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单轴预应变对C掺杂Fe(110)表面H吸附、扩散的影响
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作者 蔡一全 尹益辉 李继承 《物理学报》 北大核心 2025年第12期279-292,共14页
为了从微观结构层次进一步深入研究和完善预应变/预应力与H吸附钢(Fe-C合金)表面的作用机制,采用第一性原理的方法计算了单轴预应变对C掺杂Fe(110)表面的H吸附和扩散的影响,从表面原子空间构型、结合能(E_(b))、电子结构3个方面探究预... 为了从微观结构层次进一步深入研究和完善预应变/预应力与H吸附钢(Fe-C合金)表面的作用机制,采用第一性原理的方法计算了单轴预应变对C掺杂Fe(110)表面的H吸附和扩散的影响,从表面原子空间构型、结合能(E_(b))、电子结构3个方面探究预应变对H吸附和渗透的影响,并计算了掺杂和未掺杂C原子时H渗透的扩散能垒.结果表明,掺杂的C原子使Fe晶体的八面体空间在不同方向上发生畸变,从而使Fe(110)表面产生“畸变”,不同位点处畸变程度(D_(Δ))和离C原子本身的距离不一致,导致各位点在预应变下的吸附结构(H吸附高度d和单元表面积S_(Δ))与结合能(E_(b))变化趋势不一致,扩散能垒变化趋势与结合能变化趋势相反.研究发现,H吸附在C掺杂位点时,吸附结构和结合能计算结果显示H有更容易扩散到内部中的趋势,而电子结构计算结果显示C原子与H原子相斥,扩散能垒相较于未掺杂时升高,H原子难以扩散进入体相内部而在C周围富集,继而诱发氢脆.吸附结构、结合能、扩散能垒计算结果显示:在掺杂位点(TF_(S)位点)处,随着拉伸应变增大,H原子越容易扩散到钢的微观结构中,随着压缩应变增大,H原子越难扩散到钢的微观结构中,可利用压缩应变减小钢中氢脆的发生.这从微观层面解释了实际工程应用中“同等应力情况下,C越多,钢铁发生氢脆的倾向越严重”的原因,从电子结构层次完善了预应变下H吸附钢(Fe-C合金)表面的作用机制,可对氢脆的研究提供参考. 展开更多
关键词 第一性原理 α-Fe(C) 预应变 H吸附
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Mg-9Gd-4Y-2Zn-0.5Zr合金的Johnson-Cook本构模型及失效参数研究 被引量:1
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作者 郅慧栋 郭保全 +3 位作者 丁宁 闫钊鸣 朱家萱 万晨 《稀有金属材料与工程》 北大核心 2025年第3期714-721,共8页
研究了Mg-9Gd-4Y-2Zn-0.5Zr合金在不同应变率下的力学行为和断裂失效行为,开展了基于Johnson-Cook(J-C)本构模型和失效模型的参数标定及验证。利用万能试验机对该镁合金进行不同温度下的准静态拉伸试验,并且利用Hopkinson杆开展高应变率... 研究了Mg-9Gd-4Y-2Zn-0.5Zr合金在不同应变率下的力学行为和断裂失效行为,开展了基于Johnson-Cook(J-C)本构模型和失效模型的参数标定及验证。利用万能试验机对该镁合金进行不同温度下的准静态拉伸试验,并且利用Hopkinson杆开展高应变率(1000~3000 s^(-1))下的动态拉伸试验;根据试验数据对J-C本构模型中的应变率强化项和热软化项进行了修正,并标定相关模型参数。进一步开展数据仿真分析,并对比试验与仿真的断裂位置和真应力-应变曲线,验证失效模型参数的可靠性。使用SEM对镁合金断口微观形貌进行观察,探究温度、应变率对镁合金失效影响的微观行为特征,镁合金在准静态拉伸与动态拉伸过程中断口形貌中均发现了韧窝与解理台阶,为混合断裂机制,且高应变速率下解理台阶稍多,这与镁合金高应变速率下的应变敏感性有关;而在高温拉伸过程中表现为韧性断裂。 展开更多
关键词 Mg-Gd-Y-Zn-Zr合金 J-C本构模型 J-C失效模型 断裂应变
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不同类型猪瘟疫苗的免疫保护机制研究进展 被引量:1
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作者 王遵宝 杨凯 +2 位作者 李天增 李俊辉 莫小兵 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第2期88-95,共8页
本文综述了猪瘟活疫苗、猪瘟E2亚单位疫苗和重组病毒活载体疫苗的发展历程和免疫保护研究进展,比较分析了常用的猪瘟活疫苗和猪瘟E2亚单位疫苗的免疫保护效力、影响因素和缺陷,明确了未来猪瘟疫苗研发及猪瘟防控和净化的研究方向。
