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Exendin-4 andWound Healing
1
作者 Stefano Bacci 《BIOCELL》 2025年第11期2137-2145,共9页
This commentary analyzes the effect of Exendin-4 on wound healing.After introducing information about the drug,considerations are added regarding its impact on this process.To accelerate wound healing,the drug’s comb... This commentary analyzes the effect of Exendin-4 on wound healing.After introducing information about the drug,considerations are added regarding its impact on this process.To accelerate wound healing,the drug’s combined effects with stem cells and other factors are examined,aiming to enhance and thus accelerate the process.Finally,the clinical potential of this drug’s effect is considered,not only for wound healing but also in other diseases.Therefore,reading this commentary may provide research perspectives that can stimulate the future reader’s thinking. 展开更多
关键词 exendin-4 GLP-1R wound healing
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HPLC测定重组Exendin-4-FC融合蛋白注射液中抗氧剂及其降解物 被引量:1
2
作者 鹿泽华 冀苏龙 +5 位作者 刘帅虎 王力 高彦 申志强 李景艳 王斌 《中国现代应用药学》 CSCD 北大核心 2024年第1期112-118,共7页
目的 建立HPLC对重组Exendin-4-FC融合蛋白注射液中11种抗氧剂及其降解物含量测定方法。方法 采用饱和硫酸铵沉淀蛋白,离心后上清液转移至经甲醇活化后的C_(18)固相萃取小柱中,分别用4 mL甲醇、5 mL乙酸乙酯依次洗脱小柱,洗脱液用甲醇-... 目的 建立HPLC对重组Exendin-4-FC融合蛋白注射液中11种抗氧剂及其降解物含量测定方法。方法 采用饱和硫酸铵沉淀蛋白,离心后上清液转移至经甲醇活化后的C_(18)固相萃取小柱中,分别用4 mL甲醇、5 mL乙酸乙酯依次洗脱小柱,洗脱液用甲醇-乙酸乙酯(2∶3)混合溶剂定容后过0.22μm PTFE疏水滤膜,经HPLC分析,外标法定量。色谱条件:Kinetex■ XB-C_(18) 100A(100 mm×4.6 mm,2.6μm)色谱柱,检测波长230 nm,柱温箱30℃,进样量5μL,流速0.4 mL·min^(–1),流动相0.1%甲酸-甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B),运行时间45 min。结果 11种目标物在2.5~35μg·mL^(–1)内线性关系良好(R~2≥0.99)。在25,10,5μg·mL^(–1) 3个浓度水平下,平均加样回收率为88.1%~106.5%,RSD为0.10%~9.05%。6份样品重复性RSD为2.01%~4.77%,12份样品中间精密度RSD为2.58%~9.75%,对3批次重组Exendin-4-FC融合蛋白注射液的0月,25℃加速3月及6月正/倒置样品进行检测,结果显示所有批次样品在不同检测点均未有抗氧剂及其降解物浸出。结论 该方法专属性好、准确度与精密度高、溶液稳定性好、方法耐用性高,能够用于对药品中抗氧剂类物质的含量检测。 展开更多
关键词 重组exendin-4-FC融合蛋白注射液 抗氧剂 高效液相色谱法
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Exendin-4通过调控Sirt1/PGC1α延缓糖尿病小鼠心肌损伤 被引量:9
