鸡新城疫病毒F48E9株血凝素神经氨酸酶基因免疫诱导免疫保护的初步研究 被引量：6

1

作者 刘胜旺 孔宪刚 +2 位作者 童光志 马云燕 卢景良 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1565-1569,共5页

将我国新城疫病毒标准强毒F4 8E9株的血凝素 神经氨酸酶基因克隆于真核表达载体 pcDNA3 中 ,进行鉴定后筛选阳性质粒。将此阳性质粒进行大量法提取并纯化后作为基因疫苗以每只鸡 10 0 μg的剂量肌肉接种 4 5日龄SPF鸡 ,并以 pcDNA3 空... 将我国新城疫病毒标准强毒F4 8E9株的血凝素 神经氨酸酶基因克隆于真核表达载体 pcDNA3 中 ,进行鉴定后筛选阳性质粒。将此阳性质粒进行大量法提取并纯化后作为基因疫苗以每只鸡 10 0 μg的剂量肌肉接种 4 5日龄SPF鸡 ,并以 pcDNA3 空质粒作为对照。结果表明 ,新城疫基因疫苗能够诱导机体产生新城疫病毒特异的血清IgG抗体反应 ,但产生抗体所需的时间较长 ,抗体滴度的增加较为缓慢。人工接种新城疫强毒后 ,基因疫苗免疫组 4 / 6的鸡得到保护 ,而且保护鸡具有明显的抗体反应 ,2只鸡未得到保护 ,但其死亡时间明显迟于对照组鸡 ,死亡鸡具有典型的新城疫病毒感染鸡的病理形态学变化。 展开更多

关键词 鸡新城疫病毒f48E9株 血凝素-神经氨酸酶基因 诱导 免疫保护 基因免疫 基因疫苗

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新城疫病毒F48E9株病毒结构蛋白的分析 被引量：4

2

作者 曹殿军 刘继红 +2 位作者 王莉林 张莹 卢景良 《中国畜禽传染病》 CSCD 1997年第2期13-15,共3页

采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、激光扫描技术、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ和糖蛋白染色方法对新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４８Ｅ９株的结构蛋白进行了分析，结果表明，它具有ＮＤＶ的典型结构特征。

关键词 新城疫 f48E9 病毒结构蛋白

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鸡新城疫病毒F48E9强毒株NP基因的序列分析

3

作者 陈珍 施少华 +6 位作者 程龙飞 傅光华 陈红梅 万春和 林芳 林建生 黄瑜 《福建农业学报》 CAS 2009年第5期385-389,共5页

根据GenBank登录的鸡新城疫病毒NP基因序列设计引物,利用RT-PCR对F48E9强毒株NP基因进行扩增,将扩增产物经纯化后连入pMD18-T载体,通过PCR和酶切鉴定出阳性重组质粒,经测序后获得F48E9 NP基因序列。经分析发现该基因的ORF总长为1 470 bp... 根据GenBank登录的鸡新城疫病毒NP基因序列设计引物,利用RT-PCR对F48E9强毒株NP基因进行扩增,将扩增产物经纯化后连入pMD18-T载体,通过PCR和酶切鉴定出阳性重组质粒,经测序后获得F48E9 NP基因序列。经分析发现该基因的ORF总长为1 470 bp,编码489 aa,NP蛋白有4个高度保守的Cys位点,分别位于第55、78、139、213位,且在401～440位和461～481位区域变异较大。将F48E9株与19株参考毒株的相应序列进行比较得到核苷酸序列同源性为87.9%～92.3%,氨基酸序列同源性较高,为92.2%～98.0%,遗传进化分析表明F48E9株相对独立,与参考毒株的遗传距离较远。 展开更多

关键词 鸡新城疫病毒 f48E9株 NP基因 序列分析

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新城疫病毒F48E9株L基因的克隆及鉴定

4

作者 闫丽辉 曹殿军 +1 位作者 刘培欣 孙建宏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期251-,共1页

关键词 新城疫病毒 f48E9 L基因 病毒基因组 全基因序列 结构蛋白 基因片段 复制过程 阳性重组子 编码基因

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新城疫病毒F48E9株重组NP蛋白单克隆抗体制备及鉴定

5

作者 刘文丽 刘怀然 +3 位作者 刘培欣 张馨心 孔宪刚 陈维多 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期131-135,147,共6页

