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枳葛保肝降脂方基于TLR4/NF-κB通路对乙醇诱导的人肝LO2细胞炎症损伤的影响
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作者 康严 李忠婷 +1 位作者 陈辉 刘鹏 《中国医药导报》 2026年第3期84-89,共6页
目的基于TLR4/NF-κB信号通路探讨枳葛保肝降脂方含药血清对乙醇诱导的人肝LO2细胞炎症损伤的作用及机制。方法将人肝LO2细胞分为正常组(10%正常大鼠血清)、诱导组(10%正常大鼠血清+2.5%无水乙醇)、美他多辛组(10%美他多辛含药血清+2.5... 目的基于TLR4/NF-κB信号通路探讨枳葛保肝降脂方含药血清对乙醇诱导的人肝LO2细胞炎症损伤的作用及机制。方法将人肝LO2细胞分为正常组(10%正常大鼠血清)、诱导组(10%正常大鼠血清+2.5%无水乙醇)、美他多辛组(10%美他多辛含药血清+2.5%无水乙醇)和低、中、高浓度枳葛保肝降脂方含药血清组(简称“低、中、高浓度组”)(10.0%、5.0%、2.5%枳葛保肝降脂方含药血清+2.5%无水乙醇)。采用酶联免疫吸附试验法检测各组细胞裂解液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量;Western blot法检测各组Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、NLR家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)、Caspase-1、磷酸化核因子κB p65亚基/核因子κB p65亚基(p-NF-κBp65/NF-κBp65)蛋白表达水平;RT-qPCR检测各组TLR4、MYD88、NLRP3、Caspase-1 m RNA表达情况。结果与正常组比较,诱导组中TNF-α、IL-1β、IL-18含量,TLR4、My D88、NLRP3、Caspase-1、p-NF-κBp65/NF-κBp65蛋白表达水平,TLR4、MYD88、NLRP3、Caspase-1 m RNA表达量均升高(P<0.01)。与诱导组比较,中、高浓度组TNF-α、IL-1β、IL-18含量,TLR4、My D88、NLRP3、Caspase-1、p-NF-κBp65/NF-κBp65蛋白表达水平,TLR4、MYD88、NLRP3、Caspase-1、p-NF-κBp65/NF-κBp65mRNA表达量均降低(P<0.01)。结论枳葛保肝降脂方含药血清对无水乙醇诱导的人肝LO2细胞炎症损伤具有保护作用,其作用可能通过TLR4/NF-κB信号通路产生。 展开更多
关键词 TLR4/NF-κB信号通路 枳葛保肝降脂方 酒精性肝损伤 炎症 人肝lo2细胞
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玉米肽KSCAPLAS对乙醇性LO2细胞损伤的拮抗作用研究 被引量:1
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作者 崔宁 李冠龙 +1 位作者 刘晓兰 郑喜群 《中国粮油学报》 北大核心 2025年第6期77-84,共8页
以本项目组前期从玉米蛋白水解物中分离纯化得到的玉米蛋白单肽KSCAPLAS为研究对象,通过构建乙醇诱导LO2细胞损伤模型,探究玉米肽KSCAPLAS的拮抗乙醇性损伤作用。结果表明,KSCAPLAS能够显著降低乙醇诱导损伤的LO2细胞内活性氧(ROS)的含... 以本项目组前期从玉米蛋白水解物中分离纯化得到的玉米蛋白单肽KSCAPLAS为研究对象,通过构建乙醇诱导LO2细胞损伤模型,探究玉米肽KSCAPLAS的拮抗乙醇性损伤作用。结果表明,KSCAPLAS能够显著降低乙醇诱导损伤的LO2细胞内活性氧(ROS)的含量(P<0.05),并显著提高超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)水平(P<0.05),对乙醇性损伤的LO2细胞具有拮抗作用。此外,KSCAPLAS通过上调线粒体呼吸链复合物Ⅰ的含量进而上调细胞内ATP含量。与对照组相比,在肽质量浓度为100μg/mL条件下,细胞内线粒体呼吸链复合物Ⅰ和ATP的质量分数分别提高了63.11%和31.65%。玉米肽KSCAPLAS通过促进乙醇性损伤细胞代谢提供能量,进而缓解乙醇诱导LO2细胞的损伤。 展开更多
关键词 玉米肽 抗氧化 lo2细胞 能量代谢
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阿魏酸对乙醇诱导的LO2肝细胞DNA损伤的修复机制研究 被引量:1
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作者 钟恒 陈杉彬 +4 位作者 王德良 杨冬莹 温银萍 罗蕊琪 黄丹 《食品与发酵工业》 CAS 北大核心 2025年第1期174-181,共8页
