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单克隆抗体酶联免疫吸附抑制试验测定G2m(n)因子及成都地区汉族频率调查 被引量：4
1
作者 侯一平 苟清 吴梅筠 《中国法医学杂志》 CSCD 1991年第3期146-148,共3页
作者应用单克隆抗体,首次建立了检测人类免疫球蛋白同种异型 G2m(n)因子的酶联免疫吸附抑制试验。并调查了成都地区汉族群体 G2m(n)因子的频率。在被调查的517份血清中,G2m(n)因子阳性率为79.69%。由此计算出 G2m(n)基因频率为0.5493,... 作者应用单克隆抗体,首次建立了检测人类免疫球蛋白同种异型 G2m(n)因子的酶联免疫吸附抑制试验。并调查了成都地区汉族群体 G2m(n)因子的频率。在被调查的517份血清中,G2m(n)因子阳性率为79.69%。由此计算出 G2m(n)基因频率为0.5493,方差为0.0004。 展开更多
关键词 免疫球蛋白同种异型 g2m(n)因子 遗传多态性 单克隆抗体 酶联免疫吸附抑制试验
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人类免疫球蛋白同种异型G2m（23）因子在中国人群中的分布 被引量：1
2
作者 侯一平 苟清 吴梅筠 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1994年第5期337-341,共5页
应用单克隆抗体酶联免疫吸附抑制实验，对我国３个民族８个群体２１０４份血样进行了免疫球蛋白同种异型Ｇ２ｍ（２３）因子检测。经多元相关和多元回归分析发现，中国人Ｇ２ｍ（２３）基因频率分布呈沿海拔高度和纬度变化的渐变群。据... 应用单克隆抗体酶联免疫吸附抑制实验，对我国３个民族８个群体２１０４份血样进行了免疫球蛋白同种异型Ｇ２ｍ（２３）因子检测。经多元相关和多元回归分析发现，中国人Ｇ２ｍ（２３）基因频率分布呈沿海拔高度和纬度变化的渐变群。据此建立了可预测中国人群Ｇ２ｍ（２３）基因频率的多元回归方程。本文还讨论了Ｇ２ｍ（２３）基因频率形成渐变群的原因。 展开更多
关键词 免疫球蛋白 同种异型 g2m 基因频率 免疫遗传学
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单克隆抗体酶联免疫吸附抑制试验测定精斑G2m(n)因子
3
作者 侯一平 苟清 吴梅筠 《法医学杂志》 CAS CSCD 1991年第3期6-9,共4页
人类免疫球蛋白同种异型(human immuhoglobulin allotypes)包括Gm、Km及Am等系统。在法医学实践中可用于个人识别和亲子鉴定。关于人精液中同种异型因子的检测报道极少，我们应用抗G2m(n)因子的检测国内外均未见报道，我们应用抗G2m(n)... 人类免疫球蛋白同种异型(human immuhoglobulin allotypes)包括Gm、Km及Am等系统。在法医学实践中可用于个人识别和亲子鉴定。关于人精液中同种异型因子的检测报道极少，我们应用抗G2m(n)因子的检测国内外均未见报道，我们应用抗G2m(n)单克隆抗体建立了测定精液及精斑G2m(n)因子的酶联免疫吸附抑制试验。现报道如下。 展开更多
关键词 单克隆抗体 酶联免疫吸附抑制试验 测定 精斑 g2m(n)因子 法医物证检验学
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张家口地区汉族人群G2m(23)因子频率调查及血痕G2m(23)检出时限
4
作者 刘晓 马志刚 +1 位作者 章海山 孙洁 《中国法医学杂志》 CSCD 1997年第1期44-44,共1页
关键词 血痕 g2m(23) 检出时限 因子频率
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抗人同种异型G2m(23)单克隆抗体研制及特异性鉴定 被引量：2
5
作者 蒯应松 杨元立 +5 位作者 吴贤柱 王香菊 徐秀兰 崔家贵 李万水 谢英群 《中国法医学杂志》 CSCD 1994年第3期142-144,共3页
本文用快速液相色谱（FPLC）从G2m（23）阳性人血浆中纯化出IgG2蛋白，免疫BALB/c小鼠，建立了一株分泌抗人G2m（23）单克隆抗体的细胞株，定名为2G8。经抑制ELISA，双抗体ELISA及斑点ELISA分析，证明2G8抗体具有G2m（23）单一特异性。
关键词 单克隆抗体 ELISA g2m(23) 研制
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用酶联免疫吸附抑制试验检测血痕G2m(n)因子
6
作者 芶清 侯一平 吴梅筠 《华西医科大学学报》 CSCD 1992年第1期58-60,共3页
