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香樟延伸因子EF1a基因片段的克隆及表达分析 被引量:15
1
作者 张力维 李勇鹏 +2 位作者 姚瑶 梁优 杜丽 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期122-128,共7页
通过同源克隆的方法从香樟Cinnamomum camphora中分离到一个编码延伸因子EF1a的c DNA序列片段。根据已经在Gen Bank中登录的其它物种的EF1a基因的保守序列设计一对兼并引物,通过反转录PCR技术获得一个1 297 bp的基因片段。同源比对表明:... 通过同源克隆的方法从香樟Cinnamomum camphora中分离到一个编码延伸因子EF1a的c DNA序列片段。根据已经在Gen Bank中登录的其它物种的EF1a基因的保守序列设计一对兼并引物,通过反转录PCR技术获得一个1 297 bp的基因片段。同源比对表明:Cc EF1a与Gen Bank中注册的其它植物EF1a基因核苷酸序列的相似性均在80%以上,氨基酸序列的相似性高达96%以上。将所获得基因片段命名为Cc EF1a并提交Gen Bank,登录号为KM086740。实时定量PCR结果显示,Cc EF1a在低温胁迫下的叶片中表达量稳定,可以在实时定量PCR分析中作为内参基因。 展开更多
关键词 香樟 延伸因子 ef1a基因片段 克隆 表达分析
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拟南芥翻译延伸因子EF1A的亚细胞定位研究 被引量:3
2
作者 陈燕 王伟倩 +6 位作者 张红莉 夏群芳 孙恒吉 李瑞沙 郑帮 周树敏 张卫 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2015年第1期106-109,115,共5页
探讨了拟南芥的翻译延伸因子EF1A的亚细胞定位.以Col野生型拟南芥的cDNA为模板,通过高保真KOD扩增酶获得2 363bp的拟南芥转录延伸因子EF1A基因片段,将其与GFP融合后共同连入p1300表达载体,利用农杆菌侵染法将p35S∶GFP和p35S∶EF1A∶∶... 探讨了拟南芥的翻译延伸因子EF1A的亚细胞定位.以Col野生型拟南芥的cDNA为模板,通过高保真KOD扩增酶获得2 363bp的拟南芥转录延伸因子EF1A基因片段,将其与GFP融合后共同连入p1300表达载体,利用农杆菌侵染法将p35S∶GFP和p35S∶EF1A∶∶GFP转入野生型拟南芥中,观察转基因植物细胞中GFP的表达情况.结果显示:p35S∶GFP转基因植物中,细胞核中GFP荧光强度显著高于细胞质中荧光强度,但是在p35S∶EF1A∶∶GFP转基因植物中,细胞核中荧光强度与细胞质中荧光强度无显著差异,说明在进行蛋白翻译时细胞质中的EF1A含量显著高于细胞核中,这也为翻译延伸因子EF1A的亚细胞定位提供了实验依据. 展开更多
关键词 拟南芥 翻译延伸因子 ef1a GFP
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红树植物桐花树EF1A基因的克隆与表达分析 被引量:8
3
作者 彭亚兰 王友绍 《生态科学》 CSCD 北大核心 2014年第4期704-712,共9页
通过RACE方法克隆到桐花树(Aegiceras corniculatum)的一个延伸因子基因,命名为Ac EF1A(Gen Bank登录号:KC416649)。该基因的c DNA全长1 778 bp,CDS为1 350 bp,编码449个氨基酸。多序列比对结果表明该氨基酸序列与琴叶拟南芥(Arabidopsi... 通过RACE方法克隆到桐花树(Aegiceras corniculatum)的一个延伸因子基因,命名为Ac EF1A(Gen Bank登录号:KC416649)。该基因的c DNA全长1 778 bp,CDS为1 350 bp,编码449个氨基酸。多序列比对结果表明该氨基酸序列与琴叶拟南芥(Arabidopsis lyrata)EF1A的氨基酸序列高度相似(97.7%)。基因表达分析结果显示Ac EF1A在茎尖中的表达量最高,叶片中的表达量次之,根中的表达量最低。低温、高盐、干旱和重金属Cd胁迫下,桐花树叶片中Ac EF1A基因的表达水平有不同程度的上调。这些结果表明Ac EF1A基因可能参与了植物的生长发育过程及逆境响应过程。 展开更多
