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利用BrdU在CEF(TK^+)细胞中筛选TK^-重组鸡痘病毒 被引量：7
1
作者 郭志儒 金宁一 +3 位作者 方厚华 罗坤 夏志平 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期543-545,共3页
将新城疫病毒 (NDV)四平株 HN基因 ,插入不含报告基因、以 TK为侧翼的鸡痘病毒表达载体 p UTA- 2中的复合启动子下游 ,获得重组表达质粒 p UTA- 2 HN。将重组表达质粒转染鸡痘病毒 (FPV)感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,培养、收获病毒后 ... 将新城疫病毒 (NDV)四平株 HN基因 ,插入不含报告基因、以 TK为侧翼的鸡痘病毒表达载体 p UTA- 2中的复合启动子下游 ,获得重组表达质粒 p UTA- 2 HN。将重组表达质粒转染鸡痘病毒 (FPV)感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,培养、收获病毒后 ,用含 40 m g/ L 5 -溴 - 2 -脱氧尿嘧啶 (Brd U )的培养液 ,在 CEF(TK+)细胞中筛选培养 2代 ,然后用不含 Brd U的培养液进行病毒蚀斑纯化 ,成功筛选出表达 NDV HN蛋白的 展开更多
关键词 brdu 鸡痘病毒 TK基因 重组病毒
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MTT法与BrdU ELISA法检测成纤维细胞增殖的可靠性比较 被引量：12
2
作者 刘苹 李平 +1 位作者 熊仁平 周元国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1262-1263,共2页
目的比较MTT法与B rdU ELISA法检测成纤维细胞增殖的可靠性。方法原代培养大鼠成纤维细胞,分别在细胞60%汇合和80%汇合时,以250 pg/m lTGF-β刺激细胞增殖,48 h后分别用MTT法和B rdU ELISA法,以及免疫组化方法检测细胞增殖情况。结果细... 目的比较MTT法与B rdU ELISA法检测成纤维细胞增殖的可靠性。方法原代培养大鼠成纤维细胞,分别在细胞60%汇合和80%汇合时,以250 pg/m lTGF-β刺激细胞增殖,48 h后分别用MTT法和B rdU ELISA法,以及免疫组化方法检测细胞增殖情况。结果细胞60%汇合时MTT检测组和B rdU ELISA检测组与各自的对照组比较,比值分别为1.46和1.70,检测值近似;细胞80%汇合时二者分别为1.0和2.5,免疫组化结果显示TGF-β刺激组蓝染的增殖细胞明显高于对照组。结论与MTT法相比,B rdU ELISA更能客观地反映细胞增殖情况。 展开更多
关键词 MTT法 brdu ELISA法 细胞增殖
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BrdU,CFSE和GFP标记大鼠间充质干细胞的比较 被引量：14
3
作者 付霞霏 何援利 +2 位作者 杨芳 彭冬先 刘木彪 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第5期399-402,共4页
目的:研究BrdU,CFSE和GFP作为大鼠间充质干细胞标记物的可行性.方法:分别用上述三种标记物标记大鼠间充质干细胞,检测即时、15和30d的标记率,通过检测细胞周期、凋亡率和描绘生长曲线,来明确标记物对体外培养大鼠间充质干细胞生长特性... 目的:研究BrdU,CFSE和GFP作为大鼠间充质干细胞标记物的可行性.方法:分别用上述三种标记物标记大鼠间充质干细胞,检测即时、15和30d的标记率,通过检测细胞周期、凋亡率和描绘生长曲线,来明确标记物对体外培养大鼠间充质干细胞生长特性的影响;通过流式细胞仪检测标记物对细胞表面标志(CD29,CD34,CD44,CD45)表达的影响.结果:BrdU,CFSE,GFP的即时标记率为77.0%,99.4%,89.7%,1mo后分别下降至51.9%,77.5%,82.9%.三者对体外培养的大鼠间充质干细胞的生长特性和表面标志的表达均无明显影响.结论:GFP,BrdU和CFSE均可以作为大鼠间充质干细胞的标记物. 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 溴脱氧尿嘧啶核苷 荧光染料CFSE 间充质干细胞
