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CD2关联蛋白通过PI3K/Akt信号通路调节神经瘤细胞N2A的神经突触生长
1
作者 张润民 郑峥 刘德山 《福建医药杂志》 2025年第4期77-80,共4页
目的探讨CD2关联蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)调节神经瘤细胞N2A(Neuro2a,N2A)的神经突触生长可能的作用机制。方法应用shRNA CD2AP和过表达CD2AP的慢病毒感染N2A细胞,有效下调和上调CD2AP后,通过免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitat... 目的探讨CD2关联蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)调节神经瘤细胞N2A(Neuro2a,N2A)的神经突触生长可能的作用机制。方法应用shRNA CD2AP和过表达CD2AP的慢病毒感染N2A细胞,有效下调和上调CD2AP后,通过免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)等方法研究CD2AP、PI3K和TrkA等蛋白的相互作用关系,探讨CD2AP是否通过PI3K/Akt信号通路调节N2A细胞的神经突触的生长。结果在全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)刺激N2A细胞后,CD2AP支架蛋白可以与TrkA受体发生相互作用,继续激活PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达。在ATRA干预N2A细胞中,TrkA与CD2AP之间存在共定位,并形成TrkA-CD2AP复合物,进一步证实CD2AP是在神经突起结构可塑性中Akt通路的一个正调控的因子。结论CD2AP通过PI3K/Akt信号通路调节N2A细胞的神经突触生长。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 cd2关联蛋白 突触可塑性 认知损害
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CD2AP介导的液-液相分离调控小胶质细胞的吞噬和迁移
2
作者 陆炯彤 陆星宇 +3 位作者 李胜男 曾凯星 张佳昊 崔理立 《广东医科大学学报》 2025年第4期379-388,共10页
目的观察CD2AP在小鼠大脑中的表达情况,探究其是否会发生相分离,以及对小胶质细胞吞噬和迁移功能的影响。方法使用免疫荧光染色法研究CD2AP蛋白在WT小鼠和AD模型小鼠大脑中的表达和定位情况;在转染CD2AP的293T细胞中检测液滴的液态动力... 目的观察CD2AP在小鼠大脑中的表达情况,探究其是否会发生相分离,以及对小胶质细胞吞噬和迁移功能的影响。方法使用免疫荧光染色法研究CD2AP蛋白在WT小鼠和AD模型小鼠大脑中的表达和定位情况;在转染CD2AP的293T细胞中检测液滴的液态动力学;使用CD2AP重组蛋白观察液滴的形成;体外培养HMC3细胞并转染,通过划痕实验和细胞吞噬实验,检测对照组和CD2AP组细胞迁移率和吞噬的差异。结果CD2AP在小胶质细胞中呈高表达,呈液滴状分布。胞内过表达CD2AP后出现了具有流动性的液滴。CD2AP体外重组蛋白在不同拥挤剂的作用下不同时间点均能形成液滴。CD2AP过表达组细胞迁移率明显增高(P<0.05),但吞噬能力下降(P<0.05)。结论CD2AP具有液-液相分离的能力,并且影响小胶质细胞的吞噬和迁移能力。 展开更多
关键词 cd2AP 阿尔茨海默病 液-液相分离 细胞的吞噬 细胞迁移 小胶质细胞
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高碳酸因素对大鼠活化T淋巴细胞CD28/B7和CD2/CD48(LFA-3)信号转导通路的影响 被引量：1
3
作者 张丽娟 车玉香 +1 位作者 高伟 崔晓光 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第6期460-463,共4页
目的：探讨高碳酸因素对大鼠活化T淋巴细胞CD28／B7和CD2／CD48（LFA－3）信号转导通路的影响。方法采集体重200～250 g的健康Wistar大鼠外周静脉血样，分离T淋巴细胞，培养于含有植物血凝素（ PHA）的无菌16孔培养板中。采用随机数字... 目的：探讨高碳酸因素对大鼠活化T淋巴细胞CD28／B7和CD2／CD48（LFA－3）信号转导通路的影响。方法采集体重200～250 g的健康Wistar大鼠外周静脉血样，分离T淋巴细胞，培养于含有植物血凝素（ PHA）的无菌16孔培养板中。采用随机数字表法，将其分为3组：对照组常规培养；高碳酸组和缓冲液组于O2－N2－CO2混合气体培养箱中培养，维持培养液PaCO280～100 mmHg；缓冲液组用NaH－CO3缓冲液调节，维持培养液pH值7．2～7．4。分别于给予植物血凝素前和给予植物血凝素细胞培养1、2、4 h（ T0～3）时，随机取4孔，收集细胞和培养液，采用流式细胞仪测定T淋巴细胞坏死率、凋亡率、CD28和CD2阳性率；采用ELISA法测定培养液IL－2、IFN－γ、IL－4和IL－10的浓度。结果3组T细胞T0～3时坏死率和凋亡率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。与对照组比较，高碳酸组和缓冲液组T1～3时培养液IL－2和FN－γ的浓度降低，IL－4和IL－10的浓度升高，T2，3时T淋巴细胞CD28和CD2阳性率降低（P＜0．05或P＜0．01）；与高碳酸组比较，缓冲液组T1～3时培养液IL－2和IFN－γ的浓度升高，IL－4和IL－10的浓度降低（ P＜0．05或P＜0．01），各时点T淋巴细胞CD28和CD2阳性率差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论高碳酸因素可能通过抑制CD28／B7和CD2／CD48（LFA－3）信号转导通路，减少T淋巴细胞的活化，这是CO2直接作用和其酸性环境共同完成的。 展开更多