关键词 红树植物 桐花树 延伸因子 克隆 实时定量PCR
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百脉根离子通道蛋白Pollux与翻译延伸因子EF1A的相互作用 被引量:4
4
作者 代广中 袁兆栋 +3 位作者 苟洪兰 方庆 朱辉 张忠明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期34-38,共5页
利用酵母双杂交技术,以百脉根离子通道蛋白Pollux胞内结构域为诱饵,从百脉根AD-cDNA文库中筛选到与Pollux相互作用的多个阳性克隆,经DNA序列测定及NCBI数据库BLAST分析,其中有6个阳性克隆编码翻译延伸因子EF1A。进一步在大肠杆菌中表达... 利用酵母双杂交技术,以百脉根离子通道蛋白Pollux胞内结构域为诱饵,从百脉根AD-cDNA文库中筛选到与Pollux相互作用的多个阳性克隆,经DNA序列测定及NCBI数据库BLAST分析,其中有6个阳性克隆编码翻译延伸因子EF1A。进一步在大肠杆菌中表达与纯化Pollux和EF1A融合蛋白,通过Pull-down及Western杂交证实Pollux胞内结构域与EF1A的C-末端相互作用。 展开更多
关键词 百脉根 离子通道蛋白 酵母双杂交 翻译延伸因子
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RNA干扰真核翻译延长因子1A1抑制肝癌Hep3B细胞的增殖 被引量:2
5
作者 晏琛 刘秀霞 +3 位作者 戈进 温崇煜 余新 邵江华 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1016-1022,共7页
目的 :探讨RNA干扰真核翻译延长因子1A1(eukaryotic translation elongation factor 1A1,e EF1A1)的表达对肝癌Hep3B细胞增殖能力的影响及其可能的作用机制。方法 :构建靶向e EF1A1的短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)重组载体p GPU6... 目的 :探讨RNA干扰真核翻译延长因子1A1(eukaryotic translation elongation factor 1A1,e EF1A1)的表达对肝癌Hep3B细胞增殖能力的影响及其可能的作用机制。方法 :构建靶向e EF1A1的短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)重组载体p GPU6/GFP/Neo-e EF1A1-sh RNA,并将其转染至肝癌Hep3B细胞中,随后应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测e EF1A1 m RNA和蛋白的表达,CCK-8(cell counting kit 8)法检测细胞的增殖能力,平板克隆形成实验检测细胞的克隆形成能力,FCM法检测细胞周期的变化,蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)的表达。结果 :成功构建重组载体p GPU6/GFP/Neo-e EF1A1-sh RNA,并获得稳定低表达e EF1A1的肝癌Hep3B细胞。p GPU6/GFP/Neo-e EF1A1-sh RNA转染组Hep3B细胞中e EF1A1 m RNA和蛋白的表达水平明显低于阴性对照组(转染阴性对照载体p GPU6/GFP/Neo-NC的Hep3B细胞)和空白对照组(未转染的Hep3B细胞)(P<0.01,P<0.05)。与阴性对照组比较,p GPU6/GFP/Neo-e EF1A1-sh RNA转染组Hep3B细胞的体外增殖能力和克隆形成能力明显下降(P<0.05,P<0.01),G1期细胞所占比例明显上升(P<0.01),S期细胞所占比例明显下降(P<0.05),cyclin D1和CDK4蛋白的表达水平明显下调(P<0.05)。结论 :下调e EF1A1的表达可以抑制肝癌Hep3B细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 肝肿瘤 细胞增殖 RNA干扰 e ef1a1
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山莨菪碱在大鼠急性全脑缺血再灌注损伤中对一氧化氮内皮素-1及能量代谢的影响 被引量:31
