禽传染性支气管炎病毒H52反向遗传株的构建 被引量：2

1

作者 许记刚 王红宁 +2 位作者 杨鑫 李然 姬高升 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期664-670,共7页

IBV H52基因组全长27.6kb,分13个1.3~2.9kb的片段扩增H52全长cDNA,额外扩增N-3′片段,并克隆到载体PMD19-T上.利用No see′m技术在每个片段中引入BsaⅠ或BsmBⅠ酶切位点,D1片段中引入沉默突变位点,在5′UTR端和N-3′引入T7启动子,3′UT... IBV H52基因组全长27.6kb,分13个1.3~2.9kb的片段扩增H52全长cDNA,额外扩增N-3′片段,并克隆到载体PMD19-T上.利用No see′m技术在每个片段中引入BsaⅠ或BsmBⅠ酶切位点,D1片段中引入沉默突变位点,在5′UTR端和N-3′引入T7启动子,3′UTR端引入Poly(A)尾.将克隆好的13个片段酶切,纯化,体外无缝连接为全长cDNA.将全长cDNA及N-3′体外转录获得它们的转录体,将转录体共转染BHK-21细胞,48h后收获细胞液,将细胞液接种10日龄SPF鸡胚获得反向遗传株H52-R.在鸡胚中盲传5代后,通过RT-PCR对无义突变位点进行扩增及序列分析,在反向株H52-R中发现引入的无义突变位点.对反向株H52-R的一些生物学特性如HA、EID50等测定发现,H52-R的这些生物学特性与亲本株H52相似. 展开更多

关键词 IBV h52 反向遗传 h52-R

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鸡传染性支气管炎病毒H52株TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：7

2

作者 梁耀峰 郭霄峰 +1 位作者 宋立 刘洋 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第4期169-173,共5页

本研究建立了一种快速的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52株定量检测方法,为进一步研究疫苗的效价检测和质量监控新方法奠定基础。针对IBV核蛋白(N)基因,设计特异的H52株荧光定量PCR检测引物和TaqMan-MGB探针,优化反应体系和条件后进行特... 本研究建立了一种快速的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52株定量检测方法,为进一步研究疫苗的效价检测和质量监控新方法奠定基础。针对IBV核蛋白(N)基因,设计特异的H52株荧光定量PCR检测引物和TaqMan-MGB探针,优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验,探讨荧光定量RT-PCR与EID50方法测定病毒含量的相关性,并通过体外转录技术对病毒基因拷贝数进行定量分析。该方法特异性强,与其他禽源病毒均无交叉反应;该方法可检测到5.60×101拷贝/μL的病毒核酸,与常规PCR相比,敏感性高10倍;重复性试验的变异系数为0.9%～3.2%;与EID50检测结果的相关系数r=0.934,两种方法在检测H52株病毒效价上具有很好的相关性。本研究建立的TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法,适合于对鸡传染性支气管炎病毒H52株病毒含量的快速定量检测。 展开更多

关键词 荧光定量RT-PCR TAQMAN-MGB探针 鸡传染性支气管炎病毒 h52

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传染性支气管炎病毒疫苗株H52的全基因组克隆与分析 被引量：1

3

作者 肖朝庭 时莉 +3 位作者 宋翥远 刘然 阿合买提.买买提 周继勇 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第2期17-23,共7页

