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考虑碳市场及合作博弈的GU-P2G-CCUS系统运行优化模型
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作者 李彦斌 徐艺璇 +3 位作者 葛睿 李赟 孙琰婷 张峰 《电测与仪表》 北大核心 2025年第7期1-10,共10页
随着“双碳”目标的提出,天然气作为火电转型过渡时期的重要能源,亟需通过绿色转型实现安全、稳定运行。碳捕集、利用和储存(carbon capture,utilization and storage,CCUS)技术的应用将为燃气电厂低碳发展提供可靠的技术支撑。文中提... 随着“双碳”目标的提出,天然气作为火电转型过渡时期的重要能源,亟需通过绿色转型实现安全、稳定运行。碳捕集、利用和储存(carbon capture,utilization and storage,CCUS)技术的应用将为燃气电厂低碳发展提供可靠的技术支撑。文中提出一种发电机组(generator unit,GU)-电转气(power to gas,P2G)-CCUS系统,并构建一个考虑风电输出不确定性的数据驱动鲁棒优化(data-driven robust optimization,DDRO)模型。在此基础上,由于现有优化方法无法实现科学成本分配,考虑到主体间的合作博弈关系及系统运行的稳定性,建立了系统内部基于核仁法(nucleolus based cooperative game,NCG)的成本分配模型,以确保成本分配的科学性和合理性。结果表明:引入CCUS可以显著减少碳排放,并通过参与碳市场获得额外的利润;DDRO模型可以有效抵抗不确定风电输出的干扰,增强系统运行的安全性,降低传统优化模型的保守性;NCG模型可以实现GU、P2G和CCUS之间的合理分配,使得每个参与者都可以获得比其独立运行时更高的收益,提高参与者的合作意愿,进而增强合作的长期性与稳定性。 展开更多
关键词 gu-P2G-CCUS系统 鲁棒优化 风力不确定性 成本分配
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拟南芥ProNAS4-GUS转基因植株的构建及表达模式
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作者 贾亚峰 樊婷婷 +3 位作者 吴席 马倩 张震 王婷婷 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期508-511,共4页
为了进一步研究NAS4基因的表达模式及其在缺铁胁迫下的响应模式,文章利用从野生型拟南芥中提取的基因组DNA作为模板,克隆获得NAS4启动子片段,将片段与pART27-GUS质粒进行酶切处理,然后将片段与质粒进行连接,将连接产物通过热激转化法转... 为了进一步研究NAS4基因的表达模式及其在缺铁胁迫下的响应模式,文章利用从野生型拟南芥中提取的基因组DNA作为模板,克隆获得NAS4启动子片段,将片段与pART27-GUS质粒进行酶切处理,然后将片段与质粒进行连接,将连接产物通过热激转化法转入大肠杆菌中,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定获得阳性菌株。质粒测序正确后将重组质粒通过电击转化法转入农杆菌中,经过PCR鉴定得到阳性菌株后,用浸花法侵染野生型拟南芥;通过抗性筛选和PCR鉴定得到ProNAS4-GUS转基因植株,并对获得的转基因植株进行GUS染色分析,发现NAS4基因在幼苗的根部和叶脉中都有所表达。实验结果为研究NAS4基因在植物缺铁胁迫下的响应模式奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 NAS4基因 重组质粒 转基因植株 guS染色分析
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一个用于黄单胞菌核开关筛选鉴定的GUS报告载体的构建 被引量:1
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作者 张云帆 王家孟 +3 位作者 詹紫璐 陈泳伶 杨汇瀛 唐东阶 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期117-128,共12页
核开关(riboswitch)是存在于信使RNA(messenger RNA,mRNA)分子的5′非翻译区(5′-untranslated region,5′UTR)的一段具有调控功能的RNA片段,它通过与特定的代谢物分子直接结合来调控所在mRNA自身的表达。核开关广泛存在于细菌中,在调... 核开关(riboswitch)是存在于信使RNA(messenger RNA,mRNA)分子的5′非翻译区(5′-untranslated region,5′UTR)的一段具有调控功能的RNA片段,它通过与特定的代谢物分子直接结合来调控所在mRNA自身的表达。核开关广泛存在于细菌中,在调控细菌的基础代谢以及致病等生理过程中发挥非常重要的作用。尽管目前在大肠杆菌(Escherichia coli)等模式细菌中已经鉴定了许多核开关,然而,至今在重要的植物病原细菌黄单胞菌属(Xanthomonas)细菌中只鉴定了1个核开关。为了实现在全基因组水平上对黄单胞菌的核开关进行高通量筛选鉴定,本研究设计和构建了1个β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)报告载体pL3-SD^(+)gusA。该载体既适用于在黄单胞菌属细菌中对候选的核开关进行验证,也可以通过构建基因组DNA表达文库而实现对黄单胞菌核开关的高通量筛选鉴定。 展开更多
