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苹果属垂丝海棠钾转运基因MhHAK5的克隆及耐低钾功能鉴定
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作者 马翠霞 吴相凯 《山东农业科学》 北大核心 2025年第6期28-36,共9页
钾(K)是植物生长发育必需的矿质元素之一,对产量及品质形成至关重要。HAK5是重要的高亲和力钾转运蛋白,主要介导低钾条件下的钾摄取,然而关于苹果属HAK5的功能知之甚少。本研究以苹果属的垂丝海棠(Malus halliana)为试材,克隆其HAK5(MhH... 钾(K)是植物生长发育必需的矿质元素之一,对产量及品质形成至关重要。HAK5是重要的高亲和力钾转运蛋白,主要介导低钾条件下的钾摄取,然而关于苹果属HAK5的功能知之甚少。本研究以苹果属的垂丝海棠(Malus halliana)为试材,克隆其HAK5(MhHAK5)基因,进行生物信息学分析和组织表达特异性分析,并通过遗传转化手段将该基因在拟南芥中过表达,分析其对低钾处理的响应。结果表明,MhHAK5基因全长1 830 bp,开放阅读框(ORF)全长1 695 bp,编码518个氨基酸;MhHAK5蛋白分子量为60.05 kDa,等电点7.45,存在4个跨膜结构,为不稳定的亲水跨膜蛋白,定位于细胞核内。系统发育分析表明,MhHAK5与拟南芥AtHAK5和AtHAK10、水稻OsHAK5相似性最高,具有Ser-Gly-Gly-Gly氨基酸序列。组织表达特异性分析结果表明,MhHAK5在垂丝海棠根系中的表达量最高,且受低钾诱导。将该基因在拟南芥中过表达,与野生型(WT)相比,过表达MhHAK5能有效提高拟南芥植株在低钾条件下的K+吸收及生长激素合成,从而保障根系发育。综上,MhHAK5在低钾应激反应中发挥重要作用,本研究结果可为低钾苹果砧木的基因改良与选育提供理论依据。 展开更多
关键词 垂丝海棠 MhHAK5基因 生物信息学分析 低钾胁迫 基因表达
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影响华柑4号椪柑果实大小的因子研究
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作者 刘承浪 李港秋 +9 位作者 李顺心 魏冉冉 路妍 程超 唐政 刘保艳 叶俊丽 柴利军 邓秀新 谢宗周 《果树学报》 北大核心 2025年第4期721-731,共11页
【目的】探究影响无核椪柑果实大小的关键因子,为生产优质大果椪柑提供理论依据。【方法】以无核椪柑华柑4号(HG4,后同)和有核椪柑华柑2号(HG2,后同)为试材,通过观察果实生长发育动态、测定植物内源激素含量及分析转录组数据等手段来明... 【目的】探究影响无核椪柑果实大小的关键因子,为生产优质大果椪柑提供理论依据。【方法】以无核椪柑华柑4号(HG4,后同)和有核椪柑华柑2号(HG2,后同)为试材,通过观察果实生长发育动态、测定植物内源激素含量及分析转录组数据等手段来明确HG4果实发育的影响因子。【结果】与HG2相比,HG4果实偏小且发育迟缓,发育早期其内源激素IAA、GA_(3)、Zeatin含量偏低。通过对比HG2和HG4的两个发育时期的果实转录组数据,鉴定出参与细胞发育等生物过程的173个差异表达基因。其中HG4生长素合成通路上YUC的同源基因(CmYUC10、CmYUC11)、赤霉素合成通路上GA20ox的同源基因(CmGA20ox1、CmGA20ox5)和细胞分裂素合成通路上的基因CmIPT2表达水平整体相较于HG2更低,该表达趋势与内源激素含量测定的结果相符。此外,统计分析表明HG4结果母枝粗度在1.56~3.49 mm,与果实横径呈正相关;位于树上部的果实中,横径>70 mm的大果占比高达40%,而生长在下部的果实中,横径>70 mm的大果仅有4%。【结论】HG4果实发育早期激素代谢通路基因低表达影响其内源激素含量,可能限制了果实细胞分裂和细胞扩张,同时发现HG4结果母枝粗度和结果高度也是影响其果实大小的重要因素。 展开更多
关键词 柑橘 无核椪柑 内源激素 果实发育 基因表达分析
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基于TCGA数据库筛查食管癌术后疾病进展的细胞凋亡相关基因及预测模型的构建与验证 被引量:1
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作者 王荣华 廖泽飞 +1 位作者 王耿杰 张乐 《联勤军事医学》 2025年第9期781-786,共6页
