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不同花色忍冬LjDFR2基因的克隆及表达模式分析
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作者 鲁丹丹 郭水柱 +9 位作者 谭政委 苏小雨 孙瑶 曹艺雯 王利娜 李磊 李春明 余永亮 乔美玉 梁慧珍 《种子》 北大核心 2025年第8期74-84,93,共12页
为了探究DFR基因在忍冬和红白忍冬花色形成中的功能,通过qRT-PCR技术从忍冬和红白忍冬中获得了DFR2基因,该基因在忍冬和红白忍冬中全长cDNA序列大小均为1176 bp,核苷酸序列存在1个碱基的差异,氨基酸序列无差异,命名为LjDFR2。LjDFR2基... 为了探究DFR基因在忍冬和红白忍冬花色形成中的功能,通过qRT-PCR技术从忍冬和红白忍冬中获得了DFR2基因,该基因在忍冬和红白忍冬中全长cDNA序列大小均为1176 bp,核苷酸序列存在1个碱基的差异,氨基酸序列无差异,命名为LjDFR2。LjDFR2基因编码391个氨基酸,有6个外显子和5个内含子,二级结构主要由α-螺旋和无规卷曲构成,属于稳定的亲水性蛋白,不含信号肽,存在1个跨膜结构域,定位于细胞膜和细胞核。氨基酸序列多重比对及系统发育分析表明,LjDFR2和其他植物DFR蛋白一样含有高度保守的NADPH和底物结合域,与同为忍冬科的蓝靛果LcDFR亲缘关系最近,与菊科菊花、水木雪莲等聚为一个大分支,且它们含有相似的模体基序,关系越近,模体基序越相似。LjDFR2基因的启动子含有大量胁迫响应元件,qRT-PCR结果表明,LjDFR2基因可以响应旱盐胁迫,且其表达在干旱胁迫下呈先升后降的趋势,盐胁迫下呈先降后升的趋势。此外,LjDFR2基因在花中表达量最高,忍冬茎中表达量最低,红白忍冬根中表达量最低,在花发育的S1期表达量最高,S5期表达量最低。整体来看,LjDFR2在颜色较深的红白忍冬各组织中的表达量均显著高于忍冬,在颜色较深的花前期S1、S2和S3中的表达量也均显著高于忍冬,因此推测LjDFR2可能和花青素的积累直接相关。 展开更多
关键词 忍冬 dfr 基因克隆 胁迫处理 表达分析
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植物花青素生物合成及DFR基因调控机制研究进展
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作者 李冬辰 王涵 +6 位作者 贾利 洪秀景 王艳萍 严从生 张其安 蔡永萍 江海坤 《中国蔬菜》 北大核心 2025年第10期45-58,共14页
花青素广泛分布于植物器官中,是植物中重要的色素成分,其在医药、食品科学和生物技术方面有着广泛应用。花青素是一类重要的水溶性色素,属于黄酮类化合物,目前花青素生物合成机制已得到表征和验证。但由于花青素合成的复杂性和多样性,... 花青素广泛分布于植物器官中,是植物中重要的色素成分,其在医药、食品科学和生物技术方面有着广泛应用。花青素是一类重要的水溶性色素,属于黄酮类化合物,目前花青素生物合成机制已得到表征和验证。但由于花青素合成的复杂性和多样性,其中涉及的许多转录调控过程仍不清晰。DFR基因是花青素生物合成途径中的关键基因,该基因通过还原花青素的3种黄酮前体,即二氢山柰酚(DHK)、二氢槲皮素(DHQ)和二氢杨梅素(DHM),使得植物能够合成各种花青素,从而产生各种颜色。本文综述了花青素转录代谢调控以及DFR基因调控花青素合成的研究进展,为通过分子育种提高植物花青素含量提供了理论基础。 展开更多
关键词 花青素 dfr 生物合成
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茄科植物DFR基因密码子偏性与进化分析
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作者 王英琪 张俊杰 +3 位作者 高伟博 刘福芳 李景伟 姜超 《呼伦贝尔学院学报》 2025年第4期118-128,共11页
二氢黄酮醇-4-还原酶(DFR)是类黄酮生物合成途径的关键酶,主要参与花青素的合成,花青素作为主要的呈色物质之一,决定了茄科植物的丰富色彩,研究DFR基因的密码子偏好性,可为提高其表达效率及花青素合成相关的遗传工程提供理论依据。选取4... 二氢黄酮醇-4-还原酶(DFR)是类黄酮生物合成途径的关键酶,主要参与花青素的合成,花青素作为主要的呈色物质之一,决定了茄科植物的丰富色彩,研究DFR基因的密码子偏好性,可为提高其表达效率及花青素合成相关的遗传工程提供理论依据。选取42个茄科植物的DFR基因,通过计算GC含量、有效密码子数(ENC)、相对同义密码子使用度(RSCU)等相关参数,分析DFR基因的密码子偏好性,结果表明DFR基因的GC1、GC2、GC3的平均值为48.53、38.93、35.21,ENC值范围分布为38.79~56.37,表明DFR基因的密码子偏好性较弱;ENC-plot关联分析与PR2-plot偏倚分析显示多种因素驱动密码子使用;DFR基因偏向使用GCA、AGA、UCA密码子。本研究为茄科DFR基因的功能解析、提高表达效率、优化密码子组成、外源基因改良提供理论基础。 展开更多