本文报道了用鼠抗人G2m(n)单克隆抗体作酶联免疫吸附抑制试验,检测人类血痕中G2m(n)因子。105份人血痕的G2m(n)因子测定结果与其相应血清G2m(n)因子测定结果完全一致,准确率达100%,所需血痕的最小量为0.25cm×0.125cm。此法为血痕... 本文报道了用鼠抗人G2m(n)单克隆抗体作酶联免疫吸附抑制试验,检测人类血痕中G2m(n)因子。105份人血痕的G2m(n)因子测定结果与其相应血清G2m(n)因子测定结果完全一致,准确率达100%,所需血痕的最小量为0.25cm×0.125cm。此法为血痕的个人识别提供了新手段。 展开更多
关键词 g2m(n)因子 人类血痕 个人识别 酶联免疫吸附抑制试验
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酶标2G8单克隆抗体斑点ELISA快速检验人血痕G2m(23)因子 被引量：1
7
作者 蒯应松 王香菊 +5 位作者 徐秀兰 杨元立 吴贤柱 崔家贵 李万水 谢英群 《中国法医学杂志》 CSCD 1993年第4期215-217,共3页
利用自制的抗人 G2m(23)酶标2G8酶标单克隆抗体,首次应用直接斑点 ELISA 方法检测血痕中 G2m(23)因子。该法最小检出量为0.000048μl 血清;整个试验可在15分钟内完成。对常见的13种动物血和8种鱼血无交叉反应;盲测450例干血痕结果全部... 利用自制的抗人 G2m(23)酶标2G8酶标单克隆抗体,首次应用直接斑点 ELISA 方法检测血痕中 G2m(23)因子。该法最小检出量为0.000048μl 血清;整个试验可在15分钟内完成。对常见的13种动物血和8种鱼血无交叉反应;盲测450例干血痕结果全部正确。该方法具有快速、准确、灵敏、简便等特点,有较大的实用价值。 展开更多
关键词 单克隆抗体 g2m(23)因子 斑点ELISA 血痕 法医学
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辽宁地区汉族人群G2m（23）因子遗传多态性分布的研究
8
作者 李春梅 王保捷 贾静涛 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1996年第4期362-362,共1页
辽宁地区汉族人群Ｇ２ｍ（２３）因子遗传多态性分布的研究李春梅，王保捷，贾静涛（法医学系血清学教研室，沈阳１１０００１）关键词Ｇ２ｍ（２３）；基因频率；遗传学从１９５５年Ｇｒｕｂｂ发现人类免疫球蛋白的第一个遗传标记［１... 辽宁地区汉族人群Ｇ２ｍ（２３）因子遗传多态性分布的研究李春梅，王保捷，贾静涛（法医学系血清学教研室，沈阳１１０００１）关键词Ｇ２ｍ（２３）；基因频率；遗传学从１９５５年Ｇｒｕｂｂ发现人类免疫球蛋白的第一个遗传标记［１］以来，免疫球蛋白的同种异型的遗传... 展开更多
关键词 g2m因子 基因频率 遗传多态性 汉族 辽宁
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山莴苣苦素通过Wnt/β-catenin信号通路诱导三阴性乳腺癌发生G2/M周期阻滞和凋亡 被引量：2
9
作者 努尔曼古丽·买买提明 王梦姣 +3 位作者 弯东磊 郝锋 康金森 杨建 《中国医院药学杂志》 北大核心 2025年第12期1356-1362,共7页
目的:探讨山莴苣苦素诱导三阴性乳腺癌细胞发生G2/M周期阻滞和凋亡的作用机制。方法:运用CellTiter-Glo发光法,检测山莴苣苦素对MDA-MB-468细胞活力的影响,计算IC50值;划痕愈合实验观察山莴苣苦素对MDA-MB-468细胞迁移能力的影响;流式... 目的:探讨山莴苣苦素诱导三阴性乳腺癌细胞发生G2/M周期阻滞和凋亡的作用机制。方法:运用CellTiter-Glo发光法,检测山莴苣苦素对MDA-MB-468细胞活力的影响,计算IC50值;划痕愈合实验观察山莴苣苦素对MDA-MB-468细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测山莴苣苦素对MDA-MB-468细胞周期的影响;通过转录组测序技术筛选差异表达基因,进行GO功能注释、KEGG通路富集及PPI网络分析;通过荧光素酶报告基因实验、q-PCR和Western blot实验验证富集结果及相关基因的表达水平。结果:与对照组相比,山莴苣苦素可以抑制MDA-MB-468细胞的增殖(P<0.01)和迁移(P<0.01),并阻断G2/M检查点的细胞分裂(P<0.01);转录组测序技术测序结果显示,共上调4340个基因,下调4091个基因;GO和KEGG结果显示,差异基因主要富集在经典Wnt和PI3K-Akt等信号通路;PPI网络分析筛选出度值排名前10的核心靶标;验证实验结果显示,山莴苣苦素能抑制Wnt报告细胞的荧光信号(P<0.05),下调Wnt3a、β-catenin基因(P<0.05)及蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达(P<0.05)。结论:山莴苣苦素可能通过负调控Wnt/β-catenin信号通路抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞的增殖和迁移,并诱导细胞发生G2/M周期阻滞从而促进其凋亡。 展开更多