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作者 汤彦 杨光田 +2 位作者 蒋崇慧 汪培华 邓普珍 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期201-203,共3页
目的 了解山莨菪碱在大鼠急性全脑缺血再灌注损伤中对一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、ATP及乳酸的影响,探讨山莨菪碱(Ani)对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用Rulsinelli方法建立大鼠急性全脑缺血... 目的 了解山莨菪碱在大鼠急性全脑缺血再灌注损伤中对一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、ATP及乳酸的影响,探讨山莨菪碱(Ani)对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用Rulsinelli方法建立大鼠急性全脑缺血再灌注损伤模型。观察Ani在再灌注期间对NO、ET-1及能量代谢的影响。结果Ani可以抑制再灌注早期(1小时组)NO、ET-1及乳酸的过量产生,提高脑组织ATP含量。结论 Ani可以通过对NO、ET-1及能量代谢的影响对脑起保护作用。 展开更多
关键词 再灌注损伤 全脑缺血 山莨菪碱 NO EF1
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河北省苹果园根际土壤中疑似致病镰孢菌种类 被引量:12
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作者 邹庆甲 王树桐 +4 位作者 梁魁景 王亚南 胡同乐 韩之琪 曹克强 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期976-983,共8页
为了解引起河北省苹果再植病害的病原菌,在河北省10个地区苹果园中采集土壤样品,在实验室进行病原菌的诱集分离培养,根据形态和分子特征对主要病原菌进行种类鉴定。结果表明,在分离得到的293株真菌中,有116株镰孢菌,为分离频率最高的真... 为了解引起河北省苹果再植病害的病原菌,在河北省10个地区苹果园中采集土壤样品,在实验室进行病原菌的诱集分离培养,根据形态和分子特征对主要病原菌进行种类鉴定。结果表明,在分离得到的293株真菌中,有116株镰孢菌,为分离频率最高的真菌。在形态学鉴定的基础上,对供试镰孢菌进行了分子鉴定。在基于核糖体基因内转录间隔区(rDNA‐ITS)序列与翻译延长因子1α(EF‐1α)序列片段构建的系统发育树中,代表菌株分别与GenBank登记的所属菌株聚于同一群。研究结果明确了河北省苹果再植病害的疑似致病镰孢菌,包括:尖孢镰孢Fusarium oxysporum、木贼镰孢F.equiseti、锐顶镰孢F.acuminatum、层出镰孢F.proliferatum和茄腐镰孢F.solani。 展开更多
关键词 苹果再植病害 镰孢菌 鉴定 INTERNAL transcribed spacers(ITS) EF一1α
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云南葡萄炭疽病菌遗传多样性分析 被引量:7
8
作者 邓维萍 杜飞 +5 位作者 杨敏 杨积忠 何霞红 王海宁 李成云 朱书生 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期173-184,共12页
本研究利用β-tub2,ef1-α和his4基因部分序列对60株采自云南省不同葡萄产区的葡萄炭疽病菌菌株进行基因谱系分析。结果表明:引起云南葡萄炭疽病的病原菌种类较为复杂,不仅包括胶孢炭疽菌复合种群中的Colletotrichum gloeosporioides,... 本研究利用β-tub2,ef1-α和his4基因部分序列对60株采自云南省不同葡萄产区的葡萄炭疽病菌菌株进行基因谱系分析。结果表明:引起云南葡萄炭疽病的病原菌种类较为复杂,不仅包括胶孢炭疽菌复合种群中的Colletotrichum gloeosporioides,还有胶孢炭疽菌复合种群中的其他种或炭疽菌属其他种。来源于不同产地不同葡萄品种上的炭疽菌遗传多样性丰富,但分子水平的多样性与菌株的地理来源、寄主种类、形态特征及对红提致病力方面无明显相关性。 展开更多
