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产褐藻胶裂解酶Exiguobacterium mexicanum MAL070的筛选、发酵条件优化及其对马尾藻的降解效果评价 被引量:2
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作者 罗霜 冯娟 +6 位作者 张文君 周文梅 刘姝 侯晓月 杨光 高嵩 房耀维 《食品工业科技》 北大核心 2025年第15期199-208,共10页
目的:筛选褐藻胶裂解酶高产菌株,对其进行鉴定、产酶条件优化及马尾藻降解效果评价。方法:利用平板初筛、发酵复筛从马尾藻和浒苔样品中筛选产褐藻胶裂解酶水平较高的菌株,根据形态、生理生化特征、16S rDNA序列分析及系统发育树构建等... 目的:筛选褐藻胶裂解酶高产菌株,对其进行鉴定、产酶条件优化及马尾藻降解效果评价。方法:利用平板初筛、发酵复筛从马尾藻和浒苔样品中筛选产褐藻胶裂解酶水平较高的菌株,根据形态、生理生化特征、16S rDNA序列分析及系统发育树构建等对菌株进行鉴定;通过单因素及响应面试验优化其产酶条件;通过还原糖浓度的测定及扫描电镜评价马尾藻降解效果。结果:筛选获得高产褐藻胶裂解酶的菌株MAL070,鉴定为墨西哥微小杆菌。优化获得最佳产酶条件为:海藻酸钠1.1%、酵母粉0.34%、NaCl 2.61%、pH9、接种量2%、转速180 r/min、25℃,培养48 h,酶活达到254.961 U/mL,是优化前的1.79倍。该酶是具有广泛底物特性,将褐藻胶水解为褐藻二糖和三糖的内切酶。菌株MAL070降解马尾藻72 h后,马尾藻细胞完全失去形态,表面结构破坏明显。结论:获得的墨西哥微小杆菌MAL070有良好的马尾藻降解能力,为马尾藻的进一步应用奠定基础。 展开更多
关键词 马尾藻 褐藻胶裂解酶 墨西哥微小杆菌 产酶条件优化 降解效果
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Exiguobacterium sp. MY02菌株PyNPase基因的克隆与表达 被引量:1
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作者 姜立春 韩文君 +1 位作者 余蓉 阮期平 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期600-604,共5页
目的鉴定、构建并高效表达从土壤中筛选到的一株耐热型、高活性的嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)。方法以MY02总DNA为模板,通过简并PCR、特异PCR引物、筛选和DNA测序,在5’引物和3’引物中分别引入NcoI和XbaI酶切位点,将pynp基因克隆至分泌... 目的鉴定、构建并高效表达从土壤中筛选到的一株耐热型、高活性的嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)。方法以MY02总DNA为模板,通过简并PCR、特异PCR引物、筛选和DNA测序,在5’引物和3’引物中分别引入NcoI和XbaI酶切位点,将pynp基因克隆至分泌表达载体pBAD/gIII A中,转化至E.coliTOP 10F’,以L-阿拉伯糖诱导表达,并对诱导剂浓度、诱导时间等进行优化。结果成功构建了重组表达载体pBAD/gIII A-pynp,通过磷酸化和转化反应,鉴定此酶为PyNPase。结论优化PyNPase的纯化条件与复性条件,可获得大量的PyNPase。 展开更多
关键词 exiguobacterium 嘧啶核苷磷酸化酶 高效表达 磷酸化反应
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磺胺二甲嘧啶废水处理系统中Exiguobacterium sp.H-1的分离及其环境适应特性 被引量:2
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作者 陈田 王壮 +5 位作者 芦梦瑶 陈研 周佳 屈建航 潘婧诗 罗宇 《环境工程技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期258-267,共10页
磺胺二甲嘧啶(SMZ)是一种难降解的广谱抗生素,其广泛存在已对水环境构成严重的威胁。微生物是环境中抗生素降解转化的主要驱动者,但高效降解SMZ的微生物资源匮乏。以SMZ废水处理系统的活性污泥为原料,采用纯培养技术从中分离筛选出一株... 磺胺二甲嘧啶(SMZ)是一种难降解的广谱抗生素,其广泛存在已对水环境构成严重的威胁。微生物是环境中抗生素降解转化的主要驱动者,但高效降解SMZ的微生物资源匮乏。以SMZ废水处理系统的活性污泥为原料,采用纯培养技术从中分离筛选出一株SMZ降解菌H-1。经形态学观察、生理生化特征、16S rRNA基因序列分析,H-1归属于微小杆菌属(Exiguobacterium sp.)。通过单因素试验研究初始SMZ浓度、接种量、pH和温度对菌株H-1降解SMZ效果的影响。结果表明,接种量、pH和温度对该菌株降解SMZ的影响较大。进一步采用响应面法优化菌株Exiguobacterium sp.H-1降解SMZ的最佳条件,得出pH为7.21,温度为28.86℃,接种量为4.40%时,其对5 mg/L SMZ降解率为10.54%。本研究发现微小杆菌Exiguobacterium sp.H-1具有降解SMZ的能力,其降解SMZ的独特之处是能够将SMZ脱去SO_(2),生成嘧啶环和苯胺环,经过耦合生成N-(4,6-二甲基嘧啶-2基)-1,4-二苯胺,然后进行脱氨反应,生成2-苯-4,6-二甲基嘧啶,随后去甲基化生成产物6(2-苯基-1,2-二氢嘧啶,m/z为159.97)。此外,菌株H-1在0~10%NaCl的广泛范围内也表现出很强的耐盐性,能够为SMZ污染水体的生物修复提供耐盐能力强的微生物菌株资源。 展开更多
