期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
clpE缺陷对肺炎球菌蛋白表达的影响
1
作者 张群 尹楠林 +5 位作者 张雪梅 王虹 刘鑫 崔亚丽 尹一兵 胥文春 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1533-1537,1540,共6页
目的了解ClpE对肺炎球菌蛋白表达的影响。方法用长臂同源多聚酶链式反应(LFH-PCR)方法失活clpE基因,用PCR、测序鉴定缺陷菌株;通过固相pH梯度双向凝胶电泳(2D-PAGE)分别分离野生菌和clpE缺陷菌的总蛋白质;经凝胶银染色、PDQuest2DE软件... 目的了解ClpE对肺炎球菌蛋白表达的影响。方法用长臂同源多聚酶链式反应(LFH-PCR)方法失活clpE基因,用PCR、测序鉴定缺陷菌株;通过固相pH梯度双向凝胶电泳(2D-PAGE)分别分离野生菌和clpE缺陷菌的总蛋白质;经凝胶银染色、PDQuest2DE软件分析获得2个菌株的蛋白质表达谱;选取差异蛋白质点进行MEDLI-TOF质谱分析,查询数据库,获取有意义的蛋白点。结果以肺炎链球菌D39的图谱为参考,△clpE与其匹配率为61%。挑选17个有明显差异表达的蛋白点进行MALDI-TOF-MS分析,获得了17张肽质量指纹图,经数据库查询后,4个蛋白点获得了有意义的结果,分别为:次黄嘌呤鸟嘌呤核糖核酸转移酶(hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase),吡咯烷羧酸肽酶(pyrrolidone-carboxylate peptidase1),甲酸四氢叶酸连接酶(formate-tetrahydrofolate ligase)和双功能蛋白pyrR(bifunctional proteinpyrR)。结论野生菌表达蛋白的种类和数量均高于突变菌株,提示ClpE可通过影响某些特殊蛋白质的表达,帮助细菌适应宿主的不同环境,使宿主致病。 展开更多
关键词 肺炎球菌 双向凝胶电泳 热休克蛋白 clpe基因
暂未订购
肺炎链球菌热休克蛋白ClpE多克隆抗体的制备及其亚细胞定位
2
作者 蔡莺莺 闫文娟 +5 位作者 张群 王虹 胥文春 何於娟 尹一兵 张雪梅 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期28-32,共5页
目的制备肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)热休克蛋白(heat shock protein,HSP)ClpE多克隆抗体,并确定ClpE在S.pn表面的亚细胞定位。方法应用PCR法从S.pn D39中扩增clpE基因全长片段,克隆入原核表达载体pET28a,转化E.coli BL2... 目的制备肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)热休克蛋白(heat shock protein,HSP)ClpE多克隆抗体,并确定ClpE在S.pn表面的亚细胞定位。方法应用PCR法从S.pn D39中扩增clpE基因全长片段,克隆入原核表达载体pET28a,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,经亲和层析纯化重组蛋白。用纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,间接ELISA法测定抗体效价,Western blot法鉴定抗体的特异性。ELISA法分析ClpE在S.pn表面的亚细胞定位。结果重组表达质粒经PCR、双酶切和测序证实构建正确;表达的重组ClpE蛋白相对分子质量约83 000,表达量约占全菌总蛋白的60%,主要以可溶性上清形式存在;纯化的重组蛋白纯度达90%;制备的ClpE多克隆抗体效价达1∶4 096 000,可与S.pn D39全菌发生特异性反应,S.pn D39在正常生长时可表达ClpE蛋白;ClpE在S.pn表面有表达。结论成功制备了高效价和特异性的ClpE多克隆抗体,ClpE在S.pn表面可正常表达,为表面蛋白。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 热休克蛋白 clpe 亚细胞定位