关键词 黄单胞菌 guS报告载体 核开关 高通量筛选鉴定
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日本落叶松内源GUS基因鉴定及其酶活性分析
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作者 叶查龙 张陈谊 +2 位作者 杨玲 孙晓梅 李万峰 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2024年第6期86-92,共7页
[目的]研究日本落叶松内源β-葡糖苷酸酶(GUS)基因及其酶活性,分析GUS作为报告基因的可靠性。[方法]利用pCAMBIA1301载体上的GUS基因序列在日本落叶松参考基因组中进行比对,鉴定并克隆出日本落叶松GUS(LaGUS)基因。在NCBI利用blastp查... [目的]研究日本落叶松内源β-葡糖苷酸酶(GUS)基因及其酶活性,分析GUS作为报告基因的可靠性。[方法]利用pCAMBIA1301载体上的GUS基因序列在日本落叶松参考基因组中进行比对,鉴定并克隆出日本落叶松GUS(LaGUS)基因。在NCBI利用blastp查找其他物种中LaGUS的同源序列并构建进化树。利用已有的转录组数据和实时荧光定量PCR分析LaGUS基因在日本落叶松中的表达模式。利用组织化学的方法,以X-gluc作为GUS酶反应底物,检测日本落叶松体细胞胚胎发生过程中内源GUS的酶活性。[结果]在日本落叶松中鉴定到一个LaGUS基因,CDS长3435 bp,编码1144个氨基酸。25种植物中具有与LaGUS基因相似的序列。LaGUS基因的表达量在活动期高于休眠期,在体胚苗中高于在胚性愈伤组织和体细胞胚胎中。组织化学染色表明,日本落叶松胚性愈伤组织、体细胞胚胎和体胚苗在室温下染色6 d时均观察到蓝色,但体胚苗的染色程度高于胚性愈伤组织和体细胞胚胎。[结论]日本落叶松具有内源GUS活性,在基因工程中利用GUS作为报告基因可能存在一定干扰。 展开更多
关键词 日本落叶松 内源guS 体细胞胚胎发生 报告基因
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水稻OsTLP12基因启动子GUS表达载体的构建与转化
5
作者 杜文 陈秋红 雷东阳 《农业科学》 CAS 2024年第6期692-701,共10页
植物中类甜蛋白TLPs不仅参与宿主抵御真菌入侵的过程,还参与植物对非生物胁迫的防御。本试验采用PCR技术从籼稻特青中克隆了OsTLP12基因上游2000 bp的启动子片段,并分析了其中所含的顺式作用元件。随后,构建了与GUS报告基因融合的表达载... 植物中类甜蛋白TLPs不仅参与宿主抵御真菌入侵的过程,还参与植物对非生物胁迫的防御。本试验采用PCR技术从籼稻特青中克隆了OsTLP12基因上游2000 bp的启动子片段,并分析了其中所含的顺式作用元件。随后,构建了与GUS报告基因融合的表达载体,并通过农杆菌介导的转化方法将融合表达载体导入水稻中,随后进行了转化植株的筛选,并对转基因植株进行了GUS染色分析。本研究得到以下结果:1) 成功克隆了水稻中OsTLP12基因的启动子片段,并将其与含有GUS报告基因的表达载体融合,获得了融合表达载体;2) OsTLP12基因启动子区域含有多个生物和非生物逆境反应相关的顺式元件;3) 成功将融合表达载体转化进入水稻中,并筛选出阳性转基因幼苗;4) 对转基因幼苗进行了GUS染色,以检测OsTLP12基因启动子驱动的GUS表达情况。 展开更多
关键词 水稻 OsTLP12基因 启动子 顺式作用元件分析 遗传转化 guS染色
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An Experimental Study on Response and Control of a Flapping-Wing Aerial Robot Under Wind Gusts
6
作者 Kazuki Shimura Hikaru Aono Chang-kwon Kang 《Journal of Bionic Engineering》 SCIE EI CSCD 2024年第1期209-223,共15页
