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转Bt cry1Ah/cry1Ie双价基因抗虫玉米的研究 被引量:14
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作者 杨召军 郎志宏 +3 位作者 张杰 宋福平 何康来 黄大昉 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期39-45,共7页
构建了含有人工改造的抗虫基因Bt cry1Ah、cry1Ie和耐除草剂基因2mG2-epsps的植物表达载体pMUHUESGM,利用基因枪法将表达盒片段转化玉米愈伤组织,以2mG2-epsps基因为筛选标记基因,经草甘膦异丙胺盐筛选获得24株T0代再生植株,其中PCR检... 构建了含有人工改造的抗虫基因Bt cry1Ah、cry1Ie和耐除草剂基因2mG2-epsps的植物表达载体pMUHUESGM,利用基因枪法将表达盒片段转化玉米愈伤组织,以2mG2-epsps基因为筛选标记基因,经草甘膦异丙胺盐筛选获得24株T0代再生植株,其中PCR检测阳性植株有20株。T0和T1代植株的分子检测结果证明了外源基因已经整合到玉米基因组中并能够稳定遗传和表达,转基因株系在田间生物活性检测中表现出较好的抗虫性,这为培育抗虫玉米新品种提供了参考,同时本研究中采用了基因枪片段转化法,提高了转基因的生物安全性。 展开更多
关键词 BT cry1Ah基因 Btcry1ie基因 2mG2-epsps基因 转基因玉米
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抗虫基因Cry1Iem转化大豆的研究 被引量:6
2
作者 何欢 高嵩 +3 位作者 韩丹 吴楠 曲静 王丕武 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期665-669,共5页
通过花粉管通道法将pCMBIA3300-Cry1Iem载体中的Cry1Iem基因转入大豆品种"吉农28"中,对经过抗草铵膦筛选的转基因植株进行PCR检测,初步确定阳性植株,对转基因阳性植株进行Southern blotting检测,结果发现有5株出现杂交信号,证... 通过花粉管通道法将pCMBIA3300-Cry1Iem载体中的Cry1Iem基因转入大豆品种"吉农28"中,对经过抗草铵膦筛选的转基因植株进行PCR检测,初步确定阳性植株,对转基因阳性植株进行Southern blotting检测,结果发现有5株出现杂交信号,证明Cry1Iem基因整合到受体的基因组中。利用实时荧光定量PCR测定T1代阳性植株的Cry1Iem基因在mRNA水平上的表达量,证明Cry1Iem基因在受体材料中获得了表达。 展开更多
关键词 大豆 花粉管通道法 cry1iem基因 SOUTHERN BLOTTING 荧光定量PCR
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不同启动子表达Cry1Ie蛋白的特性分析 被引量:5
3
作者 张春鸽 赵灿 +4 位作者 束长龙 孙冰 宋福平 高继国 张杰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期192-196,共5页
苏云金芽胞杆菌启动子P1Ac与T7启动子表达的Cry1Ie蛋白对鳞翅目害虫小菜蛾(Plutella xylostella)幼虫的杀虫活性有较大差异。P1Ac启动子表达的Cry1Ie蛋白LC50为1.73μg/mL,T7启动子表达的Cry1Ie蛋白LC50为18.18μg/mL,后者是前者的10.5... 苏云金芽胞杆菌启动子P1Ac与T7启动子表达的Cry1Ie蛋白对鳞翅目害虫小菜蛾(Plutella xylostella)幼虫的杀虫活性有较大差异。P1Ac启动子表达的Cry1Ie蛋白LC50为1.73μg/mL,T7启动子表达的Cry1Ie蛋白LC50为18.18μg/mL,后者是前者的10.5倍。主要从形态、碱溶性及抗胰蛋白酶稳定性等方面对其进行了初步的探索。结果显示,两者在形态上无显著差异,均有相对较为规则的颗粒存在;在碱溶性方面无显著差异,均有约20.0%的包涵体能溶解于pH10.5 50.0 mmol/L Na2CO3的溶液;在对抗胰蛋白酶的稳定性方面无明显差异,由此说明这三方面都不是二者活性差异的原因,推测是T7启动子表达的Cry1Ie蛋白折叠不正确导致其活性较差。 展开更多
关键词 cry1Ac基因启动子P1Ac T7启动子 大肠杆菌 cry1ie蛋白 表达
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Cry1Ie基因在大肠杆菌中的表达及等同性鉴定 被引量:4
4