关键词 茄科 dfr基因 密码子偏好性 聚类分析
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DFR、抗凝血酶Ⅲ联合检测在急性肺栓塞诊断中的价值
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作者 李英雪 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2025年第2期065-069,共5页
探讨D-二聚体与纤维蛋白原比值(DFR)联合抗凝血酶Ⅲ(AT-III)检测是否可以作为预测急性肺栓塞发生的早期生物学标志物。方法 收集从2021年5月至2023年7月就诊于医院并且明确诊断为急性肺栓塞的患者104例作为病例组,选取同期体检者65例作... 探讨D-二聚体与纤维蛋白原比值(DFR)联合抗凝血酶Ⅲ(AT-III)检测是否可以作为预测急性肺栓塞发生的早期生物学标志物。方法 收集从2021年5月至2023年7月就诊于医院并且明确诊断为急性肺栓塞的患者104例作为病例组,选取同期体检者65例作为对照组,分析两组间D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(FIB)、DFR以及AT-III等指标间的差异,应用受试者工作特征(ROC)曲线分析D-二聚体、DFR以及抗凝血酶Ⅲ单独和联合检测在急性肺栓塞患者中的诊断预测效能。结果 两组患者各项指标存在统计学差异。结论 D-D、DFR、AT-III或者DFR+AT-III联合检测均可预测急性肺栓塞,DFR+AT-III联合检测预测效果较好。 展开更多
关键词 急性肺栓塞 抗凝血酶Ⅲ dfr
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郁金香二氢黄酮醇4-还原酶基因TgDFR1和TgDFR2的克隆与功能鉴定 被引量:1
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作者 张恒滨 黄玲 +4 位作者 胡先梅 梁泽慧 王艳平 产祝龙 向林 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第1期118-127,共10页
在花色形成过程中,二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase, DFR)基因扮演着至关重要的角色。本研究以红色的郁金香品种‘纯火’为实验材料,克隆了2个DFR基因,分别编码365、422个氨基酸。在花不同发育时期的基因表达分析表明,T... 在花色形成过程中,二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase, DFR)基因扮演着至关重要的角色。本研究以红色的郁金香品种‘纯火’为实验材料,克隆了2个DFR基因,分别编码365、422个氨基酸。在花不同发育时期的基因表达分析表明,TgDFR1与TgDFR2在花发育的第二阶段(着色期)的表达显著上调,而TgDFR1在第三阶段(初开期)、第四阶段(盛开期)的表达有所回落,TgDFR2的表达量则一直维持在较高水平,表明其与花青素苷的积累呈正相关。在烟草中过表达TgDFR1、TgDFR2,发现在转基因株系中基因表达量与花青素苷含量显著升高。对转基因烟草内源花青素苷合成相关基因表达进行分析,发现与转空载体对照植株相比,NtDFR的表达量显著上升,编码查耳酮合成酶(chalcone synthase, CHS)、查耳酮异构酶(chalcone isomerase, CHI)、黄酮醇合成酶(flavonol synthase, FLS)、黄烷酮3-羟化酶(flavanone 3-hydroxylase, F3H)基因的表达量显著下降。综上所述,TgDFR1与TgDFR2在郁金香花青素苷的积累方面扮演着重要的角色。 展开更多
关键词 郁金香 二氢黄酮醇4-还原酶基因 花青素苷 基因功能
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香鳞毛蕨dfr-miR160a和靶基因DfARF10的生物信息学及表达模式分析
6
作者 仲昭暄 张冬瑞 +5 位作者 李璐 苏颖 王黛宁 王泽冉 刘洋 常缨 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期22-33,共12页