关键词 MDA-MB-468细胞 山莴苣苦素 三阴性乳腺癌 WNT/Β-CATENIN信号通路 转录组测序技术 G2/M周期阻滞
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Br^+活化甲烷C—H键反应机理的理论研究 被引量：1
10
作者 余盛萍 颜红 +2 位作者 袁秀香 王欣 田安民 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第13期1518-1522,共5页
使用量子化学从头算方法和密度泛函理论对溴正离子活化甲烷分子C—H键的反应机理进行了理论研究,以探讨溴正离子成为一种活化甲烷催化剂的可能性.在B3LYP/6-311++G(3df,3p)和MP2/6-311++G(3df,3p)水平下优化了反应通道上各驻点(反应物... 使用量子化学从头算方法和密度泛函理论对溴正离子活化甲烷分子C—H键的反应机理进行了理论研究,以探讨溴正离子成为一种活化甲烷催化剂的可能性.在B3LYP/6-311++G(3df,3p)和MP2/6-311++G(3df,3p)水平下优化了反应通道上各驻点(反应物、中间体、过渡态和产物)的几何构型.在G2M(+)水平下计算了各物种的能量.研究结果表明:CH4与Br+(3P)反应存在三条不同的吸热反应途径,与Br+(1D)反应存在二条不同的放热反应通道.反应更易于通过单重态反应通道进行.理论结果不仅较好地解释了实验事实,还说明Br+有可能成为一种活化甲烷的催化剂. 展开更多
关键词 从头算 密度泛函理论 g2m(+)方法 甲烷C—H键活化 反应机理
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着丝粒蛋白F mRNA在肺腺癌细胞系、肺腺癌组织中的表达变化及相关调控信号通路分析 被引量：8
11
作者 王建松 王卫敏 蒋仲敏 《山东医药》 CAS 2019年第6期21-25,共5页
目的观察着丝粒蛋白F(CENPF) mRNA在肺腺癌细胞系中的表达变化,分析CENPF mRNA在肺腺癌组织中的表达变化并探讨其相关调控信号通路。方法①采用实时定量PCR法检测肺正常上皮细胞系BEAS-2B、肺腺癌细胞系(A549、NCI-H1650、NCI-H23、NCI-... 目的观察着丝粒蛋白F(CENPF) mRNA在肺腺癌细胞系中的表达变化,分析CENPF mRNA在肺腺癌组织中的表达变化并探讨其相关调控信号通路。方法①采用实时定量PCR法检测肺正常上皮细胞系BEAS-2B、肺腺癌细胞系(A549、NCI-H1650、NCI-H23、NCI-H1975) CENPF mRNA。②采用癌症基因组图谱(TCGA)的肺腺癌数据集分析CENPF mRNA表达与肺腺癌临床病理参数、预后的关系,Cox回归模型分析肺腺癌患者预后的影响因素。③采用基因集富集分析(GSEA)法分析受CENPF调控的肺腺癌相关信号通路。结果①A549、NCI-H1650、NCI-H23、NCI-H1975、BEAS-2B细胞CENPF mRNA相对表达量分别为4. 333±0. 271、3. 193±0. 188、2. 770±0. 091、5. 491±0. 249、1. 006±0. 071,A549、NCI-H1650、NCI-H23、NCI-H1975细胞CENPF mRNA相对表达量均高于BEAS-2B(P均<0. 05)。②肺腺癌、癌旁正常组织CENPF mRNA的相对表达量分别为9. 632±0. 059、6. 472±0. 093,二者比较,P <0. 001。CENPF mRNA表达与肺腺癌患者的性别、年龄、T分期、N分期及TNM分期相关(P均<0. 05)。生存分析结果显示,与CENPF mRNA低表达患者比较,CENPF mRNA高表达的肺腺癌患者的预后差(P=0. 001)。CENPF mRNA表达、临床TNM分期(HR分别为1. 667,1. 414; P均<0. 01)是影响肺腺癌患者预后的因素。③与CENPF mRNA高表达有关的肺腺癌调控信号通路有G2M检查点(P <0. 001,FDR <0. 001)、有丝分裂纺锤体(P <0. 001,FDR <0. 001)、E2F靶基因(P <0. 001,FDR <0. 001)、MYC靶基因(P <0. 001,FDR=0. 001)、m TOR信号通路(P=0. 002,FDR=0. 005)、精子形成(P=0. 002,FDR=0. 009)、未折叠蛋白反应(P=0. 002,FDR=0. 020)及PI3K/Akt/m TOR信号通路(P=0. 015,FDR=0. 117)等。结论肺腺癌组织及细胞系中存在CENPF高表达,CENPF高表达与肺腺癌患者的恶性病理特征及不良预后密切相关。CENPF mRNA高表达是影响肺腺癌患者预后的独立危险因素。CENPF可能通过调节G2M检查点、有丝分裂纺锤体、E2F靶基因、MYC靶基因、m TOR信号通路、精子形成、未折叠蛋白反应及PI3K/Akt/m TOR信号通路在肺腺癌的发生、发展中起重要作用。 展开更多