阿魏酸是一种天然化合物,其对肝细胞的影响尚不完全清楚。该研究旨在探讨不同浓度阿魏酸对乙醇诱导的LO2肝细胞DNA损伤的潜在修复机制。通过将不同浓度的阿魏酸作用于LO2肝细胞,并分析其对细胞增殖活性的影响。进一步研究了乙醇对LO2细... 阿魏酸是一种天然化合物,其对肝细胞的影响尚不完全清楚。该研究旨在探讨不同浓度阿魏酸对乙醇诱导的LO2肝细胞DNA损伤的潜在修复机制。通过将不同浓度的阿魏酸作用于LO2肝细胞,并分析其对细胞增殖活性的影响。进一步研究了乙醇对LO2细胞周期的影响及阿魏酸的干预作用,使用Western blot技术检测DNA损伤标记物p-H2AX的表达,以及通过流式细胞仪检测活性氧水平和细胞自噬的变化。结果表明,阿魏酸在低浓度时能促进LO2细胞增殖,中等浓度(0.25~2 mmol/L)能显著减少乙醇诱导的p-H2AX表达,降低活性氧水平,并可能促进细胞自噬。然而,高浓度阿魏酸则显示出对细胞的毒性作用,在DNA修复和自噬方面有潜在抑制效应。该研究表明,在特定浓度范围内,阿魏酸能够对抗乙醇诱导的LO2肝细胞DNA损伤,并可能通过促进细胞自噬机制来增强细胞的修复能力。但在高浓度下,阿魏酸则可能逆转其保护效应,表现出细胞毒性。 展开更多
关键词 阿魏酸 lo2肝细胞 DNA损伤修复 细胞周期 活性氧 细胞自噬 流式细胞仪
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转录组分析揭示氯化红霉素消毒副产物对人肝细胞LO2的毒性
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作者 徐敏华 何进锋 +3 位作者 史梦洁 刘红艳 张勇 姜铁明 《桂林理工大学学报》 北大核心 2025年第4期588-594,共7页
模拟红霉素在淡水环境下被氯化的过程制备氯化红霉素消毒副产物,将LO2细胞暴露于制备的氯化红霉素消毒副产物中,通过细胞增殖实验观测其活性,凋亡实验探究细胞凋亡状况,对转录组分析鉴定出的差异表达基因(DEG)进行了基因本体功能(GO)和... 模拟红霉素在淡水环境下被氯化的过程制备氯化红霉素消毒副产物,将LO2细胞暴露于制备的氯化红霉素消毒副产物中,通过细胞增殖实验观测其活性,凋亡实验探究细胞凋亡状况,对转录组分析鉴定出的差异表达基因(DEG)进行了基因本体功能(GO)和基因途径(KEGG)富集分析,并进行实时荧光定量检测正常肝细胞组和氯化红霉素消毒副产物组中CYP3A4和CYP2C18的基因表达情况,以此探究氯化红霉素消毒副产物对LO2细胞的毒性作用。结果显示:LO2细胞活性随着氯化红霉素消毒副产物的浓度升高而下降;LO2细胞凋亡率随着氯化红霉素消毒副产物的浓度升高而增加,当浓度大于10^(-4)mol/L时将引发显著细胞损伤并导致细胞坏死。与对照组相比,红霉素组共检出1943个DEG。这些DEG与类固醇生物合成、信号转导、细胞增殖、生长因子结合等生物学过程密切相关,在类固醇生物合成、MAPK信号通路、PI3K/AKT信号通路、基底细胞癌等信号通路中显著富集。氯化红霉素消毒副产物组中CYP3A4、CYP2C18 mRNA表达显著增加,影响P450酶功能,对LO2细胞增殖活性产生影响。 展开更多
关键词 氯化红霉素 消毒副产物 lo2细胞 毒性作用 细胞色素P450酶
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4-羟基肉桂酰胺(4-HY)改善油酸诱导的LO2细胞脂质积累
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作者 陈敏华 彭文元 +3 位作者 曾玉萍 宁功美 吴晓云 字成庭 《热带农业科学》 2025年第4期78-86,共9页
非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的慢性肝病,通常与肥胖和2型糖尿病有关。NAFLD是一种多重因素引起的疾病,其发病机制尚不完全清楚。目前还没有批准的用于NAFLD治疗的药物,因此寻找安全、高效的治疗手段和针对NAFLD的药物研... 非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的慢性肝病,通常与肥胖和2型糖尿病有关。NAFLD是一种多重因素引起的疾病,其发病机制尚不完全清楚。目前还没有批准的用于NAFLD治疗的药物,因此寻找安全、高效的治疗手段和针对NAFLD的药物研发具有重要的意义。油酸(OA)诱导人正常肝细胞(LO2)创建NAFLD细胞模型,并使用试剂盒检测细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量;采用实时荧光定量PCR技术检测乙酰辅酶A羧化酶(acc)、过氧化物酶体增殖物激活受体(ppar γ)、脂肪酸合酶(fasn)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(scd-1)、甾醇调控元件结合蛋白-1c(srebp-1c)基因m RNA的表达水平;最后采用蛋白免疫印迹(Western Blot)测定SREBP-1c、ACC、FASN、PPAR γ蛋白表达水平,初步探究4-HY改善LO2细胞脂肪累积的机制。MTT(噻唑蓝)结果表明,低于8μmol/L的4-羟基肉桂酰胺(4-HY)处理LO2细胞24 h没有显著细胞毒性;油红O细胞染色结果显示,OA诱导显著增加了细胞内脂滴的形成和数量,表明NAFLD细胞模型创建成功。与空白对照相比,4-HY有效降低OA诱导的LO2细胞内脂质沉积。通过TG、TC试剂盒检测可知4-HY降低了OA诱导的LO2细胞内的TG、TC的含量水平。实时荧光定量PCR结果显示,4-HY下调了脂质代谢相关基因srebp-1c、fasn、acc、scd-1、cd36、ppar γ的表达水平。蛋白免疫印迹结果表明,4-HY抑制了脂质代谢相关蛋白PPAR γ、SREBP-1c、FASN、ACC的表达。结果表明,4-HY通过下调LO2细胞内脂质代谢相关基因和蛋白的表达,抑制LO2细胞内源性脂肪合成途径,降低LO2细胞对游离脂肪酸的摄取,从而减少LO2细胞TG、TC的合成,改善NAFLD细胞模型的脂质积累。 展开更多
