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槐耳清膏对人高转移大细胞肺癌细胞L9981血管生成相关基因表达的影响 被引量:28
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作者 张芷旋 范羽 +6 位作者 周清华 王艳萍 马力 陈小禾 朱文 杨雪琴 赵颖 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第2期137-142,共6页
背景与目的肺癌是全世界对人类健康与生命危害最大的恶性肿瘤之一。目前从植物中开发抗肿瘤药物是国内外抗肿瘤新药开发的一个热点。本研究的目的是观察槐耳清膏对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981血管生成相关基因mRNA转录表达的影响及意... 背景与目的肺癌是全世界对人类健康与生命危害最大的恶性肿瘤之一。目前从植物中开发抗肿瘤药物是国内外抗肿瘤新药开发的一个热点。本研究的目的是观察槐耳清膏对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981血管生成相关基因mRNA转录表达的影响及意义,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养人高转移大细胞肺癌细胞L9981,应用台盼蓝拒染法做细胞毒性实验,实验分为:空白对照组,槐耳清膏组,顺铂化疗组,联合用药组。应用RTPCR检测四组细胞株用药前后βcatenin、Ecadherin、TIMP1、CD44V6、MMP2、endostatin、VEGFmRNA的表达。应用Boyden小室法检测四组细胞株用药前后体外侵袭力改变。结果①槐耳清膏对L9981细胞的生长有明显的抑制作用,且抑制率随药物浓度增加而上升。槐耳清膏组(1g/L)与顺铂化疗组(顺铂3mg/L)及联合用药组(槐耳清膏0.05g/L+顺铂1.5mg/L)比较抑制率无明显差异(P>0.05)。②经槐耳清膏处理后,L9981细胞的βcatenin、Ecadherin、TIMP1、endostatin、MMP2的mRNA表达水平上调,而VEGF、CD44V6表达水平下调,其中TIMP1、endostatin表达水平明显上调,CD44V6表达水平明显下调。③槐耳清膏组、顺铂化疗组、联合用药组细胞株的体外侵袭力均明显低于空白对照组(P<0.05)。结论①槐耳清膏在体外对人高转移大细胞肺癌细胞L9981具有生长抑制作用,该抑制作用呈剂量依赖性。②槐耳清膏对L9981的生长抑制作用可能与其调控血管生成相关基因mRNA的表达有关。③槐耳清膏联合顺铂有一定的协同抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 槐耳清膏 人大细胞肺癌细胞l9981 抗血管生成
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甲基硒酸对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981增殖和凋亡作用及其分子机制的初步研究 被引量:6
2
作者 刘洁薇 钟晓蓉 +5 位作者 周清华 Allen C.Gao 王艳萍 朱文 马力 张芷旋 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第2期103-108,共6页
背景与目的已有的研究表明硒具有防癌作用和抑制乳腺癌、前列腺癌细胞株增殖的作用,但有关甲基硒酸(MSA)是否具有抗肺癌的作用目前尚不清楚。本研究的目的是探讨MSA对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981是否具有生长抑制及诱导凋亡的作用,... 背景与目的已有的研究表明硒具有防癌作用和抑制乳腺癌、前列腺癌细胞株增殖的作用,但有关甲基硒酸(MSA)是否具有抗肺癌的作用目前尚不清楚。本研究的目的是探讨MSA对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981是否具有生长抑制及诱导凋亡的作用,并对其分子机制作初步探讨。方法应用体外细胞培养技术,以MSA处理L9981细胞株,应用台盼蓝计数法、克隆形成实验和流式细胞术检测MSA处理L9981细胞株前后细胞株体外增殖、克隆形成和凋亡水平的变化。应用流式细胞术检测MSA处理L9981细胞株前后细胞周期、细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白表达水平的变化。结果①MSA在大于0.5μmol/L的浓度时可显著抑制L9981细胞株的增殖(P<0.05),细胞被阻滞于G0/G1期。②MSA浓度在2.5μmol/L时可诱导L9981细胞株进入凋亡(P<0.05)。③MSA在5μmol/L时可明显抑制L9981细胞株的克隆形成能力(P<0.05)。④MSA能显著上调P53、P21、Fas、FasL和Bax蛋白表达水平。结论①MSA可显著抑制人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的体外增殖和克隆形成能力,并诱导细胞凋亡;②MSA的抗肺癌作用可能与其调控肺癌细胞株L9981细胞周期和细胞凋亡相关基因表达有关。 展开更多
关键词 甲基硒酸 人高转移大细胞肺癌细胞株l9981 生长抑制 凋亡
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转染nm23-H_1基因靶向阻断人大细胞肺癌细胞株L9981 Wnt信号传导通路 被引量:4