关键词 猪瘟 免疫保护 C株 E2亚单位疫苗 鉴别诊断
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特高压大型油箱焊接接头Johnson-Cook失效模型
4
作者 杨桂坤 袁新建 +3 位作者 孙建涛 赵义焜 李嘉熙 黎周渝 《高电压技术》 北大核心 2025年第7期3424-3433,共10页
Q355结构钢焊接接头是特高压大型油箱爆燃事故中的薄弱环节,其失效行为的预测可以有效提高油箱服役过程中的安全性。为了构建合理的焊接接头失效模型,对焊接接头的焊缝区、热影响区、母材区设计了不同的拉伸测试,拟合得到J-C失效模型的... Q355结构钢焊接接头是特高压大型油箱爆燃事故中的薄弱环节,其失效行为的预测可以有效提高油箱服役过程中的安全性。为了构建合理的焊接接头失效模型,对焊接接头的焊缝区、热影响区、母材区设计了不同的拉伸测试,拟合得到J-C失效模型的应力三轴度项、应变率项以及更好反映温度软化效应的修正后的温度项参数,同时比较了3个区域的失效模型参数,基于构建的失效模型进行数值模拟验证。结果表明:复杂应力状态及应变率对热影响区的延性有更明显的负影响,温度对热影响区及母材区存在更为明显的软化效应,数值模拟结果与试验结果更相符。 展开更多
关键词 J-C失效模型 应力三轴度 应变率 温度 断裂应变
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葡萄孢属真菌HY-021发酵培养条件优化
5
作者 包丽娟 朱海霞 +1 位作者 李欢 文轶奎 《青海农林科技》 2025年第2期17-22,共6页
为了明确菌株HY-021生长的最适条件,对其发酵产孢条件的优化进行探索。本文采用菌丝生长速率法和孢子数测定法,对拟蚕豆葡萄孢(Botrytis fabiopsis)HY-021菌株除草活性在不同培养条件下的生长及产孢情况进行了研究。结果表明,PSA培养基... 为了明确菌株HY-021生长的最适条件,对其发酵产孢条件的优化进行探索。本文采用菌丝生长速率法和孢子数测定法,对拟蚕豆葡萄孢(Botrytis fabiopsis)HY-021菌株除草活性在不同培养条件下的生长及产孢情况进行了研究。结果表明,PSA培养基最适合HY-021菌株菌丝生长和产孢,最适温度为20℃,以肌醇为碳源,硫酸铵为氮源且在黑暗条件下有利于菌丝生长,最适无机盐为氯化钙,菌丝生长的最适pH值为6~9,产孢的最适pH值为7~8,过酸过碱对HY-021菌株菌丝生长及产孢均不利。由发酵条件优化得出,HY-021菌株最佳发酵时间为5 d,最适接种量和装液量为3%和160 mL,最佳摇床转速为180 r/min。这将为菌种的大规模生产与剂型研发提供参考。 展开更多
关键词 除草菌株 拟蚕豆葡萄孢 培养条件
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TC4钛合金在高应变率复杂应力状况下的损伤失效模型研究
6
作者 熊若钦 董炜璘 +4 位作者 张恒 王珺 薛杰 刘军 耿小亮 《振动与冲击》 北大核心 2025年第24期1-7,共7页
设计了一系列无缺口试样和不同缺口类型的TC4钛合金试样,使用电子万用试验机和高速液压伺服试验机,对其开展了准静态和高应变率拉伸试验,结合试验与仿真方法,标定了材料的J-C(Johnson-Cook)本构模型和损伤模型的参数,研究了高应变率复... 设计了一系列无缺口试样和不同缺口类型的TC4钛合金试样,使用电子万用试验机和高速液压伺服试验机,对其开展了准静态和高应变率拉伸试验,结合试验与仿真方法,标定了材料的J-C(Johnson-Cook)本构模型和损伤模型的参数,研究了高应变率复杂应力状况下对材料的动态力学性能和失效特征的影响。结果显示,TC4钛合金在高应变率复杂应力状况下的失效特征显著依赖其应力三轴度。当模拟材料破坏时,仅使用J-C本构模型存在不足,需与其他模型共同作用以获得更准确的模拟结果。 展开更多
关键词 TC4钛合金 高应变率 应力三轴度 Johnson-Cook(J-C)本构模型
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冷轧和退火处理对Fe-12Mn-7Al-0.2C-0.6Si钢组织及拉伸变形行为的影响
7
作者 刘焕优 耿一帆 +2 位作者 刘帅 陈林 冯运莉 《热加工工艺》 北大核心 2025年第4期53-58,共6页
