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E.tenella感染早期雏鸡盲肠扁桃体ChIL-17A和ChIL-17F表达水平的相反变化 被引量:1
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作者 陈露 周晏丞 +5 位作者 曹立亭 董世起 廖春玉 郭玉洁 黎春秀 马跃 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2074-2080,2085,共8页
为探讨ChIL-17及其受体在抗柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)感染中的作用,本研究用E.tenellaRC株孢子化卵囊口服感染14日龄非免疫蛋公鸡,于感染后0,2,4,6,12,24,3,5,7d共9个不同时间点同时提取对照组和试验组雏鸡盲肠扁桃体RN... 为探讨ChIL-17及其受体在抗柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)感染中的作用,本研究用E.tenellaRC株孢子化卵囊口服感染14日龄非免疫蛋公鸡,于感染后0,2,4,6,12,24,3,5,7d共9个不同时间点同时提取对照组和试验组雏鸡盲肠扁桃体RNA,采用实时荧光定量PCR方法检测ChIL-17A、ChIL-17F和ChIL-17RA基因的表达动态。结果显示,ChIL-17A表达水平在感染后持续下调,感染后4h为感染前(0h)的0.13倍(P〈0.01),感染后3d达最低表达水平,仅为感染前(0h)的0.0097倍。而ChIL-17F的表达水平则呈现相反的变化,在感染早期明显上调,感染后2h上调3.07倍(P〈O.05),感染后4h上调6.49倍(P〈0.01),其后时间点与感染前相比表达水平则无显著性差异。ChIL-17RA与感染前相比表达上调,于感染后24h和7d分别上调1.73倍和2.21倍(P〈0.01)。结果表明,ChIL-17及其受体基因的表达水平在感染后均呈现显著变化,说明它们在E.tenella感染中具有重要的宿主-寄生虫免疫生物学意义。特别是ChIL-17A和ChIL-17F在感染早期(感染后2~4h)表现出显著的相反表达动态说明两者在宿主防御E-tenella感染的早期具有不同的免疫调节功能,而这一具体调节机制还有待于进一步的研究加以阐明。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 chil-17F chil-17F chil-17RA 实时荧光定量PCR
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鸡白介素-6(ChIL-6)基因的克隆与序列分析 被引量:11
2
作者 孙建和 陆苹 蒋静 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期1-3,共3页
分别用鸡传染性法氏囊病病毒感染和用ConA免疫刺激健康鸡 ,无菌取处理鸡的脾脏 ,匀浆后用Tr izol抽提细胞总RNA ,应用随机引物反转录获得cDNA ,设计引物 ,经PCR扩增获得鸡白介素 - 6 (ChIL - 6 )基因 ,应用pGEM -T载体克隆该基因 ,经测... 分别用鸡传染性法氏囊病病毒感染和用ConA免疫刺激健康鸡 ,无菌取处理鸡的脾脏 ,匀浆后用Tr izol抽提细胞总RNA ,应用随机引物反转录获得cDNA ,设计引物 ,经PCR扩增获得鸡白介素 - 6 (ChIL - 6 )基因 ,应用pGEM -T载体克隆该基因 ,经测序 ,表明其与GeneBank中公布的唯一的一个ChIL - 6基因为同源基因。 展开更多
关键词 chil-6基因 基因克隆 鸡细胞因子基因 白介素-6 序列分析
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ChIL-2-ChIL-4融合基因重组质粒遗传稳定性研究 被引量:1
3
作者 郑龙龙 张黎 +5 位作者 郝思源 郝飞飞 白瑞 霍乃蕊 郑明学 谭凡 《激光生物学报》 CAS 2021年第5期475-480,共6页
为研究大规模生产过程中DH5α/pUC57重组菌携带的表达鸡白细胞介素-2(ChIL-2)和白细胞介素-4(ChIL-4)融合基因质粒的遗传稳定性,探讨其作为鸡球虫活疫苗免疫佐剂的商业化批量生产的潜力,本文通过对重组质粒连续30代传代培养的方式,进行... 为研究大规模生产过程中DH5α/pUC57重组菌携带的表达鸡白细胞介素-2(ChIL-2)和白细胞介素-4(ChIL-4)融合基因质粒的遗传稳定性,探讨其作为鸡球虫活疫苗免疫佐剂的商业化批量生产的潜力,本文通过对重组质粒连续30代传代培养的方式,进行实验室遗传稳定性鉴定。研究结果显示:重组菌在含有氨苄青霉素(Amp+)的溶菌肉汤(LB)平板上传代30次均保持革兰氏阴性(G-),发酵葡萄糖及甘露醇并产生特异现象,但不发酵乳糖;重组菌与大肠杆菌16S rDNA片段的同源性均大于95%,各代重组质粒超螺旋比均大于90%,质粒丢失率均为0;重组质粒的表达产物具有刺激无特定病原体(SPF)雏鸡脾脏淋巴细胞的分化能力。结果表明,ChIL-2-ChIL-4融合基因重组菌和重组质粒30代内结构稳定、分离稳定,能够为扩大生产提供物质支持。 展开更多
关键词 chil-2 chil-4 重组质粒 遗传稳定性 疫苗佐剂
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ChIL-2对H_5亚型AIV疫苗免疫增强作用研究 被引量:7
4
