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海洋深层水与褐藻糖胶联合用药对IR-HepG2细胞氧化应激水平的影响 被引量:4
1
作者 何珊 彭维兵 周洪雷 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2018年第3期32-40,共9页
目的探讨海洋深层水(deep-sea water,DSW)与褐藻糖胶(fucoidan,FPS)联合用药对胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)HepG2细胞内氧化应激水平的影响。方法制备FPS和硬度为1 000的DSW,并对其理化性质进行分析。采用MTT法检测DSW与FPS联合... 目的探讨海洋深层水(deep-sea water,DSW)与褐藻糖胶(fucoidan,FPS)联合用药对胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)HepG2细胞内氧化应激水平的影响。方法制备FPS和硬度为1 000的DSW,并对其理化性质进行分析。采用MTT法检测DSW与FPS联合用药对HepG2细胞增殖的影响,确定与DSW联合用药的FPS浓度。高浓度葡萄糖(30mmol·L^(-1))诱导建立IR-HepG2细胞模型,同时给予DSW与不同浓度FPS的联合用药,药物孵育24h后,测定肝糖输出量和糖原含量,并以二者为指标确定DSW与FPS的最佳联用剂量;然后对胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)进行测定,并采用Western blot对C-Jun氨基端激酶(c-jun NH2-terminal kinase,JNK)蛋白的表达及磷酸化程度进行检测,观察DSW与FPS对IR-HepG2氧化应激的影响。结果 DSW与50mg·L^(-1)以内的FPS联合用药不会对细胞增殖产生影响,可以剂量依赖性地降低肝糖输出量,提高糖原水平,其中以DSW与50mg·L^(-1) FPS的联用效果最好,而且其联用效果显著优于单用同剂量的DSW或FPS;DSW与50mg·L^(-1) FPS联用可以显著降低MDA和ROS的水平,提高GSH-Px和SOD的活性,并显著降低JNK的磷酸化程度。结论 DSW与FPS联合用药可降低IR-HepG2细胞内的氧化应激水平,其最佳联用剂量为50mg·L^(-1),其保护作用可能与激活抗氧化酶、抑制脂质过氧化反应及抑制JNK通路有关。 展开更多
关键词 海洋深层水 褐藻糖胶 ir-hepg2 氧化应激 JNK通路
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黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的制备及对胰岛素抵抗HepG2细胞糖脂代谢的影响
2
作者 欧沛思 古洺赫 +1 位作者 林爱华 刘奕明 《南京中医药大学学报》 北大核心 2025年第7期926-935,共10页
目的建立黄柏碱(PHE)代谢产物黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(M1)的制备方法,探讨M1调节胰岛素抵抗(IR)-HepG2细胞糖脂代谢紊乱的作用及机制。方法利用肠微粒体体外孵育法结合高效液相、质谱、核磁共振(NMR)等技术完成对M1的制备、提取... 目的建立黄柏碱(PHE)代谢产物黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(M1)的制备方法,探讨M1调节胰岛素抵抗(IR)-HepG2细胞糖脂代谢紊乱的作用及机制。方法利用肠微粒体体外孵育法结合高效液相、质谱、核磁共振(NMR)等技术完成对M1的制备、提取、分离纯化及鉴定。以二甲双胍为阳性对照,考察M1低(25μmol·L^(-1))、中(50μmol·L^(-1))、高(100μmol·L^(-1))剂量给药IR-HepG2细胞24 h对其葡萄糖消耗量、糖吸收、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响。通过分子对接技术探讨M1与IRS1/PI3K/AKT通路各关键因子胰岛素表面受体(INSR)、胰岛素受体底物1(IRS1)、PI3K、AKT2的结合能力。采用qPCR法及Western blot法分别检测M1对IRS1/PI3K/AKT通路各关键因子mRNA及蛋白表达的影响。结果经NMR确认分离纯化所得产物为黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(纯度为95%)。与模型组相比,M1在各给药浓度均可显著提高IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量(P<0.01,P<0.001)及糖吸收水平(P<0.001),且作用比PHE更强(P<0.001);在中、高给药浓度可显著降低细胞TG及TC含量(P<0.001),其中在TG水平上其改善作用优于PHE(P<0.01);在各浓度均明显降低LDL-C含量(P<0.001),提高HDL-C含量(P<0.01,P<0.001)。分子对接结果显示M1与通路关键因子INSR、IRS1、PI3K、AKT2具有良好结合活性。与模型组相比,M1给药组不同程度提高INSR、IRS1、PI3K、AKT2、GLUT2 mRNA的表达,并且下调p-IRS1/IRS1蛋白表达(P<0.001),上调PI3K、p-AKT/AKT、p-GSK3β/GSK3β蛋白表达(P<0.05,P<0.001)。结论建立的方法可用于制备高纯度M1,M1通过调控IRS1/PI3K/AKT信号通路改善糖脂代谢紊乱,从而缓解IR。 展开更多
关键词 黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷 制备方法 ir-hepg2细胞 糖脂代谢 IRS1/PI3K/AKT信号通路 分子对接
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桑叶生物碱、黄酮及多糖对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用 被引量:14
3
作者 何羡霞 常化静 +1 位作者 海洋 吴新荣 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期192-195,共4页
