nm23H_1、H-ras基因在大肠癌中的表达与预后的关系 被引量：4

1

作者 华长江 殷广福 +1 位作者 许正昌 苏长青 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期291-293,共3页

关键词 大肠肿瘤 NM23-H1基因 h-ras基因 基因表达

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nm23-H_1和H-ras基因在大肠癌中的表达及其与淋巴结转移的关系 被引量：3

2

作者 华长江 殷广福 +1 位作者 苏长青 许正昌 《临床肿瘤学杂志》 CAS 1997年第4期24-26,共3页

目的:探讨nm23-H_1和H-ras基因对大肠癌淋巴结转移的预测价值。方法:采用原位分子杂交法检测57例大肠癌组织中nm23-H_1、H-ras的表达状况。结果:nm23-H_1的阳性表达率为42.1％(24/57),H-ras阳性表达率为61.4％(35/57),与组织学分类无相... 目的:探讨nm23-H_1和H-ras基因对大肠癌淋巴结转移的预测价值。方法:采用原位分子杂交法检测57例大肠癌组织中nm23-H_1、H-ras的表达状况。结果:nm23-H_1的阳性表达率为42.1％(24/57),H-ras阳性表达率为61.4％(35/57),与组织学分类无相关性;Dukes A+B组的nm23-H_1表达率显著高于C+D组(P<0.05),而H-ras则相反。结论:nm23H_1和H-ras基因的表达率与大肠癌淋巴结转移率分别呈正负相关(P<0.005),可用于淋巴结转移状况的预测,nm23-H_1的灵敏度为82.8％(24/29),H-ras的灵敏度为79.3％(23/29),联合检测则可相对提高预测的灵敏度(87.5％)。 展开更多

关键词 淋巴结转移 大肠癌组织 h-ras基因 nm23-H1 阳性表达率 原位分子杂交法 组织学分类 FAS基因 预测价值 联合检测

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人乳头状瘤病毒和p53基因及H-ras基因在喉癌细胞中的表达 被引量：1

3

作者 林山 陈智 +1 位作者 陈明华 王慧明 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2002年第4期231-234,共4页

目的 :研究喉癌细胞 p5 3基因、H - ras基因突变及其与人乳头状瘤病毒 (HPV)感染的关系 ,探讨其在喉癌发生发展中可能起的作用。方法 :采用分子生物学技术 ,包括聚合酶链反应、单链构型多态性分析、限制性内切酶长度多态性分析 ,及 DNA... 目的 :研究喉癌细胞 p5 3基因、H - ras基因突变及其与人乳头状瘤病毒 (HPV)感染的关系 ,探讨其在喉癌发生发展中可能起的作用。方法 :采用分子生物学技术 ,包括聚合酶链反应、单链构型多态性分析、限制性内切酶长度多态性分析 ,及 DNA序列分析等方法 ,对 2 8例喉癌进行人乳头状瘤病毒、p5 3基因及 H - ras基因检测。结果 :2 8例喉癌中有 5 0 %在 p5 3基因的第 7～ 8外显子有突变 ,其中 4例行 DNA序列分析表明均有碱基替换、插入或丢失 ;而 H- ras基因第 12密码子的突变率仅 3.5 7% ;高危型 HPV(HPV- 16或 - 18)感染在喉癌细胞中有一定的特异性 ,且与 p5 3基因突变有一定的相关性。结论 :在喉癌的发生发展过程中高危型 HPV感染和 p5 3基因突变起着重要的作用 ,且两者之间可能存在某种内在的联系。 展开更多

关键词 人乳头状瘤病毒 P53基因 h-ras基因 喉癌细胞 遗传学

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应用PCR-SSCP银染检测膀胱癌中H-ras基因突变 被引量：2

