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猪IFN-α_1基因的原核表达及其蛋白质结构的预测 被引量:5
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作者 陈国华 景志忠 +3 位作者 房永祥 蒙学莲 窦永喜 罗启慧 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期707-711,共5页
利用RT-PCR技术,从被诱导的猪外周血单核细胞中克隆出了猪α1干扰素(IFN-α1)基因。序列分析表明,克隆的猪IFN-α1基因序列与GenBank上登录的猪IFN-α1基因的同源性为97.8%。用克隆的猪IFN-α1基因构建了重组表达质粒pGEX-4T-1-IFN-α1... 利用RT-PCR技术,从被诱导的猪外周血单核细胞中克隆出了猪α1干扰素(IFN-α1)基因。序列分析表明,克隆的猪IFN-α1基因序列与GenBank上登录的猪IFN-α1基因的同源性为97.8%。用克隆的猪IFN-α1基因构建了重组表达质粒pGEX-4T-1-IFN-α1。探讨了猪IFN-α1基因表达的最佳条件,并在大肠杆菌中对此基因进行了表达。结果表明,IPTG的最佳诱导浓度为0.5 mmol/L,最适诱导温度为42℃,诱导9h表达量最大,表达产物约占菌体总蛋白的30%。SDS-PAGE分析表明,表达产物的分子质量为45 ku,且目的蛋白主要以包涵体的形式存在。经预测,猪IFN-α蛋白为一结构松散的球状蛋白。 展开更多
关键词 ifn-α1基因 克隆 原核表达 结构预测
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梅花鹿IFN-β1的原核表达及活性鉴定 被引量:4
2
作者 苏凤艳 李哲 +3 位作者 刘存发 宗颖 曾范利 王全凯 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期136-139,共4页
为表达具有抗病毒活性的梅花鹿干扰素β1(IFN-β1),本研究通过PCR扩增梅花鹿IFN-β1基因,将其克隆至原核表达载体p ET-28a中,构建重组质粒p ET-IFNβ1,并将其转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后,得到高效表达。SDS-P... 为表达具有抗病毒活性的梅花鹿干扰素β1(IFN-β1),本研究通过PCR扩增梅花鹿IFN-β1基因,将其克隆至原核表达载体p ET-28a中,构建重组质粒p ET-IFNβ1,并将其转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后,得到高效表达。SDS-PAGE与western blot分析结果表明,梅花鹿IFN-β1重组蛋白的分子量大小约为24 ku,表达产物主要为不溶性的包涵体,表达量占菌体总蛋白的59.02%。将Ni柱纯化的p ET-IFNβ1诱导表达产物复性后,细胞病变抑制法检测表明表达产物具有抗病毒活性,其抗病毒活性可以达到10×53.81U/0.1 m L。梅花鹿INF-β1的表达为梅花鹿INF-β1的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 梅花鹿 ifn-β1基因 原核表达 活性鉴定
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结核病人血清TGF-β_1、IFN-γ的检测 被引量:8
3
作者 姚红梅 董德琼 +1 位作者 杨渝浩 孙显明 《贵州医药》 CAS 2002年第10期873-874,共2页
目的探讨转化生长因子 β1 (TGF β1 )及干扰素γ(IFN γ)在结核病免疫机制中的作用。方法采用ELISA法测定 61例结核病人TGF β1 、IFN γ水平 ,并用 1 6例正常健康人作对照。结果结核组血清TGF β1 明显高于对照组 (P <0 0 0 1 ) ... 目的探讨转化生长因子 β1 (TGF β1 )及干扰素γ(IFN γ)在结核病免疫机制中的作用。方法采用ELISA法测定 61例结核病人TGF β1 、IFN γ水平 ,并用 1 6例正常健康人作对照。结果结核组血清TGF β1 明显高于对照组 (P <0 0 0 1 ) ,复治组高于初治组 (P <0 0 5)。结核组血清IFN γ低于对照组 (P <0 0 0 5) ,TGF β1 与IFN γ呈负相关 (r =- 0 41 5 ,P <0 0 0 1 )。结论人体感染结核杆菌后 ,TGF β1 增高 ,IFN γ减低 ,可能引起免疫功能失衡 ,是导致结核病的发病因素之一。TGF β1 越高 ,IFN γ越低 。 展开更多
关键词 转化生长因子β1 干扰素Γ 免疫机制 ELISA法 结核病 血清
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IFN-γRα、ICAM-1在大鼠肝卵圆细胞增殖模型中的表达及其意义 被引量:3
4
