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玉米肽KSCAPLAS对乙醇性LO2细胞损伤的拮抗作用研究 被引量:1
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作者 崔宁 李冠龙 +1 位作者 刘晓兰 郑喜群 《中国粮油学报》 北大核心 2025年第6期77-84,共8页
以本项目组前期从玉米蛋白水解物中分离纯化得到的玉米蛋白单肽KSCAPLAS为研究对象,通过构建乙醇诱导LO2细胞损伤模型,探究玉米肽KSCAPLAS的拮抗乙醇性损伤作用。结果表明,KSCAPLAS能够显著降低乙醇诱导损伤的LO2细胞内活性氧(ROS)的含... 以本项目组前期从玉米蛋白水解物中分离纯化得到的玉米蛋白单肽KSCAPLAS为研究对象,通过构建乙醇诱导LO2细胞损伤模型,探究玉米肽KSCAPLAS的拮抗乙醇性损伤作用。结果表明,KSCAPLAS能够显著降低乙醇诱导损伤的LO2细胞内活性氧(ROS)的含量(P<0.05),并显著提高超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)水平(P<0.05),对乙醇性损伤的LO2细胞具有拮抗作用。此外,KSCAPLAS通过上调线粒体呼吸链复合物Ⅰ的含量进而上调细胞内ATP含量。与对照组相比,在肽质量浓度为100μg/mL条件下,细胞内线粒体呼吸链复合物Ⅰ和ATP的质量分数分别提高了63.11%和31.65%。玉米肽KSCAPLAS通过促进乙醇性损伤细胞代谢提供能量,进而缓解乙醇诱导LO2细胞的损伤。 展开更多
关键词 玉米肽 抗氧化 LO2细胞 能量代谢
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阿魏酸对乙醇诱导的LO2肝细胞DNA损伤的修复机制研究
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作者 钟恒 陈杉彬 +4 位作者 王德良 杨冬莹 温银萍 罗蕊琪 黄丹 《食品与发酵工业》 CAS 北大核心 2025年第1期174-181,共8页
阿魏酸是一种天然化合物,其对肝细胞的影响尚不完全清楚。该研究旨在探讨不同浓度阿魏酸对乙醇诱导的LO2肝细胞DNA损伤的潜在修复机制。通过将不同浓度的阿魏酸作用于LO2肝细胞,并分析其对细胞增殖活性的影响。进一步研究了乙醇对LO2细... 阿魏酸是一种天然化合物,其对肝细胞的影响尚不完全清楚。该研究旨在探讨不同浓度阿魏酸对乙醇诱导的LO2肝细胞DNA损伤的潜在修复机制。通过将不同浓度的阿魏酸作用于LO2肝细胞,并分析其对细胞增殖活性的影响。进一步研究了乙醇对LO2细胞周期的影响及阿魏酸的干预作用,使用Western blot技术检测DNA损伤标记物p-H2AX的表达,以及通过流式细胞仪检测活性氧水平和细胞自噬的变化。结果表明,阿魏酸在低浓度时能促进LO2细胞增殖,中等浓度(0.25~2 mmol/L)能显著减少乙醇诱导的p-H2AX表达,降低活性氧水平,并可能促进细胞自噬。然而,高浓度阿魏酸则显示出对细胞的毒性作用,在DNA修复和自噬方面有潜在抑制效应。该研究表明,在特定浓度范围内,阿魏酸能够对抗乙醇诱导的LO2肝细胞DNA损伤,并可能通过促进细胞自噬机制来增强细胞的修复能力。但在高浓度下,阿魏酸则可能逆转其保护效应,表现出细胞毒性。 展开更多
关键词 阿魏酸 LO2肝细胞 DNA损伤修复 细胞周期 活性氧 细胞自噬 流式细胞仪
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4-羟基肉桂酰胺(4-HY)改善油酸诱导的LO2细胞脂质积累
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作者 陈敏华 彭文元 +3 位作者 曾玉萍 宁功美 吴晓云 字成庭 《热带农业科学》 2025年第4期78-86,共9页
非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的慢性肝病,通常与肥胖和2型糖尿病有关。NAFLD是一种多重因素引起的疾病,其发病机制尚不完全清楚。目前还没有批准的用于NAFLD治疗的药物,因此寻找安全、高效的治疗手段和针对NAFLD的药物研... 非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的慢性肝病,通常与肥胖和2型糖尿病有关。NAFLD是一种多重因素引起的疾病,其发病机制尚不完全清楚。目前还没有批准的用于NAFLD治疗的药物,因此寻找安全、高效的治疗手段和针对NAFLD的药物研发具有重要的意义。油酸(OA)诱导人正常肝细胞(LO2)创建NAFLD细胞模型,并使用试剂盒检测细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量;采用实时荧光定量PCR技术检测乙酰辅酶A羧化酶(acc)、过氧化物酶体增殖物激活受体(ppar γ)、脂肪酸合酶(fasn)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(scd-1)、甾醇调控元件结合蛋白-1c(srebp-1c)基因m RNA的表达水平;最后采用蛋白免疫印迹(Western Blot)测定SREBP-1c、ACC、FASN、PPAR γ蛋白表达水平,初步探究4-HY改善LO2细胞脂肪累积的机制。MTT(噻唑蓝)结果表明,低于8μmol/L的4-羟基肉桂酰胺(4-HY)处理LO2细胞24 h没有显著细胞毒性;油红O细胞染色结果显示,OA诱导显著增加了细胞内脂滴的形成和数量,表明NAFLD细胞模型创建成功。与空白对照相比,4-HY有效降低OA诱导的LO2细胞内脂质沉积。通过TG、TC试剂盒检测可知4-HY降低了OA诱导的LO2细胞内的TG、TC的含量水平。实时荧光定量PCR结果显示,4-HY下调了脂质代谢相关基因srebp-1c、fasn、acc、scd-1、cd36、ppar γ的表达水平。蛋白免疫印迹结果表明,4-HY抑制了脂质代谢相关蛋白PPAR γ、SREBP-1c、FASN、ACC的表达。结果表明,4-HY通过下调LO2细胞内脂质代谢相关基因和蛋白的表达,抑制LO2细胞内源性脂肪合成途径,降低LO2细胞对游离脂肪酸的摄取,从而减少LO2细胞TG、TC的合成,改善NAFLD细胞模型的脂质积累。 展开更多
关键词 NAFLD 4-羟基肉桂酰胺 脂质累积 LO2细胞 油酸