作者 刘岩 由振强 +2 位作者 许健 郑江涛 于涟 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期797-801,共5页
鸡白细胞介素2真核表达质粒pCI-IL-2及原核表达重组鸡白细胞介素2(rChIL-2)分别与H5亚型禽流感油乳剂灭活苗联合使用,25日龄首免,40日龄时加强免疫.MTT法检测各组鸡外周血淋巴T细胞增殖,HI试验监测H5亚型禽流感抗体水平的消长规律,结果... 鸡白细胞介素2真核表达质粒pCI-IL-2及原核表达重组鸡白细胞介素2(rChIL-2)分别与H5亚型禽流感油乳剂灭活苗联合使用,25日龄首免,40日龄时加强免疫.MTT法检测各组鸡外周血淋巴T细胞增殖,HI试验监测H5亚型禽流感抗体水平的消长规律,结果表明:pCI-IL-2及rChIL-2均能显著增强AIV疫苗的免疫效果(P<0.05),pCI-IL-2和rChIL-2两组间差异不显著(P>0.05);证实鸡白细胞介素2对H5亚型禽流感疫苗有免疫增强作用.rChIL-2协同免疫组MTT及HI试验均在第四周达到峰值,pCI-IL-2协同免役组峰值出现时间稍晚,但随后质粒免疫组可维持在更高的水平值.提示IL-2蛋白的作用更迅速,IL-2质粒作用更持久. 展开更多
关键词 白细胞介素2 AIV MTT HI 免疫增强
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传染性法氏囊病病毒VP2/4/3-ChIL-2融合基因DNA疫苗免疫原性研究 被引量:7
5
作者 万旺军 谢荣辉 +3 位作者 李龙 许健 郑江涛 于涟 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期137-143,共7页
应用重叠延伸剪切技术(splicing by overlapping extension,SOE),经3次PCR将传染性法氏囊病病毒(infectiousbursal disease virus,IBDV)多聚蛋白(VP2/4/3)基因和鸡白细胞介素2(Chicken IL-2,ChIL-2)基因进行融合,定向插入真核表达载体pC... 应用重叠延伸剪切技术(splicing by overlapping extension,SOE),经3次PCR将传染性法氏囊病病毒(infectiousbursal disease virus,IBDV)多聚蛋白(VP2/4/3)基因和鸡白细胞介素2(Chicken IL-2,ChIL-2)基因进行融合,定向插入真核表达载体pCI的CMV启动子下游,获得重组质粒pCI-VP2/4/3-IL-2和pCI-IL-2-VP2/4/3。将其制备成DNA疫苗,肌肉注射14日龄非免疫鸡,2周后加强免疫,定期测定鸡抗IBDV血清ELISA抗体效价及病毒中和抗体效价。加强免疫后3周用IBDV标准强毒株攻击,连续观察3天后全部扑杀,计算保护率及囊体比,并进行组织病理学检查。结果表明:1)融合基因重组质粒pCI-VP2/4/3-IL-2、pCI-IL-2-VP2/4/3免疫后能明显增强IBDVDNA疫苗对强毒的攻击保护(保护率分别为83.3%、91.6%),显著高于pCI-VP2/4/3单独免疫对照组(58.3%);2)诱导产生的抗IBDV血清ELISA抗体效价明显增高(P<0.05),同时能提高DNA疫苗诱导产生的中和抗体效价(P<0.05);3)能显著促进鸡外周血液T淋巴细胞增殖反应。上述结果提示:IBDV VP2/4/3与ChIL-2基因融合后发挥了相互协同作用,ChIL-2产生了分子免疫佐剂效应;融合基因DNA疫苗能增强IBDV DNA疫苗的免疫原性,促进了机体特异性免疫应答。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 鸡白细胞介素2 基因融合 DNA疫苗 免疫原性
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鸡传染性喉气管炎病毒gD基因与ChIL-2重组禽痘病毒的构建及其免疫效力试验 被引量:4
6
作者 杨明凡 张素梅 +2 位作者 陈红英 魏战勇 崔保安 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1768-1772,共5页
将鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD基因和鸡白细胞介素2(ChIL-2)基因通过同源重组法重组禽痘病毒转移载体,构建含ILTV gD基因和ChIL-2基因的重组禽痘病毒转移载体rFPV-IL2-ILTV-gD,蓝色蚀斑纯化法纯化重组病毒,用IFA检测重组病毒中ILTV g... 将鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD基因和鸡白细胞介素2(ChIL-2)基因通过同源重组法重组禽痘病毒转移载体,构建含ILTV gD基因和ChIL-2基因的重组禽痘病毒转移载体rFPV-IL2-ILTV-gD,蓝色蚀斑纯化法纯化重组病毒,用IFA检测重组病毒中ILTV gD基因的表达和用ELISA试剂盒检测ChIL-2的表达。重组病毒rFPV-IL2-ILTV-gD免疫试验鸡,间接ELISA测定血清中ILTV抗体效价,动物试验用构建的ILTV强毒以滴鼻方式攻击各组试验鸡,结果表明,外源基因在重组禽痘病毒中得到了稳定表达;ELISA检测结果表明在免疫7 d后能够检测到血清抗体,免疫21 d后血清抗体达到高峰,此后便开始逐渐下降,符合疫苗免疫的消长规律;攻毒后每组鸡的发病情况可以看出重组病毒rFPV-IL2-ILTV-gD组和疫苗对照组对ILTV强毒攻击的保护率分别为96%和92%,而空白对照组为8%。说明构建的重组病毒rFPV-IL2-ILTV-gD免疫效力稍优于弱毒疫苗,能够较好的保护免疫鸡群。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒gD基因 鸡白细胞介素2基因 重组禽痘病毒 免疫效力