作者 徐海滨 张晓霞 +2 位作者 李芳 王国英 刘允军 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期45-48,共4页
目的以Cry1Ie基因表达蛋白为模式蛋白,建立外源基因表达蛋白的技术平台。方法利用大肠杆菌系统高效表达Cry1Ie蛋白,并采用SDS-PAGE技术分离纯化,通过生物学活性和免疫反应性2项指标检测了大肠杆菌表达蛋白与转基因玉米中蛋白的等同性。... 目的以Cry1Ie基因表达蛋白为模式蛋白,建立外源基因表达蛋白的技术平台。方法利用大肠杆菌系统高效表达Cry1Ie蛋白,并采用SDS-PAGE技术分离纯化,通过生物学活性和免疫反应性2项指标检测了大肠杆菌表达蛋白与转基因玉米中蛋白的等同性。结果大肠杆菌表达系统可以产生大量的Cry1Ie蛋白,所获得的蛋白与转Cry1Ie玉米表达的Cry1Ie蛋白有相同的免疫反应性和生物活性。结论大肠杆菌表达系统可以作为Cry1Ie外源基因蛋白表达技术平台用于转基因植物食用安全性的初步研究。 展开更多
关键词 转基因玉米 cry1ie蛋白 大肠杆菌 实质等同性 蛋白表达和纯化
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转cry1Ie基因玉米残体对赤子爱胜蚓的生长发育及体内酶活性的影响 被引量:4
5
作者 崔蕾 白树雄 +3 位作者 张天涛 刘允军 何康来 王振营 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2014年第4期466-471,共6页
转Bt基因抗虫玉米通过根系分泌物或植株残体降解等方式将植株表达的Bt杀虫蛋白释放到土壤中。本文通过在人工土壤中添加磨碎的转cry1Ie基因玉米植株残体来饲养赤子爱胜蚓Eisenia foetida,研究了转cry1Ie基因玉米植株残体对赤子爱胜蚓生... 转Bt基因抗虫玉米通过根系分泌物或植株残体降解等方式将植株表达的Bt杀虫蛋白释放到土壤中。本文通过在人工土壤中添加磨碎的转cry1Ie基因玉米植株残体来饲养赤子爱胜蚓Eisenia foetida,研究了转cry1Ie基因玉米植株残体对赤子爱胜蚓生长发育及体内酶活性的影响。结果显示,在63 d的试验中,添加转cry1Ie基因玉米植株残体处理组没有引起赤子爱胜蚓的死亡。5个处理组与对照组中每7 d的蚯蚓体重、产茧数量、茧孵化数量均没有显著差异。SOD酶和POD酶活力随Bt玉米植株残体组织含量的增加而增加,50B+0N(50 g Bt/500 g土壤)处理组中SOD酶和POD酶活力要显著高于0B+50N(50 g non-Bt/500 g土壤)对照组。因此,Bt玉米植株残体可以在7 d时诱导赤子爱胜蚓SOD酶和POD酶活性。但5个处理组与对照组中赤子爱胜蚓的总蛋白含量、AChE和CAT酶活力没有显著的差异。 展开更多
关键词 cry1ie基因玉米 赤子爱胜蚓 生长发育 酶活性
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农杆菌介导大豆子叶节转化cry1Iem基因 被引量:3
6
作者 钱雪艳 郭东全 +6 位作者 姚瑶 杨向东 杨静 邢国杰 牛陆 李启云 董英山 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期757-763,共7页
利用农杆菌介导法,以东北地区种植的9个大豆基因型和国外品种Williams82的子叶节为外植体,将抗虫基因cry1Iem转入栽培大豆品种中。共转化外植体1 459个,获得84棵再生植株。采用除草剂叶片涂抹法、PCR及Bar蛋白试纸条检测法对得到大豆再... 利用农杆菌介导法,以东北地区种植的9个大豆基因型和国外品种Williams82的子叶节为外植体,将抗虫基因cry1Iem转入栽培大豆品种中。共转化外植体1 459个,获得84棵再生植株。采用除草剂叶片涂抹法、PCR及Bar蛋白试纸条检测法对得到大豆再生植株进行鉴定,转cry1Iem基因大豆T_0阳性植株为61株。对部分T_1转基因植株的遗传分析表明,外源基因能够稳定遗传到下一代。通过对部分T_1阳性转基因植株进行Southern blot分析,证明目的基因片段均已整合到受体大豆的基因组DNA中,单拷贝率为22%左右。对获得的部分T_2材料进行了室内抗大豆食心虫鉴定,有2份转基因材料抗性较对照显著提高。 展开更多
关键词 大豆 遗传转化 cry1iem基因 子叶节
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Cry1Ie蛋白的模拟胃肠液消化稳定性及热稳定性分析 被引量:8
7
作者 李欣竹 耿丽丽 +1 位作者 高继国 张杰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期214-221,共8页