目的 基于癌症基因组图谱(the cancer genome atlas, TCGA)数据库筛查食管癌术后疾病进展的细胞凋亡相关基因,构建食管癌术后疾病进展的预测模型,并验证预测模型的价值。方法 从TCGA数据库中获得食管癌肿瘤组织与正常组织的基因表达数... 目的 基于癌症基因组图谱(the cancer genome atlas, TCGA)数据库筛查食管癌术后疾病进展的细胞凋亡相关基因,构建食管癌术后疾病进展的预测模型,并验证预测模型的价值。方法 从TCGA数据库中获得食管癌肿瘤组织与正常组织的基因表达数据及患者术后疾病进展情况,并筛选出食管癌肿瘤组织与正常组织表达存在差异的细胞凋亡相关基因;利用最小绝对值收缩和选择算子(least absolute shrinkage and selection operator, LASSO)回归及Cox回归筛选与食管癌术后进展相关的关键细胞凋亡基因,构建疾病进展风险模型,并通过Kaplan-Meier生存曲线、风险曲线、受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线分析模型的有效性和准确性。然后纳入作者医院47例食管癌患者进行验证。结果 从TCGA数据库中获取食管癌肿瘤组织样本81份,正常食管组织26份,获取了食管癌肿瘤组织与正常食管组织差异表达的细胞凋亡相关基因33个。Cox回归分析筛选出29个[半胱天冬酶1(Caspase-1,CASP1)、CASP3、CASP4、CASP5、CASP6、CASP8、CASP9、成孔蛋白家族A(Gasdermin A,GSDMA)、GSDMB、GSDMC、GSDMD、GSDME、白细胞介素18(interleukin 18,IL-18)、IL-1B、含CARD结构域的NLR家族蛋白4(NLR family CARD domain-containing protein 4,NLRC4)、含PYRIN结构域的NLR家族蛋白1(NLR family pyrin domain-containing 1,NLRP1)、NLRP2、NLRP3、NLRP7、含核苷酸结合寡聚化结构域蛋白1(nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 1,NOD1)、磷脂酶Cγ1(phospholipase C gamma 1,PLCG1)、环磷酸腺苷激活的蛋白激酶催化亚基α(protein kinase cAMP-activated catalytic subunit alpha, PRKACA)、含PYD和CARD结构域的蛋白(PYD and CARD domain-containing protein, PYCARD)、SR相关的CTD相关因子11(SR-related CTD-associated factor 11,SCAF11)、中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase, ELANE)、IL-6、NLRP6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)]与食管癌患者术后疾病进展相关的细胞凋亡相关基因;通过LASSO回归,筛选出与食管癌患者术后疾病进展最相关的15个细胞凋亡相关基因(CASP3、GSDMB、GSDMC、NLRC4、NLRP3、NLRP7、NOD1、PLCG1、PRKACA、SCAF11、ELANE、IL-6、NLRP6、TNF、GPX4),其中11个基因(IL-6、CASP3、GSDMB、GSDMC、NLRC4、NLRP3、NLRP7、NOD1、PLCG1、PRKACA、SCAF11)为风险基因,4个基因(ELANE、NLRP6、TNF、GPX4)为保护基因;Kaplan-Meier曲线分析显示,高风险组患者总生存时间均低于低风险组(P<0.05);ROC曲线分析显示,该预测模型预测食管癌术后疾病进展风险的曲线下面积(area under the curve, AUC)为0.773(95%CI:0.633~0.879);风险曲线分析显示,随着风险得分的升高,高风险组患者生存时间较低风险组减少更明显,死亡病例数也增多。纳入47例食管癌患者对模型预测效能进行进一步验证,结果显示该预测模型AUC为0.754(95%CI:0.611~0.864)。结论 基于细胞凋亡相关基因构建的食管癌术后疾病进展风险预测模型可有效预测食管癌患者术后疾病进展风险,在后期的临床实践中或可用于食管癌术后疾病进展高危患者的识别和治疗指导。 展开更多
关键词 食管癌 细胞凋亡 基因表达 疾病进展
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面向建筑拆除碳排放的改进自适应演化预测模型设计
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作者 李晚璐 彭丽娟 王子威 《自动化与仪器仪表》 2025年第7期190-194,共5页
