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动态光散射在FOF1-ATPase制备过程中的应用 被引量:1
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作者 李娜 聂荣鑫 +1 位作者 尚桂军 仓怀兴 《现代仪器》 2011年第6期7-10,共4页
采用超声波破碎茵体、DEAE阴离子柱和Superdex200分子筛柱联用法得到较纯的F0F1-ATPase全酶,并得到SDS-PAGE电泳和动态光散射检测确认。动态光散射检测显示,FOF1-ATPase分子团尺寸随温度升高而增加,不同于普通胶体和单亚基蛋白,判断与FO... 采用超声波破碎茵体、DEAE阴离子柱和Superdex200分子筛柱联用法得到较纯的F0F1-ATPase全酶,并得到SDS-PAGE电泳和动态光散射检测确认。动态光散射检测显示,FOF1-ATPase分子团尺寸随温度升高而增加,不同于普通胶体和单亚基蛋白,判断与FOF1-ATPase的多亚基结构有关。研究表明,动态光散射技术是检测蛋白质均一性和稳定性的有效手段。 展开更多
关键词 F0F1-atpase 制备 动态光散射 温度
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人Na^+、K^+-ATPase α1亚单位M1~M2膜外区片段结合活性的研究 被引量:3
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作者 张明娟 杨军 +3 位作者 朱参战 段宗明 牛小麟 王蓉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期13-15,19,共4页
目的研究包含人Na+、K+-ATPaseα1亚单位M1~M2膜外区的多肽片断(HES1衍生物),是否具有与哇巴因结合的能力。方法采用Fmoc固相合成法进行多肽合成,产物经HPLC纯化,并进行质谱分析。然后采用放射性配体受体结合法检测其与哇巴因的结合能... 目的研究包含人Na+、K+-ATPaseα1亚单位M1~M2膜外区的多肽片断(HES1衍生物),是否具有与哇巴因结合的能力。方法采用Fmoc固相合成法进行多肽合成,产物经HPLC纯化,并进行质谱分析。然后采用放射性配体受体结合法检测其与哇巴因的结合能力。结果人Na+、K+-ATPaseHES1衍生物与3H-哇巴因具有一定的结合能力。3H-ouabain与Na+,K+-ATPaseHES1衍生物结合的平衡解离常数为24.58nmol·L-1,受体密度为492.43fmol·mg-1蛋白。IC50=3.078×10-7mol·L-1。结论人Na+、K+-ATPaseHES1衍生物具有与哇巴因结合的活性,为其作为一种新型药物奠定实验基础。 展开更多
关键词 Na^+ K^+-atpase α1亚单位 膜外区 哇巴因
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Na~+-K~+-ATPase α1基因全长cDNA的克隆及序列分析和表达 被引量:3
3
作者 刘珊 李冰 +2 位作者 张成锋 魏可鹏 朱健 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期594-603,共10页
为了解Na+-K+-ATPase α1基因的分子结构及其在建鲤盐度调控过程中起到的作用,采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)的方法分离克隆了建鲤(Cyprinus carpio var.jian)Na+-K+-ATPase α1基因全长cDNA,得到3 397 bp的全长cDNA,包括3 081 bp... 为了解Na+-K+-ATPase α1基因的分子结构及其在建鲤盐度调控过程中起到的作用,采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)的方法分离克隆了建鲤(Cyprinus carpio var.jian)Na+-K+-ATPase α1基因全长cDNA,得到3 397 bp的全长cDNA,包括3 081 bp的开放阅读框(ORF),232 bp的5-末端非编码区(UTR)以及219 bp的3-末端非编码区(UTR)。对推测的该基因氨基酸序列进行同源性比对和系统分析显示:建鲤与其他鱼类该基因的氨基酸序列相似度为90.22%~95.52%,与斑马鱼(Danio rerio)相似度最高(95.52%),与虱目鱼(Chanos chanos)相似度偏低,其次是平鲷(Rhabdosargus sarba)、萨罗罗非鱼(Sarotherodon melanotheron)、底鳉(Fundulus heteroclitus)、黑鲷(Acanthopagrus schlegelii)、马苏大马哈鱼(Oncorhynchus masou)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss),与大西洋鲑(Salmo salar)的相似度最低(90.22%),与非洲爪蟾(Xenopus laevis)和人(Homo sapiens)的相似度分别为89.62%和89.51%。以上结果表明,不同物种间的Na+-K+-ATPaseα1基因的氨基酸序列极为保守。用实时定量PCR(RT-PCR)检测该基因在建鲤鳃、肾、肠、肝、脑和脾的相对表达量,其中脑最高,其次是鳃、脾、肾、肠,肝最低,这表明脑、鳃和脾是建鲤Na+-K+-ATPase α1基因主要的表达器官。本研究旨为进一步探索建鲤的盐度调控机制奠定分子基础。 展开更多
