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GLT络合铁脱硫工艺在焦化煤气治理中的应用
1
作者 邵虎 陈婉丽 +1 位作者 夏鹏 曾凡文 《硫酸工业》 2025年第3期57-59,共3页
宁夏某公司50 kt/a针状焦项目延迟焦化煤气中硫化氢质量浓度高达9 g/m^(3)以上,氢气、甲烷等可燃气体体积分数超过97%。通过GLT络合铁脱硫成套工艺,将煤气中硫化氢质量浓度脱除至15 mg/m^(3)以下,满足GB 17820—2018《天然气》中二类气... 宁夏某公司50 kt/a针状焦项目延迟焦化煤气中硫化氢质量浓度高达9 g/m^(3)以上,氢气、甲烷等可燃气体体积分数超过97%。通过GLT络合铁脱硫成套工艺,将煤气中硫化氢质量浓度脱除至15 mg/m^(3)以下,满足GB 17820—2018《天然气》中二类气体要求(硫化氢质量浓度小于20 mg/m^(3))。净化后的煤气可回收并利用,节省了燃气消耗并且无“三废”排放。 展开更多
关键词 glt络合铁 脱硫 硫化氢 焦化煤气
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谷氨酸转运体GLT-1在缺血性脑卒中的作用机制及研究进展
2
作者 郑小雪 牟青春 《海南医学》 2025年第8期1205-1209,共5页
谷氨酸转运体GLT-1作为主要的谷氨酸转运蛋白,可以清除突触间隙中的谷氨酸,维持神经递质平衡,从而在缺血性脑卒中起到减少谷氨酸过度积累造成的神经兴奋性毒性的作用。本文综述了GLT-1在脑缺血中的作用机制,其中主要阐述了神经兴奋性毒... 谷氨酸转运体GLT-1作为主要的谷氨酸转运蛋白,可以清除突触间隙中的谷氨酸,维持神经递质平衡,从而在缺血性脑卒中起到减少谷氨酸过度积累造成的神经兴奋性毒性的作用。本文综述了GLT-1在脑缺血中的作用机制,其中主要阐述了神经兴奋性毒性的具体发生机制以及GLT-1的表达和功能变化,同时还探讨了GLT-1的信号通路调控以及将GLT-1作为治疗靶点的干预手段。本综述为针对GLT-1的治疗策略开发提供了理论基础,并指明了未来研究的方向。 展开更多
关键词 谷氨酸转运体 glt-1 缺血性脑卒中 脑缺血 作用机制
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自发性癫痫大鼠皮质和海马中GLT-1、EAAC1表达异常 被引量：8
3
作者 孙凤 蔡际群 +2 位作者 谢妮 王清华 杨丹 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期617-620,共4页
目的探讨自发性癫痫大鼠(SER)皮质和海马中GLT-1、EAAC1 mRNA与蛋白的表达情况。方法应用RT-PCR技术检测GLT-1、EAAC1 mRNA的表达;应用Westernblot方法检测GLT-1、EAAC1蛋白的表达;应用免疫组化方法定位GLT-1、EAAC1蛋白。结果SER皮质中... 目的探讨自发性癫痫大鼠(SER)皮质和海马中GLT-1、EAAC1 mRNA与蛋白的表达情况。方法应用RT-PCR技术检测GLT-1、EAAC1 mRNA的表达;应用Westernblot方法检测GLT-1、EAAC1蛋白的表达;应用免疫组化方法定位GLT-1、EAAC1蛋白。结果SER皮质中GLT-1蛋白表达低于正常Wistar大鼠(P<0.05);EAAC1 mRNA及蛋白表达均低于正常Wistar大鼠(P<0.01);SER海马中GLT-1蛋白表达高于Wistar大鼠(P<0.01);免疫组化结果显示GLT-1、EAAC1在SER、Wistar大鼠皮质和海马中均有表达,且位于细胞膜上。结论SER皮质中GLT-1、EAAC1表达下调可能促进了癫痫的发生;海马中GLT-1蛋白表达上调可能是一种代偿性神经保护机制。 展开更多
关键词 glt-1 EAAC1 RT-PCR WESTERN BLOT 免疫组化 自发性癫痫大鼠
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电针对帕金森病模型大鼠纹状体Glu浓度、GLT-1mRNA和GSmRNA表达的影响 被引量：6
4
作者 马骏 刘芳 +4 位作者 王述菊 马彪 王彦春 余沛豪 王中明 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期3050-3053,共4页
目的探讨电针治疗帕金森病(PD)的作用机制。方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组每组10只,模型组、电针组每组15只。PD大鼠旋转模型制备采用6-OHDA单侧纹状体立体定向微量注射法。假手术组注射方法和部位同模型组,仅注射含0.2%... 目的探讨电针治疗帕金森病(PD)的作用机制。方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组每组10只,模型组、电针组每组15只。PD大鼠旋转模型制备采用6-OHDA单侧纹状体立体定向微量注射法。假手术组注射方法和部位同模型组,仅注射含0.2%Vit C的生理盐水。电针组在模型制作成功后给予电针"风府、太冲"穴治疗,每天一次,每次30 min,7天为1疗程,连续治疗2个疗程。各组大鼠选取10只进行取材及处理。