关键词 胶孢炭疽菌 遗传多样性 葡萄炭疽病 β-tub2基因 ef1-α基因 his4基因
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萼脊兰EF1α基因片段的克隆及序列分析 被引量:4
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作者 蒋素华 王默霏 +3 位作者 宋彩霞 梁芳 李艳辉 崔波 《贵州农业科学》 CAS 2016年第5期5-8,共4页
为探明萼脊兰EF1α基因在生长发育过程中的生理功能和作为内参基因的稳定性及适用性,根据NCBI中植物翻译延长因子同源核苷酸保守序列设计简并引物,以萼脊兰叶片为试验材料,采用RNAprep多糖多酚植物总RNA提取试剂盒提取RNA,利用RT-PCR技... 为探明萼脊兰EF1α基因在生长发育过程中的生理功能和作为内参基因的稳定性及适用性,根据NCBI中植物翻译延长因子同源核苷酸保守序列设计简并引物,以萼脊兰叶片为试验材料,采用RNAprep多糖多酚植物总RNA提取试剂盒提取RNA,利用RT-PCR技术克隆翻译延伸因子EF1α,并进行生物信息学分析。结果表明:EF1α基因长620bp,编码206个氨基酸,编码的蛋白为亲水性蛋白,相对分子质量为23.16KD,等电点为8.50;经二级结构分析,α-螺旋占29.61%,延伸链占31.55%,无规则卷曲占38.83%;亚细胞定位在细胞质;EF1α基因与朵丽蝶兰杂交品种翻译延伸因子蛋白的一致性较高,进化距离最近。在GenBank登录号为KT223116。 展开更多
关键词 萼脊兰 EF1α 基因克隆 二级结构
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蓝莓茎溃疡病病原菌鉴定及品种抗病性研究 被引量:4
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作者 李媛 石凌波 +3 位作者 费诺亚 孟婷婷 傅俊范 严雪瑞 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期721-729,共9页
在浙江及福建蓝莓产区发现一种蓝莓茎部病害,病斑呈棕黄色至棕黑色,严重时引起蓝莓整株枯死。对病样进行分离得到具有致病性的36个分离株。通过对菌株的形态学研究及系统发育分析,将致病菌鉴定为Diaporthe hongkongensis,本文系国内外... 在浙江及福建蓝莓产区发现一种蓝莓茎部病害,病斑呈棕黄色至棕黑色,严重时引起蓝莓整株枯死。对病样进行分离得到具有致病性的36个分离株。通过对菌株的形态学研究及系统发育分析,将致病菌鉴定为Diaporthe hongkongensis,本文系国内外首次报道D.hongkongensis危害蓝莓。对代表菌株的生物学特性进行研究表明:菌落生长最适温度为25℃;最适培养基为PDA;菌落生长对光照不敏感。采用菌饼刺伤接种活体枝条的方法对10个蓝莓主栽品种进行抗病性测定,结果显示:不同蓝莓品种对该病菌表现出敏感差异,其中‘爱国者’、‘瑞卡’、‘日出’、‘奥林匹亚’、‘都克’、‘托柔’、‘蓝丰’相对抗病;‘北陆’、‘埃利奥特’、‘达柔’相对感病。 展开更多
关键词 蓝莓 间座壳 生物学特性 ITS EF1-α
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对蓟马类害虫高致病性球孢白僵菌的分离、鉴定 被引量:13
11
作者 王俊平 郑长英 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期295-299,共5页
从草履蚧僵虫体内分离出12株病原真菌,对蓟马类昆虫具有70%~90%的致死率。现选出一株病原真菌CYT10利用形态和分子的特点进行鉴定。扫描电镜下观察,该菌产孢细胞簇生瓶状,"之"型产孢轴。经PCR获得rDNA-ITS和EF1-a核苷酸序列,... 从草履蚧僵虫体内分离出12株病原真菌,对蓟马类昆虫具有70%~90%的致死率。现选出一株病原真菌CYT10利用形态和分子的特点进行鉴定。扫描电镜下观察,该菌产孢细胞簇生瓶状,"之"型产孢轴。经PCR获得rDNA-ITS和EF1-a核苷酸序列,与其他球孢白僵菌的相应序列一致性达95%以上,进化分析CYT10菌株与球孢白僵菌Beauveria bassiana聚为一类。根据菌株的形态观察和DNA序列分析确定该菌为球孢白僵菌。 展开更多