作者 颜伏归 段芳龄 +7 位作者 朱武凌 马军 高天慧 陈香宇 王晓 李蔚 李文晰 韩娜 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2003年第2期152-155,共4页
目的 探讨γ干扰素受体α(interforon gamma receptor alpha IFN-γRα)及细胞间黏附分子I(intercelluar adhesion moleeule I.ICAM-1)在大鼠肝卵圆细胞增殖模型中的表达情况及其生物学意义。 方法 采用二乙酰氨基笏(2-acetaminofluoren... 目的 探讨γ干扰素受体α(interforon gamma receptor alpha IFN-γRα)及细胞间黏附分子I(intercelluar adhesion moleeule I.ICAM-1)在大鼠肝卵圆细胞增殖模型中的表达情况及其生物学意义。 方法 采用二乙酰氨基笏(2-acetaminofluorene AAF)加三分之二肝切建立大鼠肝卵圆细胞增殖的模型,并以大鼠单纯三分之二肝切后的再生肝纠织、单纯灌AAF4天后的肝组织及正常大鼠肝细胞作对照,采用RT-PCR检测IPN-γRα、ICAM-1及甲胎蛋白(alpha-fetoprotein AFP)mRNA在模型组及对照组肝组织中的表达情况。结果 AFP,IFN-γRα及ICAM-1mRNA 表达水平在模型组肝切后4天及9天明显上调,AFP在肝切后9天、IFN-γRa及ICAM-1在肝切后4天的表达均显著高于对照组(P<0.05),在肝切后20天复常。结论 AFN-γRα和ICAM-1mRNA的高表达与肝卵圆细胞的增殖及分化过程密切相关。 展开更多
关键词 ifn-γRα ICAM-1 大鼠 肝卵圆细胞 细胞间黏附分子I 细胞增殖 动物模型 二乙酰氨基笏 甲胎蛋白 生物学 肝病
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基于IFN-γ/JAK1/CXCL10信号通路探讨火针治疗稳定期白癜风的作用机制 被引量:7
5
作者 李茜 欧阳洪 +4 位作者 韩敬端 邓诗清 方圆 张四妹 陈晓峰 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第17期2371-2377,2423,共8页
目的探讨火针治疗稳定期白癜风的效果及其对γ干扰素(IFN-γ)/酪氨酸激酶1(JAK1)/C-X-C基序趋化因子10(CXCL10)信号通路的影响,为火针临床应用提供科学依据,为防治白癜风提供新靶点和思路。方法选取广州市番禺区中医院2020年5月-2022年... 目的探讨火针治疗稳定期白癜风的效果及其对γ干扰素(IFN-γ)/酪氨酸激酶1(JAK1)/C-X-C基序趋化因子10(CXCL10)信号通路的影响,为火针临床应用提供科学依据,为防治白癜风提供新靶点和思路。方法选取广州市番禺区中医院2020年5月-2022年5月就诊的稳定期白癜风患者129例,根据就诊序号采用电脑随机数字表法分为3组,每组43例。窄谱中波紫外线(NB-UVB)组给予NB-UVB治疗,火针组采用火针治疗,联合组采用NB-UVB联合火针治疗,3组均治疗12周。比较3组临床疗效及治疗前后皮损色素积分、白斑病损程度[采用白癜风面积评分指数(VASI)评估]、皮损面积、免疫指标[辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)、粒细胞-巨噬细胞集落因子(GM-CSF)、CD4^(+)/CD8^(+)、可溶性细胞间黏附因子-1(sICAM-1)]、炎症指标[白细胞介素-23(IL-23)、IL-6、IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、IFN-γ/JAK1/CXCL10信号通路因子(IFN-γ、JAK1、CXCL10)水平,记录3组不良反应及随访3个月、6个月复发率。结果治疗12周后联合组总有效率为95.35%(41/43),均明显高于火针组的76.74%(33/43)及NB-UVB组的72.09%(31/43),差异均有统计学意义(P均<0.05)。治疗12周后,联合组皮损色素积分及CD4^(+)/CD8^(+)均高于火针组、NB-UVB组(P均<0.05),火针组均高于NB-UVB组(P均<0.05);联合组VASI评分、皮损面积及Th17/Treg、GM-CSF、sICAM-1、IL-23、IL-6、IL-17、TNF-α、IFN-γ、JAK1、CXCL10水平均低于火针组、NB-UVB组(P均<0.05),火针组均明显低于NB-UVB组(P均<0.05);3组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后随访6个月,联合组复发率低于NB-UVB组(P<0.05)。结论火针治疗可提高稳定期白癜风患者机体免疫功能,降低炎症反应,促进色素沉积,安全性高,且可降低复发率,考虑与火针可调节IFN-γ/JAK1/CXCL10信号通路有关。 展开更多
关键词 火针 白癜风 稳定期 ifn-γ/JAK1/CXCL10信号通路 炎症指标