关键词 着丝粒蛋白F 肺肿瘤 肺腺癌 预后 g2m检查点 有丝分裂纺锤体 E2F靶基因 MYC靶基因 mTOR信号通路 精子形成 未折叠蛋白反应 PI3K/Akt/mTOR信号通路
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芒果苷对白血病HL-60细胞周期及CDC2/CyclinB1表达的影响 被引量：20
12
作者 姚奕斌 彭志刚 +2 位作者 刘振芳 杨杰 罗军 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期81-85,共5页
目的:观察芒果苷对白血病HL-60细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期分裂基因2(CDC2)表达的影响,以进一步探讨芒果苷抗白血病的分子作用机制。方法:应用MTT比色法测定芒果苷对白血病HL-60细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术(F... 目的:观察芒果苷对白血病HL-60细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期分裂基因2(CDC2)表达的影响,以进一步探讨芒果苷抗白血病的分子作用机制。方法:应用MTT比色法测定芒果苷对白血病HL-60细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术(FCM)检测芒果苷对细胞周期的影响;用RT-PCR技术检测CyclinB1及CDC2 mRNA表达水平。结果:芒果苷呈剂量及时间依赖性抑制HL-60细胞的生长,作用24 h后,G2/M期细胞增多,出现G2/M期阻滞;CyclinB1 mRNA和CDC2 mRNA的表达随药物质量浓度的增加而逐渐增强,在芒果苷质量浓度80μmol/L时表达达到峰值。结论:芒果苷可抑制HL-60细胞增殖,阻滞细胞周期于G2/M期,显著上调HL-60细胞CyclinB1 mRNA和CDC2 mRNA的表达水平。芒果苷诱导HL-60细胞G2/M期阻滞可能是其抗白血病作用的分子机制之一。 展开更多
关键词 芒果苷 HL-60细胞 G2/M期阻滞 CDC2 CYCLINB1
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二烯丙基二硫对人结肠癌SW480细胞周期的阻滞作用 被引量：16
13
作者 廖前进 苏坚 +3 位作者 何洁 宋颖 唐海林 苏琦 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第2期168-172,共5页
背景与目的:前期研究表明,二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)能有效在体内外抑制人结肠癌细胞增殖,并将细胞阻滞于G2/M期。本实验旨在进一步探讨DADS对人结肠癌SW480细胞周期阻滞作用的可能机制。方法:采用MTT、细胞计数法检测DADS... 背景与目的:前期研究表明,二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)能有效在体内外抑制人结肠癌细胞增殖,并将细胞阻滞于G2/M期。本实验旨在进一步探讨DADS对人结肠癌SW480细胞周期阻滞作用的可能机制。方法:采用MTT、细胞计数法检测DADS对SW480细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测DADS对SW480细胞周期的影响;免疫细胞化学法检测DADS作用后PCNA、P53表达情况,蛋白印迹法分析P21WAF1、细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)表达的改变。结果:不同浓度DADS作用SW480细胞24、48、72h后,对细胞增殖的抑制作用及细胞群体倍增时间呈浓度、时间依赖性增加。流式细胞仪分析结果显示,DADS作用SW480细胞后,G0/G1期细胞含量降低,S期细胞比例变化不大,而G2/M期细胞比例则明显增加,且随着处理浓度的增加和处理时间的延长,其G2/M期细胞含量逐渐增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。DADS作用后,免疫细胞化学检测显示,PCNA、P53蛋白表达明显下降。蛋白印迹分析显示,DADS作用SW480细胞后,Cyclin B1蛋白表达明显下降,P21WAF1蛋白的表达明显升高,均呈时间效应关系。结论:DADS可能通过下调PCNA、P53、Cyclin B1蛋白表达,上调P21WAF1蛋白表达引起SW480细胞G2/M期阻滞。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 结肠肿瘤 SW480细胞 细胞周期 G2/M期 周期阻滞
