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猪圆环病毒3型LAMP-PfAgo检测方法的建立
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作者 祁钊 余相宇 +1 位作者 陈魏圆 宋祥军 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第2期1-9,31,共10页
【目的】利用PfAgo蛋白结合环介导等温扩增技术(LAMP)建立一种新的PCV3检测方法LAMP-PfAgo法,用于PCV3的快速鉴别诊断。【方法】PCR扩增PCV3 Rep基因,构建重组阳性质粒pMD19-T-PCV3-Rep,对其进行PCR和测序鉴定。根据PCV3 Rep基因的保守... 【目的】利用PfAgo蛋白结合环介导等温扩增技术(LAMP)建立一种新的PCV3检测方法LAMP-PfAgo法,用于PCV3的快速鉴别诊断。【方法】PCR扩增PCV3 Rep基因,构建重组阳性质粒pMD19-T-PCV3-Rep,对其进行PCR和测序鉴定。根据PCV3 Rep基因的保守区域设计PCV3-T1~PCV3-T4等4组引物(每组包括1对内引物和1对外引物),以pMD19-T-PCV3-Rep为模板进行LAMP,筛选最佳引物组,并对LAMP反应的Mg ^(2+)浓度、内外引物浓度、反应温度、反应时间进行优化。根据PCV3 Rep基因的保守序列,设计PCV3-gs1~PCV3-gs5等5组gDNAs和一条特异性探针,进行LAMP-PfAgo反应,筛选最佳的gDNAs,并对LAMP-PfAgo反应体系中PfAgo蛋白浓度、gDNAs浓度、Mn 2+浓度和反应时间进行优化。对该LAMP-PfAgo方法的特异性、敏感性进行评价;并用该方法和实时荧光定量PCR方法对疑似感染PCV3的46份临床样品进行检测,比较结果的一致性。【结果】重组阳性质粒pMD19-T-PCV3-Rep PCR和测序均获得了891 bp的序列,表明重组阳性质粒构建成功。LAMP最佳引物为PCV3-T1,最佳Mg ^(2+)终浓度为6 mmol/L,最佳内外引物终浓度分别为1.6和1.2μmol/L,最适的反应温度65℃,最佳反应时间60 min。使用优化后的LAMP反应条件对PCV3 Rep基因保守序列进行扩增,并将其用于后续试验。LAMP-PfAgo反应最佳的gDNAs为PCV3-gs1;优化后的PfAgo蛋白终浓度为40 U/μL,gDNAs终浓度为1.50μmol/L,Mn 2+终浓度为1.50 mmol/L,反应时间为30 min。LAMP-PfAgo法的灵敏度为10拷贝/μL,且与猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒及猪伪狂犬病毒等常见猪源病原核酸无交叉反应。临床样本检测结果显示,LAMP-PfAgo法与实时荧光定量PCR方法检测结果的符合率为100%。【结论】基于PfAgo蛋白结合LAMP技术建立了对PCV3的核酸检测方法,该方法灵敏度高和特异性强,具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 PfAgo 环介导等温扩增 即时检验
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Design and realization of lamp life test instrument 被引量:1
2
作者 潘登 张云翠 +2 位作者 朴太明 邹念育 王智森 《Journal of Harbin Institute of Technology(New Series)》 EI CAS 2012年第6期124-128,共5页
This paper introduces an instrument and method for lamp life test. The design of the instrument is divided into three steps: the oyerall design scheme, hardware circuit design and host machine programming. The instru... This paper introduces an instrument and method for lamp life test. The design of the instrument is divided into three steps: the oyerall design scheme, hardware circuit design and host machine programming. The instrument contains luminance and temperature sensors which can measure luminance of the lamp lighting and environment temperature in the instrument body. Then, the measure data can be transmitted to PC via the wireless transceiver modules for real-time monitoring. The luminance degradation curve based on the measure data is used to reckon the life of the lamp. In the end, the method for processing measurement data is given. 展开更多