采用RT-PCR方法克隆测定传染性支气管炎病毒（Infections Bronchitis Virus，IBV）疫苗株H52全基因组序列，并与其它已知全基因组序列的我国分离株进行比较分析，以分析我国IBV地方分离株与疫苗株的分子遗传关系。结果表明，H52基因组... 采用RT-PCR方法克隆测定传染性支气管炎病毒（Infections Bronchitis Virus，IBV）疫苗株H52全基因组序列，并与其它已知全基因组序列的我国分离株进行比较分析，以分析我国IBV地方分离株与疫苗株的分子遗传关系。结果表明，H52基因组全长为27630bp（不包括polyA），A＋T含量为61．8％，它与我国IBV分离株全基因组同源性在83．9％～95．2％之间，其中与KQ6的同源性最高（95．2％），与其余株均在88％以下。在基因组内基因的同源性中，以S1、S2与E变异最大，除KQ6外，其余各株（含台湾株）与H52在S1蛋白上的同源性只有72．4％～80．7％，在S2蛋白上的同源性为85．5％～88．1％，E蛋白为82．9％～93．3％。系统进化分析表明，国内分离株，除KQ6外，在进化分支中已独立于H52和其它Massachusetts型衍生毒株。H52与我国地方分离株存在较大的分子遗传差异，这些差异可能导致单纯Massachusetts型疫苗（如H120，H52）不能有效地免疫保护我国的鸡群。 展开更多

关键词 传染性支气管炎病毒 疫苗株h52 克隆

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秃疮花针剂抗鸡NDV和IBV-H52试验 被引量：4

4

作者 苟想珍 党岩 +7 位作者 马志宏 孙春香 张莉敏 常亮 陈德坤 杨增歧 李引乾 杨鸣琦 《畜牧兽医杂志》 2015年第1期5-8,共4页

为了确定秃疮花针剂的抗病毒临床应用剂量标准,试验用甘肃省畜牧兽医研究所研制的秃疮花针剂,以Reed-Muensch法和血凝实验进行了鸡胚的毒性试验及抗鸡NDV、IBV-H52试验.结果表明,秃疮花针剂在18～36倍稀释时对鸡ND病毒和对鸡传染性支气... 为了确定秃疮花针剂的抗病毒临床应用剂量标准,试验用甘肃省畜牧兽医研究所研制的秃疮花针剂,以Reed-Muensch法和血凝实验进行了鸡胚的毒性试验及抗鸡NDV、IBV-H52试验.结果表明,秃疮花针剂在18～36倍稀释时对鸡ND病毒和对鸡传染性支气管炎H52病毒有一定的抑制作用,为探索秃疮花针剂的抗病毒机理和秃疮花针剂的临床应用奠定了基础. 展开更多

关键词 秃疮花针剂 NDV IBV-h52 病毒抑制试验

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鸡传染性支气管炎病毒H52毒株S基因的克隆及序列分析

5

作者 程丽琴 周继勇 +2 位作者 沈行燕 陈吉刚 陈声明 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期303-306,共4页

将含有鸡传染性支气管炎病毒 (IBV) H5 2毒株的尿囊液浓缩 ,用 TRIzol试剂抽提病毒 RNA作为反转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)的模板 ,参照已发表的 IBV- Beaudette株 S基因序列 ,设计并合成一对特异性引物 ,扩增得到长度约 3.6 kb的 S基... 将含有鸡传染性支气管炎病毒 (IBV) H5 2毒株的尿囊液浓缩 ,用 TRIzol试剂抽提病毒 RNA作为反转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)的模板 ,参照已发表的 IBV- Beaudette株 S基因序列 ,设计并合成一对特异性引物 ,扩增得到长度约 3.6 kb的 S基因片段 ,利用引物设计中 Eco R I和 Bam H I酶切位点插入到克隆载体 p Blue Script SK的多克隆位点中 ,转化感受态 E.coli DH5 α。经酶切分析和 PCR等方法鉴定 ,筛选出阳性克隆 ,进行核苷酸序列测定 ,证实获得了 S基因的全长序列。利用 DNAstar等分析软件与 Gen Bank中其它 IBV毒株的核苷酸及其推导的氨基酸进行序列同源性比较分析 ,结果表明 ,H5 2毒株与已报道的核苷酸的同源性在 83.4 5 %～ 99.71%之间 ,氨基酸的同源性在 82 .10 %～ 99.2 6 %之间。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒h52毒株 S基因 克隆 序列分析

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鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52疫苗株S1基因的克隆与序列测定 被引量：2

