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基于Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路研究达格列净对心肌梗死猪心肌损伤的影响
1
作者 方伟 方中 +2 位作者 刘佳 章荣庆 徐晓东 《蚌埠医科大学学报》 2026年第1期14-19,共6页
目的:研究达格列净对实验猪心肌梗死后心肌损伤的保护作用,探讨Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路的作用机制。方法:将15只实验白猪(雌雄不限)随机分为假手术组(正常组)、心肌梗死组(模型组)及达格列净组(药物组),每组5只。HE染色观察各组猪... 目的:研究达格列净对实验猪心肌梗死后心肌损伤的保护作用,探讨Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路的作用机制。方法:将15只实验白猪(雌雄不限)随机分为假手术组(正常组)、心肌梗死组(模型组)及达格列净组(药物组),每组5只。HE染色观察各组猪心肌组织病理变化;实时荧光定量PCR检测各组转化生长因子(TGF)-β1、成纤维细胞生长因子9(FGF9)、斑块黏附蛋白1(FN1)、半乳糖苷结合凝集素3(LGALS3)的mRNA表达水平;ELISA检测各组心肌中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;TUNEL染色检测各组心肌凋亡细胞情况;Western blotting检测各组心脏组织中Bax、Bcl-2、凋亡相关蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9蛋白的表达。结果:与正常组相比,模型组心肌组织疏松水肿、心肌细胞排列紊乱且边界不清并伴有炎性细胞浸润,梗死区可见胶原沉积且由纤维组织代替;IL-1β、IL-6、TNF-α表达均升高(P<0.01),纤维化相关基因TGF-β1、FGF9、FN1、LGALS3的mRNA表达水平也升高(P<0.05);凋亡细胞明显增多,且Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达下降明显(P<0.01)。药物组干预后能显著改善心肌细胞凋亡及纤维化情况,降低TGF-β1、FGF9、FN1、LGALS3的mRNA相对表达量和IL-1β、IL-6、TNF-α的表达(P<0.01);抑制凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3、Caspase-9的表达(P<0.01),提高Bcl-2蛋白的表达水平(P<0.01)。结论:达格列净抑制心肌细胞凋亡及纤维化对心肌损伤具有保护作用,其作用机制与降低炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的释放,抑制Bax/Bcl-2/Caspase-3凋亡信号通路有关。 展开更多
关键词 心肌梗死 达格列净 细胞凋亡 Bax/Bcl-2/caspase-3信号通路 猪
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芪芍胶囊通过调节Caspase-8和Caspase-3抑制足细胞凋亡改善db/db小鼠糖尿病肾损伤
2
作者 刘靖薇 吴振华 +4 位作者 杨冰 杨凤文 檀淼 李婷婷 檀金川 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2026年第2期126-135,共10页
目的:观察芪芍胶囊对糖尿病肾脏疾病(DKD)db/db小鼠肾损害的作用,探讨其通过抑制足细胞凋亡实现保护肾脏的机制。方法:以db/m小鼠(7只)作为正常组,db/db小鼠(35只)随机分为模型组、达格列净组(0.001 g·kg^(-1)·d^(-1))及芪芍... 目的:观察芪芍胶囊对糖尿病肾脏疾病(DKD)db/db小鼠肾损害的作用,探讨其通过抑制足细胞凋亡实现保护肾脏的机制。方法:以db/m小鼠(7只)作为正常组,db/db小鼠(35只)随机分为模型组、达格列净组(0.001 g·kg^(-1)·d^(-1))及芪芍胶囊低(0.3413 g·kg^(-1)·d^(-1))、中(0.6825 g·kg^(-1)·d^(-1))、高剂量组(1.365 g·kg^(-1)·d^(-1)),药物连续干预8周,取材后测定小鼠血清肾功能[肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)]、空腹血糖(FBG)、24小时尿蛋白定量(24 h-UTP)等指标;过碘酸六胺银(PASM)染色、马松(Masson)染色观察肾脏病理组织形态;免疫组化检测胱天蛋白酶(Caspase)-3和B细胞淋巴瘤-2蛋白(Bcl-2);蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Caspase-8、Caspase-7、Caspase-3等分子的蛋白表达;肾组织原位末端标记法(TUNEL)染色观察细胞凋亡情况;肾母细胞瘤抑制基因-1(WT-1)的免疫荧光染色观察足细胞损伤情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测实验小鼠肾脏中Caspase-8、Caspase-3 mRNA表达。采用统计软件GraphPad Prism 10进行数据分析。结果:与正常组比较,模型组24 h-UTP、SCr、BUN、FBG均显著升高(P<0.01);肾组织PASM染色出现了糖原沉积增多,肾小球肥大,基底膜增厚;Masson染色显示肾组织胶原纤维增生;透视电镜显示模型组小鼠肾组织基底膜增厚,足突融合或丢失;免疫组化结果显示,模型组小鼠肾脏中Caspase-3显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平显著下降(P<0.01);肾组织TUNEL阳性细胞显著增多(P<0.01);WT-1在足细胞阳性表达显著降低(P<0.01);Western blot分析肾组织中Caspase-8、Caspase-7和Caspase-3蛋白表达显著上调(P<0.01);肾脏中Caspase-8、Caspase-3 mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,芪芍胶囊组24 h-UTP、SCr、BUN、FBG水平显著降低(P<0.01);肾组织病理损伤及足细胞损伤有一定的改善,肾脏中免疫组化显示Caspase-3显著降低(P<0.01)和Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.01),肾组织TUNEL阳性细胞数显著减少(P<0.01),WT-1在足细胞阳性表达显著升高(P<0.01),肾组织中Caspase-8、Caspase-7和Caspase-3蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),Caspase-8、Caspase-3mRNA表达水平显著下降(P<0.01)。结论:芪芍胶囊可通过调控Caspase-8、Caspase-7和Caspase-3的表达抑制足细胞凋亡,进而改善db/db小鼠糖尿病肾损害。 展开更多
关键词 芪芍胶囊 足细胞 糖尿病肾脏疾病 细胞凋亡 胱天蛋白酶(Caspase)-8/caspase-3
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茵陈蒿汤调控Fas/Caspase-8/Caspase-3信号通路改善胆汁淤积性肝损伤的机制
3
作者 朱正望 王琳琳 +6 位作者 赵静涵 佘琳静 唐银佩 蔡庆春 王兵 朱平生 苗明三 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2026年第1期39-46,共8页