关键词 NAFLD 4-羟基肉桂酰胺 脂质累积 lo2细胞 油酸
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醋制降低京大戟对人正常肝细胞LO2的毒性及机制研究 被引量:16
6
作者 陈海鹰 曹雨诞 +3 位作者 颜晓静 张丽 耿欣欣 丁安伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期866-870,共5页
目的:比较京大戟醋制前后对人正常肝细胞LO2的毒性作用,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养LO2细胞,用不同浓度的京大戟生品和醋品对其进行处理,MTT法测定各样品对LO2细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡的形... 目的:比较京大戟醋制前后对人正常肝细胞LO2的毒性作用,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养LO2细胞,用不同浓度的京大戟生品和醋品对其进行处理,MTT法测定各样品对LO2细胞增殖的抑制作用;Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡的形态学改变;AnnexinV/PI染色流式细胞术检测LO2细胞凋亡;PI染色流式细胞术分析其对细胞周期的影响;检测细胞培养液上清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活力,细胞裂解上清超氧化歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量。结果:与阴性对照组比较,京大戟生品各浓度组均可抑制LO2细胞增殖,诱导细胞凋亡,引起细胞S期阻滞(P<0.05);能显著升高细胞培养液上清ALT,AST,LDH活力(P<0.05),显著降低细胞裂解上清SOD活性和GSH含量、增加MDA含量。醋制后,与京大戟生品组比较,可显著降低细胞凋亡率、降低细胞周期阻滞,显著降低细胞培养液上清ALT,AST,LDH活力(P<0.05),显著升高细胞裂解上清SOD活性和GSH含量、显著降低MDA含量。结论:醋制可降低京大戟对LO2细胞的毒性,其机制可能是减轻氧化损伤,从而降低细胞周期阻滞,减少细胞凋亡。 展开更多
关键词 京大戟 醋制 lo2细胞 凋亡 氧化损伤
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醋制降低甘遂对人正常肝细胞LO2毒性研究 被引量:17
7
作者 颜晓静 张丽 +4 位作者 李璘 曹雨诞 李征军 唐于平 丁安伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1667-1671,共5页
目的:比较甘遂醋制前后对人正常肝细胞LO2的毒性差异,初步探讨甘遂醋制减毒机制。方法:以人正常肝细胞LO2细胞为研究对象,采用MTT法检测甘遂醋制前后对LO2细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态;并测定细胞培养上清液和裂解上清液... 目的:比较甘遂醋制前后对人正常肝细胞LO2的毒性差异,初步探讨甘遂醋制减毒机制。方法:以人正常肝细胞LO2细胞为研究对象,采用MTT法检测甘遂醋制前后对LO2细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态;并测定细胞培养上清液和裂解上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、Na+-K+-ATP酶,Ca2+-Mg2+-ATP酶等酶的活力和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量。结果:与阴性对照组比较,生甘遂可明显降低LO2细胞的活性(P<0.01)与形态,并显著提高LO2细胞培养上清液中ALT,AST,LDH活力(P<0.01)、显著降低SOD活力和GSH含量(P<0.01),显著增加MDA含量(P<0.01),显著降低LO2细胞裂解上清液中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力(P<0.01);醋制后,与生甘遂各剂量组比较,醋甘遂可显著降低生甘遂对LO2细胞的增殖抑制作用(P<0.01)和形态变差的趋势,可显著降低LO2细胞培养上清液中ALT,AST,LDH活力(P<0.01)、显著增加SOD活力和GSH含量(P<0.01)、显著降低MDA含量(P<0.01)、显著提高LO2细胞裂解上清液中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力(P<0.01),且呈一定的剂量相关性。结论:醋制可降低甘遂肝毒性,其可能机制为通过降低甘遂对肝细胞膜通透性的影响及减轻氧化损伤而实现。 展开更多
关键词 甘遂 醋甘遂 醋制 人正常肝细胞lo2 肝毒性 减毒
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不同方法炮制甘遂对LO2细胞周期与凋亡的影响 被引量:11
8
作者 张丽 高兰 +2 位作者 颜晓静 曹雨诞 丁安伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期825-830,共6页