3
作者 蔡迎迎 邹少洲 +5 位作者 范存霞 吴春艳 方舒 李萍 薛耀明 关美萍 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期520-526,共7页
目的探讨exendin-4对2型糖尿病小鼠心肌的保护作用及其机制。方法将C57BL/6J小鼠分为正常组(Con)和糖尿病组(DM),Con组小鼠正常饮食,DM组小鼠利用高脂饮食联合链脲佐菌素进行造模,造模成功后的2型糖尿病小鼠分Exendin-4干预(DM+Ex-4)和... 目的探讨exendin-4对2型糖尿病小鼠心肌的保护作用及其机制。方法将C57BL/6J小鼠分为正常组(Con)和糖尿病组(DM),Con组小鼠正常饮食,DM组小鼠利用高脂饮食联合链脲佐菌素进行造模,造模成功后的2型糖尿病小鼠分Exendin-4干预(DM+Ex-4)和糖尿病对照组(DM-Con)。DM+Ex-4组小鼠每天给予1 nmol/kg体质量的exendin-4腹腔注射,干预8周。DM-Con组给予等剂量的生理盐水腹腔注射。记录各组小鼠血糖、体质量等生理指标,RT-PCR检测心肌肥大、纤维化指标以及PGC1α、NRF、Cyto C等线粒体功能相关指标,Western blot检测氧化应激指标以及Sirt1/PGC1α通路表达情况,HE病理染色观察心肌结构变化。结果与Con组相比,DM-Con组的血糖、血脂均显著升高(P<0.001),心肌组织ANP、BNP、TGFβ1、Cyto C1、NOX1显著升高(P<0.05),而Sirt1、PGC1α、NRF、SOD1显著降低(P<0.05)。Exendin-4干预后,与DM-Con组相比,DM+Ex-4组小鼠血糖、血脂明显下降(P<0.05),心肌组织ANP、BNP、TGFβ1、Cyto C1、NOX1明显下降(P<0.05),Sirt1、PGC1α、NRF、SOD1表达升高(P<0.05)。结论 Exendin-4通过调控心肌组织Sirt1/PGC1α信号通路,改善线粒体功能,抑制氧化应激,从而缓解糖尿病小鼠心肌损伤。 展开更多
关键词 exendin-4 糖尿病心肌病 Sirt1/PGC1α 氧化应激 线粒体功能
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Exendin-4体外通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号减轻氧化应激诱导的小鼠MIN6胰岛β细胞凋亡 被引量:5
4
作者 刘礼斌 王燕萍 +2 位作者 潘晓东 姜苏原 陈洲 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期690-694,共5页
探讨胰高血糖素样肽-1受体激动剂Exendin-4(Ex-4)在氧化损伤诱导胰岛β细胞凋亡中的保护作用。培养的MIN6胰岛β细胞,通过AO-EB染色观察细胞凋亡形态,Annexin-V-PI染色流式技术测定凋亡率,Griess法检测细胞内一氧化氮水平,Western blott... 探讨胰高血糖素样肽-1受体激动剂Exendin-4(Ex-4)在氧化损伤诱导胰岛β细胞凋亡中的保护作用。培养的MIN6胰岛β细胞,通过AO-EB染色观察细胞凋亡形态,Annexin-V-PI染色流式技术测定凋亡率,Griess法检测细胞内一氧化氮水平,Western blotting检测胞浆iNOS蛋白、胞浆及胞核核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白表达水平。Ex-4可抑制叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的β细胞凋亡,Ex-4(100 nmol.L-1)预处理较单独t-BHP处理,其凋亡率减少约67%(P<0.001)。Ex-4同时减少NO水平的增高,并抑制t-BHP诱导的β细胞NF-κBp65活化及iNOS蛋白表达水平。Ex-4可能通过抑制细胞内NF-κB活化、胞浆iNOS表达来抑制NO水平,最终减轻氧化损伤诱导的β细胞凋亡。 展开更多
关键词 exendin-4 胰岛Β细胞 细胞凋亡 核因子κB 诱导型一氧化氮合酶 一氧化氮 叔丁基过氧化氢
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Exendin-4对高脂大鼠脂代谢及胰岛β细胞功能的影响 被引量:5
5
作者 谭兴容 王毅 +5 位作者 杨刚毅 方超 吴艳 欧阳凌云 李生兵 陈瑜 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期120-123,共4页