目的:探究茵陈蒿汤调控肿瘤坏死因子受体超家族成员6(Fas)/胱天蛋白酶(Caspase)-8/Caspase-3信号通路抑制肝细胞凋亡改善胆汁淤积性肝损伤(CLI)的作用机制。方法48只Wistar大鼠,随机选取12只为空白组,其余大鼠一次性给予α-萘异硫氰酸酯... 目的:探究茵陈蒿汤调控肿瘤坏死因子受体超家族成员6(Fas)/胱天蛋白酶(Caspase)-8/Caspase-3信号通路抑制肝细胞凋亡改善胆汁淤积性肝损伤(CLI)的作用机制。方法48只Wistar大鼠,随机选取12只为空白组,其余大鼠一次性给予α-萘异硫氰酸酯(ANIT)灌胃复制胆汁淤积性肝损伤模型。造模大鼠随机分为模型组、熊去氧胆酸组(0.1 g·kg^(-1))、茵陈蒿汤组(9.23 g·kg^(-1)),每组12只,各组大鼠给予相应药物灌胃,连续3 d。检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、总胆红素(TBil)、总胆汁酸(TBA)水平;肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织中Fas、Caspase-8、Caspase-3、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2蛋白及mRNA表达。结果与空白组比较,模型组ALT、AST、ALP、γ-GT、TBA、TBil水平显著升高(P<0.01);TNF-α、IL-1β含量及mRNA表达显著升高(P<0.01);肝细胞排列紊乱,可见炎性细胞浸润,胆管上皮细胞增生;Fas、Caspase-8、Caspase-3、Bax蛋白及mRNA表达明显升高,Bcl-2蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,熊去氧胆酸组ALP、γ-GT、TBA、TBil水平明显降低,TNF-α、IL-1β水平及mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01),Fas、Caspase-8、Caspase-3、Bax蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2 mRNA表达明显升高(P<0.05);茵陈蒿汤组ALT、AST、γ-GT、TBA、TBil水平显著降低(P<0.01),TNF-α、IL-1β水平及mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01),Fas、Bax蛋白及Fas、Caspase-8、Caspase-3、Bax mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01);肝细胞损伤、炎性细胞浸润减轻,胆管上皮细胞增生减少。结论茵陈蒿汤可改善胆汁淤积性肝损伤,其作用机制可能与抑制Fas/Caspase-8/Caspase-3通路介导的肝细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 茵陈蒿汤 胆汁淤积 肝损伤 肿瘤坏死因子受体超家族成员6(Fas)/胱天蛋白酶(Caspase)-8/caspase-3通路
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大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3的原核表达、多克隆抗体制备及水体氨氮胁迫对其表达的影响
4
作者 江藕 陈振威 +7 位作者 王庆超 王欢 唐伟俊 姜明旭 王怀池 简宇清 黄兴政 高坚 《渔业科学进展》 北大核心 2026年第1期184-198,共15页
半胱氨酸蛋白酶家族(CASPASEs)由N端结构域以及大、小催化亚基共同组成,可在特定的天冬氨酸残基上水解底物,从而在病原感染和环境胁迫等诱导的多种程序性细胞死亡中发挥功能。为深入探究高密度养殖水体中氨氮积累背景下,CASPASEs调控大... 半胱氨酸蛋白酶家族(CASPASEs)由N端结构域以及大、小催化亚基共同组成,可在特定的天冬氨酸残基上水解底物,从而在病原感染和环境胁迫等诱导的多种程序性细胞死亡中发挥功能。为深入探究高密度养殖水体中氨氮积累背景下,CASPASEs调控大口黑鲈(Micropterus salmoides)程序性细胞死亡的作用机制,本研究针对大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3的序列进行分析,筛选合适的表达区段设计引物后PCR扩增获得目的片段,随后以pET-32a为载体构建原核重组质粒,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,分别以1.0 mmol/L和0.6 mmol/L的IPTG于16℃过夜诱导表达重组蛋白;通过Ni-NTA Beads 6FF重力柱对获得的上清液蛋白进行纯化,并以SDS-PAGE分析获得Ms-CASPASE-1和Ms-CASPASE-3重组蛋白,从而确认重组蛋白表达和纯化成功。之后,将纯化的CASPASE-1和CASPASE-3重组蛋白分别与弗氏佐剂乳化后各免疫1只日本大耳兔和3只Balb/C小鼠制备多克隆抗体,通过酶联免疫法和蛋白印迹法检测效价和特异性。结果表明,免疫后获得的抗血清均能特异性识别大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3重组蛋白和内源性蛋白,有单一且与预期分子量大小一致的目的条带;同时,CASPASE-1和CASPASE-3的兔源/鼠源抗血清效价均分别为1∶1.024×10^(7)/1∶1.024×10^(6)和1∶1.024×10^(7)/1∶1.024×10^(3)。随后,使用氨氮对大口黑鲈进行胁迫,通过组织病理学检测可发现其肾脏组织出现明显病变,表现为肾小体细胞增生、肾小囊腔扩大,远曲小管和近曲小管上皮细胞肿胀和细胞死亡。以本研究制备的CASPASE-1和CASPASE-3多克隆抗体进行蛋白质印迹实验,检测到肾脏中CASPASE-1和CASPASE-3蛋白的表达水平显著增加,这2个蛋白可能介导了后续的程序性细胞死亡,这与组织病理学的结果一致。本研究成功制备了可特异性识别大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3的兔源和鼠源多克隆抗体,并探究了水体氨氮胁迫对其表达的影响,为深入研究氨氮胁迫下大口黑鲈的程序性细胞死亡机制提供了重要的基础。 展开更多
关键词 大口黑鲈 caspase-1 caspase-3 原核表达 多克隆抗体 氨氮胁迫
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龙葵通过Bcl-2/Bax/Caspase-3通路对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的治疗作用及机制
5
作者 吴闵 安祯祥 +3 位作者 何远利 文维农 苏强 何松 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2026年第2期117-125,共9页