HPLC荧光法检测纹状体谷氨酸(Glu)浓度,RT-PCR法检测谷氨酸转运体-1(GLT-1mRNA)及谷氨酰胺合成酶(GSmRNA)蛋白活性的表达。结果电针组大鼠治疗前后旋转行为差异显著(P<0.01)。与正常组及假手术组比较,模型组大鼠Glu浓度显著升高,GLT-1mRNA与GSmRNA表达水平均显著降低(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠Glu浓度降低,GLT-1mRNA与GSmRNA表达水平均升高(P<0.05)。结论电针提高了脑内GLT-1mRNA与GSmRNA蛋白活性的表达,减轻了Glu引起的细胞毒作用,从而对PD多巴胺能神经元起到了一定的保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 电针 Glu浓度 glt-1mRNA GSmRNA
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补阳还五汤对脑缺血后大鼠脑内GLT-1表达的影响 被引量：8
5
作者 丁文婷 周乐全 +3 位作者 刘微 余鹏 关莉 李小英 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2014年第3期15-17,共3页
目的 :观察脑缺血后补阳还五汤对大鼠脑内海马CA1区GLT-1(glutamate transporter-1)表达的影响。方法 :大脑中动脉栓塞法制备缺血性脑损伤大鼠模型,术后补阳还五汤灌胃,灌胃1、3、5、7 d后灌注取材。采用免疫组织化学染色法观察海马CA1... 目的 :观察脑缺血后补阳还五汤对大鼠脑内海马CA1区GLT-1(glutamate transporter-1)表达的影响。方法 :大脑中动脉栓塞法制备缺血性脑损伤大鼠模型,术后补阳还五汤灌胃,灌胃1、3、5、7 d后灌注取材。采用免疫组织化学染色法观察海马CA1区的GLT-1表达,采用免疫荧光双染确定GLT-1的细胞定位。结果 :同模型组相比,补阳还五汤在1 d和3 d后可显著增加海马CA1区GLT-1的表达,随后GLT-1的表达逐步下降,而且两组之间没有明显差异(5 d和7 d)。另外免疫荧光双染表明GS主要表达于星形胶质细胞。结论 :补阳还五汤可通过提高脑缺血后CA1区GLT-1的表达减少谷氨酸的浓度发挥保护作用。 展开更多
关键词 补阳还五汤 脑缺血 glt-1
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戊四氮点燃慢性癫痫大鼠脑组织TrkB及GLT-1的表达分析 被引量：4
6
作者 陈勇 杨忠 +3 位作者 曾义 刘卫东 梁义 刘进平 《西部医学》 2017年第6期753-757,共5页
目的分析戊四氮(PTZ)点燃慢性癫痫模型SD大鼠脑组织酪氨酸激酶受体B(TrKB)及谷氨酸转运体1(GLT-1)的表达变化,为进一步研究胶质细胞BDNF/TrkB信号通路与GLT-1的相关性提供实验依据,为癫痫的防治提供靶位线索。方法 SD大鼠40只随机分成... 目的分析戊四氮(PTZ)点燃慢性癫痫模型SD大鼠脑组织酪氨酸激酶受体B(TrKB)及谷氨酸转运体1(GLT-1)的表达变化,为进一步研究胶质细胞BDNF/TrkB信号通路与GLT-1的相关性提供实验依据,为癫痫的防治提供靶位线索。方法 SD大鼠40只随机分成模型组(30只)及对照组(10只),采用PTZ点燃法制作慢性癫痫大鼠模型。运用Western技术分析SD大鼠PTZ点燃后7天海马及颞叶皮层TrkB和GLT-1的蛋白表达、采用免疫荧光双标法分析SD大鼠PTZ点燃后7天海马及颞叶皮层GFAP/TrkB双标阳性细胞的表达,并与对照组进行比较。结果 SD大鼠慢性癫痫发作后,海马及颞叶皮层TrkB和GLT-1蛋白的表达均明显上调、GFAP/TrkB双标阳性细胞平均光密度值较对照组明显增高(P<0.05)。结论 PTZ点燃慢性癫痫SD大鼠海马及颞叶皮层脑组织TrkB表达上调与GLT-1表达异常之间可能存在内在联系,BDNF/TrkB信号通路可能通过改变PTZ点燃慢性癫痫SD大鼠胶质细胞中GLT-1的生物效应来影响或参与癫痫过程。 展开更多
关键词 癫痫 TRKB glt-1 戊四氮 星形胶质细胞
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GFAP、GLAST及GLT-1在颞叶内侧癫痫患者海马胶质细胞中的表达 被引量：2
7
作者 卢军 曾其昌 +2 位作者 王琴 黄亚辉 彭琼 《海南医学院学报》 CAS 2016年第4期392-395,共4页
