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基于CircFOXO3介导软骨细胞糖酵解探讨乌头汤改善骨关节炎软骨退变的作用
1
作者 陈悦 蒋镔烨 +3 位作者 庄莹莹 林艳铭 兰书洁 李宇涛 《中医康复》 2025年第11期1-5,共5页
目的:探讨乌头汤调控CircFOXO3改善由白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞炎症的糖酵解的作用效果,为乌头汤的临床应用提供实验依据。方法:3周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠20只,提取小鼠双膝关节软骨进行体外软骨细胞的分离与培养,用10 ng/... 目的:探讨乌头汤调控CircFOXO3改善由白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞炎症的糖酵解的作用效果,为乌头汤的临床应用提供实验依据。方法:3周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠20只,提取小鼠双膝关节软骨进行体外软骨细胞的分离与培养,用10 ng/mLIL-1β作用24 h诱导体外软骨细胞模型,构建CircFOXO3过表达细胞株;将软骨细胞随机分为空白组、IL-1β组、乌头汤组(10 ng/mL IL-1β+10%乌头汤含药血清)、oe-CircFOXO3组和oe-CircFOXO3+乌头汤组。通过Real-time PCR检测各组软骨细胞中CircFOXO3的相对表达水平,通过Western blot检测各组软骨细胞中GLUT1、PKM2、HK2和LDHA的蛋白含量。结果:CircFOXO3在IL-1β诱导的软骨细胞模型中表达显著降低(P<0.05);与空白组相比,IL-1β组中GLUT1、PKM2、HK2和LDHA蛋白表达增强(P<0.05);与oe-CircFOXO3组比较,oe-CircFOXO3+乌头汤组上述蛋白含量下降(P<0.05);与IL-1β组相比,乌头汤组中CircFOXO3表达增强(P<0.05)。结论:乌头汤可通过调控CircFOXO3抑制骨关节炎软骨细胞糖酵解,改善软骨退变。 展开更多
关键词 骨关节炎 乌头汤 circfoxo3 糖酵解 软骨细胞
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透骨消痛胶囊调控circFOXO3缓解骨关节炎软骨细胞糖酵解代谢紊乱的作用机制
2
作者 付长龙 罗雁 +3 位作者 许佳佳 林艳铭 林晴 黄艳峰 《中国中药杂志》 北大核心 2025年第16期4641-4648,共8页
从环状RNA叉头框蛋白O3(circFOXO3)调控骨关节炎(OA)软骨细胞糖酵解角度,研究透骨消痛胶囊(TGXTC)缓解OA退变的机制。在体内实验中,实验动物经随机分组进行相关干预后,通过形态学染色观察软骨组织结构变化;实时荧光PCR法(RT-qPCR)检测... 从环状RNA叉头框蛋白O3(circFOXO3)调控骨关节炎(OA)软骨细胞糖酵解角度,研究透骨消痛胶囊(TGXTC)缓解OA退变的机制。在体内实验中,实验动物经随机分组进行相关干预后,通过形态学染色观察软骨组织结构变化;实时荧光PCR法(RT-qPCR)检测软骨组织中circFOXO3的mRNA水平变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)分析葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、己糖激酶2(HK2)、丙酮酸激酶M2(PKM2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)和基质金属蛋白酶13(MMP13)蛋白表达变化。在体外实验中,荧光原位杂交(FISH)检测各组软骨细胞中circFOXO3的变化;构建慢病毒circFOXO3沉默(sh-circFOXO3)软骨细胞;RT-qPCR分析sh-circFOXO3后在软骨细胞中的水平变化;Western blot分析在sh-circFOXO3条件下,TGXTC对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞GLUT1、HK2、PKM2、LDHA和MMP13蛋白的调控。Masson染色和阿利新蓝染色结果显示,TGXTC组和阳性药物组软骨层结构较模型组改善。TGXTC组和阳性药物组的circFOXO3的mRNA水平显著上调,以上指标蛋白表达显著减少。FISH结果显示,TGXTC能上调IL-1β诱导的软骨细胞中circFOXO3的荧光强度。在circFOXO3沉默实验中,与IL-1β组相比,IL-1β+sh-circFOXO3组中circFOXO3水平显著下降;与IL-1β+TGXTC组相比,IL-1β+sh-circFOXO3+TGXTC组中circFOXO3水平显著下降。Western blot结果表明,IL-1β组软骨细胞中升高的GLUT1、HK2、PKM2、LDHA、MMP13蛋白被TGXTC干预后显著抑制,但在circFOXO3沉默后,TGXTC对这些蛋白的调控作用减弱。综上,TGXTC通过调控circFOXO3缓解OA软骨细胞糖酵解代谢紊乱,延缓OA退变。 展开更多
关键词 透骨消痛胶囊 circfoxo3 软骨退变 骨关节炎
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CircFoxO3对猪成肌细胞增殖和凋亡的影响
3
作者 王玲 蒋娇 +1 位作者 王可甜 罗宗刚 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2024年第12期2591-2596,共6页