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用BrdU法研究γ射线外照射诱发外周血淋巴细胞HPRT基因突变 被引量：4
4
作者 赵涛 崔凤梅 +2 位作者 赵经涌 劳勤华 王六一 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期187-190,共4页
用 5 -溴脱氧尿嘧啶 (BrdU)法检测 ,不同剂量γ射线外照射诱发正常人外周血淋巴细胞HPRT基因突变频率 (MFs) ,并研究其剂量效应关系。抽取正常成年人静脉血 ,分成 5组 ,分别用 0 .0— 4 .0Gy的不同剂量γ射线照射 ,全血培养后用BrdU法... 用 5 -溴脱氧尿嘧啶 (BrdU)法检测 ,不同剂量γ射线外照射诱发正常人外周血淋巴细胞HPRT基因突变频率 (MFs) ,并研究其剂量效应关系。抽取正常成年人静脉血 ,分成 5组 ,分别用 0 .0— 4 .0Gy的不同剂量γ射线照射 ,全血培养后用BrdU法检测淋巴细胞HPRT基因MFs。结果表明 ,正常人外周血淋巴细胞的MFs随外照射剂量的增加而上升 ,且剂量效应关系符合线性平方模型。研究证明了BrdU法是一种快速、简便、较敏感的检测外照射诱发HPRT基因突变的方法 ,HPRT基因辐射突变可作为生物剂量计。 展开更多
关键词 γ射线外照射 外周血淋巴细胞 基因突变 brdu法 HPRT基因 突变频率 剂量效应关系 人体
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流式细胞仪BrdU/DNA双参数分析法测定急性白血病细胞周期及其临床意义 被引量：9
5
作者 李红华 汪月增 +4 位作者 楼方定 周春喜 李斌 靳海杰 史子江 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期913-915,共3页
研究白血病细胞的增殖动力学,探讨其与临床的关系。采用流式细胞仪（FCM）BrdU/DNA双参数分析法测定39例急性白血病骨髓细胞周期的各时相细胞比例及S期细胞的时限（Ts）,其中ANLL26例,ALL13例;初治31例,复发8例（ANLL、ALL各4例）。结... 研究白血病细胞的增殖动力学,探讨其与临床的关系。采用流式细胞仪（FCM）BrdU/DNA双参数分析法测定39例急性白血病骨髓细胞周期的各时相细胞比例及S期细胞的时限（Ts）,其中ANLL26例,ALL13例;初治31例,复发8例（ANLL、ALL各4例）。结果显示,急性白血病骨髓细胞S期比例显著低于正常,初治及复发白血病患者骨髓S期细胞比例之间相差不显著;复发白血病患者骨髓细胞的Ts比初治白血病患者及正常骨髓细胞的Ts都短。提示白血病细胞处于较正常低增殖状态;Ts时限短提示白血病细胞再生迅速,与急性白血病复发关系密切;Ts时限短为白血病预后不良因素之一。 展开更多
关键词 brdu/DNA双参数分析法 急性白血病 细胞周期 流式细胞术 溴脱氧尿苷
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成人骨髓间充质干细胞的鉴定与体外BrdU标记 被引量：14
6
作者 王小蕊 侯相麟 +1 位作者 席亚明 张海红 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第21期4131-4135,共5页
背景:目前尚未发现骨髓间充质干细胞独有的标志分子,给其鉴定带来一定困难。BrdU标记不存在放射性污染,有研究认为在不受到紫外线照射的条件下,BrdU标记后对细胞功能无损害。目的:探讨成人骨髓间充质干细胞体外鉴定和标记的方法,并观察... 背景:目前尚未发现骨髓间充质干细胞独有的标志分子,给其鉴定带来一定困难。BrdU标记不存在放射性污染,有研究认为在不受到紫外线照射的条件下,BrdU标记后对细胞功能无损害。目的:探讨成人骨髓间充质干细胞体外鉴定和标记的方法,并观察其生物学特性。设计、时间及地点:细胞观察,于2007-06/12在解放军兰州军区兰州总医院完成。材料:成人骨髓来自5例健康志愿者。BrdU为美国Sigma公司产品。方法:采集成人骨髓10mL,密度梯度法分离单个核细胞,加入含10%胎牛血清的DMEM培养基,调整细胞密度为2×108L-1进行扩增培养。