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膀胱癌细胞高表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)通过上调CD24抑制NK细胞的杀伤 被引量：1
1
作者 姚田军 周幸春 +2 位作者 杨帆 刘静 张波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期333-341,共9页
目的 探讨膀胱癌细胞过表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)后是否影响自然杀伤(NK)细胞的活化及杀伤并探讨其具体机制。方法 利用慢病毒载体构建E2F3a稳定过表达的人及小鼠膀胱癌细胞株并将其与NK细胞共孵育,乳酸脱氢酶释放实验及流... 目的 探讨膀胱癌细胞过表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)后是否影响自然杀伤(NK)细胞的活化及杀伤并探讨其具体机制。方法 利用慢病毒载体构建E2F3a稳定过表达的人及小鼠膀胱癌细胞株并将其与NK细胞共孵育,乳酸脱氢酶释放实验及流式细胞术检测NK细胞活化及杀伤能力的变化。转录组测序分析膀胱癌细胞E2F3a过表达组与对照组之间的基因表达差异,免疫组织化学染色法检测膀胱癌组织中E2F3a与差异基因在蛋白水平上表达的相关性。进一步利用染色质免疫沉淀(ChIP)、实时定量PCR、 Western blot法及小干扰RNA(siRNA)等方法探索膀胱癌细胞过表达E2F3a后对NK细胞活化及杀伤影响的具体机制。结果 在膀胱癌细胞中过表达E2F3a能显著抑制NK细胞的活化及杀伤。膀胱癌细胞过表达E2F3a可显著上调CD24基因的表达,膀胱癌组织中E2F3a和CD24蛋白的表达呈显著正相关。CHIP结果显示,E2F3a能够结合CD24的启动子区并促进CD24基因的转录。干涉E2F3a过表达膀胱癌细胞中的CD24表达后,发现膀胱癌细胞E2F3a过表达所介导的NK细胞活化及杀伤抑制被显著缓解。结论 在膀胱癌细胞中E2F3a可结合CD24的启动子区促进CD24基因的转录及CD24蛋白的表达。膀胱癌细胞E2F3a通过上调CD24表达来抑制NK细胞的活化及杀伤。 展开更多
关键词 膀胱癌 E2因子转录因子家族成员3a(e2f3a) 自然杀伤(NK)细胞 CD24 免疫抑制
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E2F3a在U251胶质瘤细胞中的功能研究
2
作者 李伟 闫天豪 +2 位作者 艾小杰 张浩然 董启超 《中国神经肿瘤杂志》 2013年第3期151-155,共5页
背景与目的:E2F3a是一种重要的转录激活因子,在多种肿瘤组织中均呈现表达上调。E2F3a在恶性化程度较高的神经胶质瘤中表达较高,目前它在胶质瘤细胞中的功能尚不清楚。本文的目的是研究E2F3a对U251胶质瘤细胞周期和凋亡的影响。方法:通... 背景与目的:E2F3a是一种重要的转录激活因子,在多种肿瘤组织中均呈现表达上调。E2F3a在恶性化程度较高的神经胶质瘤中表达较高,目前它在胶质瘤细胞中的功能尚不清楚。本文的目的是研究E2F3a对U251胶质瘤细胞周期和凋亡的影响。方法:通过脂质体介导质粒转染在U251细胞中过表达E2F3a;用Western blotting检测细胞内E2F3a蛋白质的表达水平;用PI-核DNA染色结合流式细胞术分析细胞周期分布;用Annexin V-PE和7-AAD染色结合流式细胞术分析细胞凋亡比例;用实时荧光定量PCR方法测定细胞内A2、B1、D1和E细胞周期素mRNA的相对表达水平。结果:与空载体转染对照组相比,E2F3a过表达可将位于S期的细胞比例提高28%(P<0.01),将位于G0/G1期和G2/M的细胞比例分别降低15%和13%(P<0.01)。E2F3a过表达对细胞凋亡无明显影响。进一步研究发现,E2F3a可显著上调细胞周期素D1和E的mRNA表达,而不影响周期素A2和B1的mRNA表达。结论:E2F3a是胶质瘤细胞增殖的促进因子,它可通过上调细胞周期素D1和E的表达加速细胞由G1期进入S期。 展开更多
关键词 e2f3a 转录因子 过表达 细胞周期 细胞凋亡
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E2F3a功能域缺失对细胞柔红霉素敏感性的影响
3
作者 刘潇 李志刚 +1 位作者 王凯玲 刘飞飞 《北京医学》 CAS 2022年第1期54-57,63,共5页
目的探讨E2F3a功能域缺失与细胞柔红霉素(daunorubicin)敏感性的关系。方法将E2F3a的野生型及4种缺失突变体分别转入293T细胞,同时转染空载作为阴性对照,4种突变体分别缺失N端、DNA结合域(DNA-binding domain,DBD)、异二聚化域(heterodi... 目的探讨E2F3a功能域缺失与细胞柔红霉素(daunorubicin)敏感性的关系。方法将E2F3a的野生型及4种缺失突变体分别转入293T细胞,同时转染空载作为阴性对照,4种突变体分别缺失N端、DNA结合域(DNA-binding domain,DBD)、异二聚化域(heterodimerization domain,HD)和反式激活域(trans-activation domain,TA)。