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重楼皂苷Ⅰ诱导G_2/M期阻滞及干扰微管结构抗结肠癌HCT116细胞作用机制 被引量：17
14
作者 于思 曹治兴 +3 位作者 杨雨婷 白姣姣 彭成 李玉芝 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期149-154,共6页
目的:探讨重楼皂苷Ⅰ(PPI)对人结肠癌HCT116细胞周期的影响,并研究其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测PPI对HCT116细胞的体外抑制活性;采用Hoechst33258染色法观察PPI对HCT116细胞核数量的影响;采用流式细胞仪检测PPI... 目的:探讨重楼皂苷Ⅰ(PPI)对人结肠癌HCT116细胞周期的影响,并研究其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测PPI对HCT116细胞的体外抑制活性;采用Hoechst33258染色法观察PPI对HCT116细胞核数量的影响;采用流式细胞仪检测PPI对HCT116细胞周期的影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶(CDC2)和细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(CDC25C)蛋白的表达和活性,利用细胞免疫荧光和激光扫描共聚焦显微镜检测PPI对HCT116细胞微管的影响。结果:PPI以剂量-时间依赖的方式抑制HCT116的体外增殖,Hoechst 33258染色发现PPI处理组双核细胞数量明显增加(P<0.05,P<0.01);将其细胞周期阻滞于G2/M期;PPI未能抑制G2/M期相关蛋白CDC2,CDC25C的表达和活性,却有促进作用;PPI可导致细胞微管结构紊乱。结论:PPI会导致HCT116细胞阻滞在G2/M期,其作用机制与干扰细胞内微管结构有关。 展开更多
关键词 重楼皂苷Ⅰ HCT116细胞 G2/M期阻滞 微管
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氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的研究 被引量：11
15
作者 李丹妮 刘华钢 +2 位作者 刘丽敏 刘林 梁霜 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期40-43,共4页
目的研究氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721生长活力;Hoechst33258核染色,观察细胞形态学变化;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率。结果氯化两面针碱作用于细胞后,... 目的研究氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721生长活力;Hoechst33258核染色,观察细胞形态学变化;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率。结果氯化两面针碱作用于细胞后,在体外呈浓度、时间依赖性显著抑制SMMC-7721细胞的生长,作用24、48、72h的半数抑制浓度(IC50)分别为(19.5±1.8)、(3.8±0.2)、(2.8±0.1)mg/L;Hoechst33258染色后,可见核染色质凝集,凋亡细胞呈致密浓染,与对照组相比,氯化两面针碱处理后凋亡细胞比例增加;流式细胞仪检测到G2/M细胞比例增加,G0/G1、S期细胞比例下降。药物作用于SMMC-7721细胞后,随浓度增加细胞凋亡率增加。结论氯化两面针碱对SMMC-7721细胞有明显的生长抑制作用,可能与改变细胞周期并诱导细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 氯化两面针碱 SMMC-7721细胞 G2/M期阻滞 细胞凋亡 肝癌
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Gadd45介导抑癌基因BRCA1诱导的G_2/M期阻滞 被引量：8
16