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传染性支气管炎病毒S-ChIL-15融合基因真核表达质粒的构建及其体外表达 被引量:2
7
作者 王衡 李广兴 +1 位作者 刘博奇 任晓峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期35-40,共6页
通过一段编码(G3S)4多肽的碱基linker将传染性支气管炎病毒(IBV)S基因和鸡IL-15(ChIL-15)基因连接,构建了pcDNA3.1-IBVS-ChIL-15融合基因重组质粒。将该重组质粒转染Vero细胞,并通过RT-PCR、免疫组织化学及免疫荧光试验对重组质粒的体... 通过一段编码(G3S)4多肽的碱基linker将传染性支气管炎病毒(IBV)S基因和鸡IL-15(ChIL-15)基因连接,构建了pcDNA3.1-IBVS-ChIL-15融合基因重组质粒。将该重组质粒转染Vero细胞,并通过RT-PCR、免疫组织化学及免疫荧光试验对重组质粒的体外瞬时表达情况进行检测。结果显示,成功构建了S-ChIL-15融合基因,转染24 h后能检测到IBVS-ChIL-15融合基因和该融合基因瞬时表达的产物。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 S基因 鸡IL-15基因 瞬时表达 融合基因
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IBDV VP2/4/3-ChIL-2融合基因真核表达载体的构建及其在Vero细胞中的表达 被引量:1
8
作者 万旺军 谢荣辉 +2 位作者 李龙 许健 于涟 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期255-262,共8页
构建含有传染性法氏囊病病毒(InfectiousBursalDiseaseVirus,IBDV)VP2/4/3和鸡白细胞介素2(ChickenInterleukin2,ChIL2)融合基因的真核表达载体pCIVP2/4/3IL2、pCIIL2VP2/4/3,并在Vero细胞中进行表达.应用重叠延伸剪切技术(splicingbyov... 构建含有传染性法氏囊病病毒(InfectiousBursalDiseaseVirus,IBDV)VP2/4/3和鸡白细胞介素2(ChickenInterleukin2,ChIL2)融合基因的真核表达载体pCIVP2/4/3IL2、pCIIL2VP2/4/3,并在Vero细胞中进行表达.应用重叠延伸剪切技术(splicingbyoverlappingextension),分别经3次PCR获得融合基因片段VP2/4/3IL2、IL2VP2/4/3,定向插入真核表达载体pCI中,获得重组质粒pCIVP2/4/3IL2、pCIIL2VP2/4/3,在脂质体介导下,分别转染Vero细胞.RTPCR检测证实导入的外源基因在Vero细胞中得到了转录;间接免疫荧光试验(IFA)和Westernblot检测证实重组质粒在Vero细胞中正确表达了插入的外源基因编码的融合蛋白,且表达的融合蛋白具有免疫反应性.重组真核表达载体pCIVP2/4/3IL2、pCIIL2VP2/4/3的成功构建及其在Vero细胞中的有效表达,为进一步探讨ChIL2作为分子免疫佐剂对IBDVDNA疫苗的特异性免疫增强作用奠定了基础. 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 多聚蛋白 鸡白细胞介素2 融合基因 真核表达
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Comparative Study on the Cold Resistance of Four Cherry Cultivars under Chilling Stress
9
作者 阿布来克.尼牙孜 帕合尔鼎.阿布来提 +4 位作者 董胜利 杜润清 章世奎 徐乐 李文慧 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2014年第11期1919-1922,共4页
[Objective] The present study was conducted to evaluate the cold resis-tance of four cherry cultivars under different chil ing stresses. [Method] Four cultivars of Cerasus, Early-mahapphala, Red light, Lapins and Kash... [Objective] The present study was conducted to evaluate the cold resis-tance of four cherry cultivars under different chil ing stresses. [Method] Four cultivars of Cerasus, Early-mahapphala, Red light, Lapins and Kashgar Kukan were selected as the experimental materials, and the changes of the relative