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沉默LncRNA DLGAP1-AS2对人视网膜母细胞瘤增殖和迁移及侵袭的影响 被引量:3
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作者 李晖 汪明红 +1 位作者 廖风玲 刘国立 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2022年第6期904-910,共7页
目的:探讨沉默LncRNA DLGAP1-AS2对人视网膜母细胞瘤HXO-Rb44增殖、迁移和侵袭的影响及其可能作用机制。方法:收集病理确诊且临床资料完整的视网膜母细胞瘤组织标本25例,同时选取因外伤摘除眼球的正常视网膜组织9例为对照;qRT-PCR法检... 目的:探讨沉默LncRNA DLGAP1-AS2对人视网膜母细胞瘤HXO-Rb44增殖、迁移和侵袭的影响及其可能作用机制。方法:收集病理确诊且临床资料完整的视网膜母细胞瘤组织标本25例,同时选取因外伤摘除眼球的正常视网膜组织9例为对照;qRT-PCR法检测正常视网膜组织、视网膜母细胞瘤组织、人正常视网膜血管内皮细胞ACBRI-181、视网膜母细胞瘤细胞HXO-Rb44中DLGAP1-AS2、miR-1193的表达量;将si-NC、si-DLGAP1-AS2、miR-NC、miR-1193 mimic、si-DLGAP1-AS2与miR-1193 inhibitor(共转染)分别转染至HXO-Rb44细胞;双荧光素酶报告实验检测DLGAP1-AS2与miR-1193的靶向关系;CCK-8法、平板克隆形成实验与Transwell实验分别检测细胞增殖、集落形成数、迁移及侵袭;Western blot法检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量。结果:视网膜母细胞瘤组织中DLGAP1-AS2的表达量高于正常视网膜组织(P<0.05),而miR-1193的表达量低于正常视网膜组织(P<0.05);HXO-Rb44细胞中DLGAP1-AS2的表达量高于ACBRI-181细胞(P<0.05),miR-1193的表达量低于ACBRI-181细胞(P<0.05);DLGAP1-AS2可靶向调控miR-1193的表达;转染si-DLGAP1-AS2或转染miR-1193 mimic可抑制HXO-Rb44细胞增殖、迁移及侵袭;共转染si-DLGAP1-AS2与miR-1193 inhibitor可降低转染si-DLGAP1-AS2对HXO-Rb44细胞增殖、迁移及侵袭的作用。结论:沉默DLGAP1-AS2可通过靶向调控miR-1193表达而抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 人视网膜母细胞瘤 LncRNA dlgap1-as2 miR-1193 细胞增殖 迁移 侵袭
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lncRNA DLGAP1-AS2靶向miR-1193调控非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的机制研究 被引量:3
2
作者 曹淑琴 朱朝勇 +3 位作者 陈维英 祁永花 张晓媛 徐建国(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第19期2366-2370,共5页
目的:探讨lncRNA DLGAP1-AS2对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法:选取49例肺癌患者的癌组织及癌旁组织,RT-qPCR检测DLGAP1-AS2和miR-1193的表达水平;将A549细胞分为si-DLGAP1-AS2组、si-NC组、miR-1193组、... 目的:探讨lncRNA DLGAP1-AS2对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法:选取49例肺癌患者的癌组织及癌旁组织,RT-qPCR检测DLGAP1-AS2和miR-1193的表达水平;将A549细胞分为si-DLGAP1-AS2组、si-NC组、miR-1193组、miR-NC组、si-DLGAP1-AS2+anti-miR-1193组、si-DLGAP1-AS2+anti-miR-NC组;MTT法、克隆形成实验及流式细胞术分别检测细胞活性、克隆形成数及细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测DLGAP1-AS2和miR-1193的靶向关系。结果:NSCLC组织中DLGAP1-AS2表达水平高于癌旁组织,miR-1193表达水平低于癌旁组织(P<0.05)。抑制DLGAP1-AS2表达或过表达miR-1193,A549细胞的活性降低,克隆形成数减少,A549细胞凋亡率升高(P<0.05)。DLGAP1-AS2靶向调控miR-1193;干扰miR-1193表达可减弱抑制DLGAP1-AS2表达对NSCLC A549细胞增殖和凋亡的作用。结论:抑制lncRNA DLGAP1-AS2表达可能通过靶向上调miR-1193抑制NSCLC A549细胞增殖,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 lncRNA dlgap1-as2 miR-1193 非小细胞肺癌 增殖 凋亡
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长链非编码RNA DLGAP1-AS2在胃癌中的表达及其作用机制 被引量:2
3
作者 陆佳伟 唐银炳 +5 位作者 张伟亚 张守亮 祁卫东 马圭 张文波 蒋鹏程 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期153-162,共10页
目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)DLGAP1-AS2在胃癌中的表达及其临床意义。方法:从美国癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载胃腺癌相关数据集,分析肿瘤组织与正常组织中DLGAP1-AS2的表达差异。... 目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)DLGAP1-AS2在胃癌中的表达及其临床意义。方法:从美国癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载胃腺癌相关数据集,分析肿瘤组织与正常组织中DLGAP1-AS2的表达差异。采用实时荧光定量PCR法测定85例胃癌组织及其相应癌旁组织,以及25例胃癌患者和25例健康者血浆中DLGAP1-AS2的表达水平,分析胃癌组织中DLGAP1-AS2表达水平与胃癌患者临床病理特征的相关性。通过转染小干扰RNA的方法敲减胃癌AGS细胞中DLGAP1-AS2的表达后,分别采用活细胞计数法、克隆形成实验及Transwell小室法检测下调DLGAP1-AS2对胃癌AGS细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并采用蛋白质印迹法检测胃癌AGS细胞中上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关基因表达水平的变化。结果:TCGA数据库分析发现,DLGAP1-AS2在胃癌组织中的表达水平明显高于正常胃组织(P<0.001)。