为了对建筑拆除过程中的碳排放进行实时监测和预测,研究开展建筑拆除碳排放核算与管理分析,并基于此引进了智能算法提出了建筑拆除碳排放预测模型。实验结果表明,改进的基因表达式编程算法具有较丰富的种群多样性,有利于碳排放预测模型... 为了对建筑拆除过程中的碳排放进行实时监测和预测,研究开展建筑拆除碳排放核算与管理分析,并基于此引进了智能算法提出了建筑拆除碳排放预测模型。实验结果表明,改进的基因表达式编程算法具有较丰富的种群多样性,有利于碳排放预测模型的计算。研究设计的碳排放预测模型的预测结果与真实值最为贴近。同时,该模型取得了0.950的R-squared值、0.154的平均绝对百分比误差、0.192的均方根误差值,对建筑的碳排放预测效果较好。研究通过对碳排放过程的分析,有效预测了建筑拆除过程中的碳排放量,完善了建筑领域的碳排放管理工作,有利于建筑业的减排与“双碳”理念的践行。 展开更多
关键词 建筑拆除 碳排放 因子库 驱动因素 基因表达式编程
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5-氨基乙酰丙酸促进桃果皮提前着色机制研究 被引量:31
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作者 郭磊 蔡志翔 +3 位作者 张斌斌 许建兰 宋宏峰 马瑞娟 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1043-1050,共8页
在‘早白花’桃果实着色前,用 300、100 和 50 mg·L-1的 5–氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,ALA)溶液涂布果实。结果表明:ALA 处理可促进果皮提前着色,促使果实提前成熟,且以 300 mg · L-1效果最为明显,比对照早约 5 d。... 在‘早白花’桃果实着色前,用 300、100 和 50 mg·L-1的 5–氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,ALA)溶液涂布果实。结果表明:ALA 处理可促进果皮提前着色,促使果实提前成熟,且以 300 mg · L-1效果最为明显,比对照早约 5 d。ALA 处理还显著促进了 UFGT、DFR、LDOX 和 CHS 的提前表达,并且基因表达水平与花色素苷的积累趋势具有很好的一致性。据此推测 ALA 可能参与了桃果实成熟以及花色素苷合成的调控,对果皮花色素苷提前合成具有促进作用。 展开更多
关键词 5-氨基乙酰丙酸 着色 基因表达
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内含子对提高转基因动物基因表达效率的影响 被引量:18
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作者 卢一凡 邓继先 +1 位作者 肖成祖 马清钧 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第4期322-326,共5页
综述了内含子在转基因动物基因表达中的作用,对内源性内含子和异源内含子对转基因表达的影响进行分析,讨论了内含子提高转基因动物基因表达效率的三种可能机制,并指出在表达载体构建中应考虑到内含子的重要性.
关键词 转基因动物 内含子 基因表达 基因工程
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‘藤稔’葡萄冬季休眠后期花芽发育相关基因表达的分析 被引量:10
7
作者 慕茜 刘更森 +4 位作者 孙欣 李玉 陶然 王晨 房经贵 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期828-838,共11页
以6年生‘藤稔’葡萄(Vitis viniferaL.‘Fujiminori’)为试材,在枝条不同节位进行短截处理,对9个花发育相关基因的时空表达进行研究。结果表明,在冬季休眠后期虽然VvAP1、VvAP2、VvAP3、VvAG、VvFUL、VvSOC1、VvLFY和VvFLC基因的相对... 以6年生‘藤稔’葡萄(Vitis viniferaL.‘Fujiminori’)为试材,在枝条不同节位进行短截处理,对9个花发育相关基因的时空表达进行研究。结果表明,在冬季休眠后期虽然VvAP1、VvAP2、VvAP3、VvAG、VvFUL、VvSOC1、VvLFY和VvFLC基因的相对表达水平较低,但冬芽仍可进行花芽分化;短截处理可以促进花发育,增加各节位芽中基因的相对表达量;同一枝蔓上的中部芽比上部芽和下部芽发育好,基因相对表达量高,花芽生长发育时间长。 展开更多
关键词 葡萄 花芽 节位 基因表达