目的:探讨桑叶生物碱、黄酮及多糖对Hep G2细胞胰岛素抵抗的改善及其作用机制。方法:采用高糖高胰岛素培养基诱导Hep G2细胞形成红外(IR)模型,葡萄糖氧化酶法检测正常组、模型组、罗格列酮组、生物碱组、黄酮组及多糖组的细胞葡萄糖消... 目的:探讨桑叶生物碱、黄酮及多糖对Hep G2细胞胰岛素抵抗的改善及其作用机制。方法:采用高糖高胰岛素培养基诱导Hep G2细胞形成红外(IR)模型,葡萄糖氧化酶法检测正常组、模型组、罗格列酮组、生物碱组、黄酮组及多糖组的细胞葡萄糖消耗情况,并用RT-q PCR法检测C-Jun氨基端激酶(JNK)通路相关基因的表达,观察桑叶生物碱、黄酮及多糖改善Hep G2细胞胰岛素抵抗及其作用机制。结果:高糖及高胰岛素培养基培养Hep G2细胞,使细胞葡萄糖消耗率明显下降,造成胰岛素抵抗的细胞模型,给予桑叶生物碱、黄酮及多糖干预之后,细胞葡萄糖消耗率明显上升,同时下调JNK和上调IRS-1,AKT mRNA的表达。结论:桑叶生物碱、黄酮及多糖均可增加Hep G2细胞的葡萄糖消耗量,其改善胰岛素抵抗作用可能与调节JNK信号通路有关。 展开更多
关键词 桑叶有效部位 ir-hepg2细胞 C-Jun氨基端激酶通路
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红景天苷改善胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢及分子机制初探 被引量:14
4
作者 张晓英 王鹏翔 +1 位作者 张致英 贺学 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期28-31,共4页
目的:研究红景天苷对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢的影响以其可能的分子机制。方法:采用1×10-6mol/L高浓度胰岛素诱导HepG2细胞产生胰岛素抵抗模型,葡萄糖氧化酶法和蒽酮法分别检测红景天苷对模型细胞葡萄糖利用、糖原合成的影响,RT-... 目的:研究红景天苷对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢的影响以其可能的分子机制。方法:采用1×10-6mol/L高浓度胰岛素诱导HepG2细胞产生胰岛素抵抗模型,葡萄糖氧化酶法和蒽酮法分别检测红景天苷对模型细胞葡萄糖利用、糖原合成的影响,RT-PCR法检测胰岛素抵抗相关基因IRS-2、GLUT-2、PPAR-γmRNA的表达。结果:与模型组相比,浓度为1×10-6mol/L的红景天苷可促进胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖的利用和糖原合成,IRS-2 mRNA表达明显升高,GLUT-2 mRNA显著降低,PPAR-γmRNA表达没有显著改变。结论:红景天苷可以改善胰岛素抵抗细胞糖代谢,其机制可能与升高IRS-2,降低GLUT-2 mRNA有关。 展开更多
关键词 红景天苷 HEPG2 胰岛素抵抗 糖代谢 IRS-2
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HepG2细胞胰岛素抵抗模型的建立与鉴定 被引量:30
5
作者 李秀丽 贺嵩敏 +4 位作者 朱莹 冯兵 黄小千 陈婷 郑广娟 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第5期203-207,共5页
目的:采用胰岛素体外诱导法建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型,为研究胰岛素抵抗及2型糖尿病提供一种可靠的体外胰岛素抵抗模型。方法:采用含不同胰岛素浓度的RPMI 1640培养基作用于HepG2细胞,葡萄糖-己糖激酶法检测作用不同时间点培养基中... 目的:采用胰岛素体外诱导法建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型,为研究胰岛素抵抗及2型糖尿病提供一种可靠的体外胰岛素抵抗模型。方法:采用含不同胰岛素浓度的RPMI 1640培养基作用于HepG2细胞,葡萄糖-己糖激酶法检测作用不同时间点培养基中葡萄糖含量,MTT法检测各胰岛素浓度对HepG2细胞存活率的影响,确定胰岛素抵抗最佳作用浓度及时间;并以油红O染色观察细胞形态的变化;Real-time PCR法检测IRS-2 mRNA的表达,酶联免疫法检测葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的表达。结果:细胞产生胰岛素抵抗的最佳作用时间为36 h,最佳胰岛素浓度为1×10-8mol.L-1。建立模型后鉴定,模型细胞与正常细胞相比脂滴明显增多;IRS-2 mRNA的表达较正常细胞明显降低(P<0.05),G-6-Pase的表达较正常细胞明显升高(P<0.05)。结论:采用胰岛素体外诱导的方法,在胰岛素浓度为1×10-8mol.L-1,作用36 h后,可建立稳定的HepG2细胞胰岛素抵抗模型。 展开更多
关键词 HEPG2细胞 胰岛素抵抗模型 胰岛素受体底物-2 葡萄糖-6-磷酸酶
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青钱柳改善HepG2细胞胰岛素抵抗作用的研究 被引量:9
6
作者 潘慧敏 许利嘉 +2 位作者 彭勇 何春年 肖培根 《世界临床药物》 CAS 2015年第7期447-451,共5页
目的研究青钱柳不同溶剂萃取物对高糖诱导IR-Hep G2模型改善胰岛素抵抗(IR)的活性。方法以高糖诱导Hep G2细胞建立IR模型,通过检测青钱柳不同溶剂萃取物对细胞增殖和糖消耗的影响从而评价青钱柳对细胞IR的改善作用。结果青钱柳总提物(TE... 目的研究青钱柳不同溶剂萃取物对高糖诱导IR-Hep G2模型改善胰岛素抵抗(IR)的活性。方法以高糖诱导Hep G2细胞建立IR模型,通过检测青钱柳不同溶剂萃取物对细胞增殖和糖消耗的影响从而评价青钱柳对细胞IR的改善作用。结果青钱柳总提物(TE)、石油醚萃取物(PE)及氯仿萃取物(TCM)对受试细胞增殖有显著影响,乙酸乙酯萃取物(ETAC)、正丁醇萃取物(NBA)及水提物(W)在有效浓度范围内,对细胞增殖无显著影响;TCM(12.5、25和50μg/ml)、NBA高浓度组(50μg/ml)及W(6.25、12.5、25和50μg/ml)对Hep G2细胞的糖消耗有显著影响;TE(6.25、12.5、25和50μg/ml)、PE(12.5、25和50μg/ml)、ETAC(6.25、12.5和25μg/ml)、NBA(50μg/ml)及W(50μg/ml)能显著增加IR-Hep G2细胞糖消耗。结论青钱柳不同溶剂萃取物中,除TCM外,其他均能不同程度地增加IR-Hep G2细胞糖消耗,改善Hep G2细胞的IR。 展开更多