3
作者 付军科 周清华 +6 位作者 朱文 王艳萍 刘伦旭 陈小禾 聂强 李定彪 李印 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第4期294-297,共4页
目的 探讨nm2 3 H1 基因转染靶向阻断人高转移大细胞肺癌细胞株L9981Wnt信号传导通路的可行性 ,为阐明nm2 3 H1 基因调控肺癌转移抑制的分子机制和靶向治疗提供实验依据。方法 以转染nm 2 3 H1 基因的L9981 nm 2 3 H1 、原代L998... 目的 探讨nm2 3 H1 基因转染靶向阻断人高转移大细胞肺癌细胞株L9981Wnt信号传导通路的可行性 ,为阐明nm2 3 H1 基因调控肺癌转移抑制的分子机制和靶向治疗提供实验依据。方法 以转染nm 2 3 H1 基因的L9981 nm 2 3 H1 、原代L9981、空载L9981 pLXSN三株人高转移大细胞肺癌细胞为研究对象 ,应用Westernblot检测比较各株肺癌细胞胞浆、胞核中Wnt信号传导通路关键激酶GSK 3 β和 β 连环蛋白表达的变化。结果 ①GSK 3 β在L9981 nm 2 3 H1 肺癌细胞胞浆中表达量IOD( 63 41± 5 41)显著高于L9981( 373 6± 2 98)和L9981 pLXSN( 3 613± 3 83 ) (P <0 .0 0 1) ;②GSK 3 β在L9981 nm2 3 H1 肺癌细胞胞核中表达量IOD( 4 3 5 6± 490 )显著高于L9981( 65 7± 5 7)和L9981 pLXSN ( 70 5± 75 ) (P <0 .0 0 1) ;③β 连环蛋白在L9981 nm 2 3 H1 肺癌细胞胞浆中表达量IOD( 3 64 9± 118)显著高于L9981( 14 0 1± 3 1)和L9981 pLXSN ( 13 5 0± 5 5 )(P <0 .0 0 1) ;④β 连环蛋白在L9981 nm 2 3 H1 肺癌细胞胞核中表达量IOD( 2 945± 68)与L9981( 2 60 4± 2 3 )和L9981 pLXSN( 2 65 2± 5 3 )比较无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;⑤L9981与L9981 pLXSN两者间GSK 3 β和β 连环蛋白在肺癌细胞胞浆和胞核的? 展开更多
关键词 l9981 nm-23-H1基因 GSK-3Β Β-连环蛋白 Wnt信号通路 分子靶向阻断
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nm23-H_1基因转染能上调人肺癌细胞株L9981中GSK-3β激酶活性 被引量:3
4
作者 付军科 周清华 +7 位作者 朱文 王艳萍 陈小禾 车国卫 聂强 李定彪 刘伦旭 李印 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第2期81-85,共5页
目的 探讨转移抑制基因nm2 3 H1对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中Wnt信号传导激酶GSK 3 β的表达量和活性的影响 ,为全面阐明nm2 3 H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依据。方法 将稳定转染nm 2 3 H1基因的... 目的 探讨转移抑制基因nm2 3 H1对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中Wnt信号传导激酶GSK 3 β的表达量和活性的影响 ,为全面阐明nm2 3 H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依据。方法 将稳定转染nm 2 3 H1基因的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981 nm2 3 H1、原代细胞株L9981和空载体转染细胞株L9981 pLXSN培养传代 ,应用Westernblot分别检测应用 2 0mmol/LLiCl处理前后三个肺癌细胞株胞浆、胞核中GSK 3 β的表达水平 ,应用免疫共沉淀同位素闪烁计数法测定上述肺癌细胞株胞浆和胞核中的GSK 3 β激酶活性。 结果  ( 1)L9981 nm2 3 H1胞浆和胞核中GSK 3 β蛋白表达量分别为( 63 41± 5 41)和 ( 4 3 5 6± 490 )IOD ,L9981 pLXSN分别为 ( 3 613± 3 83 )和 ( 70 5± 75 )IOD ,L9981分别为 ( 373 6± 2 98)和 ( 65 7± 5 7)IOD。三个细胞株间胞浆和胞核中GSK 3 β表达量均有非常显著差异 (P <0 .0 1) ;两两比较 :L9981 nm2 3 H1胞浆和胞核GSK 3 β表达水平均显著高于L9981 pLXSN和L9981(P <0 .0 1) ,而后两者之间比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 ( 2 )L9981 nm2 3 H1胞浆和胞核GSK 3 β激酶活性分别为 ( 2 895 5±2 5 0 9)和 ( 92 47± 92 4)CPM ,L9981 pLXSN分别为 ( 112 41± 展开更多
关键词 nm23-H1 基因转染 肺癌 癌细胞 l9981 GSK-3Β 信号传导激酶活性 转移抑制基因