目的：探讨胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、谷氨酸／天冬氨酸转运体（GLAST）及谷氨酸转运体1（GLT-1）在颞叶内侧癫痫患者海马胶质细胞中的表达。方珐：选取本院神经外科住院进行前颞叶切除手术治疗的颞叶内侧癫痫患者62例作为研究对象，... 目的：探讨胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、谷氨酸／天冬氨酸转运体（GLAST）及谷氨酸转运体1（GLT-1）在颞叶内侧癫痫患者海马胶质细胞中的表达。方珐：选取本院神经外科住院进行前颞叶切除手术治疗的颞叶内侧癫痫患者62例作为研究对象，根据切除的海马组织在光镜下的情况分为海马硬化组、海马非硬化纽，检测两组GFAP、GLAST及GLT～1并进行比较。结果：GFAP主要表达在胶质细胞的细胞浆和突出部分，在光镜下表现为星状、蜘蛛状，海马硬化组比海马非硬化组更亮，反应性星形细胞增生肥大，并交织成网状，海马硬化组的GFAP在总海马区、CA1区、CA2区、齿状回表达均高于海马非硬化组，差异具有统计学意义（P〈0．05）；GLAsT主要表达在胶质细胞的细胞浆和细胞膜上，海马各区均可见，光镜下CA1区呈现补丁状或斑片状，海马硬化纽GLAsT在CA1区表达减少，而在CA2区表达增多，在齿状回GLAST丢失高于海马非硬化纽，差异具有统计学意义（P〈0．05）；GI，T～1主要表达在胶质细胞的细胞膜上，海马硬化组在CA2区椎体神经元之间的GLT-1表达增强，形成了椎体细胞层的“网格”，而海马硬化组在CA1区GLT—1丢失高于海马非硬化组，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：癫痫频繁发作后海马胶质细胞反应性过度增生、GLAST及GI．T-1的重新分布可能是颞叶内侧癫痫发病的重要原因。 展开更多
关键词 胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST) 谷氨酸转运体1(glt-1) 颞叶内侧癫痫 海马 胶质细胞
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HBV相关糖基转移酶Glt25D2的核苷酸单糖结合活性分析 被引量：2
8
作者 董芳 张锦前 +3 位作者 肖凡 朱新宇 成军 魏红山 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第2期93-96,共4页
目的体外克隆表达人类糖基转移酶Glt25D2,利用Biacore分析系统对其活化单糖及钙离子结合活性进行分析。方法构建Glt25D2原核表达载体pET32a-Glt25D2,转化大肠埃希菌BL21,克隆表达糖基转移酶Glt25D2。离心集菌,制备蛋白样品,进行SDS-PAG... 目的体外克隆表达人类糖基转移酶Glt25D2,利用Biacore分析系统对其活化单糖及钙离子结合活性进行分析。方法构建Glt25D2原核表达载体pET32a-Glt25D2,转化大肠埃希菌BL21,克隆表达糖基转移酶Glt25D2。离心集菌,制备蛋白样品,进行SDS-PAGE电泳分析;融合蛋白线性梯度洗脱,Ni-NTA柱纯化,后做Western blot鉴定。用纯化后的Glt25D2融合蛋白包被CM5芯片,分别用不同浓度的活性单糖及钙离子灌注芯片,利用Biacore生物分子相互作用分析仪分析Glt25D2的活化单糖及钙离子结合活性。结果体外成功表达人类糖基转移酶Glt25D2融合蛋白。Biacore分析显示,该糖基转移酶与400、200、100、50μg/ml唾液酸的结合活性分别为108、71、50和20 RU,与200、100、50、0μg/ml钙离子的结合活性分别为37、20、10和0 RU。结论人类糖基转移酶Glt25D2重组蛋白具有较强的钙离子及唾液酸结合活性。 展开更多
关键词 糖基转移酶 原核表达 glt25D2 生物分子相互作用分析
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GLT25D1血清水平与慢性乙型肝炎肝纤维化进程相关性分析 被引量：2
9
作者 张仁雯 郝晓花 +6 位作者 刘燃 张晓静 任慧 李红敏 王智强 成军 魏红山 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2013年第4期360-366,共7页
目的探讨GLT25D1血清水平与慢性乙型肝炎肝纤维化进程的相关性。方法通过抗原表位预测软件BepiPred 1.0Server将GLT25D1基因片段分为GLT25D1-1和GLT25D1-2两部分,PCR扩增获得目的片段,构建其原核表达质粒;对制备的多克隆抗体进行效价及... 目的探讨GLT25D1血清水平与慢性乙型肝炎肝纤维化进程的相关性。方法通过抗原表位预测软件BepiPred 1.0Server将GLT25D1基因片段分为GLT25D1-1和GLT25D1-2两部分,PCR扩增获得目的片段,构建其原核表达质粒;对制备的多克隆抗体进行效价及特异性分析。通过以GLT25D1为抗原的ELISA双抗体夹心的方法,检测其在HBV感染不同阶段的患者的血清水平。结果成功表达重组蛋白,Western blot鉴定正确;成功制备兔抗人(GLT25D1-1、GLT25D1-2)的多克隆抗体,效价较高,特异性良好。通过ELISA方法检测HBV感染患者血清,慢性乙肝(病理结果不超过S3期)、肝硬化(S3-4期及S4期)以及肝癌患者中GLT25D1的OD值较正常组均有显著性差异(P<0.01)。结论通过血清学检测结果,我们发现GTL25D1存在于HBV感染的肝病的各进程中,进而我们推测血清GLT25D1可能会作为检测肝纤维化进程的一个新的血清学指标。 展开更多
关键词 糖基转移酶 glt25D1 多克隆抗体 ELISA 肝纤维化 慢性乙型肝炎
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Taq Man探针定量PCR对癫痫大鼠脑组织GLAST、GLT-1表达变化的研究 被引量：4
