为了探究鸡肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样1(TNF alpha induced protein 8 like 1,TNFAIP8L1)基因序列特征,以及叶酸(FA)和甲氨蝶呤(MTX)对TNFAIP8L1基因在鸡胚肝脏组织不同发育阶段表达的影响,试验将孵化至第7天的240枚琅琊鸡种蛋分为生理...为了探究鸡肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样1(TNF alpha induced protein 8 like 1,TNFAIP8L1)基因序列特征,以及叶酸(FA)和甲氨蝶呤(MTX)对TNFAIP8L1基因在鸡胚肝脏组织不同发育阶段表达的影响,试验将孵化至第7天的240枚琅琊鸡种蛋分为生理盐水组(注射0.1 mL生理盐水)、FA组[注射0.1 mL FA溶液(90μg FA溶于0.1 mL生理盐水中)]、MTX组[注射0.1 mL MTX溶液(5μg MTX溶于0.1 mL生理盐水中)]、FA和MTX组[注射0.1 mL FA+MTX混合液(90μg FA+5μg MTX溶于0.1 mL生理盐水中)],每组4个重复,每个重复15枚,利用PCR技术克隆鸡TNFAIP8L1基因开放阅读框(ORF),并对其进行生物信息学分析,同时利用荧光定量PCR方法分析FA和MTX对TNFAIP8L1基因在鸡胚孵化至第10天(10E)、第13天(13E)、第16天(16E)、第19天(19E)和出壳第1天(1D)肝脏中的表达差异。结果表明:克隆获得琅琊鸡TNFAIP8L1基因序列长726 bp,其中ORF区序列长561 bp,编码186个氨基酸。氨基酸多序列比对显示琅琊鸡与绿头鸭的氨基酸序列一致性最高(为97.85%),与马的一致性最低(为64.52%)。鸡TNFAIP8L1蛋白是一种亲水稳定蛋白;二级结构预测以α-螺旋(为72.04%)和无规则卷曲(为23.66%)为主要结构,三级结构与5jxd.1模板相似,其序列同源性为62.37%。10E和16E时,FA组和MTX组TNFAIP8L1基因相对表达量均显著低于生理盐水组(P<0.05);19E和1D时,FA组和MTX组TNFAIP8L1基因相对表达量与生理盐水组差异不显著(P>0.05)。说明在鸡胚发育前期FA和MTX可能对TNFAIP8L1基因表达有抑制作用。展开更多
文摘为了探究鸡肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样1(TNF alpha induced protein 8 like 1,TNFAIP8L1)基因序列特征,以及叶酸(FA)和甲氨蝶呤(MTX)对TNFAIP8L1基因在鸡胚肝脏组织不同发育阶段表达的影响,试验将孵化至第7天的240枚琅琊鸡种蛋分为生理盐水组(注射0.1 mL生理盐水)、FA组[注射0.1 mL FA溶液(90μg FA溶于0.1 mL生理盐水中)]、MTX组[注射0.1 mL MTX溶液(5μg MTX溶于0.1 mL生理盐水中)]、FA和MTX组[注射0.1 mL FA+MTX混合液(90μg FA+5μg MTX溶于0.1 mL生理盐水中)],每组4个重复,每个重复15枚,利用PCR技术克隆鸡TNFAIP8L1基因开放阅读框(ORF),并对其进行生物信息学分析,同时利用荧光定量PCR方法分析FA和MTX对TNFAIP8L1基因在鸡胚孵化至第10天(10E)、第13天(13E)、第16天(16E)、第19天(19E)和出壳第1天(1D)肝脏中的表达差异。结果表明:克隆获得琅琊鸡TNFAIP8L1基因序列长726 bp,其中ORF区序列长561 bp,编码186个氨基酸。氨基酸多序列比对显示琅琊鸡与绿头鸭的氨基酸序列一致性最高(为97.85%),与马的一致性最低(为64.52%)。鸡TNFAIP8L1蛋白是一种亲水稳定蛋白;二级结构预测以α-螺旋(为72.04%)和无规则卷曲(为23.66%)为主要结构,三级结构与5jxd.1模板相似,其序列同源性为62.37%。10E和16E时,FA组和MTX组TNFAIP8L1基因相对表达量均显著低于生理盐水组(P<0.05);19E和1D时,FA组和MTX组TNFAIP8L1基因相对表达量与生理盐水组差异不显著(P>0.05)。说明在鸡胚发育前期FA和MTX可能对TNFAIP8L1基因表达有抑制作用。