为深入探究miRNA参与调控香鳞毛蕨(Dryopteris fragrans)生长发育的分子机理,依据实验室前期建立的miRNA数据库,筛选出与非生物胁迫相关的差异表达dfr-miR160a前体(dfr-pri-mir160a),预测其靶基因为DfARF10,并通过本氏烟草(Nicotiana be... 为深入探究miRNA参与调控香鳞毛蕨(Dryopteris fragrans)生长发育的分子机理,依据实验室前期建立的miRNA数据库,筛选出与非生物胁迫相关的差异表达dfr-miR160a前体(dfr-pri-mir160a),预测其靶基因为DfARF10,并通过本氏烟草(Nicotiana benthamiana)瞬时共转化GUS以及双荧光素酶(LUC)系统验证dfr-miR160a和DfARF10的靶向关系。结果显示,共注射dfr-pri-mir160a和DfARF10的本氏烟草叶片中GUS活性和LUC活性明显降低;qRT-PCR分析显示,dfr-miR160a及其靶基因DfARF10在香鳞毛蕨的根、配子体、叶柄、叶片和孢子囊中均有表达,在叶片中表达量最高,在根中表达量最低;通过qRT-PCR分析干旱、盐(NaCl)、高温和低温胁迫对dfr-miR160a及其靶基因DfARF10表达的影响。结果表明,在干旱和高温处理下, dfr-miR160a的表达均上调,但在NaCl处理下, dfr-miR160a的表达下调;低温处理下, dfr-miR160a的表达在0–1小时下调,在3–48小时上调。在NaCl、高温以及低温处理下DfARF10表达均上调;但在干旱处理下, DfARF10表达下调,与dfr-miR160a呈现相反的表达趋势。综上, dfr-miR160a靶向DfARF10基因且二者均能响应非生物胁迫。研究结果为从分子层面揭示香鳞毛蕨非生物胁迫抗性机制提供了新的科学依据。 展开更多
关键词 香鳞毛蕨 dfr-miR160a DfARF10 非生物胁迫
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Analysis and Verification of the Conserved MYB Binding Element in the DFR Promoter in Compositae
7
作者 Jialei Guo Fengzhen Li +2 位作者 Guomin Shi Weimin Zhao Tao He 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2024年第2期343-353,共11页
Anthocyanins,ubiquitous in the Compositae family,are regulated by MYB(v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog),playing an important role in anthocyanin synthesis.In this study,we analyzed the regulation path... Anthocyanins,ubiquitous in the Compositae family,are regulated by MYB(v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog),playing an important role in anthocyanin synthesis.In this study,we analyzed the regulation pathway in which the MYB protein of subgroup 6 promotes dihydroflavonol reductase(DFR)expression in Compositae,and validated this law in Saussurea medusa through yeast one-hybrid experiments.Our results showed that MYB and DFR underwent purification selection,DFR promoter analysis revealed the presence of MYB binding site(GAGTTGAATGG)and bHLH binding site(CANNTG)at the sense strand of 84–116 nucleotide residues from the start codon.These two motifs were separated by 9–10 nucleotide residues,as existed in the DFR promoters of many Compositae plants.Furthermore,the yeast one-hybrid experiment demonstrated that SmMYB1 can activate the promoter of SmDFR.Our results provide a reference for further functional study of DFR in Compositae. 展开更多
关键词 COMPOSITAE ANTHOCYANIN dfr gene MYB gene