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IFN-λR1与TRAF6的相互作用及对NF-κB与ISRE活性的影响 被引量:2
6
作者 杨霞 张俊文 +1 位作者 黄秉仁 陈虹 《医学研究杂志》 2014年第10期53-58,共6页
目的构建含有信号肽的全长IFN-λR1质粒,研究在配体IFN-λ1存在的情况下IFN-λR1与TRAF6的相互作用及对NF-κB与ISRE活性的影响。方法利用多次PCR将信号肽编码序列引入IFN-λR1序列中,构建表达载体,用免疫荧光及膜蛋白分离实验鉴定IFN-... 目的构建含有信号肽的全长IFN-λR1质粒,研究在配体IFN-λ1存在的情况下IFN-λR1与TRAF6的相互作用及对NF-κB与ISRE活性的影响。方法利用多次PCR将信号肽编码序列引入IFN-λR1序列中,构建表达载体,用免疫荧光及膜蛋白分离实验鉴定IFN-λR1的表达定位。用免疫共沉淀的方法研究IFN-λ1刺激下IFN-λR1与TRAF6间的相互作用。用双荧光素酶报告基因实验研究IFN-λR1与TRAF6相互作用后对下游NF-κB与ISRE活性的影响,采用实时定量PCR的方法检测此种作用对OAS1与Mx1基因表达的影响。结果成功构建了含信号肽的全长IFN-λR1表达载体,细胞内表达的IFN-λR1可正确定位于细胞膜上。细胞共转染IFN-λR1和TRAF6,在免疫沉淀物中可以检测到两个蛋白同时存在。细胞内共表达的IFN-λR1能够抑制TRAF6诱导的NF-λB的激活,而共表达的TRAF6可以抑制IFN-λR1下游ISRE的活性,并下调OAS1与Mx1基因的表达。结论证实了在IFN-λ1存在下IFN-λR1与TRAF6的相互作用及二者相互作用对各自细胞信号转导通路的影响,为TRAF6作为IFN-λ受体信号通路中的相互作用蛋白提供了新的实验依据。 展开更多
关键词 ifn-λR1 TRAF6 NF-ΚB ISRE 相互作用
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布地奈德对支气管哮喘患儿血清IL-4、CKLF-1和IFN-γ水平的影响 被引量:5
7
作者 姜明明 韩雪梅 于明涛 《中国现代医生》 2017年第3期4-6,共3页
目的探讨布地奈德对支气管哮喘患儿血清白细胞介素-4(IL-4),趋化素样因子-1(CKLF-1)和γ-干扰素(IFN-γ)水平的影响。方法选择2015年10月~2016年1月在我院就诊的84例支气管哮喘患儿,根据随机原则分为两组,其中采用布地奈德0.5 mg/次剂... 目的探讨布地奈德对支气管哮喘患儿血清白细胞介素-4(IL-4),趋化素样因子-1(CKLF-1)和γ-干扰素(IFN-γ)水平的影响。方法选择2015年10月~2016年1月在我院就诊的84例支气管哮喘患儿,根据随机原则分为两组,其中采用布地奈德0.5 mg/次剂量雾化患儿为低剂量组,而采用布地奈德1.0 mg/次剂量雾化的患者为高剂量组,并取同时期40例同龄健康儿童作为对照组,比较两组患儿治疗后的临床症状评分变化情况,同时统计各组患者治疗前后的血清IL-4、CKLF-1和IFN-γ水平。结果两组患儿治疗后临床症状评分均有所下降,其中高剂量组患儿的下降程度明显优于低剂量组(P<0.05);两组患儿炎症因子水平治疗后均明显改善(P<0.05),高剂量组患儿三项炎症因子治疗后水平更接近于正常水平。结论布地奈德作为控制支气管哮喘患儿常用药物,雾化吸入能够有效控制临床症状,改善炎症因子水平,同时采用1.0 mg/次的剂量相较于0.5 mg/次的低剂量改善效果更明显,可供临床参考。 展开更多
关键词 布地奈德 小儿支气管哮喘 IL-4 CKLF-1 ifn-Γ
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IFN-γ对妊娠早期大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴中IGF-1表达的影响 被引量:2
8
作者 司丽芳 范光丽 +2 位作者 赵瑾 朱灿鑫 雷林滨 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2009年第7期1-5,共5页
【目的】确定干扰素γ(IFN-γ)对妊娠早期大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴中IGF-1表达的影响。【方法】将妊娠9 d的SD大鼠随机分为对照组、试验1组和试验2组,采用生殖道肌肉注射的方法,对照组大鼠生殖道肌肉注射生理盐水,试验组大鼠注射IFN-γ,... 【目的】确定干扰素γ(IFN-γ)对妊娠早期大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴中IGF-1表达的影响。【方法】将妊娠9 d的SD大鼠随机分为对照组、试验1组和试验2组,采用生殖道肌肉注射的方法,对照组大鼠生殖道肌肉注射生理盐水,试验组大鼠注射IFN-γ,其中1组剂量为2.5×104U/只,2组剂量为7.5×104U/只。各试验组均在注射48h后灌注取材、免疫组化SP法染色,光镜下观察。【结果】注射2.5×104U/只和7.5×104U/只的IFN-γ均能下调妊娠大鼠下丘脑室周核、视上核、视前大细胞核、视前内侧核、视前外侧核、视前交叉上核、弓状核,腺垂体,卵巢黄体及子宫蜕膜基质细胞和子宫腺中IGF-1的表达。【结论】IFN-γ对妊娠早期大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴中IGF-1的表达具有下调作用,高剂量IFN-γ的下调作用更显著。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 干扰素-Γ 免疫组化 下丘脑-垂体-卵巢轴 妊娠大鼠