在E2F3a表达到峰值时,经不同浓度柔红霉素作用36 h,采用MTS[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-car-boxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,inner salt]方法检测细胞存活率和半数抑制浓度(IC_(50))。结果MTS结果显示,过表达E2F3a野生型以及4种缺失突变体的293T细胞在柔红霉素作用后的存活率明显低于转染空载体的细胞,IC_(50)值显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与WT-E2F3a相比,过表达E2F3a-ΔN细胞的存活率明显升高(P=0.012),IC_(50)值也显著增高。相反,过表达E2F3a-ΔTA细胞的存活率明显低于过表达WT-E2F3a(P=0.031),IC_(50)值也显著降低。而过表达突变体E2F3a-ΔDBD、E2F3a-ΔHD的细胞存活率与WT-E2F3a比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论过表达野生型及缺失突变体的E2F3a可提高293T细胞对柔红霉素的敏感性。E2F3a的N端缺失可下调293T细胞对柔红霉素的敏感性,而TA功能域的缺失可上调细胞对柔红霉素的敏感性。 展开更多
关键词 e2f3a 反式激活域 柔红霉素 急性淋巴细胞白血病 化疗敏感性
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联合检测E2F3a和CASP8AP2表达水平在儿童急性淋巴细胞白血病预后中的意义 被引量：4
4
作者 金芬芬 梅妍妍 +4 位作者 王凯玲 王婵娟 吴敏媛 崔蕾 李志刚 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期697-701,共5页
目的探讨联合检测E2F3a和CASP8AP2的表达水平在儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）预后判断中的意义。方法选取2008年3月至2010年7月首都医科大学附属北京儿童医院血液肿瘤中心收治的初诊ALL患儿141例，其中男97例，女44例；确诊时年龄1.2～... 目的探讨联合检测E2F3a和CASP8AP2的表达水平在儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）预后判断中的意义。方法选取2008年3月至2010年7月首都医科大学附属北京儿童医院血液肿瘤中心收治的初诊ALL患儿141例，其中男97例，女44例；确诊时年龄1.2～15.5岁，中位数5.2岁。采用实时荧光定量PCR（qPCR）方法检测141例ALL患儿的E2F3a和CASP8AP2的基因表达水平。利用受试者工作特征（ROC）曲线确定E2F3a和CASP8AP2表达水平的最佳分界点，将患儿分为高表达组和低表达组，比较其预后差异。Cox回归方法分析E2F3a和CASP8AP2的联合表达水平的预后意义。结果E2F3a和CASP8AP2双低表达组儿童ALL的5年无复发生存（RFS）率、无病生存（EFS）率和总生存（OS）率分别为（58.9±10.0）%、（56.0±9.9）%和（72.0±9.0）%，均明显低于双高表达组[（94.9±2.5）%、（93.7±2.7）%和（96.2±2.2）%]，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。E2F3a和CASP8AP2 2个基因均低表达的患儿与其他患儿相比，其预后很差；2个基因均低表达与MLL重排、诱导治疗结束时微小残留病水平是儿童ALL的独立预后因素。结论初诊E2F3a和CASP8AP2低表达的ALL患儿预后差，联合分析E2F3a与CASP8AP2 2个基因的表达水平能更准确地判断预后、预测复发。 展开更多
关键词 e2f3a CASP8AP2 急性淋巴细胞白血病 预后 儿童
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E2F3和AR在前列腺癌组织中的表达及意义 被引量：5
5
作者 胡力仁 吴长利 +1 位作者 胡海龙 梁恩利 《天津医药》 CAS 北大核心 2012年第1期1-3,98,共4页
目的:检测E2F3、AR在前列腺组织中的表达水平,分析两者的表达与前列腺癌病理分级和临床分期的关系。方法:利用免疫组织化学方法检测50例前列腺癌组织、50例良性前列腺增生组织中E2F3、AR蛋白的表达;采用SPSS13.0进行统计学处理。结果:E... 目的:检测E2F3、AR在前列腺组织中的表达水平,分析两者的表达与前列腺癌病理分级和临床分期的关系。方法:利用免疫组织化学方法检测50例前列腺癌组织、50例良性前列腺增生组织中E2F3、AR蛋白的表达;采用SPSS13.0进行统计学处理。结果:E2F3在良性前列腺增生组织、前列腺癌组织中的阳性表达率分别为20.00%(10/50)及66.00%(33/50),差异有统计学意义(P<0.05),且在前列腺癌组织中的表达与肿瘤临床分期和病理恶性程度呈正相关(rs分别为0.471和0.329,P<0.05)。前列腺癌组织中AR表达水平低于良性前列腺增生组织(P<0.05),且在前列腺癌组织中的表达与肿瘤临床分期和病理恶性程度呈负相关(rs分别为-0.403和-0.391,均P<0.01)。E2F3在前列腺癌组织中的表达与AR在前列腺癌组织中的表达无相关关系(rs=-0.017,P>0.05)。结论:E2F3在前列腺癌的发生、发展中起着重要作用。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 癌 前列腺增生 E2F3转录因子 免疫组织化学 病理学 临床 AR
