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四君子汤及其不同组分脾虚小鼠含药血清对IEC-6和PC12细胞的影响
1
作者 沈怡 彭颖 +2 位作者 陈孝男 董邦健 李晓波 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第21期4033-4038,共6页
目的基于脾虚小鼠含药血清和细胞模型,比较四君子汤及其不同组分的药理作用。方法建立IEC-6细胞划痕及皮质酮诱导PC12细胞损伤模型,空白和模型组细胞加入空白和脾虚小鼠血清,各给药组细胞分别加入四君子汤(SJZD)、四君子汤非多糖组分(N... 目的基于脾虚小鼠含药血清和细胞模型,比较四君子汤及其不同组分的药理作用。方法建立IEC-6细胞划痕及皮质酮诱导PC12细胞损伤模型,空白和模型组细胞加入空白和脾虚小鼠血清,各给药组细胞分别加入四君子汤(SJZD)、四君子汤非多糖组分(NPS)、四君子汤功效组分(ECS)脾虚小鼠含药血清。记录IEC-6细胞划痕迁移情况,Western blot检测IEC-6细胞PI3K/AKT信号通路蛋白表达水平。CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测PC12细胞存活率,ELISA检测PC12细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率。结果SJZD、NPS、ECS组IEC-6细胞加入含药血清后出现明显的迁移现象,其中NPS含药血清迁移修复效果优于SJZD及ECS;三者含药血清均能激活IEC-6细胞PI3K/AKT信号通路(P<0.05)。SJZD、NPS、ECS含药血清可明显改善皮质酮诱导PC12细胞损伤(P<0.05),降低PC12细胞LDH释放率(P<0.05)。结论四君子汤及其不同组分脾虚小鼠含药血清对IEC-6和PC12细胞损伤具有保护作用,ECS效果与SJZD相当,可能为其活性物质。PI3K/AKT通路可能是ECS修复肠上皮细胞的作用机制之一。 展开更多
关键词 四君子汤 脾虚证 血清药理 iec-6 PC12
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千金子制霜前后提取物对HEK293和IEC-6细胞自噬和线粒体动力学的影响
2
作者 姜明瑞 马思媛 +7 位作者 朱海婷 张俊丽 王晓宇 陈文静 毛易凡 徐鹏 张新宁 王英姿 《中草药》 北大核心 2025年第21期7829-7839,共11页
目的从细胞自噬和线粒体动力学途径探究千金子制霜前后提取物对人胚胎肾细胞(HEK293)和大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)的影响。方法将HEK293和IEC-6细胞分为对照组及千金子生品提取物(100、200、400μg/mL)组和千金子霜品提取物(100、200、400... 目的从细胞自噬和线粒体动力学途径探究千金子制霜前后提取物对人胚胎肾细胞(HEK293)和大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)的影响。方法将HEK293和IEC-6细胞分为对照组及千金子生品提取物(100、200、400μg/mL)组和千金子霜品提取物(100、200、400μg/mL)组,分别采用MTT法和流式细胞术测定细胞活力、细胞凋亡、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和线粒体膜电位;使用丹酰尸胺(dansylcadaverine,MDC)染色法观察细胞自噬囊泡数量;利用Western blotting检测细胞中微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein1 light chain 3,LC3)、p62、线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,Mfn2)、视神经萎缩蛋白1(optic atrophic protein 1,OPA1)、动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1,Drp1)的表达。结果与对照组比较,千金子制霜前后提取物作用于HEK293细胞、IEC-6细胞后存活率显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.05、0.01),自噬囊泡显著增多(P<0.01),细胞内ROS水平显著升高(P<0.01),线粒体膜电位显著降低(P<0.05、0.01),p62、Mfn2、OPA1蛋白表达水平显著降低(P<0.01),LC3-II/I、Drp1蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与相同剂量的生品比较,千金子制霜后细胞存活率升高(P<0.01),诱导HEK293和IEC-6细胞凋亡的能力减弱(P<0.01),细胞自噬囊泡的数量减少(P<0.01),线粒体膜电位升高(P<0.05、0.01),ROS水平降低(P<0.05、0.01),并能减弱对p62、Mfn2、OPA1蛋白表达的下调作用及LC3-II/I、Drp1蛋白表达的上调作用(P<0.05、0.01)。结论千金子制霜减毒的作用机制可能与通过调控细胞自噬途径和线粒体动力学平衡、影响细胞增殖及凋亡有关。 展开更多