目的:探讨龙葵对四氯化碳(CCl4)所致大鼠肝纤维化模型的治疗效果及其潜在的分子机制。方法:将60只SD大鼠随机分为空白组,模型组,龙葵低、中、高剂量组(0.9、1.8、3.6 g·kg^(-1)),水飞蓟宾胶囊组(18.9 mg·kg^(-1)),除空白组外... 目的:探讨龙葵对四氯化碳(CCl4)所致大鼠肝纤维化模型的治疗效果及其潜在的分子机制。方法:将60只SD大鼠随机分为空白组,模型组,龙葵低、中、高剂量组(0.9、1.8、3.6 g·kg^(-1)),水飞蓟宾胶囊组(18.9 mg·kg^(-1)),除空白组外,均通过腹腔注射40%的CCl_(4)溶液构建肝纤维化大鼠模型,灌胃治疗4周后腹腔麻醉后腹主动脉取血,处死大鼠,分离肝脏。通过苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色观察大鼠病理改变;检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝纤维化指标III型前胶原(PCIII)、IV型胶原(ColIV)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤-2/B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白/胱天蛋白酶-3(Bcl-2/Bax/Caspase-3)信号通路相关信使核糖核酸(mRNA)及蛋白的表达。结果:病理结果显示,与空白组比较,模型组肝组织呈现明显肝细胞水肿、炎细胞浸润、结缔组织增生及胶原纤维沉积;与模型组比较,龙葵低、中、高剂量组及水飞蓟宾胶囊组能显著改善大鼠肝组织中肝细胞结构、水肿、炎细胞浸润、结缔组织增生及胶原纤维沉积;与空白组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST、PCIII、ColIV、LN、HA含量显著升高(P<0.01),与模型组比较,各治疗组血清中ALT、AST、PCIII、ColIV、LN、HA含量明显降低(P<0.05);Real-time PCR及Western blot结果显示,与空白组比较,模型组中Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著升高,Bax及Caspase-3 mRNA和蛋白显著下降(P<0.01);与模型组比较,各治疗组中Bcl-2 mRNA和蛋白表达降低,Bax及Caspase-3mRNA和蛋白表达明显上升(P<0.05),其中龙葵高剂量组疗效最佳。结论:龙葵通过调节Bcl-2/Bax/Caspase-3通路,调控细胞凋亡改善大鼠肝纤维化进程。 展开更多
关键词 肝纤维化 龙葵 B细胞淋巴瘤-2/B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白/胱天蛋白酶-3(Bcl-2/Bax/caspase-3)信号通路 细胞凋亡
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基于Bcl-2/Bax/caspase-3通路探讨熟地黄对注意缺陷多动障碍大鼠纹状体神经元凋亡的影响 被引量：6
6
作者 王静 朱康琳 +5 位作者 倪新强 蔡文华 杨宇婷 章嘉琦 周翀 史美君 《中国中药杂志》 北大核心 2025年第3期750-757,共8页
基于B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)/半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)信号通路探讨熟地黄对注意缺陷多动障碍(ADHD)大鼠纹状体神经元凋亡的影响。将24只3周龄雄性自发性高血压病大鼠(SHR)随机分为模型组、哌甲酯组(2 mg·kg... 基于B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)/半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)信号通路探讨熟地黄对注意缺陷多动障碍(ADHD)大鼠纹状体神经元凋亡的影响。将24只3周龄雄性自发性高血压病大鼠(SHR)随机分为模型组、哌甲酯组(2 mg·kg^(-1)·d^(-1))和熟地黄组(2.4 mg·kg^(-1)·d^(-1)),同周龄雄性WKY大鼠设为正常组,每组8只,连续灌胃给药28 d。记录每组体质量和摄食量;旷场实验、高架十字迷宫测试评估大鼠多动、冲动行为;尼氏染色法检测纹状体神经元及尼氏体变化;原位末端标记法(TUNEL)荧光染色检测纹状体细胞凋亡;免疫印迹法(Western blot)检测纹状体中Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白的表达量。结果显示,与模型组相比,熟地黄可显著降低SHR大鼠在旷场实验中的总运动距离、平均运动速度和中心区停留时间,显著减少在高架十字迷宫中进入开臂的次数比、开臂停留时间和探头次数,明显增加纹状体神经元尼氏体,显著下调凋亡指数,显著升高Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值,降低Bax、caspase-3蛋白表达。总之,熟地黄可减少ADHD大鼠的多动、冲动行为,其作用可能与调控纹状体Bcl-2/Bax/caspase-3信号通路,增强纹状体神经元抗凋亡能力有关。 展开更多
关键词 熟地黄 注意缺陷多动障碍 纹状体 Bcl-2 Bax caspase-3 神经元凋亡
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基于CYP酶/Caspase-3途径探讨何首乌及其主要成分致药物性肝损伤的作用机制
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作者 刘思雨 张依娜 +7 位作者 李敏 雷一鸣 王丽平 卫培峰 欧莉 白杨 董泰玮 高峰 《中药新药与临床药理》 北大核心 2025年第4期506-514,共9页
目的基于CYP酶/Caspase-3途径探讨何首乌及其主要成分致药物性肝损伤的作用机制。方法(1)体外实验:取HepG2细胞,分为空白组,大黄素低、中、高剂量组(50、100、150μmol·L^(-1)),大黄酸低、中、高剂量组(100、150、200μmol·L^... 目的基于CYP酶/Caspase-3途径探讨何首乌及其主要成分致药物性肝损伤的作用机制。方法(1)体外实验:取HepG2细胞,分为空白组,大黄素低、中、高剂量组(50、100、150μmol·L^(-1)),大黄酸低、中、高剂量组(100、150、200μmol·L^(-1)),没食子酸低、中、高剂量组(100、150、200μmol·L^(-1)),以及二苯乙烯苷低、中、高剂量组(200、500、1000μmol·L^(-1)),给予相应药物干预24 h。采用CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR法检测肝细胞中CYP1A1、CYP3A4、Caspase-3 mRNA表达水平;Western Blot法检测肝细胞中CYP1A1、CYP3A4、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平。(2)体内实验:将昆明种小鼠随机分为空白组、生首乌组(8 g·kg^(-1))、制首乌组(8 g·kg^(-1))、大黄素组(37.8 mg·kg^(-1))、大黄酸组(312μg·kg^(-1))、没食子酸组(4.58 g·kg^(-1)),每组10只。每天灌胃给药1次,连续给药4周。采用全自动酶标仪检测肝功能指标谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL);HE染色法观察肝组织病理变化;qRT-PCR法检测肝组织中CYP1A1、CYP3A4、Caspase-3 mRNA表达水平;Western Blot法检测肝组织中CYP1A1、CYP3A4、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平。结果(1)体外实验:与空白组比较,中、高剂量大黄素及不同浓度大黄酸、没食子酸均对HepG2细胞有显著抑制作用(P<0.01),且呈浓度依赖性。二苯乙烯苷各浓度对HepG2细胞均无明显抑制作用(P>0.05)。与空白组比较,各给药组的细胞随着给药浓度升高,细胞形态开始发生变化,呈现皱缩、变圆、颜色加深,以及部分坏死、脱落,大黄素中、高剂量组及没食子酸中、高剂量组细胞坏死严重;大黄素、大黄酸及没食子酸中、高剂量组的细胞凋亡率均明显升高(P<0.05,P<0.01);大黄素、大黄酸及没食子酸各剂量组细胞的CYP1A1 mRNA表达显著上调(P<0.05,P<0.01);大黄素高剂量组、大黄酸中/高剂量组及没食子酸各剂量组细胞的CYP3A4 mRNA表达显著上调(P<0.01);大黄素中/高剂量组、大黄酸高剂量组、没食子酸中/高剂量组细胞的Caspase-3 mRNA表达显著上调(P<0.05,P<0.01);大黄素、大黄酸及没食子酸各剂量组细胞的CYP1A1、CYP3A4、Cleaved Caspase-3蛋白表达均显著上调(P<0.05,P<0.01)。