对冷轧Fe-12Mn-7Al-0.2C-0.6Si钢进行退火处理,测试不同退火温度对试验钢拉伸性能的影响,并利用OM、XRD、EBSD等技术手段对试验钢的微观组织及拉伸变形行为进行研究。结果表明:试验钢经冷轧退火处理后,组织中含有奥氏体和铁素体两相,随... 对冷轧Fe-12Mn-7Al-0.2C-0.6Si钢进行退火处理,测试不同退火温度对试验钢拉伸性能的影响,并利用OM、XRD、EBSD等技术手段对试验钢的微观组织及拉伸变形行为进行研究。结果表明:试验钢经冷轧退火处理后,组织中含有奥氏体和铁素体两相,随退火温度升高,奥氏体相含量增加;随退火温度升高试验钢屈服和抗拉强度降低,塑性升高;拉伸变形初期应变主要集中在奥氏体相,随拉伸进一步进行应变向铁素相转移;综合考虑两相比例分数以及Al、Mn元素的偏聚现象,计算得到试验钢800℃退火后奥氏体相的层错能为40.4 mJ/m^(2)。结合EBSD观察结果,奥氏体相的变形机制为位错滑移。 展开更多
关键词 Fe-Mn-Al-C钢 双相钢 微观组织 应变分布 层错能
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猪瘟兔化弱毒疫苗——半个世纪的回顾 被引量:88
8
作者 仇华吉 童光志 沈荣显 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1675-1685,共11页
猪瘟是一种严重危害养猪业的毁灭性传染病。20世纪50年代中国首创了举世闻名的猪瘟兔化弱毒疫苗(即C株),随后创制了不同的疫苗制造工艺,如细胞培养苗、乳兔组织苗和牛体反应组织苗等。C株是一株非常安全的弱毒疫苗,对各种年龄和品种的... 猪瘟是一种严重危害养猪业的毁灭性传染病。20世纪50年代中国首创了举世闻名的猪瘟兔化弱毒疫苗(即C株),随后创制了不同的疫苗制造工艺,如细胞培养苗、乳兔组织苗和牛体反应组织苗等。C株是一株非常安全的弱毒疫苗,对各种年龄和品种的猪都没有副作用,并且有良好的免疫效力,它能同时诱导体液免疫和细胞免疫应答,对不同基因型的猪瘟病毒株均能提供有效的免疫保护。免疫母猪通过母乳可对仔猪提供被动免疫保护,但过高水平的母源抗体会影响仔猪对C株疫苗的主动免疫应答。目前已经完成了包括C株及其亲本株在内的几十株猪瘟病毒的全基因组序列测定和注释,建立了猪瘟病毒的反向遗传操作系统,初步解析了猪瘟病毒主要基因的结构与功能,并构建了不同的反向遗传操作标记疫苗,赋予了C株疫苗新的生命和内涵。C株疫苗可以用于猪瘟的控制和根除,借助于C株疫苗密集接种和综合控制措施,有关国家有效地控制了猪瘟,甚至消灭了猪瘟。尽管如此,要在全球范围内根除猪瘟,今后依然有漫长的路要走,这可能有赖于对C株进行进一步改造和利用。 展开更多
关键词 猪瘟 猪瘟病毒 猪瘟兔化弱毒疫苗 20世纪50年代 综合控制措施 细胞免疫应答 被动免疫保护 反向遗传操作 回顾 免疫效力
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中国猪瘟兔化弱毒株(C-株)兔脾组织毒主要保护性抗原E2(gp55)基因序列分析 被引量:11
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作者 韩雪清 李红卫 +11 位作者 刘湘涛 李小兵 马军武 涂长春 胡弘博 殷震 蒋帅 刘伯华 赵启祖 李健强 李忠润 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期52-57,共6页
利用反转录 (RT)及套式PCR(N PCR)方法扩增了中国猪瘟兔化弱毒株 (C 株 )兔脾组织毒主要保护性抗原E2 (gp55)基因 ,成功地将其克隆并测定了核苷酸序列 ,与国内外已发表的猪瘟病毒 (HCV)E2基因序列比较的结果是 :C 株兔脾毒与C 株细胞 (S... 利用反转录 (RT)及套式PCR(N PCR)方法扩增了中国猪瘟兔化弱毒株 (C 株 )兔脾组织毒主要保护性抗原E2 (gp55)基因 ,成功地将其克隆并测定了核苷酸序列 ,与国内外已发表的猪瘟病毒 (HCV)E2基因序列比较的结果是 :C 株兔脾毒与C 株细胞 (SK6)毒、C 株疫苗 (犊牛睾丸细胞 ,HCLV C)毒、HCV SM株 (石门 )毒、Brescia株 (荷兰 )毒、Alfort株 (德国 )毒的E2核苷酸序列同源性分别为 98 87%、98 34 %、94 58%、91 0 0 %、80 78% ;氨基酸同源性分别为 98 95%、97 37%、94 2 2 %、91 60 %、89 2 3%。对C 株兔脾毒与C 株细胞毒、经典强毒及国内流行野毒E2上的A、B、C三个中和性抗原区的氨基酸组成进行了比较 ,其结果为 :C 株兔脾毒与C 株细胞毒的差异很小甚至没有差异 ,而与流行野毒及经典强毒在B、C区有较大的差异。我国经典强毒石门毒与国内80年代和 90年代流行毒之间有明显的差异 ,表明我国猪瘟流行毒株发生了变化。 展开更多