作者 宋咏梅 童彤 +4 位作者 付明 董立佳 金顺钱 吴旻 詹启敏 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期517-521,共5页
背景与目的:目前已经肯定,抑癌基因BRCA1是细胞周期监测点调控的重要因子,但BRCA1在细胞周期阻滞中的作用机制尚不完全清楚。本研究的目的是探讨Gadd45在BRCA1诱导的细胞周期阻滞中所起的作用。方法:应用转染、流式细胞仪细胞筛选(分选)... 背景与目的:目前已经肯定,抑癌基因BRCA1是细胞周期监测点调控的重要因子,但BRCA1在细胞周期阻滞中的作用机制尚不完全清楚。本研究的目的是探讨Gadd45在BRCA1诱导的细胞周期阻滞中所起的作用。方法:应用转染、流式细胞仪细胞筛选(分选)、Westernblot检测分析BRCA1诱导Gadd45的表达;利用CAT酶活性测定的方法检测外源BRCA1对Gadd45启动子所起作用;以流式细胞周期分析方法检测反义Gadd45转染对BRCA1诱导的细胞G2/M期阻滞的影响;采用细胞生长集落形成分析反义Gadd45转染HeLa、HCT116细胞在BRCA1诱导的细胞生长抑制过程所起的作用。结果:外源转染BRCA1可诱导Gadd45蛋白的表达;BRCA1激活Gadd45启动子的转录;反义Gadd45可显著阻遏BRCA1诱导细胞G2/M期阻滞;反义Gadd45转染可明显降低BRCA1对HeLa、HCT116细胞集落形成的抑制作用。结论:Gadd45作为BRCA1的下游调控基因,在BRCA1诱导的细胞G2/M期阻滞过程和生长抑制中起介导作用。 展开更多
关键词 Gadd45介导 抑癌基因 BRCAl诱导 G2/M期阻滞 作用机制
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双氢青蒿素对人胰腺癌细胞系增殖和凋亡的影响 被引量：6
17
作者 朱文赫 许娜 +4 位作者 徐俊杰 张红 李妍 吕士杰 张巍 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期70-74,共5页
目的探讨双氢青蒿素对人胰腺癌细胞(PANC-1)增殖活性及凋亡的影响,及其作用机制。方法30、60、120、240和480μmol/L双氢青蒿素作用PANC-1 48 h后,采用MTT法检测双氢青蒿素对PANC-1增殖活性的影响,流式细胞术检测其细胞周期和凋亡的变化... 目的探讨双氢青蒿素对人胰腺癌细胞(PANC-1)增殖活性及凋亡的影响,及其作用机制。方法30、60、120、240和480μmol/L双氢青蒿素作用PANC-1 48 h后,采用MTT法检测双氢青蒿素对PANC-1增殖活性的影响,流式细胞术检测其细胞周期和凋亡的变化,Western blotting检测细胞内周期相关蛋白cyclin B1、Cdk1、p21及凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3,Caspase-9和细胞色素C(Cyto C)蛋白表达变化。结果 MTT实验结果表明,30~480μmol/L双氢青蒿素对PANC-1增殖活性具有明显的抑制作用(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,双氢青蒿素可以使PANC-1细胞周期阻滞于G2/M期,并诱发PANC-1细胞发生凋亡,且随药物浓度呈现升高趋势(P<0.05)。Western blotting结果显示,双氢青蒿素作用后周期相关蛋白Cdk1和Cyclin B1蛋白表达降低,而P21蛋白表达升高。凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2蛋白表达比例升高,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9和Cyto C蛋白表达升高。结论双氢青蒿素能抑制PANC-1增殖并诱发细胞凋亡,其凋亡机制可能与线粒体途径相关。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 胰腺癌 G2/M期阻滞 免疫印迹法 人
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PPAR-γ抑制剂T0070907对人鼻咽癌细胞的生长抑制作用 被引量：6
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作者 孙月丽 吴明玮 +4 位作者 曾昭蕾 孙健 蔡于琛 冼励坚 赵擎宇 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期343-349,共7页