6

作者 朱毓永 张利平 赵宝华 《河北师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2003年第4期406-409,共4页

根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)S1基因序列 ,设计了一对引物并以RTPCR特异性扩增出IBVH5 2疫苗株的S1基因 ,基因产物大小为 1.62kb ,与设计相符 .对其进行序列测定后 ,与其他标准毒株H12 0 ,M 41,BEAU株的S1基因进行同源... 根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)S1基因序列 ,设计了一对引物并以RTPCR特异性扩增出IBVH5 2疫苗株的S1基因 ,基因产物大小为 1.62kb ,与设计相符 .对其进行序列测定后 ,与其他标准毒株H12 0 ,M 41,BEAU株的S1基因进行同源性比较 ,结果表明 ,H5 2株与H12 0 ,M 41和BEAU株的核苷酸序列的同源性分别为 91.1% ,96.9%和 96.8% ,由此可以看出 ,IBVH5 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 IBV h52疫苗 S1基因 基因克隆 序列测定 核苷酸序列 同源性

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Gordonia sp.H52对合成孕激素左炔诺孕酮的降解特性

7

作者 赖思华 张晋娜 +3 位作者 邓通初 王安国 陈乐天 许玫英 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2127-2140,共14页

【背景】合成孕激素左炔诺孕酮因其具有内分泌干扰效应而受到广泛关注,微生物在污染物降解和环境修复方面具有广泛的应用潜力,但目前对左炔诺孕酮在微生物降解中的特性和机理认识仍然有限。【目的】加速左炔诺孕酮污染的治理,亟须分离... 【背景】合成孕激素左炔诺孕酮因其具有内分泌干扰效应而受到广泛关注,微生物在污染物降解和环境修复方面具有广泛的应用潜力,但目前对左炔诺孕酮在微生物降解中的特性和机理认识仍然有限。【目的】加速左炔诺孕酮污染的治理,亟须分离获取左炔诺孕酮的高效降解菌并探究其降解机制。【方法】以养殖场的废水为接种物,选育出对左炔诺孕酮具有高效降解功能的菌株;基于菌株形态特征、生理生化特征及16S rRNA基因序列分析,确定菌株所属的分类层级;进而通过对左炔诺孕酮的降解动力学进行探究,同时结合菌株全基因组分析及降解产物谱图,确定菌株对左炔诺孕酮的降解特性。【结果】分离获得与Gordonia cholesterolivorans Chol-3的16S rRNA基因序列相似性达99.0%的Gordoniasp.H52,该菌株在18h内可以实现对0.5mg/L左炔诺孕酮的100%去除。液相色谱与串联质谱联用分析结果发现,菌株H52降解左炔诺孕酮后产生5种代谢产物,侧链炔基的裂解及脱羟基是该菌降解左炔诺孕酮的主要途径。该菌株还可以同时促进水体中多种合成孕激素的去除,使左炔诺孕酮的去除率由0%提高到91.06%、醋酸炔诺酮的去除率由37%提高到100%、孕二烯酮的去除率由0%提高到88.87%。【结论】Gordonia sp. H52对合成孕激素左炔诺孕酮表现出高效的降解特性,为合成孕激素污染水体的治理与修复提供了宝贵的菌种资源和理论参考。 展开更多