10
作者 牛廷献 罗晓红 史智勇 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第9期522-528,共7页
目的探讨谷氨酸转运蛋白GLAST、GLT-1不同亚型在癫痫发作过程中的表达变化。方法采用TaqMan探针实时定量PCR(real-time quantitative PCR)技术,检测癫痫发作后不同时点脑组织中谷氨酸转运蛋白GLAST、GLT-1表达量的变化。结果癫痫发作后... 目的探讨谷氨酸转运蛋白GLAST、GLT-1不同亚型在癫痫发作过程中的表达变化。方法采用TaqMan探针实时定量PCR(real-time quantitative PCR)技术,检测癫痫发作后不同时点脑组织中谷氨酸转运蛋白GLAST、GLT-1表达量的变化。结果癫痫发作后不同时点GLAST、GLT-1在大脑中的表达量明显低于对照组(P<0.01),且在大脑中不同时点的表达量具有明显的差异(P<0.01);GLAST在小脑中不同时点的表达量无明显差异(P>0.05),但均明显低于对照组(P<0.01);GLT-1在小脑中无表达。结论癫痫发作后谷氨酸转运蛋白GLAST、GLT-1在大脑中的表达量明显减少;GLAST、GLT-1表达量的减少可能是癫痫发病的诱因之一。 展开更多
关键词 定量PCR 癫痫 GLAST glt-1
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rhEPO对缺糖缺氧大鼠星形胶质细胞GLT-1和GLAST表达的影响 被引量：1
11
作者 庞一强 杨静 +2 位作者 吴刚 汪静 姜树原 《动物医学进展》 北大核心 2016年第10期81-84,共4页
为了研究重组人促红细胞生成素(rhEPO)对缺糖缺氧(OGD)培养大鼠星形胶质细胞GLT-1和GLAST表达的影响,将缺糖缺氧培养星形胶质细胞分成不同浓度rhEPO处理组:0、20、100U/mL,不同浓度rhEPO与星形胶质细胞在缺氧缺糖条件下培养6h,用RT-PCR... 为了研究重组人促红细胞生成素(rhEPO)对缺糖缺氧(OGD)培养大鼠星形胶质细胞GLT-1和GLAST表达的影响,将缺糖缺氧培养星形胶质细胞分成不同浓度rhEPO处理组:0、20、100U/mL,不同浓度rhEPO与星形胶质细胞在缺氧缺糖条件下培养6h,用RT-PCR测定GLT-1和GLAST的mRNA表达变化,免疫印迹技术测定GLT-1和GLAST蛋白的表达变化。20、100U/mL rhEPO星形胶质细胞GLT-1的mRNA和蛋白质水平较OGD对照组明显升高(P<0.05),GLAST的mRNA和蛋白质水平变化不明显(P>0.05)。GLT-1水平可能与rhEPO对缺糖缺氧培养大鼠星形胶质细胞的保护作用有关。 展开更多
关键词 重组人促红细胞生成素 星形胶质细胞 glt-1 GLAST 缺糖缺氧
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胰岛素增加培养的星形胶质细胞中谷氨酸转运体GLT1的表达 被引量：1
12
作者 季一飞 徐思敏 +2 位作者 沈颖 朱佳 王新新 《西部医学》 2017年第6期763-768,772,共7页
目的研究胰岛素对GLT1表达的影响。方法对原代星形胶质细胞培养后加入胰岛素刺激,再采用免疫印迹法、细胞表面生物素酰化、实时定量PCR、免疫染色、电生理学等方法,检测GLT1的表达变化。结果研究结果发现用胰岛素短期刺激会导致总的和... 目的研究胰岛素对GLT1表达的影响。方法对原代星形胶质细胞培养后加入胰岛素刺激,再采用免疫印迹法、细胞表面生物素酰化、实时定量PCR、免疫染色、电生理学等方法,检测GLT1的表达变化。结果研究结果发现用胰岛素短期刺激会导致总的和细胞膜表面的GLT1表达均增加。胰岛素处理后会增加Akt磷酸化,而Akt磷酸化的抑制剂triciribine具有明显抑制胰岛素的作用。研究还发现GLT1表达上调与KBBP表达增加和GLT1mRNA水平增加相关。结论胰岛素会调控星形胶质细胞GLT1的表达,这可能在中枢神经系统损伤后的星形胶质细胞反应中起着重要作用。 展开更多
关键词 谷氨酸转运体 glt1 星形胶质细胞 胰岛素 兴奋性中毒 生长因子 AKT
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GLT对烟粉虱的防治作用研究
13
作者 张雪丽 张清泉 +3 位作者 蒋金炜 丁识伯 陈新 黄凤宽 《广东农业科学》 CAS CSCD 2008年第7期94-97,共4页
测定GLT加入不同的助剂和杀虫剂防治烟粉虱的试验结果表明,加入不同的助剂或者与其他杀虫剂进行复配在烟粉虱防治中具有较好的效果。微粒涂布技术是一种新型的无公害的病虫害防治技术,能够有效地控制病虫害,并达到增产和提高品质的目的。
关键词 微粒涂布技术 glt 烟粉虱
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急性眼高压后大鼠视网膜GLT-1的表达变化
14
作者 李明波 胡生发 +2 位作者 黄良 黄菊芳 罗学港 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第6期827-829,共3页