electric conductivity (REC), proline (PRO) content, malondialdehyde (MDA) content, superoxide dismu-tase (SOD) activity and peroxidase (POD) activity of dormant branches of the four cherry cultivars under low temperature stress were investigated. [Result] The REC of the four cherry cultivars was Kashgar kukan 〉 Red light 〉 Early-mahapphala 〉Lapins, while the MDA content was Kashgar kukan 〉 Early-mahapphala 〉 Red light 〉Lapins, both showed a rising trend in the four cultivars with the aggravating of the low temperature stress. The PRO content, POD and SOD activities of al cultivars were precisely contrary to their REC and MDA content, as al of them exhibited a sequence as Lapins 〉 Red light 〉 Early-mahapphala 〉 Kashgar kukan in al culti-vars, and got a trend of first rising and then declining. [Conclusion] Therefore, our final evaluation of cold resistance of the four cherry cultivars was Lapins 〉 Red light 〉 Early-mahapphala 〉 Kashgar kukan. 展开更多
关键词 Cold resistance Cherry chil ing stress
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Preparation of ChIL-2 and IBDV VP2 Fusion Protein by Baculovirus Expression System 被引量:13
10
作者 Yan Liu Yongwei Wei +1 位作者 Xiaofeng Wu Lian Yu 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2005年第3期231-235,共5页
This study aims to produce an effective subunit vaccine against infectious bursal disease virus (IBDV). The genes of chicken interleukin-2 (ChIL-2) and IBDV viral protein 2 (VP2) were amplified and fused by spli... This study aims to produce an effective subunit vaccine against infectious bursal disease virus (IBDV). The genes of chicken interleukin-2 (ChIL-2) and IBDV viral protein 2 (VP2) were amplified and fused by splice overlap extension-polymerase chain reaction (SOE-PCR). The fusion gene was digested by EcoR I/Kpn I and inserted into pBacPAK8 vector, resulting in recombinant transfer plasmid pBacPakVP2-IL2. The recombinant plasmid was transfected into Sf-9 cells accompanied with hybrid nuclear polyhedrosis virus (HyNPV) genome DNA and lipofectin. Plaque-purification indicated that we had got the recombinant Hy-VP2-IL2. Fusion protein VP2-IL2 was expressed effectively both in insect cells and bombyx mori. The expression of fusion protein was confirmed by ELISA, SDS-PAGE and Western blotting assay, respectively. This efficient system allows us to meet the need for inexpensive vaccines required by the poultry industry. Cellular & Molecular Immunology. 2005;2(3):231-235. 展开更多