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E2F3基因腺相关病毒干扰载体的构建 被引量：4
6
作者 胡海龙 韩瑞发 +5 位作者 孙岩 刘利维 任海林 梁恩利 王春阳 吴长利 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期1117-1119,共3页
目的:构建针对E2F3基因的腺相关病毒干扰穿梭质粒载体,为进一步包装能够表达干扰序列的病毒奠定基础。方法:通过已经合成的pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo干扰质粒载体,进行限制性内切酶Mlu酶切,将干扰片段克隆入线性质粒pAAV-MCS中,构建具有表... 目的:构建针对E2F3基因的腺相关病毒干扰穿梭质粒载体,为进一步包装能够表达干扰序列的病毒奠定基础。方法:通过已经合成的pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo干扰质粒载体,进行限制性内切酶Mlu酶切,将干扰片段克隆入线性质粒pAAV-MCS中,构建具有表达沉默E2F3基因的RNA干扰穿梭质粒。通过Bgl Ⅱ及Mlu单酶切,BamH1和HandⅢ双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建是否成功。结果:pAAV-siE2F3线性化后,片段大小约6 300bp;以Mlu为两边酶切位点设计的引物对重组质粒进行PCR,可获得的产物大小1 700bp;应用ITR专用引物进行重组质粒的PCR后证实本研究所构建的重组质粒ITR片段存在,大小约3 500bp,上述指标均与预期设计结果相符。基因测序结果表明插入序列无基因突变,序列完整。结论:穿梭质粒载体的成功构建,为进一步包装能够表达针对E2F3基因干扰序列的腺相关病毒,进一步研究E2F3基因在肿瘤中的功能奠定基础。 展开更多
关键词 AAV系统 RNAI E2F3
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浸润性膀胱癌组织中E2F3表达与CD8^+ T细胞浸润数量的相关性分析 被引量：4
7
作者 王程远 许志斌 +3 位作者 李伟 焦勇 王江平 张波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-8,共8页
目的探讨膀胱癌组织中E2F转录因子3(E2F3)表达与CD8^+T细胞浸润的特点及其与膀胱癌恶性生物学行为之间的相关性。方法采用免疫组织化学染色法检测110例不同病理分期、分级的膀胱癌组织和相应正常膀胱组织中E2F3的表达情况及CD8^+T细胞... 目的探讨膀胱癌组织中E2F转录因子3(E2F3)表达与CD8^+T细胞浸润的特点及其与膀胱癌恶性生物学行为之间的相关性。方法采用免疫组织化学染色法检测110例不同病理分期、分级的膀胱癌组织和相应正常膀胱组织中E2F3的表达情况及CD8^+T细胞浸润特征,Western blot法检测82例膀胱癌组织及相应正常膀胱组织中E2F3、CD8蛋白水平,直线相关分析方法分析E2F3表达与CD8^+T细胞浸润的相关性。结果膀胱癌组织中E2F3高表达,膀胱癌组织中E2F3表达随肿瘤分期、分级增加逐步增高,而相应肿瘤内CD8^+T细胞浸润数目逐步减少,E2F3高表达组肿瘤内CD8^+T细胞浸润数目显著低于E2F3低表达组。E2F3阳性率及CD8^+T细胞的浸润数量减少与肿瘤病理分期、分级、肿瘤大小、伴有淋巴结转移或远处转移等肿瘤临床侵袭性指标密切相关。相关性分析显示肿瘤E2F3表达水平与肿瘤内CD8^+T细胞浸润数目呈负相关。生存分析表明E2F3高表达患者术后5年预后更差。结论膀胱癌组织中E2F3水平与肿瘤侵袭性关系密切,与肿瘤内CD8^+T细胞浸润数量呈负相关。 展开更多
关键词 浸润性膀胱癌 E2F转录因子3(E2F3) CD8+T淋巴细胞 肿瘤逃逸
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siRNA沉默E2F3基因对人膀胱癌细胞的增殖抑制作用 被引量：2
8
作者 洪泉 张文岚 +3 位作者 赵军 傅耀文 胡海龙 韩瑞发 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期523-526,608,F0003,共6页
目的:探讨siRNA干扰E2F3基因对膀胱癌细胞(5637细胞)增殖的抑制作用,阐明E2F3基因沉默对5637细胞增殖抑制作用的生物学机制。方法:化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F3基因的寡核苷酸链,经BamHⅠ、HindⅢ双酶切克隆至pRNAT-U6.1/... 目的:探讨siRNA干扰E2F3基因对膀胱癌细胞(5637细胞)增殖的抑制作用,阐明E2F3基因沉默对5637细胞增殖抑制作用的生物学机制。方法:化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F3基因的寡核苷酸链,经BamHⅠ、HindⅢ双酶切克隆至pRNAT-U6.1/Neo系统,重组构建E2F3siRNA的RNAi质粒,以质粒转染DH5α菌株筛选得到稳定表达siRNA的细胞,转染5637细胞E2F3基因沉默,RT-PCR及Western blotting检测E2F3表达,流式细胞术检测5637细胞周期,采用Annexin-V/PS双染法检测细胞凋亡率。结果:RT-PCR及Western blotting检测干扰后5637细胞E2F3基因表达抑制,3条干扰序列对5637细胞周期抑制且G1期细胞比例增高,与阴性转染对照组比较差异有显著性(P<0.05和P<0.001);细胞凋亡率增加,与空白对照组及阴性转染对照组比较差异有显著性(P<0.001)。结论:siRNA干扰E2F3基因对膀胱癌5637细胞具有明显增殖抑制和促进凋亡的作用。 展开更多
