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H9亚型AIV型特异性电化学发光免疫检测方法的建立 被引量：6
1
作者 亓文宝 李芳 +5 位作者 李华楠 黄丽红 和君 穆光慧 罗开健 廖明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第15期3064-3070,共7页
【目的】H9亚型禽流感是重要的人兽共患性传染病,该亚型病毒为H7N9亚型和H10N8亚型流感病毒提供了6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M、NS),并且一直处于动态重组过程中。因此,建立针对H9亚型禽流感的型特异性电化学发光免疫的高通量快速... 【目的】H9亚型禽流感是重要的人兽共患性传染病,该亚型病毒为H7N9亚型和H10N8亚型流感病毒提供了6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M、NS),并且一直处于动态重组过程中。因此,建立针对H9亚型禽流感的型特异性电化学发光免疫的高通量快速检测方法,加强H9亚型流感的监测,具有重要意义。【方法】用钌联吡啶标记H9亚型AIV的单克隆抗体,用MPI-E型电致化学发光分析系统评价钌标单抗标记效率;用生物素标记H9亚型AIV的多克隆抗体,HABA法检测抗体生物素化的效率;待测抗原与钌标单抗作用1 h后,将此抗原-抗体复合物与通过生物素-链霉亲和素系统固定在磁微球表面的多克隆抗体反应,最后加入反应底物三丙胺后即可在电化学分析系统进行发光检测。优化生物素化多抗和钌标单抗最佳工作浓度,确定临界值和反应谱,对所建立的方法进行敏感性、特异性和重复性试验。攻毒后3 d和5 d,采集攻毒组和空白对照组鸡只的88份咽拭子和肛拭子,分别用电化学发光免疫检测方法和鸡胚病毒分离法进行检测和比较。【结果】钌标抗H9亚型AIV单克隆抗体的标记效率为每个单抗Ig G分子上结合21个Ru2+,且间接免疫荧光方法证明其仍具有生物活性;生物素化兔抗H9N2亚型AIV多克隆抗体的标记效率为每个Ig G分子上结合了6个生物素分子,且Western blotting试验证明其仍保持生物活性;该方法的检测临界值为28.3,可疑区间为23.4—33.2;阴性和阳性变异系数均小于10%;检测限为5×104EID50,能够特异性地检测H9亚型AIV,不与其他亚型流感病毒(H1、H3、H4、H5和H6亚型)和其他类型的禽源病毒(NDV、IBV和IBDV)反应。3 h内即可完成检测,与鸡胚病毒分离法的符合率为86.4%。【结论】所建立的H9亚型AIV型特异性电化学发光免疫检测方法可以用于临床样品检测,对H9亚型禽流感的监测和防控具有重要意义。 展开更多
关键词 H9亚型禽流感 电化学发光免疫方法 快速检测
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新鲜血清重复测定差值法在游离甲状腺激素质量控制中的应用
2
作者 魏忠华 何思春 +2 位作者 王利君 焦鑫 周红 《现代检验医学杂志》 CAS 2012年第2期150-151,154,共3页
目的探讨建立一种以病人新鲜血清为质控物的全自动电化学发光免疫分析仪的质控方法。方法以Roche公司生产的Cobase601全自动电化学发光分析仪为实验仪器，以血清Fr3．FT4和TStt作观察指标。每天上午在质控物随标本测定后，选取两份结果... 目的探讨建立一种以病人新鲜血清为质控物的全自动电化学发光免疫分析仪的质控方法。方法以Roche公司生产的Cobase601全自动电化学发光分析仪为实验仪器，以血清Fr3．FT4和TStt作观察指标。每天上午在质控物随标本测定后，选取两份结果合适的新鲜病人标本，第二天重复测定1次（间隔24h），连续检测30天．计算FT3，FT4和TsH前后2次检测结果的差值。观察其最大偏差是否满足〈1／2澳大利亚室问质评标准的要求。结果新鲜血清三项指标30天重复测定结果的平均偏差及最大偏差均〈1／2澳大利亚室间质评标准，能满足临床要求。结论病人新鲜血清标本重复测定差值法经济、方便、可行，可作为FT3，FT4和TSH室内质拉品实际应用中的补充，利于提高检验报告的质量。 展开更多
关键词 电化学发光免疫分析 质量控制 新鲜血清 差值法