关键词 磺胺二甲嘧啶 exiguobacterium 生物降解 环境适应性 生物修复
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微小杆菌Exiguobacterium spp.及其环境应用研究进展 被引量:49
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作者 张莹 石萍 马炯 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期898-904,共7页
微小杆菌属(Exiguobacterium spp.,简称E.spp.)是一类革兰氏阳性、无芽孢、兼性厌氧菌.其生境广阔,广泛分布于西伯利亚永冻土、海底热液口、植物根际等环境,多数菌种具有耐/嗜热性、耐/嗜冷性、耐/嗜碱性、耐/嗜盐性,蕴藏着丰富的微生... 微小杆菌属(Exiguobacterium spp.,简称E.spp.)是一类革兰氏阳性、无芽孢、兼性厌氧菌.其生境广阔,广泛分布于西伯利亚永冻土、海底热液口、植物根际等环境,多数菌种具有耐/嗜热性、耐/嗜冷性、耐/嗜碱性、耐/嗜盐性,蕴藏着丰富的微生物资源,亟待发掘.本文总结了目前已知的E.spp.14个菌种,发现其在进化树上分成两簇,分簇结果与菌株的温度耐受性对应,并且在氧化酶活性、硝酸盐还原能力等方面也存在着明显的簇间差异.进一步对这些差异进行机理探讨,并对E.spp.嗜极性及其在环境生物修复中的应用研究进行了归纳,探讨了E.spp.在分解有机污染物(偶氮染料、农药、石油等),转化重金属,根际促生,工业污水处理等领域的环境学意义.最后对E.spp.及其活性物质在环境修复、工农业生产发展中的应用提出展望,指出环境基因组学研究和工程菌的建立将极大拓展此类菌的资源化和实际应用. 展开更多
关键词 微小杆菌属 嗜极菌 生物修复 有机污染物分解 重金属修复 根际促生
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微小杆菌Exiguobacterium sp.MH3对六价铬的还原特性 被引量:8
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作者 张莹 章莹颖 +1 位作者 唐杰 马炯 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期791-797,共7页
六价铬[Cr(VI)]是毒性强、易迁移的主要重金属污染物,通过微生物将Cr(VI)还原为低毒性的Cr(Ⅲ)是一种经济、高效的处理铬污染的方法.对从浮萍根际分离得到的微小杆菌Exiguobacterium sp.MH3的Cr(VI)去除能力、方式及影响因素进行了研究... 六价铬[Cr(VI)]是毒性强、易迁移的主要重金属污染物,通过微生物将Cr(VI)还原为低毒性的Cr(Ⅲ)是一种经济、高效的处理铬污染的方法.对从浮萍根际分离得到的微小杆菌Exiguobacterium sp.MH3的Cr(VI)去除能力、方式及影响因素进行了研究.结果显示,实验条件下,菌株MH3在12 h或36 h内可完全去除5 mg L-1或15 mg L-1 Cr(VI).其去除机理主要为还原作用,且主要发生在细胞外侧,表明菌株MH3还原Cr(VI)的酶可能为分泌型.此还原反应的最适pH为7.0.外加碳源如甘露醇、葡萄糖、蔗糖等可显著促进菌株MH3还原Cr(VI).共存金属离子Cu2+也可增强此还原作用,但是Zn2+、Mn2+、Cd2+对菌株MH3生长及Cr(VI)还原有抑制作用.共存阴离子PO43-则可促进菌株MH3的生长及Cr(VI)还原.研究表明,Exiguobacterium sp.MH3是一株高效的Cr(VI)还原菌,在含铬废水处理上具有一定的应用价值. 展开更多
关键词 微小杆菌 六价铬 还原作用 外加碳源 共存离子 废水处理
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菌株Rhodococcus sp.Chr-9和Exiguobacterium sp.Chr-43的除铬(VI)特性 被引量:5
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作者 徐莲 孙纪全 +2 位作者 吴晓磊 汤岳琴 陈福明 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期971-977,共7页