关键词 高碳酸血 T淋巴细胞 抗原 cd28 抗原 cd2
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绿脓杆菌菌毛制剂对人PBMC表达CD2、CD25、CD69抗原的促进作用 被引量：13
4
作者 廖伟娇 朱彤 +1 位作者 郑曲波 贡玉川 《广州医学院学报》 2003年第1期46-48,共3页
目的 :探讨含Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型菌毛的绿脓杆菌制剂 ,在体外对正常人外周血单个核细胞 (PBMC)的活化作用。方法 :以绿脓杆菌菌毛制剂 ,作用于体外培养的人PBMC ,采用生物素 -链霉亲和素 (BSA)免疫细胞化学法 ,检测人PBMC表面CD2、CD2 5、CD6 ... 目的 :探讨含Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型菌毛的绿脓杆菌制剂 ,在体外对正常人外周血单个核细胞 (PBMC)的活化作用。方法 :以绿脓杆菌菌毛制剂 ,作用于体外培养的人PBMC ,采用生物素 -链霉亲和素 (BSA)免疫细胞化学法 ,检测人PBMC表面CD2、CD2 5、CD6 9的表达。结果 :该制剂在实验最适条件下 ,可使PBMC上CD2表达率增加15 2 % ,CD6 9表达率增加 2 9.1% ,CD2 5的表达率增加 18.7% ,这与对照组比较差异非常显著 (P <0 .0 1)。结论 :绿脓杆菌菌毛制剂在体外能有效地促进单个核细胞的活化 ,提示该制剂可增强机体的细胞免疫功能。 展开更多
关键词 绿脓杆菌菌毛制剂 cd2 cd25 CD69
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霉酚酸酯对大鼠糖尿病肾病及CD2相关蛋白表达的影响
5
作者 吴晓蓉 邢昌嬴 +3 位作者 赵秀芬 钱军 刘佳 俞香宝 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期773-775,i0003,共4页
目的研究霉酚酸酯(MMF)对大鼠糖尿病肾病(DN)及CD2相关蛋白(CD2AP)表达的影响。方法纯种雄性SD大鼠24只,分正常对照(A)组、DN模型(B)组和MMF干预DN(C)组。饲养8周后行有关血尿生化指标和光镜组织学、透射电镜、逆转录聚合酶链反应(RT-PC... 目的研究霉酚酸酯(MMF)对大鼠糖尿病肾病(DN)及CD2相关蛋白(CD2AP)表达的影响。方法纯种雄性SD大鼠24只,分正常对照(A)组、DN模型(B)组和MMF干预DN(C)组。饲养8周后行有关血尿生化指标和光镜组织学、透射电镜、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)CD2APmRNA表达检测。结果MMF明显减少DN大鼠24 h尿蛋白的排泄,预防血肌酐的升高。组织学显示C组大鼠肾小球面积明显减少,系膜增宽及细胞外基质积聚明显改善。电镜下B组大鼠足细胞足突增宽,部分融合,肾小球毛细血管袢基膜增厚,系膜区增宽,系膜基质增多,C组大鼠以上病变都明显减轻。CD2AP mRNA表达在B组显著高于A组和C组。结论MMF具有治疗SD大鼠DN的作用,并且在转录水平逆转肾皮质CD2AP表达上调。 展开更多
关键词 霉酚酸酯 糖尿病肾病 cd2相关蛋白 cd2AP SD大鼠 蛋白表达 逆转录聚合酶链反应 肾病(DN) mRNA表达 细胞外基质积聚
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非洲猪瘟CD2v截短蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立 被引量：3
6
作者 胡巧云 黄小久 +7 位作者 唐小明 何世成 林源 彭志 石建 王卫国 刘道新 王昌建 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1103-1108,共6页
为建立非洲猪瘟(ASF)抗体检测方法,本研究根据ASFV HLJ18株基因组序列合成CD2v蛋白的胞外区段基因序列,连接至原核表达载体pET28a,构建表达质粒pET28a-CD2v。经测序鉴定正确后转化至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)pLysS,构建表达菌株p ET28a... 为建立非洲猪瘟(ASF)抗体检测方法,本研究根据ASFV HLJ18株基因组序列合成CD2v蛋白的胞外区段基因序列,连接至原核表达载体pET28a,构建表达质粒pET28a-CD2v。经测序鉴定正确后转化至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)pLysS,构建表达菌株p ET28a-CD2v/BL21(DE3)PLysS。经IPTG诱导和镍柱纯化后,获得纯化的CD2v蛋白并经SDS-PAGE和Westernblot鉴定。以纯化的CD2v蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件建立检测CD2v抗体的间接ELISA方法,并评价该方法的特异性、敏感性和重复性及在临床血清中的应用。结果显示,经测序构建的表达质粒序列正确,CD2v蛋白表达经SDS-PAGE可见略小于25k Da的条带,Westernblot显示能与ASFV感染血清发生特异性反应。