为探究环状RNA CircFoxO3的表达对猪成肌细胞增殖和凋亡的影响,本试验利用CircFoxO3过表达载体及siRNA转染猪成肌细胞,通过EdU和Annexin V-mCherry检测成肌细胞增殖和凋亡情况,利用RT-qPCR检测凋亡相关基因的表达。结果表明,猪成肌细胞... 为探究环状RNA CircFoxO3的表达对猪成肌细胞增殖和凋亡的影响,本试验利用CircFoxO3过表达载体及siRNA转染猪成肌细胞,通过EdU和Annexin V-mCherry检测成肌细胞增殖和凋亡情况,利用RT-qPCR检测凋亡相关基因的表达。结果表明,猪成肌细胞过表达CircFoxO3后增殖细胞数量减少,凋亡细胞数量上升,凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Fas、FasL表达量显著上调(P<0.05),Bax表达量极显著上调(P<0.01),抗凋亡基因Bcl-2表达量显著下调(P<0.05);转染CircFoxO3siRNA后,成肌细胞凋亡水平下降,增殖能力增加,Bax、FasL基因表达量极显著下调(P<0.01),Caspase-3、Caspase-8表达量显著降低(P<0.05),Bcl-2表达显著增加(P<0.05)。说明Circ-FoxO3表达抑制了猪成肌细胞的增殖,促进了凋亡相关基因的表达,从而促进成肌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 猪成肌细胞 circfoxo3 细胞增殖 细胞凋亡
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CircFoxo3调节miR-130a-5p/TEAD1轴对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡影响的实验研究
4
作者 曹彦花 乐金海 +4 位作者 陈新宇 刘建和 刘越美 李俊 李苏 《中国临床新医学》 2024年第1期65-73,共9页
目的探讨环状RNA叉头框蛋白O3(CircFoxo3)调节miR-130a-5p/TEA域转录因子1(TEAD1)轴对心力衰竭(HF)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠分为对照组、HF组、si-NC组、si-CircFoxo3组、agomir NC组、miR-130a-5p agomir组、si-CircFoxo3... 目的探讨环状RNA叉头框蛋白O3(CircFoxo3)调节miR-130a-5p/TEA域转录因子1(TEAD1)轴对心力衰竭(HF)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠分为对照组、HF组、si-NC组、si-CircFoxo3组、agomir NC组、miR-130a-5p agomir组、si-CircFoxo3+antagomir NC组、si-CircFoxo3+miR-130a-5p antagomir组,每组18只。除对照组外,其他组大鼠均通过腹腔注射盐酸阿霉素的方法构建HF大鼠模型。建模成功后进行药物处理,每3 d给药一次,持续3周。应用反转录实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测心肌组织中CircFoxo3、miR-130a-5p表达水平。应用彩色多普勒超声仪检测大鼠左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清人基质裂解素2(ST_(2))、N端脑钠肽前体(NT-pro BNP)水平。应用HE染色、Masson染色检测大鼠心肌组织病理变化和心肌纤维化情况。通过TUNEL染色检测心肌细胞凋亡水平。应用Western blot法检测大鼠心肌组织TEA域转录因子1(TEAD1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)蛋白表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证CircFoxo3与miR-130a-5p、miR-130a-5p与TEAD1的关系。结果与对照组比较,HF组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化严重,LVESD、LVEDD水平上升,心肌组织CircFoxo3及TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平升高,心肌细胞凋亡率升高,LVEF、miR-130a-5p和Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与HF组、si-NC组比较,si-CircFoxo3组大鼠心肌组织病理损伤减轻,LVESD、LVEDD水平降低,心肌组织CircFoxo3及TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平降低,心肌细胞凋亡率降低,LVEF、miR-130a-5p及Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与HF组、agomir NC组比较,miR-130a-5p agomir组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化有所改善,LVESD、LVEDD水平降低,心肌组织TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平降低,心肌细胞凋亡率降低,LVEF、miR-130a-5p及Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与si-CircFoxo3组、si-CircFoxo3+antagomir NC组比较,si-CircFoxo3+miR-130a-5p antagomir组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化加剧,LVESD、LVEDD水平升高,心肌组织TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平升高,心肌细胞凋亡率升高,LVEF、miR-130a-5p、Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。CircFoxo3与miR-130a-5p、miR-130a-5p与TEAD1存在靶向关系。结论沉默CircFoxo3可能通过海绵化上调miR-130a-5p来抑制TEAD1表达,进而抑制HF大鼠心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA叉头框蛋白O3 miR-130a-5p TEA域转录因子1 心力衰竭 凋亡