制备新城疫病毒(NDV)NP蛋白单抗,以期为NDV抗原表位研究及检测方法建立方面奠定基础。利用NDV F48E9株pET32a-NP重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,间接ELISA筛选,获得了2株稳定分泌抗NP重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分... 制备新城疫病毒(NDV)NP蛋白单抗,以期为NDV抗原表位研究及检测方法建立方面奠定基础。利用NDV F48E9株pET32a-NP重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,间接ELISA筛选,获得了2株稳定分泌抗NP重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1G3、4B12。经间接ELISA测定,腹水抗体效价分别为1 2.56×105、1 5.12×105。亚类鉴定结果表明这两株单抗均为IgG1。Western blot分析结果显示,1G3、4B12均能特异性识别重组NP蛋白。与NDV感染细胞经间接免疫荧光试验检测均呈黄绿色荧光。经相加ELISA测定表明两株单抗识别的抗原表位不同。 展开更多

关键词 新城疫病毒 f48E9 NP蛋白 单克隆抗体

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注浆法穿越F48断层冒顶区 被引量：1

6

作者 刘进岐 《中州煤炭》 2000年第4期33-33,共1页

城郊矿东翼轨道上山在施工至距变坡点 178 8m处遇F4 8断层 ,由于处理不当造成顶板冒落 ,致使巷道无法继续施工。采用注浆法在冒空区制造人工假顶后 ,短段掘砌 ,随掘进随架棚喷浆封闭的施工方法 ,顺利通过冒顶区。

关键词 注浆法 短段掘砌 人造假顶 巷道 冒顶区 f48断层

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新城疫病毒强毒株F48E9致病性细化分型的鉴定 被引量：4

7

作者 毕友坤 屈阳 +7 位作者 卫巧林 王文彬 赵杰 金忠元 张淑霞 王兴龙 杨增岐 萧飒 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第2期91-96,共6页

为了确证我国标准速发型新城疫强毒株F48E9致病性的细化分型,分别采用泄殖腔涂抹、泄殖腔注射、点眼滴鼻和静脉注射4种感染途径,用高、低2种剂量对SPF鸡进行感染,综合分析临床症状和病理变化。结果显示：各组均出现典型神经症状,并且伴... 为了确证我国标准速发型新城疫强毒株F48E9致病性的细化分型,分别采用泄殖腔涂抹、泄殖腔注射、点眼滴鼻和静脉注射4种感染途径,用高、低2种剂量对SPF鸡进行感染,综合分析临床症状和病理变化。结果显示：各组均出现典型神经症状,并且伴随呼吸道症状和下痢,其中高剂量组尤其是静脉注射途径,病程较短,出现明显神经症状后1-2 h死亡,病理变化不明显;低剂量组发病平缓,神经症状呈明显的渐进性,其中以点眼滴鼻途径最为明显;各感染途径剖检观察到明显的脑部及肠道出血;综合分析判定F48E9株为嗜神经型速发型强毒。同时,针对强毒株致病性的细化分型,建议采取点眼滴鼻途径和低剂量方式,综合分析临床症状和病理变化进行鉴定。对速发型新城疫病毒的细化分型鉴定能够进一步为新城疫的鉴别诊断,病毒的组织嗜性、致病机理研究提供重要的基础依据。 展开更多

关键词 新城疫病毒 f48E9株 致病型 嗜神经型

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新城疫病毒F_(48)E_8株 HN基因在杆状病毒系统中表达 被引量：10

8

作者 李太元 殷震 +2 位作者 金宁一 丁壮 王兴龙 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期334-336,共3页

目的 采用新型杆状病毒表达系统(Bac to Bac系统)在昆虫细胞Sf-9中进行新城疫病毒F48 E8株HN基因表达。方法NDV F48 E8株 HN基因插入到转座载体 pFast Bac Ⅰ,构建重组转座载体 pFast HN,转化到感受态细胞 DH10后,将目的基因转座到穿梭... 目的 采用新型杆状病毒表达系统(Bac to Bac系统)在昆虫细胞Sf-9中进行新城疫病毒F48 E8株HN基因表达。方法NDV F48 E8株 HN基因插入到转座载体 pFast Bac Ⅰ,构建重组转座载体 pFast HN,转化到感受态细胞 DH10后,将目的基因转座到穿梭载体Bacmid中,经筛选获得重组Bacmid HN转染到Sf-9昆虫细胞,并进行检测。结果 表达产物经SDS-PAGE、Westem blot检测获得蛋白特异带,相对分子质量约63000。结论NDVF48E8株HN基因能通过新型杆状病毒表达系统在昆虫细胞Sf-9中进行表达,表达量约为细胞总蛋白的10％。 展开更多