实时荧光定量PCR检测证实DLGAP1-AS2在胃癌组织中表达水平明显增高(P<0.05),并与肿瘤TNM分期、淋巴结转移和患者总生存率明显相关(P值均<0.05);而且DLGAP1-AS2在胃癌患者血浆中表达水平也明显增高(P<0.05)。敲减DLGAP1-AS2可抑制胃癌AGS细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭(P值均<0.05),并且明显下调基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)、Slug、N钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)和Twist蛋白的表达水平(P值均<0.05)。结论:DLGAP1-AS2在胃癌患者癌组织及血浆中表达水平均明显增高。敲减DLGAP1-AS2能抑制胃癌细胞增殖、迁移及侵袭,其作用机制可能与调控EMT相关分子表达有关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 RNA 长链非编码 上皮-间质转化 dlgap1-as2
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FOXD2-AS1通过EZH2调控LATS1表达影响肾癌细胞的增殖与迁移
4
作者 向威 吕磊 +1 位作者 郑福鑫 袁敬东 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第2期161-168,共8页
目的:探索lncRNA FOXD2-AS1通过EZH2调控LATS1表达影响肾透明细胞癌(ccRCC)细胞增殖与迁移的作用机理。方法:采用GEPIA 2软件在线分析TCGA数据库中FOXD2-AS1在ccRCC组织中的表达水平,评估其与患者总体生存率之间的关系。用qPCR法检测肾... 目的:探索lncRNA FOXD2-AS1通过EZH2调控LATS1表达影响肾透明细胞癌(ccRCC)细胞增殖与迁移的作用机理。方法:采用GEPIA 2软件在线分析TCGA数据库中FOXD2-AS1在ccRCC组织中的表达水平,评估其与患者总体生存率之间的关系。用qPCR法检测肾癌细胞及临床收集的26例ccRCC组织中FOXD2-AS1表达水平,用CCK-8法和Transwell小室实验观察敲减FOXD2-AS1表达对肾癌细胞增殖与迁移的影响;用qPCR与WB法检测敲减FOXD2-AS1表达对肾癌细胞LATS1 mRNA与蛋白表达的影响。用RNA免疫沉淀(RIP)和染色质免疫沉淀(ChIP)法分析FOXD2-AS1与EZH2及LATS1之间的作用。结果:GEPIA 2软件分析结果显示,FOXD2-AS1在ccRCC组织中呈明显高表达(P<0.01),FOXD2-AS1高表达患者的总体生存率较低(P<0.05)。qPCR法检测结果显示,相较癌旁组织,FOXD2-AS1在26例ccRCC组织中呈显著高表达(P<0.01)。相较永生化肾小管上皮细胞HK-2,FOXD2-AS1在肾癌786-O、ACHN及SN12-PM6细胞中均显著高表达(均P<0.01)。敲减FOXD2-AS1表达,均可显著降低肾癌细胞的增殖与迁移能力(均P<0.05),并明显上调LATS1的mRNA与蛋白表达水平(均P<0.01)。RIP与ChIP实验证实,FOXD2-AS1可结合并招募EZH2至LATS1启动子区域而发挥作用。挽救实验显示,敲减LATS1或过表达EZH2可部分逆转敲减FOXD2-AS1对肾癌细胞增殖与迁移的抑制作用。结论:FOXD2-AS1在ccRCC中高表达,其通过募集EZH2至LATS1基因启动子区域而负性调控LATS1的表达,进而促进肾癌细胞的增殖与迁移。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 FOXD2-as1 EZH2 LATS1
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INKA2-AS1促进肝细胞癌迁移、侵袭和巨噬细胞相关免疫抑制机制研究
5
作者 何秀堂 胡鹏 刘茂年 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第17期2039-2052,共14页
目的探究INKA2-AS1促进肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)迁移、侵袭和巨噬细胞相关免疫抑制的机制。方法对癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas Program,TCGA)-HCC数据和健康组织基因表达数据(Genotype-Tissue Expression,GT... 目的探究INKA2-AS1促进肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)迁移、侵袭和巨噬细胞相关免疫抑制的机制。方法对癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas Program,TCGA)-HCC数据和健康组织基因表达数据(Genotype-Tissue Expression,GTEx)数据库中374例HCC组织和160例正常肝组织中的基因表达水平进行差异分析。通过生存分析研究INKA2-AS1与HCC患者预后的关系,并对INKA2-AS1进行Cox回归分析。通过肿瘤免疫估计资源数据库分析INKA2-AS1与HCC组织免疫浸润的关系。于2019年1月至2021年1月收集在重庆海吉亚医院肝胆外科接受治疗的90例HCC患者的HCC组织和癌旁正常组织。将HCC细胞Hepa1-6分为NC、INKA2-AS1、siNC和siINKA2-AS1组。通过转染来过表达和沉默INKA2-AS1。分别通过CCK-8、EdU、TUNEL染色、划痕愈合和Transwell实验检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭情况。将各组Hepa 1-6细胞分别与巨噬细胞共培养分析其对巨噬细胞的影响。将20只4周龄SPF级裸鼠(体质量15~19 g,雌雄各半)通过随机数字表法分为4组(n=5):NC、INKA2-AS1、siNC和siINKA2-AS1组,分别通过皮下注射2×106个INKA2-AS1沉默和过表达的Hepa 1-6细胞构建荷瘤裸鼠模型,检测INKA2-AS1对肿瘤体积、质量的影响。通过Western blot检测肿瘤组织中IL-10和FAP蛋白表达水平来分析肿瘤相关巨噬细胞水平。结果HCC组织中INKA2-AS1的水平显著高于正常组织(P<0.001)。INKA2-AS1与HCC的组织学分级、病理分期有关(P<0.05)。NKA2-AS1高表达的HCC患者的生存率(P=0.001)、疾病特异性生存期(P=0.036)和无进展间期(P=0.024)显著低于INKA2-AS1低表达患者。Cox回归分析显示INKA2-AS1是HCC患者OS的独立预测因素(P=0.005)。INKA2-AS1的表达与T辅助细胞、巨噬细胞等免疫细胞相关。HCC组织中INKA2-AS1水平显著高于癌旁正常组织(P<0.05)。siINKA2-AS1组的增殖、迁移、侵袭能力低于siNC组(P<0.05),凋亡率显著高于siNC组(P<0.05),抑制与其共培养的巨噬细胞中IL-10和FAP mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。INKA2-AS1组的增殖、迁移、侵袭能力高于NC组(P<0.05),凋亡率显著低于NC组(P<0.05),促进与其共培养的巨噬细胞中IL-10和FAP mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。siINKA2-AS1组的肿瘤体积和质量显著低于siNC组(P<0.05),而INKA2-AS1组的肿瘤体积(P<0.05)和质量显著高于NC组(P<0.01)。siINKA2-AS1组肿瘤组织中IL-10和FAP蛋白水平显著低于siNC组(P<0.05),INKA2-AS1组肿瘤组织中IL-10和FAP蛋白水平显著高于NC组(P<0.05)。结论INKA2-AS1升高与HCC患者的预后不良有关,INKA2-AS1促进HCC细胞的增殖和转移,并诱导肿瘤相关巨噬细胞的转化。 展开更多