Bioinspired flapping-wing micro-air-vehicles(FWMAVs)have the potential to be useful aerial tools for gathering information in various environments.With recent advancements in manufacturing technologies and better unde... Bioinspired flapping-wing micro-air-vehicles(FWMAVs)have the potential to be useful aerial tools for gathering information in various environments.With recent advancements in manufacturing technologies and better understanding of aerodynamic mechanisms behind of the flapping flight,outdoor flights have become a reality.However,to fully realize the potential of FWMAVs,further improvements are necessary,particularly in terms of stability and robustness under gusty conditions.In this study,the response and control of a tailless two-winged FWMAV under the wind gusts are investigated.Physical experiments are conducted with a one-degree-of-freedom gimbal to focus on effects of wind gusts on the rotational motion of the FWMAV.Proportional-derivative and sliding-mode controls are adopted for the attitude control.Results present that the body angles changed in time and reached approximately 50°at the maximum due to the wing gusts.The sliding-mode controller can more effectively control the rotational angle in the presence of disturbances and both the wing speed and changes in wind speed have an impact on the effectiveness of attitude control.These results contribute to the development of of tailless two-winged,single-motor driven FWMAVs in terms of the design of attitude controller and testing apparatus. 展开更多
关键词 Flapping-wing micro-air vehicles Sliding-mode control Pitch and roll angle-Wind gus
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甘蓝Ogura细胞质雄性不育相关基因BoMF1启动子的克隆及功能分析 被引量:3
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作者 郭盈盈 颉建明 +2 位作者 简元才 郁继华 康俊根 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期887-895,共9页
通过TAIL-PCR染色体步移技术,从甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L.)基因组中克隆到胞质雄性不育(OguCMS)相关基因BoMF1翻译起始位点上游521bp的启动子序列。软件分析预测表明,该启动子序列中存在多个顺式作用元件,包括TATA-box... 通过TAIL-PCR染色体步移技术,从甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L.)基因组中克隆到胞质雄性不育(OguCMS)相关基因BoMF1翻译起始位点上游521bp的启动子序列。软件分析预测表明,该启动子序列中存在多个顺式作用元件,包括TATA-box、CAAT-box、MYB结合位点、植物激素响应单元等。为了研究该启动子的表达特性,亚克隆了BoMF1转录起始位点上游521bp序列,将其置换pBI121中的CaMV35S启动子,驱动其下游的GUS基因,构建植物表达载体pBI121-BoMF1P,以pBI121空载体作为阳性对照,通过农杆菌(LBA4404)介导法转入拟南芥。结果表明,甘蓝BoMF1启动子序列能驱动GUS基因在拟南芥花药发育晚期的花药和花粉中特异表达,表达具有组织特异性。 展开更多
关键词 甘蓝 OguCMS BoMF1启动子 guS 调控元件
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用基因枪将GUS基因导入褐藻细胞中表达 被引量:27
8