关键词 青钱柳 HEPG2 细胞 胰岛素抵抗(IR) 葡萄糖消耗
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苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮改善HepG2/IR的联合作用研究 被引量:3
7
作者 冯超 尤玲玲 +2 位作者 何庆锋 肖萍 刘金福 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2015年第9期8-12,共5页
探讨苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮单一组分及联合使用对胰岛素抵抗的改善作用。建立胰岛素抵抗人肝癌细胞模型,设立正常组、胰岛素抵抗组、盐酸吡格列酮阳性对照组、苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮单独干预组,苦瓜皂苷和南瓜多糖、苦瓜... 探讨苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮单一组分及联合使用对胰岛素抵抗的改善作用。建立胰岛素抵抗人肝癌细胞模型,设立正常组、胰岛素抵抗组、盐酸吡格列酮阳性对照组、苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮单独干预组,苦瓜皂苷和南瓜多糖、苦瓜皂苷和苦荞黄酮、南瓜多糖和苦荞黄酮联合干预组,测定葡萄糖消耗量、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、谷草转氨酶和谷丙转氨酶的含量,MTT法评价细胞活性,蛋白免疫印迹法检测细胞葡萄糖转运体4的表达。结果表明,多数生理生化指标、细胞活性和GLUT4的表达联合组与单一组分相比有显著性差异(P<0.05);采用析因分析,苦瓜皂苷、南瓜多糖和苦荞黄酮联合在改善葡萄糖消耗量和谷丙转氨酶上具有交互协同作用(P<0.05)。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 苦瓜皂苷 南瓜多糖 苦荞黄酮 HepG2/IR模型 联合作用 析因分析
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S-Equol对高糖培养HepG2细胞胰岛素敏感性及IRS-1表达的影响 被引量:1
8
作者 刘凯 陈卡 +4 位作者 周蕊 卢宗亮 易龙 张婷 糜漫天 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第7期1210-1213,共4页
目的:研究S型雌马酚(S-Equol,S-Eq)对高糖培养HepG2人肝癌细胞株胰岛素敏感性和胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS)-1表达的影响并探讨其可能的分子机制。方法:高糖培养HepG2细胞,1、10、100μM S-Eq处理细胞后,MTT法检测... 目的:研究S型雌马酚(S-Equol,S-Eq)对高糖培养HepG2人肝癌细胞株胰岛素敏感性和胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS)-1表达的影响并探讨其可能的分子机制。方法:高糖培养HepG2细胞,1、10、100μM S-Eq处理细胞后,MTT法检测细胞活力,硫酸蒽酮比色法检测胰岛素刺激细胞糖原合成量,Realtime PCR和Western blot法分别检测IRS-1 mRNA及蛋白表达变化。结果:S-Eq对HepG2细胞活力无明显影响,但显著改善高糖培养条件下HepG2细胞胰岛素敏感性,其中10μM S-Eq+H组胰岛素刺激后细胞糖原合成量上升最为显著(P<0.01),同时发现,S-Eq能显著上调IRS-1 mRNA和蛋白表达量。结论:S-Eq可能通过调控IRS-1的表达,增强高糖培养HepG2细胞胰岛素敏感性,这可能是S-Eq发挥其抗糖尿病作用的重要理论依据。 展开更多
关键词 S型雌马酚 HEPG2细胞 胰岛素敏感性 IRS-1
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盐酸小檗碱对胰岛素抵抗HepG2细胞α7烟碱型乙酰胆碱受体及相关因子影响的研究 被引量:5
9
作者 李芬 邹欣 +2 位作者 龚菂 王定坤 王开富 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期440-444,共5页
目的探讨盐酸小檗碱作用α7烟碱型乙酰胆碱受体(nAchR)与改善氓的分子机制。方法建立IR HepG2细胞模型,用盐酸小檗碱(BBR)、烟碱(NIC)干预,并设正常对照(NC)组和模型组。用现代分子生物学检测细胞培养液葡萄糖消耗量、乙酰胆碱酯酶(AchE... 目的探讨盐酸小檗碱作用α7烟碱型乙酰胆碱受体(nAchR)与改善氓的分子机制。方法建立IR HepG2细胞模型,用盐酸小檗碱(BBR)、烟碱(NIC)干预,并设正常对照(NC)组和模型组。用现代分子生物学检测细胞培养液葡萄糖消耗量、乙酰胆碱酯酶(AchE)、乙酰胆碱(Ach)、白介素-6(Ⅱ-6)、核因子-κB(NF-κB p65)、IκB激酶βSer181(ⅡKKβSer181)、α7nAchR、磷酸肌醇3激酶(PI3K)、葡萄糖转运因子4(GluT4)等相关指标,用荧光标记方法检测细胞摄取葡萄糖的荧光强度。结果葡糖糖消耗量NC组、HepG2细胞模型组、BBR组和NIC组依次为(25.33±0.77)mmol/L、(11.95±1.94)mmol/L、(16.85±0.33)mmol/L和(16.27±1.09)mmol/L。细胞内2-NBDG(荧光标记葡萄糖)荧光强度增强,NC组、HepG2细胞模型组、BBR组和NIC组依次为(118.17±14.30)、(92.33±9.35)、(120.50±26.26)和(127.67±16.07)。BBR能抑制细胞AchE活性,抑制率为53%,NIC对AchE活性无影响。BBR和NIC能激活α7nAchR,抑制IKKβSer181和NF-κBp65的表达,降低炎性细胞因子IL-6,上调PI3K、GluT4,与HepG2细胞模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 BBR可能通过抑制AchE活性以激活α7nAchR,从而抑制IKKβSer181、NFκB p65和炎症因子IL-6的表达,促进PI3K、GluT4上调,发挥其改善IR、降低葡萄糖的作用。NIC虽不能抑制AchE活性,但它是特异性激动剂,可直接激活α7nAchR。 展开更多