关键词 猪瘟 兔化弱毒株 兔脾组织毒E2基因 序列分析
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中国猪瘟C-株(脾淋毒)全长cDNA的分子克隆 被引量:8
10
作者 胡建和 刘湘涛 +4 位作者 张彦明 韩雪清 刘在新 张永国 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期490-493,共4页
应用RT PCR、NestedPCR和Half nestedPCR技术从实验感染兔脾组织的总RNA中得到了覆盖猪瘟病毒(CSFV)C 株全基因组的7个cDNA重叠片段,分别克隆于pMD18 T或pGEM TEasy载体后进行测序。运用T A克隆和多片段一步连接法,将cDNA重叠片段F1、F2... 应用RT PCR、NestedPCR和Half nestedPCR技术从实验感染兔脾组织的总RNA中得到了覆盖猪瘟病毒(CSFV)C 株全基因组的7个cDNA重叠片段,分别克隆于pMD18 T或pGEM TEasy载体后进行测序。运用T A克隆和多片段一步连接法,将cDNA重叠片段F1、F2、F3、F4与F5、F6、F7分别克隆到pGEM 5Zf(+)载体后,得到两个半长cDNA亚克隆重组质粒pGEM 5Zf(+)/F1 4和pGEM 5Zf(+)/F5 7,再将两个半长cDNA重叠片段连接并克隆到pGEM 5Zf(+)载体,构建出了CSFVC 株全长cDNA重组质粒pGEM 5Zf(+)/F1 7。全长cDNA的成功构建为进一步研究CSFV分子生物学提供了良好的工具。 展开更多
关键词 中国 猪瘟 C-株 脾淋毒 CDNA 分子克隆 兔脾组织 RNA 克隆 多片段一步连接法
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猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株复合实时荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立 被引量:16
11
作者 赵建军 成丹 +5 位作者 李娜 孙元 史子学 涂长春 童光志 仇华吉 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期406-412,共7页
根据GenBank中的猪瘟病毒强毒和弱毒株基因组序列设计了1对针对猪瘟病毒的通用引物和2条分别针对猪瘟病毒强毒和猪瘟兔化弱毒疫苗株的特异性TaqMan水解探针,建立了一种能区分猪瘟病毒强毒和兔化弱毒疫苗株的复合实时荧光定量RT—PCR检... 根据GenBank中的猪瘟病毒强毒和弱毒株基因组序列设计了1对针对猪瘟病毒的通用引物和2条分别针对猪瘟病毒强毒和猪瘟兔化弱毒疫苗株的特异性TaqMan水解探针,建立了一种能区分猪瘟病毒强毒和兔化弱毒疫苗株的复合实时荧光定量RT—PCR检测方法。结果显示,该方法能将我国大陆流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒株与猪瘟兔化弱毒疫苗株完全区分开来,而不与其他猪源病毒发生非特异反应,分别可检测到初始模板中41.8和81.5个拷贝的病毒RNA,与已建立的复合RT-套式PCR的敏感性相近,两种方法对152份样品检测的符合率达96.9%~100%。通过对8份猪瘟兔化细胞疫苗效价的检测,证实本方法与兔体反应热测定法有一定的相关性,可用于猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗的定量和鉴别检测。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪瘟兔化弱毒疫苗 复合实时荧光定量RT—PCR 鉴别诊断
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异源猪瘟病毒C株E2基因保护性抗原编码区的序列分析与比较 被引量:13
12
作者 李红卫 涂长春 +4 位作者 吕宗吉 孙明 金扩世 余兴龙 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期112-114,共3页