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矮牵牛DFR-A基因的克隆与表达分析 被引量:3
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作者 褚云霞 陈海荣 +3 位作者 潘俊松 吴爱忠 蔡润 邓姗 《中国农学通报》 CSCD 2014年第10期163-169,共7页
通过分离矮牵牛DFR-A基因,研究其在不同部位的表达规律和酶活性变化,为花色素苷合成的结构基因分离及其他研究奠定基础。基于已公布的矮牵牛DFR序列,直接从矮牵牛花瓣中分离了DFRA基因序列,利用实时荧光定量PCR技术研究其在不同器官中... 通过分离矮牵牛DFR-A基因,研究其在不同部位的表达规律和酶活性变化,为花色素苷合成的结构基因分离及其他研究奠定基础。基于已公布的矮牵牛DFR序列,直接从矮牵牛花瓣中分离了DFRA基因序列,利用实时荧光定量PCR技术研究其在不同器官中的表达特性,同时测定了不同器官中的DFR酶活性。(1)矮牵牛DFR-A基因cDNA序列为1473 bp,该基因最大开放阅读框为1143 bp,编码380个氨基酸。(2)DFR-A基因在矮牵牛各种器官中均有表达,但不同组织中表达量存在差异,在花药中的表达量最高,其次是初开和盛开花瓣中,各期花蕾中的表达量都较低,而在叶中表达量最低。(3)DFR酶在叶片及花药中几乎无活性。在初开花瓣中达到最高峰。(4)除花药以外的部位,DFR酶活性与DFR mRNA浓度存在线性相关性。矮牵牛DFR酶活性主要受转录调控,活性在初开花瓣中最高。 展开更多
关键词 矮牵牛 dfr 基因克隆 实时荧光定量PCR dfr酶活性
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比利时杜鹃花 RhDFR 基因克隆及分析 被引量:4
9
作者 蒋宝鑫 汪庆昊 +3 位作者 杨国霞 贾永红 谢晓鸿 吴月燕 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期10-20,共11页
二氢黄酮醇-4-还原酶(DFR)是植物花青素合成过程中的关键酶,能够催化二氢黄酮醇生成无色花青素。该试验以红色和白色比利时杜鹃花(Rhododendron hybridum Hort.)不同器官和不同发育时期的花瓣为实验材料,利用反转录(RT-PCR)和RACE技术克... 二氢黄酮醇-4-还原酶(DFR)是植物花青素合成过程中的关键酶,能够催化二氢黄酮醇生成无色花青素。该试验以红色和白色比利时杜鹃花(Rhododendron hybridum Hort.)不同器官和不同发育时期的花瓣为实验材料,利用反转录(RT-PCR)和RACE技术克隆RhDFR基因,利用植物酶联免疫试剂盒(ELISA)测定不同发育时期的花瓣RhDFR酶活性,利用qRT-PCR技术定量分析不同器官和不同发育时期的花瓣RhDFR基因,构建pET-28a-RhDFR原核表达载体对RhDFR蛋白进行制备和纯化,为进一步探究杜鹃花DFR基因功能以及花色的分子机理奠定基础。结果表明:(1)成功获得比利时杜鹃花RhDFR基因全长1253 bp,其开放阅读框1035 bp,编码344个氨基酸,含有1个NADPH结合保守基序和1个底物结合区域,具有高度保守性;系统进化分析显示,比利时杜鹃花RhDFR蛋白与越橘(Vaccinium corymbosum)DFR蛋白亲缘关系最近。(2)ELISA试剂盒分析显示,比利时杜鹃花不同发育时期的花瓣DFR酶活性呈先上升后下降的趋势,并于红花初开期和白花盛开期的DFR酶活性最高。(3)qRT-PCR分析显示,不同器官中RhDFR基因的表达量为花瓣最高,雄蕊最低;不同发育时期的花瓣中,红色花的RhDFR基因表达量高于白色花。(4)成功构建原核表达载体pET-28a-RhDFR并诱导表达出大小约为38 kD的蛋白,与理论值相近。研究认为,杜鹃花中DFR酶活性的功能多样化,DFR基因与比利时杜鹃花花瓣的颜色有关。 展开更多
关键词 比利时杜鹃花 二氢黄酮醇-4-还原酶(dfr) Rhdfr酶活性 表达分析 原核表达
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石斛兰dfr基因的克隆、序列分析及原核表达 被引量:16
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作者 潘丽晶 张妙彬 +2 位作者 范干群 陈伟庭 曹友培 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期129-134,共6页