关键词 盐酸小檗碱 Α7烟碱型乙酰胆碱受体 HEPG2细胞 胰岛素抵抗
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黄地安消胶囊调控IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路改善HepG2细胞胰岛素抵抗 被引量:2
10
作者 高家荣 郭明飞 +1 位作者 单莉 魏良兵 《包头医学院学报》 CAS 2021年第7期48-54,共7页
目的:观察黄地安消胶囊改善HepG2细胞胰岛素抵抗的分子生物学机制。方法:MTT实验分离出黄地安消胶囊含药血清最佳作用浓度和作用时间,免疫荧光技术检测p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β的表达情况;RT-PCR技术检测细胞中IRS-1、PI3K、Akt... 目的:观察黄地安消胶囊改善HepG2细胞胰岛素抵抗的分子生物学机制。方法:MTT实验分离出黄地安消胶囊含药血清最佳作用浓度和作用时间,免疫荧光技术检测p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β的表达情况;RT-PCR技术检测细胞中IRS-1、PI3K、Akt、GSK-3β的mRNA表达,Western blot技术检测细胞中p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β的相对表达。结果:与正常组相比,模型组中IRS-1、PI3K、Akt表达降低(P<0.05);GSK-3β表达升高(P<0.05);与模型组相比,黄地安消胶囊含药血清组IRS-1、PI3K、Akt升高(P<0.05),GSK-3β表达降低(P<0.05)。结论:黄地安消胶囊可能通过调控IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路调节蛋白活性,促进糖原合成,降低血糖,改善胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 黄地安消胶囊 胰岛素抵抗 HEPG2细胞 IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β
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大豆肽和豌豆肽对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢及其相关机制的研究 被引量:1
11
作者 刘婧 任玮 +5 位作者 程改平 李可 徐淼 闫九明 李明亮 秦修远 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期67-72,共6页
通过细胞实验探讨大豆肽与豌豆肽的复合物对II型糖尿病胰岛素抵抗作用,并初步探明其作用机制。采用1×10^(-6)mol/L的人胰岛素处理HepG2细胞24 h建立胰岛素抵抗模型;CCK-8法确定大豆肽及豌豆肽对HepG2细胞的安全剂量;检测不同复配... 通过细胞实验探讨大豆肽与豌豆肽的复合物对II型糖尿病胰岛素抵抗作用,并初步探明其作用机制。采用1×10^(-6)mol/L的人胰岛素处理HepG2细胞24 h建立胰岛素抵抗模型;CCK-8法确定大豆肽及豌豆肽对HepG2细胞的安全剂量;检测不同复配比例的大豆肽和豌豆肽实验组的葡萄糖消耗、葡萄糖吸收及细胞中的糖原含量反应糖代谢情况,通过Western Blot法检测各蛋白的表达。结果表明,与对照组相比,HepG2细胞置于含1×10^(-6)mol/L人胰岛素培养液孵育24 h,葡萄糖消耗量、葡萄糖吸收量、糖原含量都降低,表明建模成功。大豆肽及豌豆肽干预均能改善HepG2细胞的胰岛素抵抗状况,提高细胞对葡萄糖的吸收和消耗能力、糖原合成能力,并能够提高葡萄糖转运蛋白GLUT2、GLUT4的表达量及胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的磷酸化水平,其中质量浓度为200μg/mL、比例为2∶1的大豆肽和豌豆肽效果最好。大豆肽与豌豆肽以2∶1的质量比进行复配可以有效改善HepG2细胞的胰岛素抵抗状况,可能与肽提高细胞中GLUT2和GLUT4的表达量,以及提高IRS-1和Akt蛋白的磷酸化水平有关。 展开更多
关键词 大豆肽 豌豆肽 胰岛素抵抗 HepG2细胞 糖代谢 IRS-1 Akt
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肌肉肌醇对HepG2胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗量影响的细胞实验研究(英文) 被引量:2
12
作者 高丽鹤 宋扬 +2 位作者 刘翠萍 付敏 王鹏 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第12期2245-2248,共4页
目的:研究肌肉肌醇(myo-inositol,MI)对胰岛素抵抗细胞(IR-HepG2)细胞外葡萄糖消耗量的影响。方法:采用CCK-8法观察MI、高糖对HepG2细胞活力的影响,通过高糖持续作用,胰岛素刺激诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗细胞模型,葡萄糖氧化酶法(GOD... 目的:研究肌肉肌醇(myo-inositol,MI)对胰岛素抵抗细胞(IR-HepG2)细胞外葡萄糖消耗量的影响。方法:采用CCK-8法观察MI、高糖对HepG2细胞活力的影响,通过高糖持续作用,胰岛素刺激诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗细胞模型,葡萄糖氧化酶法(GOD-POD法)鉴定模型是否成立,并用GOD-POD法检测正常HepG2细胞和MI对HepG2胰岛素抵抗细胞葡萄糖消耗量的变化。结果:在对HepG2细胞活性没有影响的情况下,MI增加了胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗量。与模型对照组相比,葡萄糖氧化酶法结果显示,MI可显著增加胰岛素抵抗模型葡糖糖的消耗量(P<0.01)。结论:MI可明显增加IR-HepG2细胞模型葡萄糖的消耗量,对IR-HepG2细胞模型胰岛素抵抗有显著的改善作用。 展开更多