作者 秦松 张健 +4 位作者 李文斌 王希华 童顺 孙勇如 曾呈奎 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期353-356,共4页
于1993年11月-1994年2月,用高压氦气式基因枪,将PB1221质粒[装有CaMV35s启动子、GUS(β-葡精苷酸酶)基因以及nos的3’调控区]导入海带和裙带菜组织切块中。48h后,在海带假根细胞和裙带菜中肋部叶片细胞中检测到GUS基因的表达。实... 于1993年11月-1994年2月,用高压氦气式基因枪,将PB1221质粒[装有CaMV35s启动子、GUS(β-葡精苷酸酶)基因以及nos的3’调控区]导入海带和裙带菜组织切块中。48h后,在海带假根细胞和裙带菜中肋部叶片细胞中检测到GUS基因的表达。实验表明,微粒子轰击法是外源基因导入大型褐藻的一个有效途径。CaMV35s启动子能够驱动外源基因在海洋藻类中的表达,可作为藻类基因工程的启动元件。 展开更多
关键词 褐藻 基因导入 guS基因 细胞
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苜蓿愈伤组织诱导及GUS基因瞬时表达 被引量:21
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作者 徐恒 黎万奎 +3 位作者 谢志健 吴炼 张旭 周宇 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期905-908,共4页
用电击转化法将质粒pBI12 1(含GUS基因 ,β 葡萄糖苷酸酶基因 )导入苜蓿愈伤组织的小细胞团内 。
关键词 苜蓿 愈伤组织 guS基因 瞬时表达 电击转化
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GUS基因在杜氏盐藻细胞中的瞬间表达 被引量:37
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作者 耿德贵 王义琴 +1 位作者 李文彬 孙勇如 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第2期35-39,共5页
利用电激法将GUS基因转入杜氏盐藻细胞内进行瞬间表达 ,研究了盐藻的生长状态和电激转化条件对转化率的影响 ,并比较了CaMV35S、Ubil、Ubil Ω、CaMV35S U bil和CaMV35S Ubil Ω 5种启动子的转化效率。结果表明 ,培养 5d的盐藻在 6kV的... 利用电激法将GUS基因转入杜氏盐藻细胞内进行瞬间表达 ,研究了盐藻的生长状态和电激转化条件对转化率的影响 ,并比较了CaMV35S、Ubil、Ubil Ω、CaMV35S U bil和CaMV35S Ubil Ω 5种启动子的转化效率。结果表明 ,培养 5d的盐藻在 6kV的脉冲电压、0 .0 5s的脉冲持续时间和 2 10的脉冲次数下电激可获得较高的转化率 ,为转化最佳条件。 5种启动子中 ,Ubil Ω启动子的转化效率最高 。 展开更多
关键词 杜氏盐藻细胞 转化率 杜氏盐藻 guS基因 电激法 瞬间表达 转基因 基因表达
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利用gusA基因在水稻组织中示踪和定量水稻白叶枯病菌的方法 被引量:1
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作者 李瑜 李逸朗 +6 位作者 张翠萍 陈涛 罗铃滈 李映斌 陈功友 罗坤 邹丽芳 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期343-354,共12页
水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo)从自然孔口水孔或者伤口处侵入水稻叶片,在维管束中定殖、繁殖和扩展,引起典型的叶枯症状。可视化这个动态的病程过程和快速定量水稻组织中细菌的群体是Xoo-水稻互作研究中亟待突破... 水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo)从自然孔口水孔或者伤口处侵入水稻叶片,在维管束中定殖、繁殖和扩展,引起典型的叶枯症状。可视化这个动态的病程过程和快速定量水稻组织中细菌的群体是Xoo-水稻互作研究中亟待突破的技术难点。本研究在PXO99A菌株中表达gusA基因,将其置于lacZ启动子、hrpX启动子和不含有(T1)4终止子的hrpX启动子下,构建了3个示踪菌株PXO99A AGUSRBS、PXO99GUSA X和PXO99GUSX-。水稻上毒性测定结果显示,这3个示踪菌株与野生型PXO99A展现相同的毒性。利用示踪菌株,通过注射接种法,能够观察到Xoo在水稻维管束中定殖和扩展的动态变化;通过喷雾接种法,能够观察到Xoo从叶尖或者叶缘侵入水稻叶片引起发病的特性;发现PXO99GUSA X和PXO99A AGUSX-比PXO99GUSA RBS能够更加灵敏地反映这些病程。同时发现,PXO99GUSARBS的细菌数量与受其侵染的水稻组织的GUS活性显著正相关。本研究也评价了利用GUS活性测定法精确和快速地定量水稻组织中细菌群体的可行性。以上结果表明这套GUS系统是非常有效的,能够示踪病原菌的侵染过程和监测细菌在水稻组织中的群体数量,这将为Xoo-水稻互作研究提供有力的技术支持。 展开更多