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Oxocrebanine inhibits the proliferation of hepatocellular carcinoma cells by promoting apoptosis and autophagy
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作者 Zheng-Wen Wang Cai-Yan Pan +4 位作者 Cang-Long Wei Hui Liao Xiao-Po Zhang Cai-Yun Zhang Lei Yu 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 2025年第6期345-358,共14页
BACKGROUND Finding active lead anti-hepatocellular carcinoma compounds from traditional Chinese medicine has important research value.AIM To assess the detailed mechanism of oxocrebanine,a compound separated from the ... BACKGROUND Finding active lead anti-hepatocellular carcinoma compounds from traditional Chinese medicine has important research value.AIM To assess the detailed mechanism of oxocrebanine,a compound separated from the traditional Chinese medicinal plant Stephania hainanensis H.S.Lo et Y.Tsoong,and to evaluate its inhibition of the proliferation of human hepatocellular carcinoma cells via apoptosis and autophagy.METHODS MTT,BrdU labeling,and colony formation assays were used to assess the inhibitory effect of oxocrebanine on the growth and proliferation of human hepatocellular carcinoma Hep3B2.1-7 cells.Flow cytometry was used to detect the effect of oxocrebanine on the apoptosis of Hep3B2.1-7 cells.Western blotting was used to assess the expression of apoptosis-related proteins in Hep3B2.1-7 cells.The aforementioned methods were also used to evaluate the effects of oxocrebanine on cell proliferation,autophagy markers,and autophagy-related protein expression levels after adding autophagy inhibitor 3-mA.Furthermore,to verify the anti-hepatocellular carcinoma effect of oxocrebanine in vivo,a nude mouse model was used to investigate the inhibitory effect of oxocrebanine treatment and its mechanism.Apoptosis was detected using a TUNEL assay and the expression of microtubule-associated protein 1 LC3 in tumor specimens was assessed using immunohistochemistry.RESULTS Oxocrebanine effectively inhibited the growth of Hep3B2.1-7 cells,whilst upregulating the protein expression of cleaved caspase-3,downregulating poly(ADP-ribose)polymerase 1 protein expression,increasing the levels of Bax and Bcl-2 antagonist/killer 1 protein expression,and decreasing the levels of Bcl-2 and myeloid cell leukemia 1 protein expression,which could promote apoptosis in Hep3B2.1-7 cells.Oxocrebanine promoted the transformation of LC3-I to LC3-II in Hep3B2.1-7 cells,suggesting the occurrence of autophagy,whilst the autophagy inhibitor 3-MA could reverse this process.Oxocrebanine was also shown to reduce the phosphorylation levels of the eukaryotic translation initiation factor 4EBP1 and ribosomal protein S6 kinase B1(P70S6K),two downstream effector molecules in the PI3K/Akt/mTOR pathway,inducing autophagy in Hep3B2.1-7 cells.Moreover,the tumor-bearing nude mouse experiment indicated that oxocrebanine effectively inhibited the growth of Hep3B2.1-7 cells in vivo.The results of the TUNEL assay and immunohistochemistry also revealed that oxocrebanine induced apoptosis in vivo and increased the expression level of LC3,an autophagy marker.CONCLUSION Oxocrebanine can inhibit the proliferation of human hepatocellular carcinoma cells by promoting apoptosis and inducing autophagy in vitro and in vivo. 展开更多