关键词 RNA干扰 小分子干扰 E2F3 膀胱肿瘤 细胞增殖抑制
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膀胱移行细胞癌E2F3、miR-17-5p、miR-20a的表达及相关性分析 被引量：3
9
作者 任海林 孙岩 +1 位作者 李世斌 韩瑞发 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第20期23-25,共3页
目的检测E2F3、miR-17-5p、miR-20a在膀胱癌中的表达情况,分析E2F3与miR-17-5p、miR-20a之间是否存在关联性。方法荧光定量RT-PCR法检测不同病理分级膀胱移行细胞癌组织和细胞系5637、T24中miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的表达,Western ... 目的检测E2F3、miR-17-5p、miR-20a在膀胱癌中的表达情况,分析E2F3与miR-17-5p、miR-20a之间是否存在关联性。方法荧光定量RT-PCR法检测不同病理分级膀胱移行细胞癌组织和细胞系5637、T24中miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的表达,Western blot检测E2F3蛋白的表达。结果与正常膀胱黏膜比较,膀胱移行细胞癌组织及5637、T24细胞系中E2F3、miR-17-5p和miR-20a均高表达(P<0.05)。E2F3表达随着病理分级的升高逐步增多,miR-20a表达随病理分级的升高有降低趋势。5637细胞系相对T24细胞系高表达E2F3(P<0.05)。结论膀胱移行细胞癌中miR-17-5p、miR-20a和E2F3均高表达,miR-20a和miR-17-5p的表达与E2F3的增高密切相关。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 E2F3 miR-17-5p miR-20a
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miR-503-5p通过靶向调控E2F3对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质化的影响 被引量：5
10
作者 冉伟 曾玉华 +2 位作者 马晓洁 廖萍 刘兴兰 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期178-184,共7页
目的探讨miR-503-5p通过靶向调控E2F3对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质化的影响。方法将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、mimic-NC组、miR-503-5p mimic组、E2F3组、mimic+E2F3组,并通过Lipofectamine2000将质粒分别或者联合转染... 目的探讨miR-503-5p通过靶向调控E2F3对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质化的影响。方法将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、mimic-NC组、miR-503-5p mimic组、E2F3组、mimic+E2F3组,并通过Lipofectamine2000将质粒分别或者联合转染进入各组HeLa细胞,运用基因预测软件预测靶基因,荧光素实验验证靶向关系,RT-PCR检测miR-503-5p和E2F3的表达,MTT法检测细胞增殖,Western blot检测Ki67、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、E-cadherin和N-cadherin的表达,Transwell检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移。将裸鼠分为对照组和miR-503-5p mimic组,在裸鼠右后肢腹侧皮下分别注射0.2 mL转染mimic-NC或miR-503-5p mimic的宫颈癌HeLa细胞悬液,第30天颈椎脱位法处死裸鼠,测量肿瘤质量,并用免疫组化方法检测肿瘤组织中Ki67和Vimentin表达情况。结果宫颈癌HeLa细胞中miR-503-5p的表达量明显下调,miR-503-5p与E2F3在3′UTR区存在结合位点,miR-503-5p直接靶向作用于E2F3,过表达miR-503-5p抑制E2F3表达;miR-503-5p过表达降低细胞生长速度、Ki67和PCNA表达量,减少侵袭细胞数目,增宽划痕、降低愈合率,上调E-cadherin表达、下调N-cadherin表达(P<0.01);miR-503-5p过表达减小移植瘤体积、减轻移植瘤重量,减少Ki67和Vimentin的阳性所占比率(P<0.01)。结论 miR-503-5p通过靶向调控E2F3抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质化。 展开更多