关键词 水稻白叶枯病菌 病程 gusA基因 guS活性
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建立低能离子束介导小麦转基因方法并获得转GUS基因植株 被引量:46
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作者 吴丽芳 李红 +2 位作者 宋道君 冯慧云 余增亮 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第11期982-991,共10页
研究了注入离子种类、能量、剂量等参数对于低能离子束介导的遗传转化的影响,建立了适于小麦成熟胚转化的组培条件和筛选程序。以携带GUS基因的质粒为供体,进行了报告基因转化研究。分子生物学证据表明GUS基因已整合到小麦基因... 研究了注入离子种类、能量、剂量等参数对于低能离子束介导的遗传转化的影响,建立了适于小麦成熟胚转化的组培条件和筛选程序。以携带GUS基因的质粒为供体,进行了报告基因转化研究。分子生物学证据表明GUS基因已整合到小麦基因组中。3个小麦品种的抗性愈伤转化率分别为 9.5%、 10.8%、 11.2%,再生植株转化率分别为 1.4%、 3.4%、 17%。首次证明了离子束介导小麦遗传转化是可行的,为离子束介导小麦遗传转化体系的建立打下了基础。 展开更多
关键词 低能离子束 小麦 遗传转化 guS基因 基因表达
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转基因白桦中GUS基因表达的定量分析 被引量:17
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作者 曾凡锁 钱晶晶 +3 位作者 康君 王红艳 王亦洲 詹亚光 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期484-490,共7页
以转基因白桦(Betula platy phylla)为材料,采用单酶切结合Southern杂交的方法揭示不同转基因植株中GUS基因的整合拷贝数为1-4个。采用组织化学染色法定性分析不同整合方式转基因白桦植株中GUS基因的表达。结果表明,11个转基因植株中有... 以转基因白桦(Betula platy phylla)为材料,采用单酶切结合Southern杂交的方法揭示不同转基因植株中GUS基因的整合拷贝数为1-4个。采用组织化学染色法定性分析不同整合方式转基因白桦植株中GUS基因的表达。结果表明,11个转基因植株中有2株出现了GUS基因沉默,其余植株均有不同水平的GUS表达。在此基础上应用分光光度法定量分析不同拷贝数的GUS转基因白桦中β-葡萄糖醛酸酶活性。结果表明,在11个转基因无性系中除2个株系的GUS基因沉默外,其它9个转基因植株中GUS酶活力差异明显,但这种差异与GUS基因的拷贝数没有必然联系。 展开更多
关键词 基因表达 guS 整合方式 分光光度法 转基因白桦
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高羊茅组织培养再生体系及GUS基因瞬间表达研究 被引量:11
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作者 高丽美 徐子勤 +2 位作者 张永彦 黄萱 刘杨 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期40-45,共6页
以成熟种子为外植体,对高羊茅组织培养和植株再生体系进行了优化,分析了不同浓度2,4-D、6-BA和激动素对高羊茅愈伤组织诱导和愈伤组织分化成苗的影响,结果表明:9.0mg/L2,4-D对愈伤组织的诱导效果最佳,0.2mg/L激动素是愈伤组织分化成苗... 以成熟种子为外植体,对高羊茅组织培养和植株再生体系进行了优化,分析了不同浓度2,4-D、6-BA和激动素对高羊茅愈伤组织诱导和愈伤组织分化成苗的影响,结果表明:9.0mg/L2,4-D对愈伤组织的诱导效果最佳,0.2mg/L激动素是愈伤组织分化成苗的最适浓度,二者的诱导率和分化率分别达到68.08%和45.83%.在愈伤组织继代培养基中附加1.0mg/L2,4-D、0.5mg/L6-BA和1.25mg/LCuSO4有利于胚性愈伤组织的形成,可以明显促进愈伤组织分化.同时,采用基因枪法将GUS基因导入高羊茅愈伤组织中,通过组织化学染色检测到了GUS瞬间表达活性;并对影响GUS基因瞬间表达的因素进行了分析,以期为提高基因枪法遗传转化效率提供参考. 展开更多
关键词 高羊茅 组织培养 基因枪 guS基因 瞬间表达
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转基因水稻中GUS蛋白质的检测及其表达特征 被引量:10
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作者 牛东东 郝育杰 +13 位作者 荣瑞娟 韦汉福 兰金苹 史佳楠 魏健 李雪姣 杨烁 奚文辉 武鹏程 刘丽娟 吴琳 刘斯奇 尹长城 刘国振 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期2715-2722,共8页