建立了ASFCD2v蛋白抗体检测方法CD2v-ELISA,抗原包被质量浓度为50μg/L,血清稀释倍数为1∶100,羊抗猪HRP-IgG稀释倍数为1∶100000,阴阳性临界值为0.26;与PRRSV、CSFV、PRV(g I)、PRV(gb)、FMDV血清不发生反应,具有良好的特异性;ASF阳性血清稀释至128000倍后仍检测为阳性,具有较高的敏感性;重复性结果显示,批间和批内变异系数均小于10%。使用CD2v-ELISA检测154份临床血清,阳性结果74份,阳性率为48.05%。与2个国产、2个进口商品化ASFV抗体试剂盒的检测结果比较,CD2v-ELISA方法跟其他方法的符合率较高,分别为95.45%,94.16%,88.31%,93.51%。因此,本研究成功建立了基于CD2v胞外区段抗原的ELISA方法,可用于ASF临床抗体的检测。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 cd2v截短蛋白 间接cd2v-ELISA
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碳酸盐矿化菌的筛选与其吸附和矿化Cd2+的特性 被引量：14
7
作者 赵越 姚俊 +4 位作者 王天齐 原志敏 姜新舒 王飞 代云容 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3800-3806,共7页
从贵州省毕节市妈姑镇矿区重金属污染的土壤中筛选出5株碳酸盐矿化菌,探究其吸附和矿化Cd^(2+)的特性.从代谢热角度阐明Cd^(2+)与基质(尿素)胁迫下菌活性会降低.实验结果表明,2#菌株对Cd^(2+)耐受能力可达250mg/L.菌株吸附和矿化效率随C... 从贵州省毕节市妈姑镇矿区重金属污染的土壤中筛选出5株碳酸盐矿化菌,探究其吸附和矿化Cd^(2+)的特性.从代谢热角度阐明Cd^(2+)与基质(尿素)胁迫下菌活性会降低.实验结果表明,2#菌株对Cd^(2+)耐受能力可达250mg/L.菌株吸附和矿化效率随Cd^(2+)浓度增大而降低.Cd^(2+)初始浓度为10mg/L时,菌龄为4h的菌株对Cd^(2+)矿化效果最佳(45.14%),且矿化效果稳定.该研究表明碳酸盐矿化菌通过诱导沉淀矿化去除Cd^(2+)的效果优于菌体吸附,为碳酸盐矿化菌修复重金属污染提供理论参考和实践指导. 展开更多
关键词 碳酸盐矿化菌 筛选 cd2+ 矿化 吸附
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祛风通络方对阿霉素肾病大鼠足细胞Desmin及CD2AP蛋白的影响 被引量：15
8
作者 王竹 刘俊田 +2 位作者 孙万森 李睿萍 王晔 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期203-208,共6页
目的探讨祛风通络方对阿霉素肾病大鼠足细胞结蛋白(Desmin)和CD2相关蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)的作用。方法一次性尾静脉注射阿霉素制备肾病模型。3周后造模成功,随机分为空白对照组(A组,12只),模型对照组(B组,8只),祛风通络... 目的探讨祛风通络方对阿霉素肾病大鼠足细胞结蛋白(Desmin)和CD2相关蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)的作用。方法一次性尾静脉注射阿霉素制备肾病模型。3周后造模成功,随机分为空白对照组(A组,12只),模型对照组(B组,8只),祛风通络方小、中、大剂量组(C组、D、E每组8只)和阳性对照组(F组,8中)。从第4周起,A组和B组给生理盐水,C^E组分别给祛风通络方1.0、2.1、4.2 g/mL,F组给泼尼松25 mg/kg。各组均灌胃给药,10 mL/kg,1次/天,连续28天。期间进行24 h尿蛋白定量、血清生化指标检测,实验结束时电镜观察超微结构、Real-time PCR法及Western blot法检测足细胞骨架蛋白Desmin mRNA、裂孔隔膜蛋白CD2AP mRNA及其蛋白表达。结果 (1)与B组比较,C、D、E、F组24 h尿蛋白定量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与B组比较,C、D、E组ALB均有所升高,差异有统计学意义(P<0.05);TC含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);F组TG反而有明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)电镜观察发现,D、E、F组与B组比较,足细胞形态均有不同程度改善,特别是足突结构、足突数目改善明显,其D、E组改善更明显。(4)阿霉素肾病大鼠中Desmin mRNA、CD2AP mRNA及蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,与B组比较,C、D、E、F组Desmin mRNA和CD2AP mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)与A组比较,B组Desmin、CD2AP蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与B组比较,C、D、E、F组CD2AP蛋白表达明显降低,D、E、F组Desmin蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);各剂量组间比较,C、D、E组Desmin及CD2AP蛋白表达逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05);与F组比较,C、D组CD2AP蛋白表达明显高,E组CD2AP蛋白表达明显低,差异有统计学意义(P<0.05);C、D、E组Desmin蛋白表达较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论祛风通络方对阿霉素肾病大鼠的治疗作用伴随着改变足细胞骨架蛋白Desmin及裂孔隔膜蛋白CD2AP基因表达的改变而实现。 展开更多