关键词 Stephania hainanensis H.S.Lo et Y.Tsoong Oxocrebanine Hep3B2.1-7 cells APOPTOSIS AUTOPHAGY
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Bailu French Le Maison de Moret-Seine &Loing opened in Pengzhou,Chengdu
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《Voice of Friendship》 2017年第4期8-8,共1页
On the morning of Oct 12,2017,a representative office of France’s Seine-et-Marne department in the country’s Ile-de-France region was opened in Bailu Music Townof Pengzhou,a county-level city under the jurisdiction ... On the morning of Oct 12,2017,a representative office of France’s Seine-et-Marne department in the country’s Ile-de-France region was opened in Bailu Music Townof Pengzhou,a county-level city under the jurisdiction of Chengdu.Appropriately,the street was French-styled,and melodious music filled the air.Jean-Jacques Barbaux,president of Seine- 展开更多
关键词 LE Bailu French Le Maison de Moret-Seine loing opened in Pengzhou Chengdu
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新疆葡萄酒中的酚类物质对LO2细胞自噬的影响 被引量:2
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作者 王妍凌 陈杉彬 +8 位作者 赵文梅 尹丽萍 黎进雪 张海鹏 张金萍 黄翠 吕嘉伟 武运 薛洁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期118-125,共8页
为了探究新疆葡萄酒酚类物质对肝细胞自噬的影响,该研究使用体外培养的人正常肝细胞(LO2),通过免疫印迹、实时荧光定量、细胞免疫荧光、流式细胞术等方法观察LO2细胞中微管相关蛋白1A/1B-轻链3(microtubule-associated proteins 1A/1B l... 为了探究新疆葡萄酒酚类物质对肝细胞自噬的影响,该研究使用体外培养的人正常肝细胞(LO2),通过免疫印迹、实时荧光定量、细胞免疫荧光、流式细胞术等方法观察LO2细胞中微管相关蛋白1A/1B-轻链3(microtubule-associated proteins 1A/1B light chain3,LC3)和螯合体1(sequestosome 1,P62)的水平变化,初步评估新疆葡萄酒中酚类物质对LO2细胞自噬的影响作用。免疫印迹结果发现,橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯,可显著提升LO2细胞中LC3蛋白的表达水平,提示橙皮苷和表儿茶素没食子酸酯或对LO2细胞自噬活性有一定影响作用。进一步通过实时荧光定量方法观察橙皮苷和表儿茶素没食子酸酯对LC3和P62蛋白mRNA的影响作用发现,橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯处理细胞后,显著上调了LC3蛋白的mRNA水平,同时降低了P62蛋白的mRNA水平;细胞免疫荧光染色显示橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯处理LO2细胞后,绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)标记的LC3蛋白荧光强度增强,提示细胞内形成自噬小体;流式细胞术结果进一步发现,GFP-LC3/RFP-LC3荧光强度比值减小,表明自噬小体成熟。综上所述,橙皮苷、表儿茶素没食子酸酯对LO2细胞自噬活性具有一定的促进作用,但其作用机理尚需要进一步深入研究。 展开更多
关键词 新疆葡萄酒 细胞自噬 酚类物质 肝脏保护 LO2细胞
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POR基因敲除、回补及过表达LO2细胞株的构建及作为AFB_(1)染毒模型的初步应用 被引量:1
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作者 王琳 袁建林 +3 位作者 缪昌 马玉晗 曹三杰 赵勤 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期272-283,共12页