关键词 千金子 制霜减毒 细胞自噬 线粒体动力学 HEK293细胞 iec-6细胞 千金子素L1
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党参白术提取物分别和合用诱导IEC-6细胞增殖分化的作用 被引量：21
3
作者 陈蔚文 张子理 +4 位作者 王建华 沈小玲 韩凌 周联 徐勤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期444-447,共4页
目的　观察党参提取物 (D h)和白术提取物 (B t)对小肠隐窝细胞 (IEC 6 )增殖、分化的作用及其二者配伍对IEC 6细胞增殖的影响。方法　IEC 6细胞培养 2 4h ,加入不同剂量的D h、B t及二者的配伍溶液 ,2 4h后用MTT法观察细胞增殖 ,显微... 目的　观察党参提取物 (D h)和白术提取物 (B t)对小肠隐窝细胞 (IEC 6 )增殖、分化的作用及其二者配伍对IEC 6细胞增殖的影响。方法　IEC 6细胞培养 2 4h ,加入不同剂量的D h、B t及二者的配伍溶液 ,2 4h后用MTT法观察细胞增殖 ,显微镜观察细胞分化的形态特征。结果　D h在 2 5 0mg·L-1以下剂量时对细胞增殖无影响 ,剂量提高到 5 0 0mg·L-1和 10 0 0mg·L-1时 ,明显促进细胞的增殖。B t各剂量均无促进细胞增殖的作用 ,在 5 0 0mg·L-1和10 0 0mg·L-1剂量时 ,细胞增殖反见减弱。二药配伍后 ,促进细胞增殖的作用明显增强 ,具有一定的剂量依赖关系 ,其效果优于D h ;IEC 6细胞在B t作用下 ,分化程度增高 ,低倍镜下细胞呈典型的上皮细胞形态 ,细胞排列呈条索状 ,部分呈腺管状排列。高倍镜下可观察到隐约有细胞连接样结构 ,上皮细胞似有微绒毛形成的趋势。D h处理的细胞分化程度较低 ,镜下所见多为未分化的梭状细胞 ,且排列不规则 ,无任何形成腺管的趋势和有细胞连接样结构。结论　D h能促进细胞增殖 ,B t可促进细胞分化 ,二者配伍后促进细胞增殖作用明显增强 。 展开更多
关键词 白术提取物 细胞增殖 细胞分化 iec-6细胞 党参提取物 药理学 实验研究
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白术糖复合物对IEC-6细胞分化及绒毛蛋白表达的影响 被引量：36
4
作者 王洲 李茹柳 +1 位作者 徐颂芬 陈蔚文 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期938-944,共7页
目的:观察白术糖复合物对小肠隐窝细胞(IEC-6)细胞分化及分化标志物之一绒毛蛋白(villin)表达的影响。方法:IEC-6细胞分为空白对照组、阳性对照药胃泌素组(250μg/L)、白术糖复合物组(62.5、125、250、500、1000 mg/L),经相应处理后。... 目的:观察白术糖复合物对小肠隐窝细胞(IEC-6)细胞分化及分化标志物之一绒毛蛋白(villin)表达的影响。方法:IEC-6细胞分为空白对照组、阳性对照药胃泌素组(250μg/L)、白术糖复合物组(62.5、125、250、500、1000 mg/L),经相应处理后。光镜下观察细胞大体形态;透射电镜下观察细胞超微结构;RT-PCR法检测villin mRNA表达;免疫荧光法检测villin蛋白表达。结果:①给药7 d,光镜下空白对照组细胞处于幼稚状态;胃泌素和白术糖复合物组细胞处于分化状态;②给药20 d,电镜下空白对照组胞核较大,常染色质比例较高,细胞边缘仅见少量微绒毛;胃泌素和白术糖复合物组胞核较小,常/异染色质比例协调,细胞边缘生成大量微绒毛;③给药6 h,空白对照组细胞villin mRNA表达非常少,胃泌素组和白术糖复合物组villin mRNA表达均明显高于空白对照组;④给药7 d,免疫荧光检测发现空白对照组细胞仅有很少villin蛋白表达;胃泌素组表达非常强烈;白术糖复合物组表达稍弱于胃泌素组,但有特异性绒毛蛋白聚集点。结论:白术糖复合物有通过上调IEC-6细胞绒毛蛋白表达及分布而促其分化的作用。 展开更多
关键词 白术糖复合物 iec-6细胞 分化 绒毛蛋白
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甘草黄酮提取物对小肠上皮细胞IEC-6迁移及多胺的影响 被引量：17
5
作者 李茹柳 陶玉珠 +3 位作者 温鹏 赵世清 徐颂芬 陈蔚文 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期2722-2726,共5页