应用RT-PCR扩增了我国南京、成都、吉林3个兽医生物制品厂提供的猪瘟病毒兔化弱毒株(C株)的E2基因保护性抗原编码区,然后将其克隆到pGEM-T载体中,用Sanger′s双脱氧法对重组质粒中的插入片段进行了序列分析... 应用RT-PCR扩增了我国南京、成都、吉林3个兽医生物制品厂提供的猪瘟病毒兔化弱毒株(C株)的E2基因保护性抗原编码区,然后将其克隆到pGEM-T载体中,用Sanger′s双脱氧法对重组质粒中的插入片段进行了序列分析。将测得的这3个厂生产的C株的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列与作者实验室测得的国内石门株和国外测得的C株相同区域进行同源性比较,发现不同来源的C株及石门株之间存在不同程度的差异,核苷酸同源性为93.6%~99.6%,氨基酸同源性为90.6%~98.9%。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 免化弱毒株 E2基因 序列分析
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猪瘟病毒野毒株与疫苗株双重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:10
13
作者 王伟 符芳 +3 位作者 陈欣 李雪松 李海忠 李曦 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期854-857,共4页
为建立猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗(C株)与野毒株的快速鉴别检测方法,本研究根据GenBank登录的CSFV C株与野毒株的E2基因序列差异,设计2对特异性引物,建立了同时检测C株与野毒株的双重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。应用该方法对CSF... 为建立猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗(C株)与野毒株的快速鉴别检测方法,本研究根据GenBank登录的CSFV C株与野毒株的E2基因序列差异,设计2对特异性引物,建立了同时检测C株与野毒株的双重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。应用该方法对CSFV野毒和疫苗株的最低检出量为10拷贝;检测牛病毒性腹泻病毒Ⅰ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型4种病毒均呈阴性;批内、批间重复试验的变异系数均低于3%。应用该方法检测从黑龙江省各地区猪场采集的600份样品,结果表明野毒株的阳性率为30.5%。该方法可应用于CSFV野毒株和C株的鉴别检测。 展开更多
关键词 SYBRGreenⅠ实时荧光PCR 猪瘟病毒野毒株 C株
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猪瘟病毒兔化弱毒株全长cDNA克隆的感染性鉴定 被引量:5
14
作者 胡建和 刘湘涛 +4 位作者 郭东升 张淼涛 田宏 张彦明 谢庆阁 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期143-147,共5页
用SrfⅠ限制性内切酶将构建的猪瘟病毒兔化弱毒株(C 株)全长cDNA线性化,体外转录获得其基因组RNA,利用脂质体将基因组RNA转染至SK 6细胞系,连续传代,收集5代以后培养细胞,采用RT PCR、荧光抗体直接法、夹心ELISA进行鉴定。结果表明,所... 用SrfⅠ限制性内切酶将构建的猪瘟病毒兔化弱毒株(C 株)全长cDNA线性化,体外转录获得其基因组RNA,利用脂质体将基因组RNA转染至SK 6细胞系,连续传代,收集5代以后培养细胞,采用RT PCR、荧光抗体直接法、夹心ELISA进行鉴定。结果表明,所构建的全长cDNA具有感染性。猪瘟病毒C 株全长感染性cDNA的成功构建,为在分子水平上进一步研究中国猪瘟病毒兔化弱毒株提供了极有价值的研究工具。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 兔化弱毒株 CDNA 克隆 感染性 转染 体外转录
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免疫外科法分离克隆BALB/c小鼠胚胎干细胞 被引量:8
15
作者 徐小明 窦忠英 +1 位作者 华进联 葛秀国 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2004年第3期129-133,i001,共6页