4

作者 许绍斌 郭萍 +3 位作者 陶玉芬 李泽惠 杨昭庆 褚嘉佑 《肿瘤防治杂志》 2002年第2期151-153,共3页

目的 :了解膀胱癌中H ras基因突变情况。方法 :应用PCR SSCP银染和DNA测序技术对 31例膀胱癌组织进行检测。结果 :H ras基因突变发生率为 38 7% ,突变位点在H ras基因的第 1外显子的第 12位密码子 ,由GGC变为GTC。结论 :H ras基因突变... 目的 :了解膀胱癌中H ras基因突变情况。方法 :应用PCR SSCP银染和DNA测序技术对 31例膀胱癌组织进行检测。结果 :H ras基因突变发生率为 38 7% ,突变位点在H ras基因的第 1外显子的第 12位密码子 ,由GGC变为GTC。结论 :H ras基因突变与膀胱癌的发生发展存在着一定的联系 ,H ras基因突变可望作为膀胱癌早期临床诊断有价值的指标。 展开更多

关键词 PCR-SSCP银染 检测 膀胱癌 h-ras基因突变

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非小细胞肺癌支气管灌洗液细胞中H-ras基因突变的检测

5

作者 于亮 李秀春 +1 位作者 魏丽 马雪银 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期460-460,共1页

关键词 非小细胞肺癌 支气管灌洗液 h-ras基因 支气管镜检查 PCR-RFLP

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吸烟肺癌患者H-ras基因检测的意义

6

作者 应可净 黄刚 +4 位作者 王选锭 周学莉 刘富光 张行 蔡心涵 《浙江医学》 CAS 1998年第7期389-390,396,共3页

采用纤维支气管镜毛刷,对27例吸烟肺癌患者和22例不吸烟肺癌患者的支气管脱落细胞应用PCR—RFLP方法进行H-ras基因检测,以探讨吸烟对肺癌患者H-ras基因突变的意义。结果49例肺癌中H-ras基因总突变为54％,其中吸烟的肺癌患者H-ras基因突... 采用纤维支气管镜毛刷,对27例吸烟肺癌患者和22例不吸烟肺癌患者的支气管脱落细胞应用PCR—RFLP方法进行H-ras基因检测,以探讨吸烟对肺癌患者H-ras基因突变的意义。结果49例肺癌中H-ras基因总突变为54％,其中吸烟的肺癌患者H-ras基因突变为71.4％,不吸烟的肺癌患者为31.8％,两者差异显著(P<0.01);肺鳞癌吸烟者突变为75％,明显高于不吸烟者的16.7％(P<0.05)。提示H-ras基因可能是烟草激活的一个特殊位点,吸烟是导致H-ras基因突变的重要因素。 展开更多

关键词 肺肿瘤 吸烟 h-ras基因

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肺部疾病支气管脱落细胞中H-Ras基因检测的应用

7

作者 张行 方永明 +3 位作者 蔡心涵 应可净 刘富光 郑树 《中国实验诊断学》 1998年第2期80-80,共1页

肺部疾病支气管脱落细胞中Ｈ－Ｒａｓ基因检测的应用张行方永明蔡心涵应可净刘富光郑树随着医学分子生物学技术的进展，基因诊断已应用于临床，但由于各种肿瘤细胞在术前不容易得到，使应用于肿瘤的基因诊断的开展受到一定的限制。我们... 肺部疾病支气管脱落细胞中Ｈ－Ｒａｓ基因检测的应用张行方永明蔡心涵应可净刘富光郑树随着医学分子生物学技术的进展，基因诊断已应用于临床，但由于各种肿瘤细胞在术前不容易得到，使应用于肿瘤的基因诊断的开展受到一定的限制。我们用纤维支气管镜刷取支气管脱落细胞，... 展开更多

关键词 肺肿瘤 支气管脱落细胞 h-ras基因 诊断

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人H-ras基因真核表达载体的构建及其对肿瘤细胞生长的促进作用 被引量：1