关键词 miR-503-5p E2F3 宫颈癌HELA细胞
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HMGB1通过上调E2F3促进卵巢癌细胞增殖和侵袭能力 被引量：3
11
作者 梁婉琪 赵宗霞 +1 位作者 李芬霞 常丽花 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第4期654-660,共7页
目的:探讨高迁移率族蛋白B1(High-mobility Group Box 1 protein,HMGB1)是否通过激活E2F转录调节因子3(E2F transcription factor 3,E2F3)促进卵巢癌细胞的增殖和侵袭作用。方法:选取本院2017年10月-2018年7月收治的38例卵巢癌患者。qRT... 目的:探讨高迁移率族蛋白B1(High-mobility Group Box 1 protein,HMGB1)是否通过激活E2F转录调节因子3(E2F transcription factor 3,E2F3)促进卵巢癌细胞的增殖和侵袭作用。方法:选取本院2017年10月-2018年7月收治的38例卵巢癌患者。qRT-PCR、Western blot和免疫组化分别检测患者肿瘤组织和癌旁组织中HMGB1的表达;qRT-PCR和Western blot检测HMGB1在卵巢癌细胞系A2780、HO8910、ES-2和SKOV3中的表达;RNA沉默技术敲除HMGB1在SKOV3中的表达,同时CCK-8和Trans-well观察SKOV3细胞增殖和侵袭能力变化;RNA转录组测序(RNA transcriptome sequencing,RNA-seq)检测敲除HMGB1前后SKOV3细胞中mRNA的变化;qRT-PCR和Western blot检测验证RNA-seq结果;RNA沉默技术敲除E2F3在SKOV3细胞中的表达,同时CCK-8和Trans-well观察SKOV3细胞增殖和侵袭能力变化。结果:卵巢癌肿瘤组织中HMGB1表达显著高于癌旁组织(P<0.05);HMGB1在四种卵巢癌细胞系中的SKOV3细胞中表达最高(P<0.05);si-RNA基因沉默后,HMGB1在SKOV3细胞中几乎无表达,CCK-8和Trans-well实验表明HMGB1 si-RNA沉默后其增殖和侵袭能力显著被抑制(P<0.05);RNA-seq检测结果表明,HMGB1 si-RNA沉默后E2F3、叉状头转录因子3(Forkhead box protein P3,FOXP3)和趋化因子5(chemokine 5,CXCL5)下调倍数最明显其中E2F3下调倍数最高,同时在细胞系中验证结果显示同样结果(P<0.05);si-RNA基因沉默E2F3后,E2F3在SKOV3细胞中几乎无表达,CCK-8和Trans-well实验表明E2F3 si-RNA沉默后其增殖和侵袭能力显著被抑制(P<0.05)。结论:HMGB1可能通过上调E2F3的表达增加促进卵巢癌SKOV3细胞增殖和转移。 展开更多
关键词 HMGB1 E2F3 卵巢癌 增殖 侵袭
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MicroRNA-152在胃癌细胞中表达及对细胞增殖的影响 被引量：3
12
作者 王春明 左君波 +1 位作者 居峰 姚立新 《海南医学》 CAS 2013年第7期943-946,共4页
目的探讨microRNA-152(miR-152)在胃癌细胞中的表达情况以及对胃癌细胞增殖的影响及其可能的机制。方法采用实时荧光定量PCR(real-timePCR)方法检测胃癌细胞系MGC-803、SGC-7901、BGC-823和胃上皮细胞GES-1(作为对照)中miR-152的表达情... 目的探讨microRNA-152(miR-152)在胃癌细胞中的表达情况以及对胃癌细胞增殖的影响及其可能的机制。方法采用实时荧光定量PCR(real-timePCR)方法检测胃癌细胞系MGC-803、SGC-7901、BGC-823和胃上皮细胞GES-1(作为对照)中miR-152的表达情况。采用脂质体法,转染miR-152模拟物(miR-152mimics)构建miR-152过表达体系,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测miR-152对MGC-803胃癌细胞系增殖能力的影响,Westernblot检测转染miR-152mimics后E2F3蛋白的表达情况。结果 MGC-803、SGC-7901、BGC-823胃癌细胞系中miR-152的相对表达量分别为(0.05±0.01)、(0.19±0.03)、(0.48±0.09),表明在胃癌细胞中miR-152的表达明显下调(P<0.05)。MTT法检测结果显示,转染miR-152mimics后可明显抑制MGC-803胃癌细胞的增殖(P<0.05)。Westernblot结果表明,转染miR-152后,E2F3蛋白水平显著下降。结论 miR-152在胃癌细胞中明显低表达,并可能通过下调癌基因E2F3的表达,抑制肿瘤细胞的增殖,从而发挥抑癌基因的功能。 展开更多
关键词 MiR-152 胃癌 E2F3 细胞增殖
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尿脱落细胞E2F3 mRNA检测在膀胱癌诊断中的价值 被引量：2
13