关键词 lamp life test luminance degradation wireless communication LABVIEW
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基于沙门菌属LAMP检测的食品卫生检验优化方法
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作者 甘方勇 《现代食品》 2025年第1期196-199,共4页
沙门菌是一种常见的食源性病原体,能够引起沙门菌感染,导致食物中毒,严重时甚至可危及生命。优化检测方法对于快速准确地识别污染源、防止疾病的传播至关重要。本文通过对比传统的分离培养法,发现环介导等温扩增技术(Loop-mediated Isot... 沙门菌是一种常见的食源性病原体,能够引起沙门菌感染,导致食物中毒,严重时甚至可危及生命。优化检测方法对于快速准确地识别污染源、防止疾病的传播至关重要。本文通过对比传统的分离培养法,发现环介导等温扩增技术(Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP)在检测速度、操作简便性和成本效益方面具有显著优势。实验结果表明,LAMP方法远快于分离培养法,且LAMP法的操作步骤简单,不需要复杂的设备和高技能的操作人员,能够有效降低成本。 展开更多
关键词 沙门菌属 环介导等温扩增技术(lamp) 食品检测
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沙门菌invA基因LAMP快速检测法的建立和初步应用 被引量:21
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作者 王敏雅 徐明汉 +1 位作者 潘宏伟 王志刚 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第10期1971-1973,1981,共4页
目的:建立适合基层检验部门使用的快速检测沙门菌LAMP法。方法:在65℃普通恒温水浴中、60 min扩增沙门菌invA基因片段,目测或电泳快速检测沙门菌。分别对环介导等温扩增(LAMP)反应影响较大的温度、Betaine浓度等进行优化,并对实验室保存... 目的:建立适合基层检验部门使用的快速检测沙门菌LAMP法。方法:在65℃普通恒温水浴中、60 min扩增沙门菌invA基因片段,目测或电泳快速检测沙门菌。分别对环介导等温扩增(LAMP)反应影响较大的温度、Betaine浓度等进行优化,并对实验室保存的28种沙门菌不同血清型共34株和其他9种肠杆菌科细菌进行检测;对部分沙门菌进行污染血清直接LAMP模拟检测。结果:28种不同血清型的沙门菌LAMP检测都呈阳性,其它9种肠杆菌科细菌均为阴性;血清模拟实验与菌株直接DNA提取LAMP检测结果一致。结论:LAMP法能够快速、特异地检测沙门菌,且不需要昂贵的仪器,适合基层检验部门使用。 展开更多
关键词 沙门菌 lamp invA基因 快速测定
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基于LAMP技术建立解脲支原体基因试纸条检测方法 被引量:3
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作者 潘克女 周蕾 +3 位作者 钮海莺 厉小玉 张永乐 刘寿荣 《生物医学工程学进展》 CAS 2012年第2期79-81,共3页
目的建立一种灵敏度高、特异性强、检测速度快的方法检测解脲支原体。方法基于环介导恒温扩增技术(LAMP),根据解脲支原体序列特征设计3对引物进行解脲支原体DNA切口酶核酸恒温扩增,扩增过程在一对引物中标记生物素,随着扩增的进行生物... 目的建立一种灵敏度高、特异性强、检测速度快的方法检测解脲支原体。方法基于环介导恒温扩增技术(LAMP),根据解脲支原体序列特征设计3对引物进行解脲支原体DNA切口酶核酸恒温扩增,扩增过程在一对引物中标记生物素,随着扩增的进行生物素直接引入扩增片段中,扩增结束后产物在密闭装置中进行免疫试纸条显色反应,根据显色卡的颜色判定结果的阴阳性。结果该技术检测解脲支原体较实时荧光PCR技术灵敏度要高10倍以上,其它病原体检测均阴性该方法特异性与实时荧光PCR技术相当。结论恒温扩增联合试纸条技术检测解脲支原体具有较高的敏感性和特异性,检测速度快,适合各医院开展。 展开更多
关键词 环介导恒温扩增 试纸条 解脲支原体
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甘蔗花叶病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立和应用 被引量:10
6
作者 司慧娟 袁小宁 +3 位作者 白山 廖永凤 温荣辉 陈保善 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1346-1350,共5页