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乙肝表面抗原弱阳性标本定性与定量及核酸检测结果分析 被引量：4
3
作者 杨博鑫 梁永明 +3 位作者 刘迪 周剑锁 王天成 崔丽艳 《热带医学杂志》 CAS 2019年第11期1354-1356,1382,共4页
目的评估乙肝表面抗原弱阳性样本半定量结果与定量、核酸(HBV-DNA)检测结果之间的关系,为制定正确的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测策略提供依据。方法收集电化学发光法(ECLIA)半定量检测HBsAg弱阳性样本(COI值1~10)88例和阴性样本(COI值0... 目的评估乙肝表面抗原弱阳性样本半定量结果与定量、核酸(HBV-DNA)检测结果之间的关系,为制定正确的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测策略提供依据。方法收集电化学发光法(ECLIA)半定量检测HBsAg弱阳性样本(COI值1~10)88例和阴性样本(COI值0.8~1.0)21例,采用电化学发光定量法检测样本中HBsAg含量,采用荧光定量PCR方法检测样本中HBV-DNA。同时将收集的阳性标本分为"小三阳"和"携带者"两组,分别统计电化学发光定量法与荧光定量PCR方法在两组中的阳性率。结果"小三阳"组中电化学发光定量法阳性率为82.5%,荧光定量PCR检出率为49.2%;"携带者"组中电化学发光定量法阳性率为20.0%,荧光定量PCR检出率为0.0%;"小三阳"组两种方法的阳性检出率均远高于"携带者"组。定量法诊断阳性率为76.1%(67/88),荧光定量PCR法DNA检出率为40.9%(36/88),两种方法差异有统计学意义(P<0.001)。电化学发光定量法阳性率与荧光定量PCR法DNA片段检出率与电化学发光半定量法COI值成正相关。结论电化学发光定量法与荧光定量PCR法两种方法应用广泛并且均不可被替代,对于监测HBsAg弱阳性(COI=1~10)的患者病情进展具有重要临床意义。 展开更多
关键词 乙型肝炎表面抗原 弱阳性 电化学发光定量法 荧光定量PCR法
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电化学发光免疫法与酶联免疫法在梅毒诊断中的临床价值分析 被引量：1
4
作者 薛玉玮 孙兆娟 《首都食品与医药》 2021年第13期92-93,共2页
目的探讨电化学发光免疫法(ECLIA法)、酶联免疫法(ELISA法)在梅毒诊断筛查中的应用价值.方法回顾性分析2016年2月~2020年9月在本检测中心进行梅毒感染测定的186例受检者,所有受检者均接受ECLIA法、ELISA法及梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA... 目的探讨电化学发光免疫法(ECLIA法)、酶联免疫法(ELISA法)在梅毒诊断筛查中的应用价值.方法回顾性分析2016年2月~2020年9月在本检测中心进行梅毒感染测定的186例受检者,所有受检者均接受ECLIA法、ELISA法及梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)检测,并以TPPA检测结果作为诊断金标准,分析ECLIA法、ELISA法在梅毒筛查诊断中的价值.结果186例受检者中TPPA检测结果显示梅毒阳性为111例,阴性为75例;其中ECLIA法真阳性109例,真阴性65例;灵敏度98.20%(109/111)、特异度86.67%(65/75),准确度93.55%(174/186).ELISA法真阳性105例,真阴性71例;灵敏度94.59%(105/111)、特异度94.67%(71/75),准确度94.62%(176/186).两组患者的灵敏度对比(x^(2)=2.075)、特异度对比(x^(2)=2.836)、准确度对比(x^(2)=0.193),差异无统计学意义(P>0.05).结论ECLIA法、ELISA法在梅毒的诊断筛查中均具有较高的应用价值,两种测定方式灵敏度、特异度、准确度均处于较高水平,其中ECLIA法灵敏度稍高于ELISA法,在筛查时可减少漏诊的发生. 展开更多
关键词 梅毒 生化检测 eclia法 ELISA法 TPPA法
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