【目的】探讨PPAR-γ选择性抑制剂T0070907影响鼻咽癌(NPC)细胞体外生长的作用机制。【方法】通过RT-PCR和Westernblotting检测PPAR-γ受体在5株NPC细胞株(CNE1、CNE2、HONE1、SUNE1和5-8F)中mRNA和蛋白水平的表达;MTT法检测T0070907对... 【目的】探讨PPAR-γ选择性抑制剂T0070907影响鼻咽癌(NPC)细胞体外生长的作用机制。【方法】通过RT-PCR和Westernblotting检测PPAR-γ受体在5株NPC细胞株(CNE1、CNE2、HONE1、SUNE1和5-8F)中mRNA和蛋白水平的表达;MTT法检测T0070907对NPC细胞生长情况的影响;流式细胞术和Westernblotting检测T0070907对NPC细胞的细胞周期和细胞周期相关蛋白表达的影响。【结果】PPAR-γ在5株NPC细胞中均有表达;T0070907对NPC细胞株有明显生长抑制作用,并呈浓度、时间依赖性;T0070907作用于NPC细胞CNE1和CNE2后,G2/M期细胞比例则逐渐增加,且随着处理浓度的增加而增加,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。此外,随着T0070907处理浓度的增加,NPC细胞的细胞周期相关蛋白CyclinA、CyclinB1、Cdc2、Cdk2蛋白的表达逐渐下降,无活性的pCdc2蛋白表达则逐渐增强。【结论】PPAR-γ抑制剂T0070907能够抑制NPC细胞PPAR-γ的蛋白表达,并通过对细胞周期相关蛋白CyclinA、CyclinB1、Cdc2、Cdk2、pCdc2等蛋白的调控导致细胞周期G2/M期阻滞,从而抑制NPC细胞的生长。 展开更多
关键词 PPAR-Γ 鼻咽癌 T0070907 细胞周期 G2/M期
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二烯丙基二硫化物诱导G2/M期阻滞对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：9
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作者 张瑞涛 史惠蓉 +2 位作者 任芳 刘哲颖 姬鹏程 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期43-52,共10页
目的探讨二烯丙基二硫化物(DADS)诱导G2/M期阻滞对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法将不同浓度的DADS分别处理卵巢癌SK-OV-3和OVCAR-3细胞,采用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,裸鼠移植模型观察体... 目的探讨二烯丙基二硫化物(DADS)诱导G2/M期阻滞对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法将不同浓度的DADS分别处理卵巢癌SK-OV-3和OVCAR-3细胞,采用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,裸鼠移植模型观察体内抑瘤效果。进而应用流式细胞术检测细胞周期分布的变化,Western blot检测细胞中G2/M检验点相关信号通路、增殖和凋亡相关蛋白的表达。结果 MTT法检测显示,不同浓度的DADS作用SK-OV-3 (F=247. 86,P=0. 000)和OVCAR-3细胞(F=302. 54,P=0. 000)后,随着DADS浓度增高,细胞增殖抑制率明显升高,呈浓度依赖性。DADS处理24 h时SK-OV-3 (F=335. 12,P=0. 000)和OVCAR-3细胞(F=347. 43,P=0. 000)的增殖抑制率明显高于处理12 h和48 h时的细胞抑制率,呈明显的时间依赖性。流式细胞术检测结果显示,不同浓度的DADS作用SK-OV-3、OVCAR-3细胞后,随着DADS浓度的增高,细胞凋亡率明显升高,呈明显的浓度依赖性(P <0. 05)。DADS处理24 h时SK-OV-3和OVCAR-3细胞的凋亡率明显高于处理12和48 h时,呈明显的时间依赖性(P <0. 05)。与空白处理组相比,腹腔注射DADS溶液可明显抑制卵巢癌细胞的裸鼠移植瘤体积(F=548. 23,P=0. 000; F=311. 84,P=0. 000)。将30 mg/L的DADS作用于SK-OV-3和OVCAR-3细胞24 h后,与空白处理细胞相比,DADS处理后的SK-OV-3和OVCAR-3细胞中处于G2期的细胞百分率明显增加(F=375. 11,P=0. 000; F=256. 48,P=0. 000)。将30 mg/L DADS分别作用于SK-OV-3和OVCAR-3细胞24 h后,p-Chk1 (ser345)(F=108. 89,P=0. 013; F=97. 58,P=0. 018)、p-CDC25C (ser216)(F=87. 25,P=0. 025; F=114. 25,P=0. 009)、p-P53 (ser15)(F=112. 