目的观察甘草黄酮提取物对小肠隐窝上皮细胞IEC-6迁移及迁移过程细胞内多胺量的影响。方法划痕法制备细胞迁移模型,观察在多胺合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)及钾通道抑制剂4-氨基吡啶(4-AP)存在情况下,甘草黄酮提取物对细胞迁移的影响... 目的观察甘草黄酮提取物对小肠隐窝上皮细胞IEC-6迁移及迁移过程细胞内多胺量的影响。方法划痕法制备细胞迁移模型,观察在多胺合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)及钾通道抑制剂4-氨基吡啶(4-AP)存在情况下,甘草黄酮提取物对细胞迁移的影响;柱前衍生-高效液相色谱法检测IEC-6细胞在正常及DFMO存在条件下,给予甘草黄酮提取物12、24 h后细胞内多胺(精脒)的量。结果甘草黄酮提取物可逆转DFMO或4-AP所致IEC-6细胞迁移抑制;其给药12、24 h后可提高细胞内精脒的量,并逆转DFMO对多胺合成的抑制。结论甘草黄酮提取物促进细胞迁移的作用与影响细胞内多胺调控信号通路有关。 展开更多
关键词 甘草黄酮提取物 小肠上皮iec-6细胞 细胞迁移 多胺 多胺调控信号通路
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白术、黄芪、党参促进IEC-6细胞损伤后的快速修复 被引量：39
6
作者 宋厚盼 谢梦洲 +2 位作者 胡志希 黄惠勇 蔡雄 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1170-1175,共6页
目的研究白术、黄芪、党参提取物对体外胃肠黏膜上皮细胞损伤的快速修复作用。方法采用Tips划痕法建立小肠上皮(IEC-6)细胞迁移模型,首先考察不同的IEC-6细胞接种密度、划痕后修复时间、不同的血清浓度以建立稳定的迁移模型;接着采用表... 目的研究白术、黄芪、党参提取物对体外胃肠黏膜上皮细胞损伤的快速修复作用。方法采用Tips划痕法建立小肠上皮(IEC-6)细胞迁移模型,首先考察不同的IEC-6细胞接种密度、划痕后修复时间、不同的血清浓度以建立稳定的迁移模型;接着采用表皮生长因子(EGF)及其阻断剂AG1478对迁移模型进行评价;最后考察三味中药对IEC-6细胞迁移的作用效果。结果 (1)细胞的最佳接种密度为1×105个/m L;(2)宜在划痕后8 h计算细胞迁移率;(3)1%血清浓度为最适宜浓度;(4)EGF明显促进了IEC-6细胞迁移,AG1478明显抑制了细胞迁移;(5)白术、黄芪、党参提取物均可促进IEC-6细胞迁移。结论益气健脾中药可促进胃肠黏膜损伤后的快速修复过程,其机制是否与影响EGFR信号通路有关有待进一步研究。 展开更多
关键词 胃肠黏膜损伤 iec-6细胞 细胞迁移模型 表皮生长因子(EGF) 白术 黄芪 党参
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四君子汤多糖对IEC-6细胞迁移、钾通道蛋白及膜电位的影响 被引量：14
7
作者 涂小华 李茹柳 +3 位作者 邓娇 蔡佳仲 伍婷婷 陈蔚文 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期856-862,共7页
目的:观察四君子汤多糖对小肠上皮IEC-6细胞迁移及多胺调控信号通路钾通道蛋白和膜电位的影响,探讨四君子汤修复胃肠黏膜损伤的作用机制。方法:划痕法建立IEC-6细胞迁移模型,观察正常培养及α-二氧甲基乌氨酸(DFMO,多胺合成抑制剂)或4-... 目的:观察四君子汤多糖对小肠上皮IEC-6细胞迁移及多胺调控信号通路钾通道蛋白和膜电位的影响,探讨四君子汤修复胃肠黏膜损伤的作用机制。方法:划痕法建立IEC-6细胞迁移模型,观察正常培养及α-二氧甲基乌氨酸(DFMO,多胺合成抑制剂)或4-氨基吡啶(4-AP,钾通道抑制剂)负荷下四君子汤多糖对IEC-6细胞迁移的影响;分别以荧光定量PCR法和Western blot法检测四君子汤多糖对IEC-6细胞钾通道蛋白kv1.1 mRNA和蛋白表达的影响;流式细胞仪检测四君子汤多糖对IEC-6细胞膜电位的影响。结果:与空白对照组比较,四君子汤多糖(40、80、160 mg/L)可促进IEC-6细胞迁移,提高IEC-6细胞kv1.1 mRNA和蛋白表达水平及细胞膜电位超极化水平(P<0.05或P<0.01);与DFMO模型组比较,四君子汤多糖(40、80、160 mg/L)可逆转DFMO所致细胞迁移数减少、kv1.1 mRNA和蛋白表达的降低以及细胞膜电位去极化(P<0.05或P<0.01);与4-AP模型组比较,四君子汤多糖(20、40、80 mg/L)可逆转4-AP所致细胞迁移的抑制、kv1.1 mRNA和蛋白表达的降低(P<0.05或P<0.01)。结论:四君子汤多糖可促进IEC-6细胞迁移,作用机制与影响多胺调控信号通路钾通道蛋白表达和细胞膜电位有关。 展开更多
关键词 四君子汤多糖 小肠上皮细胞(iec-6) 细胞迁移 多胺信号通路 钾通道蛋白 细胞膜电位