Cry1Ie蛋白对亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)具有高毒力,cry1Ie基因已经应用于转基因抗虫玉米的种质创制。为评价Cry1Ie蛋白的食用安全性,开展了Cry1Ie蛋白的消化及热稳定性研究。利用实验室已经构建的表达载体,在大肠杆菌中表达了分... Cry1Ie蛋白对亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)具有高毒力,cry1Ie基因已经应用于转基因抗虫玉米的种质创制。为评价Cry1Ie蛋白的食用安全性,开展了Cry1Ie蛋白的消化及热稳定性研究。利用实验室已经构建的表达载体,在大肠杆菌中表达了分子量为81 k D的可溶性Cry1Ie蛋白,经过Ni-NTA亲和层析和Superdex-75分子筛层析获得纯度达91%蛋白。模拟消化液实验结果表明,Cry1Ie蛋白在模拟胃肠液中15 s内即被消化,SDS-PAGE未检测到蛋白残留。热稳定性实验中,Cry1Ie蛋白在玉米粉提取液中不稳定,100℃30 min内蛋白基本降解。对样品进行了生物活性测定发现,经模拟胃肠液消化处理和热处理后的Cry1Ie蛋白对亚洲玉米螟无杀虫活性。Cry1Ie蛋白在胃肠液系统中和热处理条件下均不稳定,并丧失了对亚洲玉米螟的杀虫活性。 展开更多
关键词 转基因玉米 cry1ie蛋白 消化稳定性 热稳定性 杀虫活性
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转抗虫基因Cry1Iem大豆的分子鉴定与功能验证 被引量:4
8
作者 张林 金羽琨 +1 位作者 孟祥鹏 王丕武 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期104-111,共8页
通过转抗虫基因来提高作物的抗虫性是一条有效途径,以此来提高作物的产量和品质。本研究以转抗虫基因Cry1Iem大豆的T2、T3株系作为试验材料,利用常规PCR检测、Southern杂交、荧光定量PCR技术对转抗虫基因Cry1Iem株系进行分子鉴定;同时... 通过转抗虫基因来提高作物的抗虫性是一条有效途径,以此来提高作物的产量和品质。本研究以转抗虫基因Cry1Iem大豆的T2、T3株系作为试验材料,利用常规PCR检测、Southern杂交、荧光定量PCR技术对转抗虫基因Cry1Iem株系进行分子鉴定;同时对40个转基因阳性株系进行室内人工接虫、200个转基因阳性株系室外网室接虫并进行抗虫性鉴定。选取其中10个株系进行常规PCR检测,结果在T2、T3当中都检测到了Cry1Iem、Bar、启动子CaMV35S、Nos目标片段,表明目的基因已被顺利导入受体JN28大豆植株当中并得到了稳定遗传;选取其中5个T2、T3转基因株系进行Southern杂交,结果显示:目的基因以单拷贝的形式整合到了大豆基因组当中;荧光定量PCR检测结果表明,Cry1Iem基因在选取的3个转基因株系中均得到了表达,而在非转化的受体JN28当中未检测到荧光信号。室内抗虫性鉴定结果显示40个转Cry1Iem基因株系豆荚内活虫的成活数量明显低于受体材料JN28大豆豆荚内的活虫数量,表明转基因材料具有显著的抗虫性。室外抗虫性鉴定结果表明:JN28大豆受体植株的虫食率为6.72%,属于感虫品种;而200个转Cry1Iem基因株系的平均虫食率为3.81%,属于抗虫品系。本研究结果为中国转基因抗虫大豆新品种的选育提供部分参考数据。 展开更多
关键词 转抗虫基因 cry1iem大豆 分子鉴定 功能验证
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沉默尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶基因OfUGT逆转亚洲玉米螟对Cry1Ie蛋白的抗性
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作者 林雅玲 何康来 +2 位作者 王振营 尚素琴 张天涛 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2023年第4期834-841,共8页