原文传递
clpE基因缺失对肺炎链球菌毒力的影响 被引量：1
3
作者 张群 尹楠林 +5 位作者 胥文春 王虹 庞丹 杨晓亮 尹一兵 张雪梅 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期233-238,共6页
【目的】探索clpE基因缺失对肺炎链球菌毒力的影响。【方法】用长臂同源多聚酶链式反应(LFH-PCR)方法失活clpE基因,用PCR、测序鉴定缺失菌株,通过动物实验观察clpE基因缺失株毒力改变情况,同时用细胞实验比较clpE基因缺失株和野生菌对... 【目的】探索clpE基因缺失对肺炎链球菌毒力的影响。【方法】用长臂同源多聚酶链式反应(LFH-PCR)方法失活clpE基因,用PCR、测序鉴定缺失菌株,通过动物实验观察clpE基因缺失株毒力改变情况,同时用细胞实验比较clpE基因缺失株和野生菌对宿主细胞的粘附和侵袭能力,最后用实时荧光定量PCR分析自溶素(major autolysin A,lytA)、表面黏附素A(pneumococcal surface adhesion A,psaA)、溶血素(pneumolysin,ply)、肺炎球菌表面蛋白A(pneumococcal surface protein A,pspA)和神经氨酸酶(neuraminidase,nanA)的表达。【结果】小鼠毒力实验表明野生菌株半数致死时间54h,而缺失株半数致死时间为21d,两者比较有统计学差异(P<0.01);缺失菌在对宿主细胞的粘附能力明显低于野生菌株(P<0.05)。实时荧光定量PCR显示clpE缺失株的五个毒力因子mRNA表达水平均低于野生菌,两者比较有统计学差异(P<0.05);【结论】ClpE通过调控肺炎链球菌多种毒力因子表达,而影响其毒力。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 毒力因子 实时荧光定量PCR 细菌粘附 clpe基因
原文传递
用电液相外延法制备透射式GaAs光阴极的研究 被引量：1
4
作者 曾庆科 《广西师范大学学报（自然科学版）》 CAS 1995年第2期32-36,共5页
采用电液相外延法在ｎ型ＧａＡｓ衬底上连续生长Ｇａ１－ｘＡｌｘＡｓ（ｘ＝０．７５）过渡层及ｐ型ＧａＡｓ发射层，测试结果表明，电液相外延法适合于制备透射式ＧａＡｓ光电阴极．
关键词 电液相外延 光电阴极 扩散长度 砷化镓
在线阅读 下载PDF
Ga－Al－As－Si系统中Si的两性掺杂行为的研究
5
作者 曾庆科 《功能材料》 EI CAS CSCD 1995年第3期238-242,共5页
对Ｓｉ在电液相外延Ｇａ－Ａｌ－Ａｓ－Ｓｉ系统中的两性掺杂行为进行了研究。提出了一种恒温生长Ｇａ＿（１－ｘ）Ａｌ＿ｘＡｓ：Ｓｉｐ－ｎ结的新方法，对这种ｐ－ｎ结的成因作了定性的解释，并对这种ｐ－ｎ结的电特性加以观察。
关键词 Ga-Al-As-Si系统 掺杂 电液相外延法 转变温度 阶跃电流法 P-N结 I-V特性
在线阅读 下载PDF
用电诱导液相外延法制备铝组分稳定的高铝值镓铝砷外延层
6
作者 曾庆科 《材料科学与工程》 CSCD 1995年第3期14-17,51,共5页
本文对用于制造高效率半导体发光器件的材料──Ｇａ_（１－ｘ）Ａｌ_ｘＡｓ（ｘ＝０．７５）外延层沿生长方向上铝组分的分布进行了详细地讨论。采用电液相外延法能获得铝组分高度稳定的Ｇａ_（１－ｘ）Ａｌ_ｘＡｓ外延层，并用电流诱... 本文对用于制造高效率半导体发光器件的材料──Ｇａ_（１－ｘ）Ａｌ_ｘＡｓ（ｘ＝０．７５）外延层沿生长方向上铝组分的分布进行了详细地讨论。采用电液相外延法能获得铝组分高度稳定的Ｇａ_（１－ｘ）Ａｌ_ｘＡｓ外延层，并用电流诱导效应作了初步理论解释。 展开更多
关键词 电诱导液相外延 外延层 高效发光管 镓铝砷
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部