为了解环境因素对生物除铬(VI)的影响,并为铬(VI)污染环境的生物强化治理提供高效菌株,采用选择培养的方法从制革废水污泥样品中分离到2株革兰氏阳性铬(VI)去除菌——Rhodococcus sp.Chr-9和Exiguobacteriumsp.Chr-43.菌株Chr... 为了解环境因素对生物除铬(VI)的影响,并为铬(VI)污染环境的生物强化治理提供高效菌株,采用选择培养的方法从制革废水污泥样品中分离到2株革兰氏阳性铬(VI)去除菌——Rhodococcus sp.Chr-9和Exiguobacteriumsp.Chr-43.菌株Chr.9和Chv43在25~40℃内均能够较好生长,并高效去除铬(vI),菌株Chv9和Chr-43的最适生长pH均为7.0~9.0,菌株在pH7.0的培养基中去除铬(VI)的效率最高.加入0.2~0.5mol/L的NO3-、SO4^2-和Cl-能够促进Chv9和Chv43的生长以及去除铬(VI)的效率.在含铬(VI)培养基中同时接种Ch〉9和Chv43时,chr.9促进菌株Chr-43的生长,并提高菌株去除铬(VI)的效率.研究表明,pH、温度、阴离子和环境中的其它生物对铬(VI)的去除有明显影响. 展开更多
关键词 铬(VI) 红球菌属 微小杆菌 生物修复 环境因素 污水处理
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一株耐镉细菌Exiguobacterium acetylicum TC13的分离鉴定及全基因组分析 被引量:3
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作者 李萍 黄文丽 +3 位作者 熊川 彭梅芳 金鑫 李强 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1583-1599,共17页
【背景】一些具有金属抗性的微生物被发现能降低土壤中金属的有效性,减少金属在植物中的转运和积累,同时具有促进植物生长的作用,表现出较低的成本效益和环境生态友好性,在农业、工业和环境领域具有广阔的应用前景。【目的】分离筛选并... 【背景】一些具有金属抗性的微生物被发现能降低土壤中金属的有效性,减少金属在植物中的转运和积累,同时具有促进植物生长的作用,表现出较低的成本效益和环境生态友好性,在农业、工业和环境领域具有广阔的应用前景。【目的】分离筛选并获得耐Cd(Ⅱ)优质菌株,并对其进行生物学鉴定,分析菌株形貌及耐镉的生物学特性,进一步从基因组层面剖析菌株的分子遗传特征,初步探究其潜在功能及耐重金属Cd(Ⅱ)相关基因,并探究Cd(Ⅱ)胁迫下菌株对小麦籽粒萌发特性的影响。【方法】收集四川省德阳市磷矿、煤矿产区10余份土样,利用筛选培养基分离获得耐Cd(Ⅱ)菌株,采用扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)、透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)观察其形貌特征;测定培养液OD600验证菌株耐Cd(Ⅱ)特性。基于Illumina NovaSeq和Oxford Nanopore ONT测序平台,采用全基因组测序技术进行菌株鉴定及全基因组功能分析。利用生物信息学软件对原始数据组装、功能注释,挖掘耐Cd(Ⅱ)适应机制相关基因。观察不同处理下的发芽生根率及芽根长势,研究Cd(Ⅱ)胁迫下菌株对小麦籽粒的萌发特性。【结果】分离获得一株优质耐Cd(Ⅱ)菌株,经16S rRNA基因测序和全基因测序鉴定为Exiguobacterium acetylicum,命名为TC13。菌株TC13全基因组序列组装得到1个染色体和1个环状质粒,大小分别为3192165 bp和167401 bp;G+C含量分别为46.62%和44.63%;分别包含3231个和154个DNA编码序列,染色体同时包含54个ncRNA。功能基因数据库比对结果发现菌种中多个基因涉及重金属转运、外排及应激响应等生物学过程,这可能与其耐Cd(Ⅱ)特性有关。菌株对镉胁迫下小麦籽粒萌发率及长势特性具有显著提升作用。【结论】本研究通过全基因组测序探究了E.acetylicum TC13的基因结构,丰富了同属种菌株遗传学信息,解析了Cd(Ⅱ)耐受的相关基因,证实了菌株TC13对Cd(Ⅱ)胁迫下小麦籽粒生长的促进作用,这表明菌株TC13在土壤修复及促生中具有潜在的应用前景。 展开更多
关键词 微小杆菌 扫描电镜 透射电镜 全基因组 重金属功能基因
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Toxic hexavalent chromium reduction by Bacillus pumilis,Cellulosimicrobium cellulans and Exiguobacterium 被引量:2
8
作者 Fatima REHMAN Muhammad FAISAL 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2015年第3期585-589,共5页