(2)体内实验:从肝组织病理损伤程度看,大致为没食子酸组>大黄酸组>大黄素组>生首乌组>制首乌组,制首乌组的肝组织病理损伤最低。与空白组比较,生首乌组、大黄素组、没食子酸组小鼠的血清IBIL、TBIL、AST、ALP水平均显著升高(P<0.05,P<0.01),大黄酸组的血清AST、ALP水平显著升高(P<0.05,P<0.01),没食子酸组的血清ALT水平明显升高(P<0.05);生首乌组、制首乌组、大黄素组、没食子酸组小鼠的肝组织CYP1A1、CYP3A4、Caspase-3 mRNA表达均显著上调(P<0.05,P<0.01),大黄酸组的肝组织CYP3A4 mRNA表达明显上调(P<0.05);生首乌组、制首乌组及没食子酸组小鼠的肝组织CYP1A1、CYP3A4蛋白表达均显著上调(P<0.05,P<0.01),生首乌组、大黄酸组及没食子酸组小鼠的肝组织Cleaved Caspase-3蛋白表达均显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论何首乌及其主要成分致肝损伤的作用机制可能与通过激活CYP1A1、CYP3A4通路,促进Caspase-3凋亡因子表达有关,其中没食子酸的肝损伤作用最强。 展开更多
关键词 何首乌 制首乌 大黄素 大黄酸 没食子酸 药物性肝损伤 CYP酶/caspase-3途径 HEPG2细胞 小鼠
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基于细胞凋亡caspase-3探讨清热益气化瘀中药硬膏对家兔急性软组织损伤的影响 被引量：2
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作者 刘瑞杰 钟静 蒋顺琬 《广州中医药大学学报》 2025年第3期709-717,共9页
【目的】基于细胞凋亡caspase-3探讨深圳市中医院院内制剂清热益气化瘀中药硬膏对家兔急性软组织损伤的影响。【方法】将40只家兔随机分为空白组、模型组、清热化瘀中药硬膏组(简称:原方硬膏组)、清热益气化瘀中药硬膏组[简称:联合(黄芪... 【目的】基于细胞凋亡caspase-3探讨深圳市中医院院内制剂清热益气化瘀中药硬膏对家兔急性软组织损伤的影响。【方法】将40只家兔随机分为空白组、模型组、清热化瘀中药硬膏组(简称:原方硬膏组)、清热益气化瘀中药硬膏组[简称:联合(黄芪)硬膏组]、清热益气化瘀中药浸渍组[简称:联合(黄芪)浸渍组],每组8只。除空白组,其他各组家兔采用打击法构建急性软组织损伤模型。给药后,观察用药24、72 h后损伤组织caspase-3阳性表达变化以及前列腺素E2(PGE2)水平变化。【结果】(1)给药24 h后:与空白组比较,3个给药组与模型组的caspase-3阳性表达增强(P<0.05),其中联合硬膏组caspase-3表达最弱,病理评分最低,其次是联合浸渍组、原方硬膏组。给药72 h后:3个治疗组的caspase-3阳性表达量与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05),而模型组caspase-3阳性表达量仍高于空白组(P<0.05)。(2)给药24 h后,模型组血清PGE2水平显著升于空白组(P<0.05),而3个治疗组血清PGE2水平与空白组、模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在给药72 h后,原方硬膏组血清PGE2水平与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05),而联合硬膏组和联合浸渍组血清PGE2水平低于模型组(P<0.05)。【结论】清热化瘀中药硬膏、清热益气化瘀中药硬膏、清热益气化瘀中药浸渍均能有效加速急性软组织损伤家兔损伤肌肉组织细胞的凋亡,减轻炎症反应,加速组织损伤的修复,且清热益气化瘀中药硬膏效果优于清热化瘀中药硬膏、清热益气化瘀中药浸渍。 展开更多
关键词 急性软组织损伤 清热益气化瘀 黄芪 中药硬膏 细胞凋亡 caspase-3 兔
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西方蜜蜂caspase-3基因克隆、分析与表达模式
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作者 张天泽 李婧娴 +7 位作者 王梦怡 范小雪 邱剑丰 骆庆明 卢兆辉 陈大福 严提珍 郭睿 《应用昆虫学报》 北大核心 2025年第4期933-944,共12页
【目的】本研究旨在为深入开展西方蜜蜂Apis mellifera caspase-3基因(Am-caspase-3)的功能研究提供参考和依据。【方法】通过PCR扩增Am-caspase-3的编码序列(Coding sequences,CDS)后进行Sanger测序验证,并利用生物信息学工具预测Am-ca... 【目的】本研究旨在为深入开展西方蜜蜂Apis mellifera caspase-3基因(Am-caspase-3)的功能研究提供参考和依据。【方法】通过PCR扩增Am-caspase-3的编码序列(Coding sequences,CDS)后进行Sanger测序验证,并利用生物信息学工具预测Am-caspase-3蛋白的理化性质、分子特征及蛋白互作网络。利用MEGA软件进行西方蜜蜂和其他物种caspase-3系统进化分析。采用RT-qPCR检测Am-caspase-3在不同组织和发育阶段,工蜂成虫应答东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae侵染过程以及工蜂幼虫应答蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis侵染过程中的相对表达量。【结果】Am-caspase-3的CDS长度为1 023 bp,编码340个氨基酸。Am-caspase-3的分子式为C_(1760)H_(2703)N_(459)O_(539)S_(23),相对分子量为39 kD,不含跨膜结构域和信号肽区,但包含44个磷酸化位点,主要分布于细胞质。Am-caspase-3的二级结构包括184条无规则卷曲,90个α-螺旋,46条延伸链和20个β-转角。在Am-caspase-3中鉴定到1个结构域和3个保守基序;Am-caspase-3与其模版1m72.1.A之间的同源性达73.00%。Am-caspase-3与CytC等12个蛋白构成1个互作网络。西方蜜蜂与东方蜜蜂Apis cerana的caspase-3之间同源性达81.23%,在进化树上聚为一支。Am-caspase-3在西方蜜蜂工蜂不同组织中差异表达,在中肠中的表达量最高且极显著高于其他6个组织(P<0.01)。Am-caspase-3在3日龄幼虫中的表达量达峰值且极显著高于卵、7-8日龄预蛹及12日龄蛹(P<0.01)。Am-caspase-3在2、6、15和18日龄成虫体内的表达量显著高于1日龄成虫体内的表达量(P<0.05)。Am-caspase-3在工蜂成虫应答东方蜜蜂微孢子虫侵染的1、4、7、10和13 d皆显著下调(P<0.05),Am-caspase-3在工蜂幼虫应答蜜蜂球囊菌侵染的1、2和3 d均显著上调(P<0.05)。【结论】成功克隆到Am-caspase-3的CDS;Am-caspase-3是潜在的酸性蛋白、亲水性蛋白和胞内蛋白,与CytC等11个蛋白之间存在互作关系;西方蜜蜂与东方蜜蜂的caspase-3之间同源性最高;Am-caspase-3潜在参与西方蜜蜂工蜂不同组织和虫态的发育过程及宿主应答病原真菌侵染的过程。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 caspase-3基因 细胞凋亡 东方蜜蜂微孢子虫 蜜蜂球囊菌
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电针通过Bcl-2/Bax/caspase-3信号通路修复海马线粒体损伤改善创伤后应激障碍大鼠的焦虑症状