目的探讨Exendin-4对高脂喂养的肥胖大鼠胰岛β细胞功能及糖脂代谢的影响。方法SD大鼠40只用简单随机分组法分为2组,分别给予普通饲料(NC组,10只)及高脂饲料(30只)。喂养10周后,高脂喂养大鼠分为高脂(HF)组,0.5、2μg/kg Exendin-4治疗... 目的探讨Exendin-4对高脂喂养的肥胖大鼠胰岛β细胞功能及糖脂代谢的影响。方法SD大鼠40只用简单随机分组法分为2组,分别给予普通饲料(NC组,10只)及高脂饲料(30只)。喂养10周后,高脂喂养大鼠分为高脂(HF)组,0.5、2μg/kg Exendin-4治疗高脂组(HFL、HFH组),每组10只。治疗6周后,用静脉葡萄糖耐量实验(IVGTT)和胰岛素耐量实验(ITT)来评价机体的胰岛β细胞功能及机体对胰岛素的敏感性,同时检测基础血脂水平。结果高脂诱导肥胖大鼠经Exendin-4处理后,Lee’s指数、空腹血浆游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)明显降低(P<0.01);IVGTT和ITT指标明显改善(P<0.05),胰岛素分泌水平增高(P<0.01),胰岛β细胞功能改善(P<0.05),HFH组较HFL组上述指标改善更为明显。结论Exendin-4可改善肥胖大鼠的胰岛β细胞功能和糖脂代谢,并可能呈剂量-效应关系。 展开更多
关键词 exendin-4 HE胖大鼠 胰岛Β细胞功能 糖脂代谢
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Exendin-4降低高糖联合TNF-α诱导的血管内皮细胞损伤的机制 被引量:5
6
作者 柯甦捷 薛耀明 +2 位作者 李晨钟 朱波 符彩燕 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1182-1185,共4页
目的观察exendin-4对于高糖联合肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞HUVEC-12损伤的影响并探讨其可能机制。方法体外培养HUVEC-12细胞至对数生长期,根据干预措施分为正常对照组、高糖+TNF-α组(HT组)、高糖+TNF-α+exendin-4... 目的观察exendin-4对于高糖联合肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞HUVEC-12损伤的影响并探讨其可能机制。方法体外培养HUVEC-12细胞至对数生长期,根据干预措施分为正常对照组、高糖+TNF-α组(HT组)、高糖+TNF-α+exendin-4(1 nmol/L)组(HT+E1组)和高糖+TNF-α+exendin-4(10 nmol/L)组(HT+E10组),采用硝酸还原酶法检测NO含量,实时荧光定量PCR法检测细胞ICAM-1 mRNA表达,细胞免疫荧光法检测NF-κB p65核转位,Western blotting检测p38 MAPK蛋白表达。结果处理组细胞培养液中NO含量无明显差异;与对照组相比较,HT组核NF-κB p65荧光强度及p38 MAPK水平显著增加(P<0.01);加入Eexendin-4预处理组的ICAM-1 mRNA表达显著降低;HT+E10组核NF-κB p65荧光强度及p38 MAPK蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 Exendin-4减少高糖联合TNF-α诱导的HUVEC-12细胞ICAM-1 mRNA表达,其机制可能与抑制NF-κB p65核转位及p38 MAPK蛋白有关。 展开更多
关键词 exendin-4 高糖 肿瘤坏死因子-α 核因子-κB P65 P38-MAPK
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Exendin-4通过拮抗钙超载改善Aβ_(31-35)诱导的HT22海马神经细胞per1基因异常表达 被引量:4
7
作者 赵学玲 王丽 +6 位作者 李亚蒙 原媛 于倩倩 徐云云 李杨 曹秀丽 王晓晖 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期739-744,共6页