Three bacterial strains Bacillus pumilis, Cellulosimicrobium cellulans and ExtguoOactertum were investigated when grown in Luria-Bertani (LB) medium at 500 μg/mL Cr(VI). The hexavalent chromium reduction was meas... Three bacterial strains Bacillus pumilis, Cellulosimicrobium cellulans and ExtguoOactertum were investigated when grown in Luria-Bertani (LB) medium at 500 μg/mL Cr(VI). The hexavalent chromium reduction was measured by growing the strains in DeLeo and Ehrlich (1994) medium at 200 and 400 μg/mL K2CrO4. The optimal Cr (VI) reduction by strains B. pumilis, Exigubacterium and C. cellulans was 51%, 39%, and 41%, respectively, at an initial KzCrO4 concentration of 200 ~tg/mL at pH 3 and temperature 37℃. At an initial chromate concentration of 400 gg/mL, the Cr(VI) reduction by strains B. purnilis, Exigubacterium and C. cellulans was 24%, 19%, and 18%, respectively at pH 3 at 37℃ after 24 h. These strains have ability to reduce toxic hexavalent chromium to the less mobile trivalent chromium at a wide range of different environmental conditions and can be useful for the treatment of contaminated wastewater and soils. 展开更多
关键词 chromium BIOREMEDIATION heavy metals Bacilluspumilis exiguobacterium Cellulosimicrobium cellulans
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克氏原螯虾微小杆菌Exiguobacterium profundum的分离鉴定与药敏试验 被引量:2
9
作者 石瑞雪 李艳和 《中国农学通报》 2023年第2期123-129,共7页
为了判断克氏原螯虾(Procambarus clarkii)发病致死的原因,从发病濒死虾肝胰脏中分离出一株优势菌,通过对该菌进行菌落形态观察、革兰氏染色、生理生化鉴定、16srRNA测序分析及进化树构建确认其为微小杆菌Exiguobacterium profundum。... 为了判断克氏原螯虾(Procambarus clarkii)发病致死的原因,从发病濒死虾肝胰脏中分离出一株优势菌,通过对该菌进行菌落形态观察、革兰氏染色、生理生化鉴定、16srRNA测序分析及进化树构建确认其为微小杆菌Exiguobacterium profundum。通过纸片扩散法测定了该菌株对青霉素G、氨苄西林、头孢氨苄、阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、诺氟沙星、复方新诺明等30种抗菌药物的敏感性,结果显示该菌对30种药物均敏感。通过回归感染实验推测其可能参与克氏原螯虾的致病过程。本实验结果为克氏原螯虾E.profundum的病原鉴定和药物诊治提供了一定的参考和理论基础。 展开更多
关键词 克氏原螯虾 微小杆菌exiguobacterium profundum 病原鉴定 16SRRNA基因 药敏试验 回归感染
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微小杆菌(Exiguobacteriumsp.)对肉桂酸降解行为 被引量:8
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作者 马元元 陈向向 +3 位作者 李敏 王静 张琇 杨国平 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期2079-2088,共10页
【目的】为有效缓解自毒物质肉桂酸对西瓜等作物生长的危害,从宁夏中卫硒砂瓜连作土壤中分离筛选得到一株高效降解肉桂酸的菌株,研究其基本降解特性。【方法】分离筛选得到一株能有效利用肉桂酸生长的菌株,采用16S r RNA基因序列分析进... 【目的】为有效缓解自毒物质肉桂酸对西瓜等作物生长的危害,从宁夏中卫硒砂瓜连作土壤中分离筛选得到一株高效降解肉桂酸的菌株,研究其基本降解特性。【方法】分离筛选得到一株能有效利用肉桂酸生长的菌株,采用16S r RNA基因序列分析进行菌株鉴定,运用高效液相色谱法和西瓜幼苗生长毒性实验检测降解特性。【结果】从多年西瓜连作土壤中筛选得到一株高效降解肉桂酸的细菌R30,鉴定为Exiguobacterium sp.,其96 h内对肉桂酸的降解率可达99%以上,最适降解温度和p H分别为30°C、p H 7.0。除肉桂酸外,该菌也能够高效降解香豆酸、阿魏酸、苯甲酸等其他酚酸类物质,表现出一定的底物广谱性;检测96 h降解液对西瓜种子萌发直至幼苗生长阶段的影响表明,该菌株可有效缓解肉桂酸对西瓜幼苗的生长抑制作用。【结论】菌株R30在肉桂酸、香豆酸、阿魏酸、苯甲酸等酚酸类物质导致的农作物连作障碍治理领域具有潜在的开发应用价值。 展开更多