关键词 球孢白僵菌 蓟马 形态特点 rDNA-ITS EF1-a
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基于EF1-a基因对常见禾本科作物的聚类分析 被引量:1
12
作者 押辉远 李卫涛 +1 位作者 王卫东 焦贞 《郑州大学学报(理学版)》 CAS 北大核心 2012年第2期108-113,共6页
基于EF1-a基因核苷酸序列和氨基酸序列,利用分子进化遗传分析软件MEGA 5.0构建常见禾本科植物的最小进化法(ME)、邻接法(NJ)和算术平均数的非加权成组配对法(UPGMA)分子系统进化树.研究结果表明,EF1-a cDNA序列和氨基酸序列的聚类分析... 基于EF1-a基因核苷酸序列和氨基酸序列,利用分子进化遗传分析软件MEGA 5.0构建常见禾本科植物的最小进化法(ME)、邻接法(NJ)和算术平均数的非加权成组配对法(UPGMA)分子系统进化树.研究结果表明,EF1-a cDNA序列和氨基酸序列的聚类分析都能够反映所列禾本科植物的属间关系,3种进化树的聚类分析分支情况基本一致.基于EF1-a基因的cDNA序列和氨基酸序列构建的ME、NJ树适合用来研究禾本科作物种间或种内的遗传关系,而构建的氨基酸序列UPGMA树有待更多的数据研究. 展开更多
关键词 延伸因子EF1-a 禾本科作物 分子系统进化树
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一株茶籽象甲寄生真菌的分子鉴定 被引量:2
13
作者 王定锋 李良德 +4 位作者 李慧玲 张辉 王庆森 曾明森 吴光远 《茶叶学报》 2020年第2期90-94,共5页
分子标记是一种快速、有效和精准的鉴定工具,在虫生真菌新种的鉴定中发挥重要的作用。为明确一株分离自茶籽象甲的寄生真菌的具体分类归属,我们对该菌株的EF1-α和Bloc两个分子标记基因进行了PCR扩增、测序和系统进化树构建,最终明确了... 分子标记是一种快速、有效和精准的鉴定工具,在虫生真菌新种的鉴定中发挥重要的作用。为明确一株分离自茶籽象甲的寄生真菌的具体分类归属,我们对该菌株的EF1-α和Bloc两个分子标记基因进行了PCR扩增、测序和系统进化树构建,最终明确了该寄生真菌为球孢白僵菌Beauveria bassiana。本研究结果将为今后更好地利用球孢白僵菌来防治茶园鞘翅目害虫提供参考。 展开更多
关键词 茶籽象甲 球孢白僵菌 分子鉴定 EF1-α Bloc
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LETM1蛋白在结肠癌组织中的表达及临床意义 被引量:8
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作者 高爱花 金永民 +7 位作者 孙红花 金文彪 崔海 崔现 崔玉珍 沈雄虎 张松男 朴龙镇 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第5期718-723,共6页
目的:观察亮氨酸拉链EF-hand结构域跨膜蛋白1(leucine zipper/EF-hand-containing transmembrane protein 1,LETM1)在结肠癌中的表达情况,探讨LETM1蛋白是否能够成为判断结肠癌患者预后的新的生物学指标.方法:利用免疫组织化学法检测73... 目的:观察亮氨酸拉链EF-hand结构域跨膜蛋白1(leucine zipper/EF-hand-containing transmembrane protein 1,LETM1)在结肠癌中的表达情况,探讨LETM1蛋白是否能够成为判断结肠癌患者预后的新的生物学指标.方法:利用免疫组织化学法检测73例结肠癌患者组织中LETM1蛋白的表达水平和蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)/Akt的丝氨酸473(Ser473)、苏氨酸308(Thr308)两个磷酸化位点及葡萄糖合成激酶3β(glycogen synthase k i n a s e 3β,G S K3β)的磷酸化水平,并根据LETM1蛋白表达水平进行高表达和低表达分组;采用Kaplan-Meier法分析各组无疾病生存期;采用χ2检验进行组间单因素分析.