实验组... 目的:观察内皮素A受体拮抗剂BQ123对转移性前列腺癌(PCa)PC-3M细胞株增殖与凋亡的影响,初步探讨内皮素A受体拮抗剂对转移性PCa细胞的体外抗肿瘤效应。方法:实验分为两组,对照组为PC-3M细胞及含灭活小牛血清的F12/RMPI1640培养液;实验组为PC-3M细胞加入等量的1μmol/LBQ123。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、划痕损伤实验、细胞迁移实验观察BQ123对人PCaPC-3M细胞株增殖的抑制效应,利用Annexin V-FITC/PI染色和流式细胞术检测BQ123诱导PC-3M细胞凋亡的作用及其与细胞周期的关系。结果:MTT比色法结果显示BQ123随着作用时间的增加,对PC-3M的抑制率分别为24h22.32%、48h44.88%和72h64.47%,表现出良好的时效关系(P<0.05),划痕损伤实验结果提示:实验组PC-3M细胞的迁移距离分别为12h(103.42±75.63)μm、24h(243.75±121.53)μm和48h(422.07±36.01)μm,均低于对照组的12h(162.93±19.87)μm、24h(317.19±43.19)μm和48h(692.74±40.84)μm(P<0.05)。细胞迁移实验中实验组穿入下室的PC-3M细胞为(79.2±9.58)个,亦明显少于对照组的(92.6±5.94)个(P<0.05);Annexin V-FITC/PI双染色法的结果显示对照组PC-3M细胞凋亡率为(9.38±1.37)%,实验组PC-3M细胞凋亡率为(15.03±0.93)%,差异有统计学意义(P<0.05),细胞周期实验的结果显示实验组各期细胞比例与对照组相比差异不显著(P>0.05)。结论:BQ123对PCaPC-3M细胞株的生长、迁移和侵袭能力均有明显的抑制作用,且可以诱导PC-3M细胞凋亡,可为PCa治疗的研究提供一种新的思路。 展开更多
关键词 内皮素受体 前列腺癌 细胞凋亡 BQ123 PC-3m细胞
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M细胞在激发过敏性结膜炎免疫反应过程中的作用研究 被引量：4
13
作者 杨军 何宏 钟兴武 《热带医学杂志》 CAS 2022年第6期794-797,831,736,共6页
目的探讨过敏性结膜炎患者结膜活检的淋巴滤泡小结相关上皮及M细胞的形态和功能特点。方法收集2021年1-6月中山大学中山眼科中心海南眼科医院门诊表现为典型的春季角结膜炎或季节性或常年性过敏性结膜炎23例,其中季节性结膜炎3例,常年... 目的探讨过敏性结膜炎患者结膜活检的淋巴滤泡小结相关上皮及M细胞的形态和功能特点。方法收集2021年1-6月中山大学中山眼科中心海南眼科医院门诊表现为典型的春季角结膜炎或季节性或常年性过敏性结膜炎23例,其中季节性结膜炎3例,常年性结膜炎8例,特应性角结膜炎1例,春季角结膜炎11例(边缘型7例,混合型4例),另选取同期就诊的需眼部手术的非眼表疾病患者5例为对照组。分别对季节性和常年性结膜炎及春季角结膜炎患者进行结膜滤泡活检。对离体结膜滤泡进行苏木精-伊红染色、扫描电镜和透射电镜检查,观察组织显微结构,探索滤泡相关上皮细胞和M细胞的超微结构特征。将离体结膜滤泡暴露于绿色荧光聚苯乙烯乳胶珠,观察绿色荧光聚苯乙烯乳胶珠的分布情况。结果滤泡小结相关上皮区中存在M细胞,这类细胞胞质桥较薄,有多形的和不规则的微绒毛,并有一个与底层淋巴细胞和单核细胞紧密相连的凹陷性基外侧膜。28个样本中共20个样本的淋巴滤泡小结相关上皮区具有典型的结膜相关淋巴组织(CALT)特征的结膜滤泡结构,阳性率71.4%;对照组5个样本均未发现该结构。结膜的淋巴滤泡小结相关上皮主要与乳胶珠结合,乳胶珠结合上皮细胞阳性率0.03%。结论在过敏性结膜炎中结膜M细胞可能是激发免疫反应的门户。 展开更多
关键词 m细胞 滤泡相关结膜上皮 免疫反应 过敏性结膜炎
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犬心室肌M细胞钙电流特性的研究 被引量：11
14
作者 李洁 胡大一 +2 位作者 丁国良 李翠兰 周鹏 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2001年第1期22-24,共3页
用膜片钳全细胞方法研究犬心室肌内膜、中层 (M细胞 )及外膜细胞的L型钙电流的特性 ,并观察nifedipine(1μM)对三层心肌单个细胞动作电位的影响。结果 :心室肌内膜、M及外膜细胞在去极电压为 +10mv时 ,ICa ,L的峰电流pA/pF分别为 - 4.2 ... 用膜片钳全细胞方法研究犬心室肌内膜、中层 (M细胞 )及外膜细胞的L型钙电流的特性 ,并观察nifedipine(1μM)对三层心肌单个细胞动作电位的影响。结果 :心室肌内膜、M及外膜细胞在去极电压为 +10mv时 ,ICa ,L的峰电流pA/pF分别为 - 4.2 9± 1.2 4、- 5 .30± 0 .38、- 4.0 3± 1.19,P <0 .0 5。Nifedipine(1μM)对三层细胞动作电位均缩短。心室肌内膜、M及心外膜细胞动作电位复极化达 90 %时程分别由用药前的 44 7.3± 47.0 ,5 2 4.2± 5 5 .2 ,438.2±39.3ms缩短至用药后的 30 2 .4± 42 .7,30 5 .4± 37.2 ,30 3.3± 37.6ms ,缩短率 32 .8% ,41.5 % ,33 .6 % (P <0 .0 5 )。表明犬心室肌内膜、M及外膜细胞的L型钙电流分布的差异性 。 展开更多