为了构建POR基因稳定敲除(POR^(KO))、回补(PORCO)、过表达(POR^(OE))的LO2细胞株,以便为后续深入开展POR基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究提供细胞模型。本研究首先利用CRISPR/Cas9技术设计2条靶向POR基因的sgRNA并克隆至lentiCRIS... 为了构建POR基因稳定敲除(POR^(KO))、回补(PORCO)、过表达(POR^(OE))的LO2细胞株,以便为后续深入开展POR基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究提供细胞模型。本研究首先利用CRISPR/Cas9技术设计2条靶向POR基因的sgRNA并克隆至lentiCRISPR v2载体,进行慢病毒包装与感染,筛选出LO2 POR^(KO)单克隆细胞后进行测序及Western blot鉴定。其次用同源重组方法构建pcDNA3.1(+)/myc-His B-POR重组质粒,经对POR^(KO)细胞和野生型细胞转染分别构建LO2 PORCO及LO2 POR^(OE)细胞株,以G-418筛选后进行Western blotting鉴定。再用4μmol·L^(-1)及8μmol·L^(-1)AFB_(1)分别对野生型、LO2 POR^(KO)、LO2 PORCO、LO2 POR^(OE)细胞株染毒48 h,观察细胞形态并测定细胞存活率。结果表明,靶向exon5的sgRNA-2可成功敲除POR基因,得到LO2 POR^(KO)细胞株;成功构建表达POR重组蛋白的LO2 PORCO及LO2 POR^(OE)细胞株。对AFB_(1)处理后的各细胞存活率测定结果表明,相较于野生型LO2细胞43.66%±0.58%和27.90%±0.46%的存活率,LO2 POR^(KO)细胞存活率具有极显著性差异,均为100%(P<0.0001);LO2 PORCO细胞存活率仍有显著性差异,分别为57.07%±0.74%和42.54%±0.68%(P<0.05);LO2 POR^(OE)细胞存活率则显著降低,分别为24.58%±0.92%和17.99%±0.81%(P<0.01)。综上所述,本研究成功构建了LO2 POR^(KO)、LO2 PORCO、LO2 POR^(OE)细胞株,并以AFB_(1)染毒处理分别研究了各细胞株的存活率和细胞形态学变化,发现POR基因对AFB_(1)所致细胞毒性的影响巨大。研究结果为后续深入开展POR基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 POR CRISPR/Cas9 LO2细胞 AFB_(1)
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基于脂肪变性细胞模型研究明桑降脂茶调控LO2细胞脂代谢的作用 被引量:1
8
作者 薛帼珍 刘佳宁 +6 位作者 张敏爱 闫晓睿 杨晓霞 刘昕 杜晨晖 张希春 刘计权 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第6期152-160,共9页
目的明确明桑降脂茶的降脂作用及其发挥降脂作用的物质基础。方法制备大鼠空白血清、明桑降脂茶全方和桑叶减味含药血清,以油酸诱导人正常肝细胞(LO2细胞)建立脂肪变性细胞模型,将细胞分为对照组(含空白血清)、模型组(含空白血清)、明... 目的明确明桑降脂茶的降脂作用及其发挥降脂作用的物质基础。方法制备大鼠空白血清、明桑降脂茶全方和桑叶减味含药血清,以油酸诱导人正常肝细胞(LO2细胞)建立脂肪变性细胞模型,将细胞分为对照组(含空白血清)、模型组(含空白血清)、明桑降脂茶全方血清处理组、桑叶减味血清处理组。培养4 h后,显微镜下观察各组脂肪积累情况;酶标仪测定细胞内脂质含量;按试剂盒说明测定细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(totalcholesterlo,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量,以及过氧化物酶体增殖物启动受体α(peroxisome proliferator-activated receptor alpha,PPARα)、固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP-1c)表达。高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)研究各组指纹图谱、绿原酸和橙黄决明素含量的差异。结果与模型组比较,明桑降脂茶全方血清组、桑叶减味血清组均能显著降低细胞内脂滴数量和脂质含量,降低TG、TC、LDL-C含量和SREBP-1c表达,升高HDL-C含量和PPARα表达,全方血清组的降脂作用优于桑叶减味血清组;全方血清组、桑叶减味血清组、空白血清组共有峰分别为53、35、23个,三者共有峰18个;剔除共有峰后,全方血清组有22个不同于桑叶减味血清组的差异峰,桑叶减味血清组有4个不同于全方血清组的差异峰;全方血清组中绿原酸和橙黄决明素含量均高于桑叶减味血清组,绿原酸含量在二者之间差异显著。结论明桑降脂茶具有明显的降脂作用,桑叶在其中发挥重要降脂作用。 展开更多
关键词 明桑降脂茶 含药血清 高效液相色谱法 LO2细胞 脂代谢
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地磁的LoRa与NB-IoT通信技术比较研究 被引量:3
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作者 刘远生 《信息与电脑》 2024年第7期239-241,共3页
随着物联网技术的快速发展,低功率广域网络(Low-Power Wide-Area Network,LPWAN)以其特有的优势得到广泛的应用。在众多的LPWAN技术应用场景中,地磁作为无线传感器被应用于各种停车管理的场景中,其中,国内停车行业关注度最高的是远距离... 随着物联网技术的快速发展,低功率广域网络(Low-Power Wide-Area Network,LPWAN)以其特有的优势得到广泛的应用。在众多的LPWAN技术应用场景中,地磁作为无线传感器被应用于各种停车管理的场景中,其中,国内停车行业关注度最高的是远距离无线电(Long Range Radio,Lo Ra)和窄带物联网(Narrow Band Internet of Things,NB-Io T)两种通信技术的地磁。本文旨在从地磁的Lo Ra与NB-Io T通信技术方面进行系统的梳理和比较分析,为地磁的选择应用提供有力的技术参考和储备。 展开更多