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苹果‘长富2号’开花调控转录因子基因MdSPL6的克隆及表达分析 被引量:11
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作者 樊胜 张岚清 +5 位作者 刘柯 雷超 陈欣 姚殿城 张东 韩明玉 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2089-2098,共10页
以‘长富2号’苹果短枝顶芽为材料,采用RT-PCR方法克隆得到1个候选开花调控转录因子基因SQUMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN LIKE(SPL),含有570 bp开放阅读框,编码189个氨基酸。序列比对发现,该基因含有一个保守的SBP结构域和核定位信号... 以‘长富2号’苹果短枝顶芽为材料,采用RT-PCR方法克隆得到1个候选开花调控转录因子基因SQUMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN LIKE(SPL),含有570 bp开放阅读框,编码189个氨基酸。序列比对发现,该基因含有一个保守的SBP结构域和核定位信号,属于SBP转录因子基因家族。系统进化分析表明,MdSPL6蛋白的核苷酸序列与拟南芥AtSPL3、AtSPL4和AtSPL5具有较高的同源性。实时定量PCR分析结果表明,在不同的组织中MdSPL6的表达量存在差异,在叶片和顶芽中的表达量相对较高。易成花的‘烟富6号’苹果短枝顶芽内MdSPL6的表达高于难成花的‘长富2号’。外源GA处理诱导MdSPL6的表达在花后40和60 d下调;6-BA处理使MdSPL6的表达呈现先上升后下降趋势;蔗糖处理促使MdSPL6表达上调。推测MdSPL6对激素和糖信号介导的成花诱导有重要作用,可作为调控苹果花芽分化的目标基因。 展开更多
关键词 苹果 成花诱导 MdSPL6 克隆 基因表达
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柑橘黄龙病相关水杨酸羧基甲基转移酶基因CsSAMT-1的克隆与表达分析 被引量:7
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作者 白晓晶 许兰珍 +9 位作者 贾瑞瑞 周鹏飞 陈敏 何永睿 彭爱红 雷天刚 李强 姚利晓 陈善春 邹修平 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2265-2274,共10页
为研究水杨酸羧基甲基转移酶(Salicylic acid carboxyl methyltransferase,SAMT)在柑橘防御黄龙病(Huanglongbing,HLB)中的作用,克隆获得Cs SAMT^(-1)基因,并以易感HLB锦橙和耐HLB酸柚为试材进行基因表达分析。q RT-PCR结果表明,易感病... 为研究水杨酸羧基甲基转移酶(Salicylic acid carboxyl methyltransferase,SAMT)在柑橘防御黄龙病(Huanglongbing,HLB)中的作用,克隆获得Cs SAMT^(-1)基因,并以易感HLB锦橙和耐HLB酸柚为试材进行基因表达分析。q RT-PCR结果表明,易感病锦橙中CsSAMT^(-1)在感染HLB后上调表达,且在叶脉中的表达量显著高于叶肉;而耐病酸柚中CsSAMT^(-1)呈组成型表达。外源水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MeJA)处理锦橙和酸柚,均可诱导CsSAMT^(-1)上调表达。HLB侵染前,耐病酸柚叶脉中SA和水杨酸甲酯(MeSA)含量分别为11.85和18.18 ng·g^(-1),显著高于锦橙(0.82和0.01 ng·g^(-1));HLB侵染后,锦橙中SA和MeSA含量明显上升,酸柚中SA含量明显下降,MeSA含量基本保持原有水平。研究表明,Cs SAMT^(-1)可能通过调节SA和Me SA信号分子转换来增强对柑橘黄龙病的抗性。 展开更多
关键词 柑橘 黄龙病 SAMT MESA 基因表达
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胡萝卜FLC同源基因对低温及光周期响应 被引量:7
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作者 毛笈华 庄飞云 +3 位作者 欧承刚 赵志伟 王慧 马振国 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2453-2462,共10页