关键词 IBDV chil-2 fusion gene fusion protein
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提升环境卫生水平促进儿童健康成长
11
作者 王强 张粲 李湉湉 《中国学校卫生》 北大核心 2025年第7期913-916,共4页
有效应对环境健康风险是保障儿童健康成长的关键。中国政府通过政策法规、标准制定和污染治理等措施的实施,促使儿童环境健康状况总体呈现向好趋势;但面对仍然严峻的传统和新兴环境风险,仍需进一步整合多方资源,开展儿童环境健康风险的... 有效应对环境健康风险是保障儿童健康成长的关键。中国政府通过政策法规、标准制定和污染治理等措施的实施,促使儿童环境健康状况总体呈现向好趋势;但面对仍然严峻的传统和新兴环境风险,仍需进一步整合多方资源,开展儿童环境健康风险的精准防控。文章聚焦固体燃料相关空气污染、饮用水污染以及日益严峻的气候变化等影响中国儿童健康传统与新兴的关键环境卫生挑战,从深化科学研究、强化政府政策引导、落实学校和社区行动3个层面提出系统性建议,旨在为儿童创造更安全、健康的成长环境。 展开更多
关键词 环境和公共卫生 危险因素 健康促进 儿童
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Recombinant chitinase-3-like protein 1 alleviates learning and memory impairments via M2 microglia polarization in postoperative cognitive dysfunction mice
12
作者 Yujia Liu Xue Han +6 位作者 Yan Su Yiming Zhou Minhui Xu Jiyan Xu Zhengliang Ma Xiaoping Gu Tianjiao Xia 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS 2025年第9期2727-2736,共10页
Postoperative cognitive dysfunction is a seve re complication of the central nervous system that occurs after anesthesia and surgery,and has received attention for its high incidence and effect on the quality of life ... Postoperative cognitive dysfunction is a seve re complication of the central nervous system that occurs after anesthesia and surgery,and has received attention for its high incidence and effect on the quality of life of patients.To date,there are no viable treatment options for postoperative cognitive dysfunction.The identification of postoperative cognitive dysfunction hub genes could provide new research directions and therapeutic targets for future research.To identify the signaling mechanisms contributing to postoperative cognitive dysfunction,we first conducted Gene Ontology and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathway enrichment analyses of the Gene Expression Omnibus GSE95426 dataset,which consists of mRNAs and long non-coding RNAs differentially expressed in mouse hippocampus3 days after tibial fracture.The dataset was enriched in genes associated with the biological process"regulation of immune cells,"of which Chill was identified as a hub gene.Therefore,we investigated the contribution of chitinase-3-like protein 1 protein expression changes to postoperative cognitive dysfunction in the mouse model of tibial fractu re surgery.Mice were intraperitoneally injected with vehicle or recombinant chitinase-3-like protein 124 hours post-surgery,and the injection groups were compared with untreated control mice for