关键词 祛风通络方 阿霉素肾病 结蛋白 cd2相关蛋白
原文传递
Cd2＋胁迫对竹叶眼子菜的毒理学效应分析 被引量：11
9
作者 杨海燕 施国新 +3 位作者 徐勤松 计汪栋 王红霞 李阳 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期366-370,共5页
以不同浓度Cd2+处理5d的竹叶眼子菜为实验材料,分析了叶片的光合色素、抗氧化系统、丙二醛(MDA)、可溶性糖、可溶性蛋白等生理生化指标的应答反应,并用透射电镜观察了叶细胞超微结构的变化.随着Cd2+处理浓度的增加,叶绿素含量和超氧化... 以不同浓度Cd2+处理5d的竹叶眼子菜为实验材料,分析了叶片的光合色素、抗氧化系统、丙二醛(MDA)、可溶性糖、可溶性蛋白等生理生化指标的应答反应,并用透射电镜观察了叶细胞超微结构的变化.随着Cd2+处理浓度的增加,叶绿素含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性下降,而MDA和可溶性糖含量上升;过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性和抗坏血酸(ASA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量分别在2mgL-1和4mgL-1时达到峰值;可溶性蛋白含量下降,相对分子质量(Mr)为52.1×103、42.9×103、27.4×103和14.1×103的多肽合成量逐渐减少,但Mr为18.1×103的多肽的合成量增加;叶绿体膨大、解体;线粒体嵴突肿胀、空泡化;核仁分散、核膜断裂、核质散出.结果表明:Cd2+对竹叶眼子菜的光合结构、细胞保护系统以及细胞结构的完整性等都产生明显破坏作用,最终将导致植物死亡.其中SOD、叶绿素和蛋白生物合成各指标的反应较灵敏,可作为水体Cd2+污染的监测指标.Cd2+对竹叶眼子菜的半效应浓度为2.97mgL-1. 展开更多
关键词 竹叶眼子菜 cd2+胁迫 抗氧化系统 超微结构
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坎地沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞Nephrin、Podocin和CD2AP表达的影响 被引量：24
10
作者 李秋月 李六生 +2 位作者 李桂霞 周静 吕金雷 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期310-314,共5页
目的探讨糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞相关分子Nephrin、Podocin及CD2AP表达的变化,以及坎地沙坦对其的干预作用,为DN的防治提供理论依据。方法健康雄性SD大鼠36只,随机分为3组:A组为正常对照组,B组为DN组,C组为DN+坎地沙坦组。用药后第4... 目的探讨糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞相关分子Nephrin、Podocin及CD2AP表达的变化,以及坎地沙坦对其的干预作用,为DN的防治提供理论依据。方法健康雄性SD大鼠36只,随机分为3组:A组为正常对照组,B组为DN组,C组为DN+坎地沙坦组。用药后第4周和第7周检测各组大鼠的血糖(GLU)、体重、24h尿蛋白(proteinuria)和内生肌酐清除率(Ccr),于第7周予RT-PCR法检测大鼠肾组织Nephrin、Podocin及CD2AP mRNA表达。结果 7周后,与A组比较,B组出现尿蛋白排泄增多,Ccr下降(P<0.05),肾组织Nephrin、Podocin及CD2AP mRNA水平均下调(均P<0.05);与B组比较,C组尿蛋白排泄量降低(P<0.05),Ccr升高(P<0.05),Nephrin、Podocin及CD2AP mR-NA水平均增加(均P<0.05)。采用直线相关分析后发现,尿蛋白与肾组织Nephrin、Podocin和CD2AP mRNA水平呈负相关;Ccr与肾组织Nephrin、Podocin和CD2AP mRNA水平呈正相关。结论 DN时存在足细胞分子Nephrin、Podo-cin及CD2AP表达异常,坎地沙坦对肾脏的保护作用机制可能是通过增加Nephrin、Podocin及CD2AP表达而实现。 展开更多
关键词 坎地沙坦 糖尿病肾病 足细胞 NEPHRIN PODOCIN cd2AP
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阿霉素肾病大鼠肾组织中nephrin和CD2AP的表达及意义 被引量：12
11
作者 彭亚琴 莫樱 +2 位作者 蒋小云 张巧玲 陈述枚 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期15-20,25,共7页