关键词 肉桂酸 自毒物质 微小杆菌属 西瓜
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胞外呼吸菌Exiguobacterium sp. PY14的分离鉴定及其异化铁还原特性
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作者 唐洁 朱祺 +4 位作者 彭家欣 黄运红 倪海燕 龙中儿 邹龙 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1476-1482,共7页
胞外呼吸菌广泛分布于自然生境中,是驱动铁等元素地球化学循环的重要因素,已成为各种有机污染物降解和重金属污染去除的研究热点.为了挖掘具有环境修复应用前景的胞外呼吸菌,从鄱阳湖湿地土壤中筛选具有胞外异化铁还原能力的菌株,通过... 胞外呼吸菌广泛分布于自然生境中,是驱动铁等元素地球化学循环的重要因素,已成为各种有机污染物降解和重金属污染去除的研究热点.为了挖掘具有环境修复应用前景的胞外呼吸菌,从鄱阳湖湿地土壤中筛选具有胞外异化铁还原能力的菌株,通过形态、生理生化和遗传分析进行菌种鉴定,并对其最优生长条件、异化铁还原特性及胞外电子传递机制进行研究.结果显示,分离得到的菌株PY14具有较高的异化铁还原能力,细菌形态、生理生化特征及16S rRNA基因系统发育分析鉴定其为革兰氏阳性的微小杆菌属(Exiguobacterium);具有嗜碱耐盐生长特性,最适生长pH值为8.0,在NaCl浓度高达50g/L条件下生长良好;能够利用葡萄糖、丙酮酸、乙酸和乳酸等多种小分子碳源(电子供体)进行厌氧呼吸,5 d内5 mmol/L水铁矿的还原率高达80%,添加电子穿梭(蒽醌-2,6-二磺酸盐)可显著增强其异化还原水铁矿、针铁矿和赤铁矿的速率;可通过自身分泌腐殖酸类电子穿梭体实现介导异化铁还原过程.本研究获得了一株有望在盐碱土壤或水体等环境中高效驱动铁还原的胞外呼吸菌,为进一步认识革兰氏阳性细菌胞外电子传递机制提供新依据. 展开更多
关键词 胞外呼吸菌 微小杆菌 异化铁还原 胞外电子传递
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微小杆菌属(Exiguobacterium)细菌的能量代谢途径分析 被引量:6
12
作者 赵芮 李登辉 +3 位作者 李学恭 张维佳 赵苑 吴龙飞 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2078-2093,共16页
【目的】微小杆菌属(Exiguobacterium)细菌广泛分布于海洋及非海洋环境中,具有多种代谢途径以适应复杂多样的生境。本研究从能量代谢途径角度出发,探究该属菌株对不同生境的适应能力。【方法】从美国国家生物科技数据中心(National Cent... 【目的】微小杆菌属(Exiguobacterium)细菌广泛分布于海洋及非海洋环境中,具有多种代谢途径以适应复杂多样的生境。本研究从能量代谢途径角度出发,探究该属菌株对不同生境的适应能力。【方法】从美国国家生物科技数据中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)数据库中获取146个Exiguobacterium属菌株的基因组,查找并统计光营养、厌氧呼吸和底物代谢等多种能量代谢途径的关键蛋白或关键酶基因在各菌株基因组中的分布,包括光营养型的视紫红质基因、厌氧呼吸营养型的钼辅因子合成蛋白基因,以及底物代谢营养型中乙醛酸分流途径的异柠檬酸裂解酶及苹果酸合酶基因等。根据对应的氨基酸序列构建视紫红质、MoaC和异柠檬酸裂解酶的系统发育树,分析不同能量代谢途径在该属菌株进化过程中的保守性,推测其对于该属菌株的重要性。【结果】Exiguobacterium属中50%的种具有视紫红质基因,其中分离自非海洋生境的菌株更趋向于含有视紫红质基因。本研究所统计的全部非海洋生境菌株中,含有视紫红质基因的菌株占比约为70%,而在海洋生境菌株中该比例仅为19%。Exiguobacterium属约27%的种存在钼辅因子合成蛋白基因,分离自海洋环境的菌株有该类蛋白的可能性更高(32%:21%),具有完整钼辅因子合成途径的菌株集中于进化树同一分支上的少数种。该属约61%的种存在乙醛酸分流途径相关酶基因,这些种隶属进化树的同一分支,且种内所有菌株都具备相关基因,表明乙醛酸分流途径在Exiguobacterium属的分布具有种特异性。【结论】Exiguobacterium属细菌具有多种能量代谢途径相关基因,包括基于视紫红质的光营养型能量代谢途径、基于钼酶的厌氧呼吸型能量代谢途径和底物代谢营养型能量代谢途径中的乙醛酸分流途径。能量代谢途径多样性可能是Exiguobacterium属细菌适应复杂多样生境的机制之一。此外,本研究发现Exiguobacterium属中不同种、同种不同菌株间存在能量代谢途径差异,且能量代谢途径在该属内的分布多不具备种特异性,表明仅通过16S rRNA基因种属鉴定来预测目标菌株的代谢类型可能有较大偏差和局限性。 展开更多
关键词 微小杆菌属 能量代谢 视紫红质 钼酶 钼辅因子 乙醛酸分流
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深海微小杆菌的分离鉴定及其对长牡蛎的致病性
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作者 姜军 孙洁洁 +4 位作者 杨文文 高磊 冷金源 王玲玲 宋林生 《水产学报》 北大核心 2025年第1期207-220,共14页