41,P=0. 011; F=255. 87,P=0. 000)、P21WAF1 (F=246. 38,P=0. 001; F=141. 36,P=0. 005)和p-CDK1 (Thr14/Tyr15)蛋白(F=298. 12,P=0. 000; F=233. 15,P=0. 000)的表达明显增加,CDK1 (F=308. 24,P=0. 000; F=257. 55,P=0. 000)和Cyclin B1蛋白(F=223. 15,P=0. 001; F=241. 28,P=0. 000)的表达明显减少,增殖和凋亡相关蛋白PCNA (F=77. 36,P=0. 031; F=157. 28,P=0. 001)、Ki-67 (F=205. 64,P=0. 007; F=315. 22,P=0. 000)和Survivin蛋白(F=122. 13,P=0. 013; F=188. 24,P=0. 000)表达明显减少,Cleaved-caspase3蛋白表达明显增加(F=86. 46,P=0. 023; F=99. 11,P=0. 009)。结论 DADS可抑制卵巢癌细胞增殖,诱导其凋亡;其分子机制可能与G2/M检验点Chk1-CDC25C和P53-P21WAF1通路激活、CDK1活性降低、CDK1和CyclinB1蛋白表达减少,最终导致卵巢癌细胞G2/M期阻滞有关。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫化物 卵巢上皮性癌 G2/M期阻滞 增殖 凋亡
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自噬在ZEA对睾丸支持细胞细胞周期影响中的作用 被引量：9
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作者 王冰洁 郑王龙 +7 位作者 司梦雪 刘青 邹辉 顾建红 袁燕 刘学忠 刘宗平 卞建春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1327-1333,共7页
为探讨玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)雄性生殖毒性的机理,本试验展开了ZEA对睾丸支持细胞细胞周期的影响以及自噬在ZEA对睾丸支持细胞细胞周期影响中的作用研究。试验以原代睾丸支持细胞为材料,分别以浓度为0(对照组),0.1,1,10,20,30μ... 为探讨玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)雄性生殖毒性的机理,本试验展开了ZEA对睾丸支持细胞细胞周期的影响以及自噬在ZEA对睾丸支持细胞细胞周期影响中的作用研究。试验以原代睾丸支持细胞为材料,分别以浓度为0(对照组),0.1,1,10,20,30μmol/L ZEA进行染毒,24h后利用CCK-8法、流式细胞术、免疫荧光技术和Western blot等进行ZEA对睾丸支持细胞的活率、细胞周期分布、LC3聚点、自噬及细胞周期相关蛋白等影响的检测。流式细胞术检测结果显示:与对照组比较,当ZEA浓度高于10μmol/L时,G0/G1期比例显著下降(P<0.05),G2/M期的比例极显著升高(P<0.01);与20μmol/L ZEA组相比,自噬抑制剂(CQ)+20μmol/L ZEA组细胞周期的G2/M期的比例显著降低(P<0.05),自噬促进剂(RAP)+20μmol/L ZEA组细胞周期的G2/M期的比例显著升高(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,当ZEA浓度高于10μmol/L时,产生LC3荧光信号的细胞数目较对照组呈极显著性升高(P<0.01)。Western blot检测结果显示:与对照组比较,当ZEA浓度高于10μmol/L时,LC3蛋白的表达量呈极显著性升高(P<0.01),CDK4、CyclinD1等细胞周期蛋白的表达显著降低(P<0.05);与20μmol/L ZEA组相比,CQ+20μmol/L ZEA组CyclinD1、CDK4等蛋白的表达量上升(P<0.05),RAP+20μmol/LZEA组CyclinD1、CDK4等的表达量下降(P<0.05)。结果表明:ZEA能诱导睾丸支持细胞发生自噬,并使睾丸支持细胞发生G2/M期阻滞,且存在剂量依赖性;促进自噬可导致细胞周期阻滞在G2/M期,造成M期延长,而自噬的缺陷可以部分逆转ZEA诱导睾丸支持细胞周期G2/M期的阻滞。在一定浓度范围内,ZEA能显著抑制睾丸支持细胞的增殖,细胞自噬在这一过程中起促进作用。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 睾丸支持细胞 细胞周期 G2/M期阻滞 自噬
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