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TRAF6和IFN-λR1相互作用后的泛素化变化对IFN-λ1信号通路的影响 被引量:1
9
作者 张俊文 杨霞 +3 位作者 米蕊芳 刘福生 陈虹 黄秉仁 《医学研究杂志》 2016年第9期43-48,共6页
目的研究IFN-λ1抑制NF-κB激活和TRAF6抑制ISRE激活的分子机制。方法利用细胞培养、细胞转染、免疫共沉淀、SDS-PAGE及Western blot等方法检测IFN-λ1对TRAF6泛素化,以及泛素连接酶TRAF6对IFN-λ1的受体IFN-λR1泛素化的作用。结果IFN-... 目的研究IFN-λ1抑制NF-κB激活和TRAF6抑制ISRE激活的分子机制。方法利用细胞培养、细胞转染、免疫共沉淀、SDS-PAGE及Western blot等方法检测IFN-λ1对TRAF6泛素化,以及泛素连接酶TRAF6对IFN-λ1的受体IFN-λR1泛素化的作用。结果IFN-λ1会抑制TRAF6的自身泛素化,TRAF6能泛素化受体IFN-λR1,并且IFN-λ1会增加IFN-λR1与泛素K63位点的结合。结论IFN-λ1抑制了NF-κB的激活的原因是IFN-λ1能够抑制TRAF6的自身泛素化。TRAF6能泛素化IFN-λR1,从而抑制ISRE的激活。 展开更多
关键词 IFN—λ1 ifn-λR1 TRAF6 NF—κB ISRE
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人重组IFN-γ对STAT-1在卵巢癌细胞中表达调控的研究 被引量:1
10
作者 沈怡 方大俊 +2 位作者 阮莎莎 赵虹 王泽华 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2010年第2期119-122,共4页
目的:研究IFN-γ对卵巢癌耐药细胞株SKOV3TS及敏感细胞株SKOV3中STAT-1表达的调控。方法:应用RT-PCR方法、细胞免疫荧光法检测SKOV3TS与SKOV3在IFN-γ作用前后STAT-1 mRNA及蛋白的表达。用MTT法检测不同浓度IFN-γ作用卵巢癌细胞株不同... 目的:研究IFN-γ对卵巢癌耐药细胞株SKOV3TS及敏感细胞株SKOV3中STAT-1表达的调控。方法:应用RT-PCR方法、细胞免疫荧光法检测SKOV3TS与SKOV3在IFN-γ作用前后STAT-1 mRNA及蛋白的表达。用MTT法检测不同浓度IFN-γ作用卵巢癌细胞株不同时间后对细胞增殖率的影响。结果:卵巢癌SKOV3TS、SKOV3细胞株均有STAT-1表达,且主要集中于胞浆。并且随着IFN-γ作用时间延长,STAT-1蛋白表达增强。IFN-γ作用两种细胞株24h及48h后STAT-1 mRNA表达均增加,且差异有统计学意义(P<0.01),但不同浓度IFN-γ作用相同时间后STAT-1 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。IFN-γ可显著抑制SKOV3TS和SKOV3细胞增殖,也呈时间依赖性(P<0.01)。IFN-γ对SKOV3组的抑制率较SKOV3TS组高(P<0.05)。结论:IFN-γ能够促进STAT-1表达,抑制卵巢癌细胞增殖。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 细胞系 人重组ifn-γ STAT-1 噻唑蓝 聚合酶链反应 逆转录酶
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PD-L1和IFN-ɑ与系统性红斑狼疮患者免疫功能异常的关系研究 被引量:4
11
作者 廖永强 孟芳 +5 位作者 肖妮 夏洪娇 刘剑荣 彭可君 俞丹菁 戴森华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期2016-2019,2022,共5页
