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乳酸乳球菌中冷休克蛋白基因的高效表达及其抗冻保护作用 被引量:9
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作者 张英华 雷雨婷 霍贵成 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1203-1207,共5页
【目的】微生物在适应外界环境急剧降温的条件下都会发生应激反应,产生一系列蛋白质被称为冷休克蛋白。冷休克蛋白对乳酸菌适应低温环境和增强抗冻能力方面发挥着重要作用。本文目的是为了研究乳酸乳球菌中冷休克蛋白CspC、CspD的作用... 【目的】微生物在适应外界环境急剧降温的条件下都会发生应激反应,产生一系列蛋白质被称为冷休克蛋白。冷休克蛋白对乳酸菌适应低温环境和增强抗冻能力方面发挥着重要作用。本文目的是为了研究乳酸乳球菌中冷休克蛋白CspC、CspD的作用。【方法】将冷休克蛋白CspC、CspD基因分别重组到质粒pNZ8148,转化乳酸乳球菌NZ9000后,加入Nisin诱导,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析,比较重组菌与空白菌在30℃条件下菌体生长差异及反复冻融活菌数的差异。【结果】得出CspC、CspD的相对分子量分别为7.0、6.2kDa。【结论】CspC使菌体更加迅速的恢复了生长;冷休克蛋白CspD增强了菌体的抗冻存活率(增加了30~40倍)。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌 冷休克蛋白 CspC、cspd基因克隆、表达 抗冻保护作用
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化学发光技术在Southern印迹杂交中的应用 被引量:2
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作者 刘凤娟 陈清 俞守义 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第6期997-998,共2页
目的:探讨化学发光技术(CSPD)在Southern印迹杂交中的应用情况。方法:随机引物法地高辛标记模板,化学发光法直接检测探针标记效率,进行模拟杂交确定最适探针浓度、检测探针敏感性。结果:化学发光法直接检测探针标记效率为0.1 pg,模拟杂... 目的:探讨化学发光技术(CSPD)在Southern印迹杂交中的应用情况。方法:随机引物法地高辛标记模板,化学发光法直接检测探针标记效率,进行模拟杂交确定最适探针浓度、检测探针敏感性。结果:化学发光法直接检测探针标记效率为0.1 pg,模拟杂交中化学发光法检测探针敏感性达到0.03 pg,最适探针浓度为40 ng/ml。结论:化学发光技术检测敏感性高,可用于基因组Southern印迹杂交检测单拷贝基因。 展开更多
关键词 化学发光 cspd Southern印迹杂交
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微粒子化学发光免疫测定促甲状腺素敏感性方法的建立与应用 被引量:3
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作者 王永宁 李荣秀 +3 位作者 李成武 高云华 郭小英 顾忠泽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期629-631,共3页
目的 :建立一种低成本、高敏感性检测血清促甲状腺激素(TSH)的微粒子化学发光免疫分析 (CLEIA)方法。方法 :采用碱性磷酸酶标记的抗TSHβ亚单位特异性单克隆抗体 (mAb) ,与FITC偶联的抗TSHα亚单位的另一mAb配对 ,构成双抗体夹心免疫结... 目的 :建立一种低成本、高敏感性检测血清促甲状腺激素(TSH)的微粒子化学发光免疫分析 (CLEIA)方法。方法 :采用碱性磷酸酶标记的抗TSHβ亚单位特异性单克隆抗体 (mAb) ,与FITC偶联的抗TSHα亚单位的另一mAb配对 ,构成双抗体夹心免疫结合 ,用抗FITC多抗免疫磁珠做固相分离载体 ,用金刚烷胺CSPD为发光底物的非均相免疫分析法。结果 :方法灵敏度 4 μIU/L ,批内变异系数 (CV)平均为7.4 5 % ,批间CV平均为 10 .4 5 % ,回收率为 91.4 %~ 10 2 .4 %。将实际样品测定与ACS 180  系统检测的结果相比较有较好的相关性。结论 :微粒子化学发光定量测定TSH的成本低、灵敏度及特异性高和稳定性好 。 展开更多
关键词 化学发光酶免疫分析 免疫磁珠 金刚烷胺 促甲状腺激素
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地高辛标记DNA探针应用于凝胶转移电泳
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作者 刘冰菁 姜先荣 +2 位作者 杨杰 周衍茂 任克勤 《阜阳师范学院学报(自然科学版)》 1998年第4期24-29,共6页
半抗原DIG-ddUTP与DNA连接,以此作为探针可以与其相识别的蛋白质相结合,再用带有碱性磷酸的抗体处理,形成的复合物可作用于底物CSPD,使其产生萤光,而被x光片记录下来。
关键词 地高辛标记 DNA探针 凝胶转移电泳 cspd
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