关键词 地磁 Lo Ra NB-Io T 通信技术
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基于PLS模型的建筑电气能耗预测 被引量:1
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作者 闻琦 《电气传动自动化》 2024年第2期64-67,32,共5页
本文针对传统建筑工程施工作业中电气设备能源消耗过大、能耗数据未能充分利用的情况,提出一种基于PLS模型的建筑电气能耗预测方法,通过在传统建筑电气设备中加入传感器,运用LoRa射频数据双向传输技术,有效整合能耗数据,引入PLS方法建... 本文针对传统建筑工程施工作业中电气设备能源消耗过大、能耗数据未能充分利用的情况,提出一种基于PLS模型的建筑电气能耗预测方法,通过在传统建筑电气设备中加入传感器,运用LoRa射频数据双向传输技术,有效整合能耗数据,引入PLS方法建立能耗异常预测模型,获取建筑电气设备的能耗时间比,分析能耗数据异常数据点,并采用评价指标验证预测结果的有效性。通过实验验证,该方法在建筑电气设备能耗管理及工业能源可持续发展方面具备较高的可行性。 展开更多
关键词 PLS模型 建筑电气设备 Lo Ra数据传输 能耗预测
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三氯生对LO2细胞代谢挥发性有机物的影响分析
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作者 亓雪 张计杨 《当代医学》 2024年第35期47-53,共7页
目的检测三氯生(triclosan,TCS)染毒处理LO2细胞顶空气体中挥发性有机化合物(volatile organic compounds,VOCs),分析TCS对VOCs组分的影响,探讨细胞代谢VOCs作为一类生物标志物在药物代谢机理研究中的价值。方法选取LO2细胞进行培养,在... 目的检测三氯生(triclosan,TCS)染毒处理LO2细胞顶空气体中挥发性有机化合物(volatile organic compounds,VOCs),分析TCS对VOCs组分的影响,探讨细胞代谢VOCs作为一类生物标志物在药物代谢机理研究中的价值。方法选取LO2细胞进行培养,在细胞培养基中加入含有不同浓度的TCS进行染毒处理,设为实验组,并进一步分为10μM TCS染毒组和20μM TCS染毒组;不进行TCS染毒处理的细胞,设为对照组。收集对照组及实验组不同浓度TCS染毒处理LO2细胞的代谢顶空VOCs,采用单光子电离飞行时间质谱(single photon ionization time of flight mass spectrometry,SPI-TOF-MS)在线检测TCS作用于LO2细胞后VOCs的变化。比较3组VOCs组分的差别,绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,计算曲线下面积(area under the curve,AUC),分析TCS对细胞代谢VOCs的识别价值。结果基于对照组与10μM TCS染毒组之间代谢VOCs所绘制ROC曲线共发现15种10μM TCS作用后发生显著变化的VOCs,其AUC均>0.9,达到完美的识别性能;10μM TCS染毒组m/z=62、64、68、72、84、104 VOCs的相对浓度(relative concentration,R_(i))均高于对照组,m/z=78、98、108、110、114、118、128、136、146 VOCs的R_(i)均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。于对照组与20μM TCS染毒组之间代谢VOCs所绘制ROC曲线共发现9种20μM TCS作用后发生显著变化的VOCs,其AUC均>0.9,达到完美的识别性能;10μM TCS染毒组m/z=62、64、68、72、84、104 VOCs的R_(i)均高于对照组,m/z=78、98、108、110、114、118、128、136、146 VOCs的R_(i)均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。基于10μM TCS染毒组与20μM TCS染毒组之间代谢VOCs所绘制ROC曲线共发现16种10、20μM TCS作用后发生显著变化的VOCs,其AUC均>0.9,达到完美的识别性能;20μM TCS染毒组m/z=78、82、98、136、142 VOCs的R_(i)均高于10μM TCS染毒组,m/z=64、68、72、84、86、94、104、108、112、118、128 VOCs的R_(i)均低于10μM TCS染毒组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TCS染毒处理可导致LO2细胞代谢VOCs组分发生改变,表明细胞代谢VOCs有可能作为一类生物标志物用于药物代谢机理探究的辅助工具。 展开更多
关键词 三氯生 LO2细胞 挥发性有机物 单光子电离飞行时间质谱
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醋制降低京大戟对人正常肝细胞LO2的毒性及机制研究 被引量:16
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作者 陈海鹰 曹雨诞 +3 位作者 颜晓静 张丽 耿欣欣 丁安伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期866-870,共5页