目的:检测急性眼高压后大鼠视网膜GLT-1的表达变化。方法:成年大鼠左眼眼压升高至闪光视网膜电图b波消失的临界眼压且维持缺血60min。实验动物分别存活1、3、7或14d后通过免疫组织化学检测大鼠视网膜GLT-1的表达变化,尼氏染色检测节细... 目的:检测急性眼高压后大鼠视网膜GLT-1的表达变化。方法:成年大鼠左眼眼压升高至闪光视网膜电图b波消失的临界眼压且维持缺血60min。实验动物分别存活1、3、7或14d后通过免疫组织化学检测大鼠视网膜GLT-1的表达变化,尼氏染色检测节细胞的变化。结果:急性眼高压后视网膜随着再灌时间的延长,内层视网膜厚度逐渐变薄,节细胞层细胞数目进行性下降。GLT-1阳性产物主要表达于OPL和IPL。急性HIOP后再灌1天时,与正常组相比,此时GLT-1表达增加(P＜0．05)。再灌3天时, GLT-1表达量继续增加。第7天时GLT-1表达开始下调,至14天时,GLT-1表达明显低于3天组,但仍高于正常组(P＜0．05)。结论:急性眼高压可导致视网膜GLT-1表达增加,其机制可能与其自身的保护反应有关。 展开更多
关键词 急性高眼压 glt-1 视网膜 大鼠
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p38 MAPK反义寡聚脱氧核苷酸抑制脑缺血预处理诱导脑缺血耐受过程中GLT-1表达上调
15
作者 王佳磊 蒋孟洋 +5 位作者 张孟岳 王文帅 李力 张玲燕 李文斌 张敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1253-1259,共7页
目的观察p38 MAPK反义寡聚脱氧核苷酸(ASODNs)是否影响大鼠脑缺血预处理(CIP)诱导脑缺血耐受过程中GLT-1蛋白的表达。方法 80只健康Wistar大鼠,♂,永久凝闭椎动脉,随机分为6组:(1)假手术(sham)组(n=10);(2)CIP组(n=10);(3)脑缺血损伤(Ⅱ... 目的观察p38 MAPK反义寡聚脱氧核苷酸(ASODNs)是否影响大鼠脑缺血预处理(CIP)诱导脑缺血耐受过程中GLT-1蛋白的表达。方法 80只健康Wistar大鼠,♂,永久凝闭椎动脉,随机分为6组:(1)假手术(sham)组(n=10);(2)CIP组(n=10);(3)脑缺血损伤(Ⅱ)组(n=10);(4)CIP+Ⅱ组(n=10);(5)p38 MAPK AS-ODNs+CIP+Ⅱ组(n=30);(6)p38 MAPK S-ODNs+CIP+Ⅱ组(n=10)。(5)组中根据p38 MAPK AS-ODNs所用剂量不同分为5 nmol、10 nmol及15 nmol亚组(n=10);p38 MAPK S-ODNs的剂量为15nmol。所有动物均在sham手术或末次脑缺血/再灌注后6 h和2 d取材,Western blot和(或)免疫组织化学法检测p-p38MAPK及GLT-1蛋白的表达。结果 CIP引起p-p38 MAPK适度升高和GLT-1明显升高,并抑制Ⅱ引起的p-p38 MAPK过度升高及GLT-1表达下调;注射p38 MAPK AS-ODNs抑制CIP诱导脑缺血耐受过程中p-p38 MAPK和GLT-1的表达上调,呈剂量依赖性。结论 p38 MAPK AS-ODNs阻断CIP诱导脑缺血耐受过程中GLT-1表达上调。 展开更多
关键词 p38 MAPK glt-1 AS-ODNs 脑缺血预处理 海马 大鼠
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糖基因GLT25D1和GLT25D2缺失对APAP诱导的急性药物性肝损伤的影响
16
作者 张福阳 何玲玲 +4 位作者 杨君茹 高美欣 王世伟 肖凡 魏红山 《医学分子生物学杂志》 CAS 2021年第2期96-103,共8页
目的 研究糖基因Glt25D1和Glt25D2在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的急性药物性肝损伤中的可能作用及机制.方法 抽取6~8周雄性糖基因Glt25D1和Glt25D2敲除小鼠(Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-))及野生型小鼠(Wild type,WT),构建... 目的 研究糖基因Glt25D1和Glt25D2在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的急性药物性肝损伤中的可能作用及机制.方法 抽取6~8周雄性糖基因Glt25D1和Glt25D2敲除小鼠(Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-))及野生型小鼠(Wild type,WT),构建药物性肝损伤模型.实验组腹腔内注射500 mg/kg APAP,对照组给予相同剂量生理盐水.造模6 h后处死小鼠.检测小鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,观察肝组织病理.分离提纯小鼠肝原代细胞,分别加APAP和衣霉素(Tunicamycin,Tm)刺激6 h后收取细胞,提取细胞蛋白和RNA.q-PCR、Western印迹检测小鼠肝脏组织及原代肝细胞Glt25D1和Glt25D2、内质网应激相关蛋白、凋亡相关蛋白、炎性因子的表达变化趋势.