关键词 建鲤 Na+-K+-atpase α1 克隆 序列分析 组织表达
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Ouabain及其受体Na^+/K^+-ATPase α_1、α_4抗体对人精子运动功能的影响 被引量:3
4
作者 万艳 吴黎 +1 位作者 娄欢 苏萍 《医药导报》 CAS 2009年第8期1008-1012,共5页
目的研究Ouabain及其受体Na+/K+-ATPase α1、α4抗体对正常人精子运动功能的影响。方法将60例正常人的精液上游法进行优化,其中30例与不同浓度Ouabain共孵育,在1,2,3,4h采用CASA检测精子运动参数;另外30例分别与Na+/K+-ATPase α1和α... 目的研究Ouabain及其受体Na+/K+-ATPase α1、α4抗体对正常人精子运动功能的影响。方法将60例正常人的精液上游法进行优化,其中30例与不同浓度Ouabain共孵育,在1,2,3,4h采用CASA检测精子运动参数;另外30例分别与Na+/K+-ATPase α1和α4抗体共同孵育,1h后同样方法检测。结果①与阴性对照组比较,优化后的精子与较高剂量Ouabain(1×10-5~1×10-2mol.L-1)共孵育后,活动率显著下降(P<0.05),a+b级精子所占比例显著下降(P<0.01);但各浓度组两参数差异无显著性;②与阴性对照组比较,较低剂量Ouabain(1×10-6和1×10-7mol·L-1)作用后,精子活动率和a+b级精子所占比例下降均不明显,两浓度组之间差异无显著性;③Ouabain作用后,精子其他运动参数如直线速度、鞭打频率、直线性、前向性、摆动性均未见显著变化。④Anti-α1和Anti-α4作用后的精子活动率均显著下降(均P<0.01);但两者之间差异无显著性;⑤Anti-α1和Anti-α4作用后的a+b级精子所占比例均显著下降(均P<0.01);且Anti-α4作用后降低的幅度明显大于Anti-α1(P<0.05);⑥Na+/K+-ATPase α1和α4抗体作用后,精子其他运动参数如直线速度、鞭打频率、直线性、前向性、摆动性均未见显著变化。结论Ouabain在体外能够降低正常人精子运动功能;Na+/K+-ATPase α1、α4抗体也能够降低精子运动功能,但α4抗体的作用更明显。 展开更多
关键词 OUABAIN Na+/K+-atpase α1抗体 Na+/K+-atpase α4抗体 精子运动
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利用F_0F_1-ATPase分子马达技术检测志贺氏菌 被引量:2
5
作者 张捷 王燕飞 +9 位作者 王璇 王小晋 顾德周 张惠媛 尚士进 王娟 汪琦 王佩荣 陈广全 乐加昌 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期203-206,共4页
利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立应用在食品检测中快速检测方法。首先从嗜热菌中提取载色体,合成生物素化宋内氏志贺氏菌IpaH探针,在载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-I... 利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立应用在食品检测中快速检测方法。首先从嗜热菌中提取载色体,合成生物素化宋内氏志贺氏菌IpaH探针,在载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-IpaH探针,将待测宋内氏志贺氏菌标准菌株和阴性对照分别与此生物传感器结合,比较其催化ATP合成10 min后的ATP产生量,进而对宋内氏志贺氏菌DNA进行检测。ATP合成的量可以通过luciferase-luciferin检测试剂所体现的荧光强度大小标定。结果表明,chroIpaH(连接在载色体chro上的IpaH探针)的浓度在0.031 mg/mL,宋内氏志贺氏菌DNA浓度在50 ng/mL为最适检测条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及PCR检测方法对照,具有良好的检测符合性。 展开更多
关键词 F0F1-atpase分子马达 宋内氏志贺氏菌 IpaH探针 快速检测
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大鼠严重烧伤早期心肌线粒体F_0F_1-ATPase活性变化及其对能量代谢的影响 被引量:2
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作者 梁晚益 唐立新 +1 位作者 杨宗城 黄跃生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期780-782,共3页