关键词 肝细胞癌 INKA2-as1 肿瘤免疫 巨噬细胞
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宫颈癌患者血清LncRNA SFTA1P和LncRNA UBE2R2-AS1表达水平与预后的关系 被引量:2
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作者 肖献花 郭丽娜 +4 位作者 呼慧军 张伟伟 冀娜娜 段敬梅 高翔 《安徽医学》 2025年第1期22-27,共6页
目的探究宫颈癌(CC)患者血清中长链非编码RNA(LncRNA)表面活性剂相关1假基因(SFTA1P)和UBE2R2-AS1表达水平及其与预后的关系。方法选取2018年4月至2021年4月邯郸市妇幼保健院收治的108例CC患者为CC组,100例同期健康体检者为健康组。用... 目的探究宫颈癌(CC)患者血清中长链非编码RNA(LncRNA)表面活性剂相关1假基因(SFTA1P)和UBE2R2-AS1表达水平及其与预后的关系。方法选取2018年4月至2021年4月邯郸市妇幼保健院收治的108例CC患者为CC组,100例同期健康体检者为健康组。用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清LncRNA SFTA1P和LncRNA UBE2R2-AS1水平;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清LncRNA SFTA1P和LncRNA UBE2R2-AS1对CC的诊断价值;Kaplan-Meier法分析血清LncRNA SFTA1P和LncRNA UBE2R2-AS1表达水平与CC患者预后的关系;Cox回归分析CC患者预后的影响因素。结果与健康组相比,CC患者血清LncRNA SFTA1P表达水平升高(P<0.05),LncRNA UBE2R2-AS1表达水平降低(P<0.05),且其水平与FIGO分期、淋巴结转移、肌层浸润深度有关(P<0.05);血清LncRNA SFTA1P和LncRNA UBE2R2-AS1单独及联合诊断CC发生的曲线下面积分别为0.863、0.817和0.915,联合优于单独诊断(Z_(二者联合-LncRNA SFTA1P)=3.057、P=0.002,Z_(二者联合-LncRNA UBE2R2-AS1)=3.564、P<0.001);血清LncRNA SFTA1P高表达组患者3年生存率低于低表达组患者(64.91%比80.39%,χ^(2)=4.443,P=0.035),LncRNA UBE2R2-AS1高表达组患者3年生存率高于低表达组患者(82.00%比63.79%,χ^(2)=5.938,P=0.015);FIGO分期Ⅱb~Ⅲc期、淋巴结转移、肌层浸润深度≥1/2、LncRNA SFTA1P表达水平升高及LncRNA UBE2R2-AS1表达水平降低均为CC患者预后的危险因素(P<0.05)。结论CC患者血清中LncRNA SFTA1P表达上调,LncRNA UBE2R2-AS1表达下调,其表达水平与肿瘤FIGO分期、淋巴结转移、肌层浸润深度有关,且与患者预后生存密切相关。 展开更多
关键词 宫颈癌 长链非编码RNA SFTA1P 长链非编码RNA UBE2R2-as1 临床病理特征 预后
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LncRNA CTBP1-AS2调节miR-433-3p/DPP8信号轴对急性髓系白血病细胞恶性生物学行为的影响
7
作者 刘苏慧 段丽娟 +2 位作者 李超 秦凡 尚淼 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第11期2631-2636,共6页
目的:探讨LncRNA C-末端结合蛋白-1反义RNA2(CTBP1-AS2)调节miR-433-3p/二肽基肽酶8(DPP8)信号轴对急性髓系白血病(AML)细胞恶性生物学行为的影响。方法:AML细胞HL-60随机分为si-NC组、si-CTBP1-AS2组、si-CTBP1-AS2+anti-NC组、si-CTBP... 目的:探讨LncRNA C-末端结合蛋白-1反义RNA2(CTBP1-AS2)调节miR-433-3p/二肽基肽酶8(DPP8)信号轴对急性髓系白血病(AML)细胞恶性生物学行为的影响。方法:AML细胞HL-60随机分为si-NC组、si-CTBP1-AS2组、si-CTBP1-AS2+anti-NC组、si-CTBP1-AS2+anti-miR-433-3p组。CCK-8法和EdU染色检测HL-60细胞增殖;流式细胞术检测HL-60细胞凋亡;Transwell检测HL-60细胞迁移和侵袭;Western blot检测HL-60细胞PCNA、Bax、MMP-9、DPP8蛋白表达;ELISA检测HL-60细胞IFN-γ、IL-1β表达;双荧光素酶报告基因实验分析LncRNA CTBP1-AS2与miR-433-3p、miR-433-3p与DPP8的相互作用。结果:si-CTBP1-AS2组HL-60细胞LncRNA CTBP1-AS2、DPP8 mRNA、A_(450)、EdU阳性细胞率、迁移细胞数、侵袭细胞数、PCNA蛋白、MMP-9蛋白、DPP8蛋白、IL-1β蛋白表达低于si-NC组,miR-433-3p表达、凋亡率、Bax蛋白、IFN-γ蛋白表达高于si-NC组(P<0.05);与si-CTBP1-AS2组、si-CTBP1-AS2+anti-NC组比较,si-CTBP1-AS2+anti-miR-433-3p组miR-433-3p、凋亡率、Bax蛋白、IFN-γ蛋白表达降低,DPP8 mRNA、A_(450)、EdU阳性细胞率、迁移细胞数、侵袭细胞数、PCNA蛋白、MMP-9蛋白、DPP8蛋白、IL-1β蛋白表达升高(P<0.05)。LncRNA CTBP1-AS2靶向负调控miR-433-3p,miR-433-3p靶向负调控DPP8。结论:敲低LncRNA CTBP1-AS2可能抑制AML细胞恶性生物学行为,其机制可能通过调节miR-433-3p/DPP8信号轴实现。 展开更多
关键词 LncRNA CTBP1-as2 miR-433-3p DPP8 急性髓系白血病
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沉默AGAP2-AS1通过有氧糖酵解抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖和迁移
8
作者 张春利 蔡徐山 +2 位作者 齐结华 席芳 宦宇 《中国优生与遗传杂志》 2025年第2期280-285,共6页