取第3代骨髓间充质干细胞,加入成骨诱导培养基,行碱性磷酸酶染色;加入成脂诱导培养基,行油红O染色;加入终浓度为5,10,15μmol/LBrdU溶液,孵育12,24,48,72,96h后行免疫细胞化学染色。主要观察指标:倒置光学显微镜下观察细胞生长及增殖情况,流式细胞仪鉴定细胞表型,成骨及成脂诱导分化结果。BrdU阳性标记率及标记后细胞生长情况。结果:①体外培养的成人骨髓间充质干细胞形态均一,为梭形或纺锤形的成纤维细胞样外观;表达CD44和CD71,不表达CD34和HLA-DR;可定向诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞。②大部分骨髓间充质干细胞标记后核抗BrdU染色阳性,随着标记浓度的升高和标记时间的延长,BrdU阳性率逐渐增高,终浓度10μmol/LBrdU标记72h后阳性率达90%以上,且连续传9代均可检测到BrdU阳性细胞。第3代骨髓间充质干细胞90%处于G0/G1期,BrdU标记后88.62%处于G0/G1期,标记前后细胞生长周期无明显变化。结论:通过形态学特征、表面标记和多向分化潜能可以鉴定体外分离培养的细胞为成人骨髓间充质干细胞;BrdU标记可用于成人骨髓间充质干细胞移植入体内后存活、生长和分化的动态示踪观察;BrdU最佳标记浓度和时间分别为10μmol/L和72h。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 诱导分化 brdu
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FITC标记的抗Brdu单克隆抗体的研制 被引量：5
7
作者 徐志伟 邓鸿业 +3 位作者 韩淑红 邓玉兰 黄大无 丁桂凤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期164-165,共2页
关键词 brdu 单克隆抗体 亲和纯化 FITC标记 增殖细胞
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BrdU掺入与T细胞的活化和细胞因子表达的关系 被引量：2
8
作者 李丽 池沛冬 +2 位作者 孟锐 杨滨燕 吴长有 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期72-75,共4页
目的:探讨利用流式细胞术(FCM)检测细胞增殖(BrdU掺入)与T细胞的活化及细胞因子表达的关系。方法:正常人PBMC经PMA+Ionomycin刺激不同时间,在培养结束前1 h加入BrdU,利用抗BrdU以及多种抗细胞表面和抗细胞因子抗体标记,FCM检测。结果:... 目的:探讨利用流式细胞术(FCM)检测细胞增殖(BrdU掺入)与T细胞的活化及细胞因子表达的关系。方法:正常人PBMC经PMA+Ionomycin刺激不同时间,在培养结束前1 h加入BrdU,利用抗BrdU以及多种抗细胞表面和抗细胞因子抗体标记,FCM检测。结果:体外刺激PBMC 48 h后,可见T细胞有BrdU掺入,但随着时间的延长,掺入率没有明显增加。对比分析BrdU掺入与活化分子表达的关系表明,CD69在刺激后8 h达高峰,而CD25则需要24 h后达到高峰。另外,BrdU掺入与细胞因子表达没有明显关系,当PBMC刺激后8 h,即有大量IFN-γ的表达,而当培养时间延长到24、48和72 h后,IFN-γ的表达没有明显改变。OKT3+antiCD28刺激T细胞后BrdU的阳性率高于PMA+Ionomycin刺激的T细胞,CD8+T细胞掺入率高于CD4+T细胞。结论:利用FCM检测BrdU+细胞可以用于评价T细胞的增殖反应,但在多克隆刺激的条件下,只有少数细胞发生增殖,并且BrdU掺入率受刺激剂种类和时间的影响,BrdU掺入与活化分子和细胞因子的表达均没有明显关系。 展开更多
关键词 brdu 增殖 流式细胞仪 细胞活化
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BrdU诱导大熊猫染色体脆性位点的研究 被引量：3
9
作者 王亚军 钱永胜 +7 位作者 王喜忠 陈文元 王子淑 张咏梅 费立松 何光昕 宋云芳 陈红卫 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期511-515,共5页