关键词 肌肉肌醇 胰岛素抵抗 HEPG2细胞 葡萄糖消耗量
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Novel Se-enrichedα-glucosidase inhibitory peptide derived from tuna dark meat:Preparation,identification and effects on IR-HepG2 cells
13
作者 Hui Yu Meiting Xian +5 位作者 Caiye Qu Pai Peng Edwine Yongo Zhiqiang Guo Zhixun Du Juan Xiao 《Food Bioscience》 2024年第4期2747-2757,共11页
Se-enriched peptides serve various physiological functions and are crucial sources of Se.This study found the Se content of yellowfin tuna dark meat was 18.34 mg/kg(dry weight),making it an ideal natural source of Se-... Se-enriched peptides serve various physiological functions and are crucial sources of Se.This study found the Se content of yellowfin tuna dark meat was 18.34 mg/kg(dry weight),making it an ideal natural source of Se-enriched peptides.We used five different enzymatic treatments to prepare Se-enriched protein hydrolysates from dark meat.Among them,the trypsin-generated protein hydrolysate showed the highestα-glucosidase inhibition activity.It was then fractionated by ultrafiltration followed by RP-HPLC,and the sequences of Se-enriched peptide obtained were identified from the most active fraction by LC-MS/MS.Subsequently,KPLSeCPK was screened by in silico analyses and validated by theα-glucosidase activity inhibition experiment(IC_(50)=0.828 mM).Molecular docking and inhibition kinetics assay further demonstrated the interaction between KPLSeCPK andα-glucosidase,suggesting its potential as a novel hyperglycemic inhibitor.Moreover,KPLSeCPK lessened IR and boosted antioxidant capability of IR-HepG2 cells.Thus,KPLSeCPK provides a valuable reference for efficiently utilizing natural organic Se. 展开更多
关键词 Tuna dark meat Se-enriched peptides α-glucosidase T2DM ir-hepg2 cells
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光甘草定通过调节ERK/IRS-1和PI3K/Akt信号通路改善HepG2细胞的胰岛素抵抗 被引量:15
14
作者 李德锋 樊金玲 +1 位作者 杜琳 任国艳 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第24期7751-7762,共12页
目的 探索光甘草定改善肝细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的作用和机制。方法 通过高胰岛素诱导人肝癌HepG2细胞建立IR模型,采用葡萄糖氧化酶法检测细胞的葡萄糖消耗量及生成;荧光标记法检测葡萄糖摄取量;蒽酮法检测糖原含量;EL... 目的 探索光甘草定改善肝细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的作用和机制。方法 通过高胰岛素诱导人肝癌HepG2细胞建立IR模型,采用葡萄糖氧化酶法检测细胞的葡萄糖消耗量及生成;荧光标记法检测葡萄糖摄取量;蒽酮法检测糖原含量;ELISA检测葡萄糖代谢关键酶的活性;Western blotting检测磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)、细胞外调节蛋白激酶/胰岛素受体底物-1(extracellular regulated protein kinase/insulin receptor substrate-1,ERK/IRS-1)信号通路相关蛋白以及葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4)的表达。采用分子对接技术研究光甘草定和ERK分子间的相互作用。结果 光甘草定显著增加IR-HepG2细胞的葡萄糖消耗和摄取(P<0.05);通过显著提高糖原合成酶(glycogen synthase,GS)、葡萄糖激酶(glucokinase,GCK)和丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)活性(P<0.05、0.01),促进IR-HepG2细胞的糖原合成和糖酵解;通过显著减弱磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)和葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G6Pase)的活性(P<0.05),抑制IR-HepG2细胞的糖异生。