本文建立了甘蔗花叶病毒(SCMV)RT-LAMP可视化检测方法。针对甘蔗花叶病毒的cp基因保守区设计引物,建立并优化了特异性检测甘蔗花叶病毒的高灵敏度RT-LAMP反应体系。所优化的SCMV RT-LAMP方法灵敏度高,对于SCMV cp基因的最低检测量为20 ... 本文建立了甘蔗花叶病毒(SCMV)RT-LAMP可视化检测方法。针对甘蔗花叶病毒的cp基因保守区设计引物,建立并优化了特异性检测甘蔗花叶病毒的高灵敏度RT-LAMP反应体系。所优化的SCMV RT-LAMP方法灵敏度高,对于SCMV cp基因的最低检测量为20 fg,可从简单提取的甘蔗总RNA中检出病毒核酸。研究结果表明所建立的针对SCMV的RT-LAMP体系具有特异性强、灵敏度高、操作简单和快速的特点,在实际检测中展示出良好的应用前景。 展开更多
关键词 甘蔗花叶病毒 RT-lamp 病毒检测 可视化检测
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基于LAMP的高校试卷分析系统的构建 被引量:2
7
作者 徐锦强 余诚强 丁艺 《高师理科学刊》 2014年第2期38-42,共5页
试卷分析是高校教学过程的必要环节,对提高教学质量有重要的指导作用.根据高校试卷特点及用户需求,研究了基于LAMP的高校试卷分析系统的平台搭建和配置,提出了系统开发的思路,实现了系统功能的具体设计,为高校试卷分析提供了新的解决方法.
关键词 试卷分析 高校
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基于LAMP的网络渗透测试系统设计与实现 被引量:4
8
作者 廖先琴 《电子器件》 CAS 北大核心 2014年第3期482-486,共5页
为了更好的完成对目标系统的远程安全评估,设计实现了一种基于LAMP架构的网络渗透测试系统。该系统实现功能包括:基于B/S模式的系统Web框架,运用NASL攻击脚本插件实现的漏洞扫描模块,基于攻击图的渗透方案自动生成模块,统一调用的多数... 为了更好的完成对目标系统的远程安全评估,设计实现了一种基于LAMP架构的网络渗透测试系统。该系统实现功能包括:基于B/S模式的系统Web框架,运用NASL攻击脚本插件实现的漏洞扫描模块,基于攻击图的渗透方案自动生成模块,统一调用的多数据库通用引擎。测试结果表明,系统能够有效针对目标主机完成信息探测、漏洞扫描、渗透攻击、测试评估等功能,系统性能稳定,操作简单,可扩展性强。 展开更多
关键词 渗透测试 lamp NASL攻击脚本语言 数据库技术
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LAMP法检测超级细菌NDM-1基因
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作者 潘翊 何金洋 +1 位作者 刘亚敏 李兰芳 《医学动物防制》 2011年第5期433-435,共3页
目的建立超级细菌NDM-1基因的LAMP检测方法。方法根据目前Genbank上公布的超级细菌NDM-1基因序列,交由商业性的公司化学合成NDM-1全基因,然后以PCR、酶切及测序鉴定基因合成是否成功;再以LAMP法扩增NDM-1基因重组质粒,电泳观察扩增是否... 目的建立超级细菌NDM-1基因的LAMP检测方法。方法根据目前Genbank上公布的超级细菌NDM-1基因序列,交由商业性的公司化学合成NDM-1全基因,然后以PCR、酶切及测序鉴定基因合成是否成功;再以LAMP法扩增NDM-1基因重组质粒,电泳观察扩增是否成功。结果经证实化学合成NDM-1基因是成功的;之后进行的LAMP法扩增NDM-1基因也是成功的。结论成功建立了LAMP法检测超级细菌NDM-1基因的方法,为超级细菌的检测提供了一种可用的方法。 展开更多
关键词 新德里金属-β-内酰胺酶-1 环介导的等温扩增 检测
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基于布鲁菌bp26基因LAMP检测方法的建立及优化 被引量:4
10
作者 马世辉 贾沅铮 +5 位作者 王福成 连丽燕 蒋蔚 陈兆国 韩先干 陈伟 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1043-1049,共7页
布鲁菌病严重影响畜牧业发展和公共卫生安全,及时、准确地检测布鲁菌是该病防控的关键。本研究基于布鲁菌bp26基因设计特异性的环介导等温扩增(LAMP)引物,建立布鲁菌LAMP检测方法。为获得最佳反应条件,对镁离子浓度、LAMP引物比例、反... 布鲁菌病严重影响畜牧业发展和公共卫生安全,及时、准确地检测布鲁菌是该病防控的关键。本研究基于布鲁菌bp26基因设计特异性的环介导等温扩增(LAMP)引物,建立布鲁菌LAMP检测方法。为获得最佳反应条件,对镁离子浓度、LAMP引物比例、反应设备等条件进行优化,对建立的LAMP检测方法的灵敏度、特异性进行评价。结果显示,建立的LAMP反应体系中镁离子浓度为8 mmol/L,内外引物比为6∶1时为最佳体系;分别在金属浴、恒温水浴锅、烘箱等不同环境下实验,结果无差异;对大肠杆菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌等8种不同细菌的特异性检测结果显示,该方法特异性良好。在最佳反应条件下,检测灵敏度为10 pg/μL。为获得良好的可视化检测效果,通过对反应体系中不同浓度的锰离子浓度进行优化,结果显示,锰离子浓度为0.1 mmol/L时可以建立最佳可视化效果。本研究建立的布鲁菌LAMP检测方法特异、灵敏、可视化,为布鲁菌的临床快速检测提供了技术支持。 展开更多
关键词 布鲁菌 环介导等温扩增 bp26 可视化检测