目的:探讨不同方法炮制所得甘遂各样品对人正常肝细胞LO2细胞周期与凋亡的影响。方法:以人正常肝细胞LO2为研究对象,采用MTT法检测甘遂醋制前后各炮制品(生品、清炒品、醋润品、醋制品)对LO2细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态... 目的:探讨不同方法炮制所得甘遂各样品对人正常肝细胞LO2细胞周期与凋亡的影响。方法:以人正常肝细胞LO2为研究对象,采用MTT法检测甘遂醋制前后各炮制品(生品、清炒品、醋润品、醋制品)对LO2细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态,采用流式细胞术研究甘遂醋制前后各炮制品对LO2细胞周期和凋亡的影响。结果:与阴性对照组比较,甘遂生品可明显降低LO2细胞的活性(P<0.01)和形态,显著升高S期细胞百分率(P<0.05),显著降低G2/M期细胞百分率(P<0.01),显著增加人正常肝细胞LO2细胞的早期凋亡率、晚期凋亡坏死率、总凋亡率(P<0.01);与甘遂生品组比较,甘遂各炮制品均能降低对人正常肝细胞LO2的增殖抑制作用(P<0.01)和形态变差的趋势,其降低增殖抑制作用的顺序为醋制品>醋润品>清炒品,且呈一定的量-效关系(r醋制=0.999,r醋润=0.913,r清炒=0.914,r生品=0.984);且均能显著增加G2/M期细胞百分率(P<0.05,P<0.05,P<0.01),显著减少人正常肝细胞LO2的早期凋亡率、晚期凋亡坏死率、总凋亡率(P<0.01),其增加G2/M期细胞百分率的顺序和降低凋亡率的顺序均为醋制品>醋润品>清炒品。结论:甘遂炮制后可通过影响LO2细胞周期与凋亡降低其毒性,且甘遂醋制工艺中的炒与醋润2种操作在醋制降低甘遂的肝毒性中能够起到协同作用,从而为揭示上述2种操作在甘遂醋制减毒工艺中的合理性和醋制工艺优化提供了一定的依据。 展开更多
关键词 甘遂 醋甘遂 醋润 醋制 lo2细胞 减毒 细胞周期 细胞凋亡
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补骨脂素和异补骨脂素下调NF-κB活性改善LO2细胞脂代谢紊乱的机制研究 被引量:12
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作者 周俪姗 鄢素琪 +5 位作者 熊小丽 黄娟 秦欢 张领领 张林利 汤建桥 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2118-2123,共6页
探讨补骨脂素和异补骨脂素对正常人肝细胞(LO2)内脂质沉积的改善及作用机制。建立棕榈酸(PA)诱导的人LO2细胞非酒精性脂肪肝模型,给予补骨脂素和异补骨脂素干预,酶法检测细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量,细胞上清液谷丙转氨酶(ALT... 探讨补骨脂素和异补骨脂素对正常人肝细胞(LO2)内脂质沉积的改善及作用机制。建立棕榈酸(PA)诱导的人LO2细胞非酒精性脂肪肝模型,给予补骨脂素和异补骨脂素干预,酶法检测细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量,细胞上清液谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量;ELISA法检测细胞上清液促炎因子(IL-6,TNF-α)及趋化因子(IL-8,MCP-1)的表达;Western blot法检测细胞内核因子κB(NF-κB) p65磷酸化(p-p65)及非磷酸化蛋白(p65)、转化因子(TGF)β1蛋白表达。结果显示,与模型组比较,补骨脂素组细胞内TG,TC含量降低(P<0. 01,P<0. 05),细胞上清液中ALT和AST含量、促炎因子及趋化因子分泌水平均有降低(P<0. 01,P<0. 05),细胞内p-p65/p65比值及TGF-β1蛋白表达明显下降(P<0. 01);异补骨脂素组细胞内TG含量无明显变化,其余检测指标均有降低(P<0. 01,P<0. 05)。补骨脂素疗效优于异补骨脂素(P<0. 01,P<0. 05)。结果表明,补骨脂素对PA诱导LO2细胞脂肪变性具有改善作用;补骨脂素和异补骨脂素均对PA诱导LO2细胞损伤具有缓解作用,可抑制NF-κB的活性减轻炎症反应并下调TGF-β1表达。 展开更多
关键词 补骨脂素 异补骨脂素 lo2细胞 非酒精性脂肪性肝病 核因子ΚB
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三白草中化学成分对H_2O_2损伤LO2细胞保护作用 被引量:10
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作者 徐春蕾 李祥 +2 位作者 陈宏降 薛平 吴玉兰 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期163-164,共2页
目的研究三白草中主要化学成分对H2O2损伤人正常肝细胞LO2的保护作用。方法供试品为三白草中木脂素类成分:Rel-(7S,8R,7’R,8’R)-3,3’,4,4’,5,5’-hexamethoxy-7-O-7’,8,8’-llignan、Di-O-methyltetra hydrofuriguaiacin B、里卡灵... 目的研究三白草中主要化学成分对H2O2损伤人正常肝细胞LO2的保护作用。方法供试品为三白草中木脂素类成分:Rel-(7S,8R,7’R,8’R)-3,3’,4,4’,5,5’-hexamethoxy-7-O-7’,8,8’-llignan、Di-O-methyltetra hydrofuriguaiacin B、里卡灵A、里卡灵B、三白草素、二氢愈创木酸;黄酮类成分:异槲皮苷、槲皮苷。LO2细胞接种于96孔板培养,加入100μmol/L的受试成分,培养24h后加入20μL 1.2mmol/L H2O2作用1h。使用MTT法检测各组细胞存活率。结果异槲皮苷和槲皮苷对H2O2损伤LO2细胞有显著保护作用,里卡灵A和二氢愈创木酸对细胞有显著损伤作用。结论该实验可以为三白草保肝作用的研究提供理论基础。 展开更多