目的 探讨严重烧伤早期心肌线粒体F0 F1 ATPase活性变化及其对能量代谢的影响。方法 复制 3 0 %TBSAⅢ度烧伤大鼠模型 ,取正常及伤后 1、3、6、12、2 4h大鼠心肌分离线粒体 ,测定F0 F1 ATPase活性、线粒体膜电位及ATP、ADP、AMP含量... 目的 探讨严重烧伤早期心肌线粒体F0 F1 ATPase活性变化及其对能量代谢的影响。方法 复制 3 0 %TBSAⅢ度烧伤大鼠模型 ,取正常及伤后 1、3、6、12、2 4h大鼠心肌分离线粒体 ,测定F0 F1 ATPase活性、线粒体膜电位及ATP、ADP、AMP含量。结果①烧伤后 1h线粒体F0 F1 ATPase合成活性明显升高 ,但 3、6、12、2 4h显著降低 ,分别为对照组的 5 1.4%、44.9%、77.6%和 87.4%。F0 F1 ATPase水解活性于伤后 1h明显降低 ,但 3h显著高于对照组 ,6、12、2 4h下降 ,明显低于正常对照组 ;②大鼠烧伤后 1h心肌线粒体ATP含量及膜电位均无明显变化 ,但 3、6、12、2 4h线粒体ATP含量及膜电位均显著降低 ,同时ADP含量升高。结论 烧伤后1h线粒体F0 F1 ATPase合成活性明显升高 ,加速ATP合成以满足细胞对能量的需求 ;伤后 3hF0 F1 ATPase水解活性明显升高 ,水解ATP以维持线粒体膜电位 ;6hF0 F1 ATPase功能紊乱 ,合成与水解活性均显著降低 ,失去其对能量代谢的调节作用。 12、2 4hF0 F1 AT Pase合成与水解活性均有所恢复 ,线粒体ATP含量及膜电位也呈恢复趋势。 展开更多
关键词 烧伤 线粒体 F0F1-atpase 能量代谢 心肌
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利用F_0F_1-ATPase分子马达生物传感器检测食品中的副溶血性弧菌 被引量:2
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作者 张捷 顾德周 +8 位作者 张惠媛 刘岩 汪琦 张昕 王佩荣 陶雨风 范斐 陈广全 乐加昌 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第24期226-229,共4页
利用载色体上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器对副溶血性弧菌检测快速检测。在ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-toxR探针,将待测副溶血性弧菌标准菌株和阴性对照分别与生物传感器结合后,比较其催化ATP合成30... 利用载色体上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器对副溶血性弧菌检测快速检测。在ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-toxR探针,将待测副溶血性弧菌标准菌株和阴性对照分别与生物传感器结合后,比较其催化ATP合成30min后的ATP产生量,可以对副溶血性弧菌的DNA进行检测。ATP合成的多寡可以通过环境中H+的量进行测量,而H+的多寡通过F-DHPE所体现的荧光强度大小来获得。结果表明,chro toxR的质量浓度在0.156mg/mL,副溶血性弧菌DNA质量浓度在40ng/mL时为最适检出条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及聚合酶链式反应检测方法对照,具有良好的符合性。 展开更多
关键词 F0F1-atpase分子马达 生物传感器 副溶血性弧菌 快速检测
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无机磷和叠氮钠对线粒体F_1-ATPase构象的不同影响 被引量:2
8
作者 杨树长 李生广 林治焕 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期471-474,共4页
用εADP作荧光探针,用荧光猝灭的方法证明无机磷(Pi)能影响F1-ATPase的构象从而使酶结合ADP的能力降低.用aurovertinB作荧光探针研究了Pi和叠氮钠对F1-ATPase构象的影响,发现Pi能影响洗... 用εADP作荧光探针,用荧光猝灭的方法证明无机磷(Pi)能影响F1-ATPase的构象从而使酶结合ADP的能力降低.用aurovertinB作荧光探针研究了Pi和叠氮钠对F1-ATPase构象的影响,发现Pi能影响洗去催化位点核苷酸的F1的构象,而叠氮钠对其没有影响,但却能影响结合有ADP的F1的构象.因此Pi和叠氮钠对酶构象的影响是不同的,二者可能有不同的作用位点. 展开更多
关键词 F1-atpase 构象 无机磷 叠氮钠 线粒体
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F_0F_1-ATPase分子马达技术对阪崎肠杆菌检测的研究 被引量:2
9
作者 张捷 王煜 +9 位作者 陆琳 刘艳华 周琦 孙梓晏 顾德周 尚世进 张惠媛 王佩荣 陈广全 乐加昌 《生物技术进展》 2013年第4期297-300,共4页
本研究建立了应用F0F1-ATPase分子马达生物传感器快速检测阪崎肠杆菌的方法。自嗜热菌中提取载色体后,合成针对阪崎肠杆菌的生物素化ITS探针,在载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-ITS探针,将待测阪崎肠... 本研究建立了应用F0F1-ATPase分子马达生物传感器快速检测阪崎肠杆菌的方法。自嗜热菌中提取载色体后,合成针对阪崎肠杆菌的生物素化ITS探针,在载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-ITS探针,将待测阪崎肠杆菌标准菌株和阴性对照分别与此生物传感器结合,比较其催化ATP产生量,进而对阪崎肠杆菌DNA进行检测。结果表明,chro ITS探针浓度0.019mg/mL,阪崎肠杆菌DNA浓度40ng/mL为最适检测条件。通过与传统检测方法及PCR检测方法对照,本方法具有良好的检测符合性。 展开更多