8

作者 张云静 冯滢滢 +5 位作者 徐小洁 王涛 张柯 梁迎春 张蓉 叶棋浓 《生物技术通讯》 CAS 2015年第2期190-193,共4页

目的:构建癌基因H-ras真核表达载体,并检测其对肿瘤细胞生长的作用。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增H-ras基因片段,将其插入p XJ-40-myc载体后转染人胚肾HEK293T细胞,用Western印迹检测该融合蛋白的表达;将重组质粒转染人肠癌HCT-116细... 目的:构建癌基因H-ras真核表达载体,并检测其对肿瘤细胞生长的作用。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增H-ras基因片段,将其插入p XJ-40-myc载体后转染人胚肾HEK293T细胞,用Western印迹检测该融合蛋白的表达;将重组质粒转染人肠癌HCT-116细胞和人肝癌Hep G2细胞,通过细胞生长曲线(CCK8法)对myc-H-ras影响肿瘤细胞生长的情况进行分析。结果:利用PCR技术,从乳腺文库中扩增出H-ras基因片段,并成功插入p XJ-40-myc载体;重组质粒转染HEK293T细胞,经Western印迹检测融合蛋白正确表达;细胞生长曲线结果显示,转染myc-H-ras的结肠癌HCT-116细胞和人肝癌Hep G2细胞比转染空载体的细胞生长快。结论:构建了人H-ras基因真核表达载体,为进一步研究ras基因在肿瘤细胞中的作用奠定了一定基础。 展开更多

关键词 h-ras基因 真核表达载体 肿瘤细胞

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宫颈癌组织中H-ras基因突变与高危型HPV感染关系的研究 被引量：1

9

作者 李鸣 叶珉 林厚怡 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1998年第4期289-292,共4页

采用ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＲＦＬＰ等方法检测５１例宫颈组织（其中宫颈癌标本３８例，正常宫颈组织标本１３例）中高危型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）－１６，１８感染情况及Ｈ－ｒａｓ基因突变情况。研究结果显示，宫颈组织中ＨＰＶ－１６，１... 采用ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＲＦＬＰ等方法检测５１例宫颈组织（其中宫颈癌标本３８例，正常宫颈组织标本１３例）中高危型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）－１６，１８感染情况及Ｈ－ｒａｓ基因突变情况。研究结果显示，宫颈组织中ＨＰＶ－１６，１８感染率为７４％（２８／３８），表明高危型ＨＰＶ－１６，１８是宫颈癌发生的重要因素。Ｈ－ｒａｓ基因突变率为２９％（１１／３８）。正常宫颈组织中上述检测结果均为阴性。Ｈ－ｒａｓ基因突变与多种肿瘤发生有关；显示该基因突变与宫颈癌发生有关，但不是早期事件，也不能作为临床恶变与预后判断的指标；Ｈ－ｒａｓ基因突变与ＨＰＶ－１６。 展开更多

关键词 宫颈癌 h-ras基因 高危型 人乳头瘤病毒

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沉默H-ras基因对人涎腺腺样囊性癌裸鼠移植瘤的抑制作用 被引量：1

10

作者 于利洁 王洁 +3 位作者 董福生 孔世奇 尹风任 冀建文 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期104-107,112,共5页