关键词 新城疫病毒f48E8株 HN基因 杆状病毒系统 表达

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鸡新城疫标准强毒感染鹅试验 被引量：12

9

作者 刘文博 万洪全 +8 位作者 吴艳涛 胡北侠 倪雪霞 张如宽 刘秀梵 郁炳贤 高海岗 邹尧坤 盛水兴 《中国家禽》 北大核心 2001年第19期10-11,共2页

用鸡新城疫中国标准强毒F48E8及国外标准强毒Hert33、AG68人工感染鹅，可以使鹅感染发病，F48E8攻毒组发病率100％，死亡率50％（9／18）；AG68、Hert33攻毒组发病率明显低于F48E8攻毒组和JS2／98／Goose攻毒组，死亡率分别为6％（1／1... 用鸡新城疫中国标准强毒F48E8及国外标准强毒Hert33、AG68人工感染鹅，可以使鹅感染发病，F48E8攻毒组发病率100％，死亡率50％（9／18）；AG68、Hert33攻毒组发病率明显低于F48E8攻毒组和JS2／98／Goose攻毒组，死亡率分别为6％（1／15）和0％（0／15）。对照组健康，且扑杀时平均体重明显高于攻毒组。实验证明：新城疫中国标准强毒株F48E8等毒株可以使鹅发病，症状和病变都与文献中所报道的鹅副粘病毒病相同。 展开更多

关键词 新城疫强毒 f48E8 鹅 致病性 攻毒试验 感染

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新城疫野毒株与F_(48)E_9强毒株对不同抗体水平雏鸡的感染试验 被引量：11

10

作者 程相朝 张春杰 +2 位作者 李银聚 吴庭才 郑祥海 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2002年第6期24-25,共2页

应用新城疫野毒株与F48E9标准强毒株对母源抗体效价分别为 8.5 0、6.0 0和 4.0 0log2的雏鸡进行了攻毒试验。结果 ,新城疫野毒株的感染致死率依次为 2 0 %、10 0 %和 10 0 % ;F48E9标准强毒株的感染致死率依次为 0、10 %和10 0 %。提示 ... 应用新城疫野毒株与F48E9标准强毒株对母源抗体效价分别为 8.5 0、6.0 0和 4.0 0log2的雏鸡进行了攻毒试验。结果 ,新城疫野毒株的感染致死率依次为 2 0 %、10 0 %和 10 0 % ;F48E9标准强毒株的感染致死率依次为 0、10 %和10 0 %。提示 ,在目前新城疫流行日益复杂的情况下 。 展开更多

关键词 感染试验 抗体水平 鸡 新城疫 野毒株 f48E9强毒株 雏鸡 母源抗体

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新城疫病毒中国标准强毒F_(48)E_8株融合蛋白的结构 被引量：2

11

作者 吴艳涛 刘秀梵 +2 位作者 刘伟忠 文其乙 张如宽 《扬州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1998年第2期31-32,共2页

对新城疫病毒（ＮＤＶ）中国标准强毒Ｆ４８Ｅ８株融合蛋白的结构进行了分析．该融合蛋白的前体Ｆ０由５５３个氨基酸组成，在第１１６和１１７位氨基酸处被酶切成Ｆ１和Ｆ２亚单位．酶切激活部位序列为ＲＲＱＲＲ↓Ｆ，第１１７位氨基... 对新城疫病毒（ＮＤＶ）中国标准强毒Ｆ４８Ｅ８株融合蛋白的结构进行了分析．该融合蛋白的前体Ｆ０由５５３个氨基酸组成，在第１１６和１１７位氨基酸处被酶切成Ｆ１和Ｆ２亚单位．酶切激活部位序列为ＲＲＱＲＲ↓Ｆ，第１１７位氨基酸为Ｆ，具有ＮＤＶ强毒的特征．Ｆ０上有３个疏水区，其功能分别代表信号肽区、融合诱导区和跨膜结构区．Ｆ０的可糖基化部位有６个．并比较了Ｆ４８Ｅ８株和国外强毒株的氨基酸同源性，与Ｍｉｙａｄｅｒａ株、ＴｅｘａｓＧＢ株的同源性分别为９３．６４％和９２．４１％． 展开更多