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作者 马丹丹 程洁 +2 位作者 张虹 刘广 宋凯 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第11期2375-2384,共10页
目的观察电针治疗对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠海马线粒体超微结构及Bcl-2、Bax、caspase-3基因和蛋白表达的影响,探讨其治疗作用及机制。方法40只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、假针刺组、帕罗西汀组、电针组,8只/组。采... 目的观察电针治疗对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠海马线粒体超微结构及Bcl-2、Bax、caspase-3基因和蛋白表达的影响,探讨其治疗作用及机制。方法40只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、假针刺组、帕罗西汀组、电针组,8只/组。采用连续单一应激联合足底电刺激建立PTSD模型,空白组和模型组不予以治疗,电针组针刺“百会”“神庭”及双侧“肝俞”“肾俞”,假针刺组大鼠浅刺腧穴旁开5 mm处,不连接电针仪,15 min/次,5次/周,持续3周。帕罗西汀组给予帕罗西汀混悬液(10 mg/kg)灌胃,5次/周,持续3周。治疗后通过旷场实验和高架十字迷宫实验评估行为学变化,HE染色和尼式染色观察海马病理及神经细胞变化,电镜观察线粒体超微结构,实时荧光定量PCR和免疫荧光检测Bcl-2、Bax、caspase-3的mRNA及蛋白表达。结果与空白组相比,模型组大鼠旷场活动总距离、高架十字迷宫开臂区域活动路程及时间明显减少(P<0.05);海马神经细胞数量减少,细胞皱缩、空泡增多、血管周围水肿,线粒体肿胀、膜破损、嵴减少;海马神经细胞数量明显减少(P<0.0001);Bcl-2表达下降,Bax、caspase-3表达上升(P<0.0001);与模型组相比,帕罗西汀组和电针组旷场活动总距离、高架十字迷宫开臂区域路程明显增加(P<0.01);尼氏染色神经细胞数量增加(P<0.05);海马神经元皱缩减少,细胞形态更规则、排列更整齐,且神经元结构染色较均匀;线粒体结构较为完整;Bcl-2表达上升,Bax、caspase-3表达下降(P<0.001);帕罗西汀组高架十字迷宫开臂区域活动时间增加,电针组仅呈上升趋势(P>0.05);假针刺组无明显改善。结论电针可能通过上调Bcl-2、下调Bax和caspase-3,改善海马线粒体损伤,发挥对PTSD大鼠的治疗作用。 展开更多
关键词 创伤后应激障碍 电针 线粒体 神经细胞 caspase-3 焦虑障碍
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关中奶山羊Caspase-3基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究
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作者 张建永 邢岗 +6 位作者 杨凯 袁媛 彭忠宏 郭永峰 朱俊儒 阴浩 安小鹏 《中国畜牧杂志》 北大核心 2025年第6期167-173,共7页
为获得关中奶山羊半胱天冬酶-3(Caspase-3)基因CDS区,探究其生物信息学功能及其在关中奶山羊不同组织的表达规律,本研究以关中奶山羊乳腺组织cDNA为模板,通过PCR技术克隆Caspase-3基因的CDS区,并对其进行测序。在此基础上,对其进行生物... 为获得关中奶山羊半胱天冬酶-3(Caspase-3)基因CDS区,探究其生物信息学功能及其在关中奶山羊不同组织的表达规律,本研究以关中奶山羊乳腺组织cDNA为模板,通过PCR技术克隆Caspase-3基因的CDS区,并对其进行测序。在此基础上,对其进行生物信息学分析,实时荧光定量PCR检测Caspase-3基因在关中奶山羊乳腺、心脏、肾脏、子宫、脾脏、肝脏组织中的表达情况。结果显示:关中奶山羊的Caspase-3基因CDS区全长828 bp,编码275个氨基酸。氨基酸相似性比对结果显示,关中奶山羊Caspase-3基因与绵羊、羚牛、水牛、家牛、黇鹿、猪、双峰驼、人、小鼠的相似性分别为99.6%、98.5%、95.3%、94.5%、90.5%、88.4%、86.5%、83.6%、81.8%。系统进化树显示,关中奶山羊Caspase-3基因与绵羊、羚牛的亲缘关系更近,与双峰驼、猪、人、小鼠亲缘关系较远。关中奶山羊Caspase-3蛋白分子式为C_(1361)H_(2144)N_(362)O_(426)S_(21),属于稳定蛋白、亲水性蛋白,不含跨膜螺旋结构和信号肽,其主要定位于细胞核中。实时荧光定量PCR结果显示,Caspase-3基因在关中奶山羊各组织中均有一定程度的表达,其中在子宫和脾脏中的表达量显著高于其他组织。本研究为进一步阐释关中奶山羊Caspase-3基因功能奠定了基础。 展开更多
关键词 关中奶山羊 caspase-3 生物信息学分析 组织表达谱
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基于Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路探讨黄芪多糖联合维生素C对镉致雌性大鼠生殖系统损伤的保护作用
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作者 王俊诸 邓雅丹 +4 位作者 李鑫 郭威 范曦 李敏 李梅芳 《河北医药》 2025年第12期1941-1946,共6页
目的 探究Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路在黄芪多糖联合维生素C对镉致雌性大鼠生殖系统损伤的保护作用。方法 24只SD雌鼠随机分4组(每组6只):对照组腹腔注射0.9%氯化钠溶液,Cd组腹腔注射Cd Cl2,给药2组给予灌胃Aps+Vc(高低剂量)处理。试... 目的 探究Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路在黄芪多糖联合维生素C对镉致雌性大鼠生殖系统损伤的保护作用。方法 24只SD雌鼠随机分4组(每组6只):对照组腹腔注射0.9%氯化钠溶液,Cd组腹腔注射Cd Cl2,给药2组给予灌胃Aps+Vc(高低剂量)处理。试验结束后,检测血清E2、P4含量,观察卵巢病理及细胞凋亡,检测Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达。结果 腹腔注射Cd Cl2,经黄芪多糖联合维生素C干预后,Aps+Vc低、高剂量组体毛光泽、进食量和取水量、对外界刺激反应均有明显改善,腹部未出现硬块、坏疽等现象;体重增长率、卵巢指数相对升高。ELISA结果显示,Aps+Vc低、高剂量组E2、P4水平显著提高。HE染色结果显示,Aps+Vc低、高剂量组卵巢组织微环境得到明显改善。TUNEL结果显示Aps+Vc低、高剂量组卵巢组织细胞凋亡率显著下降。IHC结果显示,Bax和Caspase-3蛋白在Aps+Vc低、高剂量组卵巢组织细胞中表达率显著降低;Bcl-2蛋白在卵巢组织细胞中表达率显著升高。Western blot结果显示,Aps+Vc低、高剂量组卵巢组织细胞中Bax和Caspase-3蛋白相对表达量下调、Bcl-2蛋白相对表达量上调,Bax/Bcl-2比值降低。结论 黄芪多糖联合维生素C可通过调控镉染毒雌性大鼠卵巢组织细胞中Bax/Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达抑制镉促进卵巢组织细胞的凋亡,调整卵巢组织细胞的凋亡过程,有效减少闭锁卵泡的生成,恢复雌性大鼠血清雌性激素水平,减少镉对卵巢的损伤,改善卵巢微环境并恢复卵巢功能,对临床上卵巢受到镉损伤后的治疗具有重要价值。 展开更多
关键词 镉 黄芪多糖 维生素C Bax/Bcl-2/caspase-3信号通路