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禽白血病病毒K亚群RT-LAMP检测方法的建立 被引量:7
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作者 黄海超 陈轩 +6 位作者 杨素 赵海燕 曹伟胜 邵建宏 赵福振 沙才华 李忠 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期161-166,共6页
根据Gen Bank数据库中禽白血病病毒(ALV)K亚群特异性的gp85基因序列,设计了特异性检测ALV K亚群(ALV-K)的RT-LAMP引物。对内、外引物浓度组合和反应温度进行优化,建立了ALV-K的RT-LAMP检测方法。特异性试验结果显示,本方法只对ALV-... 根据Gen Bank数据库中禽白血病病毒(ALV)K亚群特异性的gp85基因序列,设计了特异性检测ALV K亚群(ALV-K)的RT-LAMP引物。对内、外引物浓度组合和反应温度进行优化,建立了ALV-K的RT-LAMP检测方法。特异性试验结果显示,本方法只对ALV-K进行特异性扩增,而对禽白血病的其他亚群以及NDV、REV、AIV、MDV、IBV等常见禽病病原未见扩增。敏感性试验表明,本方法最低能够检测到3.4×104copies/L的质粒。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 K亚群 RT-lamp 检测方法
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畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的LAMP检测及其耐药性分析 被引量:7
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作者 范丽霞 苑学霞 +4 位作者 李鸳鸯 邬元娟 赵善仓 张丙春 王文博 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第7期2325-2335,共11页
为深入了解畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的流行及耐药状况,采用建立的畜禽粪便中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法对山东省内牛粪污、猪粪、鸡粪、鸭粪中的金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌进... 为深入了解畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的流行及耐药状况,采用建立的畜禽粪便中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法对山东省内牛粪污、猪粪、鸡粪、鸭粪中的金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌进行检测,进而对检测阳性样品进行分离,并对药敏试验中多重耐药性菌株进行耐药基因预测。结果表明,LAMP方法检测畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌与国家标准方法检测结果符合率为100%,重复性好,特异性高。从80份畜禽粪污样品中分离到的3株金黄色葡萄球菌均对青霉素耐药;34株大肠埃希氏菌对氟苯尼考、利福平的耐药比例高于50%,高于25%以上的还有氨苄西林、四环素、多西环素、磺胺异噁唑、头孢噻吩和头孢噻呋;耐药基因预测结果显示,鸡粪、鸭粪、牛粪和猪粪中的4株大肠埃希氏菌分别携带10、8、20和15种耐药基因;鸡粪中的1株金黄色葡萄球菌携带11种耐药基因。说明山东地区畜禽粪污中金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌耐药状况严峻,菌株普遍多重耐药,且携带多种耐药基因。 展开更多
关键词 畜禽粪污 lamp 金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌 药敏试验 耐药基因
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猪流行性腹泻病毒RT-LAMP检测方法的建立与应用 被引量:8
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作者 吴迪 王林 +11 位作者 栗云鹏 杜鹃 张玮 张启龙 高晓龙 程汝佳 王培 李蕊 吴惠明 宋彦军 韦海涛 周德刚 《中国兽药杂志》 2020年第5期1-9,共9页
为建立一种适用于现场快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M基因编码区序列,分别设计合成3组引物,通过对引物的筛选和反应条件优化,建立了PEDV RT-LAMP可视化快速检测方法。灵... 为建立一种适用于现场快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M基因编码区序列,分别设计合成3组引物,通过对引物的筛选和反应条件优化,建立了PEDV RT-LAMP可视化快速检测方法。灵敏度和特异性试验结果显示,本方法在65℃45 min对PEDV的检测灵敏度为2 copies/μL,与猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒均无交叉反应。利用该方法对30份送检的临床样品进行检测,检出阳性样品8份,与荧光定量RT-PCR检测结果一致。试验表明,所建立的RT-LAMP检测方法具有特异性好、灵敏度高、快速、结果可视、设备适用范围广等优点,适用于PEDV现场快速检测。 展开更多