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唐古特大黄多糖促进IEC-6细胞增殖、移行作用及其可能的机制研究 被引量：9
8
作者 刘琳娜 梅其炳 +3 位作者 王志鹏 张琰 刘莉 刘新友 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期303-307,共5页
目的观察唐古特大黄多糖组分之一(RTP1)对大鼠小肠隐窝上皮细胞株(IEC-6)细胞增殖、移行及其对细胞内鸟氨酸脱羧酶(ODC)活性和ODC蛋白表达的影响,观察其对胃肠黏膜的修复作用并探讨可能的机制。方法采用MTT法和体外肠上皮细胞移行模型,... 目的观察唐古特大黄多糖组分之一(RTP1)对大鼠小肠隐窝上皮细胞株(IEC-6)细胞增殖、移行及其对细胞内鸟氨酸脱羧酶(ODC)活性和ODC蛋白表达的影响,观察其对胃肠黏膜的修复作用并探讨可能的机制。方法采用MTT法和体外肠上皮细胞移行模型,观察不同剂量的RTP1(10、30、100mg·L-1)处理IEC-6细胞24h后,细胞增殖和移行情况;Western blot检测ODC蛋白表达;通过测定L-[1-14C]鸟氨酸释放14CO2的量来检测ODC活性变化。结果RTP1在10、30、100mg·L-1时均可明显促进IEC-6细胞的增殖和移行,可增加ODC蛋白表达和ODC活性,并具有剂量依赖性,与空白对照组相比差异具有显著性(P<0·05或0·01)。结论RTP1可促进肠上皮细胞的增殖和移行,提示RTP1可能对肠黏膜的损伤修复具有直接作用。其作用机制可能与鸟氨酸脱羧酶表达增加和(或)活性增大有关。 展开更多
关键词 唐古特大黄多糖 iec-6细胞 增殖 移行 鸟氨酸脱羧酶
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白术内酯对IEC-6细胞及食管癌细胞ECA9706增殖能力的影响 被引量：18
9
作者 高小玲 汪保英 +2 位作者 尹素改 张钟允 陈玉龙 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期921-923,共3页
目的:观察白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对IEC-6细胞及食管癌细胞ECA9706增殖能力的影响。方法:细胞种植于96孔板,24h后分别加入白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ200、100、50、25、12.5、6.25μg/m L,放置培养箱48h后,MTT法检测白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ不同剂量对IE... 目的:观察白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对IEC-6细胞及食管癌细胞ECA9706增殖能力的影响。方法:细胞种植于96孔板,24h后分别加入白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ200、100、50、25、12.5、6.25μg/m L,放置培养箱48h后,MTT法检测白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ不同剂量对IEC-6细胞及ECA9706细胞增殖能力的影响。结果:白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ随着剂量的增加,呈现从增殖到抑制的作用,其中以白术内酯Ⅰ50μg/m L对IEC-6细胞增殖率效果最佳,白术内酯Ⅱ小剂量对IEC-6细胞作用不明显,但是随着剂量的增加,呈现抑制作用;白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ200、100、50μg/m L均能抑制ECA9706细胞的增殖,其中以白术内酯Ⅱ效果明显。结论:白术内酯Ⅰ可能是白术健脾的有效成分,而白术内酯Ⅱ可能是抑制肿瘤细胞增殖的主要成分之一。 展开更多
关键词 白术内酯 增殖 iec-6细胞 ECA9706细胞
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IEC-6细胞迁移药理实验模型建立的研究(英文) 被引量：12
10
作者 胡灿 李茹柳 +3 位作者 卢文彪 羊燕群 王静 陈蔚文 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期738-746,共9页