目的:构建H-ras靶向短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)质粒,研究其对人涎腺腺样囊性癌裸鼠成瘤的抑制作用及其对移植瘤细胞增殖活性及细胞凋亡率的影响。方法:构建含H-ras靶向特定序列的真核表达质粒pHRAS,稳定表达pHRAS质粒的细胞为... 目的:构建H-ras靶向短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)质粒,研究其对人涎腺腺样囊性癌裸鼠成瘤的抑制作用及其对移植瘤细胞增殖活性及细胞凋亡率的影响。方法:构建含H-ras靶向特定序列的真核表达质粒pHRAS,稳定表达pHRAS质粒的细胞为实验组,未处理的SACC-M细胞为对照组,建立裸鼠荷瘤模型,计算成瘤率;移植瘤原代培养检测质粒表达及瘤细胞增殖活性;免疫组织化学法检测瘤内H-ras蛋白表达;采用组织学观察、流式细胞术及TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况。结果:pHRAS质粒转染组成瘤率及肿瘤体积显著低于对照组,原代培养可见大量瘤细胞表达绿色荧光。实验组瘤内H-ras蛋白表达量明显减少,实验组肿瘤细胞凋亡率为(41.55±4.25)%,明显高于对照组的(4.73±1.35)%(P<0.05)。结论:shRNA沉默H-ras基因能抑制SACC-M细胞裸鼠皮下移植瘤的形成,在体内有效下调H-ras蛋白的表达,且对肿瘤细胞具有促凋亡作用。 展开更多

关键词 涎腺肿瘤 基因沉默 小鼠 裸 基因 h-ras

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野生型p16基因导入对膀胱癌细胞生长抑制和H-ras基因表达的调控 被引量：1

11

作者 武玉东 吴海 +1 位作者 马腾骧 吴长利 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 1998年第5期459-460,共2页

目的观察野生型p16基因对膀胱肿瘤细胞恶性表型及H-ras基因表达的影响。方法构建p16基因逆转录病毒表达载体,转染膀胱肿瘤细胞系EJ;应用Northern杂交检测外源p16基因及H-ras基因表达;流式细胞仪检测细胞周期;双层软琼脂培养检测细胞在... 目的观察野生型p16基因对膀胱肿瘤细胞恶性表型及H-ras基因表达的影响。方法构建p16基因逆转录病毒表达载体,转染膀胱肿瘤细胞系EJ;应用Northern杂交检测外源p16基因及H-ras基因表达;流式细胞仪检测细胞周期;双层软琼脂培养检测细胞在体外形成克隆的能力。结果转染p16基因后,肿瘤细胞生长速率降低,体外形成克隆的能力下降,细胞被抑制在G_0+G_1期,细胞内H-rasmRNA表达低于非转染细胞。结论增加细胞内野生型p16基因表达量能抑制突变的H-ras基因表达,从而抑制膀胱癌细胞的恶性增殖。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 P16基因 h-ras基因 基因表达

原文传递

H-ras原癌基因在乳腺癌转移中的作用研究

12

作者 张雅洁 何彦丽 +2 位作者 孙瑜 张惠球 黄书伟 《实用癌症杂志》 2001年第1期29-31,共3页

目的　研究H ras基因在乳腺癌转移中的作用及作为预测乳腺癌转移潜能指标的价值。方法　采用免疫组织化学LSAB法观察 76例乳腺癌、34例淋巴结转移灶和 8例乳腺纤维腺瘤组织中 p2 1蛋白、PCNA、CD44、ⅧRAg的表达情况 ;采用PCR RFLP法检... 目的　研究H ras基因在乳腺癌转移中的作用及作为预测乳腺癌转移潜能指标的价值。方法　采用免疫组织化学LSAB法观察 76例乳腺癌、34例淋巴结转移灶和 8例乳腺纤维腺瘤组织中 p2 1蛋白、PCNA、CD44、ⅧRAg的表达情况 ;采用PCR RFLP法检测 42例乳腺癌、6例乳腺纤维腺瘤H ras 12位密码子点突变状态。结果　 76例乳腺癌 p2 1蛋白阳性 5 8例 ,有淋巴结转移组阳性率明显高于无转移组 ,2组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。p2 1蛋白与CD 44、PCNA表达均呈正相关 (γ =0 .6 337,P <0 .0 1;γ =0 .30 44,P <0 .0 5 )。p2 1蛋白阳性组肿瘤间质血管密度 (IMVD )明显高于阴性组 ,2组比较有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　p2 1蛋白表达与乳腺癌淋巴结转移密切相关 ;与CD 44、IMVD联合检测可作为预测乳腺癌转移潜能敏感且准确的指标。 展开更多