关键词 lamp 猪流行性腹泻病毒 快速检测 检测方法
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检测寨卡病毒核酸的RT-LAMP可视化方法的建立 被引量:2
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作者 宋雨濛 黄培 +7 位作者 金宏丽 焦翠翠 白玉洁 张梦瑶 龚志远 李媛媛 张海丽 王化磊 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1698-1703,共6页
为建立简单、便捷、灵敏、特异的寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)快速检测方法,本研究通过对不同时间、不同地区分离的ZIKV全基因组序列进行分析,筛选ZIKV NS5基因保守区为靶标,同时设计特异性引物及探针,结合RT-LAMP恒温扩增技术和免疫层析... 为建立简单、便捷、灵敏、特异的寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)快速检测方法,本研究通过对不同时间、不同地区分离的ZIKV全基因组序列进行分析,筛选ZIKV NS5基因保守区为靶标,同时设计特异性引物及探针,结合RT-LAMP恒温扩增技术和免疫层析技术,成功构建ZIKV反转录环介导等温扩增核酸可视化(RT-LAMP-VF)检测方法。结果显示,该方法具有良好的特异性和敏感性,当内、外、环引物比为FIP∶LF∶F3=4∶2∶1时,在61℃条件下恒温扩增45 min,可特异性检测到10^(2)copies/μL的RNA标准品以及2.15 pfu的ZIKV,且与其他黄病毒(日本乙型脑炎病毒、猪瘟病毒)等无交叉反应。血液组织中的其他RNA不影响RT-LAMP-VF的敏感性和特异性,表明该方法可用于临床样本ZIKV的检测。本研究建立的ZIKV RT-LAMP-VF检测方法操作简单、不需要特殊仪器设备,尤其适用于基层单位ZIKV的现场快速检测,为ZIKV病的现场快速检测和预警预报体系的建立提供技术支持与物质保障。 展开更多
关键词 寨卡病毒 环介导等温扩增 免疫层析试纸条 核酸可视化检测
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葡萄卷叶伴随病毒-3 RT-LAMP检测体系的建立与应用 被引量:2
15
作者 张强强 王雯雯 +3 位作者 闫思远 李玲 王若彤 顾沛雯 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2166-2174,共9页
为实现葡萄生产中对葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)的快速检测。本研究以GLRaV-3的CP基因序列(GenBank登录号:KC477128.1)为靶序列设计并合成了3对逆转录环介导恒温扩增技术(RTLAMP)引物,建立并优化GLRaV-3的RT-LAMP检测方法。结果表明,... 为实现葡萄生产中对葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)的快速检测。本研究以GLRaV-3的CP基因序列(GenBank登录号:KC477128.1)为靶序列设计并合成了3对逆转录环介导恒温扩增技术(RTLAMP)引物,建立并优化GLRaV-3的RT-LAMP检测方法。结果表明,该方法能够实现在恒温64℃下反应1 h完成对GLRaV-3的检测,引物GLRaV3-LAMP-Ⅰ特异性高,不与GLRaV-1~2、葡萄扇叶病毒、沙地葡萄茎痘相关病毒、葡萄病毒A、灰皮诺葡萄病毒和葡萄浆果内坏死病毒等7种葡萄常见病毒发生交叉反应;RNA最低检测限为10 pg·μL^(-1),灵敏度是逆转录PCR(RT-PCR)的10倍。田间样品检测验证结果表明,该方法与常规RT-PCR法检测一致率为100%。综上,本研究建立的GLRaV-3 RT-LAMP检测体系具有高特异性、高灵敏度和实用性强等特点,可应用于田间葡萄卷叶病样的检测。 展开更多
关键词 葡萄卷叶伴随病毒3 RT-lamp 引物筛选 反应条件优化 田间检测
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海产品中霍乱弧菌实时浊度LAMP检测方法的应用 被引量:1
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作者 梁华丽 《食品工程》 2015年第4期25-28,共4页
为了建立起一种同时具备快速、特殊、敏感以及有效的对霍乱弧菌进行检测的办法,并且借此来控制或预防该细菌造成大面积感染的可能性,对这种实际存在的霍乱弧菌中存在的ctx A基因所拥有的保守区域进行引物设计,通过实时浊度仪来进行LAMP... 为了建立起一种同时具备快速、特殊、敏感以及有效的对霍乱弧菌进行检测的办法,并且借此来控制或预防该细菌造成大面积感染的可能性,对这种实际存在的霍乱弧菌中存在的ctx A基因所拥有的保守区域进行引物设计,通过实时浊度仪来进行LAMP检测,即环介导等温扩增研究法,对其所具备的特性以及敏感性进行研究分析,并且通过这一方法对极高可能存在海产品中的霍乱弧菌进行检测。 展开更多