作者 李家兵 李锦秀 +1 位作者 姚惠 张盼 《川北医学院学报》 CAS 2009年第2期132-134,共3页
目的探讨检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中E2F3 mRNA的表达及意义。方法采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测58例膀胱癌患者,15例泌尿外科非肿瘤患者以及10例健康志愿者尿液脱落细胞E2F3mRNA的表达,并与尿脱落细胞学检查相对照。结果用... 目的探讨检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中E2F3 mRNA的表达及意义。方法采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测58例膀胱癌患者,15例泌尿外科非肿瘤患者以及10例健康志愿者尿液脱落细胞E2F3mRNA的表达,并与尿脱落细胞学检查相对照。结果用RT-PCR法检测尿脱落细胞E2F3 mRNA用于诊断膀胱癌的敏感性为81.03%,高于尿脱落细胞学检测(41.38%)(χ2=19.206,p<0.05),两种方法诊断膀胱癌的特异性无统计学差异(p>0.05)。不同分化程度及不同临床分期膀胱癌患者之间尿脱落细胞E2F3 mRNA的阳性表达率的差异无统计学意义(χ2=0.517,p>0.05;χ2=0.132,p<0.988)。结论RT-PCR法检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中E2F3 mRNA的方法可以作为诊断膀胱癌的无创性方法。 展开更多
关键词 膀胱癌 E2F3 逆转录聚合酶链反应 脱落细胞
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miR-3691-3p靶向调控E2F3/PRDM1对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：4
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作者 孙莉 牛涵波 +1 位作者 徐义英 孙茂民 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2018年第1期22-27,共6页
目的:探讨微小RNA-3691-3p(miR-3691-3p)调控的靶基因E2F3(E2F transcription factor 3)和PR结构域蛋白1(PR domain containing 1,PRDM1)对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:在前列腺癌DU145细胞株中,转染不同浓度梯度的miR-36... 目的:探讨微小RNA-3691-3p(miR-3691-3p)调控的靶基因E2F3(E2F transcription factor 3)和PR结构域蛋白1(PR domain containing 1,PRDM1)对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:在前列腺癌DU145细胞株中,转染不同浓度梯度的miR-3691-3p mimic后,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测候选靶基因E2F3和PRDM1 mRNA和蛋白表达的变化;人工合成候选靶基因的小干扰RNA(E2F3 siRNA和PRDM1 siRNA)转染入DU145细胞中,采用实时荧光定量PCR检测siRNA在细胞中的转染率;DU145细胞株分别转染阴性对照siRNA、E2F3 siRNA和PRDM1 siRNA后,采用MTT、Transwell、划痕实验检测DU145细胞株增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果:随着miR-3691-3p mimic转染浓度增高,在DU145细胞株中E2F3和PRDM1 mRNA的表达量逐渐下降(P<0.01或P<0.05),两个蛋白的表达水平均明显降低(P<0.01)。与阴性对照组相比,转染E2F3 siRNA和PRDM1 siRNA的DU145细胞株中,E2F3和PRDM1在mRNA水平上表达量显著减少(E2F3:t=31,P<0.01;PRDM1:t=10.44,P<0.01)。且转染E2F3 siRNA的DU145细胞增殖、迁移和侵袭能力显著下降(均P<0.01);而转染PRDM1 siRNA的DU145细胞增殖和侵袭能力显著下降(均P<0.01),迁移能力没有明显变化(P>0.05)。结论:在DU145细胞中,低水平的miR-3691-3p通过靶向调控E2F3和PRDM1的增高来增强细胞的生物学特性。 展开更多
关键词 前列腺癌 DU145细胞株 miR-3691-3p E2F3 PRDM1 生物学特性
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Linc01419调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖与侵袭 被引量：2
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作者 向威 吕磊 +2 位作者 郑福鑫 袁敬东 吴维 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第16期2921-2929,共9页