目的探讨长链非编码RNA lnc-AGAP2-AS1对人宫颈癌细胞系HeLa增殖和迁移能力的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人永生化表皮细胞Hacat及宫颈癌细胞HeLa中AGAP2-AS1的表达水平;RT-qPCR验证转染si-AGAP2-AS1后对HeLa细胞AGAP2-AS1... 目的探讨长链非编码RNA lnc-AGAP2-AS1对人宫颈癌细胞系HeLa增殖和迁移能力的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人永生化表皮细胞Hacat及宫颈癌细胞HeLa中AGAP2-AS1的表达水平;RT-qPCR验证转染si-AGAP2-AS1后对HeLa细胞AGAP2-AS1的沉默效率;CCK-8检测沉默AGAP2-AS1对HeLa增殖的影响;划痕实验和Transwell实验法检测沉默AGAP2-AS1对HeLa迁移的影响;酶联免疫吸附试验(ELISA)用于检测细胞培养上清液中葡萄糖和乳酸的水平;Western blot实验检测上皮-间质转化(EMT)和有氧糖酵解中有关蛋白水平差异。结果宫颈癌细胞HeLa中AGAP2-AS1表达高于Hacat(P<0.05);si-AGAP2-AS1可以有效地降低HeLa细胞中AGAP2-AS1的表达(P<0.05);沉默AGAP2-AS1后,HeLa细胞的增殖能力下降(P<0.05),迁移能力也下降(P<0.05);EMT相关蛋白N-cadherin、vimentin及snail水平降低,E-cadherin升高(P<0.05);HeLa细胞摄入葡萄糖及生成乳酸均减少(P<0.05);糖酵解过程重要酶包括己糖激酶(HK2)、磷酸果糖激酶-1(PFK1)、丙酮酸激酶(PKM2)、乳酸脱氢酶(LDHA)和葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)均有所降低(P<0.05)。结论沉默lnc-AGAP2-AS1可能通过抑制有氧糖酵解途径抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖和迁移。 展开更多
关键词 AGAP2-as1 宫颈癌 糖酵解 增殖 迁移
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胶质母细胞瘤中LY86-AS1和KHDRBS2低表达与免疫细胞浸润及预后相关性分析
9
作者 王莎莎 赵文浩 +2 位作者 何锡宁 张杨杨 常文丽 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第3期245-253,共9页
目的 探究淋巴细胞抗原86反义RNA 1(LY86-AS1)和含KH结构域的RNA信号转导相关分子2(KHDRBS2)在胶质母细胞瘤(GBM)中的表达、相关性及其对患者预后和免疫细胞浸润的影响。方法 基于基因表达综合(GEO)数据库中GSE50161数据集,采用加权基... 目的 探究淋巴细胞抗原86反义RNA 1(LY86-AS1)和含KH结构域的RNA信号转导相关分子2(KHDRBS2)在胶质母细胞瘤(GBM)中的表达、相关性及其对患者预后和免疫细胞浸润的影响。方法 基于基因表达综合(GEO)数据库中GSE50161数据集,采用加权基因共表达网络分析(WGCNA)和基因差异表达分析鉴定与GBM发生密切相关的LY86-AS1和KHDRBS2。采用癌症基因组图谱(TCGA)和中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库分析LY86-AS1和KHDRBS2表达与GBM患者预后的关系。采用多个数据集分析LY86-AS1和KHDRBS2表达的相关性及其与免疫细胞浸润的关系。采用实时定量PCR验证LY86-AS1和KHDRBS2在GBM和正常脑组织中的表达,人类蛋白质图谱(HPA)数据库获取KHDRBS2的蛋白表达及免疫组织化学染色验证KHDRBS2的蛋白表达。结果 LY86-AS1和KHDRBS2在GBM组织中低表达,且与GBM发生密切相关,两者呈显著正相关关系。LY86-AS1和KHDRBS2低表达组的患者总体生存率低于高表达组。LY86-AS1与初始B细胞、浆细胞、活化自然杀伤(NK)细胞、M1型巨噬细胞、活化肥大细胞和单核细胞呈显著正相关关系;KHDRBS2与初始B细胞、浆细胞、辅助T细胞、活化NK细胞和单核细胞呈显著正相关关系。结论 LY86-AS1和KHDRBS2在GBM中低表达,且与预后不良相关,影响肿瘤免疫微环境并可能作为GBM诊断和判断患者预后新的生物标志物。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤(GBM) 长链非编码RNA LY86-as1 KHDRBS2 免疫细胞浸润 预后分析
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长链非编码RNA SBF2-AS1在肝癌临床诊疗一体化中的应用价值
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作者 向冬云 赵莲 +2 位作者 吴惠仪 孙昊 邓敬桓 《武警医学》 2025年第8期668-673,共6页
目的 分析肝癌组织中长链非编码RNA SBF2-AS1(LncRNA SBF2-AS1)的表达及临床意义,探讨其在肝癌诊疗一体化中的应用价值。方法 选取2021~2022年被广西医科大学第一附属医院收治的原发性肝细胞癌54例患者作为研究对象,收集术后切除的肝癌... 目的 分析肝癌组织中长链非编码RNA SBF2-AS1(LncRNA SBF2-AS1)的表达及临床意义,探讨其在肝癌诊疗一体化中的应用价值。方法 选取2021~2022年被广西医科大学第一附属医院收治的原发性肝细胞癌54例患者作为研究对象,收集术后切除的肝癌组织和癌旁组织标本,采集患者的病理组织、临床检验诊断和治疗方式等多项临床治疗资料,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测组织标本中的LncRNA SBF2-AS1表达水平,并利用生物统计方法分析其与临床诊断和治疗指标的相关性,运用生物数据库信息分析LncRNA SBF2-AS1对肝癌的诊断价值。结果 肝癌组织中的LncRNA SBF2-AS1的相对表达量(10.656)明显高于癌旁(1.000),差异有统计学意义(Z=-5.675,P<0.001);LncRNA SBF2-AS1的表达与谷丙转氨酶(r=0.297,P<0.05)、中性粒细胞(r=0.275,P<0.05)水平、不同治疗方式(r=0.332,P<0.05)呈正相关性;根据LncRNA SBF2-AS1表达中位值(M=3.649)将患者分为高表达组(27例)和低表达组(27例),LncRNA SBF2-AS1的表达水平与谷丙转氨酶有关(P<0.05)。通过TCGA数据库获取371例肝癌组织及50例癌旁组织的LncRNA SBF2-AS1相对表达量,ROC曲线下面积(AUC)为0.9122,特异度和灵敏度各为94.00%、79.51%。结论 LncRNA SBF2-AS1在肝癌组织中高表达,与谷丙转氨酶、中性粒细胞和治疗方式有关,可成为肝癌诊断及炎性损伤监测的标志物,具有临床诊疗一体化的应用价值。 展开更多
关键词 肝癌 诊疗一体化 长链非编码RNA SBF2-as1 应用价值
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LncRNA OIP5-AS1调节miR-7-5p/KDM2A轴对结肠癌细胞增殖和免疫逃逸的影响