关键词 h-ras基因 P21蛋白 乳腺癌 原癌基因 肿瘤转移

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妊娠早期小鼠子宫内膜原癌基因H-ras的表达 被引量：4

13

作者 朱瑾 周剑萍 +2 位作者 刘银坤 张炜 贺斌 《生殖医学杂志》 CAS 2002年第3期163-167,共5页

目的 :本实验检测原癌基因 H-ras的转录和翻译水平在妊娠早期小鼠子宫内膜的表达规律。方法 :采用反转录聚合酶链反应 ( RT-PCR)、免疫转移印迹 ( Western-blot)和免疫斑点印迹 ( Dot-blot)法。结果 :原癌基因 H-ras在妊娠早期小鼠子宫... 目的 :本实验检测原癌基因 H-ras的转录和翻译水平在妊娠早期小鼠子宫内膜的表达规律。方法 :采用反转录聚合酶链反应 ( RT-PCR)、免疫转移印迹 ( Western-blot)和免疫斑点印迹 ( Dot-blot)法。结果 :原癌基因 H-ras在妊娠早期小鼠子宫内膜的表达呈现两个峰值 ,分别为妊娠的第 1和第 6、7天。结论 :提示原癌基因 展开更多

关键词 子宫内膜 胚胎着床 原癌基因h-ras 基因表达 免疫转移印迹法 反转录聚合酶链反应

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食管癌组织H-ras基因的分离和初步分析

14

作者 丁少宏 王志华 +2 位作者 李伟 卢欣 吴旻 《科学通报》 1987年第24期1899-1901,共3页

在我国,食管癌是高发的癌症之一。通过从食管癌中分离转化基因,搞清其结构上的变化及活化机制,从分子水平探讨环境因素和遗传因素在食管癌发生中的作用,将有助于探索防治食管癌的有效途径。基于这一目的,我们以从人膀胱癌细胞系中分离... 在我国,食管癌是高发的癌症之一。通过从食管癌中分离转化基因,搞清其结构上的变化及活化机制,从分子水平探讨环境因素和遗传因素在食管癌发生中的作用,将有助于探索防治食管癌的有效途径。基于这一目的,我们以从人膀胱癌细胞系中分离出的转化基因(H-ras)为探针,对构建的一例食管癌组织的基因文库进行筛选,筛选出了H-ras基因,并对其结构进行了初步分析。 展开更多

关键词 初步分析 h-ras基因 转化基因 食管癌

原文传递

口腔癌中H-ras癌基因第12位密码子的G→T突变

15

作者 刘学锋 杨平 +3 位作者 伍欣星 赵文先 汪涚之 李铁军 《医学研究杂志》 1992年第4期25-25,共1页

癌基因是目前肿瘤研究中的活跃领域,口腔癌癌基因的研究正在引起人们的兴趣和重视。1989年,国外学者曾在两个口腔癌细胞株中发现H-ras癌基因的点突变,有关口腔癌实体瘤中H-ras癌基因的点突变研究,国内外尚未见报道。本研究采用分子生物... 癌基因是目前肿瘤研究中的活跃领域,口腔癌癌基因的研究正在引起人们的兴趣和重视。1989年,国外学者曾在两个口腔癌细胞株中发现H-ras癌基因的点突变,有关口腔癌实体瘤中H-ras癌基因的点突变研究,国内外尚未见报道。本研究采用分子生物学新技术——聚合酶链反应(PCR),先在体外放大口腔癌DNA中H-ras的亚基因片段,H-ras第12位密码子顺序位于该放大片段内。 展开更多

关键词 h-ras癌基因 口腔癌 癌细胞株 聚合酶链反应 寡核苷酸探针 密码子 实体瘤 点突变 DNA 基因片段

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H-ras癌基因转染后SMMC7721细胞转移特性的体内外检测 被引量：4