目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(rea... 目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Linc01419在不同膀胱癌细胞系、22例经病理证实为膀胱癌的手术患者的肿瘤组织及癌旁正常膀胱组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验和Transwell小室侵袭实验检测敲低Linc01419表达对膀胱癌细胞增殖与侵袭的影响;采用双荧光素酶报告基因检测法分析Linc01419与miR-34a-5p及miR-34a-5p与E2F3之间的靶向调控关系。结果:UALCAN数据库分析显示相较正常膀胱组织,Linc01419在膀胱癌组织中显著高表达(P<0.001);RT-qPCR分析结果显示相较癌旁正常膀胱组织,Linc01419在22例膀胱癌组织中表达明显上调(P<0.001),与UALCAN数据库分析结果一致;Linc01419在4株膀胱癌细胞中的表达明显高于正常膀胱上皮细胞(P<0.01);敲低Linc01419表达,可显著抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭及N-cadherin、PCNA蛋白的表达,而显著促进E-cadherin的蛋白表达(P<0.05);miR-34a-5p过表达对膀胱癌细胞具有类似的抑制作用;双荧光素酶报告基因实验、RIP及Pull-down实验证实Linc01419可靶向结合miR-34a-5p,而后者进一步介导了对E2F3的靶向调控;抑制miR-34a-5p表达,可显著削弱Linc01419沉默对膀胱癌细胞生物学行为及E-cadherin、N-cadherin、PCNA、E2F3表达的影响。结论:Linc01419在膀胱癌中异常高表达,其通过调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖和侵袭,很可能是膀胱癌发生、发展过程中的一个重要环节。 展开更多
关键词 膀胱癌 Linc01419 miR-34a-5p E2F3
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miR-449a对食管鳞癌细胞Eca-109增殖、迁移、侵袭的影响及机制 被引量：1
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作者 王强强 王梦洁 +3 位作者 张玉虹 李皓 高飞 刘阳晨 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第16期24-27,共4页
目的探讨miR-449a对食管鳞癌细胞Eca-109增殖、迁移、侵袭的影响及其可能的机制。方法将食管鳞癌细胞Eca-109分为miR-449a组和NC组,分别转染miR-449a-mimics和NC-mimics;采用实时荧光定量PCR法检测两组miR-449a相对表达量,miR-449a组miR... 目的探讨miR-449a对食管鳞癌细胞Eca-109增殖、迁移、侵袭的影响及其可能的机制。方法将食管鳞癌细胞Eca-109分为miR-449a组和NC组,分别转染miR-449a-mimics和NC-mimics;采用实时荧光定量PCR法检测两组miR-449a相对表达量,miR-449a组miR-449a相对表达量明显高于NC组,证实上调miR-449a表达的Eca-109细胞模型建立成功。采用CCK-8法、平板克隆形成试验检测两组细胞增殖能力(分别以培养12、24、48 h吸光度值和克隆数表示),细胞划痕试验检测细胞迁移能力(以细胞之间的距离表示),Transwell小室试验检测细胞侵袭能力(以侵袭到下室的细胞数量表示),流式细胞仪检测细胞周期比例。采用实时荧光定量PCR法和Western blotting法分别检测两组miR-449a直接靶基因E2F3 mRNA及蛋白相对表达量。结果 miR-449a组细胞培养12、24、48 h时的吸光度值及克隆数、细胞之间的距离、侵袭到下室的细胞数量均低于NC组(P<0.05或<0.01)。miR-449a组G1期细胞比例高于NC组,S期细胞比例低于NC组(P均<0.05);两组G2/M期细胞比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-449a组E2F3 mRNA及蛋白相对表达量均低于NC组(P均<0.01)。结论 miR-449a可抑制食管鳞癌细胞Eca-109的增殖、迁移和侵袭;抑制靶基因E2F3表达可能是其作用机制。 展开更多
关键词 食管鳞癌 微小RNA-449a E2F3基因 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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miR-449b通过E2F3-p53途径抑制子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B的生长 被引量：2
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作者 陈慧君 黄亦波 +1 位作者 林蓉蓉 郑飞云 《医学研究杂志》 2015年第8期41-45,共5页