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作者 王晓凡 刘志平 《现代消化及介入诊疗》 2025年第4期454-459,共6页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)OIP5-AS1调节微小RNA(miR)-7-5p/赖氨酸特异性去甲基化酶2A(KDM2A)轴对人结肠癌细胞增殖和免疫逃逸的影响。方法收集结肠癌及癌旁组织,通过qRT-PCR实验测定其中LncRNA OIP5-AS1、miR-7-5p和KDM2A mRNA水平... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)OIP5-AS1调节微小RNA(miR)-7-5p/赖氨酸特异性去甲基化酶2A(KDM2A)轴对人结肠癌细胞增殖和免疫逃逸的影响。方法收集结肠癌及癌旁组织,通过qRT-PCR实验测定其中LncRNA OIP5-AS1、miR-7-5p和KDM2A mRNA水平,免疫组织化学染色检测KDM2A蛋白表达。将HT29细胞分为对照组(Control)、sh-NC、sh-OIP5-AS1、sh-OIP5-AS1+miR In-NC组、sh-OIP5-AS1+miR-7-5p-In组。qRT-PCR和Western blot实验测定各组HT29细胞中LncRNA OIP5-AS1、miR-7-5p、KDM2A mRNA水平;Western blot测定各组HT29细胞中KDM2A和PD-L1蛋白表达;CCK-8法和细胞克隆形成实验检测HT29细胞增殖能力;ELISA实验检测细胞中免疫逃逸相关因子水平;T淋巴细胞与各组HT29细胞共培养测定肿瘤杀伤率;双荧光素酶报告基因试验测定miR-7-5p与LncRNA OIP5-AS1以及KDM2A的靶向关系。结果与癌旁组织相比,结肠癌组织中LncRNA OIP5-AS1和KDM2A mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05),miR-7-5p水平显著降低(P<0.05);与sh-NC组相比,sh-OIP5-AS1组HT29细胞中LncRNA OIP5-AS1、KDM2A mRNA及蛋白表达、细胞存活率、集落形成数和PD-L1水平显著降低(P<0.05),miR-7-5p、IL-2、IFN-γ水平和T细胞肿瘤杀伤率显著升高(P<0.05);与sh-OIP5-AS1+miR In-NC组相比,sh-OIP5-AS1+miR-7-5p-In组LncRNA OIP5-AS1、KDM2A mRNA及蛋白表达、细胞存活率、集落形成数和PD-L1水平显著升高(P<0.05),miR-7-5p、IL-2、IFN-γ水平和T细胞肿瘤杀伤率显著降低(P<0.05);与miR mimic-NC和OIP5-AS1-WT或KDM2A-WT共转染的细胞相比,miR-7-5p mimic和OIP5-AS1-WT或KDM2A-WT共转染的细胞中相对荧光素酶活性显著减少(P<0.05)。结论LncRNA OIP5-AS1下调可能通过靶向调控miR-7-5p/KDM2A轴抑制结肠癌细胞的增殖和免疫逃逸。 展开更多
关键词 长链非编码RNA OIP5-as1 微小RNA-7-5p/赖氨酸特异性去甲基化酶2A轴 人结肠癌细胞
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LncRNA FGD5-AS1通过调节miR-302b-3p/E2F1轴对胃癌细胞迁移及侵袭的影响
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作者 李娜 李浩 +2 位作者 林坤 贺延新 郑英兰 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第24期3065-3076,共12页
目的 探讨长链非编码RNA FGD5-AS1(LncRNA FGD5-AS1)调节微小RNA-302b-3p(miR-302b-3p)/E2F转录因子1(E2F1)轴对胃癌细胞迁移及侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞系(SGC-7901、MKN-45、HGC-27、AGS、BGC-823)... 目的 探讨长链非编码RNA FGD5-AS1(LncRNA FGD5-AS1)调节微小RNA-302b-3p(miR-302b-3p)/E2F转录因子1(E2F1)轴对胃癌细胞迁移及侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞系(SGC-7901、MKN-45、HGC-27、AGS、BGC-823)及人胃粘膜上皮细胞系GES-1中LncRNA FGD5-AS1、miR-302b-3p、E2F1 mRNA表达,筛选最佳干预细胞。将胃癌细胞分为对照组(NC组)、sh-NC组、sh-FGD5-AS1组、sh-FGD5-AS1+anti-miR-NC组、sh-FGD5-AS1+anti-miR-302b-3p组。qRT-PCR检测细胞中LncRNA FGD5-AS1、miR-302b-3p、E2F1 mRNA的表达水平;MTT法及流式细胞仪分别检测细胞增殖与凋亡;划痕实验及Transwel l实验分别检测细胞迁移与侵袭;Western blot检测E2F1、Ki-67、Bax、Bcl-2蛋白表达;裸鼠移植瘤实验验证LncRNA FGD5-AS1对胃癌移植瘤生长的影响;双荧光素酶报告基因和RNA pull-down实验检测LncRNA FGD5-AS1、E2F1与miR-302b-3p的靶向关系。结果 与GES-1相比,胃癌细胞系(SGC-7901、MKN-45、HGC-27、AGS、BGC-823)中LncRNA FGD5-AS1、E2F1 mRNA表达水平升高,miR-302b-3p表达水平降低(P<0.05),选择AGS细胞进行实验;沉默LncRNA FGD5-AS1表达可显著上调miR-302b-3p表达,下调E2F1表达,抑制胃癌细胞增殖、迁移与侵袭,促进细胞凋亡(P<0.05);抑制miR-302b-3p表达可部分减弱沉默LncRNA FGD5-AS1对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的作用(P<0.05);体内实验显示,沉默LncRNA FGD5-AS1表达可显著抑制胃癌移植瘤小鼠肿瘤的生长(P<0.05);RNA pull-down实验、双荧光素酶报告基因实验证实LncRNA FGD5-AS1、E2F1与miR-302b-3p存在靶向调控关系。结论 LncRNA FGD5-AS1在胃癌细胞中上调表达,沉默LncRNA FGD5-AS1表达可通过调节miR-302b-3p/E2F1轴,抑制胃癌恶性进展。 展开更多
关键词 长链非编码RNA FGD5-as1 微小RNA-302-3p/E2F转录因子1 胃癌 迁移 侵袭
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血清lncRNA CDKN2B-AS1和FBXL19-AS1在溃疡性结肠炎患者中的表达及其与炎症因子水平的相关性研究
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作者 赵丽娟 武建军 +1 位作者 云宇婷 娜日格乐 《胃肠病学和肝病学杂志》 2025年第12期1787-1791,共5页