关键词 F0F1-atpase分子马达 阪崎肠杆菌 ITS探针 快速检测
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F_0F_1-ATPase分子马达技术对单核细胞增生李斯特菌检测的研究 被引量:3
10
作者 张捷 张昕 +8 位作者 范爱红 张惠媛 汪琦 顾德周 王佩荣 韩晶 陆琳 陈广全 乐加昌 《生物技术进展》 2012年第6期436-440,共5页
利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立了应用在食品检测中快速检测方法。首先从嗜热菌中提取载色体后,标记荧光探针F-DHPE,合成生物素化单增李氏菌prfA探针,在已标记F-DHPE的载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε... 利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立了应用在食品检测中快速检测方法。首先从嗜热菌中提取载色体后,标记荧光探针F-DHPE,合成生物素化单增李氏菌prfA探针,在已标记F-DHPE的载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-prfA探针,将待测单核细胞增生李斯特菌标准菌株和阴性对照分别与此生物传感器结合,通过环境H+量测定ATP产生量,进而对单核细胞增生李斯特菌DNA进行检测。结果表明,chroprfA(连接在载色体chro上的prfA探针)的浓度在0.052mg/mL,单核细胞增生李斯特菌DNA浓度在40ng/mL为最适检测条件。通过传统检测方法及PCR检测方法对照,本方法具有良好的检测符合性。 展开更多
关键词 F0F1-atpase分子马达 单核细胞增生李斯特菌 prfA探针 快速检测
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利用F_0F_1-ATPase免疫生物传感器快速检测人肠道病毒71型的研究 被引量:2
11
作者 欧新华 孙边成 +2 位作者 王佩荣 陈静芳 乐加昌 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第12期1932-1934,1940,共4页
目的从嗜热菌中提取载色体Chromatophore,利用F0F1-ATPase构建一种生物传感器,用于人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)的快速、简便、特异检测。方法制备F0F1-ATPaseε亚基单克隆抗体,通过亲和素-生物素系统的连接作用,以EV71抗体为... 目的从嗜热菌中提取载色体Chromatophore,利用F0F1-ATPase构建一种生物传感器,用于人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)的快速、简便、特异检测。方法制备F0F1-ATPaseε亚基单克隆抗体,通过亲和素-生物素系统的连接作用,以EV71抗体为检测工具,构建一种新的F0F1-ATPaseε亚基单克隆抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-EV71抗体的免疫生物传感器,通过比较其检测前后ATP催化合成量的不同,实现对EV71病毒的快速检测。同时,合成用于EV71检测的特异性引物探针,比较2种检测方法的结果。结果 RT-PCR检测灵敏度为10-7mg/ml,检测时间约3 h;生物传感器检测灵敏度为10-7mg/ml,但整个实验过程仅需30 min。结论利用F0F1-ATPase构建的免疫生物传感器可用于EV71感染的快速检测,具有一定的应用前景。 展开更多
关键词 F0F1-atpase 生物传感器 人肠道病毒71
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酸应激对1株乳酸乳球菌质膜F_1F_0-ATPase活性的影响 被引量:1
12
作者 刘怀龙 孟祥晨 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期63-65,共3页
评价10株乳酸乳球菌的酸应激能力,选用应激能力较高的菌株,确定其最佳酸应激条件。将4 h、10 h、20 h培养的该菌菌体在此条件下应激,以硫酸亚铁钼蓝比色法测定应激前后的质膜F_1 F_0-ATPase活性。结果表明,菌株KLDS 4.0312具有较高应激... 评价10株乳酸乳球菌的酸应激能力,选用应激能力较高的菌株,确定其最佳酸应激条件。将4 h、10 h、20 h培养的该菌菌体在此条件下应激,以硫酸亚铁钼蓝比色法测定应激前后的质膜F_1 F_0-ATPase活性。结果表明,菌株KLDS 4.0312具有较高应激能力,应激后耐酸性可提高7542倍,其最佳酸应激条件为pH4.5,30 min。4 h、10 h、20 h培养的该菌菌体应激后,质膜F_1F_0-ATPase活性分别提高56.68%、11.05%、5.16%。 展开更多