以培养的大熊猫外周血淋巴细胞为实验材料，研究了ＢｒｄＵ所诱导的大熊猫染色体脆性位点．结合显带技术，初步确定了脆性位点在染色体上的分布及其出现频率等．不同的脆性位点，其表达频率会出现显著差异．其中，Ｎｏ．２染色体着丝粒... 以培养的大熊猫外周血淋巴细胞为实验材料，研究了ＢｒｄＵ所诱导的大熊猫染色体脆性位点．结合显带技术，初步确定了脆性位点在染色体上的分布及其出现频率等．不同的脆性位点，其表达频率会出现显著差异．其中，Ｎｏ．２染色体着丝粒处的脆性位点对ＢｒｄＵ极为敏感，表达频率高达４０％．此外还就ＢｒｄＵ诱导脆性位点的机理进行了初步的探讨． 展开更多
关键词 brdu 大熊猫 染色体 脆性位点
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BrdU标记检测大鼠垂体前叶细胞的增殖功能 被引量：2
10
作者 胡玉珍 赵玉峰 +3 位作者 张万会 张庆红 冯娜 张海峰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1202-1203,1206,共3页
目的:为了观察大鼠垂体前叶细胞中各类激素细胞的增殖水平,建立一种快速、准确、灵敏、无同位素污染的检测垂体前叶细胞增殖的方法。方法:应用原代培养大鼠垂体前叶细胞,加入5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记细胞增殖,用抗BrdU抗体进行免疫... 目的:为了观察大鼠垂体前叶细胞中各类激素细胞的增殖水平,建立一种快速、准确、灵敏、无同位素污染的检测垂体前叶细胞增殖的方法。方法:应用原代培养大鼠垂体前叶细胞,加入5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记细胞增殖,用抗BrdU抗体进行免疫细胞化学染色,观察大鼠垂体前叶细胞中各类激素细胞增殖能力。结果:大鼠垂体前叶细胞可见Br-dU阳性标记内分泌细胞,其细胞核内可见棕褐色阳性颗粒,核浆比例增大,呈颗粒状,提示处于细胞增殖期。免疫细胞双重染色表明,体外培养垂体前叶的生长激素细胞、催乳素细胞、促肾上腺皮质激素细胞均具有一定的增殖能力。结论:BrdU标记是一种有效的标记垂体前叶细胞增殖的方法,为探究大鼠垂体前叶细胞中各类激素细胞增殖能力提供了理论基础。 展开更多
关键词 5-溴-2-脱氧尿苷(brdu) 细胞培养 免疫细胞化学 垂体 大鼠
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用BrdU标记技术观察大鼠脊髓上胸段灰质细胞的分化发育 被引量：5
11
作者 沈伟哉 郭国庆 卢洪伟 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期289-291,I001,共4页
目的　观察脊髓灰质细胞的分化发育 ,寻找脊髓移植时胎鼠脊髓取材的最佳时间。　方法　用 5 -溴 -2 -脱氧尿嘧啶 (Brd U)标记 DNA,ABC免疫细胞化学方法观察大鼠上胸段脊髓灰质细胞的增殖分化情况。　结果孕鼠于 E10 d腹腔注射 Brd U,胎... 目的　观察脊髓灰质细胞的分化发育 ,寻找脊髓移植时胎鼠脊髓取材的最佳时间。　方法　用 5 -溴 -2 -脱氧尿嘧啶 (Brd U)标记 DNA,ABC免疫细胞化学方法观察大鼠上胸段脊髓灰质细胞的增殖分化情况。　结果孕鼠于 E10 d腹腔注射 Brd U,胎鼠脊髓上胸段 Brd U免疫反应神经元主要集中在脊髓后角 ,脊髓侧角的 Brd U免疫反应神经元较少 ,前角仅有少量的 Brd U免疫反应神经元 ;孕鼠于 E11d腹腔注射 Brd U,胎鼠脊髓上胸段后角 Br-d U免疫反应神经元较 E10 d减少 ,侧角和前角 Brd U免疫反应神经元增多 ;孕鼠于 E12 d腹腔注射 Brd U,胎鼠脊髓上胸段 Brd U免疫反应神经元主要集中于前角和侧角 ,而后角仅有少量的 Brd U免疫反应神经元 ;孕鼠于 E13d、E14d腹腔注射 Brd U,胎鼠脊髓上胸段未见 Brd U免疫反应神经元。　结论　 Brd U标记技术能较好的标记脊髓灰质细胞 ,胎鼠脊髓进行 Brd U标记的最佳时间应选择 E12 d,已标记胎鼠脊髓的最佳移植取材时间为 展开更多
关键词 脊髓 大鼠 brdu标记技术 脊髓灰质细胞
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BrdU体外示踪大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化 被引量：3