关键词 三白草 lo2细胞 存活率
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九香虫防御性物质水溶液成分分析及其对LO2细胞活性的影响 被引量:5
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作者 侯晓晖 孙廷 +2 位作者 李晓飞 钟婷婷 刘川燕 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2013年第10期2363-2367,共5页
研究了九香虫的防御性物质水溶液中挥发性成分及其相对百分含量,以及该水溶液对人肝LO2细胞活性的研究。采用温水浸泡法获得九香虫的防御性物质水溶液;GC-MS获得该水溶液的挥发性成分组成,并用面积归一法计算各成分的相对百分含量;利用... 研究了九香虫的防御性物质水溶液中挥发性成分及其相对百分含量,以及该水溶液对人肝LO2细胞活性的研究。采用温水浸泡法获得九香虫的防御性物质水溶液;GC-MS获得该水溶液的挥发性成分组成,并用面积归一法计算各成分的相对百分含量;利用MTT法、流式细胞术研究该水溶液对LO2细胞的影响。研究表明,九香虫防御性物质水溶液中挥发性成分包含19种化合物,其中相对百分含量最高的为反-2-己烯醛(88.54%),其次为2-甲基-4-戊烯醛(5.16%)、十三烷(3.43%)等;该水溶液作用LO2细胞后,IC50为3.64μL,呈剂量依赖性;细胞周期结果显示,G2/M期细胞比例明显降低,而G0/G1期细胞比例明显升高,且差异具有统计学意义。九香虫防御性物质水溶液成分主要是烯醛和烷烃类化合物;该物质能够抑制人肝LO2细胞的体外增殖,可能与其细胞周期阻滞有关。 展开更多
关键词 Aspongopus CHINENSIS 防御性物质水溶液 挥发性成分 GC-MS lo2细胞 细胞增殖 细胞周期
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厄贝沙坦激活PPAR-γ介导AMPK/mTOR通路诱导自噬改善LO2细胞脂肪变 被引量:7
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作者 钟娟 雷任国 +2 位作者 钟庆荣 覃亚勤 黎洪棉 《天津医药》 CAS 北大核心 2020年第10期936-941,共6页
目的探讨厄贝沙坦调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)介导磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路及自噬对LO2细胞脂肪变的影响。方法采用脂混合物(LM)诱导LO2细胞建立细胞脂肪变模型,将造模后细... 目的探讨厄贝沙坦调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)介导磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路及自噬对LO2细胞脂肪变的影响。方法采用脂混合物(LM)诱导LO2细胞建立细胞脂肪变模型,将造模后细胞分为模型组、厄贝沙坦组和厄贝沙坦联合PPAR-γ抑制剂组,另设正常组。分别干预24 h后,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)含量,并行油红O染色分析细胞内脂质沉积,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞PPAR-γ、AMPK/mTOR信号通路相关蛋白的表达,应用激光共聚焦技术观察自噬标志蛋白LC3B的变化。结果10μmol/L及以下浓度的厄贝沙坦对LO2细胞生长无明显毒性作用,20μmol/L厄贝沙坦对细胞毒性作用较大,表现出明显的抑制作用。与正常组比较,模型组LO2细胞内TG和TC含量升高,油红O染色显示脂质大量沉积,PPAR-γ、p-AMPK和LC3B蛋白表达水平降低,mTOR磷酸化水平升高(均P<0.05);与模型组比较,经厄贝沙坦治疗后,LO2细胞内TG和TC含量降低,油红O染色显示脂质沉积减少,PPAR-γ、p-AMPK和LC3B蛋白表达水平升高,mTOR磷酸化水平降低(均P<0.05);但经厄贝沙坦联合PPAR-γ抑制剂干预后,PPAP-γ抑制剂抑制了厄贝沙坦对LO2细胞脂肪变的治疗作用。结论厄贝沙坦可通过激活PPAR-γ介导的AMPK/mTOR信号通路,促进LM诱导LO2细胞的自噬,从而减轻脂质沉积,改善肝细胞脂肪变。 展开更多
关键词 血管紧张素受体拮抗剂 PPARγ AMP活化蛋白激酶类 自噬 厄贝沙坦 AMPK/mTOR通路 lo2细胞 脂肪变性
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解毒化瘀颗粒对H_(2)O_(2)诱导LO2肝细胞炎症反应的影响 被引量:5