【目的】动态观察nephrin、CD2相关蛋白(CD2AP)在阿霉素肾病大鼠肾小球中的表达变化,探讨其在蛋白尿发生发展过程中的作用。【方法】72只大鼠分为2组,模型组36只和对照组36只,模型组大鼠尾静脉一次性注射盐酸阿霉素,对照组大鼠尾静脉一... 【目的】动态观察nephrin、CD2相关蛋白(CD2AP)在阿霉素肾病大鼠肾小球中的表达变化,探讨其在蛋白尿发生发展过程中的作用。【方法】72只大鼠分为2组,模型组36只和对照组36只,模型组大鼠尾静脉一次性注射盐酸阿霉素,对照组大鼠尾静脉一次性注射等容积生理盐水,分别于注射后3、5、7、14、28、42d各杀检6只大鼠。采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学检测大鼠肾小球中nephrin、CD2AP的表达和分布变化。【结果】①模型组大鼠7d时nephrinmRNA表达增加,14d时其蛋白表达(9.44±0.49)亦显著增加;CD2AP表达增加时间较晚,28d时其mRNA和蛋白表达(7.88±1.01)才显著增加。②与对照组相比,模型组nephrin、CD2AP出现分布异常,从沿着毛细血管袢线样分布逐渐转变为不连续性颗粒样或斑片状分布。③肾小球nephrinmRNA、CD2APmRNA表达量与24h尿蛋白量均呈正相关关系(r=0.878,P<0.01;r=0.945,P<0.01)。【结论】①nephrin早期出现表达增加及分布异常,可能是导致蛋白尿的原因及判断肾小球足细胞损伤的一个早期重要指标。②CD2AP在后期出现表达增加,可能是足细胞抵抗损伤的一种代偿反应。 展开更多
关键词 NEPHRIN cd2AP 阿霉素 蛋白尿
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CD2相关蛋白在足细胞分化中的作用 被引量：7
12
作者 姜华军 常莹 +3 位作者 朱忠华 刘建社 邓安国 张春 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期135-142,共8页
本文旨在研究肾脏足细胞的分化特点及CD2相关蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)在足细胞分化过程中的作用。用RPMI1640培养基在33oC许可条件下培养永生化小鼠足细胞系(未分化组),转染针对CD2AP的小分子干扰RNA(small interfering RNA,... 本文旨在研究肾脏足细胞的分化特点及CD2相关蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)在足细胞分化过程中的作用。用RPMI1640培养基在33oC许可条件下培养永生化小鼠足细胞系(未分化组),转染针对CD2AP的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)后置于37oC非许可条件下培养(转染组),并将非许可条件下未转染组作为对照组。用MTT法检测足细胞的生长速度;用RT-PCR方法检测CD2AP、WT1、synaptopodin和nephrin mRNA表达;用Westernblot检测CD2AP、WT1和nephrin蛋白表达;用免疫荧光结合激光共聚焦方法检测CD2AP、nephrin、F-actin和tubulin在分化及未分化足细胞中的分布及其共定位情况。结果显示,CD2AP、WT1和nephrin在分化及未分化足细胞中均可稳定表达,而synaptopodin仅表达于已分化足细胞,在未分化足细胞无表达。在足细胞分化过程中,CD2AP和nephrin的表达上调(P<0.05);CD2AP、tubulin和F-actin在细胞内的分布发生改变,CD2AP与nephrin及F-actin在未分化足细胞中存在共定位关系。转染特异性siRNA下调CD2AP表达,细胞生长速度明显减慢,synaptopodin mRNA表达下调(P<0.05),细胞分化迟滞。结果表明,足细胞分化过程中伴随细胞骨架的重新分布和细胞形态的改变;CD2AP可能作为足细胞裂孔隔膜分子与细胞骨架的连接蛋白,在足细胞分化过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 cd2相关蛋白 足细胞 NEPHRIN SYNAPTOPODIN WT1
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化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP的调节作用 被引量：20
13
作者 方敬 陈志强 +6 位作者 郭倩 陈春宇 王春宁 谢田 孙汝 刘利飞 张肖 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期835-841,共7页
目的探讨化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP的调节作用。方法 40只大鼠采用高糖高脂饲料联合1%链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)35 mg/kg腹腔注射复制糖尿病大鼠模型,将造模成功的36只大鼠按随机数字表法... 目的探讨化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP的调节作用。方法 40只大鼠采用高糖高脂饲料联合1%链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)35 mg/kg腹腔注射复制糖尿病大鼠模型,将造模成功的36只大鼠按随机数字表法分为模型组、化瘀通络组和厄贝沙坦组,每组12只。另取10只正常大鼠作为正常组。化瘀通络组和厄贝沙坦组分别给予化瘀通络中药和厄贝沙坦灌胃,同时正常组和模型组等量蒸馏水灌胃。