目的:探讨PD-L1和IFN-α与系统性红斑狼疮(SLE)患者免疫功能异常的关系。方法:选取2018年1月~2019年12月于我院就诊的SLE患者52例(SLE组)和健康志愿者48例(对照组)。根据抗dsDNA抗体检测结果,将SLE组分为抗dsDNA抗体阳性组(18例)和阴性... 目的:探讨PD-L1和IFN-α与系统性红斑狼疮(SLE)患者免疫功能异常的关系。方法:选取2018年1月~2019年12月于我院就诊的SLE患者52例(SLE组)和健康志愿者48例(对照组)。根据抗dsDNA抗体检测结果,将SLE组分为抗dsDNA抗体阳性组(18例)和阴性组(34例)。ELISA检测血清PD-L1和IFN-α,分别采用ELISA法和间接免疫荧光法检测抗dsDNA抗体,流式细胞术检测细胞表面PD-1和PD-L1,速率散射比浊法检测补体C3和C4,免疫比浊法检测CRP。结果:与对照组相比,SLE患者外周血CD4^+T细胞表面PD-1和PD-L1表达上调,阳性组高于阴性组(P<0.01);CD8^+T和CD19^+B细胞表面PD-1表达上调,PD-L1表达下调,阳性组与阴性组比较差异均有统计学意义(P<0.01);与阴性组和对照组相比,阳性组血清PD-L1、补体C3和C4显著降低,而IFN-α、CRP、SLEDAI及抗dsDNA抗体滴度显著增高(P<0.01);SLE患者血清PD-L1与IFN-α、SLEDAI、抗dsDNA抗体滴度和CRP呈显著负相关(r=-0.468,-0.494,-0.493,-0.352,P<0.05),与补体C3和C4呈显著正相关(r=0.498,0.326,P<0.05)。结论:PD-L1和IFN-α异常表达于SLE患者T、B淋巴细胞表面和血清,共同参与细胞及体液免疫功能调节。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 免疫功能异常 PD-1/PD-L1 ifn-Α
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IFN-γ、IL-32、IL-1β在原因不明习惯性流产中的临床意义 被引量:4
12
作者 孙葱葱 梁玉杰 +4 位作者 陈倩 朱丹 朱艳乐 郑克琼 严珞媛 《中国现代医生》 2012年第10期82-83,85,共3页
目的探讨干扰素-γ、白介素-32和白细胞介素-1β在原因不明习惯性流产中的表达及临床意义。方法ELISA法检测URSA组、正常妊娠组和健康对照组血清中IFN-γ、IL-32和IL-1β的浓度,并进行统计学分析。结果URSA组IFN-γ、IL-32和IL-1β的血... 目的探讨干扰素-γ、白介素-32和白细胞介素-1β在原因不明习惯性流产中的表达及临床意义。方法ELISA法检测URSA组、正常妊娠组和健康对照组血清中IFN-γ、IL-32和IL-1β的浓度,并进行统计学分析。结果URSA组IFN-γ、IL-32和IL-1β的血清浓度水平显著高于健康对照组和正常妊娠组(P<0.01);正常妊娠组较健康对照组的IFN-γ、IL-32和IL-1β血清浓度水平均显著下降(P均<0.01)。结论IFN-γ、IL-1β、IL-32反馈环可能参与了URSA的发生,对其血清浓度的检测可作为监测URSA病人治疗效果和再次妊娠结局的指标。 展开更多
关键词 URSA 干扰素-Γ 白介素-32 白细胞介素-1Β
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栀子提取物对单纯疱疹病毒1型感染小鼠VP16mRNA和IFN-γmRNA的影响 被引量:9
13
作者 时宇静 黄洋 +5 位作者 郭姗姗 姜晶 苏丹 赵晔 高英杰 崔晓兰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期41-46,共6页
采用RT-PCR技术,分别在单纯疱疹病毒1型感染BALB/C小鼠4、7、10、14、21天时,检测小鼠脑内VP16 mRNA和IFN-γ表达的变化,考察栀子提取物T9对病毒复制和宿主免疫的影响。结果显示,栀子提取物T9各给药组VP16 mRNA相对表达量在同一时间内... 采用RT-PCR技术,分别在单纯疱疹病毒1型感染BALB/C小鼠4、7、10、14、21天时,检测小鼠脑内VP16 mRNA和IFN-γ表达的变化,考察栀子提取物T9对病毒复制和宿主免疫的影响。结果显示,栀子提取物T9各给药组VP16 mRNA相对表达量在同一时间内均低于病毒对照组,其中T9低剂量组VP16 mRNA相对表达量在感染后第21天明显下降,T9高剂量组VP16 mRNA相对表达量随时间变化呈现持续降低状态;栀子提取物T9各给药组在除第4天外的其他时间点IFN-γmRNA相对表达量均高于病毒对照组,其中T9低剂量组IFN-γ mRNA相对表达量在感染后第4天至第14天随时间变化而明显增高,之后表达量略有下降,T9高剂量组IFN-γ mRNA相对表达量随时间变化呈现持续升高状态。结果提示,栀子提取物T9可能通过上调单纯疱疹病毒感染小鼠脑内IFN-γ mRNA相对表达量,来抑制单纯疱疹病毒在小鼠脑内的复制。 展开更多
关键词 栀子提取物T9 单纯疱疹病毒1 RT—PCR ifn-Γ 病毒复制
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RanBPM调控IFN-λR1-STAT5通路分子机制研究 被引量:1
14
作者 张俊文 赵乔佳杰 +3 位作者 杨霞 马雯 黄秉仁 刘福生 《医学研究杂志》 2019年第8期31-36,共6页