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心理应激对SD大鼠颞下颌关节髁突软骨细胞凋亡及Caspase-3表达的影响
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作者 郑程东 张媛媛 +4 位作者 张海娟 韩妍冬 于传垒 陈鹤玲 王爽 《中国美容医学》 2025年第3期7-13,共7页
目的:本研究旨在探讨单纯心理应激对大鼠颞下颌关节髁突软骨细胞凋亡及Caspase-3表达的影响。方法:通过建立大鼠的单纯心理应激动物模型,并采用HE染色、TUNEL法和免疫组织化学等实验方法观察不同时间点下大鼠颞下颌关节软骨的组织学变... 目的:本研究旨在探讨单纯心理应激对大鼠颞下颌关节髁突软骨细胞凋亡及Caspase-3表达的影响。方法:通过建立大鼠的单纯心理应激动物模型,并采用HE染色、TUNEL法和免疫组织化学等实验方法观察不同时间点下大鼠颞下颌关节软骨的组织学变化、软骨细胞凋亡情况以及Caspase-3在软骨中的表达变化。结果:与对照组相比,在心理应激1周、3周和5周后,实验组大鼠出现显著的行为学改变,体重增长量略有减少但差异无统计学意义(P>0.05);旷场实验和高架实验表明心理应激组大鼠的焦虑水平增高(P<0.05);组织学分析发现,心理应激导致软骨结构损伤,软骨细胞凋亡率增加,且随应激时间延长而加剧(P<0.05);Caspase-3的表达也随应激时间的延长而增加,但在恢复期有所下降(P<0.05)。结论:单纯心理应激可引起颞下颌关节髁突软骨病理性改变,可能与关节软骨内Caspase-3表达增加及软骨细胞过度凋亡有关。 展开更多
关键词 心理应激 颞下颌关节 颞下颌关节紊乱病 髁突软骨 细胞凋亡 caspase-3
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病毒性心肌炎患者外周血PBMC中Beclin-1、LC3-Ⅱ、Caspase-3表达与心肌损伤及预后的关系
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作者 谭晓梅 谭茂华 +2 位作者 谭雪梅 邓国红 高丽萍 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第7期1316-1319,共4页
目的探讨病毒性心肌炎(VMC)患者外周血单核细胞(PBMC)中自噬相关基因Beclin-1(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达与心肌损伤及预后关系。方法选取2020年3月至2023年6月重庆三峡医药高... 目的探讨病毒性心肌炎(VMC)患者外周血单核细胞(PBMC)中自噬相关基因Beclin-1(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达与心肌损伤及预后关系。方法选取2020年3月至2023年6月重庆三峡医药高等专科学校附属人民医院收治的120例VMC患者作为观察组,同时选取120名体检心功能正常健康人群作为对照组,比较观察组和对照组以及不同心肌损伤程度VMC患者外周血PBMC中Beclin-1、LC3-Ⅱ、Caspase-3 mRNA和血清心肌肌钙蛋白(cTnI)表达水平。采用Pearson相关性分析Beclin-1、LC3-Ⅱ、Caspase-3 mRNA与cTnI相关性。随访记录VMC患者出院1年内心血管不良事件发生情况,比较发生与未发生不良事件VMC患者Beclin-1、LC3-Ⅱ、Caspase-3 mRNA水平差异,并利用ROC曲线分析Beclin-1、LC3-Ⅱ、Caspase-3 mRNA水平对不良事件发生预测价值。结果观察组外周血PBMC中Beclin-1、LC3-Ⅱ、Caspase-3 mRNA表达水平和血清cTnI高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。VMC患者心肌损伤者入院时外周血PBMC中Beclin-1、LC3-Ⅱ、Caspase-3 mRNA表达水平和血清cTnI水平:轻度<中度<重度,差异有统计学意义(均P<0.05)。VMC患者入院时PMBC中Beclin-1、LC3-Ⅱ、Caspase-3 mRNA表达水平与血清cTnI水平呈正相关(r=0.450、0.411、0.376,P<0.05)。VMC患者1年发生不良事件率为35.00%,发生不良事件者入院时Beclin-1、LC3-Ⅱ和Caspase-3 mRNA表达水平高于未发生不良事件者,差异有统计学意义(P>0.05)。经ROC分析结果显示,VMC患者入院时PMBCs中Beclin-1、LC3-Ⅱ、Caspase-3 mRNA表达水平预测不良事件发生AUC分别为0.724、0.829、0.724、0.889,均具有一定预测价值(P<0.05)。结论Beclin-1、LC3-Ⅱ、Caspase-3 mRNA在VMC患者外周血PMBCs中呈高表达状态,且与心肌损伤有关,对患者预后具有一定的预测价值。 展开更多
关键词 病毒性心肌炎 外周血单核细胞 BECLIN-1 LC3-Ⅱ caspase-3
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肤痒清凝胶通过调控p38 MAPK/JNK/Caspase-3信号通路改善DNCB诱导的小鼠特应性皮炎
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作者 乔善鑫 李方睿 +5 位作者 禹亚杰 魏海燕 徐萌 王英 徐兴华 马亚琴 《中医药导报》 2025年第6期55-60,共6页
目的:探究肤痒清凝胶(FYQO)调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)信号通路对2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导的小鼠特应性皮炎(AD)皮损的改善作用。方法:75只小鼠随机分为对照组(Control组)... 目的:探究肤痒清凝胶(FYQO)调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)信号通路对2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导的小鼠特应性皮炎(AD)皮损的改善作用。方法:75只小鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(DNCB组)、肤痒清凝胶低剂量组(FYQO-1 g/kg组)、肤痒清凝胶中剂量组(FYQO-2 g/kg组)、肤痒清凝胶高剂量组(FYQO-4 g/kg组),每组15只。实验首日,小鼠腹部涂抹30μL 5.0%DNCB溶液致敏,第3天于背部涂50μL 0.2%DNCB溶液二次激发,此后每3 d重复1次,共计3次,第9天观察背部皮肤反应,若出现红肿、丘疹等即为造模成功。Control组不处理,DNCB组涂抹空白凝胶,FYQO-1 g/kg组、FYQO-2 g/kg组、FYQO-4 g/kg组分别涂抹1、2、4 g/kg肤痒清凝胶,2次/d,共9 d;在首次涂抹凝胶后的第3天和第9天观察小鼠搔抓行为,采用湿疹面积及严重程度指数(EASI)评分标准评价;苏木精-伊红(HE)染色观察皮损组织病理变化;免疫组织化学检测标志物蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和免疫印迹检测p38 MAPK/JNK/Caspase-3通路相关标志物mRNA和蛋白水平。结果:在首次涂抹凝胶后第3、9天,与Control组比较,DNCB组小鼠搔抓次数显著增加,在停止涂抹凝胶当天及结束后1周,DNCB组EASI评分升高,小鼠背部皮肤出现AD样皮损,表皮和棘皮层增厚,炎性细胞浸润,P38、JNK和cleaved Caspase-3 mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.05);在首次涂抹凝胶后第3、9天,与DNCB组比较,FYQO-1 g/kg、FYQO-2 g/kg、FYQO-4 g/kg组小鼠的搔抓次数显著减少,在停止涂抹凝胶当天及结束后1周,小鼠的EASI评分显著降低,小鼠背部皮肤出现不同程度的皮肤变薄、红斑和水肿,表皮层和棘皮层轻度增厚,炎症细胞浸润减少等情况,P38、JNK和cleaved Caspase-3 mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05);FYQO-4 g/kg组的效果优于FYQO-1 g/kg组和FYQO-2 g/kg组(P<0.05)。结论:肤痒清凝胶可通过调控p38MAPK/JNK/Caspase-3信号通路改善DNCB诱导的小鼠特应性皮炎。 展开更多