目的探讨血清lncRNA CDKN2B-AS1和FBXL19-AS1在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者中的表达及与炎症因子水平的相关性研究。方法选取2021年6月至2024年6月在本院就诊的114例UC患者为研究组,根据病情严重程度分为轻度组37例,中度... 目的探讨血清lncRNA CDKN2B-AS1和FBXL19-AS1在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者中的表达及与炎症因子水平的相关性研究。方法选取2021年6月至2024年6月在本院就诊的114例UC患者为研究组,根据病情严重程度分为轻度组37例,中度组46例,重度组31例;另选取86名在本院进行健康体检者作为对照组。收集患者临床资料,qRT-PCR法检测血清lncRNA CDKN2B-AS1、FBXL19-AS1水平,ELISA检测炎症相关因子水平,Pearson法和Spearman法分析血清lncRNA CDKN2B-AS1和FBXL19-AS1水平与炎症因子、病情严重程度的相关性,ROC曲线分析血清lncRNA CDKN2B-AS1和FBXL19-AS1水平对UC患者病情严重程度的诊断价值。结果研究组患者ESR、IL-4、IL-6、IL-23、IL-1β、TNF-α以及血清lncRNA FBXL19-AS1水平与对照组相比,均呈显著升高趋势(P<0.05),研究组Hb和血清lncRNA CDKN2B-AS1水平与对照组相比,均呈显著下降趋势(P<0.05);UC重度组患者中,血清lncRNA FBXL19-AS1以及炎症因子IL-4、IL-6、IL-23、IL-1β、TNF-α水平高于轻度组和中度组(P<0.05),而血清lncRNA CDKN2B-AS1水平低于中度组和轻度组(P<0.05),血清lncRNA CDKN2B-AS1水平与炎症因子IL-4、IL-6、IL-23、IL-1β、TNF-α以及病情严重程度呈显著负相关(P<0.05),血清lncRNA FBXL19-AS1水平与炎症因子IL-4、IL-6、IL-23、IL-1β、TNF-α以及病情严重程度呈显著正相关(P<0.05);血清lncRNA CDKN2B-AS1和FBXL19-AS1二者联合诊断UC患者病情严重程度优于各自单一诊断(Z二者联合-CDKN2B-AS1=2.162、Z二者联合-FBXL19-AS1=2.130,P=0.031、0.033)。结论UC患者血清lncRNA CDKN2B-AS1水平下降,lncRNA FBXL19-AS1水平升高,二者与炎症因子以及疾病严重程度有显著相关性,二者联合对临床评估病情严重程度有较高的诊断价值。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 lncRNA CDKN2B-as1 lncRNA FBXL19-as1 炎症因子
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LncRNA PRR34-AS1调节miR-296-5p/DDI2轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 陈海洋 王春梅 +1 位作者 石金升 代贺阳 《中国细胞生物学学报》 2025年第7期1593-1603,共11页
该文旨在探究LncRNA PRR34-AS1调节miR-296-5p/DDI2轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR法检测CRC细胞与组织中LncRNA PRR34-AS1、miR-296-5p、DDI2 mRNA水平;用双荧光素酶实验检测LncRNA PRR34-AS1与miR-296-5p及DDI... 该文旨在探究LncRNA PRR34-AS1调节miR-296-5p/DDI2轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR法检测CRC细胞与组织中LncRNA PRR34-AS1、miR-296-5p、DDI2 mRNA水平;用双荧光素酶实验检测LncRNA PRR34-AS1与miR-296-5p及DDI2与miR-296-5p的靶向关系;将HCT116细胞分为Control组、sh-NC组、sh-PRR34-AS1组、sh-PRR34-AS1+antiNC组、sh-PRR34-AS1+anti-miR-296-5p组,除Control组外,其余各组转染质粒;用克隆法、划痕法和Transwell法分别检测HCT116细胞增殖、迁移、侵袭能力;免疫印迹和免疫组化法检测相关蛋白表达水平;裸鼠成瘤实验检测LncRNA PRR34-AS1对CRC移植瘤生长及对miR-296-5p、DDI2表达的影响。在CRC细胞和组织中,LncRNA PRR34-AS1、DDI2 mRNA表达水平升高,miR-296-5p表达水平降低(P<0.05)。在线预测显示,LncRNA PRR34-AS1与miR-296-5p、DDI2与miR-296-5p有靶向关系。与sh-NC组比较,sh-PRR34-AS1组细胞LncRNA PRR34-AS1、DDI2、PCNA、MMP-2、MMP-9表达下调,miR-296-5p表达上调,克隆形成数目、划痕愈合率、侵袭细胞数目降低(P<0.05);与sh-PRR34-AS1+anti-NC组比较,sh-PRR34-AS1+anti-miR-296-5p组miR-296-5p表达下调,DDI2、PCNA、MMP-2、MMP-9表达上调,克隆形成数目、划痕愈合率、侵袭细胞数目上升(P<0.05)。与sh-NC组相比,sh-PRR34-AS1组肿瘤体积更小、质量更低,LncRNA PRR34-AS1、DDI2表达下调,miR-296-5p表达上调(P<0.05)。抑制LncRNA PRR34-AS1可通过靶向miR-296-5p/DDI2轴,抑制CRC细胞的增殖、迁移、侵袭。 展开更多
关键词 结直肠癌 LncRNA PRR34-as1 miR-296-5p DDI2 增殖 迁移 侵袭
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LncRNA MAGI2-AS3调节miR-143-3p/PTP4A1轴对宫颈癌细胞的影响
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作者 李晓雪 高月月 +1 位作者 左慧 张萍 《激光生物学报》 2025年第4期365-373,共9页
为探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)MAGI2-AS3调节miR-143-3p/PTP4A1轴对宫颈癌(CC)细胞的影响,通过RT-qPCR检测54例CC患者术中切除的CC组织及癌旁组织中MAGI2-AS3、miR-143-3p、PTP4A1的表达。将HeLa细胞随机分为对照组、sh-NC组、sh-MA... 为探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)MAGI2-AS3调节miR-143-3p/PTP4A1轴对宫颈癌(CC)细胞的影响,通过RT-qPCR检测54例CC患者术中切除的CC组织及癌旁组织中MAGI2-AS3、miR-143-3p、PTP4A1的表达。将HeLa细胞随机分为对照组、sh-NC组、sh-MAGI2-AS3组、sh-MAGI2-AS3+anti-NC组、sh-MAGI2-AS3+antimiR-143-3p组,测定各组细胞中MAGI2-AS3、miR-143-3p、PTP4A1的表达;检测细胞的增殖、迁移、侵袭情况及PTP4A1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达。利用动物试验验证敲除MAGI2-AS3对CC肿瘤生长及PTP4A1表达的影响。结果显示:CC组织MAGI2-AS3、PTP4A1 mRNA的表达量分别为1.97±0.35、1.73±0.34,高于癌旁组织(1.02±0.33、0.98±0.31),miR-143-3p表达量为0.48±0.14,低于癌旁组织(1.01±0.16)(P<0.05)。