关键词 酸应激 乳酸乳球菌 F1F0-atpase 存活率
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La^(3+)离子对叶绿体CF_1-ATPase活力影响研究
13
作者 潘登奎 潘仲光 +1 位作者 原向阳 郭平毅 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期482-487,共6页
为进一步弄清La3+离子对光合磷酸化及Hill反应影响作用机制,采用分光光度法,控制反应液中La3+离子浓度在0~20μmol.L-1范围,对纯化的游离态CF1-ATPase水解ATP活性测定结果表明:La3+离子对CF1-ATPase具有明显的促进作用。而且随La3+离... 为进一步弄清La3+离子对光合磷酸化及Hill反应影响作用机制,采用分光光度法,控制反应液中La3+离子浓度在0~20μmol.L-1范围,对纯化的游离态CF1-ATPase水解ATP活性测定结果表明:La3+离子对CF1-ATPase具有明显的促进作用。而且随La3+离子浓度增大,CF1-ATPase活性动力学曲线明显呈现"S"型。但当La3+离子浓度大于25μmol.L-1之后,La3+离子对游离态CF1-ATPase则表现出一定的抑制作用。而La3+离子浓度在0~30μmol.L-1范围内,受La3+离子作用类囊体膜CF1-ATPase活性动力学曲线则呈现双"S"形曲线。热稳定性实验结果表明:La3+离子可以降低CF1-ATPase活化能,提高CF1-ATPase的热稳定性。La3+离子对CF1-ATPase活性的影响可能与CF1-ATPase分子上别构位点有关,这也可能是La3+离子促进叶绿体Hill反应的关键部位。 展开更多
关键词 La3+ CF1-atpase 活性动力学 活化能
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米根霉F_1-ATPase活性降低突变株的筛选研究
14
作者 罗水忠 郑志 +1 位作者 姜绍通 胡燕红 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第11期442-446,共5页
本实验采用同步辐射软X射线Nk诱变米根霉,获得一株新霉素抗性突变株NA-2,该菌株F1-ATPase活性降低86.82%,胞内ATP含量下降18.99%,最终菌体浓度为出发菌株的79.22%,发酵周期缩短了12h,葡萄糖平均消耗速度和L-乳酸生产强度分别高出25.17%... 本实验采用同步辐射软X射线Nk诱变米根霉,获得一株新霉素抗性突变株NA-2,该菌株F1-ATPase活性降低86.82%,胞内ATP含量下降18.99%,最终菌体浓度为出发菌株的79.22%,发酵周期缩短了12h,葡萄糖平均消耗速度和L-乳酸生产强度分别高出25.17%和32.57%,平均葡萄糖消耗比速(qs)、L-乳酸生成比速(qp)和细胞比生长速率(μ)分别提高86.42%、128.13%和60.0%,但胞内能荷变化不明显。进一步研究发现,突变株糖酵解途径中关键酶磷酸果糖激酶(PEK)、丙酮酸激酶(PK)和磷酸甘油醛激酶(GAPDH)的活性较原始菌株提高了58.34%、23.53%和11.29%,乙醇脱氢酶(ADH)活性降低了32.11%,乳酸脱氢酶(LDH)活性提高了42.27%。结果表明,降低米根霉F1-ATPase活性有效地提高了糖酵解关键酶活性而加速葡萄糖代谢,提高了L-乳酸生产强度。 展开更多
关键词 米根霉 F1-atpase 糖酵解 L-乳酸 新霉素抗性 同步辐射
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Characterization of Cytosolic V_1-ATPase in Pea Root
15
作者 余和芬 陈珈 王学臣 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第2期164-168,共5页
Cytosolic V-1-ATPase complex in pea (Pistum sativum L.) root cells was characterized by immunoblotting, immuno-electron microscopy and measurement of ATP hydrolysis activity. Using antibodies against the subunits A an... Cytosolic V-1-ATPase complex in pea (Pistum sativum L.) root cells was characterized by immunoblotting, immuno-electron microscopy and measurement of ATP hydrolysis activity. Using antibodies against the subunits A and B of V-type H+-ATPase (V-ATPase) from mung bean as primary antibodies, both immuno-blotting and immuno-electron microscopy showed that subunit A and subunit B existed in the cytosol. Measurement of ATPase activity further showed that cytosolic proteins had NO3--sensitive ATP hydrolysis activity. All these suggested that V-1-ATPase complex occurred in the cytosol. This is the direct proof that V-1-ATPase occurs in the cytosol of the plant cells for the first time. 展开更多