目的:探讨Exendin-4对Aβ_(31-35)所致的HT22神经细胞per1基因异常表达的影响及可能作用机制。方法:本研究采用海马神经细胞HT22作为实验对象。以1%血清饥饿1 h来诱导细胞同步化(CT0)。MTT实验检测细胞存活率;倒置显微镜下观察细胞形态... 目的:探讨Exendin-4对Aβ_(31-35)所致的HT22神经细胞per1基因异常表达的影响及可能作用机制。方法:本研究采用海马神经细胞HT22作为实验对象。以1%血清饥饿1 h来诱导细胞同步化(CT0)。MTT实验检测细胞存活率;倒置显微镜下观察细胞形态变化;Real-time PCR检测各CT时间per1基因的表达变化;选择per1表达差异最显著的CT时间点,采用流式细胞术检测细胞内钙离子浓度的变化情况。结果:(1)Exendin-4可以明显提高Aβ_(31-35)所致的HT22细胞存活率的下降;(2)镜下观察可见,经Exendin-4预处理后部分改善了Aβ_(31-35)对细胞的损伤作用,细胞形态有所恢复;(3)Aβ_(31-35)使per1基因在CT16时各处理组的相对表达量明显不同;与对照组相比,Aβ_(31-35)使per1基因表达量明显升高;经Exendin-4预处理后,per1基因的表达得到一定程度的恢复,差异具有统计学意义;(4)在CT16时各处理组细胞荧光强度值明显不同,与对照组相比,Aβ_(31-35)使细胞荧光强度明显增强;经Exendin-4预处理后,细胞荧光强度值明显降低,差异具有统计学意义,此结果与加入尼莫地平的结果类似。加入尼莫地平预处理后,检测各个CT时间per1基因表达变化,与Exendin-4预处理组得到的结果类似。结论:Exendin-4通过拮抗钙超载改善Aβ_(31-35)诱导的HT22海马神经细胞per1基因的异常表达。 展开更多
关键词 exendin-4 Aβ31-35 HT22神经细胞 per1基因 钙超载
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Exendin-4的表达及其降糖活性研究 被引量:5
8
作者 祖向阳 张贵星 +1 位作者 陈小让 王小纯 《药物生物技术》 CAS CSCD 2009年第4期316-320,共5页
根据GeneBank中登录的Exendin-4的氨基酸序列(AAB22006),结合大肠杆菌的密码子偏嗜性,对原有基因70%的密码子进行改造,使其在大肠杆菌中高效表达;同时添加KpnI和NcoI酶切位点和肠激酶识别位点,构建成重组表达载体pET-32a(+)-Exendin-4,... 根据GeneBank中登录的Exendin-4的氨基酸序列(AAB22006),结合大肠杆菌的密码子偏嗜性,对原有基因70%的密码子进行改造,使其在大肠杆菌中高效表达;同时添加KpnI和NcoI酶切位点和肠激酶识别位点,构建成重组表达载体pET-32a(+)-Exendin-4,转化大肠杆菌BL21(DE3)。在30℃条件下1mmol/L的IPTG诱导表达6h,融合蛋白表达量占细菌蛋白总量的32%。利用亲和层析纯化融合蛋白,每克湿菌体可获得纯度98%的融合蛋白6.44mg。利用肠激酶切除融合蛋白的N端融合部分,用亲和层析吸附N端融合肽,每克湿菌体可获得纯度99%的Exendin-41.59mg。腹腔注射糖尿病基因小鼠(BKS.Cg-m+/+Leprdb/J鼠),血糖浓度下降极显著,最佳用量为7μg/kg,注射后4h血糖降低达51.93%。 展开更多
关键词 exendin-4 基因改造 表达 血糖浓度
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Exendin-4改善Aβ31-35所致小鼠海马HT22神经细胞Per2节律基因/蛋白异常表达 被引量:3
9
作者 王晓晖 李亚蒙 +3 位作者 王丽 赵学玲 原媛 徐云云 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期12-17,共6页
目的探讨Exendin-4对β淀粉样蛋白31-35(Aβ31-35)所致HT22细胞Per2节律基因/蛋白表达的影响及机制。方法 HT22细胞分为Aβ31-35处理组(0,2.5,5.0,10.0μmol/L),Exendin-4单独处理组,Exendin-4预处理组,Exendin-4+Exendin(9-39)预处理组... 目的探讨Exendin-4对β淀粉样蛋白31-35(Aβ31-35)所致HT22细胞Per2节律基因/蛋白表达的影响及机制。方法 HT22细胞分为Aβ31-35处理组(0,2.5,5.0,10.0μmol/L),Exendin-4单独处理组,Exendin-4预处理组,Exendin-4+Exendin(9-39)预处理组,Exendin-4+Exendin(9-39)处理组,Exendin(9-39)单独处理组,以完全培养基培养的细胞为对照组。光镜下观察HT22细胞形态,MTT法检测细胞存活率,实时荧光定量PCR检测Per2基因的表达,免疫荧光染色观察GLP-1R及PER2蛋白表达。