二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)在不同花色形成中起着关键作用。利用RT-PCR方法从石斛兰中克隆出dfr基因,并命名为Dendfr。该序列全长1164bp,编码352个氨基酸。氨基酸序列分析发现,DenDFR与3种兰科植物的DFR氨基酸序列同源性达81%~86%,与其... 二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)在不同花色形成中起着关键作用。利用RT-PCR方法从石斛兰中克隆出dfr基因,并命名为Dendfr。该序列全长1164bp,编码352个氨基酸。氨基酸序列分析发现,DenDFR与3种兰科植物的DFR氨基酸序列同源性达81%~86%,与其他非兰科植物的DFR氨基酸同源性在56%~72%之间。在DenDFRN-末端存在一个保守的NADP结合区,序列中存在26个氨基酸组成的底物特异结合区,其中134位氨基酸处存在特异的天冬酰胺N位点。将Dendfr的编码区克隆到pQE30载体中,在大肠杆菌中高效表达了该蛋白,为进一步研究石斛兰花色形成机制及花色改良基因工程打下基础。 展开更多
关键词 石斛兰 花色 dfr基因 克隆 序列分析 原核表达
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青海高原鼠疫菌DFR分型及空间分布特征的研究 被引量:11
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作者 杨晓艳 魏柏青 +8 位作者 辛有全 靳娟 何建 熊浩明 魏荣杰 祁美英 李存香 金泳 代瑞霞 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期387-389,396,共4页
目的青海高原鼠疫菌DFR分型及空间分布特征的研究。方法对分离到的青海省839株鼠疫菌,根据鼠疫菌差异区段(Different Region,DFR)分型,使用23个DFR和PMT1(质粒验证引物)的扩增引物,对被试菌株DNA进行PCR扩增。并运用青海省地方病预防控... 目的青海高原鼠疫菌DFR分型及空间分布特征的研究。方法对分离到的青海省839株鼠疫菌,根据鼠疫菌差异区段(Different Region,DFR)分型,使用23个DFR和PMT1(质粒验证引物)的扩增引物,对被试菌株DNA进行PCR扩增。并运用青海省地方病预防控制所地理信息系统(GIS)进行鼠疫菌基因型的空间分布特征的分析。结果 839株青海省鼠疫菌共包括11个基因型,即1b、5、7、8、10、14、21、30、32、44、36,其中32、44、36型为新基因型,青海高原以5型和8型为主,祁连山南麓和青海湖环湖地区的菌株绝大多数属于基因型8型,占56.14%(471/839);位于青南高原的菌株,其基因型主要为5型,占23.12%(194/839)。青藏高原青海田鼠鼠疫疫源地鼠疫菌基因组型全部为14型,占1.19%(10/839)。结论在青海省分离的鼠疫菌中,喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地鼠疫菌的基因型以5型和8型为主,青海田鼠疫源地鼠疫菌以基因型14型为主。 展开更多
关键词 青海高原 鼠疫菌 dfr分型 GIS 疫源地
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茄萼花色苷合成相关基因DFR和MYB克隆及表达分析 被引量:9
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作者 王海竹 曲红云 +1 位作者 周婷婷 徐启江 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第14期2781-2792,共12页
【目的】花色苷是一类通过类黄酮途径合成的水溶性次生代谢产物,既能使植物的不同器官呈现红、紫、蓝等颜色,还有利于人体健康。紫茄富含花色苷,但是有关茄萼花色苷生物合成的分子机制还不是很清楚。本研究旨在通过克隆茄萼花色苷合成... 【目的】花色苷是一类通过类黄酮途径合成的水溶性次生代谢产物,既能使植物的不同器官呈现红、紫、蓝等颜色,还有利于人体健康。紫茄富含花色苷,但是有关茄萼花色苷生物合成的分子机制还不是很清楚。本研究旨在通过克隆茄萼花色苷合成相关基因DFR和MYB,测定其在不同发育时期不同颜色茄萼中的表达量,探究DFR和MYB在茄萼花色苷合成中的作用。【方法】选用绿萼和紫萼长茄(Solanum melongena L.)果萼为试材,测定不同p H条件下茄萼花色苷含量;通过RACE方法分离克隆DFR和MYB cDNA全长序列,分析DFR和MYB的保守结构域及序列特征;分别对DFR和MYB及其同源蛋白序列进行系统进化分析,构建系统进化树来进一步分析鉴定基因;使用Ex PASy网站提供的在线分析软件SOPMA预测蛋白质二级结构;利用实时荧光定量PCR方法检测目的基因在不同发育阶段果萼中的表达情况。【结果】从绿萼和紫萼长茄果萼中克隆了DFR和MYB片段,分别命名为ouSmDFR、dongSmDFR和ouSmMYB、dongSmMYB,Gen Bank登录号分别为:KX224250、KX224251和KX224253、KX224254。ouSmDFR和dongSmDFR全长分别为1 285 bp和1 249 bp,开放阅读框为858 bp和864 bp,分别编码285个和287个氨基酸;ouSmMYB和dongSmMYB全长分别为969 bp和959 bp,开放阅读框均为462 bp,编码153个氨基酸。