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作者 张荣臻 毛德文 +3 位作者 孙克伟 王秀峰 刘茵 王挺帅 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期564-567,共4页
目的研究解毒化瘀颗粒对H_(2)O_(2)诱导LO2肝细胞损伤炎症反应的影响及其可能的作用机制,为慢加急性肝衰竭的防治提供理论基础。方法利用H_(2)O_(2)诱导LO2肝细胞损伤模型,用不同浓度解毒化瘀颗粒工作液进行干预,采用Hochest 33528染色... 目的研究解毒化瘀颗粒对H_(2)O_(2)诱导LO2肝细胞损伤炎症反应的影响及其可能的作用机制,为慢加急性肝衰竭的防治提供理论基础。方法利用H_(2)O_(2)诱导LO2肝细胞损伤模型,用不同浓度解毒化瘀颗粒工作液进行干预,采用Hochest 33528染色观察细胞形态,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,RT-PCR检测细胞中炎症因子白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)及Toll样受体4(Toll-like Receptors 4,TLR4)mRNA水平,Western blot检测信号通路蛋白磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶(phosphorylation-mitogen activated protein kinase,p-MAPKs)、磷酸化核转录因子κB(phosphorylation-nuclear factor kappa B,p-NF-κB),TLR4的表达水平。结果与对照组相比,经H_(2)O_(2)处理后,LO2细胞凋亡率明显上升(P<0.01),炎性因子IL-6、TNF-αmRNA水平显著升高(P<0.01),TLR4 mRNA水平亦显著升高(P<0.01)。p-MAPKs、p-NF-κB、TLR4的蛋白表达水平则显著降低(P<0.01)。经解毒化瘀颗粒工作液干预后,细胞凋亡率显著下降(P<0.01),炎性因子IL-6、TNF-αmRNA水平显著降低(P<0.01),TLR4 mRNA水平亦显著降低(P<0.01)。p-MAPKs、p-NF-κB、TLR4的蛋白表达水平则显著升高(P<0.01)。结论解毒化瘀颗粒对H_(2)O_(2)诱导LO2肝细胞的炎症反应具有保护作用,其机制可能与TLR/MAPKs/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 解毒化瘀颗粒 lo2肝细胞 炎症 信号通路
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茵陈五苓散含药血清对LO2细胞株LDL-R及HMG-CoA还原酶表达的影响 被引量:5
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作者 李若梦 刘石密 +2 位作者 吴凝 赵琳琳 王东生 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2015年第14期1243-1246,共4页
目的探讨茵陈五苓散含药血清调节血脂的可能机制并筛选其最佳给药浓度及作用时间。方法将40只雄性SD大鼠随机分为菌陈五苓散低、中、高剂量组,辛伐他汀组及空白组,每组8只。菌陈五苓散低、中、高剂量组分别给予4、8、16 g/(kg·d)... 目的探讨茵陈五苓散含药血清调节血脂的可能机制并筛选其最佳给药浓度及作用时间。方法将40只雄性SD大鼠随机分为菌陈五苓散低、中、高剂量组,辛伐他汀组及空白组,每组8只。菌陈五苓散低、中、高剂量组分别给予4、8、16 g/(kg·d)菌陈五苓散;辛伐他汀组给予1 mg/(kg·d)辛伐他汀片;空白组给予20 mg/(kg·d)生理盐水,各组大鼠每天灌胃2次,连续3天,制备含药血清。取对数生长期的LO2细胞株经过24 h孵化贴壁后随机分为茵陈五苓散低、中、高剂量组,辛伐他汀组及空白组,每组各18孔,每孔分别加入受试血清10μl。同浓度的18孔再分为3组,每组6孔,分别培养24、48、72 h,实时荧光定量法检测各组细胞的低密度脂蛋白受体(LDL-R)mRNA及3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-Co A)还原酶mRNA表达情况。结果与空白组比较,茵陈五苓散各剂量组及辛伐他汀组各时间点LDL-R mRNA表达均明显升高,HMG-Co A还原酶mRNA表达均明显下降(P<0.05或P<0.01),其中茵陈五苓散在中浓度、干预48 h的条件下LDL-R mRNA表达达高峰、HMG-Co A还原酶mRNA表达最低。结论茵陈五苓散含药血清调节血脂的机制可能与其能明显上调LDL-R表达、下调HMG-Co A还原酶表达有关,在药物浓度为中浓度、干预时间为48 h时效果最佳。 展开更多
关键词 茵陈五苓散 lo2细胞株 3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶 低密度脂蛋白受体
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三黄茵赤方含药血清对LO2细胞DNA氧化损伤的影响 被引量:2
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作者 代欢 刁建新 +2 位作者 区锦莹 李海叶 杨运高 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1434-1439,共6页