【目的】建立转基因水稻中GUS蛋白质的免疫学检测方法,并了解花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子驱动的GUS蛋白质在转基因水稻中的表达特征。【方法】以细菌基因组DNA为模板,PCR扩增GUS基因后克隆到表达载体pET30a中,测序验证的重组子转入... 【目的】建立转基因水稻中GUS蛋白质的免疫学检测方法,并了解花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子驱动的GUS蛋白质在转基因水稻中的表达特征。【方法】以细菌基因组DNA为模板,PCR扩增GUS基因后克隆到表达载体pET30a中,测序验证的重组子转入大肠杆菌表达菌BL21中,IPTG诱导获得重组表达的GUS蛋白质,用HIS-tag beads纯化后作为免疫原免疫小鼠制备GUS蛋白质特异的抗体,通过免疫印迹分析筛选高特异性的单克隆抗体,用Broadford法对重组的GUS蛋白质进行定量,对不同浓度的GUS蛋白质进行免疫印迹分析,绘制检测GUS蛋白质的标准曲线,通过与标准曲线的比较对水稻叶片中GUS蛋白质进行定量分析。提取不同时期、不同部位的水稻总蛋白质,包括苗期的地上部、地下部,分蘖期的茎、茎节、叶鞘、叶枕、叶片上部、叶片中部和叶片下部,孕穗期的茎、穗轴、叶鞘、叶枕、叶片、幼穗(长度分别为1、2、10和20 cm),开花期的茎、穗轴、叶鞘、叶片、穗子,成熟期的茎、叶片、授粉后不同时期的种子(分别为授粉后10、20、30和40 d)、乳熟期的胚、胚乳和颖壳、成熟种子的全种子、胚、胚乳和颖壳以及不同时期的叶片和根部材料等。SDS-PAGE分离后用抗体检测其GUS蛋白质的丰度。【结果】筛选获得了高特异性的抗GUS单克隆抗体(编号为#27),用该抗体检测转基因水稻中及重组的GUS蛋白质均呈现特异条带,没有可见的背景信号,用本研究建立的免疫印迹方法对重组GUS蛋白质的检测下限约为4 ng,可检出转基因水稻单粒大米2.5%样品中(约0.6 mg)的GUS蛋白质。在不同时期的转基因水稻叶片中GUS蛋白质的表达丰度基本稳定,而在水稻根部的GUS丰度随生长急剧减少,5叶期根中的表达量不到3叶期的三分之一,到6叶期检测不到GUS蛋白质。在水稻苗期叶片中,GUS蛋白质约占鲜重的0.02‰。另外,除分蘖期以后的根部之外,GUS蛋白质几乎在所有的水稻组织部位中呈组成型表达,只是不同组织中的表达量略有差异,如在孕穗期和开花期的茎及颖壳中的表达量较低。【结论】建立了具有应用价值的对转基因水稻中GUS蛋白质丰度检测的免疫印记方法。该方法特异性高、样品用量少、不依赖于GUS蛋白质的酶活性、测定结果易于在不同实验室间比较。证明了35S启动子驱动的GUS蛋白质在转基因水稻中基本呈组成型表达。 展开更多
关键词 水稻 转基因植物 CaMV 35S启动子 guS蛋白质 免疫印迹
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GUS基因和NPTII基因表达的相关性及其在转基因棉花检测研究中的应用 被引量:10
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作者 上官小霞 李燕娥 +3 位作者 梁运生 吴霞 杜春芳 张林水 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2007年第3期163-167,共5页
利用农杆菌介导转化法,将含有35S启动子驱动NPTII基因和GUS基因以及棉纤维特异表达启动子E6驱动目的基因FB的植物表达载体转入到常规棉花R15中。重点分析了GUS基因和NPTII基因在愈伤诱导阶段、T0代及T1代转基因棉花中的表达情况。综合... 利用农杆菌介导转化法,将含有35S启动子驱动NPTII基因和GUS基因以及棉纤维特异表达启动子E6驱动目的基因FB的植物表达载体转入到常规棉花R15中。重点分析了GUS基因和NPTII基因在愈伤诱导阶段、T0代及T1代转基因棉花中的表达情况。综合两个基因的表达来进行转基因棉花的阳性鉴定,可以为转基因棉花后代的纯合选育提供双重保障。7个转基因株系选育到T3代共获得株行51个,卡那霉素检测多数株行阳性率在90%以上,其中21个株行阳性率达100%。 展开更多
关键词 guS基因 NPTII基因 相关性 转基因棉花 基因表达
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抗氧化剂对农杆菌介导的大豆下胚轴GUS基因瞬时表达的影响 被引量:21
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作者 汲逢源 王戈亮 许亦农 《植物生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期330-334,共5页