相较于sh-NC组和对照组,sh-MAGI2-AS3组HeLa细胞中的A490 nm值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率、侵袭数以及MAGI2-AS3、PTP4A1 mRNA的表达量和PCNA、PTP4A1、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平均降低,miR-143-3p mRNA的表达量升高(P<0.05)。相较于sh-MAGI2-AS3组、sh-MAGI2-AS3+anti-NC组,shMAGI2-AS3+anti-miR-143-3p组miR-143-3p mRNA的表达量降低,A490 nm值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率、侵袭数以及PTP4A1 mRNA的表达量和PCNA、PTP4A1、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平升高(P<0.05)。相较于sh-NC组,sh-MAGI2-AS3组移植瘤的质量、体积、Ki-67阳性率、PTP4A1阳性率均降低(P<0.05)。综上所述,MAGI2-AS3靶向负调控mi R-143-3p,mi R-143-3p靶向负调控PTP4A1。敲除MAGI2-AS3可能抑制CC细胞的侵袭、迁移和增殖,可能是通过调节mi R-143-3p/PTP4A1轴实现的。本研究可能为CC的靶向治疗研究提供新的靶点。 展开更多
关键词 LncRNA MAGI2-as3 miR-143-3p/PTP4A1 宫颈癌 迁移 侵袭
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LncRNA HAND2-AS1介导miR-449a/RNF125改善膝骨关节炎软骨退变
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作者 陈星宇 任奋强 +2 位作者 周斌 艾力亚尔·阿依都 王新安 《解剖科学进展》 2025年第5期651-654,659,共5页
目的探究lncRNA HAND2-AS1对膝骨关节炎软骨退变的影响及其机制。方法SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、膝骨关节炎组(KOA组)、膝骨关节炎+过表达对照组(KOA+ov-NC组)和膝骨关节炎+过表达HAND2-AS1组(KOA+ov-HAND2-AS1组),每组10只,观... 目的探究lncRNA HAND2-AS1对膝骨关节炎软骨退变的影响及其机制。方法SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、膝骨关节炎组(KOA组)、膝骨关节炎+过表达对照组(KOA+ov-NC组)和膝骨关节炎+过表达HAND2-AS1组(KOA+ov-HAND2-AS1组),每组10只,观察大鼠形态变化。RT-qPCR检测各组大鼠关节软骨中HAND2-AS1、miR-449a和RNF125 mRNA表达水平;HE染色观察各组大鼠关节软骨病理损伤;TUNEL实验检测各组大鼠关节软骨细胞凋亡情况;Western blot检测各组大鼠关节软骨中RNF125、β-catenin、p-GSK3β和p-β-catenin蛋白表达水平。生物信息学预测miR-449a与HAND2-AS1和RNF125的潜在结合位点,并采用双荧光素酶报告基因实验验证。结果过表达lncRNA HAND2-AS1改善膝骨关节炎大鼠关节炎症状和关节软骨病理损伤,抑制大鼠关节软骨细胞凋亡,下调大鼠关节软骨中miR-449a、β-catenin和p-GSK3β表达,并上调RNF125和p-β-catenin表达。miR-449a与HAND2-AS1和RNF125 mRNA结合。结论过表达lncRNA HAND2-AS1改善膝骨关节炎诱导的软骨退变,其机制与海绵化miR-449a上调RNF125表达并抑制Wnt/β-catenin信号通路激活有关。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 LncRNA HAND2-as1 miR-449a RNF125 WNT/Β-CATENIN信号通路 大鼠
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lncRNA USP2-AS1调节miR-299-3p/MMP2轴对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响
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作者 舒德军 沈玉光 +2 位作者 周维富 卢勋 唐激杨 《现代免疫学》 2025年第2期125-133,共9页
为探究lncRNA USP2-AS1调节miR-299-3p/基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2, MMP2)轴对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响,将si-N... 为探究lncRNA USP2-AS1调节miR-299-3p/基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2, MMP2)轴对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响,将si-NC、 si-USP2-AS1、 si-USP2-AS1+inhibitor NC和si-USP2-AS1+miR-299-3p inhibitor分别转染至A549细胞并分别命名为相应组别,未做任何处理的A549细胞记为NC组。qRT-PCR检测正常人肺上皮细胞系BEAS-2B及A549细胞中lncRNA USP2-AS1、 miR-299-3p的表达;CCK-8法检测A549细胞的增殖活性;流式细胞术检测A549细胞的凋亡率;Transwell法检测A549细胞的侵袭、迁移数量;Western blotting检测A549细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin, E-cad)、 N-cad、波形蛋白和MMP2的蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因法验证lncRNA USP2-AS1、 miR-299-3p及MMP2的关系;裸鼠异种移植试验检测肿瘤细胞的在体生长情况。结果显示,与BEAS-2B细胞相比,A549细胞lncRNA USP2-AS1、 MMP2表达量显著上调(均P<0.05), miR-299-3p表达显著下调(P<0.05)。与NC组、 si-NC组相比,si-USP2-AS1组A549细胞增殖活性,迁移、侵袭细胞数量,lncRNA USP2-AS1表达量,N-cad、波形蛋白表达量均显著下调(均P<0.05), A549细胞凋亡率、 miR-299-3p表达、 E-cad蛋白表达量均显著上调(均P<0.05);与NC组、 sh-NC组相比,sh-USP2-AS1组移植瘤体积、质量均显著下降(均P<0.05),而抑制miR-299-3p表达减弱了沉默lncRNA USP2-AS1抑制A549细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤生长及促进凋亡的效应;lncRNA USP2-AS1负向调控miR-299-3p/MMP2轴。由此,沉默lncRNA USP2-AS1可能通过上调miR-299-3p下调MMP2表达,进而对A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭以及EMT产生影响。 展开更多