目的:比较京大戟醋制前后对人正常肝细胞LO2的毒性作用,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养LO2细胞,用不同浓度的京大戟生品和醋品对其进行处理,MTT法测定各样品对LO2细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡的形... 目的:比较京大戟醋制前后对人正常肝细胞LO2的毒性作用,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养LO2细胞,用不同浓度的京大戟生品和醋品对其进行处理,MTT法测定各样品对LO2细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡的形态学改变;AnnexinV/PI染色流式细胞术检测LO2细胞凋亡;PI染色流式细胞术分析其对细胞周期的影响;检测细胞培养液上清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活力,细胞裂解上清超氧化歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量。结果:与阴性对照组比较,京大戟生品各浓度组均可抑制LO2细胞增殖,诱导细胞凋亡,引起细胞S期阻滞(P<0.05);能显著升高细胞培养液上清ALT,AST,LDH活力(P<0.05),显著降低细胞裂解上清SOD活性和GSH含量、增加MDA含量。醋制后,与京大戟生品组比较,可显著降低细胞凋亡率、降低细胞周期阻滞,显著降低细胞培养液上清ALT,AST,LDH活力(P<0.05),显著升高细胞裂解上清SOD活性和GSH含量、显著降低MDA含量。结论:醋制可降低京大戟对LO2细胞的毒性,其机制可能是减轻氧化损伤,从而降低细胞周期阻滞,减少细胞凋亡。 展开更多
关键词 京大戟 醋制 LO2细胞 凋亡 氧化损伤
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醋制降低甘遂对人正常肝细胞LO2毒性研究 被引量:17
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作者 颜晓静 张丽 +4 位作者 李璘 曹雨诞 李征军 唐于平 丁安伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1667-1671,共5页
目的:比较甘遂醋制前后对人正常肝细胞LO2的毒性差异,初步探讨甘遂醋制减毒机制。方法:以人正常肝细胞LO2细胞为研究对象,采用MTT法检测甘遂醋制前后对LO2细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态;并测定细胞培养上清液和裂解上清液... 目的:比较甘遂醋制前后对人正常肝细胞LO2的毒性差异,初步探讨甘遂醋制减毒机制。方法:以人正常肝细胞LO2细胞为研究对象,采用MTT法检测甘遂醋制前后对LO2细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态;并测定细胞培养上清液和裂解上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、Na+-K+-ATP酶,Ca2+-Mg2+-ATP酶等酶的活力和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量。结果:与阴性对照组比较,生甘遂可明显降低LO2细胞的活性(P<0.01)与形态,并显著提高LO2细胞培养上清液中ALT,AST,LDH活力(P<0.01)、显著降低SOD活力和GSH含量(P<0.01),显著增加MDA含量(P<0.01),显著降低LO2细胞裂解上清液中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力(P<0.01);醋制后,与生甘遂各剂量组比较,醋甘遂可显著降低生甘遂对LO2细胞的增殖抑制作用(P<0.01)和形态变差的趋势,可显著降低LO2细胞培养上清液中ALT,AST,LDH活力(P<0.01)、显著增加SOD活力和GSH含量(P<0.01)、显著降低MDA含量(P<0.01)、显著提高LO2细胞裂解上清液中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力(P<0.01),且呈一定的剂量相关性。结论:醋制可降低甘遂肝毒性,其可能机制为通过降低甘遂对肝细胞膜通透性的影响及减轻氧化损伤而实现。 展开更多
关键词 甘遂 醋甘遂 醋制 人正常肝细胞LO2 肝毒性 减毒
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3种温阳健脾汤药对非酒精性脂肪肝细胞增殖与凋亡的影响 被引量:29
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作者 杨家耀 陶冬青 +3 位作者 刘嵩 张书 马威 时昭红 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1591-1596,共6页
通过油酸诱导正常肝细胞株LO2构建非酒精性脂肪肝细胞模型,探讨四君子汤、理中汤和附子理中汤对非酒精性脂肪肝细胞增殖与凋亡的影响。不同浓度的油酸诱导正常肝细胞株LO2构建非酒精性脂肪肝细胞模型,油红O染色观察非酒精性脂肪肝细胞... 通过油酸诱导正常肝细胞株LO2构建非酒精性脂肪肝细胞模型,探讨四君子汤、理中汤和附子理中汤对非酒精性脂肪肝细胞增殖与凋亡的影响。不同浓度的油酸诱导正常肝细胞株LO2构建非酒精性脂肪肝细胞模型,油红O染色观察非酒精性脂肪肝细胞的脂滴形成状况;全自动生化分析仪检测细胞上清液中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平。分别设正常组、模型组、模型+四君子汤组、模型+理中汤组和模型+附子理中汤组,MTT检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞中PCNA,cleaved caspase-3,cleaved caspase-8,cleaved caspase-9,Bax和Bcl-2蛋白的表达情况。油红O染色结果显示,与低浓度诱导相比,80 mg·L^(-1)油酸诱导非酒精性脂肪肝细胞模型效果最佳,且诱导成功后细胞上清液中AST,ALT,TC和TG含量显著升高(P<0.01)。MTT和流式细胞仪检测结果显示,四君子汤、理中汤和附子理中汤均能有效促进非酒精性脂肪肝细胞的增殖并抑制其凋亡(P<0.01),且附子理中汤的作用效果最佳。Western blot检测结果显示,四君子汤、理中汤和附子理中汤能下调非酒精性脂肪肝细胞中cleaved caspase-3,cleaved caspase-8,cleaved caspase-9和Bax蛋白表达量,上调PCNA和Bcl-2蛋白的表达量,且附子理中汤的调节效果较其他2组药物处理更显著。该实验表明四君子汤、理中汤和附子理中汤均能有效促进非酒精性脂肪肝细胞的增殖并抑制其凋亡,且附子理中汤的作用效果最佳,其药效机制可能与3种汤药介导增殖与凋亡相关通路中关键因子的表达有关。 展开更多
关键词 四君子汤 理中汤 附子理中汤 非酒精性脂肪肝 LO2细胞株