转Bacillus thuringiensis(Bt)基因作物在害虫防治中应用较多,但长期种植转Bt基因作物,靶标害虫不可避免会对杀虫蛋白产生抗性,如何进行抗性治理是当前面临的难题。本研究基于前期转录组分析结果,定量分析了尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶... 转Bacillus thuringiensis(Bt)基因作物在害虫防治中应用较多,但长期种植转Bt基因作物,靶标害虫不可避免会对杀虫蛋白产生抗性,如何进行抗性治理是当前面临的难题。本研究基于前期转录组分析结果,定量分析了尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶基因(Of UGT)在亚洲玉米螟Cry1Ie抗性品系(ACB-IeR)及敏感品系(ACB-Bt S)的表达量,利用RNA干扰技术(RNAi)对ACB-IeR品系Of UGT基因进行沉默,并通过毒力测定试验来检验干扰效果。Of UGT基因在ACB-Ie R三龄幼虫中相对表达量高于ACB-Bt S,并且注射ds UGT后该基因表达量下降。Cry1Ie抗性品系的致死中浓度大于1000.00μg/g,在蛋白浓度为500.00μg/g时,注射ds UGT和ds GFP后的幼虫存活率没有显著性差异,但较空白对照组存活率显著降低;在蛋白浓度为1000.00μg/g时,注射ds GFP后的幼虫存活率较空白对照组降低,注射ds UGT后的幼虫存活率较空白对照和注射ds GFP的都显著降低。由结果可以看出RNAi沉默OfUGT基因后可以降低抗性品系亚洲玉米螟对Cry1Ie蛋白的抗性,但对抗性的逆转程度还需要后续更进一步的研究。 展开更多
关键词 亚洲玉米螟 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶 RNA干扰 cry1ie 抗性逆转
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抗虫蛋白Cry1Ie在大肠杆菌中的表达、纯化及等同性
10
作者 张小霞 严卫星 徐海滨 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第A03期324-325,共2页
关键词 cry1ie蛋白 大肠杆菌表达系统 等同性
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2015—2021年亚洲玉米螟对Cry1Ie杀虫蛋白的敏感性监测 被引量:1
11
作者 王月琴 静大鹏 +2 位作者 刘凯强 王振营 何康来 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期405-412,共8页
为明确亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis田间种群对Cry1Ie杀虫蛋白的敏感性,于2015—2021年连续7年从黄淮海夏玉米区和北方春玉米区7省14地采集亚洲玉米螟田间种群,采用人工饲料混合法评价其对Cry1Ie杀虫蛋白的敏感性。结果表明,Cry1Ie杀... 为明确亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis田间种群对Cry1Ie杀虫蛋白的敏感性,于2015—2021年连续7年从黄淮海夏玉米区和北方春玉米区7省14地采集亚洲玉米螟田间种群,采用人工饲料混合法评价其对Cry1Ie杀虫蛋白的敏感性。结果表明,Cry1Ie杀虫蛋白对54个亚洲玉米螟田间种群的抑制中浓度LC50介于0.65~6.28μg/g之间,其中对2016年齐齐哈尔种群的LC50最低,对2017年肇东种群的LC50最高;LC95介于4.99~70.29μg/g之间,其中对2015年合肥种群的LC95最低,对2017年松原种群的LC50最高。在LC50水平上,相较于室内对照种群,最敏感种群和最不敏感种群分别为2018年铁岭种群和2017年肇东种群,抗性倍数分别为0.26和1.17。虽然各地理种群对Cry1Ie杀虫蛋白的敏感性存在差异,但均处于敏感水平,且是自然选择的结果,表明Cry1Ie杀虫蛋白可用于亚洲玉米螟田间种群的防治。 展开更多
关键词 亚洲玉米螟 cry1ie杀虫蛋白 地理种群 LC50 抗性监测 敏感性
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不同遗传背景转基因玉米CM8101对亚洲玉米螟的抗虫性
12
作者 燕树锋 刘海芳 +1 位作者 许暠昱 张子豪 《分子植物育种》 北大核心 2025年第15期5054-5060,共7页
为研究不同遗传背景的转基因抗虫玉米CM8101对亚洲玉米螟的抗性表现,本研究以转基因玉米CM8101-105和CM8101-111为材料,以其相应遗传背景‘中单105’和‘中单111’及普通玉米‘郑单958’为对照,进行了不同时期人工接虫鉴定。心叶期接虫... 为研究不同遗传背景的转基因抗虫玉米CM8101对亚洲玉米螟的抗性表现,本研究以转基因玉米CM8101-105和CM8101-111为材料,以其相应遗传背景‘中单105’和‘中单111’及普通玉米‘郑单958’为对照,进行了不同时期人工接虫鉴定。心叶期接虫结果表明转基因玉米CM8101-105和CM8101-111虫害级别均为1级,对亚洲玉米螟表现为高抗;收获期雌穗调查结果表明,不同遗传背景的CM8101对亚洲玉米螟均表现为高抗,雌穗单株蛀孔数、单株隧道长度和危害级别等指标均显著低于对照组。此外,收获期剖秆结果表明,不同遗传背景的CM8101茎秆未受到亚洲玉米螟危害,茎秆单株蛀孔数、单株隧道长度、单株存活幼虫数量等指标均显著低于对照组。综上所述,抗虫基因cry1Ab-Ma在不同遗传背景玉米中均能稳定表达,转基因玉米的叶片、雌穗、茎秆等器官对亚洲玉米螟均有优良的抗性,转基因抗虫玉米CM8101具有重要的生产应用价值,该研究为培育具有中国自主知识产权的转基因抗虫玉米新品种提供依据。 展开更多