采用ELISA法检测不同时间点各组大鼠24 h尿蛋白定量;连续干预16周后分别检测各组大鼠体重(body weight,BW)、肾重(kidney weight,KW)、肾脏指数(kidney index,KI)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、血肌酐(serum creatinine,SCr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和尿酸(uric acid,UA);光镜和电镜下观察肾组织病理形态学变化;采用Western blot和Real-time PCR法检测肾脏足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP蛋白和mRNA表达。结果 (1)与正常组比较,模型组大鼠第4、8、12、16周24 h尿蛋白定量明显升高(P<0.01),造模后大鼠BW减轻,KI、FBG、SCr、BUN和UA水平均升高(P<0.01);与模型组比较,化瘀通络组和厄贝沙坦组第4、8、12、16周24 h尿蛋白定量明显降低,且化瘀通络组24 h尿蛋白定量较厄贝沙坦组减少更明显(P<0.05,P<0.01);造模后化瘀通络组和厄贝沙坦组BUN水平降低(P<0.05,P<0.01)。(2)肾脏病理显示:模型组肾脏结构紊乱,基底膜明显增厚,系膜重度增生,足突广泛融合;化瘀通络组和厄贝沙坦组肾脏病理改变均有不同程度减轻。(3)Western blot和Real-Time PCR显示:与正常组比较,模型组大鼠肾组织podocin、CD2AP蛋白和mRNA表达水平均降低(P<0.01);与模型组比较,化瘀通络组和厄贝沙坦组podocin、CD2AP蛋白和mRNA表达水平均升高(P<0.01);化瘀通络组podocin、CD2AP蛋白和CD2AP mRNA表达均明显高于厄贝沙坦组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论化瘀通络中药可以降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白,保护肾功能,改善肾脏病理改变,其机制可能与上调裂孔膜蛋白podocin、CD2AP表达有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 化瘀通络中药 PODOCIN cd2AP
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CD2AP、F-actin在肾病大鼠中的表达及意义 被引量：7
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作者 赵非 黄松明 +3 位作者 张爱华 费莉 郭梅 陈荣华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期182-186,共5页
目的:观察CD2-associatedprotein(CD2AP)、肌动蛋白微丝(F-actin)在氨基核苷肾病大鼠肾小球中的表达变化及其意义。方法:通过建立大鼠氨基核苷肾病模型,采用免疫组织化学、蛋白质印迹技术观察CD2AP在不同时点肾病大鼠肾小球中的表达和... 目的:观察CD2-associatedprotein(CD2AP)、肌动蛋白微丝(F-actin)在氨基核苷肾病大鼠肾小球中的表达变化及其意义。方法:通过建立大鼠氨基核苷肾病模型,采用免疫组织化学、蛋白质印迹技术观察CD2AP在不同时点肾病大鼠肾小球中的表达和分布变化,采用荧光技术检测肾小球F-actin含量的变化。结果:①肾小球足细胞CD2AP的表达在肾病模型建立的早期即有下调;在肾病大鼠蛋白尿的高峰期,CD2AP的表达明显下降(P<0.01);在肾病大鼠的疾病恢复期,CD2AP的表达逐步恢复正常。②肾小球足细胞CD2AP表达量的变化与肾病大鼠24h尿蛋白的变化呈负相关(r=-0.865,P<0.01)。③在肾病大鼠蛋白尿的高峰期,肾小球F-actin含量明显下降(P<0.05)。④肾小球CD2AP蛋白表达量和肾小球F-actin荧光定量变化呈正相关(r=0.873,P<0.01)。结论:①CD2AP、F-actin的表达变化在蛋白尿的发生机制中有着重要作用。②CD2AP可能是判断肾小球足细胞损伤的一个早期重要指标。 展开更多
关键词 cd2-associated PROTEIN 肾病 细胞骨架 微丝
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CD59-CD2对T细胞信号转导的作用 被引量：10
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作者 高美华 钟丹丹 张蓓 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期773-776,780,共5页
目的将构建的CD59-linker-CD2融合基因真核表达载体在Jurkat细胞中稳定表达,研究CD59与CD2分子在T细胞信号转导中的相互作用,探讨CD59向T细胞内传递信号的相关机制。方法酶切鉴定构建的pIRES-CD59-linker-CD2融合基因真核表达载体,脂质... 目的将构建的CD59-linker-CD2融合基因真核表达载体在Jurkat细胞中稳定表达,研究CD59与CD2分子在T细胞信号转导中的相互作用,探讨CD59向T细胞内传递信号的相关机制。方法酶切鉴定构建的pIRES-CD59-linker-CD2融合基因真核表达载体,脂质体法转染Jurkat细胞,G418筛选建立稳定转染细胞系,免疫酶法检测转染细胞表面CD59的表达,Western blot检测转染细胞中CD59蛋白的表达;用CD59单克隆抗体作用于各组Jurkat细胞,使用激光共聚焦显微镜检测细胞浆内的Ca2+,ELISA检测细胞上清中白介素2(IL-2)的变化,比较各组差异。结果经酶切鉴定证实携带CD59-linker-CD2融合基因的重组质粒扩增成功;免疫酶法和Western blot证实CD59在转染细胞中稳定表达,且转染组L-Jurkat细胞比正常组Ju-rkat细胞CD59表达量增加,二者比较其差别有统计学意义(P<0.05);与正常细胞相比,胞浆内Ca2+和IL-2在转染细胞中均高表达,两组细胞比较其差别有统计学意义(P<0.05)。结论 pIRES-CD59-linker-CD2融合基因真核表达载体可在Jurkat细胞中稳定表达,CD59mAb交联刺激后,CD59可通过CD2向细胞内传递信号,引起细胞内信号分子的一系列变化,为研究CD59与CD2在T细胞信号转导中的协同作用及进一步探讨CD59向T细胞内传递信号的机制奠定基础。 展开更多