12
作者 樊彩兰 刘伯轩 +5 位作者 李晶 岳晓华 李华青 张悦红 王建华 牛勃 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第27期5309-5313,共5页
背景:目前还未找到一个理想的标记性分子用来鉴定骨髓间充质干细胞,因此也就不能保证骨髓间充质干细胞的同质性。目的:以BrdU体外示踪标记验证大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导后的分化潜能。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-01/1... 背景:目前还未找到一个理想的标记性分子用来鉴定骨髓间充质干细胞,因此也就不能保证骨髓间充质干细胞的同质性。目的:以BrdU体外示踪标记验证大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导后的分化潜能。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-01/10在山西医科大学完成。材料:4周龄Wistar大鼠由山西医科大学实验动物中心提供。方法:密度梯度离心+贴壁培养法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,达80%融合时胰蛋白酶消化传代扩增。取5×1010L-1个骨髓间充质干细胞接种于25mm培养皿,加入含地塞米松、β-磷酸甘油、维生素C和体积分数为10%胎牛血清的L-DMDM培养基进行成骨诱导。取第3代骨髓间充质干细胞,加入终浓度为10μmol/LBrdU进行体外示踪,200倍荧光显微镜下随机选取10个视野,通过计数阳性细胞与非阳性细胞数得到BrdU标记率。主要观察指标:倒置显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞表面抗原,观察诱导后成骨分化潜能,体外BrdU标记率。结果:分离纯化的骨髓间充质干细胞呈均一的成纤维细胞样,贴壁生长,以长梭形为主,传至第3代呈明显的同向性改变,漩涡状盘旋排列,细胞存活率均大于95%,至第7代仍未见细胞生长减缓现象;CD44,CD71,CD105均呈阳性表达,CD45呈阴性表达;成骨诱导后Vonkossa染色可见骨髓间充质干细胞中有黑色颗粒沉积;BrdU标记率>90%。结论:密度梯度离心结合贴壁培养法能有效分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,可在体外长期培养,并具有成骨分化潜能;BrdU可成功标记骨髓间充质干细胞,是安全、有效、便捷的体外示踪方法。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 分离培养 成骨 brdu 体外示踪
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应用BrdU-ELISA法检测化学物皮肤致敏性研究 被引量：5
13
作者 黄海雄 庾蕾 +4 位作者 何国群 杨湘霞 黄琼 杨淋清 刘丽清 《职业与健康》 CAS 2008年第12期1133-1135,共3页
目的研究应用BrdU-ELISA法检测化学物皮肤致敏性。方法将受试物2,4-二硝基氯苯(DNCB)、三氯乙烯(TCE)、三氯乙酸、抗菌冻胶对小鼠双耳背皮肤进行涂抹,25μl/耳,连续染毒3 d,第4天每只小鼠腹腔注射BrdU标记液(0.3ml/只)。第5天取小鼠耳... 目的研究应用BrdU-ELISA法检测化学物皮肤致敏性。方法将受试物2,4-二硝基氯苯(DNCB)、三氯乙烯(TCE)、三氯乙酸、抗菌冻胶对小鼠双耳背皮肤进行涂抹,25μl/耳,连续染毒3 d,第4天每只小鼠腹腔注射BrdU标记液(0.3ml/只)。第5天取小鼠耳部淋巴结称重,然后制成单细胞悬液,应用BrdU-ELISA法检测淋巴细胞增殖。同时应用豚鼠局部封闭涂皮法检测受试物的致敏性。结果DNCB、TCE各浓度组与AOO溶剂对照组BrdU标记值比较,差异均存在统计学意义(P<0.01),DNCB各浓度组与AOO溶剂对照组淋巴结重量比较,差异均存在统计学意义(P<0.01),而TCE各浓度组与AOO溶剂对照组淋巴结重量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。抗菌凝胶组与三氯乙酸分别与空白对照组比较,其中抗菌凝胶组、1%、5%三氯乙酸BrdU标记值差异均无统计学意义,10%三氯乙酸差异则存在统计学意义(P<0.05)。结论BrdU-ELISA法具有检测化学物皮肤致敏性的能力,但其灵敏性比标准LLNA和传统豚鼠局部封闭涂皮法差,需要进一步优化实验方法。 展开更多