目的研究RanBPM调控IFN-λR1-STAT信号通路的分子机制。方法利用免疫共沉淀和双荧光素酶报告基因等方法检测IFN-λR1中与STAT5A结合的位点,RanBPM与STAT5A的相互作用和相互作用的结构域,以及相互作用后对STAT5A报告基因活性的影响。结果... 目的研究RanBPM调控IFN-λR1-STAT信号通路的分子机制。方法利用免疫共沉淀和双荧光素酶报告基因等方法检测IFN-λR1中与STAT5A结合的位点,RanBPM与STAT5A的相互作用和相互作用的结构域,以及相互作用后对STAT5A报告基因活性的影响。结果IFN-λR1中含有两个与STAT5A结合的位点;STAT5A能与RanBPM相互作用,RanBPM的氨基酸和羧基端有与STAT5A相互作用的位点;RanBPM增强了STAT5A双荧光素酶报告基因活性。结论RanBPM能分别与IFN-λR1和STAT5A相互作用,参与调控IFN-λR1-STAT5通路。 展开更多
关键词 RANBPM 相互作用 ifn-λR1 STAT5A
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应用CRISPR/Cas9系统敲除PD-1基因对人T淋巴细胞增殖及分泌IFN-γ的影响 被引量:2
15
作者 龚福生 许扬梅 +2 位作者 刘施佳 黄丽洁 郑秋红 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期656-661,共6页
目的:探讨应用CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除PD-1基因对人T细胞增殖及分泌IFN-γ的影响。方法:设计靶向PD-1基因的sgRNA序列,应用T7 RNA聚合酶体外分别合成PD-1-sgRNA和Cas9mRNA。利用核转染技术将PD-1-sgRNA和Cas9 mRNA混合物转入激活的... 目的:探讨应用CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除PD-1基因对人T细胞增殖及分泌IFN-γ的影响。方法:设计靶向PD-1基因的sgRNA序列,应用T7 RNA聚合酶体外分别合成PD-1-sgRNA和Cas9mRNA。利用核转染技术将PD-1-sgRNA和Cas9 mRNA混合物转入激活的人T淋巴细胞,测序确认基因敲除的效率。应用流式细胞术分析基因敲除后T淋巴细胞表型和PD-1的表达情况,锥虫蓝活细胞计数法检测T细胞增殖活力,ELISA检测T细胞分泌IFN-γ情况。结果:体外成功合成PD-1-sgRNA和Cas9 mRNA。将PD-1-sgRNA和Cas9 m RNA核转染T淋巴细胞,测序证实PD-1基因序列编辑效率为58.3%。CRISPR/Cas9系统成功下调T淋巴细胞表面PD-1分子的表达水平[(9.6±1.85)%vs(16.2±2.05)%,P<0.05],PD-1基因敲除不影响T细胞的增殖活力和细胞表型(P>0.05);但PD-1-sgRNA组的效应T细胞分泌IFN-γ水平显著升高(P<0.01)。结论:CRISPR/Cas9基因编辑系统成功敲除人T淋巴细胞PD-1基因,降低PD-1分子表达可阻断PD-1/PD-L1负性调控从而增强T细胞的免疫活性,且促进效应T细胞分泌IFN-γ。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9系统 T淋巴细胞 核转染 PD-1 基因敲除 ifn-Γ
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健脾益肠散对溃疡性结肠炎大鼠IFN-γ、IL-10、TGF-β1的影响 被引量:9
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作者 刘金国 蔺晓源 +3 位作者 张文秀 张瑜 纪云西 刘杰民 《中医药信息》 2015年第4期7-9,共3页
目的:观察健脾益肠散对溃疡性结肠炎(UC)大鼠血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1的影响。方法:将60只SD大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、健脾益肠散高、中、低剂量组和柳氮磺吡啶组,每组10只;采用2、4、6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法复制U... 目的:观察健脾益肠散对溃疡性结肠炎(UC)大鼠血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1的影响。方法:将60只SD大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、健脾益肠散高、中、低剂量组和柳氮磺吡啶组,每组10只;采用2、4、6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法复制UC大鼠模型;给药21天后,ELISA法测定各组大鼠血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1含量。