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nm23-H_1基因点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的GSK-3β激酶活性的影响 被引量:3
5
作者 马力 周清华 +7 位作者 朱文 朱大兴 杨雪琴 王艳萍 陈小禾 张敏 高利伟 赵颖 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第1期30-34,共5页
背景与目的我们的前期研究结果表明nm23-H1基因的肺癌转移抑制作用可能与上调Wnt信号通路中关键激酶GSK-3β的活性、进而抑制Wnt信号通路相关。本研究的目的是探讨nm23-H1点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中胞质和胞核的GSK-3β... 背景与目的我们的前期研究结果表明nm23-H1基因的肺癌转移抑制作用可能与上调Wnt信号通路中关键激酶GSK-3β的活性、进而抑制Wnt信号通路相关。本研究的目的是探讨nm23-H1点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中胞质和胞核的GSK-3β激酶活性的影响,为阐明nm23-H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依据。方法将原代人低转移大细胞肺癌细胞株NL9980、原代人高转移大细胞肺癌细胞株L9981、空载体转染细胞株L9981-pEGFP、稳定转染nm23-H1基因的细胞株L9981-nm23-H1-pEGFP以及稳定转染在44、96、118、120号位点发生突变后的nm23-H1基因的转基因肺癌细胞株L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1H118F-pEGFP和L9981-nm23-H1S120G-pEGFP作为研究对象,应用免疫共沉淀同位素闪烁计数法测定上述肺癌细胞株胞质和胞核中的GSK-3β激酶活性。结果nm23-H1基因发生点突变后,所有转基因肺癌细胞株细胞胞质和胞核中的GSK-3β活性均较突变前有所下降。L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1H118F-pEGFP、L9981-nm23-H1S120G-pEGFP分别与L9981-nm23-H1-pEGFP比较,胞质与胞核中GSK-3β激酶活性均存在显著性差异(P<0.05),其中L9981-nm23-H1P96S-pEGFP与L9981-nm23-H1-pEGFP胞质中GSK-3β活性存在极显著差异(P<0.01),L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP和L9981-nm23-H1H118F-pEGFP与L9981-nm23-H1-pEGFP的胞核中GSK-3β活性存在极显著差异(P<0.01)。结论①nm23-H1基因突变能显著影响其对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981胞质和胞核中GSK-3β激酶活性的调控作用;②nm23-H1基因可能通过调控L9981中GSK-3β激酶活性来抑制L9981细胞株中Wnt信号传导。 展开更多
关键词 人高转移大细胞肺癌细胞株l9981 NM23-H1 基因 Wnt信号通路 GSK-3Β 点突变
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靶向抑制ERK1/2信号传导通路对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981恶性表型的影响 被引量:3
6
作者 李印 周清华 +5 位作者 孙芝琳 孙泽芳 王艳萍 覃扬 朱文 陈晓禾 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第6期504-509,共6页
背景与目的肺癌的发生和发展是一个多基因调控、多阶段多步骤发生的复杂过程,目前已知信号传导异常在肺癌发生和发展各个阶段都具有重要作用。本研究旨在探讨外源性MEK1/2抑制剂U0126对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中细胞外信号调节激... 背景与目的肺癌的发生和发展是一个多基因调控、多阶段多步骤发生的复杂过程,目前已知信号传导异常在肺癌发生和发展各个阶段都具有重要作用。本研究旨在探讨外源性MEK1/2抑制剂U0126对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中细胞外信号调节激酶ERK1/2表达和活化的影响及细胞恶性生物学行为的影响。方法将具有nm23H1基因杂合性缺失的人高转移大细胞肺癌原代细胞株L9981培养传代,应用蛋白印迹法(Westernblot)和免疫沉淀法,检测U0126对L9981中总ERK1/2和双磷酸化ERK1/2的表达水平,以及ERK1/2相对活性的影响;应用MTT法及改良Boyden小室法分别检测U0126对L9981体外增殖活性及侵袭能力的作用规律。结果不同浓度的U0126作用于L998120min后,随着U0126浓度的增加ERK1/2的相对活性均逐渐下降,不同U0126浓度组间磷酸化ERK1/2表达水平比较均有非常显著性差异(P<0.01);而不同浓度U0126组间总ERK1/2表达水平比较无显著性差异(P=0.387)。相同浓度的U0126作用于L9981不同时间后,随着作用时间的延长,细胞中ERK1/2的相对活性均逐渐下降,各时间组间磷酸化ERK1/2表达水平比较有显著性差异(P<0.01);而各时间组间总ERK1/2表达水平比较无显著性差异(P=0.689)。