关键词 玉米 苏云金芽孢杆菌 cry1Ab-Ma基因 抗虫性鉴定 亚洲玉米螟
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苏云金芽胞杆菌cry1Ie新基因的克隆、表达与生物活性测定 被引量:2
13
作者 余宗兰 贺利业 +3 位作者 龚莉 黄刚辉 李平 郑爱萍 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期201-206,共6页
为获得新的鳞翅目害虫杀虫基因,根据已知cry1I类基因编码区设计简并引物,采用直接克隆法,以苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株BN23-5质粒DNA为模板进行扩增,并对得到的基因进行鉴定和分析。结果表明:克隆得到一个完整的cry... 为获得新的鳞翅目害虫杀虫基因,根据已知cry1I类基因编码区设计简并引物,采用直接克隆法,以苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株BN23-5质粒DNA为模板进行扩增,并对得到的基因进行鉴定和分析。结果表明:克隆得到一个完整的cry1Ie基因,全长2 160 bp,由719个氨基酸组成,该氨基酸序列与已知的4种Cry1Ie蛋白不同,与Cry1Ie2和Cry1Ie3的氨基酸序列同源性最高,为95.4%,被国际Bt杀虫晶体蛋白基因命名委员会命名为Cry1Ie5(登录号为KJ710646)。将该基因插入表达载体p ET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG低温诱导成功表达,SDS-PAGE电泳验证其大小为81 k D,与预测的分子量相符合。生物活性测定表明,Cry1Ie5表达的包涵体蛋白对小菜蛾和亚洲玉米螟具有杀虫活性,LC_(50)分别为0.43μg/m L和48.39μg/m L;对棉铃虫的致死率不高,但能明显抑制其生长;对甜菜夜蛾没有杀虫活性。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 cry1ie5基因 鳞翅目害虫 克隆
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苏云金芽胞杆菌可视化快速表达载体的构建与特性分析
14
作者 张静安 胡孝龙 +5 位作者 曹蓓蓓 廖敏 束长龙 张杰 王奎 操海群 《生物技术通报》 北大核心 2025年第1期95-102,共8页
【目的】构建可以快速高效表达苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫基因的表达载体,提高Bt杀虫基因发掘及功能研究效率。【方法】以pUC18载体为基础,构建一个以cry1Ac基因启动子p1Ac指导、融合绿色荧光蛋白GFP的可视化快速... 【目的】构建可以快速高效表达苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫基因的表达载体,提高Bt杀虫基因发掘及功能研究效率。【方法】以pUC18载体为基础,构建一个以cry1Ac基因启动子p1Ac指导、融合绿色荧光蛋白GFP的可视化快速表达载体p1Ac-GFP,并从生物活性、碱溶性、抗胰蛋白酶稳定性、培养条件等方面对其进行分析。【结果】p1Ac-GFP在大肠杆菌中指导表达的Cry1Ac蛋白与Bt来源的蛋白在杀虫活性方面无明显差异。同时,p1Ac-GFP表达的Cry1Ac蛋白能够溶解于50 mmol/L Na_(2)CO_(3)溶液中,可溶性组分可被胰蛋白酶消化为60 kD大小的核心活性片段。此外,p1Ac-GFP大肠杆菌宿主菌株可以发出绿色荧光,培养菌液荧光强度与所表达的Bt蛋白浓度呈较好的线性关系。培养条件优化结果显示,37℃、培养液与装瓶体积比为5/5、48 h的培养时间最适合p1Ac-GFP表达Bt Cry1Ac蛋白。【结论】p1Ac-GFP表达Bt蛋白时可以直接使用菌液荧光强度作为生物活性测定的浓度指示依据,有助于Bt基因杀虫活性功能的快速批量筛选。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 杀虫基因 cry1Ac启动子 大肠杆菌 表达载体