结果 5,10μmol/L Aβ31-35处理后,细胞存活率较对照组显著降低(P<0.05)。Exendin-4预处理后,5μmol/L Aβ31-35引起的细胞形态结构的改变明显改善,细胞存活率显著提高(P<0.05)。Exendin-4预处理后,Per2基因/蛋白表达在CT(circadian time)16时较Aβ31-35处理显著提高(P<0.05);Exendin-4+Exendin(9-39)处理后,GLP-1R表达在CT16时较Exendin-4处理显著降低(P<0.05)。Exendin-4+Exendin(9-39)预处理后,CT16时PER2蛋白荧光强度较Exendin-4预处理显著降低(P<0.05)。结论Exendin-4可能通过上调GLP-1R,改善Aβ31-35所致HT22细胞Per2节律基因/蛋白异常表达。 展开更多
关键词 exendin-4 Aβ31-35 HT22神经细胞 Per2节律基因/蛋白 GLP-1R
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尼克酰胺联合Exendin-4促进大鼠骨髓间充质干细胞体外转分化为胰岛素分泌细胞团的研究 被引量:3
10
作者 武晓泓 刘翠萍 +5 位作者 茅晓东 徐宽枫 崔岱 朱剑 张梅 刘超 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期230-232,共3页
尼克酰胺联合Exendin4能明显促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)转分化为胰岛素分泌细胞团,表达胰岛素、C肽和相应基因。
关键词 骨髓间充质干细胞 胰岛素 尼克酰胺 exendin-4
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Exendin-4改善胰岛素抵抗的作用机制研究 被引量:3
11
作者 李清明 杨刚毅 +6 位作者 李伶 李钶 齐晓亚 谭兴蓉 石绍川 刘桦 Guenther Boden 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期405-408,共4页
目的探讨exendin-4(exenatide)对高脂诱导胰岛素抵抗(IR)大鼠胰岛素敏感性(IS)改善的机制及对脂肪细胞因子的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分为正常饮食组(NC)、高脂组(HF)和高脂+Exenatide组(HE)。HE组给予exenatide(2μg/kg,日二次)... 目的探讨exendin-4(exenatide)对高脂诱导胰岛素抵抗(IR)大鼠胰岛素敏感性(IS)改善的机制及对脂肪细胞因子的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分为正常饮食组(NC)、高脂组(HF)和高脂+Exenatide组(HE)。HE组给予exenatide(2μg/kg,日二次)腹腔注射6周,用静脉胰岛素耐量试验评价各组IS变化,观察各组肌肉和脂肪组织胰岛素信号传导、脂肪细胞因子表达和血浆浓度变化。结果6周后,HE组Lee’s指数、空腹血浆FFA、TG、TC均较NC组降低(P均<0.01),IR明显改善;胰岛素刺激后HE组肌肉和脂肪组织IRS-1酪氨酸磷酸化升高(P<0.05);HF和HE组血浆内脏脂肪素(visfatin)水平明显降低(P<0.05,P<0.01),但HE组脂联素(APN)血浆水平和脂肪组织mRNA表达明显高于HF和NC组(P均<0.01)。结论Exenatide明显改善了高脂大鼠IR,其胰岛素增敏机制可能与增强IRS-1酪氨酸磷酸化以及对APN、visfatin等脂肪细胞因子的影响有关。 展开更多
关键词 exendin-4 胰岛素抵抗 脂肪细胞因子 胰岛素信号系统
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Exendin-4与糖尿病治疗 被引量:8
12
作者 谭兴容 王毅 杨刚毅 《重庆医学》 CAS CSCD 2006年第10期904-906,共3页
关键词 exendin-4 GLP-1 糖尿病
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Exendin-4的研究进展 被引量:5
13
作者 毕华 刘兰 +1 位作者 韩春梅 饶春明 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2441-2445,共5页