目的 使用免疫外科法分离克隆BALB c小鼠胚胎干细胞 (embryonicstemcells,ES细胞 ) ,为进一步建立BALB c小鼠ES细胞系打下基础。方法 用免疫外科法从 4 5枚BALB c小鼠囊胚中分离得到 2 0枚去除滋养层细胞的ICM ,接种在MEF饲养层上 ,使... 目的 使用免疫外科法分离克隆BALB c小鼠胚胎干细胞 (embryonicstemcells,ES细胞 ) ,为进一步建立BALB c小鼠ES细胞系打下基础。方法 用免疫外科法从 4 5枚BALB c小鼠囊胚中分离得到 2 0枚去除滋养层细胞的ICM ,接种在MEF饲养层上 ,使用DMEM(高糖 ) +15 %FBS +0 1mmol Lβ 巯基乙醇 +0 0 1mmol L非必需氨基酸 +10 0 0IU mlLIF +10 0IU mL青霉素 +10 0IU ml链霉素培养液 ,17枚形成典型的ICM集落 (85 0 % ) ,有一枚胚胎传至第 10代。用于全胚培养的BALB c小鼠胚胎共 10 2枚 ,使用与免疫外科相同的培养方法 ,6 6枚形成典型的ICM集落 (6 4 7% ) ,其中一枚胚胎传至第 8代。结果 免疫外科法较全胚培养法有利于小鼠ES细胞的分离与克隆 ;添加LIF(10 0 0IU ml)有利于小鼠ES细胞的分离与传代 (P <0 0 5 ) ;0 0 5 %胰酶 +0 0 0 8%EDTA是较好的ES细胞消化液 ,对细胞综合损伤力小 ,且传代后ES细胞集落形成能力也较高 (P <0 0 5 )。结论 分离得到的ES细胞经形态学观察 ,AKP染色 ,体外分化实验 ,核型分析等证明其具有胚胎干细胞的诸多特性。 展开更多
关键词 BALB/C小鼠 胚胎干细胞 免疫外科法 分离 克隆
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猪瘟病毒及其全长cDNA在猪肾细胞中增殖表达特性的比较研究 被引量:5
16
作者 田宏 张彦明 +5 位作者 林彤 刘湘涛 胡建和 吴锦艳 张淼涛 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1038-1042,共5页
以猪瘟C-株弱毒疫苗株、经典强毒石门株和C-株全长cDNA为试验材料,以免疫荧光技术为主;结合ELISA和RT-PCR检测技术,对其在培养细胞中的增殖特性和表达规律进行了比较研究。同时筛选猪瘟病毒及其全长cDNA的敏感细胞,探索其增殖表达规律,... 以猪瘟C-株弱毒疫苗株、经典强毒石门株和C-株全长cDNA为试验材料,以免疫荧光技术为主;结合ELISA和RT-PCR检测技术,对其在培养细胞中的增殖特性和表达规律进行了比较研究。同时筛选猪瘟病毒及其全长cDNA的敏感细胞,探索其增殖表达规律,以便为猪瘟病毒反向遗传操作提供技术方法和可操作的条件。 展开更多
关键词 猪瘟病毒C-株 石门株 全长cDNA细胞转染 细胞转染鉴定
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猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR快速鉴别检测方法的建立 被引量:9
17
作者 郭抗抗 邓力 +3 位作者 井勇 张彦明 王晶钰 宁蓬勃 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2010年第6期13-18,共6页
【目的】建立猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株的RT-PCR快速鉴别检测方法。【方法】根据Gen-Bank中36株猪瘟病毒(CSFV)强毒株和兔化弱毒疫苗株的基因序列,分别设计了针对CSFV强毒和兔化弱毒疫苗株的特异性引物,建立了一种能区分CSFV强毒... 【目的】建立猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株的RT-PCR快速鉴别检测方法。【方法】根据Gen-Bank中36株猪瘟病毒(CSFV)强毒株和兔化弱毒疫苗株的基因序列,分别设计了针对CSFV强毒和兔化弱毒疫苗株的特异性引物,建立了一种能区分CSFV强毒和兔化弱毒疫苗株的RT-PCR检测方法。【结果】建立的RT-PCR检测方法可以从CSFV强毒株和兔化弱毒疫苗株中分别扩增出大小为187和492 bp的特异性片段,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等猪源性病毒的检测结果均为阴性,说明该方法具有较好的特异性。对10份疑似猪瘟临床样品进行检测后发现,利用该方法可以从中分别检测出CSFV强毒和疫苗毒。【结论】建立了可鉴别检测CSFV强毒株和弱毒疫苗株的RT-PCR方法,为猪瘟的早期诊断及疫苗免疫猪和野毒感染猪的鉴别提供了技术参考。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪瘟兔化弱毒疫苗 反转录-聚合酶链式反应 鉴别检测