learning and memory capacities using the Y-maze and fear conditioning tests.In addition,protein expression levels of proinflammatory factors(interleukin-1βand inducible nitric oxide synthase),M2-type macrophage markers(CD206 and arginase-1),and cognition-related proteins(brain-derived neurotropic factor and phosphorylated NMDA receptor subunit NR2B)were measured in hippocampus by western blotting.Treatment with recombinant chitinase-3-like protein 1 prevented surgery-induced cognitive impairment,downregulated interleukin-1βand nducible nitric oxide synthase expression,and upregulated CD206,arginase-1,pNR2B,and brain-derived neurotropic factor expression compared with vehicle treatment.Intraperitoneal administration of the specific ERK inhibitor PD98059 diminished the effects of recombinant chitinase-3-like protein 1.Collectively,our findings suggest that recombinant chitinase-3-like protein 1 ameliorates surgery-induced cognitive decline by attenuating neuroinflammation via M2 microglial polarization in the hippocampus.Therefore,recombinant chitinase-3-like protein1 may have therapeutic potential fo r postoperative cognitive dysfunction. 展开更多
关键词 chil1 hippocampus learning and memory M2 microglia NEUROINFLAMMATION postoperative cognitive dysfunction(POCD) recombinant CHI3L1
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儿童早期功能语类习得:普遍语法阵营内的成熟论与连续论之争
13
作者 解献芬 《北京电子科技学院学报》 2025年第2期129-138,共10页
在普遍语法阵营内,对于儿童母语早期功能语类习得,学者们持有“成熟论”和“连续论”两派不同的观点。本文首先分别梳理了在这两派观点内部各自不同研究,对同一派别内研究者所持的观点进行了比较,分析了不同研究之间“大同小异”的本质... 在普遍语法阵营内,对于儿童母语早期功能语类习得,学者们持有“成熟论”和“连续论”两派不同的观点。本文首先分别梳理了在这两派观点内部各自不同研究,对同一派别内研究者所持的观点进行了比较,分析了不同研究之间“大同小异”的本质;其次,本研究对两派观点进行了对比分析,指出两派理论差别的源头在于学者们对普遍语法这个语言发展内在机制和外部语言输入机制的认知差异,这实质上也是对儿童句法习得过程的认知差别。基于汉语以及国外儿童语言习得相关研究综合分析,本研究认为儿童早期语言发展初始状态方面的差别不是两派观点差异的本质所在,不应该被过分强调。最后,本文强调要从多个角度综合探究儿童母语的语言习得问题,从而推进该领域研究的发展。 展开更多
关键词 成熟论 连续论 普遍语法 功能语类 儿童句法习得
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鸡白细胞介素15真核表达质粒构建及其体外表达 被引量:5
14
作者 马德星 潘龙 +2 位作者 杨静红 盖仁华 李广兴 《中国家禽》 北大核心 2009年第6期8-11,15,共5页
应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从ConA刺激20h的白莱航鸡脾脏T淋巴细胞中扩增出鸡白细胞介素15(ChIL-15)全基因片段。将其连接到克隆载体pMD18-T中得到重组克隆质粒pMD18-T-ChIL-15。阳性克隆质粒经鉴定正确后将ChIL-15亚克隆... 应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从ConA刺激20h的白莱航鸡脾脏T淋巴细胞中扩增出鸡白细胞介素15(ChIL-15)全基因片段。将其连接到克隆载体pMD18-T中得到重组克隆质粒pMD18-T-ChIL-15。阳性克隆质粒经鉴定正确后将ChIL-15亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,得到重组阳性表达质粒pcDNA3.1(+)-ChIL-15。阳性表达质粒经鉴定正确后应用磷酸钙法体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了ChIL-15蛋白在293T细胞中的表达。 展开更多