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云南草地贪夜蛾田间种群对Bt毒素的抗性基因频率监测研究
15
作者 康强强 靳明辉 +3 位作者 杨现明 吴孔明 李怡萍 萧玉涛 《环境昆虫学报》 北大核心 2025年第5期1440-1446,共7页
转基因Bt作物的广泛应用和产业化推广不仅有效遏制了虫害的大规模暴发,显著减少了化学农药的施用量,更重要的是缓解了由此带来的农药残留及环境污染问题。为了监测我国云南地区草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda田间种群对Bt毒素的抗性,... 转基因Bt作物的广泛应用和产业化推广不仅有效遏制了虫害的大规模暴发,显著减少了化学农药的施用量,更重要的是缓解了由此带来的农药残留及环境污染问题。为了监测我国云南地区草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda田间种群对Bt毒素的抗性,本研究以云南寻甸地区草地贪夜蛾田间种群为研究对象,通过F2代结合诊断剂量法对草地贪夜蛾田间种群进行抗性监测,系统评估了该地区草地贪夜蛾对Bt毒素的抗性水平。检测结果显示,仅发现3个单雌系对Cry1Ab具有低频抗性(抗性等位基因频率为0.006),而对Vip3Aa仍保持高度敏感。本研究表明云南地区草地贪夜蛾种群尚未形成明显抗性,这为该区域Bt转基因作物的可持续推广提供了重要科学依据,并建议继续开展长期监测和抗性治理策略研究。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 苏云金芽孢杆菌 CRY1AB Vip3Aa 抗性基因频率
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抗虫转基因玉米对草地贪夜蛾的室内抗性水平鉴定
16
作者 熊梅 宋君 +4 位作者 魏超 李辉 杨强 代晓航 刘文娟 《湖南农业科学》 2025年第3期61-66,共6页
分别以转Cry1Ab基因和转Vip3Aa20基因的转基因玉米为供体,通过传统杂交育种的方式,将Cry1Ab基因和Vip3Aa20基因转入先达901玉米中,采用室内离体组织生物测定的方法来评价抗虫转基因玉米对草地贪夜蛾的抗性水平,采用酶联免疫方法检测外... 分别以转Cry1Ab基因和转Vip3Aa20基因的转基因玉米为供体,通过传统杂交育种的方式,将Cry1Ab基因和Vip3Aa20基因转入先达901玉米中,采用室内离体组织生物测定的方法来评价抗虫转基因玉米对草地贪夜蛾的抗性水平,采用酶联免疫方法检测外源蛋白含量,生测结果与蛋白检测结果相互印证。结果表明:转基因玉米先达901在各时期各组织中均能稳定高剂量表达外源蛋白Cry1Ab和Vip3Aa20,且对草地贪夜蛾的致死作用强,具有较好的商业化应用前景。 展开更多
关键词 抗虫转基因玉米 草地贪夜蛾 室内抗性鉴定 Cry1Ab蛋白 Vip3Aa20蛋白
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CRY1/2在糖脂代谢调控中的作用研究进展
17
作者 陈雨桐 赵之强 +1 位作者 仝永斌 刘钰瑜 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第9期1607-1612,共6页
CRY1/2作为生物钟系统的重要转录调节因子,在机体代谢稳态维持中起着关键作用。该文通过对既有研究的分析,重点探讨了CRY1/2对糖代谢和脂代谢的调控机制。CRY1在糖异生、糖酵解及胰岛素分泌中发挥着重要调控作用,其通过调控关键酶的表达... CRY1/2作为生物钟系统的重要转录调节因子,在机体代谢稳态维持中起着关键作用。该文通过对既有研究的分析,重点探讨了CRY1/2对糖代谢和脂代谢的调控机制。CRY1在糖异生、糖酵解及胰岛素分泌中发挥着重要调控作用,其通过调控关键酶的表达,维持血糖稳态。此外,CRY1/2通过调控脂肪合成和吸收,参与脂质代谢的调控,影响体内能量平衡。该文还讨论了CRY1/2在肥胖及外源物解毒中的潜在应用前景,指出其作为治疗靶点的潜在价值。CRY1/2作为代谢调控的核心因子,具有重要的临床应用前景,深入理解CRY1/2在糖脂代谢调控中的分子机制,将为慢性代谢性疾病的治疗提供新的思路与策略。 展开更多
关键词 CRY1/2 糖代谢 脂代谢 胰岛素抵抗 肥胖 调控机制
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分子选择结合回交转育培育转基因抗虫水稻‘吉科稻早1(cry1C*)’