关键词 CD59基因 cd2基因 融合基因 JURKAT细胞 细胞信号转导
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Hg2＋、Cd2＋及其复合胁迫对苦草的毒害 被引量：8
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作者 马剑敏 靳同霞 +3 位作者 成水平 贺锋 吴娟 吴振斌 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期78-81,共4页
利用微宇宙系统研究了不同浓度的Hg2+、Cd2+单一及复合处理下,苦草对这三种胁迫的响应。三种胁迫下,3d内苦草现存量增加百分比与金属离子浓度间显著负相关,其中在[Hg2+]或[Hg2++Cd2+]([Hg2+]/[Cd2+]=1)>5μmol/L时,2～3d可致死;总生... 利用微宇宙系统研究了不同浓度的Hg2+、Cd2+单一及复合处理下,苦草对这三种胁迫的响应。三种胁迫下,3d内苦草现存量增加百分比与金属离子浓度间显著负相关,其中在[Hg2+]或[Hg2++Cd2+]([Hg2+]/[Cd2+]=1)>5μmol/L时,2～3d可致死;总生产力、净生产力、呼吸强度以及叶绿素含量均随着金属离子浓度的增加而下降,同时叶绿素含量还随着胁迫时间的延长而降低,但上述四个指标在低浓度胁迫时常略有升高;可溶性蛋白含量在[Hg2+]或[Hg2++Cd2+]≤2.5μmol/L、以及[Cd2+]≤10μmol/L时升高或基本稳定,之后随着金属离子浓度的增加和胁迫时间的延长而明显降低。Hg2++Cd2+的复合胁迫效应略小于相应浓度的Hg2+,但明显大于相应浓度的Cd2+。Hg2+对苦草的毒性数倍于Cd2+,二者对苦草的毒性有相加或协同效应。 展开更多
关键词 Hg2+ cd2+ 急性胁迫 苦草
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CD58/CD2表达与宫颈癌肿瘤生物学的关系及意义 被引量：5
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作者 张婷 许飞 +3 位作者 张晨辉 张建裕 龚华 陈道桢 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1097-1099,1122,共4页
目的:探讨CD58/CD2在宫颈癌患者的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法:分别应用免疫组织化学技术及流式细胞术检测40例宫颈癌患者及30例CIN患者组织CD58水平和外周血CD2+细胞百分率,以30例子宫肌瘤患者作为正常对照。结果:宫颈癌... 目的:探讨CD58/CD2在宫颈癌患者的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法:分别应用免疫组织化学技术及流式细胞术检测40例宫颈癌患者及30例CIN患者组织CD58水平和外周血CD2+细胞百分率,以30例子宫肌瘤患者作为正常对照。结果:宫颈癌患者外周血CD2+细胞百分率及癌组织CD58表达水平均明显低于CIN组及正常对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05),且不同病理分级、肿瘤直径及间质浸润深度宫颈癌患者CD2+细胞百分率和CD58表达水平分别比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),而不同临床分期、年龄及绝经与否宫颈癌患者CD2+细胞百分率和CD58表达水平分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:CD58/CD2的表达与宫颈癌的发生、发展有关,二者可作为治疗及评价预后的参考指标,并可为肿瘤靶向治疗提供新靶点。 展开更多
关键词 宫颈癌 CD58 cd2 免疫组织化学 流式细胞术 肿瘤生物学特性
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芪卫颗粒对糖尿病肾病大鼠足细胞CD2AP表达的影响 被引量：16
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作者 王馨瑶 耿建国 +4 位作者 高彦彬 李娇阳 周盛楠 邹大威 刘迎新 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第2期239-243,共5页