关键词 合成孕激素 左炔诺孕酮 Gordonia sp.h52 降解特性

原文传递

鸡传染性支气管炎耐热活疫苗的研究 被引量：2

8

作者 秦玉明 王利永 +1 位作者 朱良全 王栋 《中国家禽》 北大核心 2009年第22期11-14,共4页

应用鸡传染性支气管炎病毒(H52株)与不同耐热保护剂配方和冻干曲线进行筛选。结果表明:采用冻干曲线2和耐热保护剂WXS冻干鸡传染性支气管炎病毒H52弱毒疫苗效果最佳。试制耐热活疫苗3批,其各项检验均符合要求。耐老化试验表明:经过37℃... 应用鸡传染性支气管炎病毒(H52株)与不同耐热保护剂配方和冻干曲线进行筛选。结果表明:采用冻干曲线2和耐热保护剂WXS冻干鸡传染性支气管炎病毒H52弱毒疫苗效果最佳。试制耐热活疫苗3批,其各项检验均符合要求。耐老化试验表明:经过37℃放置10d的每羽份病毒含量下降0.6～0.8个滴度,每羽份病毒含量达104.7～105.1EID50。保存期试验表明:2～8℃保存24个月疫苗每羽份病毒含量下降0.4～0.6个滴度,每羽份病毒达104.1～104.3EID50。疫苗2～8℃保存24个月后效检抗体水平达到1∶16～1∶32。免疫持续期试验表明:免疫21日龄SPF鸡,6个月后血清中和抗体效价达到1∶32～1∶64。田间试验表明临床观察无不良反应,安全有效。特异性试验表明耐热活疫苗抗原性不变。耐热保护剂生物学和理化特性表明保护剂安全、稳定,室温保存期达3个月。 展开更多

关键词 耐热保护剂 鸡传染性支气管炎病毒(h52株) 活疫苗

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基于CANopen协议的伺服驱动器从站实现 被引量：4

9

作者 孙旋 蒋文凯 廖文琦 《制造业自动化》 2016年第5期9-13,共5页

针对伺服驱动器的多机应用要求实时性高、数据量大等特点,提出了基于CANopen总线协议的解决方案,采用了以F28M35H52C为主控制器的伺服驱动器硬件平台,着重分析并实现了CANopen协议中的协议结构、数据格式以及DS-301和DS-402子协议,使用... 针对伺服驱动器的多机应用要求实时性高、数据量大等特点,提出了基于CANopen总线协议的解决方案,采用了以F28M35H52C为主控制器的伺服驱动器硬件平台,着重分析并实现了CANopen协议中的协议结构、数据格式以及DS-301和DS-402子协议,使用台达CANopen主站设备与伺服驱动器建立CANopen网络实验环境。实验结果表明CANopen协议在伺服驱动器中可成功实现伺服驱动器的多机控制。 展开更多

关键词 F28M35h52C CANOPEN 现场总线 伺服驱动器

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一种精密控制直流电机伺服系统设计 被引量：8

10

作者 张磊 杜晓岚 《自动化技术与应用》 2016年第2期132-135,共4页

针对传统双闭环电动机调速系统跟随性差的缺点,采用带前馈控制的直流伺服三闭环控制系统,以TI双核单片机F28M35H52C为主控芯片,设计了直流电动机伺服控制系统的组成,包括电源模块、处理器及处理器外围电路、驱动电路、编码器的电平转换... 针对传统双闭环电动机调速系统跟随性差的缺点,采用带前馈控制的直流伺服三闭环控制系统,以TI双核单片机F28M35H52C为主控芯片,设计了直流电动机伺服控制系统的组成,包括电源模块、处理器及处理器外围电路、驱动电路、编码器的电平转换电路、电流采集信号的调理电路。 展开更多

关键词 伺服控制 三闭环 电路 F28M35h52C

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用H_(52)-S_4环氧厚浆涂料进行桥梁混凝土防碳化处理 被引量：3

11

作者 张文渊 《腐蚀与防护》 CAS 2003年第3期126-127,共2页

针对江苏省国营淮海农场早期建造的交通桥梁碳化情况 ,采用H52 S4 环氧厚浆涂料进行封闭保护处理 ,介绍了施工工艺及方法 。

关键词 h52-S4环氧厚浆涂料 桥梁混凝土 防碳化处理 防护

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API X52钢在饱和H_2S/CO_2的NACE溶液中的应力腐蚀开裂行为 被引量：2

12

作者 刁顺 袁羲 +1 位作者 田蕾 郭兴蓬 《石油与天然气化工》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期397-400,422,共5页