U0126对L9981细胞株ERK1/2相对活性的作用具有时间和剂量依赖性。不同浓度的U0126作用于L9981后,随着U0126浓度的增加,细胞体外增殖活性随之降低,不同浓度组间比较均有显著性差异(P<0.01)。不同浓度的U0126作用于L9981后,随着U0126浓度的增加,细胞体外侵袭能力随之降低。在U0126浓度为0、10和20μmol/l时三个剂量组间细胞体外侵袭能力比较无显著性差异(P>0.05),而在U0126浓度增加为40和60μmol/l时与U0126浓度为0、10和20μmol/l时细胞体外侵袭能力比较均有显著性差异(P<0.01)。结论ERK1/2信号传导通路特异性抑制剂U0126对人高转移大细胞肺癌细胞株ERK1/2信号传导通路的抑制作用具有剂量和时间依赖性;U0126对人高转移大细胞肺癌细胞株体外增殖活性和侵袭能力的抑制作用具有剂量依赖性;提示人高转移大细胞肺癌细胞株中ERK1/2信号传导通路关键激酶MEK1/2可能是治疗肺癌的一个潜在分子靶点。 展开更多
关键词 人高转移大细胞肺癌细胞株l9981 ERK1/2 U0126 增殖 侵袭 靶向治疗
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nm23-H1基因转染L9981肺癌细胞前后基因表达谱的变化 被引量:3
7
作者 车国卫 周清华 +4 位作者 覃扬 王艳萍 陈小禾 朱文 孙芝琳 《生命科学研究》 CAS CSCD 2006年第1期77-81,共5页
应用基因芯片检测L9981细胞转染nm23-H1基因前后细胞基因表达谱的改变.提取L9981细胞转染nm23-H1基因前后细胞的总RNA,纯化为mRNA后再转录为cDNA.cDNA经限制性内切酶Sau3AI消化后,cDNA片段分别用cy3和cy5标记,与定制的包含14000个基因... 应用基因芯片检测L9981细胞转染nm23-H1基因前后细胞基因表达谱的改变.提取L9981细胞转染nm23-H1基因前后细胞的总RNA,纯化为mRNA后再转录为cDNA.cDNA经限制性内切酶Sau3AI消化后,cDNA片段分别用cy3和cy5标记,与定制的包含14000个基因芯片杂交.杂交结果经扫描和软件分析,nm23-H1基因转染L9981细胞后发现1156(8.26%,1156/14000)个基因表达上调,而642(4.59%,642/14000)个基因表达下调.涉及基因包括信号传导、癌基因与抑癌基因、转移相关基因、细胞周期与凋亡、细胞外基质与细胞骨架相关基因,以及细胞因子和转录因子等.nm23-H1基因是通过对转移相关基因的调节来发挥其抑制肺癌细胞株L9981侵袭和转移作用的. 展开更多
关键词 l9981 基因芯片 基因表达 NM23-H1基因
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nm23-H1基因在人肺癌细胞L9981恶性表型逆转中的作用 被引量:2
8
作者 车国卫 周清华 +5 位作者 王艳萍 刘伦旭 覃杨 孙芝琳 孙泽芳 陈晓禾 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期530-534,共5页
nm23-H1基因是肿瘤转移抑制基因,转染野生型的nm23-H1基因可以逆转肺癌的恶性表型,我们拟建立转染野生型nm23-H1基因的人大细胞肺癌细胞株L9981-nm23-H1,并初步探讨nm23-H1基因在逆转L9981细胞株恶性表型中的作用。应用基因克隆技术构... nm23-H1基因是肿瘤转移抑制基因,转染野生型的nm23-H1基因可以逆转肺癌的恶性表型,我们拟建立转染野生型nm23-H1基因的人大细胞肺癌细胞株L9981-nm23-H1,并初步探讨nm23-H1基因在逆转L9981细胞株恶性表型中的作用。应用基因克隆技术构建质粒载体pLXSN-nm23-H1-EGFP,并建立L9981-nm23-H1细胞株。同时应用Westernblot检测L9981-nm23-H1细胞中nm23-H1蛋白表达。细胞培养及改良的Boyden小室法分别检测L9981-nm23-H1细胞株的体外生物学行为,动物实验检测L9981-nm23-H1细胞株在裸鼠体内的成瘤性及肺部转移能力。结果成功构建了逆转录病毒载体pLXSN-nm23-H1-EGFP;并建立了人大细胞肺癌细胞株L9981-nm23-H1;nm23-H1基因在细胞株L9981-nm23-H1中稳定、高效表达;L9981-nm23-H1细胞体外增殖能力,克隆形成力,体外侵袭力显著降(P<0.01);L9981-nm23-H1裸鼠体内的成瘤性及肺部转移能力显著低于L9981和L9981-pLXSN(P<0.01);nm23-H1基因的抑瘤率82.56%。本研究资料提示转染野生型nm23-H1基因可以逆转人大细胞肺癌细胞株L9981的恶性表型。 展开更多
关键词 NM23-H1基因 人肺癌 肿瘤细胞 l9981 恶性表型 逆转录病毒载体
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nm23-H_1基因转染前后人高转移大细胞肺癌细胞株L9981 PKA活性变化的实验研究 被引量:2
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作者 李定彪 周清华 +7 位作者 王艳萍 朱文 陈小禾 杨俊杰 刘伦旭 付军科 聂强 李印 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第2期91-94,共4页