关键词 膜片钳全细胞记录 m细胞 钙通道电流 动作电位时程 犬 儿童
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ErbB-3结合蛋白—ebp1对ACC-M细胞生长的影响 被引量：11
15
作者 余优成 张志愿 +5 位作者 陈万涛 周晓健 潘红芽 张萍 徐骎 叶冬霞 《中国临床医学》 北大核心 2005年第2期324-326,共3页
目的:探讨ErbB- 3结合蛋白—ebp1 对腺样囊性癌ACC M细胞生长增殖作用的影响。方法:通过免疫组化筛选到erbB 2/erbB -3双阳性的ACC M细胞系;转染pcDNA3.1 -ebp1 质粒至ACC M细胞,G418 筛选被转染的阳性细胞;RT- PCR检测转染后细胞中ebp... 目的:探讨ErbB- 3结合蛋白—ebp1 对腺样囊性癌ACC M细胞生长增殖作用的影响。方法:通过免疫组化筛选到erbB 2/erbB -3双阳性的ACC M细胞系;转染pcDNA3.1 -ebp1 质粒至ACC M细胞,G418 筛选被转染的阳性细胞;RT- PCR检测转染后细胞中ebp1的转录水平;细胞生长曲线及3H- TdR摄入法观察转染前后细胞生长增殖能力的改变。结果:ACC- M细胞同时表达erbB 2/erbB 3;RT -PCR显示转染后细胞中ebp1转录水平明显升高;ACC- M- ebp1 细胞生长曲线平缓,生长减慢,3H- TdR摄入量明显减少,细胞增殖能力减弱。结论:ebp1在体外能显著抑制ACC- M肿瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 结合蛋白 ACC erbB-2 细胞生长曲线 PCDNA3 生长增殖能力 细胞增殖能力 肿瘤细胞增殖 转录水平 腺样囊性癌 PCR检测 增殖作用 免疫组化 阳性细胞 m细胞 TdR ^3H 转染 细胞系 双阳性 摄入量 筛选 RT
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M细胞、跨室壁离散度与心律失常的关系 被引量：19
16
作者 臧益民 臧伟进 《心脏杂志》 CAS 2002年第4期343-345,共3页
本文从 M细胞的电生理特征和心室复极跨室离散度的角度 ,分析
关键词 m细胞 跨室壁离散度 心律失常
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TFAR19蛋白协同米非司酮对前列腺癌PC-3M细胞凋亡的影响 被引量：1
17
作者 于靖 赵雪飞 +5 位作者 王继洲 姜颖 杜颜丹 林平 王淑娟 于晓光 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期919-923,共5页
目的初步探讨TFARl9协同米非司酮（MIF）对前列腺癌PC-3M细胞凋亡的影响。方法构建TFARl9真核表达载体，用脂质体介导的方法转染PC-3M细胞。MTT法检测5、10、20、50和100μmol·L^-1 MIF作用于前列腺癌PC-3M细胞24～96h的吸光度（A... 目的初步探讨TFARl9协同米非司酮（MIF）对前列腺癌PC-3M细胞凋亡的影响。方法构建TFARl9真核表达载体，用脂质体介导的方法转染PC-3M细胞。MTT法检测5、10、20、50和100μmol·L^-1 MIF作用于前列腺癌PC-3M细胞24～96h的吸光度（A）值。在转染TFARl9的细胞中加入20mol·L^-1 MIF培养24、48h，MTT比色法检测细胞增殖，原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡率，透射电镜进一步观察细胞超微结构的改变。结果构建了PCI-neo-TFARl9真核表达载体并在转染的PC-3M细胞中得到了瞬时表达。MTT实验表明，与对照组相比，5、10μmol·L^-1 MIF组的A值差异无统计学意义（P〉0．05），20、50和100μmol·L^-1MIF组的A值差异有统计学意义（P〈0．01），MIF对前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用呈时间、剂量依赖性；转染PCI-neo-TFARl9并加入20mol·L^-1 MIF后，与对照组及单独应用MIF组相比，细胞生长明显受到抑制（P〈0．01），细胞凋亡率明显增加（P〈0．01），透射电镜观察到典型的细胞凋亡特征（细胞体积缩小，核皱缩、碎裂，染色质呈块状边集等）。结论TFARl9蛋白能够协同米非司酮促进前列腺癌PC-3M细胞凋亡，有望成为前列腺癌的辅助治疗药物。 展开更多
关键词 前列腺癌 TFARl9 米非司酮 细胞凋亡 PC-3m细胞