糖尿病是威胁人类健康的重大疾病,Exendin-4是一种从墨西哥巨蜥蜴的毒液中分离得到的含39个氨基酸的多肽,与GLP-1具有53%的序列同源性,其不但能促进胰岛素分泌,而且具有稳定性好、半衰期长的优点,在糖尿病等治疗方面具有广阔的前景。本... 糖尿病是威胁人类健康的重大疾病,Exendin-4是一种从墨西哥巨蜥蜴的毒液中分离得到的含39个氨基酸的多肽,与GLP-1具有53%的序列同源性,其不但能促进胰岛素分泌,而且具有稳定性好、半衰期长的优点,在糖尿病等治疗方面具有广阔的前景。本文就Exendin-4结构、性质、功能等方面的研究进展作以综述。 展开更多
关键词 exendin-4 糖尿病
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exendin-4表达载体构建及其在大肠杆菌中分泌表达 被引量:2
14
作者 张红绪 贾孟 +2 位作者 周庆峰 张怡 李成伟 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期109-112,116,共5页
目的:研究新型抗糖尿病药物exendin-4的分子作用机制,为exendin-4的大规模生产奠定基础.方法:采用重叠PCR法扩增出exendin-4的完整序列,并将其克隆至表达载体pET22b上,得到重组质粒pET-Exn4.重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG... 目的:研究新型抗糖尿病药物exendin-4的分子作用机制,为exendin-4的大规模生产奠定基础.方法:采用重叠PCR法扩增出exendin-4的完整序列,并将其克隆至表达载体pET22b上,得到重组质粒pET-Exn4.重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后,超声破碎表达产物,Tricine-SDS-PAGE分析exendin-4表达.结果:PCR、酶切鉴定和测序结果证明成功构建了重组表达载体pET-Exn4,Tricine-SDS-PAGE结果表明ex-endin-4基因在大肠杆菌中获得了分泌表达.结论:成功构建了exendin-4的重组表达载体并在大肠杆菌中实现分泌表达. 展开更多
关键词 exendin-4 载体构建 分泌表达 大肠杆菌 Ⅱ型糖尿病
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Exendin-4中13号残基的分子动力学模拟 被引量:2
15
作者 王嵩 赵熹 +2 位作者 郑清川 黄旭日 孙家锺 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1641-1644,共4页
Exendin-4作为胰腺GLP-1受体上的一种有效的激活剂,是一种含有39个氨基酸残基的多肽,其第13号氨基酸Gln突变为Tyr,使活性增强.应用分子动力学模拟方法,分别优化了突变前后,Exendin-4与蛋白的复合物结构,并对整体结构的性质、静电势、相... Exendin-4作为胰腺GLP-1受体上的一种有效的激活剂,是一种含有39个氨基酸残基的多肽,其第13号氨基酸Gln突变为Tyr,使活性增强.应用分子动力学模拟方法,分别优化了突变前后,Exendin-4与蛋白的复合物结构,并对整体结构的性质、静电势、相互作用模式及能量进行了分析.阐明了Gln突变为Tyr的活性增强的内在原因,结果表明,突变的Exendin-4能够通过改变自身结构的局部柔性调整与蛋白受体相互作用,从而可以改善Exendin-4与其蛋白受体的结合能力. 展开更多
关键词 exendin-4 分子动力学模拟 复合物 静电作用
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Exendin-4对游离脂肪酸介导的βTc6细胞GK和GLUT2表达改变的干预作用 被引量:3
16
作者 黄林晶 杨立勇 +1 位作者 严孙杰 沈喜妹 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期832-835,共4页