关键词 融合蛋白 f48E8毒株 新城疫病毒 强毒株 氨基酸

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新城疫病毒F蛋白在昆虫细胞中的表达及其融细胞作用 被引量：5

12

作者 王桂军 秦爱建 +2 位作者 邵红霞 崔平福 金文杰 《中国病毒学》 CSCD 2006年第6期571-574,共4页

用RT-PCR方法扩增出新城疫病毒标准强毒株F48E8的F基因,并将其克隆到pGEM-T载体,命名为pGEM-NDF。鉴定正确后,以BamHI和XbaI双酶切将F基因从pGEM-NDF中释放出来,并插入到pFastBacI载体中,得到重组转移载体pFast-NDF。然后将该重组质粒... 用RT-PCR方法扩增出新城疫病毒标准强毒株F48E8的F基因,并将其克隆到pGEM-T载体,命名为pGEM-NDF。鉴定正确后,以BamHI和XbaI双酶切将F基因从pGEM-NDF中释放出来,并插入到pFastBacI载体中,得到重组转移载体pFast-NDF。然后将该重组质粒转入含有穿梭质粒的感受态DH10Bac中,通过转座作用获得重组穿梭质粒reBacmid-NDF。再用reBacmid-NDF转染Sf9昆虫细胞,获得含有新城疫病毒F48E8株F基因的重组杆状病毒。间接免疫荧光和Western-blot分析结果表明F蛋白在昆虫细胞中获得表达,而且主要表达于细胞膜上,并使感染重组杆状病毒的昆虫细胞在96h发生融合作用。动物试验表明,表达的F蛋白能够产生中和抗体。本文的研究结果为F蛋白的进一步开发奠定了基础。 展开更多

关键词 新城疫病毒 f48E8 融合蛋白 重组杆状病毒

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新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞中免疫相关细胞因子表达的检测 被引量：3

13

作者 刘温泉 王远萍 +2 位作者 邹年莉 柳萍 黄勇 《中国家禽》 北大核心 2009年第19期12-15,共4页

分别采用新城疫强毒株F48E9与新城疫弱毒株LaSota感染10日龄鸡胚制作的鸡胚成纤维细胞,感染后24h提取鸡胚成纤维细胞的总RNA,通过RT-PCR技术结合凝胶成像系统扫描检测21种免疫相关细胞因子在鸡胚成纤维细胞中的表达量。实验结果表明,在... 分别采用新城疫强毒株F48E9与新城疫弱毒株LaSota感染10日龄鸡胚制作的鸡胚成纤维细胞,感染后24h提取鸡胚成纤维细胞的总RNA,通过RT-PCR技术结合凝胶成像系统扫描检测21种免疫相关细胞因子在鸡胚成纤维细胞中的表达量。实验结果表明,在鸡胚成纤维细胞中,无论是否感染新城疫病毒,IL-2、IL-3、IL-4、IL-21不能检测到其相应条带。通过统计学分析,IFN-β、IFN-γ、IL-9、IL-12-P35、IL-12-P40在病毒感染组与对照组间呈现出显著的差异,而强毒感染组与弱毒感染组的比较中,仅IFNγ、IL-9表现出显著差异。 展开更多

关键词 鸡胚成纤维细胞 f48E9毒株 LA Sota毒株 细胞因子表达差异

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新城疫病毒F_(48)E_9株NP基因的克隆与序列分析 被引量：1

14

作者 柴迎梅 曹殿军 +3 位作者 闫丽辉 刘培欣 黄永芬 汪清胤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期110-112,共3页