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作者 李俊财 厉书媛 +5 位作者 王宏杰 朱国北 董文文 徐博阳 李开忠 李赵博 《分子植物育种》 北大核心 2025年第2期457-466,共10页
为了培育适应于吉林省中早熟稻区的抗螟虫水稻品种,以水稻‘HD1’为cry1C*及bar基因供体,以‘吉科稻早1’为受体品种,利用cry1C*基因内分子标记及耐Basta性进行前景选择,利用37个SSR标记进行背景选择,结合回交转育创制‘吉科稻早1(cry1... 为了培育适应于吉林省中早熟稻区的抗螟虫水稻品种,以水稻‘HD1’为cry1C*及bar基因供体,以‘吉科稻早1’为受体品种,利用cry1C*基因内分子标记及耐Basta性进行前景选择,利用37个SSR标记进行背景选择,结合回交转育创制‘吉科稻早1(cry1C*)’导入系。对导入系进行Bt蛋白质含量检测、抗虫性、耐冷性、抗稻瘟病性和田间农艺性状鉴定,选择抗虫版的水稻‘吉科稻早1’。通过对供体亲本和受体亲本杂交、4次回交、2次自交的各世代水稻材料进行分子选择,创制了携带cry1C*及bar基因、检测分子标记遗传背景恢复率100%的‘吉科稻早1(cry1C*)’导入系3个(导入系1,导入系2和导入系3)。其中的导入系1叶片Bt蛋白质含量及抗虫性与供体类似,孕穗期耐冷性、叶瘟及穗颈瘟抗性、产量构成因子及产量、稻米碾米品质及外观品质、稻米食味品质等与受体类似。转基因抗虫水稻‘吉科稻早1(cry1C*)’基本培育成功。 展开更多
关键词 分子选择 回交转育 cry1C*基因 抗虫水稻
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抗虫与耐草甘膦转基因棉花株系的抗性评价与遗传稳定分析
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作者 文晋 宁艳芳 +5 位作者 秦欣 刘圆 张晓玲 朱永红 田时敏 马燕斌 《中国农业科学》 北大核心 2025年第12期2291-2302,共12页
【目的】棉铃虫和田间杂草是制约大田棉花高产的重要因素,现有单一抗虫或耐除草剂品种难以满足高效生产需求,培育兼具抗虫与耐除草剂复合性状的转基因棉花品种,为棉花抗逆育种提供高效种质资源。【方法】通过农杆菌介导法将抗虫融合基因... 【目的】棉铃虫和田间杂草是制约大田棉花高产的重要因素,现有单一抗虫或耐除草剂品种难以满足高效生产需求,培育兼具抗虫与耐除草剂复合性状的转基因棉花品种,为棉花抗逆育种提供高效种质资源。【方法】通过农杆菌介导法将抗虫融合基因cry1Ac-vip3Da与耐草甘膦基因g10-epsps导入棉花品种R15中,利用PCR鉴定再生株系,对阳性株系持续多代自交纯合,筛选抗性优良的稳定株系;利用qRT-PCR、ELISA分析转基因株系不同组织中目标基因的表达情况;并通过生物活性测定和草甘膦耐受试验分别鉴定不同转基因株系T_(4)—T_(6)代际间抗虫与耐草甘膦抗性的遗传稳定性;同时,综合分析不同转基因株系的农艺性状。【结果】PCR鉴定获得8个抗虫耐草甘膦转基因株系,其中,3个转基因株系CA-6、CA-7、CA-17的抗性表现较优;qRT-PCR分析发现cry1Ac-vip3Da和g10-epsps在3个转基因株系各组织中均高表达,且在同株系不同组织中的表达量有所差异;经ELISA检测,在3个转基因株系各组织之间,Cry1Ac-Vip3Da和G10-EPSPS蛋白的含量差异显著,其中,叶片中的蛋白含量最高,且随生育期(四叶期至吐絮期)逐渐下降,但T_(4)—T_(6)代际间蛋白表达稳定;生物活性测定和草甘膦耐受试验表明,3个转基因棉花株系T_(4)—T_(6)代的校正死亡率为65.12%—82.75%,可耐受4倍以上推荐剂量的草甘膦,且抗性在世代间无衰减;农艺性状分析表明,与对照相比,转基因株系在株高、果枝数、单株铃数、铃重、衣分和籽棉、皮棉产量等农艺性状方面无显著差异。【结论】外源基因cry1Ac-vip3Da和g10-epsps在转基因株系CA-6、CA-7和CA-17中稳定遗传,协同赋予抗虫性与草甘膦耐受性,且农艺性状未受外源基因影响。 展开更多
关键词 cry1Ac-vip3Da g10-epsps 转基因棉花 抗虫性 草甘膦耐受性 稳定遗传
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Impact of Seed Halopriming on Germination,Morphological Traits,and Cry1Ac Gene Expression in Bt Cotton(Gossypium hirsutum)