目的探讨miR-449b对子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B增殖和凋亡的影响及其作用的分子途径。方法脂质体lipofectamine 2000包被miR-449b并转染入HEC-1-B细胞,实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miR-449b的表达水平,CCK-8试验检测转染前后细胞活... 目的探讨miR-449b对子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B增殖和凋亡的影响及其作用的分子途径。方法脂质体lipofectamine 2000包被miR-449b并转染入HEC-1-B细胞,实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miR-449b的表达水平,CCK-8试验检测转染前后细胞活性,流式细胞仪来检测转染前后细胞凋亡情况。细胞克隆形成实验观察转染前后细胞克隆形成能力。Western blot方法检查转染前后细胞内E2F3蛋白和p53的表达情况。结果转染后实验组miR-449b表达量较NC组增加,细胞增殖能力和克隆能力减弱,而细胞凋亡增加(P<0.05)。miR-449b使E2F3表达下调,p53表达上调(P<0.05)。结论 miR-449b通过E2F3-p53途径抑制HEC-1-B细胞增殖并促进凋亡,可能作为治疗子宫内膜腺癌的新分子靶标。 展开更多
关键词 miR-449b HEC-1-B细胞 增殖 凋亡 E2F3 P53
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E2F3及C-myc在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其相关性研究 被引量：1
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作者 胡海龙 韩瑞发 +5 位作者 孙岩 刘利维 任海林 梁恩利 王春阳 吴长利 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第19期1094-1096,1101,共4页
目的:探讨E2F3及C-myc在膀胱癌组织中表达的相互关系及其与膀胱癌恶性生物学行为之间的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测不同病理分期及组织分级的BTCC标本和正常膀胱黏膜中E2F3及C-myc蛋白的表达情况,应用免疫组化自动分析系统进... 目的:探讨E2F3及C-myc在膀胱癌组织中表达的相互关系及其与膀胱癌恶性生物学行为之间的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测不同病理分期及组织分级的BTCC标本和正常膀胱黏膜中E2F3及C-myc蛋白的表达情况,应用免疫组化自动分析系统进行分析,结果以积分光密度表示。结果:膀胱移行细胞癌组织中E2F3及C-myc蛋白的表达阳性率明显高于正常膀胱黏膜,两组间有显著性差异(P<0.05),同时E2F3的表达率与膀胱癌的分级和分期密切相关(P<0.05;P<0.01);C-mvc的表达率与膀胱癌的分级和分期密切相关(P<0.01;P<0.01)。膀胱移行细胞癌中E2F3与C-myc的表达呈正相关。结论:E2F3及C-myc与膀胱癌的恶性程度密切相关,同时二者之间的表达密切相关,二者不仅可以作为膀胱癌的诊断与预后指标,而且为以E2F3为靶点的膀胱癌的基因治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 E2F3 C-MYC 膀胱移行细胞癌
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E2F3在前列腺癌中的表达及意义 被引量：2
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作者 李锦秀 李家兵 +1 位作者 张盼 姚惠 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2009年第4期286-288,共3页
目的探讨E2F3在前列腺癌中的表达及临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化技术检测26例前列腺癌、20例良性前列腺增生和10例正常前列腺组织中E2F3mRNA及蛋白的表达。结果E2F3mRNA及蛋白的表达与临床分期有关,晚期(C+D... 目的探讨E2F3在前列腺癌中的表达及临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化技术检测26例前列腺癌、20例良性前列腺增生和10例正常前列腺组织中E2F3mRNA及蛋白的表达。结果E2F3mRNA及蛋白的表达与临床分期有关,晚期(C+D期)E2F3mRNA及蛋白的表达水平明显高于早期(A+B期,P<0.05),低分化癌E2F3mRNA及蛋白的表达明显高于高中分化癌(P<0.05)。前列腺癌中E2F3表达水平明显高于良性前列腺增生(P<0.05)及正常前列腺组织(P<0.05)。结论E2F3表达可能与前列腺癌的恶性程度有关,E2F3在前列腺癌的发生发展中起到促进作用。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 E2F3 RT—PCR 免疫组织化学
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