根据NDVNP蛋白已知基因序列设计合成了一对引物 ,利用RT_PCR扩增出了F4 8E9株NP基因 15 98bp的片段 ,将该片段克隆到pMD18_TVector上 ,并对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定 ,结果证明我们得到了这个基因片段的阳性重组子。为了... 根据NDVNP蛋白已知基因序列设计合成了一对引物 ,利用RT_PCR扩增出了F4 8E9株NP基因 15 98bp的片段 ,将该片段克隆到pMD18_TVector上 ,并对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定 ,结果证明我们得到了这个基因片段的阳性重组子。为了更充分证实所得阳性质粒的可靠性 ,采用Sanger′s双脱氧末端终止法对阳性重组子进行核苷酸序列测定 ,获得了F4 8E9株NP基因片段的基因序列 ,利用DNASIS分析软件 ,将F4 8E9株与LaSota株的相应序列进行比较 ,其核苷酸序列同源性为 88.2 %。至此 ,我们获得了F4 展开更多

关键词 新城疫病毒 基因克隆 f48E9株 NP基因 序列分析

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GPRS远程监控系统的编程设计 被引量：2

15

作者 李姝越 《单片机与嵌入式系统应用》 2013年第5期63-66,共4页

以MG2455/F48为核心部件平台,设计实现了远程环境监控系统的软件内核。该系统基于SHT11、TSL2561构建采集节点,负责获取温湿度、光照度等监测数据;并基于Em310模块构建网关节点,负责接收远端发送的控制命令并验证其合法性,同时将采集节... 以MG2455/F48为核心部件平台,设计实现了远程环境监控系统的软件内核。该系统基于SHT11、TSL2561构建采集节点,负责获取温湿度、光照度等监测数据;并基于Em310模块构建网关节点,负责接收远端发送的控制命令并验证其合法性,同时将采集节点的监测数据返回给通过验证的合法用户手机。经测试,系统数据采集有效,时延较小,并有较大的功能扩展空间,适用于各类对环境监控有较高需求的场合。 展开更多

关键词 远程监控 温湿度 光照度 短消息 MG2455 f48 SHT11 TSL2561 Em310

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Sc^(3+)和Ru^(4+)联合取代BZN基陶瓷结构与介电性能的研究

16

作者 张倩 丁士华 +3 位作者 宋天秀 彭小松 刘旭 蒋旭峰 《无机材料学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1145-1150,共6页

采用传统的固相反应法制备致密的Bi1.4Sc0.1ZnNb1.5-xRuxO7陶瓷样品,研究Sc3+,Ru4+共同替代对Bi2O3-Zn O-Nb2O5陶瓷的相结构、晶体化学特性和介电性能的影响。结果表明:当掺杂量x≤0.055 mol时,样品保持单一的立方焦绿石结构。当掺杂量x... 采用传统的固相反应法制备致密的Bi1.4Sc0.1ZnNb1.5-xRuxO7陶瓷样品,研究Sc3+,Ru4+共同替代对Bi2O3-Zn O-Nb2O5陶瓷的相结构、晶体化学特性和介电性能的影响。结果表明:当掺杂量x≤0.055 mol时,样品保持单一的立方焦绿石结构。当掺杂量x=0.055 mol时,X射线衍射峰强度变弱,峰形变宽。随着掺杂量的增加(0≤x≤0.04 mol),陶瓷样品的晶格常数a和A位离子与第7个氧O′平均键长R(A-O')逐渐减小,结晶化学参数键价和AV(O')[A4]增大,AV(O)[A2B2]减小,48f(O)偏移量ξ增加。室温下样品的介电常数随着掺杂量的增加而减小,介电损耗逐渐增加,介电松弛特征减弱。低温下样品呈现明显的弛豫现象,峰值温度Tm随着掺杂量的增加向高温方向移动。利用修正的Curie-Weiss(C-W)公式对样品εr-T曲线进行最小二乘法拟合,得出样品的弛豫度γ由R0样品的1.57减小到R40样品的1.33。 展开更多

关键词 立方焦绿石陶瓷 48f(O)偏移量ξ 修正Curie-Weiss公式 介电弛豫

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多通道数据实时采集系统设计

17

作者 李玉楚 王钦若 《伺服控制》 2011年第2期60-61,72,共3页

本文设计了一种基于STC11F48XE单片机的多通道数据采集系统。四路旋转变压器采集的模拟信号经AD2S1200转为数字信号,并存入单片机中。采集系统通过串口中断的方式和上位机传输数据。经现场实验表明,该系统能可靠的完成数据采集和传输。

关键词 STC11f48XE 数据采集 AD2S1200

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Chicken Embryo Inhibition Test of Recombinant Freeze-drying Chicken Interferon against Newcastle Disease Virus( NDV) F_(48)E_(10)