大豆(Glycine max)下胚轴作为大豆遗传转化的外植体材料,能快速高频再生不定芽。然而,在遗传转化过程中褐化影响基因转化效率。在该研究中,我们用含有GUS染色基因和hptII(Hygromycin phosphotransferase II)筛选基因的农杆菌(Agrobacter... 大豆(Glycine max)下胚轴作为大豆遗传转化的外植体材料,能快速高频再生不定芽。然而,在遗传转化过程中褐化影响基因转化效率。在该研究中,我们用含有GUS染色基因和hptII(Hygromycin phosphotransferase II)筛选基因的农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)LBA4404侵染大豆下胚轴,并用组织化学定位法测定了GUS基因的瞬时表达,以确定大豆的优化基因转化条件。结果显示,在共培养基中加入硫代硫酸钠、L_半胱氨酸以及二硫苏糖醇等抗氧化剂,可以有效地抑制大豆下胚轴在组培过程中褐化的发生,并大幅度提高农杆菌在下胚轴的瞬时表达率。这些结果说明抗氧化剂可以降低这种影响并有效提高基因转化效率。 展开更多
关键词 大豆 下胚轴 农杆菌 guS基因 瞬时表达
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兰花圆球茎基因枪转化后的GUS基因表达 被引量:13
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作者 陈志俊 明小天 +2 位作者 刘荣维 李毅 陈章良 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第4期94-96,共3页
利用花椰菜花叶病毒 (CaMV ) 35S启动子引导的葡糖醛酸糖苷酶 (β glu curonidase ,GUS)基因检测基因枪法转化兰花圆球茎组织的瞬间表达效率。发现在基因枪轰击时在DNA 金粉悬液中加入 0 1mol/L的生长激素NAA ,轰击前预培养时使用0 1m... 利用花椰菜花叶病毒 (CaMV ) 35S启动子引导的葡糖醛酸糖苷酶 (β glu curonidase ,GUS)基因检测基因枪法转化兰花圆球茎组织的瞬间表达效率。发现在基因枪轰击时在DNA 金粉悬液中加入 0 1mol/L的生长激素NAA ,轰击前预培养时使用0 1mol/L甘露醇处理 ,每个培养皿轰击两次和轰击压力为 110 0 psi下 。 展开更多
关键词 guS 兰花圆球式 基因枪 瞬间表达
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基于GUS基因瞬时表达优化云南杜鹃(Rhododendron yunnanense Franch.)遗传转化方法 被引量:8
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作者 彭绿春 周微 +5 位作者 汪玲敏 张露 宋杰 解玮佳 关文灵 李世峰 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第6期1045-1051,共7页
本研究以云南杜鹃无菌叶片和愈伤组织为受体材料,运用正交试验设计,通过组织染色分析法研究了预培养时间、菌液密度、侵染时间、共培养时间对农杆菌介导的GUS基因瞬时表达的影响。结果表明:叶片是云南杜鹃较理想的遗传转化受体材料,无... 本研究以云南杜鹃无菌叶片和愈伤组织为受体材料,运用正交试验设计,通过组织染色分析法研究了预培养时间、菌液密度、侵染时间、共培养时间对农杆菌介导的GUS基因瞬时表达的影响。结果表明:叶片是云南杜鹃较理想的遗传转化受体材料,无菌叶片预培养0 d,菌液OD_(600)值0.5,侵染时间40 min,共培养5 d,GUS基因瞬时表达率最高,平均表达率为70%。试验结果为云南杜鹃遗传转化研究提供了快速可靠的依据。 展开更多
关键词 云南杜鹃 guS基因 瞬时表达 遗传转化方法
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利用GUS基因瞬时表达探索佛手叶盘基因枪转化参数 被引量:6
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作者 周春丽 郭卫东 +3 位作者 王德解 余初浪 路梅 李玉萍 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期2145-2150,共6页
佛手是芳香科枸橼类植物,有很好的药用和观赏价值,但其品种较为单一,对其进行遗传改良和品种选育显得十分必要.为了将基因枪转化方法应用于佛手的遗传改良和品种选育,本实验以GUS基因为报告基因,利用基因枪方法将其转入金华佛手外植体内... 佛手是芳香科枸橼类植物,有很好的药用和观赏价值,但其品种较为单一,对其进行遗传改良和品种选育显得十分必要.为了将基因枪转化方法应用于佛手的遗传改良和品种选育,本实验以GUS基因为报告基因,利用基因枪方法将其转入金华佛手外植体内,通过检测GUS基因在佛手叶盘中的瞬时表达情况,分析了外植体的幼嫩程度、射程、氦气压力、真空度、轰击次数等参数对GUS瞬时表达的影响,并研究了最佳检测时间.结果表明,以幼叶为受体,在射程为6 cm、氦气压力为7.584×106Pa,真空度为88.046 kPa条件下,2 d后可检测出GUS基因的最佳表达活性.轰击次数多少对GUS基因瞬时表达影响不明显. 展开更多
关键词 佛手 基因枪 guS基因 瞬时表达
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