目的 探讨nm2 3 H1基因转染和forskolin对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981PKA活性的影响。方法 应用PKA通路特异激动剂forskolin对人高转移大细胞肺癌原代细胞株L9981、转基因细胞株L9981 nm 2 3 H1 pLXSN和空载体转染细胞株L9981 pL... 目的 探讨nm2 3 H1基因转染和forskolin对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981PKA活性的影响。方法 应用PKA通路特异激动剂forskolin对人高转移大细胞肺癌原代细胞株L9981、转基因细胞株L9981 nm 2 3 H1 pLXSN和空载体转染细胞株L9981 pLXSN共同培养 ,应用放免法检测forskolin处理后不同时间点三个细胞株PKA的活性变化。结果  ( 1)forskolin处理前L9981、L9981 pLXSN和L9981 nm2 3 H1 pLXSN的PKA活性经F检验有显著性差异 (P <0 .0 1) ;两两比较 :L9981 nm2 3 H1 pLXSN的PKA活性显著高于L9981和L9981 pLXSN(P <0 .0 1) ,而L9981与L9981 pLXSN之间比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 ( 2 )在同一作用时间 ( 3 0min)下 ,三个细胞株经不同浓度forskolin处理后PKA活性均显著升高 (P <0 .0 1) ,在forskolin浓度为 10 0 μmol/L时PKA活性最高 ,呈剂量依赖关系。 ( 3 )三个细胞株在同一浓度forskolin( 10 0μmol/L)处理下 ,PKA活性随作用时间升高 ,在forskolin作用时间为 3 0min时PKA的活性最高 ,呈时间依赖关系。结论  ( 1)nm2 3 H1基因转染能显著上调人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的PKA活性 ,nm2 3 H1作为一种肿瘤转移抑制基因的作用机理与PKA信号通路可能有一定联系 ;( 2 )forskolin能显著上调L9981细胞? 展开更多
关键词 NM23-H1 基因转染 癌细胞 l9981 PKA活性 实验 FORSKOLIN PKA通路特异激动剂 高转移 大细胞肺癌
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nm23-H_1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中β-catenin表达的影响 被引量:1
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作者 付军科 周清华 +6 位作者 朱文 王艳萍 刘伦旭 陈晓禾 车国卫 聂强 李定彪 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第6期471-474,共4页
目的 探讨nm2 3 H1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中 β catenin和磷酸化β catenin表达水平的影响 ,为阐明nm2 3 H1基因逆转肺癌转移的分子机制提供实验依据。方法 以原代L9981、转染nm 2 3 H1基因的L9981 nm2 3 H1和... 目的 探讨nm2 3 H1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中 β catenin和磷酸化β catenin表达水平的影响 ,为阐明nm2 3 H1基因逆转肺癌转移的分子机制提供实验依据。方法 以原代L9981、转染nm 2 3 H1基因的L9981 nm2 3 H1和转染空载体的L9981 pLXSN三株肺癌细胞株为研究对象 ,应用WesternBlot检测比较各细胞株胞浆、胞核中 β catenin和磷酸化 β catenin表达水平的变化 ,以确定nm 2 3 H1基因转染是否能调控人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中 β catenin和磷酸化 β catenin表达。 结果 ①β catenin在L9981 nm2 3 H1细胞株胞浆中表达量 (IOD) (3 64 9± 118)显著高于L9981(14 0 1± 3 1)和L9981 pLXSN(13 5 0± 5 5 )细胞株 (P <0 .0 0 1) ;②β catenin在L9981 nm 2 3 H1细胞株胞核中表达量 (2 945± 68)与L9981(2 60 4± 2 3 )和L9981 pLXSN(2 65 2± 5 3 )细胞株比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;③磷酸化β catenin在L9981 nm 2 3 H1细胞株胞浆中表达量 (3 12 3± 10 2 )显著低于L9981(4 3 62± 13 1)和L9981 pLXSN (4 5 0 0±117)细胞株 (P <0 .0 0 1) ;④磷酸化 β catenin在L9981 nm2 3 H1细胞株胞核中表达量 (5 13 6± 112 )显著高于L9981(2 666± 116)和L9981 pLXSN(2 展开更多
关键词 人高转移大细胞肺癌细胞株 “肺癌转移抑制级联” l9981 nm-23-H1 基因 Β-CATENIN WNT信号通路