关键词 V-type H+ -atpase (V-atpase) V-1-atpase PEA
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弱化F_1F_0-ATPase植物乳杆菌的选育及产酸性能分析
16
作者 张庆 钟小廷 +5 位作者 李京 林凯 袁春红 宋菲菲 向文良 车振明 《食品与发酵科技》 CAS 2014年第3期21-25,共5页
以植物乳杆菌为研究对象,利用硫酸新霉素筛选压力,筛选获得三株F1F0-ATPase活性弱化突变株M04、M15和M20。产酸及耐酸性能分析表明:突变株M04、M15和M20的产酸性能均弱于出发株,其中M20的产酸性能明显下降;在pH5.5和4.5的MRS液体培养基... 以植物乳杆菌为研究对象,利用硫酸新霉素筛选压力,筛选获得三株F1F0-ATPase活性弱化突变株M04、M15和M20。产酸及耐酸性能分析表明:突变株M04、M15和M20的产酸性能均弱于出发株,其中M20的产酸性能明显下降;在pH5.5和4.5的MRS液体培养基中M20的生长明显受到抑制;编码F1F0-ATPase的β亚基碱基序列分析表明:三株突变株均发生碱基突变而弱化F1F0-ATPase活性,其中突变株M20在多个位点的碱基置换及缺失对菌株的F1F0-ATPase活性影响最大。 展开更多
关键词 植物乳杆菌 硫酸新霉素 F1F0-atpase 突变株筛选
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小麦根线粒体可溶性F_1-ATPase的纯化及生化特性研究
17
作者 王延枝 冷楠 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 1993年第1期72-76,共5页
用氯仿处理小麦根的线粒体,经Sephadex G-200和DEAE-Cellulose柱层析纯化,得到的可溶性F_1-ATPase和结合在线粒体内膜上的完整ATPase相似之处为:它们都受叠氮化钠和硝酸盐抑制,被HCO_3^-和C1^-激活以及对ATP的水解能力大于对GTP的水解能... 用氯仿处理小麦根的线粒体,经Sephadex G-200和DEAE-Cellulose柱层析纯化,得到的可溶性F_1-ATPase和结合在线粒体内膜上的完整ATPase相似之处为:它们都受叠氮化钠和硝酸盐抑制,被HCO_3^-和C1^-激活以及对ATP的水解能力大于对GTP的水解能力.两者的不同之处为:可溶性F_1-ATPase不受寡霉素和二环己基碳二亚胺(DCCD)的抑制。该文报导了简单、快速制备F_1-ATPase的方法和线粒体F_1-ATPase的生化特性. 展开更多
关键词 小麦 线粒体 F1-atpase 纯化
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花生质膜H+-ATPase基因AhHA1 的克隆与功能研究 被引量:1
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作者 田丽彬 孔伟伟 +4 位作者 韩燕 刘译阳 李国卫 崔凤 万书波 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1058-1068,共11页
质膜H+-ATPase是植物细胞膜上唯一介导H+外排到胞外区域的质子泵,H+外排产生跨膜电化学梯度,为大量次级转运蛋白提供跨膜驱动力,因此质膜H+-ATPase在跨膜转运系统中发挥重要作用。本研究鉴定了一个盐胁迫诱导的花生质膜H+-ATPase基因AhH... 质膜H+-ATPase是植物细胞膜上唯一介导H+外排到胞外区域的质子泵,H+外排产生跨膜电化学梯度,为大量次级转运蛋白提供跨膜驱动力,因此质膜H+-ATPase在跨膜转运系统中发挥重要作用。本研究鉴定了一个盐胁迫诱导的花生质膜H+-ATPase基因AhHA1,并利用生物信息学技术筛选了栽培种花生基因组中AhHA1的同源基因,进行了系统进化树分析、亚细胞定位研究和组织表达分析。结果表明栽培种花生基因组编码24个AhHA1同源基因,分属于5个亚家族,其中AhHA1与拟南芥AHA4和AHA11同源;亚细胞定位实验显示AhHA1定位在细胞质膜上;组织表达分析显示AhHA1/2在根中的表达量最高。为研究AhHA1的功能,构建了AhHA1过表达转基因株系,分析了盐胁迫下转基因株系的表型。结果表明,过表达AhHA1的转基因拟南芥种子的萌发率、幼苗成活率和生物量均有提高,说明该基因的过量表达能够提高植物的耐盐能力。本研究增加了对花生耐盐机理和花生质膜H+-ATPase家族的认识,提供了提高作物耐盐能力的候选基因。 展开更多
关键词 花生 质膜H+-atpase AhHA1 盐胁迫