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鲍内脏多糖的抗氧化活性 被引量:13
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作者 王姣 魏好程 +2 位作者 何传波 马英 熊何健 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第15期115-121,共7页
为研究鲍内脏多糖的抗氧化活性,采用体外抗氧化实验,评价不同化学组成的鲍内脏多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和·OH的清除作用,并以人体肝细胞LO2建立过氧化氢损伤模型,探讨鲍内脏多糖... 为研究鲍内脏多糖的抗氧化活性,采用体外抗氧化实验,评价不同化学组成的鲍内脏多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和·OH的清除作用,并以人体肝细胞LO2建立过氧化氢损伤模型,探讨鲍内脏多糖在细胞水平的抗氧化能力。结果表明:鲍内脏多糖CAVP、AVP1、AVP2具有良好的清除体外自由基能力。多糖CAVP、AVP1、AVP2清除DPPH自由基的半抑制率浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为1.46、1.74、1.55 mg/m L。其清除·OH的IC50分别为7.14、15.27、8.11 mg/m L。另外,细胞模型法评价结果显示,鲍内脏多糖CAVP、AVP1、AVP2在质量浓度0.5~4.0 mg/m L条件下对肝细胞LO2的H2O2氧化损伤有保护作用,3种多糖样品均能显著提高LO2细胞存活率;CAVP(4.0 mg/m L)、AVP1(0.5 mg/m L)和AVP2(0.5 mg/m L)能极显著降低氧化损伤时乳酸脱氢酶的释放;CAVP能极显著提高LO2细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)(4.0 mg/m L)、过氧化氢酶(catalase,CAT)(0.5 mg/m L)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)(0.5 mg/m L)活力;AVP1质量浓度为4.0 mg/m L时,能极显著提高LO2细胞内GSH-Px、SOD活力,显著提高CAT活力;AVP2分别在质量浓度0.5、4.0 mg/m L时极显著提高LO2细胞内CAT活力;在质量浓度为4.0 mg/m L时,3种多糖样品对降低细胞氧化损伤产生的丙二醛(malondialdehyde,MDA)均有显著作用。因此,鲍内脏多糖是一类潜在的抗氧化物,可用于此类功能食品的开发。 展开更多
关键词 鲍内脏 多糖 抗氧化 LO2细胞
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不同方法炮制甘遂对LO2细胞周期与凋亡的影响 被引量:11
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作者 张丽 高兰 +2 位作者 颜晓静 曹雨诞 丁安伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期825-830,共6页
目的:探讨不同方法炮制所得甘遂各样品对人正常肝细胞LO2细胞周期与凋亡的影响。方法:以人正常肝细胞LO2为研究对象,采用MTT法检测甘遂醋制前后各炮制品(生品、清炒品、醋润品、醋制品)对LO2细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态... 目的:探讨不同方法炮制所得甘遂各样品对人正常肝细胞LO2细胞周期与凋亡的影响。方法:以人正常肝细胞LO2为研究对象,采用MTT法检测甘遂醋制前后各炮制品(生品、清炒品、醋润品、醋制品)对LO2细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态,采用流式细胞术研究甘遂醋制前后各炮制品对LO2细胞周期和凋亡的影响。结果:与阴性对照组比较,甘遂生品可明显降低LO2细胞的活性(P<0.01)和形态,显著升高S期细胞百分率(P<0.05),显著降低G2/M期细胞百分率(P<0.01),显著增加人正常肝细胞LO2细胞的早期凋亡率、晚期凋亡坏死率、总凋亡率(P<0.01);与甘遂生品组比较,甘遂各炮制品均能降低对人正常肝细胞LO2的增殖抑制作用(P<0.01)和形态变差的趋势,其降低增殖抑制作用的顺序为醋制品>醋润品>清炒品,且呈一定的量-效关系(r醋制=0.999,r醋润=0.913,r清炒=0.914,r生品=0.984);且均能显著增加G2/M期细胞百分率(P<0.05,P<0.05,P<0.01),显著减少人正常肝细胞LO2的早期凋亡率、晚期凋亡坏死率、总凋亡率(P<0.01),其增加G2/M期细胞百分率的顺序和降低凋亡率的顺序均为醋制品>醋润品>清炒品。结论:甘遂炮制后可通过影响LO2细胞周期与凋亡降低其毒性,且甘遂醋制工艺中的炒与醋润2种操作在醋制降低甘遂的肝毒性中能够起到协同作用,从而为揭示上述2种操作在甘遂醋制减毒工艺中的合理性和醋制工艺优化提供了一定的依据。 展开更多
关键词 甘遂 醋甘遂 醋润 醋制 LO2细胞 减毒 细胞周期 细胞凋亡
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连翘苷对酒精性肝损伤的保护作用 被引量:12
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作者 刘银华 戚之琳 +2 位作者 徐国祥 何雷 杨江华 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第1期6-9,15,共5页
目的:研究连翘苷对酒精性肝损伤的保护作用。方法:人正常肝细胞株LO2于高糖DMEM完全培养基中培养,CCK-8试剂盒检测细胞存活率;ALT活性检测试剂盒检测细胞培养液中ALT的活性;DAPI染色法于荧光倒置显微镜下观察细胞核形态的改变;Western b... 目的:研究连翘苷对酒精性肝损伤的保护作用。方法:人正常肝细胞株LO2于高糖DMEM完全培养基中培养,CCK-8试剂盒检测细胞存活率;ALT活性检测试剂盒检测细胞培养液中ALT的活性;DAPI染色法于荧光倒置显微镜下观察细胞核形态的改变;Western blotting检测凋亡相关蛋白PARP、caspase 3的表达。结果:连翘苷浓度依赖性地减轻酒精诱导的肝细胞损伤;DAPI染色结果表明连翘苷能够显著逆转酒精诱发的肝细胞核浓缩及核碎裂现象,细胞凋亡相关蛋白PARP和caspase 3的表达也被显著抑制。结论:连翘苷通过抑制肝细胞凋亡在酒精性肝损伤中发挥保护作用。 展开更多