关键词 长链非编码核糖核酸USP2-as1 微小核糖核酸299-3p/基质金属蛋白酶2 非小细胞肺癌 增殖 凋亡 上皮间质转化
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lncRNA FOXC2-AS1逆转骨肉瘤细胞对阿霉素耐药性的影响 被引量:9
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作者 张义 张擎柱 +5 位作者 谷锐 冯震 石利涛 魏俊强 曹向宇 金宇 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期385-390,共6页
目的探讨沉默长链非编码RNA FOXC2-AS1(lncRNA FOXC2-AS1)对人骨肉瘤细胞阿霉素(ADM)耐药性的影响及可能作用机制。方法采用ADM长期浓度梯度递增法体外建立ADM耐药细胞株MG-63/ADR,利用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测MG-63和MG-63/ADR细胞... 目的探讨沉默长链非编码RNA FOXC2-AS1(lncRNA FOXC2-AS1)对人骨肉瘤细胞阿霉素(ADM)耐药性的影响及可能作用机制。方法采用ADM长期浓度梯度递增法体外建立ADM耐药细胞株MG-63/ADR,利用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测MG-63和MG-63/ADR细胞中FOXC2-AS1的表达水平,采用阴性对照序列和si-FOXC2-AS1序列转染MG-63/ADR细胞作为si-NC组和si-FOXC2-AS1组,另设空白对照组。MTT实验和平板克隆形成实验检测各组细胞对ADM的敏感性,并计算半数抑制浓度(IC50)。Western blotting法检测各组细胞中Notch-1及下游靶因子Hes-1、Hey-1、Hey-2蛋白水平。结果体外成功建立MG-63/ADR耐药细胞株,1、5、25、125、625、3125、15 625 ng/ml ADM对MG-63/ADR细胞的增殖抑制率分别为(5.90±0.48)%、(9.86±0.85)%、(16.75±2.21)%、(29.84±2.98)%、(50.45±4.96)%、(54.82±5.33)%和(57.69±5.76)%,明显低于MG-63细胞。ADM对MG-63和MG-63/ADR的IC50分别为106.55 ng/ml和685.47 ng/ml。MG-63/ADR耐药指数为6.43。si-FOXC2-AS1组FOXC2-AS1的相对表达量为0.44±0.12,低于空白对照组(1.43±0.22)和si-NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。1、5、25、125、625、3125和15 625 ng/ml ADM对si-FOXC2-AS1组MG-63/ADR细胞的增殖抑制率分别为(6.36±0.40)%、(13.41±1.05)%、(32.45±2.69)%、(49.73±4.14)%、(64.82±4.67)%、(77.56±5.79)%和(79.50±5.62)%,明显高于空白对照组。转染si-FOXC2-AS1后MG-63/ADR细胞对ADM的敏感性增加了4.25倍。si-FOXC2-AS1组经ADM(100 ng/ml)作用96 h后,MG-63/ADR细胞克隆形成率为(27.64±7.28)%,低于空白对照组的(76.07±17.91)%和si-NC组的(69.83±15.71)%,差异有统计学意义(P<0.05)。si-FOXC2-AS1组MG-63/ADR细胞中Notch-1及其下游分子Hes-1、Hey-1、Hey-2蛋白的表达水平分别为0.67±0.15、0.52±0.10、0.45±0.12和0.38±0.11,均低于空白对照组和si-NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论沉默lncRNA FOXC2-AS1表达通过抑制Notch-1信号通路的活化,进而增加MG-63/ADR细胞对ADM的敏感性。 展开更多
关键词 骨肉瘤 长链非编码RNA FOXC2-as1 Notch-1信号通路 阿霉素耐药
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白芷提取物通过调控SBF2-AS1/miR-329-3p轴影响卵巢癌细胞增殖及凋亡 被引量:10
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作者 谷少华 刘巧方 李向南 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第23期5360-5365,共6页
目的探讨白芷提取物对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法采用不同浓度的白芷提取物处理人卵巢癌细胞A2780,采用甲基噻唑基四唑(MTT)法观察白芷提取物对A2780细胞增殖活力的影响;流式细胞仪检测白芷提取物处理后A2780细胞凋... 目的探讨白芷提取物对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法采用不同浓度的白芷提取物处理人卵巢癌细胞A2780,采用甲基噻唑基四唑(MTT)法观察白芷提取物对A2780细胞增殖活力的影响;流式细胞仪检测白芷提取物处理后A2780细胞凋亡情况;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测白芷提取物对长链非编码RNA SBF2-AS1(LncRNA SBF2-AS1)、微小RNA-329-3p(miR-329-3p)表达的影响;MTT法与流式细胞仪分别检测抑制SBF2-AS1的表达后A2780细胞增殖活力及凋亡情况;双荧光素酶报告基因实验检测SBF2-AS1与miR-329-3p的靶向调控关系;Western印迹检测细胞中细胞周期蛋白(Cyclin)D1、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、P21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况。结果白芷提取物抑制A2780细胞增殖且呈剂量依赖性,促进细胞凋亡,抑制CyclinD1、Bcl-2的表达,而促进P21、Bax的表达(均P<0.05);抑制SBF2-AS1的表达可显著抑制A2780细胞增殖,提高细胞凋亡率,上调P21、Bax的表达,而下调CyclinD1、Bcl-2的表达(均P<0.05);白芷提取物可显著促进miR-329-3p的表达,而抑制SBF2-AS1的表达(均P<0.05);双荧光素酶报告实验证实SBF2-AS1可靶向结合miR-329-3p并负向调控其表达;SBF2-AS1过表达可逆转白芷提取物对A2780细胞增殖、凋亡的作用。结论白芷提取物可通过调控SBF2-AS1/miR-329-3p轴抑制卵巢癌细胞增殖、促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 白芷提取物 LncRNA SBF2-as1 miR-329-3p 卵巢癌 增殖 凋亡
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