IR-HepG2细胞经光甘草定处理后,Akt、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)和叉头框蛋白O1(forkhead boxing protein O1,FOXO1)的磷酸化水平得到显著恢复(P<0.01),而这种作用被PI3K的抑制剂LY294002所逆转(P<0.01)。同时,光甘草定显著促进GLUT4向质膜的易位(P<0.01)。光甘草定显著降低IRHep G2细胞的ERK和IRS的磷酸化水平(P<0.01),还可作为ERK的I1/2型抑制剂。结论 光甘草定通过抑制ERK/IRS-1通路,激活PI3K/Akt信号通路,修复IR-HepG2细胞的糖代谢紊乱,缓解IR症状。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 ERK/IRS-1 PI3K/Akt 光甘草定 HEPG2细胞 糖代谢 葡萄糖摄取
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橄榄苦苷对胰岛素抵抗HepG2肝细胞胰岛素信号传导的影响 被引量:6
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作者 杨双 徐继璞 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第20期164-168,共5页
目的:观察橄榄苦苷(oleuropein,OL)对胰岛素抵抗HepG2肝细胞的胰岛素信号传导的影响。方法:常规复苏细胞,于10%FBS+1%青-链霉素的DMEM(1 g·L^(-1)葡萄糖)培养基中,37℃5%CO_2细胞培养箱中培养,常规细胞培养传至第3代待用... 目的:观察橄榄苦苷(oleuropein,OL)对胰岛素抵抗HepG2肝细胞的胰岛素信号传导的影响。方法:常规复苏细胞,于10%FBS+1%青-链霉素的DMEM(1 g·L^(-1)葡萄糖)培养基中,37℃5%CO_2细胞培养箱中培养,常规细胞培养传至第3代待用;利用1×10^(-6)mol·L^(-1)胰岛素溶液刺激HepG2肝细胞36 h后建立肝细胞胰岛素抵抗模型,分为模型组,OL组(50μmol·L^(-1)),另设正常HepG2肝细胞为正常组,每组设6个复孔;对数生长期细胞,饥饿培养24 h后,诱导建立胰岛素抵抗模型,进行药物干预36 h后,以细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测OL对细胞活性的影响;OL对胰岛素抵抗HepG2肝细胞干预后,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测肝细胞胰岛素受体(InsR),胰岛素受体底物-1(IRS-1),葡萄糖转运蛋白-2(GLUT-2)mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组胰岛素抵抗的HepG2肝细胞活性明显降低(P〈0.05),胰岛素信号分子InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白表达明显降低(P〈0.05,P〈0.01)。与模型组比较,OL干预后胰岛素抵抗的HepG2肝细胞活性显著升高(P〈0.01);胰岛素信号分子InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白表达明显升高(P〈0.05,P〈0.01)。结论:OL能够增加胰岛素抵抗肝细胞活性,上调肝细胞胰岛素信号通路中InsR,IRS-1,GLUT-2 mRNA和蛋白的表达,这可能是其改善胰岛素抵抗的机制之一。 展开更多
关键词 橄榄苦苷 2型糖尿病 胰岛素抵抗 HepG2肝细胞 胰岛素受体 胰岛素受体底物-1 葡萄糖转运蛋白-2
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小檗碱对体外HepG2细胞IR模型抗IR的效应及机制 被引量:7
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作者 张敬升 黄伟 谢鸣 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第21期138-143,共6页
目的:探讨小檗碱对HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)模型的改善作用及机制。方法:HepG2细胞采用高糖(25 mmol·L(-1))和高胰岛素(1×10(-6)mol·L(-1))联合诱导24 h,建立体外IR模型。模型培养液中分别加入1×10... 目的:探讨小檗碱对HepG2细胞胰岛素抵抗(IR)模型的改善作用及机制。方法:HepG2细胞采用高糖(25 mmol·L(-1))和高胰岛素(1×10(-6)mol·L(-1))联合诱导24 h,建立体外IR模型。模型培养液中分别加入1×10(-5),1×10(-6)mol·L(-1)小檗碱,设1×10-3mol·L(-1)二甲双胍作为阳性药,孵育24 h。葡萄糖氧化酶法检测培养液葡萄糖含量,计算细胞葡萄糖消耗量,细胞增殖活性检测(CCK-8)测定细胞增殖活性;生化法检测细胞丙酮酸激酶(PK)活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞葡萄糖激酶(GCK)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)的活性;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞胰岛素受体(InsR),磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K),丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(Akt)和GLUT2 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞胰岛素受体底物-1(IRS-1),磷酸化的磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(p-Akt)的表达水平。结果:与正常组比较,模型组细胞葡萄糖消耗量显著降低(P〈0.01),PK,GCK,GLUT2蛋白活性显著降低(P〈0.01),InsR,PI3K,Akt,GLUT2 mRNA表达水平显著降低(P〈0.01),IRS-1,p-PI3K,p-Akt蛋白表达水平显著降低(P〈0.01)。与模型组比较,小檗碱组和二甲双胍组的细胞葡萄糖消耗量明显增加(P〈0.01),PK,GCK,GLUT2蛋白活性显著升高(P〈0.01),InsR,PI3K,Akt,GLUT2 mRNA和IRS-1,p-PI3K,p-Akt1蛋白表达水平均明显升高(P〈0.05,P〈0.01)。结论:小檗碱体外对HepG2细胞IR模型有显著的改善作用,其机制可能通过调节IRS-1/PI3K/Akt信号通路促进肝脏葡萄糖转运和改善葡萄糖代谢。 展开更多