关键词 连翘苷 细胞凋亡 肝细胞株LO2 肝损伤
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补骨脂素和异补骨脂素下调NF-κB活性改善LO2细胞脂代谢紊乱的机制研究 被引量:12
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作者 周俪姗 鄢素琪 +5 位作者 熊小丽 黄娟 秦欢 张领领 张林利 汤建桥 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2118-2123,共6页
探讨补骨脂素和异补骨脂素对正常人肝细胞(LO2)内脂质沉积的改善及作用机制。建立棕榈酸(PA)诱导的人LO2细胞非酒精性脂肪肝模型,给予补骨脂素和异补骨脂素干预,酶法检测细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量,细胞上清液谷丙转氨酶(ALT... 探讨补骨脂素和异补骨脂素对正常人肝细胞(LO2)内脂质沉积的改善及作用机制。建立棕榈酸(PA)诱导的人LO2细胞非酒精性脂肪肝模型,给予补骨脂素和异补骨脂素干预,酶法检测细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量,细胞上清液谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量;ELISA法检测细胞上清液促炎因子(IL-6,TNF-α)及趋化因子(IL-8,MCP-1)的表达;Western blot法检测细胞内核因子κB(NF-κB) p65磷酸化(p-p65)及非磷酸化蛋白(p65)、转化因子(TGF)β1蛋白表达。结果显示,与模型组比较,补骨脂素组细胞内TG,TC含量降低(P<0. 01,P<0. 05),细胞上清液中ALT和AST含量、促炎因子及趋化因子分泌水平均有降低(P<0. 01,P<0. 05),细胞内p-p65/p65比值及TGF-β1蛋白表达明显下降(P<0. 01);异补骨脂素组细胞内TG含量无明显变化,其余检测指标均有降低(P<0. 01,P<0. 05)。补骨脂素疗效优于异补骨脂素(P<0. 01,P<0. 05)。结果表明,补骨脂素对PA诱导LO2细胞脂肪变性具有改善作用;补骨脂素和异补骨脂素均对PA诱导LO2细胞损伤具有缓解作用,可抑制NF-κB的活性减轻炎症反应并下调TGF-β1表达。 展开更多
关键词 补骨脂素 异补骨脂素 LO2细胞 非酒精性脂肪性肝病 核因子ΚB
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三白草中化学成分对H_2O_2损伤LO2细胞保护作用 被引量:10
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作者 徐春蕾 李祥 +2 位作者 陈宏降 薛平 吴玉兰 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期163-164,共2页
目的研究三白草中主要化学成分对H2O2损伤人正常肝细胞LO2的保护作用。方法供试品为三白草中木脂素类成分:Rel-(7S,8R,7’R,8’R)-3,3’,4,4’,5,5’-hexamethoxy-7-O-7’,8,8’-llignan、Di-O-methyltetra hydrofuriguaiacin B、里卡灵... 目的研究三白草中主要化学成分对H2O2损伤人正常肝细胞LO2的保护作用。方法供试品为三白草中木脂素类成分:Rel-(7S,8R,7’R,8’R)-3,3’,4,4’,5,5’-hexamethoxy-7-O-7’,8,8’-llignan、Di-O-methyltetra hydrofuriguaiacin B、里卡灵A、里卡灵B、三白草素、二氢愈创木酸;黄酮类成分:异槲皮苷、槲皮苷。LO2细胞接种于96孔板培养,加入100μmol/L的受试成分,培养24h后加入20μL 1.2mmol/L H2O2作用1h。使用MTT法检测各组细胞存活率。结果异槲皮苷和槲皮苷对H2O2损伤LO2细胞有显著保护作用,里卡灵A和二氢愈创木酸对细胞有显著损伤作用。结论该实验可以为三白草保肝作用的研究提供理论基础。 展开更多
关键词 三白草 LO2细胞 存活率
暂未订购
儿童咳嗽变异性哮喘外周血CD4^+CD25^+CD127^(lo/-)Treg及IL-17表达水平与肺炎支原体DNA的关系 被引量:13
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作者 梁晓君 冷耀明 +2 位作者 周莹 胡颖 詹忠明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期301-302,共2页
儿童咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)是一种潜在、隐匿形式哮喘,临床常无感染征象。近年来有学者提出该病可能与某些病原体感染密切相关[1]。研究发现,肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,MP)感染可诱发哮喘,且与哮喘发作... 儿童咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)是一种潜在、隐匿形式哮喘,临床常无感染征象。近年来有学者提出该病可能与某些病原体感染密切相关[1]。研究发现,肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,MP)感染可诱发哮喘,且与哮喘发作及恶化有关。CVA是由多种细胞和细胞因子共同参与的气道慢性炎症性疾病,CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)有可能在支气管哮喘的发生发展中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 儿童 咳嗽变异性哮喘 肺炎支原体 IL-17 CD4+CD25+CD127lo -Treg
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