关键词 特应性皮炎 肤痒清凝胶 p38 MAPK/JNK/caspase-3信号通路 2 4-二硝基氯苯 小鼠
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基于神经细胞凋亡相关因子Caspase-3,NMDAR探讨当归芍药散对血管性痴呆的影响 被引量：2
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作者 国一秀 匡逸 +3 位作者 李冰 王潇慧 张敬 李彬 《吉林中医药》 2025年第2期219-223,共5页
目的探讨当归芍药散对血管性痴呆大鼠海马组织、神经凋亡相关因子Caspase-3,NMDAR的影响。方法大鼠随机分为假手术组,模型组,阳性对照组,当归芍药散低剂量组(DSS低剂量组),当归芍药散高剂量组(DSS高剂量组),除假手术组外均采用双侧颈总... 目的探讨当归芍药散对血管性痴呆大鼠海马组织、神经凋亡相关因子Caspase-3,NMDAR的影响。方法大鼠随机分为假手术组,模型组,阳性对照组,当归芍药散低剂量组(DSS低剂量组),当归芍药散高剂量组(DSS高剂量组),除假手术组外均采用双侧颈总动脉永久结扎法制备血管性痴呆大鼠模型,术后根据组别分别采用蒸馏水、尼莫地平、当归芍药散灌胃,持续4周,采用Morrirs水迷宫实验检测血管性痴呆大鼠记忆能力,采用Western blot法检测海马组织中Caspase-3,NMDAR蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组的水迷宫实验结果均显著低于假手术组(P<0.05),海马组织中的Caspase-3、NMDAR蛋白质含量显著升高(P<0.05)。与模型组比较,阳性对照组、当归芍药散高剂量组与当归芍药散低剂量组的水迷宫实验结果明显改善(P<0.05),阳性对照组和当归芍药散高剂量组的Caspase-3,NMDAR蛋白质含量均显著降低(P<0.05)。结论当归芍药散通过减少神经细胞凋亡发挥对血管性痴呆的治疗作用。 展开更多
关键词 当归芍药散 血管性痴呆 caspase-3 NMDAR
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抑制AQP4对脑缺血再灌注损伤模型小鼠Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的影响
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作者 黄玲晓 莫圣龙 +1 位作者 简崇东 商敬伟 《吉林医学》 2025年第4期763-768,共6页
目的:探讨抑制AQP4对脑缺血再灌注损伤(I/R)模型小鼠因子Bcl-2相关x蛋白(Bax)、因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)表达的影响。方法:45只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、给药组(AQP4... 目的:探讨抑制AQP4对脑缺血再灌注损伤(I/R)模型小鼠因子Bcl-2相关x蛋白(Bax)、因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)表达的影响。方法:45只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、给药组(AQP4抑制组),每组15只。建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型,缺血1 h后再灌注,给药组立即给予AQP4抑制剂AER-2712 mg/kg腹腔注射,Sham组与I/R组给予等体积生理盐水腹腔注射,给药后24 h取材。采用Longa评分评估小鼠神经功能损伤情况;TTC染色观察小鼠脑梗死面积;Western印迹法及免疫荧光染色检测Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的情况。结果:①与Sham组比较,I/R组小鼠神经功能损伤症状显著加重,差异有统计学意义(P<0.05);TTC染色可见大面积脑梗死;Western印迹检测显示小鼠脑组织Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光染色显示Bcl-2表达降低,Bax、Caspase-3表达升高。②与I/R组比较,AQP4抑制组小鼠神经功能缺损症状显著减轻,差异有统计学意义(P<0.05);脑梗死面积减小;Western印迹检测显示小鼠脑组织Bax、Caspase-3蛋白表达水平显著降低,Bcl-2蛋白表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光染色显示Bcl-2表达升高,Bax、Caspase-3表达降低。结论:抑制AQP4可抑制I/R小鼠神经细胞凋亡,减少脑细胞组织梗死面,修复神经细胞,改善神经功能缺损。 展开更多
关键词 缺血/再灌注 细胞凋亡 BCL-2 BAX caspase-3
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基于网络药理学探究生脉饮靶向Bcl-2/Bax/Caspase-3通路介导线粒体凋亡改善心力衰竭作用机制
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作者 刘玄 冯禾 +4 位作者 王靖阳 王雨婷 张瑞 詹梓廉 徐强 《中国中医药信息杂志》 2025年第9期22-30,共9页
目的基于网络药理学及实验验证探讨生脉饮通过调控线粒体凋亡改善心力衰竭的作用机制,为其临床应用提供依据。方法通过TCMSP、TCMID数据库获取生脉饮有效成分及其靶点,通过GeneCards、OMIM、DrugBank、PharmGKB、TTD数据库获取心力衰竭... 目的基于网络药理学及实验验证探讨生脉饮通过调控线粒体凋亡改善心力衰竭的作用机制,为其临床应用提供依据。方法通过TCMSP、TCMID数据库获取生脉饮有效成分及其靶点,通过GeneCards、OMIM、DrugBank、PharmGKB、TTD数据库获取心力衰竭及线粒体凋亡相关靶点,利用STRING数据库构建药物与疾病交集靶点蛋白相互作用(PPI)网络,通过Cytoscape3.8.2软件构建成分-靶点网络,采用DAVID数据库对交集靶点进行GO和KEGG通路富集分析。通过分子对接评估关键成分与核心靶蛋白的结合能力。建立心力衰竭大鼠模型,超声心动图检测大鼠心功能,ELISA检测血清脑利尿钠肽(BNP)、氨基末端前脑利尿钠肽(NT-proBNP)含量,透射电镜观察线粒体超微结构,Western blot检测Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路蛋白表达。结果筛选出生脉饮有效成分66个、靶点146个,与心力衰竭及线粒体凋亡交集靶点22个,涉及TNF、Bcl-2、Bax、Caspase-3等关键蛋白。GO富集分析显示交集靶点与炎症反应、细胞信号传导密切相关,KEGG通路富集分析提示主要涉及TNF信号通路、IL-17信号通路及线粒体功能调控通路。分子对接结果表明,Ginsenoside rh2、Beta-sitosterol等成分与靶点Bcl-2、Bax、Caspase-3结合良好。动物实验显示,生脉饮显著改善心力衰竭模型大鼠心功能(P<0.05,P<0.01),降低血清BNP和NT-proBNP含量(P<0.01),减轻线粒体病理损伤,并通过上调Bcl-2及降低Bax、Caspase-3蛋白表达(P<0.01),抑制线粒体凋亡,从而保护心肌细胞。结论生脉饮能够靶向调控Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路,改善心力衰竭相关病理过程,可为生脉饮的临床优化应用提供依据。 展开更多