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nm23-H1基因调控人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的PKA活性和体外增殖侵袭力的实验研究
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作者 李定彪 周清华 +4 位作者 王艳萍 刘伦旭 洪志鹏 尹小川 杨鸿生 《云南医药》 CAS 2006年第4期316-321,共6页
目的探讨nm23-H1基因转染对人高转移大细胞肺癌L9981细胞株PKA活性变化和细胞增殖和体外侵袭力影响。方法应用放免法检测人高转移大细胞肺癌原代细胞株L9981,转基因细胞株L9981-nm23-H1和空载体转染细胞株L9981-pLXSN的PKA的活性,应用MT... 目的探讨nm23-H1基因转染对人高转移大细胞肺癌L9981细胞株PKA活性变化和细胞增殖和体外侵袭力影响。方法应用放免法检测人高转移大细胞肺癌原代细胞株L9981,转基因细胞株L9981-nm23-H1和空载体转染细胞株L9981-pLXSN的PKA的活性,应用MTT法检测L9981,L9981-nm23-H1和L9981-pLXSN细胞株的体外增殖,改良的Boyden小实法检测L9981,L9981-pLXSN,L9981-nm23-H1这3个细胞株细胞体外侵袭力。结果(1)原代细胞株L9981的PKA活性为0.408±0.048(pmol/min/μg),空载体转染细胞株L9981-pLXSN的PKA活性为0.476±0.05(7pmolmin/μg),转基因细胞株L9981-nm23-H1的PKA活性为1.939±0.06(2pmol/min/μg),经F检验,在3种细胞株中PKA活性有显著性差异(P<0.001)两两比较,L9981-nm23-H1的PKA的活性明显高于L9981和L9981-pLXSN细胞株(P<0.001),而L9981和L9981-pLXSN细胞株之间所显示PKA的活性并无统计学差异(P>0.05);(2)L9981细胞株的OD值为1.532±0.893,L9981-pXSN细胞株的OD值为1.435±0.542,L9981-nm23-H1细胞株的OD值为0.456±0.081,经F检验,L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1增殖力有非常显著性差异(P<0.001),两两比较,L9981-nm23-H1细胞增殖力显著低于L9981和L9981-pLXSN细胞株(P<0.001),而L9981和L9981-pLXSN细胞株之间比较无显著性差异(P=0.121<0.05);(3)L9981细胞株穿越ECM胶的细胞数为151.75±3.304,L9981-pLXSN细胞株穿越ECM胶的细胞数为158.75±2.986,L9981-nm23-H1细胞株穿越ECM胶的细胞数为43.5±2.082,经F检验3个细胞株间的体外侵袭力有显著性差异,两两比较,L9981-nm23-H1细胞株体外侵袭力明显低于L9981和L9981-pLXSN细胞株(P<0.001),而L9981和L9981-pLXSN细胞株间比较无显著性差异(P=0.271<0.05)。结论nm23-H1基因可以显著抑制人高转移大细胞肺癌的体外增殖力和侵袭力,显著上调人高转移大细胞肺癌细胞株的PKA活性信号。 展开更多
关键词 NM23-H1 PKA l9981 肿瘤转移抑制基因
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人大细胞肺癌细胞系NL9980和L9981的建立及其生物学特性研究 被引量:27
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作者 周清华 王艳萍 +4 位作者 车国卫 朱文 陈晓禾 陈晓峰 孙芝琳 《中国肺癌杂志》 CAS 2003年第6期464-468,共5页
目的 探讨从人大细胞肺癌细胞株WCQH 980 1分离构建不同转移潜能肺癌细胞株的可能性 ,并鉴定其生物学和分子生物学差异。方法 应用单个细胞克隆技术分离建立不同肺癌细胞亚系NL9980和L9981;应用Southernblot、RT PCR、Westernblot检测... 目的 探讨从人大细胞肺癌细胞株WCQH 980 1分离构建不同转移潜能肺癌细胞株的可能性 ,并鉴定其生物学和分子生物学差异。方法 应用单个细胞克隆技术分离建立不同肺癌细胞亚系NL9980和L9981;应用Southernblot、RT PCR、Westernblot检测NL9980和L9981细胞株中nm 2 3 H1基因多态性、mR NA和蛋白转录表达水平 ;应用MTT法、平板法、Boyden小室法、染色体分型法以及动物实验检测NL9980和L9981细胞株的体内体外生物学特征。结果 ①成功分离建立具有不同转移能力的人大细胞肺癌细胞系NL9980和L9981;②L9981细胞系存在nm 2 3 H1等位基因杂合性缺失、mRNA和蛋白表达缺失 ,而NL9980细胞株nm2 3 H1等位基因结构和转录表达均正常 ;③L9981细胞株的体外增殖能力、克隆形成率和体外侵袭力均显著高于NL9980细胞株 ;④L9981细胞株在裸鼠体内的成瘤性和肺部转移率均显著高于NL9980 ;⑤NL9980和L9981染色体众数比较无显著性差异。结论 ①NL9980和L9981细胞株具有不同的生物学和分子生物学特征 ;②L9981细胞株的高侵袭和高转移潜能可能与nm 2 3 H1等位基因缺失有关。 展开更多
关键词 大细胞肺癌 细胞系 生物学 基因 染色体 肿瘤