结果 Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-)造模组小鼠ALT和AST水平均显著高于WT造模组.小鼠肝脏HE染色可见,Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-)造模组小鼠肝损伤程度比WT造模组更严重.Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-) APAP造模组GRP78、chop以及cleaved caspase-12、cleaved caspase-3等内质网应激相关蛋白的表达量高于WT造模组,同时伴有线粒体细胞色素C的释放.结论 Glt25D1和Glt25D2基因敲低加重小鼠APAP诱导的急性肝损伤,促进内质网应激,促进肝细胞凋亡. 展开更多
关键词 内质网应激 急性肝损伤 对乙酰氨基酚 糖基化修饰 glt25D1 glt25D2
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GLT-1基因siRNA真核表达载体的构建及其在大鼠神经胶质细胞中的抑制效应
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作者 李哲 王玮 +4 位作者 雷迎峰 尹文 王巍 李惠民 廖衡 《生物技术通讯》 CAS 2007年第1期5-8,共4页
目的:研究特异性siRNA对大鼠神经胶质细胞中GLT-1基因的阻抑效果。方法:根据GLT-1基因的序列特点和RNAi设计原则,设计其shRNA的核苷酸片段。退火后将其克隆入pSupressorNeo,构建可表达大鼠GLT-1基因siRNA的重组真核表达质粒pSuppressorN... 目的:研究特异性siRNA对大鼠神经胶质细胞中GLT-1基因的阻抑效果。方法:根据GLT-1基因的序列特点和RNAi设计原则,设计其shRNA的核苷酸片段。退火后将其克隆入pSupressorNeo,构建可表达大鼠GLT-1基因siRNA的重组真核表达质粒pSuppressorNeo-GLT-1;利用脂质体法将其转染神经胶质细胞后,用RT-PCR、Western印迹及免疫荧光法等方法检测转染的神经胶质细胞中GLT-1基因的表达水平。结果:瞬时转染的神经胶质细胞中GLT-1基因的表达受到明显抑制,GLT-1蛋白含量明显下降。结论:pSuppressor-Neo-GLT-1质粒构建成功,瞬时转染神经胶质细胞后可以明显抑制GLT-1基因的表达。 展开更多
关键词 glt-1基因 RNA干扰 神经胶质细胞 转染
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gltS基因缺失对禽致病性大肠杆菌生物学特性的影响 被引量：2
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作者 王利丽 张春晓 +6 位作者 张闫 孙欣艺 侯冠欣 陶勇 赵奇 张志强 史秋梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期690-697,共8页
为研究谷氨酸转运蛋白GltS编码基因对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物学特性的影响,本研究利用λ-Red同源重组方法构建APEC CE129(WT)株gltS基因缺失株CE129ΔgltS(KO)和基因回补株CE129ΔgltS/gltS(RS),并均经PCR及测序鉴定,结果显示,gltS... 为研究谷氨酸转运蛋白GltS编码基因对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物学特性的影响,本研究利用λ-Red同源重组方法构建APEC CE129(WT)株gltS基因缺失株CE129ΔgltS(KO)和基因回补株CE129ΔgltS/gltS(RS),并均经PCR及测序鉴定,结果显示,gltS基因缺失株及回补株均正确构建。通过连续10 h测定各菌株OD600nm值绘制WT、KO、RS菌株的生长曲线,利用梅里埃自动生化鉴定系统测定3株菌的生化特性;利用K-B纸片法检测3株菌对8类16种药物的敏感性;利用半固体培养基检测3株菌的运动能力。结果显示,3株菌的生长特性、生化特性、药敏特性和运动能力均无明显差异。利用细菌平板计数法计算检测WT与KO菌株的体外竞争指数(CI),分析KO菌株是否致弱。利用结晶紫染色法测定3株菌的生物被膜(BF)的形成能力,并利用刚果红琼脂板及含荧光增白剂的琼脂板分别检测菌株BF中curli菌毛及纤维素的形成情况。结果显示,WT与KO菌株的体外CI为0.32,表明KO菌株轻度致弱。BF形成能力检测结果显示,相对于WT、RS菌株,KO菌株BF的形成能力极显著降低(P<0.001),且KO菌株BF的主要组成成分curli菌毛有明显变化,表明gltS基因参与APEC BF中curli菌毛的形成,而3株菌在含荧光增白剂琼脂板的荧光强度均一致,表明gltS基因与APEC BF中纤维素的形成无关。采用细菌计数法统计WT、KO、RS菌株在6种应激条件下的生存率,结果显示,除氧化应激条件下3株菌的生存率无显著差异外,在酸、碱、热、铁饥饿应激环境中,与WT和RS菌株相比,KO菌株的生存率均极显著降低(P<0.001、P<0.0001)。在50 mg/L、100 mg/L NaNO2中,KO菌株的生存率显著降低(P<0.01);在150 mg/L NaNO2中,KO菌株的生存率极显著降低(P<0.001)。采用菌落计数法测定WT和KO菌株抗不同浓度血清的杀菌作用,结果显示,在高浓度的血清中(50%~100%),WT、KO菌的数量显著高于DH5α对照菌株(P<0.05);但在不同浓度血清中KO菌的数量与WT菌的数量差异不显著。本研究结果首次证实gltS基因参与APEC部分生物学特性的形成,为进一步阐释gltS基因功能及该菌的致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 禽致病性大肠杆菌 gltS基因缺失 生物学特性