关键词 生脉饮 心力衰竭 网络药理学 线粒体凋亡 Bcl-2/Bax/caspase-3通路
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基于Keap-1/Nrf2/HO-1和Caspase-3/Bcl-2/Bax信号通路探讨坤宝丸对早发性卵巢功能不全大鼠的影响
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作者 王婷婷 杨硕 +4 位作者 杜菁 王辉 左泽平 徐意 王建芳 《现代生物医学进展》 2025年第4期601-611,共11页
目的:探讨坤宝丸对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠的治疗作用。方法:采用雷公藤多苷(TWP)片灌胃诱导POI大鼠模型,将大鼠分为空白组、模型组、雌二醇组、坤宝丸低、中、高剂量组,除空白组外,上午灌胃大鼠TWP,连续造模2周,下午灌胃相应药物... 目的:探讨坤宝丸对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠的治疗作用。方法:采用雷公藤多苷(TWP)片灌胃诱导POI大鼠模型,将大鼠分为空白组、模型组、雌二醇组、坤宝丸低、中、高剂量组,除空白组外,上午灌胃大鼠TWP,连续造模2周,下午灌胃相应药物,连续给药4周。实验结束后,称量大鼠双侧卵巢湿重、子宫、全脑和垂体的重量,计算脏器指数;HE染色观察大鼠卵巢病理的改变,分析卵泡数量的变化;ELISA检测大鼠血清中E_(2)、LH、AMH和FSH含量的变化;IHC分析大鼠卵巢组织中Keap-1、Nrf2、HO-1、Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白阳性表达的情况。结果:与空白组比较,模型组大鼠卵巢湿重、性腺指数、子宫指数和垂体指数明显降低,黄体和闭锁卵泡数量明显增多,原始卵泡、次级卵泡和成熟卵泡明显减少,血清中E_(2)和AMH含量明显降低,LH和FSH含量明显升高,Keap-1、Caspase-3和Bax蛋白阳性表达明显升高,Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。与模型组相比,各给药组卵巢湿重、性腺指数、子宫指数和垂体指数出现不同程度的升高,黄体和闭锁卵泡数量明显减少,原始卵泡、次级卵泡和成熟卵泡明显增多,血清中E_(2)和AMH含量明显升高,LH和FSH含量明显降低,Keap-1、Caspase-3和Bax蛋白阳性表达明显降低,Bcl-2、Nrf2和HO-1蛋白表达量明显升高(P<0.05)。结论:坤宝丸对TWP诱导的POI大鼠有一定的治疗作用。其机制可能与影响性激素表达水平和卵泡的发育,调节Keap-1/Nrf2/HO-1和Caspase-3/Bcl-2/Bax通路有关。 展开更多
关键词 坤宝丸 POI 免疫轴 Keap-1/Nrf2/HO-1 caspase-3/Bcl-2/Bax
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血清焦亡凋控因子Caspase-3、Survivin、Bax、Bcl-2表达参与宫颈癌浸润转移的研究
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作者 卢东方 穆彦敏 陈晓琳 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第10期1061-1066,共6页
目的探讨血清焦亡凋控因子Caspase-3、Survivin、Bax、Bcl-2表达参与宫颈癌浸润转移的机制。方法将2022年1月至2023年6月邢台市中心医院进行治疗的宫颈癌患者158例作为研究对象,临床分期:Ⅰ、Ⅱ期患者101例,Ⅲ期患者57例,组织学分级:高... 目的探讨血清焦亡凋控因子Caspase-3、Survivin、Bax、Bcl-2表达参与宫颈癌浸润转移的机制。方法将2022年1月至2023年6月邢台市中心医院进行治疗的宫颈癌患者158例作为研究对象,临床分期:Ⅰ、Ⅱ期患者101例,Ⅲ期患者57例,组织学分级:高分化组79例,中低分化组79例;浸润组66例,非浸润组92例;淋巴结转移组69例,非淋巴结转移组89例;HPV感染组74例,非HPV感染组84例。另选取同期进行健康体检的志愿者158例作为对照组,研究宫颈癌患者浸润、淋巴结转移的单因素影响指标,采用logistics多因素分析研究影响宫颈癌患者浸润、淋巴结转移的危险因素。研究宫颈癌患者浸润、淋巴结转移与Caspase-3、Survivin、Bax、Bcl-2的相关性。结果研究组患者Caspase-3(t=43.70,P<0.01)、Bax(t=34.90,P<0.01)低于对照组,Bcl-2(t=37.33,P<0.01)、Survivin(t=26.63,P<0.01)高于对照组,浸润组的Caspase-3(t=5.44,P<0.01)、Bax(t=27.74,P<0.01)低于非浸润组,Bcl-2(t=11.80,P<0.01)、Survivin(t=3.07,P=0.00)、临床分期(Ⅲ期)(χ^(2)=71.60,P<0.01)、分化程度(中低分化)(χ^(2)=134.89,P<0.01)、淋巴结转移(χ^(2)=90.05,P<0.01)、HPV感染(χ^(2)=60.64,P<0.01)高于非浸润组,宫颈癌淋巴结转移患者的Caspase-3(t=9.28,P<0.01)、Bax(t=15.95,P<0.01)低于非淋巴结转移组,Bcl-2(t=8.06,P<0.01)、Survivin(t=3.45,P=0.001)、临床分期(Ⅲ期)(χ^(2)=45.11,P<0.01)、分化程度(中低分化)(χ^(2)=11.35,P<0.01)、浸润(χ^(2)=90.05,P<0.01)、HPV感染(χ^(2)=53.17,P<0.01)高于非淋巴结转移组,通过多因素分析,Caspase-3[OR=0.301,95%CI(0.205~0.443)]、Survivin[OR=3.212,95%CI(2.635~3.916)]、Bax[OR=0.361,95%CI(0.290~0.450)]、Bcl-2[OR=3.022,95%CI(2.384~3.831)]、临床分期(Ⅲ期)[OR=2.743,95%CI(1.920~3.919)]、分化程度(中低分化)[OR=2.971,95%CI(2.047~4.312)]、淋巴结转移[OR=3.281,95%CI(2.365~4.551)]、HPV感染[OR=2.801,95%CI(2.171~3.614)]均是造成宫颈癌患者浸润的危险因素,Caspase-3[OR=0.317,95%CI(0.224~0.449)]、Survivin[OR=2.762,95%CI(2.108~3.620)]、Bax[OR=0.316,95%CI(0.232~0.430)]、Bcl-2[OR=3.222,95%CI(2.522~4.116)]、临床分期(Ⅲ期)[OR=3.146,95%CI(2.576~3.842)]、分化程度(中低分化)[OR=2.812,95%CI(2.240~3.530)]均是造成宫颈癌淋巴结转移的危险因素。结论在宫颈癌患者的疾病进展中,通过对血清焦亡凋控因子Caspase-3、Bax的下调作用,通过提升Survivin、Bcl-2表达水平,进一步加剧宫颈癌浸润以及淋巴结转移的风险。 展开更多
关键词 caspase-3 BAX SURVIVIN Bcl-2 宫颈癌 浸润 淋巴结转移
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