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作者 Wenqi Shi Binyameen Bin Shafqat +6 位作者 Muhammad Arif Ayesha Fazal Nawaz Muhammad Amir Zia Xu Ling Dingli Hong Ruhong Xu Luhua Li 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 2025年第1期229-241,共13页
Seed priming is an effective seed pretreatment technology that enhances germination and overall crop performance by optimizing seed hydration and metabolic processes before planting.Seed quality is a critical determin... Seed priming is an effective seed pretreatment technology that enhances germination and overall crop performance by optimizing seed hydration and metabolic processes before planting.Seed quality is a critical determinant of cotton(Gossypium hirsutum)crop performance,influencing germination,plant vigor,and yield.This study evaluates the effects of seed priming with potassium salts(1%and 2%KCl and K2SO4)on germination,morphological traits,and Cry1Ac gene expression in three Bt cotton cultivars(IUB-2013,NIAB-878B,FH-142)as Cry1Ac enhance the pest resistance in Bt cotton and reduce the plant’s dependence on chemical insecticides.Seeds were primed for six hours,air-dried,and sown in the field.Germination rates,plant height,number of bolls per plant,boll weight,seed cotton yield,and ginning outturn(GOT)were assessed at crop maturity.Cry1Ac gene expression was quantified to explore the influence of priming treatments on transgene activity.Results demonstrated that 1%K2SO4 priming significantly enhanced germination and yield-related traits,with Cry1Ac expression peaking in the IUB-2013 cultivar under 1%K2SO4 treatment.These findings suggest that potassium-based halopriming improves cotton seedling establishment and Bt gene expression.This study addresses the critical gaps in understanding the effects of seed halopriming on morphological traits,germination,and expression of the Cry1Ac gene in Bt cotton while providing a novel eco-friendly and cost-effective halopriming approach,offering the potential to improve cotton production. 展开更多
关键词 COTTON seed priming halopriming CRY1AC Bt cotton GERMINATION yield traits
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