结果:在结肠癌患者中LETM1蛋白高表达率为54.8%,LETM1蛋白在结肠癌浸润深度、分化及淋巴结转移中低表达和高表达率分别为27.3%/72.7%、38.3%/61.7%和22.7%/77.3%,其差异均有统计学意义(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤大小未见统计学意义(P>0.05).LETM1蛋白在结肠癌组织中可以激活磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI-3K)/A k t信号传导通路.L ETM1高表达患者无疾病生存期显著低于LETM1低表达患者(P<0.05).结论:LETM1蛋白在结肠癌中高表达,可能参与结肠癌的发生、发展与复发.LETM1蛋白可以作为预测结肠癌患者预后的新的生物学指标. 展开更多
关键词 亮氨酸拉链EF—hand结构域跨膜蛋白1 结肠癌 蛋白激酶B
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一株寄生茶大灰象甲的棒束孢菌的分子鉴定 被引量:1
15
作者 王定锋 李良德 +3 位作者 李慧玲 张辉 王庆森 吴光远 《茶叶学报》 2019年第2期80-84,共5页
分子标记作为一种快速、有效、精准的鉴定工具,在昆虫病原真菌新种的鉴定中发挥重要的作用。为明确一株分离自茶大灰象甲的棒束孢If410的具体分类归属,我们对该菌株的rDNA-ITS,EF1-α和β-tubulin等3个分子标记基因进行了PCR扩增、测序... 分子标记作为一种快速、有效、精准的鉴定工具,在昆虫病原真菌新种的鉴定中发挥重要的作用。为明确一株分离自茶大灰象甲的棒束孢If410的具体分类归属,我们对该菌株的rDNA-ITS,EF1-α和β-tubulin等3个分子标记基因进行了PCR扩增、测序和系统发育树构建,最终明确了其为玫烟色棒束孢Isariafumosorosea。本研究结果将为今后更好地利用玫烟色棒束孢来防治茶大灰象甲和其它鞘翅目害虫奠定基础。 展开更多
关键词 棒束孢菌 茶大灰象甲 分子鉴定 RDNA-ITS EF1-α Β-TUBULIN
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δEF1与雌激素受体-α和他莫昔芬耐药关系的研究
16
作者 罗萍 杨爽 +4 位作者 杨朝晖 李媛媛 甄江涛 张承玉 赵振营 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期67-72,共6页
乳腺癌是常见的女性恶性肿瘤,抗雌激素耐药是成功治疗的一大障碍,雌激素受体(ER)-α的减少或消失是产生抗药性的首要机制.δ晶体蛋白增强因子1(δ-crystallin enhancer factor1,δEF1)是锌指同源结构域转录因子家族中的一员,在乳腺癌等... 乳腺癌是常见的女性恶性肿瘤,抗雌激素耐药是成功治疗的一大障碍,雌激素受体(ER)-α的减少或消失是产生抗药性的首要机制.δ晶体蛋白增强因子1(δ-crystallin enhancer factor1,δEF1)是锌指同源结构域转录因子家族中的一员,在乳腺癌等诸多肿瘤中均证实有δEF1的异常表达.采用RT-PCR、Western blotting和细胞免疫荧光技术,分析了在δ晶体蛋白增强因子1(δEF1)功能缺失情况下雌激素受体阳性乳腺癌细胞中雌激素受体(ER)-α表达的变化及组蛋白乙酰化对ER-α的影响.同时采用细胞活力实验证实δEF1通过调控ER-α的表达影响乳腺癌细胞对抗雌激素药物他莫西芬(tamoxifen,TAM)的敏感性.结果表明:δEF1被抑制后,乳腺癌细胞中ER-α的表达水平明显升高(p<0.01),细胞对他莫西芬(TAM)的反应增强,存活率降低(p<0.01);而组蛋白乙酰化可以显著恢复细胞中ER-α的表达(p<0.01). 展开更多
关键词 shδEF1 ER-Α 抗雌激素耐药 表观遗传 乳腺癌
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犬源贾第虫EF1α基因的克隆及序列分析
17
作者 李结 王培园 +4 位作者 张萍 刘远佳 郭建超 孟祥龙 李国清 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第1期53-56,共4页