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circFoxo3表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡和转移的作用机制研究
5
作者 邓艳琴 潘秀霞 《中国优生与遗传杂志》 2021年第6期769-773,共5页
目的研究环状RNA叉头盒O3(circFoxo3)对卵巢癌细胞增殖、凋亡和转移能力的影响,并探讨其发挥作用的可能机制。方法常规培养卵巢癌细胞系CoC1、SKOV3、CAOV4和正常卵巢上皮细胞IOSE80,qRT-PCR检测circFoxo3在卵巢癌细胞系和正常卵巢上皮... 目的研究环状RNA叉头盒O3(circFoxo3)对卵巢癌细胞增殖、凋亡和转移能力的影响,并探讨其发挥作用的可能机制。方法常规培养卵巢癌细胞系CoC1、SKOV3、CAOV4和正常卵巢上皮细胞IOSE80,qRT-PCR检测circFoxo3在卵巢癌细胞系和正常卵巢上皮细胞中的表达水平。选择高表达circFoxo3的卵巢癌细胞转染circFoxo3敲减质粒,分为si-NC和si-circFoxo3组。MTS和平板克隆实验检测circFoxo3对卵巢癌细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测circFoxo3对卵巢癌细胞凋亡的影响;Transwell实验检测circFoxo3对卵巢癌细胞转移能力的影响;Western blotting检测circFoxo3对PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、pPI3K、AKT和pAKT表达的影响。结果circFoxo3在卵巢癌细胞中的表达显著高于在正常卵巢上皮细胞IOSE80中的表达(P<0.05);与si-NC组相比,si-circFoxo3组细胞的增殖能力降低,细胞凋亡增加,细胞转移能力降低;si-circFoxo3组细胞pPI3K和pAKT蛋白表达降低。结论circFoxo3在卵巢癌细胞中表达上调,可能通过调控PI3K/AKT促进卵巢癌细胞的进展。circFoxo3可能是治疗卵巢癌的潜在靶点。 展开更多
关键词 卵巢癌 circfoxo3 增殖 凋亡 转移
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环状RNA circFOXO3在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖和侵袭转移能力的影响 被引量：8
6
作者 张辉 梁鸿 +3 位作者 白军伟 王志凯 郑伟 秦涛 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期408-411,共4页
目的观察circFOXO3在胃癌组织的表达及对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法收集2017年8月至2018年10月于河南省人民医院胃肠外科进行胃癌根治术的48例胃癌患者组织标本,通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circFOXO3在胃癌... 目的观察circFOXO3在胃癌组织的表达及对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法收集2017年8月至2018年10月于河南省人民医院胃肠外科进行胃癌根治术的48例胃癌患者组织标本,通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circFOXO3在胃癌组织中的表达,分析circFOXO3表达与胃癌组织临床病理特征之间的相关性。构建circFOXO3过表达和对照质粒(pEX-circFOXO3、pEX-NC)、敲减和对照载体(si-circFOXO3、si-NC),分别设为过表达组和对照组、敲减组和对照组,采用细胞计数(CCK-8)、Transwell侵袭和转移实验检测胃癌细胞的增殖、侵袭和转移能力。计量资料组间比较采用t检验,计数资料采用χ2检验。结果circFOXO3在胃癌组织中高表达率(29/48,60.42%)显著高于癌旁正常组织(16/48,33.33%)(χ2=7.069,P<0.05),且其表达与组织分化(χ2=5.976,P<0.05)、浸润深度(χ2=4.409,P<0.05)、TNM分期(χ2=5.581,P<0.05)呈正相关。CCK-8、Transwell侵袭和转移实验结果表明,过表达circFOXO3后AGS细胞增殖(24 h:0.95±0.08;48 h:1.76±0.16)、侵袭[(157±11)个]和迁移能力[(186±14)个]均较对照组[24 h:0.58±0.04,t=7.165,P<0.05;48 h:0.88±0.07,t=8.728,P<0.05;侵袭为(85±7)个,t=9.565,P<0.05;迁移为(94±8)个,t=9.882,P<0.05]显著提高;敲减circFOXO3后SGC-7901细胞增殖(24 h:0.46±0.02,48 h:0.73±0.05)、侵袭[(53±4)个]和迁移[(65±5)个]能力较对照组[24 h:0.63±0.04,t=6.584,P<0.05;48 h:1.34±0.14,t=7.107,P<0.05;侵袭为(96±8)个,t=8.327,P<0.051;迁移为(114±9)个,t=8.243,P<0.05]均明显降低,差异有统计学意义。结论circFOXO3在胃癌组织中显著高表达,且可促进胃癌细胞增殖和侵袭转移。 展开更多
关键词 胃癌 circfoxo3 增殖 侵袭 转移
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