建立适合肠上皮整复研究的IEC-6细胞迁移药理实验模型,并观察黄芪糖复合物对细胞迁移的影响。方法：设立不同的细胞接种密度、划痕后观察时间、辅助材料Matrigel浓度、血清饥饿处理法、细胞迁移抑制剂DF-MO（二氟甲基鸟氨酸）浓度等以... 建立适合肠上皮整复研究的IEC-6细胞迁移药理实验模型,并观察黄芪糖复合物对细胞迁移的影响。方法：设立不同的细胞接种密度、划痕后观察时间、辅助材料Matrigel浓度、血清饥饿处理法、细胞迁移抑制剂DF-MO（二氟甲基鸟氨酸）浓度等以考察模型的建立条件,并在已建立的模型上观察受试药的效果。结果：①细胞宜以4×105/mL接种6孔板;②宜划痕后24 h观察细胞迁移数;③5%Matrigel为适宜浓度;④血清饥饿可造成细胞迁移数明显减少,应使用含血清的培养液。⑤DFMO 2.5~5 mmol/L为抑制细胞迁移适宜浓度。⑥黄芪糖复合物及阳性药精脒能促进细胞迁移。结论：建立了适宜药理实验的IEC-6细胞迁移模型,在此模型上可反映受试药对细胞正常迁移及迁移抑制的药效作用。 展开更多
关键词 iec-6 胃肠黏膜损伤 细胞迁移
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醋制降低京大戟对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6毒性研究 被引量：14
11
作者 曹雨诞 颜晓静 +1 位作者 张丽 丁安伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1069-1074,共6页
目的:比较京大戟醋制前后对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6的毒性差异,初步探讨京大戟醋制减毒机制。方法:以大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6为研究对象,采用MTT法检测京大戟醋制前后对IEC-6细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察醋制前后对细胞形... 目的:比较京大戟醋制前后对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6的毒性差异,初步探讨京大戟醋制减毒机制。方法:以大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6为研究对象,采用MTT法检测京大戟醋制前后对IEC-6细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察醋制前后对细胞形态的影响;采用高内涵细胞成像系统(HCS)分析醋制降低肠细胞线粒体凋亡通路。结果:与阴性对照组比较,增殖抑制实验显示京大戟生品具有较强的肠细胞毒性(P<0.01),HCS分析结果显示京大戟可显著降低细胞核Hoechst荧光强度、线粒体膜电位荧光强度(P<0.05,P<0.01),并显著增加Annexin V-FITC和PI荧光强度、细胞膜通透性荧光强度(P<0.01,P<0.01,P<0.01);醋制后与京大戟生品各剂量组比较,京大戟醋品可显著降低京大戟生品对肠细胞的增殖抑制作用,增加细胞核Hoechst荧光强度、线粒体膜电位荧光强度(P<0.05,P<0.05),降低Annexin V-FITC和PI荧光强度、细胞膜通透性荧光强度(P<0.01,P<0.01,P<0.05),且呈一定的剂量相关性。结论:醋制可降低京大戟对肠细胞的毒性,其可能机制为通过降低京大戟对IEC-6细胞膜通透性,从而为进一步阐明京大戟醋制减毒机制提供了一定的依据。 展开更多
关键词 京大戟 醋制 大鼠小肠隐窝上皮细胞(iec-6) 高内涵细胞成像系统(HCS)
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不同伤情血清可有效激活IEC-6细胞PI3K/Akt通路 被引量：6
12
作者 王锋超 王涛 +6 位作者 艾国平 王军平 冉新泽 杜智勇 李军 徐辉 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期518-520,共3页
目的检测不同伤情血清对肠上皮细胞PI3K/Akt通路的激活。方法将对数生长期的IEC-6细胞无血清培养基培养24 h后,加入单放、单烧和复合伤24 h大鼠血清,并设正常大鼠血清组和无血清组作对照,刺激12 h后检测细胞AKT磷酸化水平。利用SELD I(s... 目的检测不同伤情血清对肠上皮细胞PI3K/Akt通路的激活。方法将对数生长期的IEC-6细胞无血清培养基培养24 h后,加入单放、单烧和复合伤24 h大鼠血清,并设正常大鼠血清组和无血清组作对照,刺激12 h后检测细胞AKT磷酸化水平。利用SELD I(surfaced enhanced laser desorption/ion ization)蛋白质芯片技术对单放、单烧、复合伤24 h大鼠血清差异蛋白进行筛选和分析。结果单放、单烧和复合伤24 h大鼠血清刺激后的IEC-6细胞Akt磷酸化水平较正常大鼠血清刺激的高,其中烧伤组最高。单放组血清与单烧血清比较有11个差异峰,复合伤组与单烧组相比有6个差异峰。结论单放、单烧和复合伤血清均可有效激活IEC-6细胞的PI3K/Akt通路,烧伤组最强,可能和烧伤组血清特殊变化有关。 展开更多