关键词 小檗碱 胰岛素抵抗 HEPG2细胞 胰岛素受体底物-1 (IRS-1)/磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B (Akt)/葡萄糖转运蛋白2 (GLUT2)通路
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Composition of four polyphenol fractions extracted from partridge tea and their mechanisms on ameliorate insulin resistance in HepG2 cells
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作者 Ke-Xin Hao Ying-Jing Zhang +6 位作者 Rui-Fang Zhong Yi-Meng Li Ling Wang Xiao Chang Da-Wei Wang Jian-Guo Jiang Wei Zhu 《Food Bioscience》 2024年第6期4888-4898,共11页
Partridge tea is a plant used as a speciality tea drink in Hainan Province,China.The aim of this study was to isolate polyphenols from partridge tea,investigate their main constituent compositions and ameliorative eff... Partridge tea is a plant used as a speciality tea drink in Hainan Province,China.The aim of this study was to isolate polyphenols from partridge tea,investigate their main constituent compositions and ameliorative effects on insulin resistance in insulin resistant HepG2(IR-HepG2)cells.PTP was obtained from partridge tea,then PTP-1,PTP-2 and PTP-3 were obtained after further purification.The polyphenol contents of PTP,PTP-1,PTP-2,PTP-3 were determined to be 15.9%,51.4%,42.51% and 22.74%,respectively.PTP and PTP-1 had similar compositions,and the contents of the main components of PTP-1 was higher than that of PTP.Structural compositions and contents of PTP-2 and PTP-3 differ significantly.Further analysis indicated that PTP failed to have significant hypoglycaemic activity,while other three polyphenols regulated the fat metabolism disorders caused by insulin resistance,thus improving the body’s utilization of blood glucose.In addition,the three polyphenols reversed the damage caused by insulin resistance in IR-HepG2 cells by up-regulating the activities of HK(200μg/mL PTP-1:2.8414 mol/min/mL)and PK(200μg/mL PTP-1:10.7204 U/L),increasing the activity of SOD and CAT and decreasing the level of MDA.The mRNA results showed that PTP-1,PTP-2 and PTP-3 could achieve hypoglycaemic efficacy in the body by regulating the IRS-1/PI3K/AKT signal pathway.In summary,our results suggested that the polyphenols of partridge tea could be a promising natural source for preventing and treating hyperglycemia. 展开更多
关键词 Partridge tea Polyphenols ir-hepg2 cells Hypoglycaemic activity Insulin resistance
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发酵巴戟天中多糖和寡糖降血糖作用研究 被引量:14
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作者 黄少杰 罗志锋 +2 位作者 陶倩 黎攀 杜冰 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期43-49,共7页