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Glt25d1基因敲低对刀豆蛋白A诱导的自身免疫性肝炎小鼠巨噬细胞和中性粒细胞的影响 被引量：4
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作者 高美欣 何玲玲 +6 位作者 叶小慧 杨君茹 李佳 张曼卡 张健 肖凡 魏红山 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2020年第1期36-43,共8页
目的研究Glt25d1基因在刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的自身免疫性肝炎中的作用及其对巨噬细胞和中性粒细胞的影响。方法随机抽取6~8周无特定病原体雌性Glt25d1+/-小鼠及与其同窝出生的野生型(wild type,WT)小鼠,体质量(20±... 目的研究Glt25d1基因在刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的自身免疫性肝炎中的作用及其对巨噬细胞和中性粒细胞的影响。方法随机抽取6~8周无特定病原体雌性Glt25d1+/-小鼠及与其同窝出生的野生型(wild type,WT)小鼠,体质量(20±2)g,分为WT对照组、Glt25d1+/-对照组、WT造模组和Glt25d1+/-造模组,每组8只。造模组通过内眦静脉注射Con A,剂量为10 mg/kg,对照组给予相同剂量生理盐水注射。造模12 h后处死小鼠。检测小鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartateaminotransferase,AST)水平,观察肝组织病理。采用流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏和肝脏中巨噬细胞和中性粒细胞的比例。采用定量逆转录PCR(quantitative reverse transcriptase-mediated PCR,qRT-PCR)检测肝脏中单核-巨噬细胞趋化蛋白-1(monocyte/macrophage chemotaxis proteinⅠ,MCP-Ⅰ)、巨噬细胞炎性蛋白1α(macrophage inflammatory proteinⅠα,MIP-Ⅰα)、巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatoryproteinⅡ,MIP-Ⅱ)及淋巴细胞抗原6G(lymphocyteantigen6complexlocusG,Ly6G)等mRNA的相对表达量。结果 WT对照组和Glt25d1+/-对照组小鼠ALT [(52.00±18.19)U/L vs (45.00±6.85)U/L]和AST [(168.17±21.33)U/L vs(276.17±83.37)U/L]水平差异无统计学意义(t值分别为0.360、1.255,P值分别为0.7263、0.2589)。Con A造模12 h后,WT造模组小鼠ALT和AST水平分别为(3089.67±663.92)U/L、(3099.50±519.15)U/L,Glt25d1+/-造模组小鼠ALT和AST水平分别(11565.17±1381.38)U/L、(10875.17±1558.68)U/L,均显著高于未造模组(P均<0.05),Glt25d1+/-造模组小鼠ALT和AST水平均显著高于WT造模组(t值分别为5.530、4.733,P值分别为0.0003、0.0032)。肝组织HE染色示:WT对照组和Glt25d1+/-对照组小鼠肝组织未见明显损伤,Con A诱导12 h后,与WT Con A造模组小鼠相比,Glt25d1+/-造模组小鼠肝脏坏死面积更广、汇管区炎性细胞浸润更显著。Glt25d1+/-对照组小鼠脾脏中巨噬细胞比例显著高于WT对照组[(5.04±0.32)%vs(3.48±0.31)%],差异有统计学意义(t=2.954,P=0.0131),外周血[(0.26±0.09)%vs(0.63±0.16)%]和肝脏[(1.58±0.11)%vs(2.83±0.43)%]中差异无统计学意义(t值分别为1.456、1.626,P值分别为0.1733、0.1351)。