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新型反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)鉴别猪瘟强毒和弱毒疫苗方法的建立 被引量:6
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作者 李安 崔言顺 +5 位作者 沈志强 谢金文 王金良 曲光刚 李峰 李建亮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期21-25,共5页
对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守区设计1对通用引物,扩增片段为609bp,并在该对引物扩增区域内设计针对疫苗弱毒的特异引物,扩增片段为237bp,建立一种能够区分猪瘟病毒强毒... 对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守区设计1对通用引物,扩增片段为609bp,并在该对引物扩增区域内设计针对疫苗弱毒的特异引物,扩增片段为237bp,建立一种能够区分猪瘟病毒强毒和疫苗弱毒的敏感、特异、重复性好的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)鉴别诊断方法。该方法能将我国大陆地区流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒与疫苗弱毒完全区分开来,且不与牛病毒性腹泻病毒及其他猪源病毒发生非特异反应。应用本试验建立的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)方法可以及早对猪瘟作出准确诊断,并可将强毒感染猪迅速从弱毒疫苗免疫猪群中筛选出来,减少了未感染免疫猪被误杀的可能性。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 反转录-复合套式聚合酶链式反应 强毒 兔化弱毒疫苗
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还原六价铬细菌及其还原酶的研究 被引量:15
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作者 魏斐 杨丽荣 +1 位作者 薛保国 吴坤 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期53-59,共7页
从活性污泥中筛选出的C-2苏云金芽孢杆菌,能耐受250mg/L的六价铬,并具有较好的还原能力。研究表明木糖、果糖、玉米饼粉、苹果酸、琥珀酸、柠檬酸及Cu2+、Fe2+、Ca2+离子对C-2菌的还原有积极作用,菌体的接种量影响还原的速率。C-2菌还... 从活性污泥中筛选出的C-2苏云金芽孢杆菌,能耐受250mg/L的六价铬,并具有较好的还原能力。研究表明木糖、果糖、玉米饼粉、苹果酸、琥珀酸、柠檬酸及Cu2+、Fe2+、Ca2+离子对C-2菌的还原有积极作用,菌体的接种量影响还原的速率。C-2菌还原的最适温度为37℃,最适pH为9.0;六价铬还原酶的最适pH为7.0、温度为37℃,Co2+、Cu2+、Fe2+、DTT、NADH对酶的还原有积极影响。 展开更多
关键词 C-2菌 六价铬 还原酶
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猪瘟兔化弱毒疫苗与我国近年猪瘟野毒的免疫保护相关性试验 被引量:22
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作者 丘惠深 郎洪武 王在时 《中国兽药杂志》 北大核心 1997年第3期1-3,共3页
2批猪瘟兔化毒睾丸细胞苗分别来自两家兽医生物药品厂,各分别免疫接种猪只,随后以5株猪瘟病毒野毒分别攻击,疫苗接种猪完全存活,对照猪完全死亡。此5株野毒分离自国内不同地区,并皆已经过细致的鉴定,以免疫荧光技术对猪扁桃体... 2批猪瘟兔化毒睾丸细胞苗分别来自两家兽医生物药品厂,各分别免疫接种猪只,随后以5株猪瘟病毒野毒分别攻击,疫苗接种猪完全存活,对照猪完全死亡。此5株野毒分离自国内不同地区,并皆已经过细致的鉴定,以免疫荧光技术对猪扁桃体进行了活体检查,各对照猪材料上能在攻击后一周时出现病毒,而疫苗接种猪在整个观察期间未出现病毒,据此。 展开更多
关键词 猪病 疫苗 猪瘟野毒 免疫
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