关键词 海产品 霍乱弧菌 实时浊度 lamp检测
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基于LAMP架构的防爆电气检验管理的解决方案
17
作者 宋立斌 《电气开关》 2012年第2期84-87,共4页
介绍了基于LAMP(Linux+Apache+MySQL+PHP)架构的防爆电气检测管理系统的设计模式、系统流程和各模块的功能,借助检测机构内部局域网实现了受检单位管理,检验任务分配,生成检验报告及报告查询等功能,能有效地提高检验机构的管理水平和工... 介绍了基于LAMP(Linux+Apache+MySQL+PHP)架构的防爆电气检测管理系统的设计模式、系统流程和各模块的功能,借助检测机构内部局域网实现了受检单位管理,检验任务分配,生成检验报告及报告查询等功能,能有效地提高检验机构的管理水平和工作效率以及服务质量。 展开更多
关键词 防爆电气检验 lamp架构 B/S模式 MYSQL数据库
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The Development of a Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP) Procedure for Plague Diagnostic 被引量:1
18
作者 Mariana de Lira Nunes Carina Lucena Mendes-Marques +1 位作者 Alzira Maria Paiva de Almeida Nilma Cintra Leal 《American Journal of Analytical Chemistry》 2014年第16期1069-1077,共9页
Plague caused by Yersinia pestis is one of the infectious diseases subject to the International Health Regulations (IHR). Permanent monitoring of the focal plague areas is mandatory in order to enable prompt control m... Plague caused by Yersinia pestis is one of the infectious diseases subject to the International Health Regulations (IHR). Permanent monitoring of the focal plague areas is mandatory in order to enable prompt control measures to prevent the spread of the disease. Therefore, the availability of efficient diagnosis tests is of paramount importance. Here, we describe a loop-mediated isothermal amplification (LAMP)-based procedure for rapid Y. pestis detection. We constructed a set of LAMP primers, which were used in assays to establish the reaction conditions that would lead to the quick visualization of the results by evaluating the test tube with the naked eye. The primers were specifically designed to target the caf1 gene located on pFra/Tox (pMT), a prototypical plasmid of Y. pestis. The LAMP procedure was performed at 65&deg;C for 45 min in a water bath and allowed for the detection of at least 10 pg of bacterial DNA. Due to its simplicity, specificity, sensitivity and rapidity, the LAMP technique is an additional tool that may be implemented in routine plague diagnoses, especially in emergencies. 展开更多
关键词 PLAGUE YERSINIA PESTIS Diagnosis tests Loop-Mediated ISOTHERMAL AMPLIFICATION (lamp)
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