【目的】探究丝裂原活化蛋白激酶激酶6(mitogen-activated protein kinase kinase6,MAP2K6)基因在湖羊不同发育阶段背最长肌组织中的表达水平,分析该基因的多态性与湖羊生长性状之间的相关性,以期为湖羊的生长性状分子育种提供新的标记...【目的】探究丝裂原活化蛋白激酶激酶6(mitogen-activated protein kinase kinase6,MAP2K6)基因在湖羊不同发育阶段背最长肌组织中的表达水平,分析该基因的多态性与湖羊生长性状之间的相关性,以期为湖羊的生长性状分子育种提供新的标记资源。【方法】利用实时荧光定量PCR检测MAP2K6基因在湖羊(n=15)不同发育阶段背最长肌组织中的表达情况;通过Illumina OvineSNP 50K BeadChip检测湖羊(n=3024)MAP2K6基因的单核苷酸多态性(SNP),利用一般线性模型分析MAP2K6基因SNP位点与湖羊(n=1974)生长性状间的关联性,并使用R语言corrplot包计算湖羊体重与各体尺指标的相关系数。【结果】实时荧光定量PCR检测结果显示,湖羊背最长肌组织中MAP2K6基因表达量在初生到4月龄阶段逐渐升高,且3、4月龄的表达量均极显著高于初生、45日龄和6月龄(P<0.01)。湖羊MAP2K6基因中共检测到2个位点:rs414959578G>A和rs426057803A>G。关联分析结果显示,MAP2K6基因rs414959578G>A位点对湖羊5月龄体重、体高、体斜长、胸围、胸深、胸宽、十字部高、腰角宽,以及6月龄胸围、背膘厚有显著或极显著影响(P<0.05;P<0.01);rs426057803A>G位点对湖羊3月龄管围,5月龄胸围、管围和十字部高以及6月龄背膘厚有显著或极显著影响(P<0.05;P<0.01)。相关性分析结果显示,湖羊体重与体尺指标间存在显著正相关(P<0.05),但6月龄湖羊体斜长与6月龄胸宽、腰角宽,5月龄管围与6月龄腰角宽均不存在显著相关(P>0.05)。【结论】MAP2K6基因与湖羊背最长肌的发育相关,rs414959578G>A和rs426057803A>G位点对湖羊生长性状有显著影响。研究结果可为湖羊生长性状分子标记的挖掘和利用提供一定的理论依据。展开更多
目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼map3k15敲除纯合品系,为进一步研究map3k15在肾脏疾病方面的作用提供动物模型。方法1)分析map3k15在斑马鱼中的表达模式;2)利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼map3k15敲除纯合品系;3)观察...目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼map3k15敲除纯合品系,为进一步研究map3k15在肾脏疾病方面的作用提供动物模型。方法1)分析map3k15在斑马鱼中的表达模式;2)利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼map3k15敲除纯合品系;3)观察map3k15缺失对斑马鱼表型的影响。结果1)map3k15在斑马鱼前肾中表达,且MAP3K15/Map3k15蛋白在多物种间具有高度保守性;2)成功构建了斑马鱼map3k15-/-突变体,并保留+2 bp及+1 bp 2种突变品系;3)map3k15突变斑马鱼在胚胎发育过程中出现卵黄囊、心包及头部的水肿,且随发育时间延长,症状逐渐加重。结论成功构建了map3k15敲除的纯合斑马鱼品系,为未来研究map3k15在肾脏发育及疾病中的作用提供了重要的模型。展开更多
文摘目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼map3k15敲除纯合品系,为进一步研究map3k15在肾脏疾病方面的作用提供动物模型。方法1)分析map3k15在斑马鱼中的表达模式;2)利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼map3k15敲除纯合品系;3)观察map3k15缺失对斑马鱼表型的影响。结果1)map3k15在斑马鱼前肾中表达,且MAP3K15/Map3k15蛋白在多物种间具有高度保守性;2)成功构建了斑马鱼map3k15-/-突变体,并保留+2 bp及+1 bp 2种突变品系;3)map3k15突变斑马鱼在胚胎发育过程中出现卵黄囊、心包及头部的水肿,且随发育时间延长,症状逐渐加重。结论成功构建了map3k15敲除的纯合斑马鱼品系,为未来研究map3k15在肾脏发育及疾病中的作用提供了重要的模型。