蛋白质二级结构分析表明α-螺旋和无规则卷曲均为两个DFR蛋白和两个MYB蛋白的主要二级结构元件。序列比对表明DFR蛋白具有NADPH结构域(NADPH binding domain)和底物特异性结合结构域(Substrate specific binding domain),属于NADB-Rossmann超基因家族;MYB蛋白属于R2R3-MYB转录因子,具有R2、R3两个MYB结构域和b HLH结合域。ouSmDFR和dongSmDFR与St DFR和Sl DFR具有相对较高的同源性;ouSmMYB和dongSmMYB与Es MYB同源性较高。花色苷含量测定显示,紫萼果茄萼花色苷含量较高且随着果实的发育成熟而逐渐增加;而绿萼茄萼几乎检测不到花色苷。荧光实时定量PCR分析表明,DFR和MYB在紫萼长茄果萼中表达量均远高于绿萼长茄;从初蕾期到盛花期,紫萼长茄果萼中DFR和MYB表达量逐渐升高,而绿萼长茄则几乎没有变化,与两个品种茄萼颜色变化相一致。【结论】ouSmDFR和dongSmDFR属于NADB-Rossmann超基因家族,ouSmMYB和dongSmMYB为典型R2R3-MYB转录因子,DFR和MYB在紫萼长茄果萼中表达明显高于绿萼长茄。推测DFR和MYB在茄萼呈色中发挥作用,并且参与花色苷生物合成。 展开更多
关键词 萼片 花色苷 dfr MYB 基因表达
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石斛兰dfr基因植物表达载体的构建 被引量:7
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作者 潘丽晶 范干群 +2 位作者 张妙彬 肖杨 曹友培 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期71-75,共5页
石斛兰花瓣缺乏橙色、蓝色,这与其二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)活性有着密切的关系。根据已报道的石斛兰dfr基因序列设计引物,从Den.Burana Emerald中分离了dfr基因。将该基因序列正向与反向连接到植物表达载体... 石斛兰花瓣缺乏橙色、蓝色,这与其二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)活性有着密切的关系。根据已报道的石斛兰dfr基因序列设计引物,从Den.Burana Emerald中分离了dfr基因。将该基因序列正向与反向连接到植物表达载体pCAM BIA1301中,并由组成型启动子CaMV35S驱动,成功构建了dfr基因的正义和反义植物表达载体pC-SDN1和pCSDN2,并导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefacien)EHA105,以期利用转基因技术培育出石斛兰花色新品种。 展开更多
关键词 石斛兰 dfr基因 正义 反义 植物表达载体
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朵丽蝶兰二氢黄酮醇4-还原酶基因DtpsDFR的克隆与表达分析 被引量:9
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作者 钟淮钦 黄敏玲 +2 位作者 吴建设 樊荣辉 林兵 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1375-1381,共7页
二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reduetase,DFR)是花色素苷合成途径中的一个关键酶。该研究利用RT-PCR和RACE技术从朵丽蝶兰‘满天红’深红色花瓣中克隆获得一个DFR基因,命名为DtpsDFR。该cDNA序列全长1 286 bp,编码378个氨基酸... 二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reduetase,DFR)是花色素苷合成途径中的一个关键酶。该研究利用RT-PCR和RACE技术从朵丽蝶兰‘满天红’深红色花瓣中克隆获得一个DFR基因,命名为DtpsDFR。该cDNA序列全长1 286 bp,编码378个氨基酸。氨基酸序列分析表明,DtpsDFR编码的蛋白与Bromheadia fi nlaysoniana、文心兰、大花蕙兰、石斛兰等兰科植物的DFR蛋白同源性均在76%以上,含有1个FR_SDR_e特征结构域,存在NADPH结合基序和底物特异性结合基序,属于NADB_Rossmann超家族;系统进化树显示,DtpsDFR与Bromheadia fi nlaysoniana的DFR蛋白亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析结果显示,DtpsDFR基因的表达量随着花的发育逐渐降低,凋谢期微量表达;在花瓣、萼片中的表达量高于唇瓣,在叶片和根中微量表达。 展开更多