关键词 溴脱氧尿嘧啶核苷 酶联免疫吸附测定 局部淋巴结实验 皮肤致敏性
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EdU与BrdU在检测细胞增殖中的特点及应用进展 被引量：9
14
作者 罗涛 王彤敏 李力燕 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第32期4581-4583,共3页
细胞增殖是细胞在周期调控因子的作用下,通过DNA复制、RNA转录和蛋白质合成等一系列复杂反应而进行的分裂过程,是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础[1]。细胞增殖检测广泛应用于分子生物学、免疫学、肿瘤生物学、药理学等研究领域,是... 细胞增殖是细胞在周期调控因子的作用下,通过DNA复制、RNA转录和蛋白质合成等一系列复杂反应而进行的分裂过程,是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础[1]。细胞增殖检测广泛应用于分子生物学、免疫学、肿瘤生物学、药理学等研究领域,是评价细胞代谢、生理和病理状况的重要方法[2]。目前,常用的方法包括胸腺嘧啶核苷渗入法、MTT检测法、羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）检测法等。 展开更多
关键词 EDU brdu 细胞增殖
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BrdU标记大鼠骨髓间充质干细胞增殖与成骨能力的变化 被引量：2
15
作者 冯进益 尤元璋 +2 位作者 李偏 蔡志刚 芮钢 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第19期3421-3426,共6页
背景:BrdU标记是一种标记率高、标记简便的标记物,但其毒性报道不一。目的:观察BrdU标记对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖与成骨能力的影响。方法:直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,0.2%Brdu标记后检测其增殖能力、克隆形成能力;经... 背景:BrdU标记是一种标记率高、标记简便的标记物,但其毒性报道不一。目的:观察BrdU标记对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖与成骨能力的影响。方法:直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,0.2%Brdu标记后检测其增殖能力、克隆形成能力;经成骨诱导液诱导培养3周后,利用茜素红染色,荧光免疫组织化学和RT-PCR观测标记前后骨髓间充质干细胞成骨能力的变化情况。结果与结论:Brdu标记后骨髓间充质干细胞克隆形成能力明显减弱,在克隆个数和面积上均小于正常对照组(P<0.05);在增殖能力方面,BrdU标记后第4天开始进入对数增长期时增殖较慢,高峰较低(P<0.05);在成骨能力方面,经成骨诱导后BrdU标记组与正常对照组的骨髓间充质干细胞均表达骨钙素、Ⅰ型胶原,并且都有明显的钙结节形成,RT-PCR检测显示标记前后骨髓间充质干细胞在骨钙素基因的表达方面差异无显著性意义(P>0.05)。提示BrdU标记抑制骨髓间充质干细胞的克隆增殖形成能力,但不会降低其成骨分化能力,可以广泛应用于骨髓间充质干细胞作为种子细胞干细胞研究的示踪剂。 展开更多
关键词 细胞示踪 brdu 骨髓间充质干细胞 组织工程 RealTime-PCR
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头针对急性脑缺血再灌注大鼠BrdU/nestin表达的实验研究 被引量：10
16
作者 张红星 王琼 +3 位作者 乐薇 周利 刘银妮 杨敏 《湖北中医药大学学报》 2011年第5期3-6,共4页