关键词 P13K/AKT iec-6 血清 烧伤 放射 复合伤 SELDI
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灵芝多糖对IEC-6细胞促增殖、迁移与分化作用 被引量：5
13
作者 陈丽华 李卫东 +3 位作者 杨菁 张佳琦 秦莹 林志彬 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期270-272,273,共4页
目的通过灵芝多糖作用于体外培养的大鼠小肠隐窝细胞株IEC-6细胞,观察灵芝多糖对IEC-6细胞增殖、迁移与分化的影响。方法不同浓度的灵芝多糖作用于正常IEC-6细胞44h后,用噻唑蓝(MTT)法测细胞的增殖。灵芝多糖预作用IEC-6细胞46h后,用500... 目的通过灵芝多糖作用于体外培养的大鼠小肠隐窝细胞株IEC-6细胞,观察灵芝多糖对IEC-6细胞增殖、迁移与分化的影响。方法不同浓度的灵芝多糖作用于正常IEC-6细胞44h后,用噻唑蓝(MTT)法测细胞的增殖。灵芝多糖预作用IEC-6细胞46h后,用500μmol·L-1H2O2刺激IEC-6细胞40min,以MTT法测细胞的增殖变化。采用IEC-6单层肠上皮细胞损伤重建模型,检测灵芝多糖对IEC-6细胞迁移的影响,并用ELISA方法检测培养细胞上清中TGF-β的含量以探讨迁移途径。对细胞进行HE染色来观察IEC-6细胞的分化情况。结果灵芝多糖对正常及受H2O2损伤后的IEC-6细胞均有促增殖作用,并呈量效关系;10mg·L-1灵芝多糖可促进受损IEC-6细胞的迁移,但对细胞上清中TGFβ含量无影响。在10mg·L-1灵芝多糖作用下,IEC-6细胞分化程度增高。结论灵芝多糖可以促进IEC-6细胞增殖、迁移与分化。其促迁移作用是非依赖TGFβ途径的。 展开更多
关键词 灵芝多糖 iec-6细胞 增殖 迁移 分化
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IEC-6细胞的培养鉴定和生长特性研究 被引量：5
14
作者 陈祥贵 芮光伟 +3 位作者 任川洪 王瑞淑 王志民 冉新泽 《四川工业学院学报》 CAS 2003年第1期41-44,共4页
大鼠肠上皮细胞株IEC 6具有正常的未分化的肠上皮隐窝细胞的特征 ,在营养学研究中具有重要应用价值。本研究采用相差显微镜、透射电镜、扫描电镜等技术观察细胞形态结构 ,采用MTT法研究血清和血清替代品对ICE 6细胞生长的影响。结果表... 大鼠肠上皮细胞株IEC 6具有正常的未分化的肠上皮隐窝细胞的特征 ,在营养学研究中具有重要应用价值。本研究采用相差显微镜、透射电镜、扫描电镜等技术观察细胞形态结构 ,采用MTT法研究血清和血清替代品对ICE 6细胞生长的影响。结果表明 :引进的IEC 6细胞具有典型的正常肠上皮隐窝细胞的形态特征、超微结构和生长特性 ,表明的细胞株未发生转化或变异。不同的血清和血清替代品对细胞增殖的效应有差异 ,2 %的透析胎牛血清能维持细胞良好的增殖状态 ,可用于研究正常培养条件下外源核苷酸对肠上皮细胞的作用。 展开更多
关键词 iec-6细胞 鉴定 生长特性 细胞培养 细胞增殖 透析血清 肠上皮细胞 形态特征 超微结构 营养素
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白术提取物对IEC-6细胞迁移过程Rho GTPaes及肌球蛋白II表达的影响 被引量：7
15
作者 李茹柳 宋厚盼 +3 位作者 伍婷婷 涂小华 林传权 陈蔚文 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期739-743,共5页
目的观察白术提取物对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移多胺介导钾通道激活信号通路指标Rho GTPaes(Rho A、Rac1和Cdc42)表达的影响,对肌球蛋白II(myosinⅡ)分布和表达的影响,以探讨益气健脾中药白术对胃肠黏膜损伤修复的作用机制。方法荧光定量... 目的观察白术提取物对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移多胺介导钾通道激活信号通路指标Rho GTPaes(Rho A、Rac1和Cdc42)表达的影响,对肌球蛋白II(myosinⅡ)分布和表达的影响,以探讨益气健脾中药白术对胃肠黏膜损伤修复的作用机制。方法荧光定量PCR法检测Rho A、Rac1和Cdc42 mRNA表达;Western blot法检测Rho A、Rac1和Cdc42蛋白表达;免疫荧光法检测myosinⅡ蛋白分布和表达。结果白术提取物能提高细胞迁移过程Rho A、Rac1、Cdc42 mRNA和蛋白表达,逆转多胺合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)所致的Rho A、Rac1、Cdc42 mRNA和蛋白表达抑制;提高细胞迁移过程myosinⅡ表达,从而增加细胞骨架应力纤维形成,改善DFMO所致的myosinⅡ蛋白表达和分布的抑制。结论白术提取物促进IEC-6细胞迁移的作用机制,与其影响多胺介导钾通道激活信号通路有关。 展开更多