18

作者 Guo Shijin Wang Yanping +5 位作者 Fu Shijun Zhang Zhimei Xu Qianqian Miao Lizhong Dong Lin Shen Zhiqiang 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2015年第2期113-115,共3页

The paper was to study the inhibitory effect of recombinant freeze-drying chicken interferon against Newcastle disease virus （NDV） F48E10. Nine-day-old chicken embryos were inoculated with recombinant freeze-drying ... The paper was to study the inhibitory effect of recombinant freeze-drying chicken interferon against Newcastle disease virus （NDV） F48E10. Nine-day-old chicken embryos were inoculated with recombinant freeze-drying chicken interferon via allaotoic sack, while 10-day-old chicken embryos were inoculated with NDV F48E10, and in vivo protective efficacy of interferon on chichen embryos was studied. The results showed that the recombinant freeze-drying chicken interferon at the dose of 1.28 mg/embryo reached the protection ratio of 90% on chicken embryo infected by F48E10. 展开更多

关键词 Recombinant freeze-drying chicken interferon Chicken embryo f48E10 Protection ratio

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Cel48F产物排出过程中酶-底物相互作用及关键残基的分子动力学模拟

19

作者 刘天志 董莹 +3 位作者 鄂镜雯 韩菲 李卓 张浩 《沈阳大学学报（自然科学版）》 CAS 2019年第1期11-17,共7页

使用分子动力学模拟方法,通过对比产物在不同结合位置时的构象和对其相互作用的统计学分析,研究了Cel48F水解前后及产物排出过程中酶与产物间相互作用的变化,揭示了一些关键残基及其作用.结果表明,在底物刚发生水解后,产物主要在Glu 44... 使用分子动力学模拟方法,通过对比产物在不同结合位置时的构象和对其相互作用的统计学分析,研究了Cel48F水解前后及产物排出过程中酶与产物间相互作用的变化,揭示了一些关键残基及其作用.结果表明,在底物刚发生水解后,产物主要在Glu 44和Trp 611辅助下向出口移动一个小的距离,使其远离剩余底物和关键催化残基,防止逆反应发生,在继续向出口移动过程中,在产物结合裂缝上方的残基Trp 411的疏水相互作用下,内侧糖单元向上方移动并与Trp 411相邻的Thr 410形成氢键,而外侧糖单元在Asp 494作用下移动很小,使产物在裂缝中转动,有利于外界水分子进入并包裹产物,最终实现产物排出. 展开更多

关键词 Cel48F 产物排出 分子动力学模拟 酶-底物间相互作用

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以rLaSota为骨架构建表达强毒株HN蛋白的嵌合体新城疫病毒

20

作者 丁玉林 王永 +3 位作者 解希帝 葛金英 步志高 王凤龙 《畜牧与兽医》 北大核心 2010年第11期1-6,共6页

新城疫病毒(NDV)的HN蛋白是一个多功能蛋白,具有血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)两种活性,在病毒感染过程中扮演重要角色。本研究利用反向遗传操作技术,将NDV强毒株F48E9的HN基因替换弱毒株rLaSota的HN基因,获得嵌合病毒rL-F48E9HN。收获病... 新城疫病毒(NDV)的HN蛋白是一个多功能蛋白,具有血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)两种活性,在病毒感染过程中扮演重要角色。本研究利用反向遗传操作技术,将NDV强毒株F48E9的HN基因替换弱毒株rLaSota的HN基因,获得嵌合病毒rL-F48E9HN。收获病毒尿囊液,提取基因组RNA,进行序列分析,结果显示嵌合病毒基因组的HN基因获得了正确替换。嵌合病毒在鸡胚内的生长特性与亲本株LaSota一致,与F48E9的生长特性相差甚远。嵌合病毒红细胞吸附性明显增强,较rLaSota株增加51%,而细胞融合作用无明显变化。rL-F48E9HN的鸡胚平均致死时间(MDT)为148 h,脑内致病指数(ICPI)为0.43,静脉接种致病指数(IVPI)为0,说明rL-F48E9HN的毒力仍然属于弱毒力范围,而没有达到中等毒力或者强毒力。 展开更多

关键词 新城疫病毒 HN蛋白 弱毒株rLaSota 强毒株f48E9 反向遗传操作

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