基于‘松滋野生’(Ws)和‘Amsterdam’(Af)胡萝卜转录组测序,挖掘胡萝卜FLC同源基因(DcFLCs),深入研究其对低温及光周期响应规律。结果表明,胡萝卜中存在3个具有完整MADS-box和K-box保守结构域的FLC同源基因DcFLC1、DcFLC2、DcFLC3,分... 基于‘松滋野生’(Ws)和‘Amsterdam’(Af)胡萝卜转录组测序,挖掘胡萝卜FLC同源基因(DcFLCs),深入研究其对低温及光周期响应规律。结果表明,胡萝卜中存在3个具有完整MADS-box和K-box保守结构域的FLC同源基因DcFLC1、DcFLC2、DcFLC3,分别编码209、212、219个氨基酸残基蛋白,进化树显示与其它植物FLC亲缘关系较远。RT-PCR表明DcFLC1和DcFLC2在供试材料中均表达,而DcFLC3仅在部分材料中表达。qPCR结果显示低温能促进DcFLC1和DcFLC3在耐抽薹品种Af幼苗叶片和种根中表达,而DcFLC2仅在Af种根中表达显著,在幼苗叶片中表达不显著。DcFLC1和DcFLC2在抽薹敏感的Ws幼苗叶片和种根春化过程中表达规律不同,低温能促进DcFLC1在幼苗叶片以及DcFLC2在种根中表达。连续光照能促进DcFLC1、DcFLC2在Af幼苗叶片中表达,但在Ws中则不同。 展开更多
关键词 胡萝卜 DcFLCs 低温 光周期 基因表达
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MdMYB73的分子克隆及其在苹果愈伤组织和拟南芥幼苗中的盐抗性功能鉴定 被引量:9
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作者 张全艳 刘晓 +2 位作者 于建强 胡大刚 郝玉金 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2073-2080,共8页
从‘嘎拉’苹果中克隆了一个MYB转录因子基因(序列号:MDP0000894463)。该基因包含长为729 bp完整的开放阅读框,编码243个氨基酸,预测其蛋白质分子量为26.34 kD,等电点为9.29。系统进化树分析表明,这一MYB转录因子与拟南芥AtMYB73同源序... 从‘嘎拉’苹果中克隆了一个MYB转录因子基因(序列号:MDP0000894463)。该基因包含长为729 bp完整的开放阅读框,编码243个氨基酸,预测其蛋白质分子量为26.34 kD,等电点为9.29。系统进化树分析表明,这一MYB转录因子与拟南芥AtMYB73同源序列相似性最高,因此将其命名为MdMYB73。功能域分析表明,MdMYB73蛋白含有保守的R2R3-typeMYB绑定域。荧光定量PCR分析表明,MdMYB73在苹果的各个组织均有表达,在叶片和花中表达相对较高;MdMYB73的表达明显受盐胁迫的诱导。将异位表达MdMYB73的拟南芥幼苗进行抗盐鉴定,结果表明MdMYB73负调控拟南芥盐胁迫抗性;同时,AtSOS1,AtSOS3和AtNHX1抗盐相关基因的表达水平显著降低,表明MdMYB73可能负调控SOS反应,影响拟南芥抵抗高盐胁迫过程。将MdMYB73基因遗传转化苹果愈伤组织,抗盐表型分析表明,MdMYB73过量表达也明显降低了转基因愈伤组织对盐胁迫的抗性。 展开更多
关键词 苹果 MYB MD MYB73 SOS 盐胁迫 基因表达
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‘翠冠’梨花芽休眠期碳水化合物变化及其相关基因表达研究 被引量:12
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作者 郑鹏华 刘国琴 +1 位作者 Sayed Hussain 滕元文 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期325-332,共8页
以‘翠冠’梨(Pyruspyrifolia Nakai)花芽为试材,连续两年研究了其在休眠过程中的碳水化合物含量变化及编码α-淀粉酶、β-淀粉酶和α-葡聚糖磷酸化酶等碳水化合物代谢相关基因的表达模式。两年的结果显示,随着‘翠冠’梨花芽休眠的加深... 以‘翠冠’梨(Pyruspyrifolia Nakai)花芽为试材,连续两年研究了其在休眠过程中的碳水化合物含量变化及编码α-淀粉酶、β-淀粉酶和α-葡聚糖磷酸化酶等碳水化合物代谢相关基因的表达模式。两年的结果显示,随着‘翠冠’梨花芽休眠的加深,可溶性糖含量逐渐下降,11月15日降到最低。此后,在内休眠及其解除过程中可溶性糖含量呈上升趋势。花芽中淀粉含量随着休眠的加深逐渐下降,最低含量出现的时间在年度间有所不同。随着休眠开始解除,淀粉含量逐渐增加,在完全解除前达到最大值,其后则逐渐下降。‘翠冠’梨花芽的PpAMY、PpBAM1、PpBAM2和PpPHS在内休眠阶段均出现一个表达高峰,然后逐渐下降直到内休眠完全解除前。之后,除PpBAM2外,其余3个基因再次上调表达。‘翠冠’梨花芽休眠期间,淀粉含量的变化与PpAMY、PpBAM1、PpBAM2和PpPHS的表达变化之间存在联系,由此推测这些基因可能参与了‘翠冠’梨花芽休眠期碳水化合物代谢的调控。 展开更多