多糖和寡糖是巴戟天的重要活性成分,对巴戟天的药用功效起着重要影响。该研究以发酵巴戟天为原料,通过探究发酵巴戟天中多糖和寡糖对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性的抑制效果,并结合IR-HepG2细胞实验来评价这2种有效成分的降血糖作用。... 多糖和寡糖是巴戟天的重要活性成分,对巴戟天的药用功效起着重要影响。该研究以发酵巴戟天为原料,通过探究发酵巴戟天中多糖和寡糖对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性的抑制效果,并结合IR-HepG2细胞实验来评价这2种有效成分的降血糖作用。结果表明:发酵巴戟天中的多糖和寡糖单独或复配使用时,都能较好地抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的活性,且多糖的酶活性抑制能力强于寡糖。当多糖和寡糖复配的质量浓度大于0.5 IC_(50)时,其对α-葡萄糖苷酶活性抑制存在显著的协同作用。此外,这2种有效组分都可一定程度地改善IR-HepG2细胞的胰岛素抵抗作用,促进IR-HepG2细胞对葡萄糖的摄取,且与质量浓度成正相关关系。该研究为发酵巴戟天活性成分的降血糖作用机制及效果提供了有价值的科学依据。 展开更多
关键词 发酵巴戟天 多糖 寡糖 Α-葡萄糖苷酶 α-淀粉酶 ir-hepg2细胞 降血糖
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豌豆肽缓解胰岛素抵抗形成效果探究 被引量:11
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作者 崔欣悦 张瑞雪 +5 位作者 周明 朱艳 陈亮 马勇 谷瑞增 魏颖 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第12期145-148,共4页
目的:探究豌豆肽对缓解人肝癌细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)形成的作用。方法:体外采用高浓度胰岛素诱导人肝癌细胞HepG2建立IR细胞模型,利用葡萄糖氢化酶过氧化氢酶法(GOP-POD)测定不同浓度豌豆肽对胰岛素诱导前后HepG2/IR细... 目的:探究豌豆肽对缓解人肝癌细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)形成的作用。方法:体外采用高浓度胰岛素诱导人肝癌细胞HepG2建立IR细胞模型,利用葡萄糖氢化酶过氧化氢酶法(GOP-POD)测定不同浓度豌豆肽对胰岛素诱导前后HepG2/IR细胞的葡萄糖含量及消耗量变化;MTT比色法检测豌豆肽对发生胰岛素抵抗细胞的毒性影响;采用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)手段检测细胞中胰岛素受体(InsR)及凋亡促进蛋白Caspase-3的表达。结果:胰岛素诱导48 h建立的HepG2/IR抵抗模型最为稳定,其葡萄糖消耗量与正常HepG2细胞相比降低10%。利用不同浓度豌豆肽对胰岛素诱导的HepG2细胞进行作用时,其葡萄糖消耗量提高1.31~1.68倍,InsR的表达水平提高1.19~1.34倍,凋亡蛋白Caspase-3阳性率表达增加。结论:豌豆肽对肝细胞内胰岛素抵抗的形成具有一定缓解作用。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 HepG2/IR细胞 豌豆肽
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lncRNA LAMA5-AS1在胰岛素抵抗中的作用及黄芪多糖与小檗碱联合使用对其的调控机制 被引量:2
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作者 何析珈 毛竹君 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3710-3716,共7页
目的:探讨黄芪多糖(AP)与小檗碱(BBR)联合使用对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞模型的作用是否通过调控长链非编码RNA(lncRNA)LAMA5-AS1的表达。方法:建立IR HepG2细胞模型并给予AP-BBR干预,构建LAMA5-AS1过表达载体和siRNA,检测其过表达效果... 目的:探讨黄芪多糖(AP)与小檗碱(BBR)联合使用对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞模型的作用是否通过调控长链非编码RNA(lncRNA)LAMA5-AS1的表达。方法:建立IR HepG2细胞模型并给予AP-BBR干预,构建LAMA5-AS1过表达载体和siRNA,检测其过表达效果和干扰效果。将LAMA5-AS1和LAMA5-AS1 siRNA分别转染HepG2细胞,采用qRT-PCR检测IR相关基因mRNA表达;RNA pull-down和RNA免疫沉淀法(RIP)分别检测LAMA5-AS1和PCB蛋白之间的相互作用和结合情况。结果:与对照组比较,模型组LAMA5-AS1表达显著升高(P<0.05),AP-BBR组可显著降低LAMA5-AS1的表达(P<0.05)。与IR组比较,IR+AP-BBR组、IR+OE+AP-BBR组和IR+OENC+AP-BBR组chemerin、GLUT2、PPARα和PPARγ mRNA水平显著升高(P<0.01);IR+AP-BBR组、IR+siRNA+AP-BBR组和IR+siNC+AP-BBR组中chemerin、GLUT2、myostatin、p38MAPK和PPARα mRNA水平显著升高(P<0.01,P<0.05);IR+siRNA组chemerin、GLUT2、myostatin、p38MAPK、PPARα和PPARγ mRNA水平显著升高(P<0.01,P<0.05)。RNA pull-down和RIP实验发现,IP较IgG有显著的富集趋势(P<0.01),推断LAMA5-AS1-202可与PCB蛋白结合。结论:lncRNA LAMA5-AS1作为上游基因可诱导IR的发生,AP-BBR可能通过抑制LAMA5-AS1的表达,增加胰岛素相关基因水平而改善IR。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 黄芪多糖 小檗碱 长链非编码RNA LAMA5-AS1 机制 HepG2细胞模型
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