以广州某宠物医院临床犬源贾第虫为研究对象,根据GenBank TM中登录的贾第虫EF1α基因序列(AF069575),设计1对引物EF/ER,采用PCR方法从贾第虫基因组DNA中扩增出目的片段,纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌液PCR鉴定后,对其进... 以广州某宠物医院临床犬源贾第虫为研究对象,根据GenBank TM中登录的贾第虫EF1α基因序列(AF069575),设计1对引物EF/ER,采用PCR方法从贾第虫基因组DNA中扩增出目的片段,纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌液PCR鉴定后,对其进行序列测定及分析,旨在对广州犬源贾第虫进行分子鉴定。结果显示,该犬源贾第虫EF1α序列长为288bp,与预期目的片段一致,该序列构建的分子进化树表明该犬源贾第虫分离株为蓝氏贾第虫D型。说明EF1α适合做分子标记,可准确地对贾第虫进行基因分型,为贾第虫分子分类学及分子遗传学研究奠定了基础。 展开更多
关键词 犬源贾第虫 EF1α基因 克隆 PCR技术 序列分析
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呼吸道合胞病毒性毛细支气管炎患儿血浆内皮素-1及肿瘤坏死因子水平的研究
18
作者 方营旗 李红叶 +1 位作者 李玉琴 彭韶 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期616-616,共1页
关键词 儿童 毛细支气管炎 呼吸道合胞病毒 EF1 TNF
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苹果树腐烂病病原种类及其亲缘关系分析
19
作者 李亚鹏 张王斌 仪子博 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期700-706,共7页
【目的】研究苹果树腐烂病菌的种类及其亲缘关系,为有效防治苹果树腐烂病提供理论依据。【方法】以阿克苏地区不同区域苹果树腐烂病病样为材料,采用常规组织分离法和枝条烫伤接种法分离和鉴定菌株,记录形态学特征和发病情况;利用分子生... 【目的】研究苹果树腐烂病菌的种类及其亲缘关系,为有效防治苹果树腐烂病提供理论依据。【方法】以阿克苏地区不同区域苹果树腐烂病病样为材料,采用常规组织分离法和枝条烫伤接种法分离和鉴定菌株,记录形态学特征和发病情况;利用分子生物学方法获得β-tubulin与EF1-α序列,在NCBI网站对比分析Blast同源性,采用邻接法构建系统发育树分析同源性。【结果】菌丝生长最适温度20~30℃,最适pH值为5~6,最适碳氮源分别是葡萄糖和蛋白胨;共分离出11个菌株,将菌株接种到健康苹果枝条上均可发病且能分离出相同的菌株,各菌株分别与Valsa mali和Valsa ceratosperma具有较近的亲缘关系。【结论】阿克苏地区苹果树腐烂病菌为黑腐皮壳属V.mali(无性型C.mali)和V.ceratosperma(无性型C.sacculus),其中V.mali为阿克苏地区的主要致病种,在PDA上存在不同类型的培养性状。 展开更多
关键词 苹果树 腐烂病菌 Β-TUBULIN EF1-α 培养性状
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硫酸镁对高血压病人血压及血浆内皮素-1水平的影响
20
作者 陈祥鸿 蔡智荣 +1 位作者 郭英华 赵慧元 《青岛医学院学报》 1998年第4期271-272,共2页
目的观察静脉滴注硫酸镁对高血压病人血压和血浆内皮素-1水平的影响。②方法对10例轻、中度高血压病人用随机、双盲、自身安慰剂交叉对照法观察了静脉滴注25%硫酸镁10ml(含Mg2+4.88mmol)前后收缩压、舒张压以... 目的观察静脉滴注硫酸镁对高血压病人血压和血浆内皮素-1水平的影响。②方法对10例轻、中度高血压病人用随机、双盲、自身安慰剂交叉对照法观察了静脉滴注25%硫酸镁10ml(含Mg2+4.88mmol)前后收缩压、舒张压以及血浆内皮素-1水平的变化。③结果静脉滴注硫酸镁组病人收缩压、舒张压、血浆内皮素-1水平均降低,与治疗前和安慰剂治疗组比较,差异均有显著性(t=2.53~5.27,P<0.05,0.01)。④结论硫酸镁降低血浆内皮素-1水平可能是其降低高血压病人血压的作用机理之一。 展开更多
关键词 高血压 药物疗法 硫酸镁 血压 EF1
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