目的 探讨Exendin-4在高脂状态下是否具有抗脂毒性及其相关的机制是否涉及葡萄糖激酶(GK)和葡萄糖转运蛋白2 (GLUT2). 方法 应用不同浓度Exendin-4(5、10及50 nmol/L)孵育βTc6细胞不同时限(6、12及24 h),再予1mmol/L FFA作用24... 目的 探讨Exendin-4在高脂状态下是否具有抗脂毒性及其相关的机制是否涉及葡萄糖激酶(GK)和葡萄糖转运蛋白2 (GLUT2). 方法 应用不同浓度Exendin-4(5、10及50 nmol/L)孵育βTc6细胞不同时限(6、12及24 h),再予1mmol/L FFA作用24h后,检测细胞内GK和GLUT2表达情况.结果 Exendin-4干预6h,各组细胞内GK、GLUT2表达未见明显改变;当干预延长至12~24 h,随干预浓度增高,细胞内GK、GLUT2表达逐步升高. 结论 适宜浓度的Exendin-4干预一定的时限可上调脂毒性状态下胰岛β细胞GK和GLUT2的表达. 展开更多
关键词 exendin-4游离脂肪酸 βTc6细胞 葡萄糖激酶 葡萄糖转运蛋白2
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GST-Exendin-4在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化 被引量:2
17
作者 张怡 周庆峰 +2 位作者 贾孟 张红绪 李成伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期155-159,共5页
为了制备GST-Exendin-4融合蛋白,以本实验室构建好的pET22b-Exendin-4为模板,通过PCR扩增出Exendin-4基因,酶切克隆入pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-Exendin-4。经DNA测序证实插入序列与设计完全一致后,将重组质粒转化大肠杆菌BL... 为了制备GST-Exendin-4融合蛋白,以本实验室构建好的pET22b-Exendin-4为模板,通过PCR扩增出Exendin-4基因,酶切克隆入pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-Exendin-4。经DNA测序证实插入序列与设计完全一致后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在不同浓度的IPTG和不同温度诱导下,经SDS-PAGE分析鉴定,表达出Mr约为30 kD的目的蛋白,灰度扫描显示目的蛋白占菌体总蛋白的29.9%,超声裂解后的上清通过Sepharose 4B亲和层析纯化、透析、除盐及冷冻干燥得到高纯度的目的蛋白。本研究成功制备了高纯度的GST-Exendin-4融合蛋白,为下一步进行目的蛋白大规模的生产打下了良好的基础。 展开更多
关键词 exendin-4 融合蛋白 可溶表达 亲和纯化
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Exendin-4通过JNK和ERK信号通路增强大鼠脂肪来源干细胞的增殖 被引量:2
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作者 周浩 杨俊杰 +6 位作者 辛婷 胡舜英 易军 周珊珊 韩天文 张颖 陈韵岱 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第30期5801-5805,共5页
目的:探讨Exendin-4对大鼠脂肪来源干细胞的(Adipose-derived stem cells,ADSCs)增殖作用及其机制。方法:体外分离培养SD大鼠腹股沟处脂肪组织,流式细胞学方法鉴定分离的ADSCs,使用Exendin-4(Ex-4,0-50 nm/L)对P4代(第四代)ADSCs进行干... 目的:探讨Exendin-4对大鼠脂肪来源干细胞的(Adipose-derived stem cells,ADSCs)增殖作用及其机制。方法:体外分离培养SD大鼠腹股沟处脂肪组织,流式细胞学方法鉴定分离的ADSCs,使用Exendin-4(Ex-4,0-50 nm/L)对P4代(第四代)ADSCs进行干预,采用MTT检测ADSCs的增殖情况,Western blot检测MAPK通路中JNK和ERK的磷酸化水平,使用相应的阻断剂来观测JNK和ERK通路对ADSCs增殖作用的影响。结果:分离培养的ADSCs高表达CD29、CD90和CD105,低表达CD31、CD34和CD45,符合间充质干细胞的表型。Ex-4以浓度依赖方式促进ADSCs体外增殖,10 nm/L为最适促增殖处理浓度。同时,Ex-4可以提高细胞中c-Jun和ERK的磷酸化水平,而给予相应阻断剂后,磷酸化蛋白表达减弱,细胞增殖能力也明显减弱。结论:Ex-4可以通过JNK和ERK通路增强大鼠脂肪来源干细胞的增殖。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 exendin-4 增殖 JNK/ERK信号通路