目的探讨芪卫颗粒对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织足细胞裂孔隔膜蛋白CD2相关蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)表达的影响。方法采用数字表法随机选取10只大鼠为正常组,其余大鼠采用腹腔注射大剂量链脲佐菌素(strep... 目的探讨芪卫颗粒对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织足细胞裂孔隔膜蛋白CD2相关蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)表达的影响。方法采用数字表法随机选取10只大鼠为正常组,其余大鼠采用腹腔注射大剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(60 mg/kg)诱导DN大鼠模型,将成模大鼠采用数字表法随机分为模型组、西药组以及芪卫颗粒组,连续给药,动态监测大鼠血糖、体质量、24 h尿微量白蛋白;24周后将大鼠处死,采用免疫组织化学法及蛋白印迹法(Western blotting)检测肾组织足细胞CD2AP表达情况。结果与正常组相比,模型组呈高血糖、低体质量状态(P<0.05),24 h尿微量白蛋白浓度显著升高,足细胞CD2AP表达显著下降(P<0.05);与模型组相比,各给药组体质量、血糖无明显变化,24 h尿微量白蛋白浓度明显下降,CD2AP表达明显上调(P<0.05)。结论芪卫颗粒能够上调CD2AP在肾组织的表达,降低DN大鼠尿微量白蛋白排泄,延缓DN的发生、发展。 展开更多
关键词 芪卫颗粒 糖尿病肾病 足细胞 cd2AP
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CD2相关蛋白在肾病综合征中的表达及意义 被引量：11
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作者 史秀岩 张春 +4 位作者 付应峰 朱忠华 朱红艳 易丽霞 付玲 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期490-494,共5页
目的观察不同病理类型的原发性肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)患者肾小球足细胞中CD2相关蛋白(CD2AP)的表达,探讨其与足细胞损伤的关系。方法选取原发性NS患者54例,10例同期肾肿瘤切除患者正常肾组织作为对照。肾活检后常规染色观... 目的观察不同病理类型的原发性肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)患者肾小球足细胞中CD2相关蛋白(CD2AP)的表达,探讨其与足细胞损伤的关系。方法选取原发性NS患者54例,10例同期肾肿瘤切除患者正常肾组织作为对照。肾活检后常规染色观察肾脏组织病理改变,肾组织行免疫荧光法CD2AP和肾小球上皮细胞蛋白-1(GLEPP1)双重标记,对肾小球CD2AP的表达进行定位;分别用real time PCR和免疫组化SP法检测组织中CD2AP的表达,采用real time PCR检测nephrin的表达,透射电镜观察足细胞的结构变化,并定量测量足突密度。结果 (1)NS患者肾小球中CD2AP的表达及nephrin的表达下调,足细胞足突不同程度融合,足突密度降低。(2)病理表现为微小病变性肾病(minimal change disease,MCD)、局灶性节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)和膜性肾病(membranous nephropathy,MN)的NS患者CD2AP表达及nephrin表达较对照组明显降低,且CD2AP与nephrin表达呈正相关,病理表现为MCD和FSGS的NS患者CD2AP表达与足突密度呈正相关。结论本研究首次发现原发性NS患者肾小球足细胞中CD2AP的表达降低,且在MCD和FSGS中与足细胞病变程度相关,提示CD2AP低表达在足细胞病变为主的肾小球疾病中发挥重要作用。CD2AP有利于诊断足细胞病变的早期检测,对CD2AP表达减低进行早期干预可能有助于延缓疾病进展。 展开更多
关键词 肾病综合征 足细胞 cd2AP
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中国汉族儿童散发性激素耐药型肾病综合征CD2AP基因突变分析 被引量：11
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作者 孟大川 余自华 +4 位作者 王道静 付荣 王晶晶 封东宁 杨勇辉 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期641-645,650,共6页
目的分析中国汉族散发性激素耐药型肾病综合征(SRNS)患儿CD2AP基因突变及其特点。方法40例中国汉族散发性SRNS患儿,以及50例尿检正常的汉族成年人,取外周静脉血3 ml,提取基因组DNA,应用聚合酶链反应(PCR)方法扩增CD2AP基因全部18个外显... 目的分析中国汉族散发性激素耐药型肾病综合征(SRNS)患儿CD2AP基因突变及其特点。方法40例中国汉族散发性SRNS患儿,以及50例尿检正常的汉族成年人,取外周静脉血3 ml,提取基因组DNA,应用聚合酶链反应(PCR)方法扩增CD2AP基因全部18个外显子及其周围的部分内含子,进行直接DNA序列测定。应用神经网络程序对CD2AP基因内含子突变进行隐蔽性剪接位点预测。结果在40例散发性SRNS患儿中检测出11种CD2AP基因多态性,并在3例散发性SRNS患儿中检测出3种在正常对照人群中未发现的CD2AP基因变异,IVS7-135G>A、1083T>C和IVS13-137G>A。神经网络程序分析结果结合临床表型提示,IVS7-135G>A突变为非致病突变、1083T>C和IVS13-137G>A突变的致病性不明确。结论中国汉族散发性SRNS患儿存在CD2AP基因突变,今后尚需对CD2AP基因突变与SRNS患儿临床表型的关联性进行详尽研究。 展开更多
关键词 肾病综合征 激素耐药 cd2AP基因 突变 儿童
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