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F1-ATPase转动马达的随机动力学研究
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作者 李吉 毕建军 +1 位作者 孙萍 王海燕 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期17-19,共3页
通过建立物理模型研究了马达F1-ATPase转动的过程,得到理想条件下马达F1-ATPase转动的角速度随ATP浓度、摩擦系数的变化规律.同时,在热涨落环境下,计算了马达F1-ATPase向前和向后转动的概率之比,修正了理想条件下马达的转动模型,得到与... 通过建立物理模型研究了马达F1-ATPase转动的过程,得到理想条件下马达F1-ATPase转动的角速度随ATP浓度、摩擦系数的变化规律.同时,在热涨落环境下,计算了马达F1-ATPase向前和向后转动的概率之比,修正了理想条件下马达的转动模型,得到与实验吻合的结果. 展开更多
关键词 F1-atpase转动马达 福克普朗克方程 ATP水解
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Effects of fructose-1,6-diphosphate on concentration of calcium and activities of sarcoplosnic Ca^(2+)-ATPase in cardiomyocytes of Adriamycin-treated rats 被引量:9
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作者 蔡巍 陈君柱 +1 位作者 阮黎明 王懿娜 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2005年第7期622-625,共4页
Objective: To observe the effects of fructose-1,6-diphosphate (FDP) on serum levels of cardiac troponin 1 (cTnl) and creatine kinase-MB (CK-MB), as well as the concentration of calcium in cardiomyocytes (Myo[Ca2+]) an... Objective: To observe the effects of fructose-1,6-diphosphate (FDP) on serum levels of cardiac troponin 1 (cTnl) and creatine kinase-MB (CK-MB), as well as the concentration of calcium in cardiomyocytes (Myo[Ca2+]) and activity of sarcoplosnic Ca2+-ATPase (SRCa2+-ATPase) in Adriamycin (ADR)-treated rats. Methods: Rats were intraperitoneally injected with ADR (2.5 mg/kg every other day for 6 times) and then with different dosages of FDP (every other day for twenty-one times). Bi-antibodies sandwich Enzyme linked immune absorption assay (ELISA) was performed to detect serum level of cTnl. CK-MB was detected by monoclonal antibody, Myo[Ca2+] was detected by fluorescent spectrophotometry and the activity of SRCa2+-ATPase was detected by inorganic phosphate method. Results: FDP (300, 600, 1200 mg/kg) significantly reduced the serum levels of cTnl and CK-MB, while at the same time decreased calcium concentration and increased SRCa2+-ATPase activity in cardiomyocytes of ADR-treated rats (P<0.01). Conclusions: FDP might alleviate the cardiotoxic effects induced by ADR through decreasing calcium level as well as increasing SRCa2+-ATPase activity in cardiomyocytes. 展开更多
关键词 Fructose-1 6-diphosphate ADRIAMYCIN CARDIOMYOCYTE CALCIUM Sarcoplosnic reticulum Ca2+-atpase
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