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Exendin-4与绿色荧光蛋白融合基因的表达与活性研究 被引量:3
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作者 垢敬 田菲 施丽捷 《天津医药》 CAS 北大核心 2008年第3期212-214,242,共4页
目的:表达具有双功能特性的Exendin-4-GFP融合蛋白。方法:构建融合表达载体pET21a(+)/Exendin-4-GFP,转化大肠杆菌BL21后,以IPTG诱导融合蛋白的表达,并利用镍金属螯合层析树脂对其进行纯化。采用胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)转染的CHO... 目的:表达具有双功能特性的Exendin-4-GFP融合蛋白。方法:构建融合表达载体pET21a(+)/Exendin-4-GFP,转化大肠杆菌BL21后,以IPTG诱导融合蛋白的表达,并利用镍金属螯合层析树脂对其进行纯化。采用胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)转染的CHO细胞考察融合蛋白的结合特性,并检测其生物活性。结果:含有融合表达载体的重组菌株诱导表达后,经SDS-PAGE及免疫印迹分析显示,31.0ku的融合蛋白在大肠杆菌中得到了表达,且具有Exendin-4的抗原活性。受体结合实验表明,该融合蛋白能够与GLP-1R特异性结合,在488nm激发光下呈现绿色荧光。体内活性实验表明,融合蛋白具有明显的降血糖活性。结论:本研究表达的Exendin-4-GFP融合蛋白同时具有Exendin-4的活性和荧光特性,为研究GLP-1受体功能以及Exendin-4与细胞相互作用的机制奠定了基础。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白质类 基因表达 大肠杆菌 质粒 exendin-4 胰高血糖素样肽-l受体
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双链腺相关病毒介导表达Exendin-4治疗糖尿病大鼠的研究 被引量:2
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作者 王俊红 王枫 +3 位作者 董鹏 徐静 谢璇 郭永红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第17期1831-1835,共5页
目的 构建 、鉴定自身互补双链DNA的腺相关病毒(scAAV)重组载体,使其分泌表达Exendin-4,检测其转导效率并观察在糖尿病大鼠模型中的治疗作用。 方法 应用基因工程方法改建穿梭质粒pSSHG-CMV,插入外源性基因Exendin-... 目的 构建 、鉴定自身互补双链DNA的腺相关病毒(scAAV)重组载体,使其分泌表达Exendin-4,检测其转导效率并观察在糖尿病大鼠模型中的治疗作用。 方法 应用基因工程方法改建穿梭质粒pSSHG-CMV,插入外源性基因Exendin-4,构建重组scAAV载体,感染HEK293细胞,ELISA检测转染NIH3T3细胞上清Exendin-4滴度,链佐霉素诱导20只6周龄体质量180~220 g SD成年雄性大鼠为糖尿病鼠模型,逆向注射重组scAAV于糖尿病大鼠颌下腺,检测其血糖及胰岛素分泌水平。 结果 重组scpSSHG/exn4可有效包装和复制,病毒滴度为2.5×1011pfu/mL,转染细胞上清分泌Exendin-4浓度可达到4.53 ng/mL,scAAV治疗组血糖浓度在2、4周及8周均低于对照组[分别为(639.17±27.89)vs (396.00±34.00),(657.02±39.87) vs (315.62±42.56),(215.6±24.7) vs (458.6±19.7) mg/dL],胰岛素浓度均高于对照组[分别为(156.8±24.5) vs (535.9±35.6),(236.5±12.3) vs (495.3±18.6),(620.43±46.90) vs (381.56±21.78) pg/mL],二者比较有显著统计学差异(P〈0.05)。 结论 成功构建重组双链腺伴病毒scAAV-Ex-4,具有高效转导能力,对糖尿病大鼠模型具有控制血糖及增加胰岛素分泌作用。 展开更多
关键词 双链AAV exendin-4 2型糖尿病大鼠
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