采用动电位扫描、渗氢测量、U形环试样浸泡等实验方法和SEM、EDS等表面分析技术对API X52钢在H_2S/CO_2饱和的NACE标准溶液中的应力腐蚀开裂行为进行了研究。结果表明:阳极极化下无SSCC敏感电位;API X52钢的稳态渗氢电流密度与SSCC敏感... 采用动电位扫描、渗氢测量、U形环试样浸泡等实验方法和SEM、EDS等表面分析技术对API X52钢在H_2S/CO_2饱和的NACE标准溶液中的应力腐蚀开裂行为进行了研究。结果表明:阳极极化下无SSCC敏感电位;API X52钢的稳态渗氢电流密度与SSCC敏感性随H^+浓度增加而增大;自腐蚀电位下,API X52钢的开裂机理是氢致开裂型和阳极溶解型两种机制的联合作用,阳极溶解型这种机制通过氢致开裂型起作用。 展开更多

关键词 X52钢H2S/CO2 应力腐蚀开裂 氢渗透 U形环

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喘咳停抗鸡传染性支气管炎病毒H_(52)株和M_(41)株感染的疗效试验 被引量：1

13

作者 薛树山 张喜臣 +2 位作者 刘欣 崔玉君 祝智国 《辽宁畜牧兽医》 2002年第4期1-2,共2页

本研究主要通过喘咳停抗传染性支气管炎病毒H52株（IBVH52）鸡胚感染抑制试验和传染性支气管炎病毒M41株（IBVM41）雏鸡感染治疗试验来了解其对病毒引起的鸡呼吸道感染的疗效。试验I分为A1（IBVH52）、A2（IBVH52+中药煎剂）、A3（中药... 本研究主要通过喘咳停抗传染性支气管炎病毒H52株（IBVH52）鸡胚感染抑制试验和传染性支气管炎病毒M41株（IBVM41）雏鸡感染治疗试验来了解其对病毒引起的鸡呼吸道感染的疗效。试验I分为A1（IBVH52）、A2（IBVH52+中药煎剂）、A3（中药煎剂）和A4（空白）4组,鸡胚接种后120小时,A2组（30％）鸡胚死亡率比A1组（80％）低50％,A3组、A4组全部存活;活胚平均重A2组（6克）明显大于A1组（3.3克）,与A3组（7.9克）和A4组（7.8克）接近。试验Ⅱ分B1（喘咳停）、B2（对照药）和B3（空白）3组,IBVM41株感染鸡治疗3天后,B1组鸡只痊愈,10天后剖检病变不明显;B2组鸡只呼吸道症状减轻,但个别鸡只有继发感染,剖检见呼吸道内有少量粘液,肺脏纹理清晰;B3组鸡死亡3只,呼吸道症状明显,剖检见呼吸道内有大量粘液,肺脏纹理极为明显。以上试验结果表明,喘咳停具有明显的抗呼吸道病毒IBVH52株和M41株感染的作用。 展开更多

关键词 喘咳停 鸡 传染性支气管炎病毒 h52株 M41株 疗效试验 胚重 死亡率

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52系列涂布机的研制

14

作者 吴仲明 《四川真空》 2000年第1期53-54,共2页

关键词 h52型 涂布机 技术指标 烫印材料 镀铝膜

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盘点美国战略轰炸机 被引量：1

15

作者 张庆 周振国 《国防科技》 2002年第6期43-45,共3页

冷战期间，为了抵消苏联在洲际弹道导弹上的数量优势，美国大力发展了战略轰炸机，使其载弹量、突防能力、航程都得到了空前的提高。苏联解体后，失去了竞争对手的美国在地区冲突中大打出手，无论是“沙漠之狐”还是“盟军力量”，轰炸... 冷战期间，为了抵消苏联在洲际弹道导弹上的数量优势，美国大力发展了战略轰炸机，使其载弹量、突防能力、航程都得到了空前的提高。苏联解体后，失去了竞争对手的美国在地区冲突中大打出手，无论是“沙漠之狐”还是“盟军力量”，轰炸机都成为侵略者手中的霸王鞭，在一些中小。 展开更多