目的探讨三黄茵赤方含药血清对H2O2诱导LO2细胞DNA氧化损伤的保护作用。方法采集三黄茵赤方含药血清,以LO2细胞株为研究对象,通过H2O2诱导LO2细胞DNA氧化损伤模型,实验分正常对照组、H2O2模型组、三黄茵赤方含药血清5%、10%、15%浓度组... 目的探讨三黄茵赤方含药血清对H2O2诱导LO2细胞DNA氧化损伤的保护作用。方法采集三黄茵赤方含药血清,以LO2细胞株为研究对象,通过H2O2诱导LO2细胞DNA氧化损伤模型,实验分正常对照组、H2O2模型组、三黄茵赤方含药血清5%、10%、15%浓度组、维生素E组,采用倒置显微镜观察各组形态,CCK-8法测定细胞存活率,生化法检测细胞内SOD、CAT和GSH-PX活性,流式细胞仪检测细胞内ROS水平,ELISA检测细胞内8-OHd G含量,彗星实验检测细胞DNA损伤情况。结果与H2O2模型组比较,三黄茵赤方含药血清10%、15%浓度组、维生素E组均能提高细胞存活率(P<0.05),增强细胞内SOD、CAT、GSH-PX活性(P<0.05),改善细胞对ROS清除能力(P<0.01),降低细胞内8-OHd G含量(P<0.01),减低细胞拖尾率、尾长、尾矩及Olive尾矩(P<0.05)。结论三黄茵赤方含药血清对H2O2诱导LO2细胞DNA氧化性损伤具有保护作用,以15%浓度含药血清组作用最显著。 展开更多
关键词 含药血清 lo2细胞 H2O2 DNA氧化损伤
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狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对H2O2致LO2细胞损伤的保护作用 被引量:3
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作者 冯传平 丁海霞 +3 位作者 黄松 彭攸灵 刘颖新 李飞艳 《中国药师》 CAS 2018年第1期53-57,共5页
目的:探讨狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮(WSTF)对氧化应激损伤LO_2细胞的保护作用。方法:通过细胞毒性实验确定给药范围,建立过氧化氢(H2O_2)致LO_2细胞损伤模型,用含不同浓度WSTF的培养液与急性损伤肝细胞共孵育不同时间,采用MTT比色法... 目的:探讨狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮(WSTF)对氧化应激损伤LO_2细胞的保护作用。方法:通过细胞毒性实验确定给药范围,建立过氧化氢(H2O_2)致LO_2细胞损伤模型,用含不同浓度WSTF的培养液与急性损伤肝细胞共孵育不同时间,采用MTT比色法测定细胞活力,检测谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙二醛(MDA)的水平,评价WSTF对肝细胞损伤的保护作用。检测细胞线粒体膜电位和细胞内活性氧簇(ROS)水平,分析WSTF抑制H2O_2诱导LO_2细胞凋亡情况。结果:0.3 mmol·L^(-1)H2O_2处理LO_2细胞4 h构建H2O_2损伤LO_2细胞模型,确定0.031 2~0.125 mg·ml^(-1)WSTF为保护LO_2细胞损伤的给药浓度范围。WSTF可抑制H2O_2对肝细胞的损伤,并明显降低H2O_2致急性损伤肝细胞的ALT、AST释放量和MDA水平,逆转H2O_2诱导LO_2肝细胞线粒体膜电位去极化和细胞内ROS升高。结论:WSTF体外给药对肝细胞损伤有保护作用。 展开更多
关键词 狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮 过氧化氢 lo2肝细胞损伤 谷氨酸氨基转移酶 天冬氨酸氨基转移酶 丙二醛 保护作用
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LO2细胞不同缺氧复氧时间细胞存活率检测及瘦素的影响 被引量:2
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作者 周少丽 池信锦 +2 位作者 关键强 黑子清 郭娜 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第S2期18-19,40,共3页
【目的】复制肝细胞缺血缺氧模型和瘦素对它的影响。【方法】将LO2细胞分别缺氧2h、4h、8h和12h和正常组,后用CCK-8检测各组细胞的A490值,与正常组比较算出细胞的存活率。并用不同浓度的瘦素(分别为100μg/L、200μg/L、400μg/L、800μ... 【目的】复制肝细胞缺血缺氧模型和瘦素对它的影响。【方法】将LO2细胞分别缺氧2h、4h、8h和12h和正常组,后用CCK-8检测各组细胞的A490值,与正常组比较算出细胞的存活率。并用不同浓度的瘦素(分别为100μg/L、200μg/L、400μg/L、800μg/L和1600μg/L)加入缺氧12h的LO2细胞,观察瘦素对其细胞存活率的影响。【结果】LO2细胞经厌氧培养后,缺氧2h、4h、8h和12h细胞CCK-8A490值显著低于缺氧正常组平均值(P<0.01),随着缺氧时间的延长,A490值、细胞存活率逐渐下降;经厌氧培养后的LO2细胞与正常组相比,细胞CCK-8A490值显著低于对照组(P<0.01),不同浓度的LEP能减轻厌氧培养的LO2细胞损伤,A490值、细胞存活增高。【结论】采用厌氧气体培养LO2细胞复制肝脏缺血模型是可行的;瘦素对经厌氧培养后的LO2细胞有保护作用。 展开更多