结果:模型组大鼠血清IFN-γ、TGF-β1含量增加,IL-10含量减少,与正常组比较均有统计学差异(P<0.01);与模型组比较,健脾益肠散高、中剂量组IFN-γ、IL-10含量和高剂量组TGF-β1含量均明显改善(P<0.05或P<0.01);健脾益肠散高剂量组血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1的变化与柳氮磺吡啶组比较差异无统计学意义(P>0.05),但其明显优于健脾益肠散低剂量组(P<0.05)。结论:健脾益肠散对UC肠黏膜免疫的保护作用可能与调节外周血IFN-γ、IL-10、TGF-β1的含量有关。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 健脾益肠散 ifn-Γ IL-10 TGF-Β1
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热灭活白念珠菌通过Dectin-1诱导外周血单个核细胞表达IL-12和IFN-γ 被引量:2
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作者 胡志德 黄元兰 +3 位作者 孙懿 陈孙孝 邓安梅 仲人前 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期48-51,共4页
为研究Dectin-1在热灭活白念珠菌刺激外周血单个核细胞(PBMC)免疫应答中的作用。我们用不同浓度昆布多糖(Dectin-1封闭剂)与PBMC共培养1 h后,再用热灭活白念珠菌刺激PBMC 4 d;同时用不同剂量的Dectin-1激活剂酵母聚糖(zymosan)刺激PBMC ... 为研究Dectin-1在热灭活白念珠菌刺激外周血单个核细胞(PBMC)免疫应答中的作用。我们用不同浓度昆布多糖(Dectin-1封闭剂)与PBMC共培养1 h后,再用热灭活白念珠菌刺激PBMC 4 d;同时用不同剂量的Dectin-1激活剂酵母聚糖(zymosan)刺激PBMC 4 d,收集培养液上清,经ELISA检测IL-12和IFN-γ水平。结果发现,昆布多糖可以部分抑制热灭活白念珠菌刺激PBMC合成IL-12和IFN-γ的能力,酵母聚糖可以诱导PBMC合成IL-12和IFN-γ。因此,Dectin-1是介导热灭活白念珠菌诱导PBMC产生IL-12和IFN-γ的受体之一。 展开更多
关键词 DECTIN-1 白念珠菌 IL-12 ifn-Γ
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布地奈德对小儿支气管哮喘IL-4,CKLF-1和IFN-γ水平的影响 被引量:3
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作者 杜萍 《中国药业》 CAS 2015年第21期62-64,共3页
目的探讨布地奈德不同剂量对小儿支气管哮喘白细胞介素-4(IL-4)、趋化素样因子-1(CKLF-1)和γ-干扰素(IFN-γ)水平的影响及临床疗效。方法将明确诊断为支气管哮喘患儿124例采用随机数字表法分为高剂量组和低剂量组,高剂量组给予布地奈... 目的探讨布地奈德不同剂量对小儿支气管哮喘白细胞介素-4(IL-4)、趋化素样因子-1(CKLF-1)和γ-干扰素(IFN-γ)水平的影响及临床疗效。方法将明确诊断为支气管哮喘患儿124例采用随机数字表法分为高剂量组和低剂量组,高剂量组给予布地奈德雾化吸入,每次1.0 mg,3次/天。低剂量组每次给予0.5 mg,3次/天;同时选取相匹配的健康小儿43例作为对照组。结果哮喘患儿治疗前血清IL-4,CKLF-1和IFN-γ水平均明显高于健康小儿(P<0.01),中度哮喘患儿血清上述指标水平明显高于轻度哮喘患儿(P<0.01)。高剂量组在控制哮喘临床症状效果明显优于低剂量组(P<0.01)。组内治疗前后血清IL-4,CKLF-1和IFN-γ水平比较,高、低剂量组均有统计学差异(P<0.05),治疗后,组间比较,有统计学差异(P<0.05)。高剂量组较低剂量组能在更短时间内提高血氧饱和度和降低呼吸频率(P<0.01)。不良反应发生率两组比较,无统计学差异(P>0.05)。结论高剂量布地奈德能更好地控制哮喘患儿的病情,同时血清IL-4,CKLF-1和IFN-γ水平可作为哮喘患儿疾病发展的重要评价指标。 展开更多
关键词 布地奈德 小儿 支气管哮喘 白细胞介素-4 趋化素样因子-1(CKLF-1) Γ-干扰素
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鼻渊舒口服液对CRS模型小鼠鼻窦黏膜IFN-γ及免疫检查点B7-H1/PD-1 mRNA表达的影响研究 被引量:6
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作者 付译节 李辉 +3 位作者 朱天民 朱鑫 李璐 胡守亮 《中国药房》 CAS 北大核心 2020年第17期2076-2081,共6页