目的观察头针对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠BrdU/nestin表达的影响,探讨头针治疗脑缺血的可能机制。方法将90只健康雌性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和头针组,各组再根据缺血再灌注时间的不同,随机分为7d、14d、28d共9个亚组。... 目的观察头针对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠BrdU/nestin表达的影响,探讨头针治疗脑缺血的可能机制。方法将90只健康雌性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和头针组,各组再根据缺血再灌注时间的不同,随机分为7d、14d、28d共9个亚组。采用大脑中动脉线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型,选取顶颞后斜线、顶颞前斜线,进针后接韩氏穴位神经刺激仪,每天治疗1次。对大鼠应用神经功能缺损评分(NSS),免疫荧光检测法观察脑缺血再灌注各时间点大鼠海马齿状回BrdU及BrdU/nestin含量。结果头针组与模型组各时相NSS组间比较,头针组显著低于模型组(P<0.05,P<0.01)。脑缺血再灌注侧海马齿状回BrdU的表达:模型组与假手术组比较均有显著性差异(P<0.01),头针组在各时间点上与模型组比较,均显著性升高(P<0.01),7 d达到峰值,14 d开始下降。脑缺血再灌注侧海马齿状回BrdU/nestin的表达:模型组与假手术组比较均有显著性差异(P<0.01),头针组在各时间点上与模型组比较,均显著性升高(P<0.05),以7 d最为明显(P<0.01)。结论头针可明显改善大鼠神经功能缺损状态,促进神经干细胞得再生,通过增加nestin的含量来促进急性脑缺血再灌注损伤过程中神经干细胞的修复,实现对缺血脑组织保护的目的。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 头针 神经干细胞 5-溴脱氧尿苷 神经巢蛋白
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BrdU标记在大鼠生精细胞体外培养中的应用 被引量：2
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作者 檀大羡 王植柔 +4 位作者 刘锋 卢晟盛 李莲军 卢克焕 李佳荃 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1508-1510,1513,共4页
目的探讨应用5-溴-2-脱氧尿苷(5-bromo-2-deoxy-uridine,BrdU)标记检测大鼠生精细胞体外的分化、发育情况。方法采用BrdU体内标记生精细胞的DNA,免疫细胞化学法跟踪观察大鼠生精细胞在体外培养中的分化、发育情况。结果培养前在体内标记... 目的探讨应用5-溴-2-脱氧尿苷(5-bromo-2-deoxy-uridine,BrdU)标记检测大鼠生精细胞体外的分化、发育情况。方法采用BrdU体内标记生精细胞的DNA,免疫细胞化学法跟踪观察大鼠生精细胞在体外培养中的分化、发育情况。结果培养前在体内标记BrdU的细胞为初级精母细胞,经培养后在BrdU标记的细胞中出现早期精子细胞。结论大鼠生精细胞体外培养过程中,应用BrdU标记能检测生精细胞的分化、发育情况。 展开更多
关键词 生精细胞 体外培养brdu
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应用缓释BrdU检测前腭缝成骨细胞的增殖活性 被引量：2
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作者 周洁 李允武 +2 位作者 刘海霞 徐疾 唐国华 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2011年第2期147-151,共5页