Con A诱导12h后,与WT造模组相比,Glt25d1+/-造模组小鼠外周血中巨噬细胞比例显著降低[(0.12±0.21)%vs (0.43±0.10)%,t=2.955,P=0.0144],肝脏中巨噬细胞比例显著升高[(8.34±0.30)%vs (1.03±0.53)%,t=6.992,P=0.0002],脾脏中巨噬细胞比例无显著差异[(3.98±0.39)%vs (3.82±0.21)%,t=0.372,P=0.7173]。与WT对照组小鼠相比,Glt25d1+/-对照组小鼠脾脏中中性粒细胞比例显著升高[(5.20±0.76)%vs (2.46±0.35)%,t=3.836,P=0.0028],外周血[(0.67±0.26)%vs (1.96±0.77)%]和肝脏[(3.68±1.33)%vs (3.76±1.12)%]中中性粒细胞比例无显著差异(t值分别为1.078、0.039,P值分别为0.3040、0.9698)。Con A诱导12 h后,与WT造模组小鼠相比,Glt25d1+/-造模组小鼠外周血中性粒细胞比例显著降低[(1.37±0.22)%vs (14.40±2.72)%,t=4.782,P=0.0088],肝脏中巨噬细胞比例显著升高[(8.08±1.93)%vs (1.64±0.71)%,t=3.788,P=0.0043],脾脏中差异无统计学意义[(5.81±0.84)%vs (5.96±0.42)%,t=0.176,P=0.8621]。WT对照组小鼠MCP-Ⅰ、MIP-Ⅰα、MIP-Ⅱ及Ly6G mRNA相对表达量分别为0.66±0.31、1.08±0.23、1.04±0.17、1.05±0.19,Glt25d1+/-对照组小鼠上述指标分别为0.60±0.13、1.56±0.11、0.77±0.07、0.92±0.16,差异均无统计学意义(P均> 0.05)。WT造模组小鼠MCP-Ⅰ、MIP-Ⅰα、MIP-Ⅱ及Ly6G mRNA相对表达量分别为1.29±0.41、1.11±0.18、1.16±0.19、0.90±0.20,Glt25d1+/-造模组小鼠上述指标分别为2.51±0.26、4.72±0.45、2.62±0.36、2.36±0.59,Glt25d1+/-造模组均显著高于WT造模组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 Glt25d1基因敲低可加重小鼠Con A诱导的自身免疫性肝炎,降低外周血巨噬细胞和中性粒细胞比例,升高肝脏中巨噬细胞和中性粒细胞比例,并诱导肝脏细胞因子如MCP-Ⅰ、MIP-Ⅰα、MIP-Ⅱ及Ly6G转录水平升高。 展开更多
关键词 glt25d1 自身免疫性肝炎 巨噬细胞 中性粒细胞
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电针对创伤性脑损伤大鼠GLT-1和细胞凋亡的影响 被引量：4
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作者 张晓辉 柳依江 +1 位作者 杜若桑 崔海 《中国中医急症》 2021年第7期1161-1164,共4页
目的观察电针对创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑组织中谷氨酸转运蛋白-1(GLT-1)的表达和细胞凋亡的影响,探讨电针对创伤性脑损伤的脑保护作用。方法将40只SD大鼠随机分成假手术组、TBI组、手针组、电针组4组,每组10只。假手术组和TBI组不予以干... 目的观察电针对创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑组织中谷氨酸转运蛋白-1(GLT-1)的表达和细胞凋亡的影响,探讨电针对创伤性脑损伤的脑保护作用。方法将40只SD大鼠随机分成假手术组、TBI组、手针组、电针组4组,每组10只。假手术组和TBI组不予以干预,手针组和电针组在造模后立即干预,共7 d,所有大鼠分别在干预第2天、第4天、第7天进行mNSS评估神经功能。第7天干预结束后采用HE染色观察炎性细胞浸润情况、TUNEL检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR检测脑组织GLT-1 mRNA的表达情况。结果1)mNSS:在干预第2天,TBI组、手针组、电针组mNSS评分均高于假手术组,且TBI组与假手术组相比有统计学差异(P<0.01);在第4天和第7天,手针组和电针组评分虽都降低,但电针组比TBI组减少更为显著(P<0.01)。2)HE染色和TUNEL:与假手术组相比,TBI组和手针组炎性细胞数和凋亡细胞数均减少且有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与TBI组相比,电针组细胞数量显著降低(P<0.05)。3)实时荧光定量PCR:与假手术组相比,TBI组GLT-1 mRNA含量明显降低(P<0.05),电针组含量明显升高(P<0.01);与TBI组比较,电针组和手针组GLT-1mRNA表达升高(P<0.01或P<0.05);电针组的GLT-1 mRNA的表达量显著高于手针组(P<0.01)。结论针刺可提高TBI大鼠脑内GLT-1 mRNA的表达,抑制谷氨酸兴奋性毒性,减轻神经炎症,降低细胞凋亡和改善神经功能评分,从而减轻脑损伤达到保护脑的作用,且电针的干预效果优于手针。 展开更多
关键词 创伤性脑损伤 电针 手针 glt-1 细胞凋亡 大鼠
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