目的:探讨鼻渊舒口服液对慢性鼻-鼻窦炎(CRS)模型小鼠γ干扰素(IFN-γ)的影响,并基于协同刺激分子B7同源物l(B7-H1)/程序性死亡因子1(PD-1)免疫检测点探讨其可能机制。方法:将雄性C57小鼠随机分为正常组、假手术组、化学药对照组(克拉霉... 目的:探讨鼻渊舒口服液对慢性鼻-鼻窦炎(CRS)模型小鼠γ干扰素(IFN-γ)的影响,并基于协同刺激分子B7同源物l(B7-H1)/程序性死亡因子1(PD-1)免疫检测点探讨其可能机制。方法:将雄性C57小鼠随机分为正常组、假手术组、化学药对照组(克拉霉素,103 mg/kg)和鼻渊舒低、中、高剂量组(鼻渊舒口服液,3.1、6.2、12.4 mL/kg),每组20只。除正常组不作任何处理外,其余各组小鼠均开放上颌窦,假手术组不填充带菌海绵,模型组和各给药组填充带菌海绵以复制CRS模型。自造模后第8周开始,正常组、假手术组和模型组小鼠均灌胃生理盐水0.2 mL,各给药组小鼠灌胃相应药物,每日1次,连续14 d。观察小鼠的鼻部症状和一般情况,采用苏木精-伊红染色法观察小鼠鼻窦黏膜的病理变化;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测小鼠鼻窦黏膜中IFN-γ、B7-H1、PD-1 mRNA的表达情况。结果:正常组、假手术组小鼠未见鼻部异常,鼻窦黏膜上皮及纤毛完整,两组IFN-γ、B7-H1、PD-1 mRNA的相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。模型组小鼠可见流涕且频繁挠鼻、喷嚏,鼻腔内有少量黄色分泌物,脱毛严重;其鼻窦黏膜严重缺损、纤毛脱落,黏膜下层腺体增生,可见淋巴细胞浸润;鼻窦黏膜中IFN-γ、B7-H1、PD-1mRNA的相对表达量均较正常组显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠的鼻部症状、一般情况及鼻窦组织病理学变化均有不同程度的改善,化学药对照组和鼻渊舒中、高剂量组小鼠鼻窦黏膜中IFN-γ、B7-H1 mRNA以及各给药组PD-1 mRNA的相对表达量均显著降低,且鼻渊舒中、高剂量上述指标均显著低于低剂量组,而鼻渊舒高剂量组IFN-γmRNA的相对表达量显著高于中剂量组。鼻渊舒低、高剂量组IFN-γmRNA,低剂量组B7-H1 mRNA以及各剂量组PD-1 mRNA的相对表达量均显著高于化学药对照组(P<0.05或P<0.01);鼻渊舒中剂量组上述指标水平与化学药对照组相当(P>0.05)。结论:鼻渊舒口服液可改善CRS模型小鼠鼻窦黏膜的慢性炎症,其机制可能与通过抑制IFN-γmRNA表达从而干预B7-H1/PD-1 mRNA过度表达有关。 展开更多
关键词 鼻渊舒口服液 慢性鼻-鼻窦炎 γ干扰素 协同刺激分子B7同源物l 程序性死亡因子1 免疫检查点 小鼠 机制
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重组腺病毒Ad-IFN-λ1对荷瘤鼠肺腺癌A549细胞增殖的影响及其作用机制
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作者 朱涛峰 张金 +1 位作者 刘洋 严玉兰 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2011年第6期481-484,共4页
目的:研究重组腺病毒Ad-IFN-λ1对肺腺癌A549细胞皮下移植瘤的影响及其作用机制。方法:建立A549荷瘤裸鼠模型后,随机分为3组,分别注入含有IFN-λ1的腺病毒(Ad-IFN-λ1组)、Ad-LacZ(空质粒组)和PBS(对照组)。各组每周干预1次,共干预3次。... 目的:研究重组腺病毒Ad-IFN-λ1对肺腺癌A549细胞皮下移植瘤的影响及其作用机制。方法:建立A549荷瘤裸鼠模型后,随机分为3组,分别注入含有IFN-λ1的腺病毒(Ad-IFN-λ1组)、Ad-LacZ(空质粒组)和PBS(对照组)。各组每周干预1次,共干预3次。每7天测量肿瘤体积,末次处理1周后全部处死小鼠,通过TUNEL法、流式细胞仪检测移植瘤的凋亡及脾NK细胞的改变。绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤干预的抑瘤率。结果:Ad-IFN-λ1组移植瘤生长受到明显抑制,凋亡指数(0.149±0.037)%明显高于空质粒组(0.041±0.019)%和PBS组(0.033±0.011)%,差异有统计学意义(P<0.01);Ad-IFN-λ1组脾NK细胞比例为(0.149±0.037)%,明显高于空质粒组的(6.82±0.67)%和PBS组(6.34±0.58)%(P<0.01)。结论:Ad-IFN-λ1体内转染对肺A549腺癌的生长有一定的抑制作用,且可能是通过刺激体内NK细胞增加而促进肿瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 ifn-λ1 肺癌 凋亡 NK细胞 小鼠
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