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Alterations and Its Mechanisms of Wnt Signal Pathway in Human High-matastatatic Large Cell Lung Cancer Cell Line L9981 by Transfecting with Nm23-H1 Gene 被引量:1
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作者 Junke FU Zhe WANG +7 位作者 Sen WEI Gang CHEN Zhigang LI Jun CHEN Hongyu LIU Zhihao WU Ke XU Qinghua ZHOU 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期477-479,共3页
Backgroud and Objective Tumor metastasis is not only the malignant marker and characteristics of lung cancer, but also the main cause of failure to cure and lose their life of the
关键词 肺癌 扩散 临床 化疗
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Alterations in the Cytoskeleton and Biological Behavior in Human Lung Cancer Cell Line L9981 by Nm23-H1 gene Transfection
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作者 Zhe WANG Junke FU +4 位作者 Zhihao WU Hongyu LIU Jun CHEN Liya SUN Q inghua ZHOU 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期475-476,共2页
Objective and Methods The key cause of failure to cure and high mortality in lung cancer. At present, it has been known
关键词 肺癌 治疗 诊断 疗效
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Noninvasive Assessment of Using Bioluminescent Imaging(BLI) to Research Methylseleninic Acid' Effect on the Growth And Spontaneous Metastasis in Human High-Metastatic Large Cell Lung Cancer Cell Line L9981
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作者 Yuanrong REN Yu FAN Li MA Jun CHEN Seng WEI Zhigang LI Hongyu LIU Haisu WAN Zhihao WU Qinghua ZHOU 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期505-506,共2页
Background and Objective The disease incidence and mortality of lung cancer has been increased dramatically for recent 50 years in many countries in the world. In2002, the new cases
关键词 肺癌 医学 化疗 疗效
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Effects of Methylseleninic Acid on the Proliferation and Cell Cycle in Human High Metastatic Large Cell Lung Cancer Cell Line L9981 and Its Molecular Mechanism
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作者 Xiaorong ZHONG Yu FAN Li MA Jun CHEN Sen WEI Zhigang LI Hongyu LIU Haisu WAN Zhihao WU Qinghua ZHOU 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期498-499,共2页
Background and Objective Lung cancer is the rst killer of human being in the whole world. Recently, although many treatment strategies have been developed, the anti-cancer effects
关键词 肺癌 临床 治疗 疗效