【目的】从患有脓包病的长牡蛎中分离并鉴定致病菌,系统分析其形态特征、生理生化特征及致病机制,为长牡蛎脓包病的防治提供科学依据。【方法】从辽宁省大连市庄河某养殖区采集了患有脓包病的长牡蛎,利用16S rDNA测序及生物信息学技术... 【目的】从患有脓包病的长牡蛎中分离并鉴定致病菌,系统分析其形态特征、生理生化特征及致病机制,为长牡蛎脓包病的防治提供科学依据。【方法】从辽宁省大连市庄河某养殖区采集了患有脓包病的长牡蛎,利用16S rDNA测序及生物信息学技术鉴定出一株深海微小杆菌,并对其进行药敏实验和溶血实验,进一步结合人工感染实验、高通量测序和实时荧光定量PCR技术分析感染后长牡蛎鳃组织中炎症相关基因表达及细菌群落结构变化情况。【结果】分离菌株在2216 E琼脂培养基中形成直径为1.0~1.5 mm的乳黄色菌落,形态均一稳定;对头孢哌酮、青霉素和阿莫西林等抗生素高度敏感;在28℃条件下表现出显著的β溶血活性。人工感染实验显示,深海微小杆菌感染导致长牡蛎外套膜出现脓包,鳃表面出现白色斑点,同时伴有肿胀,感染后长牡蛎鳃组织中Cgtlr3、Cgap-1、Cgcaspase-3、Cgil-17-5和Cgil-17-6基因的mRNA表达水平显著升高。高通量测序分析显示,感染后长牡蛎鳃组织中变形菌门和弯曲杆菌门的相对丰度增加,弧菌科的相对丰度升高。【结论】深海微小杆菌促进鳃组织炎症相关基因的表达,同时提高了鳃组织中弧菌的丰度导致长牡蛎发病,是诱发长牡蛎脓包病的潜在病原之一。研究结果为贝类病害的预防和控制提供了一定的数据支撑。 展开更多
关键词 长牡蛎 脓包病 深海微小杆菌 16S rDNA测序 转录组测序
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产纤维素酶的金橙黄微杆菌YT9分离鉴定及其培养条件优化 被引量:4
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作者 缪静 李坦坦 +2 位作者 程仕伟 梁会会 崔海洋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第17期210-214,共5页
从渤海近海土壤中分离1株产纤维素酶菌株,经形态、生理生化指标和16S rDNA分析鉴定为金橙黄微杆菌。对该产酶菌株进行碳源、氮源、金属盐、培养温度、pH值和诱导物质量浓度的优化,确定最佳培养基组分和条件为:果糖20g/L、羧甲基纤维素钠... 从渤海近海土壤中分离1株产纤维素酶菌株,经形态、生理生化指标和16S rDNA分析鉴定为金橙黄微杆菌。对该产酶菌株进行碳源、氮源、金属盐、培养温度、pH值和诱导物质量浓度的优化,确定最佳培养基组分和条件为:果糖20g/L、羧甲基纤维素钠(CMC)0.5g/L、蛋白胨8g/L、硫酸亚铁铵2g/L、K2HPO42g/L、NaH2PO42g/L、MnSO41g/L、pH6.5、培养温度30℃、接种量4%。优化后纤维素酶系中以羧甲基纤维素酶活力为最高,为226.27U/mL,其次是β-葡萄糖苷酶和微晶纤维素酶。 展开更多
关键词 金橙黄微杆菌 纤维素酶 培养条件优化 分离 鉴定
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1株微小杆菌对4种蓝藻的生长影响 被引量:4
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作者 邹万生 罗玉双 +2 位作者 刘良国 王文彬 杨品红 《生态与农村环境学报》 CAS CSSCI CSCD 北大核心 2013年第5期612-617,共6页
利用过滤的天然珍珠养殖水参照BG11配制加富培养液,将1株能促进鱼害微囊藻生长的微小杆菌属菌株(Exiguobacterium sp.013,简写为E.sp.013)进行纯化扩大培养后与铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)、水华微囊藻(Microcystis flosaquae)... 利用过滤的天然珍珠养殖水参照BG11配制加富培养液,将1株能促进鱼害微囊藻生长的微小杆菌属菌株(Exiguobacterium sp.013,简写为E.sp.013)进行纯化扩大培养后与铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)、水华微囊藻(Microcystis flosaquae)、平裂藻(Merismopedia sp.)和惠氏微囊藻(Microcystis wesenbergii)按一定菌、藻密度比例同时接种后进行为期24 d的培养试验,利用特定生长率和细胞密度等指标观察并检验E.sp.013菌株对4种蓝藻生长的影响,同时检测培养液中优势菌群的数量变化趋势。结果表明:E.sp.013菌对铜绿微囊藻、水华微囊藻和惠氏微囊藻具有显著促生长和延长稳定生长期作用,对平裂藻不具有显著促生长作用,但对延长其稳定生长期具有显著效果;试验培养过程中E.sp.013菌落数量占所有菌落总数的比例始终高于46%,处于绝对优势地位,表明E.sp.013菌具有调控其他菌群的能力。 展开更多
关键词 蓝藻 促生长菌株 微小杆菌 水华
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低温淀粉酶菌株C2的分离鉴定及其产低温淀粉酶的酶学性质 被引量:10