关键词 缺氧-复氧 lo2细胞 存活率 瘦素
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玉米糖肽对酒精诱导损伤LO2细胞的保护效应 被引量:4
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作者 王晓杰 童玲 刘晓兰 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第1期13-22,共10页
构建LO2细胞酒精性损伤模型,在细胞水平上研究玉米糖肽干预对酒精诱导损伤的LO2细胞的保护效应,并探讨玉米糖肽拮抗酒精性肝细胞损伤的可能机理。结果表明:与酒精模型组相比,50μg/mL玉米糖肽的预处理能够增加损伤LO2细胞中酒精代谢酶(... 构建LO2细胞酒精性损伤模型,在细胞水平上研究玉米糖肽干预对酒精诱导损伤的LO2细胞的保护效应,并探讨玉米糖肽拮抗酒精性肝细胞损伤的可能机理。结果表明:与酒精模型组相比,50μg/mL玉米糖肽的预处理能够增加损伤LO2细胞中酒精代谢酶(ADH和ALDH)和抗氧化酶(SOD、CAT和GSH-Px)活力以及GSH含量;降低ROS和MDA含量,说明玉米糖肽通过促进酒精代谢和增强抗氧化活力,维持LO2细胞结构的完整,防止肝内酶(AST、ALT和LDH)的泄露,并降低LO2细胞早期凋亡和死亡细胞的比例,达到保护酒精诱导损伤的LO2细胞的效果。 展开更多
关键词 转谷氨酰胺酶 玉米糖肽 lo2细胞 酒精代谢酶 细胞凋亡
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Pdx1与Ngn3协同诱导LO2细胞分化为胰腺β样细胞 被引量:3
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作者 郭敏 唐小龙 张洹 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期351-356,共6页
目的:胰腺十二指肠同源框蛋白1(Pdx1)与神经源素3(Ngn3)联合诱导肝实质细胞向胰腺β样细胞分化。方法:以人胚胎胰腺组织基因组的mRNA为模板经RT-PCR扩增获得Pdx1与Ngn3基因。应用分子生物学技术,分别克隆到真核表达载体pEGFP-C1的多克... 目的:胰腺十二指肠同源框蛋白1(Pdx1)与神经源素3(Ngn3)联合诱导肝实质细胞向胰腺β样细胞分化。方法:以人胚胎胰腺组织基因组的mRNA为模板经RT-PCR扩增获得Pdx1与Ngn3基因。应用分子生物学技术,分别克隆到真核表达载体pEGFP-C1的多克隆位点中,构建pEGFP-C1/Pdx1与pEGFP-C1/Ngn3真核表达质粒,并共转染L02细胞,用RT-PCR、免疫组化、间接荧光法检测目的基因及胰岛素相关基因葡萄糖转运体2(GLUT2)与胰岛素的表达情况。结果:目的基因克隆正确,RT-PCR、免疫组化、间接荧光证实转染后LO2细胞中有Pdx1、Ngn3和胰岛素及胰岛素相关基因GLUT2的表达。结论:Pdx1与Ngn3协同作用可诱导肝实质细胞向胰腺β样细胞分化。 展开更多
关键词 胰腺十二指肠同源框蛋白1 神经源素3 lo2细胞 转分化 胰腺β样细胞
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S1P对人LO2肝细胞株胰岛素抵抗模型糖代谢的影响 被引量:2
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作者 方红娟 冯琼 +4 位作者 王强 张强 史云湘 陈金龙 钟历勇 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第8期1025-1030,共6页
目的观察鞘氨醇激酶1(SPK1)催化产物1-磷酸鞘氨醇(S1P)对LO2肝细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的影响。方法用胰岛素诱导人正常肝细胞(LO2)产生胰岛素抵抗,MTT法检测LO2细胞增殖,葡萄糖-己糖激酶法检测培养基残存葡萄糖浓度,油红O鉴定LO2细胞... 目的观察鞘氨醇激酶1(SPK1)催化产物1-磷酸鞘氨醇(S1P)对LO2肝细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的影响。方法用胰岛素诱导人正常肝细胞(LO2)产生胰岛素抵抗,MTT法检测LO2细胞增殖,葡萄糖-己糖激酶法检测培养基残存葡萄糖浓度,油红O鉴定LO2细胞脂肪变性,荧光双染法鉴定线粒体ROS,Western blot检测SPK1蛋白表达。结果与对照组相比,10、100和1 000 nmol/L 3个浓度的胰岛素对细胞葡萄糖摄取能力无显著影响;1 000 nmol/L浓度的胰岛素作用细胞48 h时胰岛素敏感指数下降,胰岛素抵抗模型建立。与对照组相比,模型组细胞脂滴面积增加(P<0.05),SPK1表达量呈增加趋势,线粒体ROS也显著增加。在模型组中加入S1P后,可显著促进细胞对葡萄糖的吸收(P<0.05)。结论成功构建胰岛素诱导的LO2肝细胞胰岛素抵抗模型,并且发现S1P可以促进模型细胞糖代谢,提示S1P可作为筛选降糖药物的新靶点。 展开更多
关键词 1-磷酸鞘氨醇 lo2细胞 胰岛素抵抗 糖代谢
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