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E2F陷阱DNA对前列腺癌PC-3M细胞凋亡的诱导 被引量：1
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作者 王涛 姜安丽 +5 位作者 张鹏举 陈彤 贺美兰 陈蔚文 邓景惕 张建业 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1462-1466,共5页
目的:为观察转录因子E2F陷阱DNA对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M增殖和凋亡的影响。方法:采用脂质体lipofectam ine将E2F decoy DNA、ARE decoy DNA和control decoy DNA分别转染PC-3M细胞,MTT检测其对细胞增生的影响,倒置相差显微镜... 目的:为观察转录因子E2F陷阱DNA对雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M增殖和凋亡的影响。方法:采用脂质体lipofectam ine将E2F decoy DNA、ARE decoy DNA和control decoy DNA分别转染PC-3M细胞,MTT检测其对细胞增生的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,并进行染色体DNA断裂的测定;通过RT-PCR检测转染的PC-3M细胞中c-Myc mRNA、cyc lin D1 mRNA表达水平的变化,通过W estern b lotting检测细胞中c-Myc蛋白、cyc lin D1蛋白表达水平的变化。结果:E2F decoy DNA转染后的PC-3M细胞的生长受到明显抑制;转染后的细胞形态变化符合凋亡的典型改变,染色体断裂明显,细胞凋亡率为26.35%;c-Myc、cyc lin D1的表达受到抑制。结论:E2F decoy DNA可诱导雄激素非依赖性前列腺癌PC-3M凋亡和抑制细胞增殖,其机制可能涉及到c-Myc mRNA、cyc lin D1的表达变化。 展开更多
关键词 转录因子E2F 前列腺肿瘤 细胞凋亡 PC-3m细胞
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平阳霉素、羟基喜树碱联合应用对Acc-M细胞活性的影响 被引量：1
19
作者 安永谦 孙沫逸 +5 位作者 李建虎 张圃 杨耀武 马家海 陈伟 王鑫 《现代肿瘤医学》 CAS 2005年第2期208-210,共3页
目的　观察体外应用羟基喜树碱(HCPT)、平阳霉素(PYM)两种药物单用和联合应用对人腺样囊性癌Acc-M细胞的生长抑制作用。方法　采用MTT法研究用药前后细胞增殖活性的影响。结果　两种药单用及合用对细胞均有很好的抑制作用,且以HCPT和PY... 目的　观察体外应用羟基喜树碱(HCPT)、平阳霉素(PYM)两种药物单用和联合应用对人腺样囊性癌Acc-M细胞的生长抑制作用。方法　采用MTT法研究用药前后细胞增殖活性的影响。结果　两种药单用及合用对细胞均有很好的抑制作用,且以HCPT和PYM合用最强。HCPT和PYM单用和合用可使细胞的群体倍增时间显著延长,以联合用药为佳。结论　HCPT、PYM单独及联合用药均对Acc-M细胞在体外有很好的抑制作用且以联合应用效果更佳。 展开更多
关键词 羟基喜树碱 平阳霉素 Acc—m细胞 mTT法
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M细胞及其周围滤泡相关上皮细胞生物学特性的研究 被引量：2
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作者 孟红波 房林 +5 位作者 何耀明 郑立君 钱明平 张军 石林祥 卢少毅 《放射免疫学杂志》 CAS 2007年第4期356-358,共3页
目的:探索肠滤泡相关上皮细胞和M细胞的生物学特性。方法:取大鼠小肠PP结滤泡相关上皮细胞和M细胞进行培养,培养细胞分为对照组、内毒素组和灭活大肠杆菌组,分别予内毒素和灭活大肠杆菌干预,培养细胞爬片以抗细胞角蛋白-8抗体免疫荧光... 目的:探索肠滤泡相关上皮细胞和M细胞的生物学特性。方法:取大鼠小肠PP结滤泡相关上皮细胞和M细胞进行培养,培养细胞分为对照组、内毒素组和灭活大肠杆菌组,分别予内毒素和灭活大肠杆菌干预,培养细胞爬片以抗细胞角蛋白-8抗体免疫荧光染色观察,培养液用ELISA检测TNF-α、IL-18、IL-27水平。结果:内毒素组TNF-α和IL-27水平升高,大肠杆菌组IL-18和IL-27升高,培养细胞部分呈抗细胞角蛋白-8抗体免疫荧光阳性。结论:肠滤泡相关上皮细胞和M细胞不仅在呈递抗原方面发挥作用,也可通过其分泌细胞因子,对机体局部和全身免疫功能产生影响。 展开更多
关键词 滤泡相关上皮细胞 m细胞 肿瘤坏死因子-Α 白介素-18 白介素-27
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