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The Regulating Mechanism of Nm23-H1 Gene for FAK Signal Pathway in Human Lung Cancer Cell Line L9981
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作者 Dejun KONG Zhilin SUN +10 位作者 Yang QIN Wen ZHU Li REN Jun CHEN Sen WEI Zhigang LI Hongyu LIU Haisu WAN Zhi-hao WU Ke XU Qinghua ZHOU 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期489-490,共2页
Background and objective Lung Cancer is one of the most malignant cancers threatening people’s health and life and one of the most rapid increasing cancers both in morbidity
关键词 肺癌 癌细胞 扩散 治疗
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Methylseleninic Acid on The Apoptosis Induction and Invasion Inhibition in Human High-Meta-static Large Cell Lung Cancer Cell Line L9981
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作者 Jiewei LIU Yu FAN Li MA Jun CHEN Sen WEI Zhigang LI Hongyu LIU Haisu WAN Zhihao WU Qinghua ZHOU 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期501-502,共2页
Background and Objective Lung cancer, which has been proved to have fastest increasing rate of morbidity and mortality, appears to be one of the most dangerous malignant tumor that
关键词 肺癌 癌细胞 扩散 化疗
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The Inhibiting Effects and It's Molecular Mecanisms of the Fungi of Huai Er's on Human Large Cell Lung Cancer Cell Line L9981
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作者 Yu FAN Zhilin SUN +10 位作者 Yang QIN Wen ZHU Li REN Jun CHEN Sen WEI Zhigang LI Hongyu LIU Haisu WAN Zhihao WU Ke XU Qinghua ZHOU 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期492-493,共2页
Background and Objective Lung cancer, which threatens human’s health and life, is the malignant tumor with the most rapid increase of morbidity. Although recent years the basic
关键词 肺癌 治疗 疗效 临床
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Transfection of Nm23-H1 Gene Inhibited the Metastatic Potential of Human High-metastatic Large Cell Lung Cancer L9981
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作者 Haixia ZHENG Zhilin SUN +10 位作者 Yang QIN Wen ZHU Li REN Jun CHEN Sen WEI Zhigang LI Hongyu LIU Haisu WAN Zhihao WU Ke XU Qinghua ZHOU 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期490-492,共3页
Background and objective Invasion and metastasis is not only the malignant phenotypes of lung cancer but also the main cause of death. Elucidating the molecular mechanism of
关键词 NM23-H1 肺癌 临床 治疗
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