关键词 chil-15 转染 IFA
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重组鸡白细胞介素2质粒在体内的分布研究 被引量:2
15
作者 由振强 于涟 +2 位作者 张朝政 褚武英 许健 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期522-526,共5页
3周龄雏鸡肌肉接种200μg重组鸡白细胞介素2真核表达质粒(pCI-chIL-2).PCR法检测血清、心、肝、肺、脾、法氏囊和肌肉接种部位中pCI-chIL-2的残留情况,利用竞争PCR观察血清中重组质粒的动态分布,RT-PCR检测上述组织器官pCI-chIL-2的表... 3周龄雏鸡肌肉接种200μg重组鸡白细胞介素2真核表达质粒(pCI-chIL-2).PCR法检测血清、心、肝、肺、脾、法氏囊和肌肉接种部位中pCI-chIL-2的残留情况,利用竞争PCR观察血清中重组质粒的动态分布,RT-PCR检测上述组织器官pCI-chIL-2的表达情况.结果表明:接种后2 h血清中即可检测到pCI-chIL-2,8 h达到高峰,7 d时已检测不到;pCI-chIL-2在上述组织器官中存在的时间比较长,1~14 d各组织器官中均有分布,19 d时肺和法氏囊中已检测不到;RT-PCR结果显示pCI-chIL-2转录的mRNA在各组织于不同时间均有存在.本研究为重组chIL-2作为免疫增强剂的应用提供体内试验数据. 展开更多
关键词 鸡自细胞介素2(chil-2) 分布 竞争PCR RT-PCR
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鸡白细胞介素18成熟蛋白在昆虫细胞/杆状病毒系统中的表达 被引量:2
16
作者 韩宗玺 刘胜旺 +1 位作者 孔宪刚 冉多良 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第4期59-62,共4页
将编码鸡的白细胞介素 1 8(chickeninterleukine 1 8,ChIL 1 8)成熟蛋白的基因亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacB上 ,构建真核转移载体pMelBacBChIL 1 8,经限制性内切酶消化、ChIL 1 8特异引物PCR鉴定和确证性序列测定 ,证明目的基因正... 将编码鸡的白细胞介素 1 8(chickeninterleukine 1 8,ChIL 1 8)成熟蛋白的基因亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacB上 ,构建真核转移载体pMelBacBChIL 1 8,经限制性内切酶消化、ChIL 1 8特异引物PCR鉴定和确证性序列测定 ,证明目的基因正确克隆到载体的预期位点。将纯化的pMelBacBChIL 1 8质粒与杆状病毒DNA(Bac N BlueTM DNA)共转染sf9昆虫细胞 ,经四轮蓝斑筛选纯化 ,获得了重组杆状病毒 ,命名为rBaculovirusChIL 1 8。提取病毒染色体DNA ,经ChIL 1 8特异引物和重组杆状病毒特异引物PCR鉴定 ,证明获得了纯化的重组杆状病毒。用该重组病毒接种sf9昆虫细胞 ,收获接种后不同时间的细胞进行SDS PAGE电泳。结果表明ChIL 1 8基因在昆虫细胞中获得了表达 ,表达的重组蛋白分子量约为 2 3kDa。应用在大肠杆菌原核表达系统中表达的重组蛋白制备的兔抗ChIL 1 8多克隆抗体进行Westernblot分析 ,表明本研究真核系统表达的ChIL 1 8成熟蛋白和前期原核系统表达的ChIL 1 8成熟蛋白均具有生物学活性。 展开更多
关键词 chil-18 鸡白细胞介素18 成熟蛋白 昆虫细胞/杆状病毒系统 表达 生物学活性
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表达鸡柔嫩艾美耳球虫表面抗原TATA4与鸡IL-IL-2的侵入型乳酸菌构建及鉴定 被引量:1
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作者 刘洋 姜延龙 +4 位作者 刘晶 张赞 高兴 王春凤 杨桂连 《中国家禽》 北大核心 2019年第10期20-25,共6页
为探究鸡柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)表面抗原TA4在植物乳杆菌NC8的表达情况,使用PCR扩增TA4片段,同时使用细胞因子ChIL-2作为免疫佐剂,应用猪圆环病毒2A肽(P2A)序列使抗原与免疫佐剂共表达,连接有金黄色葡萄球菌的纤连蛋白结合蛋白A(Fn... 为探究鸡柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)表面抗原TA4在植物乳杆菌NC8的表达情况,使用PCR扩增TA4片段,同时使用细胞因子ChIL-2作为免疫佐剂,应用猪圆环病毒2A肽(P2A)序列使抗原与免疫佐剂共表达,连接有金黄色葡萄球菌的纤连蛋白结合蛋白A(FnBPA)的409载体,构建两株重组侵入型乳酸菌NC8 pSIP 409-FnBPA-pgsA′-TA4和NC8 pSIP 409-FnBPA-pgsA′-TA4-IL2。使用自制多克隆抗体通过Western blot检测重组菌的蛋白表达情况。结果表明,两种侵入型目的蛋白TA4和IL-2使用多克隆抗体检测均可成功检测到蛋白表达,为后期动物试验及益生菌口服疫苗的制备奠定了基础。 展开更多