关键词 朵丽蝶兰 dfr基因 CDNA克隆 基因表达
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甜樱桃DFR基因内含子2和内含子3的多态性 被引量:5
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作者 王廿 鄢锦辉 +3 位作者 张开春 王晶 张晓明 闫国华 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期320-329,共10页
【目的】研究70个甜樱桃品种DFR基因多态性与果皮颜色的相关性。【方法】通过DNA序列分析,以不同果皮颜色的10个甜樱桃品种(Prunus avium L.)为材料,检测DFR基因的多态性。根据多态性出现的位点设计特异引物,通过PCR扩增检测70个甜樱桃... 【目的】研究70个甜樱桃品种DFR基因多态性与果皮颜色的相关性。【方法】通过DNA序列分析,以不同果皮颜色的10个甜樱桃品种(Prunus avium L.)为材料,检测DFR基因的多态性。根据多态性出现的位点设计特异引物,通过PCR扩增检测70个甜樱桃品种DFR基因的多态性。【结果】获得甜樱桃DFR基因约1 kb的片段,测序结果用BLAST分析发现,其核苷酸序列与樱桃李(Prunus cerasifera)的核苷酸相似性为80%,预测的氨基酸序列与已知的甜樱桃(P.avium)DFR氨基酸序列相似性达99%。该片段由3个外显子和3个内含子组成,2个多态性位点分别在内含子2和内含子3上。在黄色、黄底红晕和红色果皮3个组的70个甜樱桃品种中发现3个单倍型,共5种单倍型组合。通过SAS 9.0软件分析发现,所检测到的DFR基因的等位基因频率在黄底红晕果皮品种组和红色品种果皮组中的分布无显著差异。【结论】本研究在甜樱桃DFR基因座上得到2个差异位点,分别在内含子2和内含子3内,其优势基因频率依次为:0.864和0.679;但未发现DFR基因内含子2和内含子3的多态性与果皮颜色之间存在直接关系。 展开更多
关键词 甜樱桃 dfr基因 果皮颜色 等位基因频率 基因多态性
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基于DFR的疲劳加速腐蚀因子模型与分析 被引量:7
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作者 贺小帆 刘文珽 向锦武 《应用力学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第3期445-449,共5页
针对腐蚀条件下飞机结构疲劳分析问题,考虑地面停放预腐蚀的影响,建立了基于疲劳强度的加速腐蚀因子分析方法。以DFR作为结构疲劳强度的度量,以预腐蚀后的疲劳寿命服从双参数威布尔分布为基础,建立了DFR随预腐蚀时间的变化规律,推导得... 针对腐蚀条件下飞机结构疲劳分析问题,考虑地面停放预腐蚀的影响,建立了基于疲劳强度的加速腐蚀因子分析方法。以DFR作为结构疲劳强度的度量,以预腐蚀后的疲劳寿命服从双参数威布尔分布为基础,建立了DFR随预腐蚀时间的变化规律,推导得到了加速腐蚀因子的表达式,以及加速腐蚀因子与腐蚀时间无关的结论;并构造了参数估计的线性模型,得到了加速腐蚀因子估计量的近似分布,对其进行了统计分析。 展开更多
关键词 腐蚀 预腐蚀 加速腐蚀 dfr 加速因子 疲劳 可靠性
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腐蚀环境下疲劳分析的DFR方法研究 被引量:12
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作者 张建宇 鲍蕊 +1 位作者 陈勃 费斌军 《北京航空航天大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期547-550,共4页
将腐蚀对结构件疲劳寿命的影响当量转化为对细节疲劳额定值DFR的影响 ,建立了腐蚀条件下疲劳分析的DFR方法 .通过对标准S N曲线方程的变换 ,得到了DFR的腐蚀当量折算系数与腐蚀对疲劳寿命的影响系数之间的关系 ,并研究了其中的参数对当... 将腐蚀对结构件疲劳寿命的影响当量转化为对细节疲劳额定值DFR的影响 ,建立了腐蚀条件下疲劳分析的DFR方法 .通过对标准S N曲线方程的变换 ,得到了DFR的腐蚀当量折算系数与腐蚀对疲劳寿命的影响系数之间的关系 ,并研究了其中的参数对当量折算系数的精度的影响 ,从而给出了由疲劳试验确定当量折算系数的方法 .基于地面停放预腐蚀和空中飞行腐蚀疲劳对疲劳寿命的影响相互独立的假设 ,得出了当量折算系数对预腐蚀和腐蚀疲劳的分解方法 . 展开更多
关键词 腐蚀疲劳 疲劳寿命 dfr
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二氢黄酮醇4-还原酶基因(DFR)与花色的修饰 被引量:40