关键词 休眠 碳水化合物 基因表达
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经转染人骨形态发生蛋白7基因后骨髓间充质干细胞mRNA的表达 被引量:7
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作者 金丹 曾位森 +4 位作者 裴国献 齐凤菊 魏宽海 王珂 陈滨 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期222-225,共4页
目的构建人骨形态发生蛋白7(humanbonemorphogeneticprotein7,hBMP-7)逆转录病毒载体并检测经逆转录病毒介导基因转染的兔骨髓间充质干细胞(bonemarrow-derivedmesenchymalstemcell,MSCs)mRNA的表达。方法构建hBMP-7逆转录病毒载体后利... 目的构建人骨形态发生蛋白7(humanbonemorphogeneticprotein7,hBMP-7)逆转录病毒载体并检测经逆转录病毒介导基因转染的兔骨髓间充质干细胞(bonemarrow-derivedmesenchymalstemcell,MSCs)mRNA的表达。方法构建hBMP-7逆转录病毒载体后利用脂质体介导的基因转移技术转染包装细胞PT67,制备含目的基因的重组逆转录病毒液并感染兔骨髓间充质干细胞,采用原位杂交、RT-PCR检测hBMP-7mRNA在MSCs中的表达。结果成功构建了hBMP-7逆转录病毒载体,经hBMP-7基因转染的MSCs可表达外源性BMP-7mRNA。结论采用逆转录病毒介导的方法可以将hBMP-7转染至MSCs中并表达外源性基因。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白 骨髓间充质干细胞 基因表达 组织工程 mRNA HBMP-7 基因转染
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淫羊藿总黄酮对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴钙调蛋白基因表达的影响 被引量:22
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作者 蒋淑君 王桂兰 +1 位作者 崔存德 徐红 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期341-341,353,共2页
目的从分子水平探讨肾阳虚证病理改变及淫羊藿总黄酮的作用及其机理,为开发药物的临床新用途提供理论依据。方法用大剂量外源糖皮质激素建立肾阳虚大鼠动物模型,以实时荧光定量RTPCR技术,测定各组大鼠下丘脑垂体肾上腺轴CaMmRNA的表达,... 目的从分子水平探讨肾阳虚证病理改变及淫羊藿总黄酮的作用及其机理,为开发药物的临床新用途提供理论依据。方法用大剂量外源糖皮质激素建立肾阳虚大鼠动物模型,以实时荧光定量RTPCR技术,测定各组大鼠下丘脑垂体肾上腺轴CaMmRNA的表达,以及淫羊藿总黄酮对其的影响。结果肾阳虚大鼠下丘脑、肾上腺CaMmRNA水平升高,垂体组织CaMmRNA水平没有显著变化,淫羊藿总黄酮能够降低下丘脑组织CaMmRNA水平,但对肾上腺影响不显著。结论大鼠肾阳虚证时下丘脑中CaMmRNA水平升高,淫羊藿总黄酮可使其降低。 展开更多
关键词 淫羊藿总黄酮 下丘脑-垂体-上腺轴 钙调蛋白 基因表达
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葡萄中盐诱导的R2R3-MYB基因的筛选与表达分析 被引量:9
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作者 王春荣 王庆杰 +2 位作者 李晓玲 姚玉新 郝玉金 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期529-535,共7页