关键词 侵入型乳酸菌 鸡柔嫩艾美耳球虫 TA4 chil-2
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中华医学会变态反应学分会2012年学术会议纪要 被引量:2
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作者 支玉香 王子熹 尹佳 《中华临床免疫和变态反应杂志》 2013年第2期209-214,共6页
由中华医学会变态反应学分会主办、陕西省变态反应学分会协办的中华医学会变态反应学分会2012年学术会议于2012年10月28日在古都西安闭幕。会议邀请了国内外专家就变态反应疾病基础与临床研究热点问题及新进展进行了专题报告,与会者一... 由中华医学会变态反应学分会主办、陕西省变态反应学分会协办的中华医学会变态反应学分会2012年学术会议于2012年10月28日在古都西安闭幕。会议邀请了国内外专家就变态反应疾病基础与临床研究热点问题及新进展进行了专题报告,与会者一致认为受益匪浅。下面对会议专题报告摘要进行综述。 展开更多
关键词 过敏反应 特异性免疫治疗 疫苗 哮喘 IGE 壳多糖酶chil1 难治性慢性鼻窦炎 皮肤点刺试验 脾脏
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2022—2023年淄博市妇幼保健院接种门诊3~12岁儿童四价流感疫苗接种现状调查
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作者 李晨璟 《中国卫生工程学》 2025年第3期307-310,共4页
目的通过调查2022—2023年淄博市妇幼保健院接种门诊3~12岁儿童四价流感疫苗接种现状及影响因素,为流感防控工作提供参考。方法选取2022年9月1日至2023年3月31日在淄博市妇幼保健院接种门诊接种疫苗的1200例3~12岁儿童及其家长作为调查... 目的通过调查2022—2023年淄博市妇幼保健院接种门诊3~12岁儿童四价流感疫苗接种现状及影响因素,为流感防控工作提供参考。方法选取2022年9月1日至2023年3月31日在淄博市妇幼保健院接种门诊接种疫苗的1200例3~12岁儿童及其家长作为调查对象,利用自制问卷调查儿童四价流感疫苗接种率,利用Spearman相关性模型分析家长对流感及疫苗认知情况与四价流感疫苗接种率的相关性,采用logistic回归模型分析影响3~12岁儿童四价流感疫苗接种率的独立因素。结果2022—2023年淄博市妇幼保健院接种门诊3~12岁儿童四价流感疫苗接种率为11.25%(135/1200);Spearman相关性分析显示,家长认为四价流感疫苗非常安全、四价流感疫苗保护效果好与疫苗接种率呈正相关(P<0.05);多因素logistic回归分析显示,儿童年龄、四价流感疫苗安全性、四价流感疫苗保护效果是其独立影响因素。logistic回归模型拟合上述独立影响因素生成联合预测因子对儿童四价流感疫苗接种率的受试者工作特征曲线下面积为0.846(95%CI:0.770~0.923)。结论淄博市妇幼保健院接种门诊3~12岁儿童四价流感疫苗接种率较低,应提高家长和接种单位及医生对四价流感疫苗相关知识的认知,提高疫苗接种依从性。 展开更多
关键词 接种门诊 流感 四价流感疫苗 接种率 影响因素 儿童
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基于抗原蛋白Fiber-2及细胞因子佐剂的Ⅰ群4型禽腺病毒亚单位疫苗的开发 被引量:6
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作者 匡露寒 季国荣 +2 位作者 杨灿灿 张元兴 刘琴 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期452-458,共7页
为了开发一种抗I群4型禽腺病毒(FAd V-4)的亚单位疫苗,选择I群禽腺病毒血清4型流行毒株衣壳蛋白Fiber-2作为保护性抗原蛋白。利用昆虫细胞-杆状病毒系统生产Fiber-2蛋白,通过Westernblot检测重组蛋白的表达情况,利用双向琼脂扩散法检测... 为了开发一种抗I群4型禽腺病毒(FAd V-4)的亚单位疫苗,选择I群禽腺病毒血清4型流行毒株衣壳蛋白Fiber-2作为保护性抗原蛋白。利用昆虫细胞-杆状病毒系统生产Fiber-2蛋白,通过Westernblot检测重组蛋白的表达情况,利用双向琼脂扩散法检测重组Fiber-2的免疫原性。为了增强亚单位疫苗的免疫保护效果,添加鸡源白细胞介素2(chIL-2)和鸡源γ-干扰素(ch IFN-γ)作为免疫佐剂,与重组Fiber-2单独或混合使用,制备多种形式的亚单位疫苗,并进行动物攻毒保护试验。重组蛋白的Western-blot鉴定结果显示,63 ku处出现Fiber-2蛋白目的条带;双向琼脂扩散试验结果显示,重组蛋白效价达到1∶128,表现出良好的反应原性。动物攻毒保护试验结果显示,单独使用Fiber-2免疫SPF鸡,在50 μg/只的剂量下,可为SPF鸡提供100%的保护效果,以chIL-2和chIFN-γ为免疫佐剂,与重组Fiber-2联合免疫SPF鸡,可显著增强Fiber-2在低剂量(10 μg/只)下的免疫保护效果,上述结果表明重组Fiber-2联合chIL-2和chIFN-γ细胞因子佐剂所制备的亚单位疫苗在抗I群4型禽腺病毒感染领域具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 I群4型禽腺病毒 Fiber-2 chil-2 chIFN-γ 亚单位疫苗
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