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大豆GmNAC46转录因子的亚细胞定位及形成同源二聚体分析
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作者 孙睿加 高歌 +1 位作者 倪志勇 于月华 《大豆科学》 北大核心 2025年第4期12-19,共8页
NAC转录因子在植物抵御逆境胁迫和生长发育中扮演重要角色,GmNAC46负调控大豆对盐胁迫的应答。为了分析GmNAC46转录因子的作用机理,通过生物信息学方法、烟草瞬时表达体系和酵母双杂交方法分析GmNAC46转录因子的亚细胞定位及GmNAC46能... NAC转录因子在植物抵御逆境胁迫和生长发育中扮演重要角色,GmNAC46负调控大豆对盐胁迫的应答。为了分析GmNAC46转录因子的作用机理,通过生物信息学方法、烟草瞬时表达体系和酵母双杂交方法分析GmNAC46转录因子的亚细胞定位及GmNAC46能否自身互作形成同源二聚体。生物信息学预测结果表明,GmNAC46定位于细胞核中且存在同源二聚体结构,构建了GmNAC46-pEGAD载体。瞬时表达结果表明GmNAC46定位于烟草表皮的细胞核中,说明GmNAC46是一个核定位的转录因子。构建GmNAC46-N-pGBKT7以及GmNAC46-pGADT7载体,酵母双杂交结果进一步表明GmNAC46蛋白能够以同源二聚体的形式在细胞中发挥作用。此研究结果为进一步探讨大豆GmNAC46转录因子的生物学功能和作用机理提供了理论依据。 展开更多
关键词 大豆 gmnac46 亚细胞定位 同源二聚体 烟草瞬时表达 酵母双杂交
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大豆GmNAC46生物信息学、转录自激活及组织表达分析 被引量:1
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作者 杨梦诗 倪志勇 于月华 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期298-303,共6页
NAC转录因子是一类广泛存在于植物中且为植物所特有的转录因子超家族,不仅调控植物的生长发育等方面,同时也响应植物受到的生物及非生物胁迫。为了研究大豆中NAC转录因子的功能,利用PCR的方法从大豆中克隆GmNAC46基因,采用生物信息学方... NAC转录因子是一类广泛存在于植物中且为植物所特有的转录因子超家族,不仅调控植物的生长发育等方面,同时也响应植物受到的生物及非生物胁迫。为了研究大豆中NAC转录因子的功能,利用PCR的方法从大豆中克隆GmNAC46基因,采用生物信息学方法对该基因及编码的蛋白质进行分析,采用酵母单杂交实验分析转录因子的自激活活性,采用qRT-PCR的方法分析基因的组织特异性表达。结果表明:GmNAC46基因开放阅读框长1218 bp,编码405个氨基酸,蛋白质分子量为45.872 kD,等电点为4.88。GmNAC46蛋白在4~156位氨基酸处含有1个高度保守的NAC结构域,属于亲水性蛋白,定位于细胞核中。GmNAC46蛋白与野生大豆的NAC蛋白亲缘关系较近。酵母单杂交实验结果表明,转录因子GmNAC46具有转录自激活活性。组织特异性表达模式分析表明,GmNAC46基因在大豆根、茎、叶、子叶中都表达,在根中表达量最高。 展开更多
关键词 大豆 gmnac46 基因克隆 生物信息学分析 转录激活 组织表达
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