以葡萄砧木‘1103P’为试材,筛选获得了4个受盐强烈诱导的R2R3-MYB基因,系统进化分析表明其编码蛋白属于不同的拟南芥R2R3-MYB亚组。该4个基因在根、茎、叶和果实中呈组成型表达,但具有不同的表达水平,尤其是VvMYB112在葡萄根系中具有... 以葡萄砧木‘1103P’为试材,筛选获得了4个受盐强烈诱导的R2R3-MYB基因,系统进化分析表明其编码蛋白属于不同的拟南芥R2R3-MYB亚组。该4个基因在根、茎、叶和果实中呈组成型表达,但具有不同的表达水平,尤其是VvMYB112在葡萄根系中具有较高的表达水平。在4个基因中,VvMYB112能响应100~200 mmol·L-1高盐处理。此外,VvMYB112和VvMYB15也能被聚乙二醇(PEG6000)和低温诱导,而VvMYB107和VvMYB87对PEG6000和低温不敏感或受其抑制。表明这4个基因可能通过不同的途径介导抗盐性。 展开更多
关键词 葡萄 R2R3-MYB 转录因子 基因表达
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热应激对剑尾鱼HSP70家族两成员基因表达的影响 被引量:6
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作者 万文菊 石存斌 +2 位作者 王纪亭 柴同杰 吴淑勤 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期929-935,共7页
采用RT-PCR方法扩增实验动物剑尾鱼(Xiphopohorus helleri)纯系RR-B的HSP70家族两个成员的eDNA片段,并将其克隆到PMD18-T载体中测序,将测序结果与GenBank中的核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行同源性比较。同时利用RT-PCR半定量方... 采用RT-PCR方法扩增实验动物剑尾鱼(Xiphopohorus helleri)纯系RR-B的HSP70家族两个成员的eDNA片段,并将其克隆到PMD18-T载体中测序,将测序结果与GenBank中的核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行同源性比较。同时利用RT-PCR半定量方法研究热应激时两个成员在剑尾鱼组织中的表达。通过克隆获得了剑尾鱼的HSP70家族两个新成员的cDNA片段,两序列均包含HSP70家族的特征性签名序列和热休克蛋白的定位序列;通过对克隆片段与已发表的青锵(Oryzias latipes)等鱼类HSP70的核苷酸序列和其编码的氨基酸序列同源性比较,发现核苷酸序列同源性较高,成员一和成员二分别为85%-89%和82%-99%;氨基酸序列同源性更高,成员一和成员二分别为97%-99%和93%-99%。一般条件下,两成员在剑尾鱼肝脏、脾脏、肾脏和心脏中不表达,但热应激能刺激成员一在剑尾鱼脾脏中表达,成员二在肝脏、脾脏、肾脏和心脏中强烈表达,并可能在参与热应激保护方面起更大作用。 展开更多
关键词 HSP70 热应激 剑尾鱼 克隆 基因表达
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茌梨套PE袋和无纺布袋对果点及贮藏失水的影响机理 被引量:6
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作者 王玉玲 张新富 +2 位作者 王彩虹 王然 杨绍兰 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期850-860,共11页
观察茌梨套绿色聚乙烯(PE)薄膜袋和无纺布袋栽培的果实果点及果皮亚显微结构,并测定相关生理指标、基因表达量等,探究不同套袋处理对茌梨果点及果实贮藏失水的影响机理。结果表明:套绿色PE薄膜袋的果实,果面粗糙,果点大;而套无纺布袋的... 观察茌梨套绿色聚乙烯(PE)薄膜袋和无纺布袋栽培的果实果点及果皮亚显微结构,并测定相关生理指标、基因表达量等,探究不同套袋处理对茌梨果点及果实贮藏失水的影响机理。结果表明:套绿色PE薄膜袋的果实,果面粗糙,果点大;而套无纺布袋的果实果面光洁,果点小。果实发育后期,套绿色PE薄膜袋的果实果皮中PbPAL2基因的表达量高于套无纺布袋果实,其贮藏期间质量损失率显著高于对照,果皮较薄,表面蜡质少且龟裂翘起;而套无纺布袋果实质量损失率较低,果皮厚且表面蜡质多,蜡质晶体形态多样。采前套袋通过调控PbPAL2的表达进而影响果点的木栓化,并改变了果皮角蜡层结构影响其贮藏失水。采前套无纺布袋有利于提高茌梨果实的外观品质,延缓其贮藏失水。 展开更多
关键词 套袋 果皮 显微结构 基因表达 失水
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水稻rbcS启动子控制的外源基因在转基因水稻中的特异性表达 被引量:23
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作者 刘巧泉 于恒秀 +2 位作者 张文娟 王红梅 顾铭洪 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期247-253,共7页