16

作者 汪青 林芷英 冯晓黎 《中国临床医学》 2001年第2期133-135,共3页

目的 :研究H -ras癌基因与肝癌转移行为的关系。方法 :应用基因转移技术将H -ras癌基因导入人肝癌细胞株SMMC772 1,通过对几种转移相关指标的体内外检测 ,观察转染前后细胞转移特性的变化。结果 :体外检测显示转染后细胞的粘附、运动能... 目的 :研究H -ras癌基因与肝癌转移行为的关系。方法 :应用基因转移技术将H -ras癌基因导入人肝癌细胞株SMMC772 1,通过对几种转移相关指标的体内外检测 ,观察转染前后细胞转移特性的变化。结果 :体外检测显示转染后细胞的粘附、运动能力提高 ,Ⅳ型胶原酶 (cⅣase)的分泌增加 ,表皮生长因子受体 (EGFR)表达增加 ,且上述变化与H -ras基因的蛋白产物p2 1的表达有明确的相关关系。裸鼠体内实验性转移试验为阴性结果。结论 :H -ras癌基因能在体外诱导人肝癌细胞转移表型的产生 ,提高细胞的转移潜能 ,但在活体内还受多种正性、负性调控因子的影响。 展开更多

关键词 h-ras癌基因 肝细胞癌 肿瘤浸润 肿瘤转移 基因转染 SMMC7721细胞

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能量可控陡脉冲联合H-ras干扰性RNA治疗卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的实验研究 被引量：4

17

作者 王萍玲 胡丽娜 +4 位作者 李聪 孙才新 米彦 王士彬 姚成果 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期490-493,共4页

目的　利用陡脉冲电场的可逆性电穿孔电转基因,观察陡脉冲治疗仪联合基因治疗对肿瘤生长的影响。方 法　构建抗H- ras基因表达的小发夹状RNA重组质粒载体(pshRNA H- ras);建立卵巢癌荷瘤裸鼠模型,光、电镜观察陡脉 冲对肿瘤组织的... 目的　利用陡脉冲电场的可逆性电穿孔电转基因,观察陡脉冲治疗仪联合基因治疗对肿瘤生长的影响。方 法　构建抗H- ras基因表达的小发夹状RNA重组质粒载体(pshRNA H- ras);建立卵巢癌荷瘤裸鼠模型,光、电镜观察陡脉 冲对肿瘤组织的病理学改变,荧光报告质粒观察陡脉冲电场的可逆性电穿孔;实验分为4组:对照组、陡脉冲治疗组、陡脉 冲加基因单次干扰治疗组和加基因重复干扰治疗组,记录治疗后21d各荷瘤鼠肿瘤的体积和体质量。结果　陡脉冲对肿 瘤组织有明显的破坏作用,肿瘤边缘残存有活性的癌细胞;各治疗组肿瘤体积与体质量明显低于对照组,差异具有极显著 性(P<0.01),其中,陡脉冲加基因重复干扰治疗组肿瘤体积和重量显著低于仅用陡脉冲治疗组(P<0.01)。结论　陡脉 冲是一种新型有效的治癌工具,联合基因治疗能更有效地抑制肿瘤生长。 展开更多

关键词 能量可控陡脉冲 RNAI 基因 h-ras 卵巢肿瘤 肿瘤

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长期放置含铜IUD与ras、p53基因突变及HPV感染的关系 被引量：4

18

作者 张萍 董白桦 +2 位作者 张爱荣 高晓林 孔北华 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期414-417,共4页