关键词 白术提取物 iec-6 细胞迁移 RHO GTPaes 肌球蛋白Ⅱ
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苏氨酸对大鼠小肠上皮细胞系IEC-6细胞活性和紧密连接蛋白表达的影响 被引量：4
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作者 任曼 黄金歌 +4 位作者 靳二辉 车传燕 胡倩倩 周金星 李升和 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期4081-4086,共6页
本研究旨在探讨苏氨酸对大鼠小肠上皮细胞活性和增殖的影响,并研究苏氨酸是否对大鼠小肠上皮细胞紧密连接蛋白表达具有调控作用。试验采用不同浓度的苏氨酸(0、0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 mmol/L)处理大鼠小肠上皮细胞系IEC-6细胞24 h,... 本研究旨在探讨苏氨酸对大鼠小肠上皮细胞活性和增殖的影响,并研究苏氨酸是否对大鼠小肠上皮细胞紧密连接蛋白表达具有调控作用。试验采用不同浓度的苏氨酸(0、0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 mmol/L)处理大鼠小肠上皮细胞系IEC-6细胞24 h,用噻唑兰(MTT)法测定IEC-6细胞活性,苏木精-伊红(HE)染色观察IEC-6细胞增殖情况,Western-blot法检测IEC-6细胞紧密连接蛋白表达情况。结果表明:各浓度的苏氨酸均能不同程度地提高IEC-6细胞的活性,0.5 mmol/L苏氨酸处理24 h时IEC-6细胞的活性最高,且与未经苏氨酸处理的对照组差异显著(P<0.05)。不同浓度的苏氨酸均能促进IEC-6细胞的增殖,且在苏氨酸浓度为0.5 mmol/L时促增殖作用最明显。与未经苏氨酸处理的对照组相比,0.1 mmol/L的苏氨酸对紧密连接蛋白claudin-3的表达未产生显著影响(P>0.05),但显著促进了occludin的表达(P <0.05);苏氨酸浓度为0.5、1.0、5.0、10.0 mmol/L时均显著促进上述2种紧密连接蛋白的表达(P <0.05),使claudin-3的相对表达量分别增加了1.84、7.08、8.71、3.83倍,occludin的相对表达量分别增加了2.65、2.71、2.82、3.88倍。综上,适宜浓度的苏氨酸对大鼠小肠上皮细胞系IEC-6细胞的活性和增殖具有促进作用,且在浓度为0.5 mmol/L时作用最显著,同时促进了紧密连接蛋白claudin-3和occludin的表达。 展开更多
关键词 苏氨酸 iec-6细胞 活性 增殖 紧密连接蛋白
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黄芪注射液通过激活鸟氨酸脱羧酶促进IEC-6细胞分化的研究 被引量：18
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作者 张子理 陈蔚文 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期439-443,共5页
目的 :观察黄芪注射液 (Astragalusinjection ,AI)对小肠隐窝细胞株 (IEC 6 )增殖、分化、移行及其对细胞内鸟氨酸脱羧酶 (ODC)和多胺含量的影响 ,探讨其粘膜修复的作用机理。方法 :IEC 6细胞接种后 2 4h ,加入AI。加药后 12h收获细胞 ... 目的 :观察黄芪注射液 (Astragalusinjection ,AI)对小肠隐窝细胞株 (IEC 6 )增殖、分化、移行及其对细胞内鸟氨酸脱羧酶 (ODC)和多胺含量的影响 ,探讨其粘膜修复的作用机理。方法 :IEC 6细胞接种后 2 4h ,加入AI。加药后 12h收获细胞 ,分别检测ODCmRNA水平、ODC蛋白、ODC活性及细胞内腐胺含量 ;2 4h观察细胞增殖和细胞分化 ;细胞接种后 72h损伤细胞 ,并加入AI ,加药后 2 4h、4 8h及 72h观察细胞移行。结果 :AI能明显抑制IEC 6细胞增殖 ,促进细胞分化 ,对细胞移行无明显影响。AI 6 2 5～ 2 5 0 μg/ml各剂量组可明显增加ODCmRNA水平 ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5～ 0 0 1)。AI各剂量组对ODC蛋白均无明显影响。AI随着剂量增加 ,逐渐升高IEC 6细胞ODC活性和腐胺含量 ,具有剂量依赖关系。结论 :AI通过诱导IEC 6细胞ODC活性和多胺的生物合成促进细胞分化 。 展开更多
关键词 黄芪注射液 鸟氨酸脱羧酶 iec-6细胞 分化 研究