关键词 美国 战略轰炸机 B-52H B-52轰炸机 B-1B轰炸机 B-2A轰炸机 作战性能 武器装备

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挂载12枚“联合直接攻击弹药”执行对伊拉克轰炸任务的B-52H远程战略轰炸机

16

《国防科技》 2003年第9期1-1,共1页

关键词 联合直接攻击弹药 战略轰炸机 B-52H型 伊拉克战争

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你想到了吗 静电引起自动跳台

17

作者 尹显松 《家电维修》 2005年第3期44-44,共1页

最近接到一块25英寸的汇佳彩电保修板．CPU为LC863532B-52H4。故障现象是：插上机壳上的按键小板．把主板放在壳内，开机10秒左右就出现自动跳台现象。很有规律地往上跳台，开始认为是按键板上的按钮漏电，拆下来一看却没有。为了慎重... 最近接到一块25英寸的汇佳彩电保修板．CPU为LC863532B-52H4。故障现象是：插上机壳上的按键小板．把主板放在壳内，开机10秒左右就出现自动跳台现象。很有规律地往上跳台，开始认为是按键板上的按钮漏电，拆下来一看却没有。为了慎重，重新换一新的按键板装机后还是如此。测量CPU⑨脚(键控输入)在跳台的时候电压有一点摆动，说明有电压信号来了。检查该脚外围元件没有发现什么，清洗了一遍板也没有用，更换了CPU也不行。但把按键板拔下来就发现问题了。 展开更多

关键词 彩电 CPU LC863532B-52H4 静电 显像管 故障 维修

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美国

18

《国防科技》 2003年第1期85-86,共2页

美国《每日航宇》2002年12月4日报道美国总审计局称，尽管美国国防部实施8年的先期概念技术演示项目(ACTD)在促进先进武器系统和新技术的应用方面取得了成功，但仍需要进行重大改进。ACTD项目与美国国防部的传统采购程序相比，效率更高... 美国《每日航宇》2002年12月4日报道美国总审计局称，尽管美国国防部实施8年的先期概念技术演示项目(ACTD)在促进先进武器系统和新技术的应用方面取得了成功，但仍需要进行重大改进。ACTD项目与美国国防部的传统采购程序相比，效率更高。传统的从概念探索到批量生产实施过程一般历时10-15年；而ACTD的实施一般只有2-6年，主要是对已经研制出的原型机进行试验。 展开更多

关键词 美国 总审计局 概念技术演示项目 TDRS—J 通信卫星 EA-6B电子干扰机 EB-52H电子干扰机

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美将在关岛部署6架B-52H轰炸机

19

作者 谭新木 潘云召 《世界航空航天博览（B版）》 2004年第03B期107-107,共1页

关键词 美国军队 B-52H轰炸机 军事部署 关岛 战斗力

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X—51A验证机成功完成首次试飞 被引量：1

20

作者 温杰 《国际航空》 2010年第6期12-14,共3页

5月26日上午，美国空军第419飞行中队的一架B-52H轰炸机从爱德华空军基地起飞，携带着X一51A验证机，执行首次飞行试验任务。大约10时10分，X-51A验证机从载机的左侧机翼下脱离，经过助推和分离阶段后，顺利实现了超燃冲压发动机的点火... 5月26日上午，美国空军第419飞行中队的一架B-52H轰炸机从爱德华空军基地起飞，携带着X一51A验证机，执行首次飞行试验任务。大约10时10分，X-51A验证机从载机的左侧机翼下脱离，经过助推和分离阶段后，顺利实现了超燃冲压发动机的点火和加速，总共持续飞行了200秒，使飞行速度达到了马赫数5。 展开更多

关键词 验证机 B-52H轰炸机 爱德华空军基地 超燃冲压发动机 飞行速度 试飞 美国空军 试验任务

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