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作者 刘娟 冯群芳 张杰 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2005年第6期715-719,共5页
二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)是花色素苷生化合成途径中的一个关键酶,在花色的修饰中起重要作用。目前,已从多种植物中分离到了DFR基因。文章介绍DFR同源基因的结构与时空表达特性、构建的系统进化树所体现的部分单子叶与双子叶植物间亲缘... 二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)是花色素苷生化合成途径中的一个关键酶,在花色的修饰中起重要作用。目前,已从多种植物中分离到了DFR基因。文章介绍DFR同源基因的结构与时空表达特性、构建的系统进化树所体现的部分单子叶与双子叶植物间亲缘关系与进化差异以及DFR的转基因研究进展。 展开更多
关键词 dfr 花色 转基因花卉 基因工程
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棕色棉DFR基因的克隆与生物信息学分析 被引量:5
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作者 肖向文 朱奇朗 +6 位作者 刘海峰 王俊铎 罗城 曾闻 梁亚军 龚兆龙 李晓波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期88-95,共8页
花色素苷是影响花色的主要色素,二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)基因是花色素苷生物合成途径的关键酶基因。通过同源克隆策略,以新彩棉6号(XC-6)纤维的RNA以及DNA为模板克隆得到GhDFR基因的CDS全长编码序列及带有内含子的基因组序列,并进行了... 花色素苷是影响花色的主要色素,二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)基因是花色素苷生物合成途径的关键酶基因。通过同源克隆策略,以新彩棉6号(XC-6)纤维的RNA以及DNA为模板克隆得到GhDFR基因的CDS全长编码序列及带有内含子的基因组序列,并进行了生物信息学分析。序列分析结果显示,该基因含有6个外显子,5个内含子结构,其cDNA包含一个1 020 bp的开放阅读框,编码355个氨基酸,其氨基酸序列包含具有高度保守性的NADP(H)的结合位点以及底物特异性结合位点。推定的GhDFR蛋白质分子量为39.65 kD,等电点为5.67。该蛋白氨基酸序列同毛果杨、葡萄、天竺葵等物种DFR蛋白显示出较高同源性,而系统进化分析结果表明其与天竺葵、芍药DFR亲缘关系较近。氨基酸序列分析预测表明,GhDFR基因所编码的蛋白不具备信号肽区段,无明显跨膜区域,不属于分泌蛋白,可能为亲水性蛋白,定位于细胞质的可能性最高,其主要二级结构元件为α-螺旋和无规则卷曲。GhDFR属于NADB-Rossmann superfamily。 展开更多
关键词 二氢黄酮-4-还原酶(dfr) 天然彩色棉 基因克隆 花色素苷
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基于3DFR算法的爆破块度图像处理研究及其应用 被引量:6
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作者 赵国彦 戴兵 +2 位作者 马驰 张雷 王珊 《中南大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第5期2002-2007,共6页
考虑地下矿山拍照时的低对比度、噪声的干扰及灰度的不确定性等因素的特殊条件,提出适合地下矿山大块率测定的3DFR算法图像处理技术:首先,根据概率论确定三维直方图中目标与背景的区域;然后,通过模糊熵求极大值原理选取三维阈值,进而对... 考虑地下矿山拍照时的低对比度、噪声的干扰及灰度的不确定性等因素的特殊条件,提出适合地下矿山大块率测定的3DFR算法图像处理技术:首先,根据概率论确定三维直方图中目标与背景的区域;然后,通过模糊熵求极大值原理选取三维阈值,进而对图像进行处理;选取9组关于爆破块度的照片进行分割处理,并与OTSU法和传统方法进行分割结果对比评价。为了进一步考察3DFR算法图像处理技术的准确性,与现场实际测量结果进行对比和相关性分析。研究结果表明:3DFR算法图像处理结果与现场实际测量结果较吻合,相关性系数达到0.955,为地下矿山爆破大块率安全、准确、高效的测定提供了一条途径,并可用于地下矿山爆破参数优化。 展开更多
关键词 爆破块度 3dfr算法 图像分割 最佳阈值
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