为将不同启动子用于转基因水稻的研究,从武运粳8号水稻中克隆了Rubisco小亚基基因(rbcS)的5'上游调控区,构建了由rbcS启动子引导的GUS融合基因,并经农杆菌介导导入到水稻中。对转基因水稻植株中GUS活性的定性与定量测定结果表明,rbc... 为将不同启动子用于转基因水稻的研究,从武运粳8号水稻中克隆了Rubisco小亚基基因(rbcS)的5'上游调控区,构建了由rbcS启动子引导的GUS融合基因,并经农杆菌介导导入到水稻中。对转基因水稻植株中GUS活性的定性与定量测定结果表明,rbcS启动子可驱动GUS报告基因在转基因水稻植株叶片和叶鞘内的叶肉细胞中特异性高效表达,而在茎、根和种子等器官中不表达或表达活性极弱,表现出明显的组织与细胞特异性。结果还表明,光诱导处理可明显提高rbcS启动子启动的外源基因的表达量。 展开更多
关键词 水稻rbcS启动子 转基因水稻 基因表达 GUS活性 光诱导
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芹菜非特异性脂转移蛋白基因的克隆与表达分析 被引量:6
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作者 蒋倩 王枫 +5 位作者 侯喜林 王镇 李梦瑶 马静 刘梦叠 熊爱生 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1293-1302,共10页
以芹菜(Apium graveolens)‘六合黄心芹’、‘津南实芹’和‘美国西芹’为试验材料,采用RT-PCR技术分别获得其cDNA序列。序列分析表明:来源于3个芹菜品种的非特异性脂转移蛋白(Non-specific lipid transfer protein,nsLTP)基因核苷酸序... 以芹菜(Apium graveolens)‘六合黄心芹’、‘津南实芹’和‘美国西芹’为试验材料,采用RT-PCR技术分别获得其cDNA序列。序列分析表明:来源于3个芹菜品种的非特异性脂转移蛋白(Non-specific lipid transfer protein,nsLTP)基因核苷酸序列高度保守,全长357bp,编码118个氨基酸,起始密码子ATG之后含有27个氨基酸残基的信号肽序列,推测其成熟的蛋白含91个氨基酸残基,预测其蛋白质分子量为11.75kD,pI值为9.36。芹菜的nsLTP蛋白主要由α-螺旋和随机卷曲组成。空间结构上分析显示,芹菜nsLTP蛋白中H1区域明显分为H1a和H1b两个亚区域,而模板碧桃中H1区域为一个连续的螺旋结构,存在明显的差异。进化分析显示,芹菜nsLTP与香石竹、大洋洲滨藜等植物的nsLTP相似性较高,在保守位置具有8个半胱氨酸残基。实时定量PCR表达分析表明,该基因主要在芹菜的茎以及茎尖生长活跃中心表达,具有明显的组织特异性。 展开更多
关键词 芹菜 脂转移蛋白 基因克隆 实时定量PCR 基因表达
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p38MAPK红色荧光蛋白融合载体的构建及表达 被引量:8
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作者 龚小卫 秦清和 +1 位作者 王静珍 姜勇 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期171-173,共3页
目的构建在哺乳动物细胞中表达的p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)红色荧光蛋白(RFP)融合表达载体。方法将克隆在pcDNA3上的FLAG标记的p38MAPK亚克隆到红色荧光蛋白载体pDsRed1-N1上,随后转染HeLa细胞。在荧光显微镜下观察结果。结果重组质... 目的构建在哺乳动物细胞中表达的p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)红色荧光蛋白(RFP)融合表达载体。方法将克隆在pcDNA3上的FLAG标记的p38MAPK亚克隆到红色荧光蛋白载体pDsRed1-N1上,随后转染HeLa细胞。在荧光显微镜下观察结果。结果重组质粒经酶切、PCR和测序证明正确无误,并在HeLa细胞中得到高量表达。融合蛋白发出的红色荧光表明p38MAPK弥散分布于细胞质中,细胞核中也有一定的分布。结论成功构建了p38MAPK红色荧光蛋白融合载体,该载体能在哺乳动物细胞中进行表达,为研究p38MAPK的细胞内定位提供了一个重要的工具。 展开更多
关键词 丝裂原活化蛋白激酶 红色荧光蛋白 载体构建 基因表达
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