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组蛋白乙酰化修饰对IEC-6恶性转化细胞细胞周期和p53、p21^(WAF1)基因表达的调控 被引量：3
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作者 王燕 郭乔楠 +2 位作者 章波 许雪青 白云 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期300-303,共4页
目的分析和探讨IEC-6恶性转化细胞不同时期组蛋白乙酰化修饰对肿瘤发生相关基因表达的影响。方法采用我们已建立的3个转化期(化学致癌剂MNNG和诱导剂PMA共同作用6、12、24次)的IEC-6转化细胞进行培养,提取不同转化时期的IEC-6转化细胞... 目的分析和探讨IEC-6恶性转化细胞不同时期组蛋白乙酰化修饰对肿瘤发生相关基因表达的影响。方法采用我们已建立的3个转化期(化学致癌剂MNNG和诱导剂PMA共同作用6、12、24次)的IEC-6转化细胞进行培养,提取不同转化时期的IEC-6转化细胞的细胞核蛋白,采用免疫印迹检测H3乙酰化水平;并用ChIP及RT-PCR检测组蛋白H3乙酰化对p21WAF1表达的影响。结果24次IEC-6恶性转化细胞组蛋白H3乙酰化水平高于6次IEC-6转化细胞,而组蛋白H3去乙酰化水平低于6次IEC-6转化细胞;同时发现p21WAF1的启动子区PCR产物减少。在6、12次IEC-6转化细胞中均有较弱的p53、p21WAF1表达;在24次IEC-6恶性转化细胞中仍可检测到较弱的p53表达,但p21WAF1表达缺如。结论IEC-6恶性转化细胞过程中,组蛋白H3乙酰化水平增高,导致p21WAF1基因表达受抑,近而可能影响转化细胞的细胞周期。 展开更多
关键词 iec-6细胞 组蛋白乙酰化 P53 P21WAF1
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四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的影响 被引量：7
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作者 韩凌 王培训 韩冰 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2005年第11期1208-1209,共2页
目的:研究四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的影响。方法:以IEC-6细胞为研究对象,采 用MTT比色法,观察四君子汤总多糖时正常及消炎痛作用下该细胞增殖的影响。结果:四君子汤总多糖不同剂量于不同 的培养时间对IEC-6细胞的... 目的:研究四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的影响。方法:以IEC-6细胞为研究对象,采 用MTT比色法,观察四君子汤总多糖时正常及消炎痛作用下该细胞增殖的影响。结果:四君子汤总多糖不同剂量于不同 的培养时间对IEC-6细胞的生长均有促进作用,当采用消炎痛造成IEC-6细胞生长抑制模型时,四君子汤总多糖可使其 恢复至正常水平。结论:四君子汤总多糖具有促进IEC-6细胞增殖的作用,它可能通过对小肠上皮细胞增殖的影响而发 挥对肠道黏膜吸收和免疫功能的调整作用。 展开更多
关键词 四君子汤多糖 iec-6细胞株 脾虚 实验研究
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外源核苷酸对IEC-6细胞凋亡的影响 被引量：3
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作者 陈祥贵 王瑞淑 +2 位作者 邓茂先 冉新泽 粟永萍 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期701-704,共4页
目的探讨外源核苷酸对正常肠上皮细胞系IEC6凋亡的作用。方法体外培养的IEC6细胞经4种单核苷酸及按母乳组成模式配制的核苷酸混合物处理,然后采用流式细胞术、电子显微镜等方法观测细胞凋亡。结果流式细胞检测表明嘌呤核苷酸AMP和GMP均... 目的探讨外源核苷酸对正常肠上皮细胞系IEC6凋亡的作用。方法体外培养的IEC6细胞经4种单核苷酸及按母乳组成模式配制的核苷酸混合物处理,然后采用流式细胞术、电子显微镜等方法观测细胞凋亡。结果流式细胞检测表明嘌呤核苷酸AMP和GMP均能诱导细胞凋亡,但电子显微镜观察发现仅有AMP诱导典型的细胞凋亡特征。嘧啶核苷酸和核苷酸混合物不诱导细胞凋亡,而且嘧啶核苷酸UMP能解除嘌呤核苷酸诱导细胞凋亡的作用。结论嘌呤核苷酸可诱导肠上皮细胞凋亡,嘧啶核苷酸UMP可解除嘌呤核苷酸的凋亡诱导作用。 展开更多
关键词 外源核苷酸 iec-6 细胞凋亡
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