目的:探讨长期(5年以上)放置含铜宫内节育器(intrauterinedevice,IUD)与宫颈细胞ras、p53基因突变及人乳头瘤病毒(Humanpapillomaviruses,HPV)感染的关系。方法:采集宫颈脱落细胞学液基标本,采用伯塞斯达系统(thebethesdasystem,TBS)诊... 目的:探讨长期(5年以上)放置含铜宫内节育器(intrauterinedevice,IUD)与宫颈细胞ras、p53基因突变及人乳头瘤病毒(Humanpapillomaviruses,HPV)感染的关系。方法:采集宫颈脱落细胞学液基标本,采用伯塞斯达系统(thebethesdasystem,TBS)诊断标准行宫颈细胞病理学诊断;采用PCR-SSCP技术检测标本中H-ras、p53基因的表达;采用FQ-PCR技术检测肿瘤相关HPVDNA含量。结果:H-ras及p53基因表达在各组中均无改变;含铜IUD组中HPV6/11型阳性率为3.33%,DNA含量为8.80×107copy/ml,对照组中HPV6/11型阳性率为3.70%,DNA含量为6.75×107copy/ml,两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。两组HPV16/18型均为阴性。结论:长期放置含铜IUD(带尾丝)对子宫颈无致突变作用,不增加肿瘤相关HPV感染,不增加子宫颈病变的发生率。 展开更多

关键词 宫内节育器 h-ras基因 P53基因 HPV DNA定量 人乳头瘤病毒

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乳腺不典型增生组织中Hras基因突变的检测 被引量：2

19

作者 杨举伦 普苹 +4 位作者 蔡学敏 王力 赵川 蔡琳 邹红 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2001年第1期12-14,共3页

目的 :探讨H ras基因在乳腺癌发生早期的作用。方法 :用PCR RFLP和PCR SSCP方法检测 30例乳腺癌、36例单纯性增生、31例不典型增生组织中H ras基因第 12密码子的突变 ,用免疫组化技术检测乳腺癌和乳腺增生病组织中H ras蛋白的表达。结果... 目的 :探讨H ras基因在乳腺癌发生早期的作用。方法 :用PCR RFLP和PCR SSCP方法检测 30例乳腺癌、36例单纯性增生、31例不典型增生组织中H ras基因第 12密码子的突变 ,用免疫组化技术检测乳腺癌和乳腺增生病组织中H ras蛋白的表达。结果 :73 3%的乳腺癌和 48 4%的乳腺导管不典型增生组织有H ras蛋白表达 ,单纯性增生上皮中无表达 ,所检测的增生病和乳腺癌组织中均未见到H ras基因第 12密码子突变。结论 :H ras蛋白过表达出现于乳腺癌发生的早期阶段 ,但这种过表达与H ras基因第 12密码子突变无关。 展开更多

关键词 乳腺癌 乳腺增生病 h-ras基因 基因突变 乳腺不典型增生组织

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一种原位示踪外源目的基因表达载体的构建 被引量：2

20

作者 刘琦 罗阳 +1 位作者 姜莉 张学 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第9期89-92,共4页

应用分子克隆技术 ,分别将增强型绿色荧光蛋白 (enhancedgreenfluorescentprotein ,EGFP)、内部核糖体进入位点 (internalribosomeentrysite,IRES)和编码H ras基因C端 2 0个氨基酸的DNA(rasc2 0 )片段插入真核表达载体pcDNA3,构建真核... 应用分子克隆技术 ,分别将增强型绿色荧光蛋白 (enhancedgreenfluorescentprotein ,EGFP)、内部核糖体进入位点 (internalribosomeentrysite,IRES)和编码H ras基因C端 2 0个氨基酸的DNA(rasc2 0 )片段插入真核表达载体pcDNA3,构建真核重组表达载体并将其命名为pZX。通过脂质体介导将该载体转染人宫颈癌细胞系HeLa ,培养过夜后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白在细胞内的分布 ,并与pEGFP C3质粒DNA转染该细胞系进行比较。结果表明 ,转染pZX载体的实验组细胞膜发出绿色荧光 ,而对照组绿色荧光则均匀弥散于整个细胞中 。 展开更多

关键词 转染 EGFP IRES 脂质体介导 h-ras基因 对照组 分子克隆技术 目的基因 表达载体 真核

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