目的:配制缓释BrdU,用于检测前腭缝牵张成骨过程中成骨细胞的增殖和分化,探讨前腭缝牵张成骨的机制。方法:用泊洛沙姆温敏凝胶配制缓释BrdU,大鼠皮下注射后不同时间点采取血样,高效液相色谱法测定BrdU血药浓度,并与腹腔注射BrdU溶液进... 目的:配制缓释BrdU,用于检测前腭缝牵张成骨过程中成骨细胞的增殖和分化,探讨前腭缝牵张成骨的机制。方法:用泊洛沙姆温敏凝胶配制缓释BrdU,大鼠皮下注射后不同时间点采取血样,高效液相色谱法测定BrdU血药浓度,并与腹腔注射BrdU溶液进行比较。选取35天龄雄性SD大鼠40只,随机分为实验组和对照组,实验组安放扩大簧牵张前腭缝。2组动物于24h后随机皮下注射BrdU温敏凝胶1次或腹腔注射BrdU溶液1次。所有动物分别于48h和96h处死(n=5),免疫组化染色检测细胞的增殖和迁移。结果:皮下注射BrdU温敏凝胶6h后,血清中仍可检测出1.21μg/mL BrdU,免疫组化染色可见大鼠前腭缝有BrdU阳性的增殖细胞。腹腔注射BrdU溶液3h后,血清中仅检测到0.17μg/mL BrdU,免疫组化染色未见BrdU阳性细胞。前腭缝牵张48h后,骨缝边缘可见大量BrdU阳性成骨细胞;96h后可见部分BrdU阳性细胞包埋于骨缝边缘的新生骨基质中。结论:BrdU温敏凝胶能起到良好的缓释效果,为体内标记成骨细胞提供了一种简便易行的方法。牵张力作用于前腭缝后,促进骨缝边缘的间充质细胞增殖,这些细胞分化为成骨细胞并分泌骨基质,从而促进新骨形成。 展开更多
关键词 成骨细胞 增殖 缓释brdu 前腭缝 牵张力
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BrdU抗体染色技术检测昆虫器官的细胞增殖 被引量：3
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作者 张徐波 沈杰 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1474-1478,共5页
BrdU(5-bromo-2'-deoxyuridine)是一种人工合成的核苷酸类似物,常用于标记活体组织的增殖细胞。它的结构类似于胸腺嘧啶,在细胞分裂的S期,可以取代胸腺嘧啶而插入正在复制的细胞DNA中。通过免疫组化手段,用BrdU抗体检测整合在细胞DN... BrdU(5-bromo-2'-deoxyuridine)是一种人工合成的核苷酸类似物,常用于标记活体组织的增殖细胞。它的结构类似于胸腺嘧啶,在细胞分裂的S期,可以取代胸腺嘧啶而插入正在复制的细胞DNA中。通过免疫组化手段,用BrdU抗体检测整合在细胞DNA中的BrdU分子,可以反映出细胞周期的活力,即细胞增殖的速率。本文介绍一种优化的BrdU染色流程,用来标记昆虫小器官的细胞增殖速率。通过这种技术,我们重新评估了Dpp信号通路中的转录抑制因子Brinker在翅芽发育过程中调控细胞增殖的作用,发现它并不是以前所认为的在翅囊区是一种生长抑制因子。 展开更多
关键词 昆虫发育生物学 Bromodeoxyuridine（brdu） 细胞增殖 昆虫器官 翅 Brinker
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差速贴壁联合应用5-BrdU对心肌细胞纯度及活力的影响 被引量：7
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作者 郎明健 郭敏 +2 位作者 曾秋棠 闵新文 杨汉东 《心脏杂志》 CAS 2008年第5期566-569,共4页
目的研究多次差速贴壁并联合应用5-溴脱氧尿苷（5-BrdU）对分离的心肌细胞纯度及活性的影响。方法以酶消化法分离乳鼠心肌细胞，分别进行1—3次差速贴壁并联用或不联用5-BrdU以纯化心肌细胞。正常培养3d后，观察细胞的形态特征。用流式... 目的研究多次差速贴壁并联合应用5-溴脱氧尿苷（5-BrdU）对分离的心肌细胞纯度及活性的影响。方法以酶消化法分离乳鼠心肌细胞，分别进行1—3次差速贴壁并联用或不联用5-BrdU以纯化心肌细胞。正常培养3d后，观察细胞的形态特征。用流式细胞技术分析各实验组心肌细胞的纯度。以台盼蓝染色、MTT比色法及细胞线粒体内膜功能检测（流式细胞术）来反映各实验组心肌细胞的活性。结果随着差速贴壁次数的增加，心肌细胞得以纯化，但细胞的活性有所下降。联用5-BrdU后细胞纯度进一步提高，且对细胞的活性无明显影响；其中两次差速贴壁并联合应用5-BrdU后，可获得纯度高、活性好的心肌细胞。结论两次差速贴壁并联合应用5-BrdU为纯化心肌细胞的有效方法。 展开更多
关键词 心肌细胞 纯化 差速贴壁技术 5-溴脱氧尿苷
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