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作者 冯旭明 迟乃玉 张庆芳 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1762-1767,共6页
获得低温淀粉酶高产菌株,确定该菌株所产淀粉酶的酶学性质。从大黑山(大连)污泥中筛选菌株,通过菌株的形态特征、生理生化和16S rDNA序列鉴定确定其种属,对其酶学性质进行初步研究。获得1株低温淀粉酶高产菌株C2,经鉴定其为微小杆菌属,C... 获得低温淀粉酶高产菌株,确定该菌株所产淀粉酶的酶学性质。从大黑山(大连)污泥中筛选菌株,通过菌株的形态特征、生理生化和16S rDNA序列鉴定确定其种属,对其酶学性质进行初步研究。获得1株低温淀粉酶高产菌株C2,经鉴定其为微小杆菌属,C2所产低温淀粉酶最适反应温度为25°C,酶的热稳定性比较差,最适pH为7.5,Ca2+和Fe2+对该酶有激活作用,Cu2+、Ni2+、Go2+等抑制酶活性。经薄层层析(TLC)鉴定酶解产物为葡萄糖,说明该菌株具有产生低温淀粉糖化酶的能力。菌株C2所产淀粉酶符合低温淀粉酶性质,值得进一步研究。 展开更多
关键词 低温淀粉酶 16S RDNA 微小杆菌 酶学性质
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酸菜包外包膜污染菌分析 被引量:5
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作者 蒋荣荣 赵炜 +1 位作者 王洋 周帼萍 《中国酿造》 CAS 2013年第1期133-136,共4页
某企业发现直接接触食品的酸菜外包膜微生物超标。送检的5份细菌总数达104cfu/mL^107cfu/mL,并伴有霉菌污染。通过16S rDNA序列分析,鉴定其主要的污染菌为微小杆菌(Exiguobacterium spp.)和不动杆菌(Acinetobacter spp.),同时也伴有部... 某企业发现直接接触食品的酸菜外包膜微生物超标。送检的5份细菌总数达104cfu/mL^107cfu/mL,并伴有霉菌污染。通过16S rDNA序列分析,鉴定其主要的污染菌为微小杆菌(Exiguobacterium spp.)和不动杆菌(Acinetobacter spp.),同时也伴有部分葡萄球菌(Staphylococcus spp.)和芽孢杆菌(Bacillus spp.)。污染的霉菌则主要为曲霉(Aspergillus spp.)、交链孢霉(Alternaria spp.)和青霉(Penicillium spp.)。采用半定量粘附实验检测其生物膜形成能力,发现3个主要污染菌株均有很强的生物膜形成能力。 展开更多
关键词 外包膜 污染菌 微小杆菌 不动杆菌 生物膜
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Isolation,identification and characterization of an algicidal bacterium from Lake Taihu and preliminary studies on its algicidal compounds 被引量:16
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作者 Chuan Tian Xianglong Liu +3 位作者 Jing Tan Shengqin Lin Daotang Li Hong Yang 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2012年第10期1823-1831,共9页
In an effort to identify a bio-agent capable of controlling cyanobacterial blooms, we isolated a bacterial strain, A27, which exhibited strong algicidal activity against the dominant bloom-forming species of Microcyst... In an effort to identify a bio-agent capable of controlling cyanobacterial blooms, we isolated a bacterial strain, A27, which exhibited strong algicidal activity against the dominant bloom-forming species of Microcystis aeruginosa in Lake Taihu. Based on 16S rRNA gene sequence analysis, this strain belongs to the genus Exiguobacterium. This is the first report of an algicidal bacterial strain belonging to the genus Exiguobacterium. Strain A27 exhibited algicidal activity against a broad range of cyanobacteria, but elicited little or no algicidal activity against the two green algal strains tested. The algicidal activity of strain A27 was shown to be dependent on the density of the bacteria and to have a threshold density of 1.5×106 CFU/mL. Our data also showed that the algicidal activity of strain A27 depended on different growth stages ofMicrocystis aeruginosa (exponential ≈ lag phase 〉 early stationary) rather than that of the bacterium itself. Our results also suggested the algicidal activity of strain A27 occurred via the production of extracellular algicidal compounds. Investigation of the algicidal compounds revealed that there were at least two different algicidal compounds produced by strain A27. These results indicated that strain A27 has great potential for use in the control of outbreaks of cyanobacterial blooms in Lake Taihu. 展开更多
关键词 algicidal bacteria freshwater cyanobacteriat bloom Microcystis aeruginosa exiguobacterium sp. A27
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一株能降解牛奶中过敏原αs1-酪蛋白的蛋白酶产生菌的筛选、鉴定及免疫学研究
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作者 谈铭 张娟 +2 位作者 朱婷 堵国成 陈坚 《工业微生物》 CAS CSCD 2013年第6期60-67,共8页
从牛奶场附近土壤中筛选得到1株能降解牛奶过敏原蛋白(αs1-酪蛋白)的菌株Exiguobacterium BBE201110,能产分子量约为55 kDa的蛋白酶,酶活达到346.48 U/mL,对该酶降解牛奶过敏原(αs1-酪蛋白)效果进行免疫学研究(Western blot)表明,在... 从牛奶场附近土壤中筛选得到1株能降解牛奶过敏原蛋白(αs1-酪蛋白)的菌株Exiguobacterium BBE201110,能产分子量约为55 kDa的蛋白酶,酶活达到346.48 U/mL,对该酶降解牛奶过敏原(αs1-酪蛋白)效果进行免疫学研究(Western blot)表明,在牛奶中添加4%的酶溶液进行降解20 min,酪蛋白特异性清除显著,过敏原蛋白αs1-酪蛋白浓度明显的降低。本实验筛得降解牛奶过敏原蛋白(αs1-酪蛋白)的菌株并成功纯化出蛋白酶,具有一定的食品工业开发价值及商业应用潜力。 展开更多
关键词 αs1-酪蛋白 exiguobacterium BBE201 1 10 免疫验证
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乙酰微小杆菌生物合成5-甲基尿苷的研究 被引量:2
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作者 上官俊龙 苏境坦 +4 位作者 郑桂兰 张文权 张贵友 谢莉萍 王洪钟 《广东海洋大学学报》 CAS 2011年第4期30-36,共7页
用乙酰微小杆菌(Exiguobacterium acetylicum)完整细胞作为酶源,催化鸟苷和胸腺嘧啶合成抗艾滋病药物关键中间体5-甲基尿苷,并对影响菌体生长和5-甲基尿苷转化率的因素进行了考察。采用紫外诱变方法获得高表达核苷磷酸化酶菌种,使5-甲... 用乙酰微小杆菌(Exiguobacterium acetylicum)完整细胞作为酶源,催化鸟苷和胸腺嘧啶合成抗艾滋病药物关键中间体5-甲基尿苷,并对影响菌体生长和5-甲基尿苷转化率的因素进行了考察。采用紫外诱变方法获得高表达核苷磷酸化酶菌种,使5-甲基尿苷的转化率提高到了75.8%;对培养基进行了碳源和氮源的优化,结果表明,3 g/L葡萄糖、20 g/L玉米浆、4 g/L NH4Cl有利于菌体生长;通过响应曲面(Response Surface Methodology,RSM)法获得了较为合适的转化条件:0.03 g/L MnSO4加入到pH值为8.0的磷酸缓冲液,两种底物浓度均为67 mmol/L,反应温度为56℃。 展开更多
关键词 乙酰微小杆菌 5-甲基尿苷 紫外诱变 培养基优化 生物合成 响应曲面法
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