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Exploring the effect of Bushen Bitong recipe-containing serum on IL-1β-induced chondrocyte apoptosis based on SOX9/NF-κB/MMP-13 signaling pathway
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作者 YI Lin ZHANG Wen-hao +4 位作者 XIANG Wen-yuan SHI Zheng-yu REMILA Aimai-ti DENG Ying-jie FANG Rui 《Journal of Hainan Medical University》 CAS 2024年第4期1-7,共7页
Objective:To observe the effect and possible mechanism of action of Bushen Bitong recipe(BSBT)containing serum on IL-1β-induced chondrocyte apoptosis.Methods:Generation 3 rat chondrocytes were randomized into Control... Objective:To observe the effect and possible mechanism of action of Bushen Bitong recipe(BSBT)containing serum on IL-1β-induced chondrocyte apoptosis.Methods:Generation 3 rat chondrocytes were randomized into Control,IL-1β,IL-1β+BSBT(L),IL-1β+BSBT(M),and IL-1β+BSBT(H)groups(5%,10%and 15%BSBT-containing serum),and then 24h after intervention respectively,the cell proliferation and Apoptosis rate;Western blot detected the expression levels of Bcl-2,BAX,Caspase-3,SOX9,NF-κB p65,MMP-13 proteins in chondrocytes.ELISA detected the levels of TNF-α,IL-6,and bFGF in the supernatants of chondrocyte culture.Results:Compared with Control group,cell proliferation activity decreased,apoptosis rate increased,NF-κB p65,MMP-13 protein level and TNF-α,IL-6 level increased,and SOX9 protein level and bFGF level decreased in IL-1βgroup;compared with IL-1βgroup,different concentrations of BSBT-containing serum group,cell proliferation activity increased,and apoptosis rate decreased.NF-κB p65,MMP-13 protein level and TNF-α,IL-6 level decreased,SOX9 protein level and bFGF level increased;compared with IL-1β+BSBT(L)group,cell proliferation activity increased,apoptosis rate decreased in IL-1β+BSBT(M)and IL-1β+BSBT(H)groups,and NF-κB p65,MMP-13 protein level and TNF-αlevel decreased.13 protein levels and TNF-αand IL-6 levels decreased,and SOX9 protein levels and bFGF levels increased.Conclusion:BSBT-containing serum may promote IL-1β-induced proliferation of chondrocytes,reduce apoptosis,improve the microenvironment of chondrocytes,and promote cartilage repair through the SOX9/NF-κB/MMP-13 signaling pathway. 展开更多
关键词 Bushen bitong recipe Osteoarthritis CHONDROCYTES Signaling pathway IL-1Β
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补肾痹通方调控HIF-1α信号通路抑制膝骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡的作用机制研究
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作者 梁治权 向文远 +3 位作者 邓迎杰 热米拉·艾买提 张文豪 方锐 《新疆医科大学学报》 2026年第2期153-159,共7页
目的基于缺氧诱导因子1α(Hypoxia inducible factor 1 subunit alpha,HIF-1α)信号通路探讨补肾痹通方对膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)大鼠抑制软骨细胞凋亡的作用机制。方法采用改良Hulth法构建KOA大鼠模型,将32只造模成功的KO... 目的基于缺氧诱导因子1α(Hypoxia inducible factor 1 subunit alpha,HIF-1α)信号通路探讨补肾痹通方对膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)大鼠抑制软骨细胞凋亡的作用机制。方法采用改良Hulth法构建KOA大鼠模型,将32只造模成功的KOA大鼠随机分为模型组、高剂量组、低剂量组及HIF-1抑制剂组,每组8只,另取8只正常SD大鼠设为空白组。低剂量组和高剂量组分别给予16.34、32.68 g/kg补肾痹通方灌胃,HIF-1抑制剂组在给予32.68 g/kg补肾痹通方灌胃的同时腹腔注射2 mg/kg利非西呱,空白组给予等体积生理盐水灌胃,每天灌胃或注射1次,连续3周。药物干预结束24 h后,脱颈处死各组大鼠,沿髌骨周缘剪开皮肤,完整切取软骨组织。番红固绿染色和大体评分观察关节软骨病理变化;免疫荧光检测大鼠软骨组织Ⅱ型胶原蛋白(Collagen typeⅡ,CollagenⅡ)和骨形态发生蛋白7(Bone morphogenetic protein-7,BMP-7)荧光强度水平;生化检测大鼠软骨组织活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平;采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定大鼠软骨组织炎症因子白细胞介素-1β(Interleukin-1 beta,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的水平;免疫印记法(Western blot,WB)检测B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma-2 associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、活化型半胱天冬酶-3(cleaved-Caspase3)、HIF-1α蛋白表达情况。结果与空白组相比,模型组大鼠关节软骨大体评分升高,软骨细胞减少,基质着色减弱,局部缺损;软骨组织中CollagenⅡ、BMP-7荧光表达下调,ROS和炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平升高,HIF-1α、cleaved-Caspase3、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P均<0.05)。与模型组比较,高剂量组关节软骨大体观察评分降低,软骨细胞数量增加,基质染色较正常,潮线较完整;软骨组织中CollagenⅡ、BMP-7荧光表达上调,ROS和炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平降低,HIF-1α、cleaved-Caspase3、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P均<0.05)。与高剂量组相比,HIF-1抑制剂组关节软骨大体观察评分降低,大鼠软骨破坏程度减轻,基质着色深;软骨组织中CollagenⅡ、BMP-7荧光表达上调,ROS和炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平降低,HIF-1α、cleaved-Caspase3、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P均<0.05)。结论补肾痹通方能有效改善KOA大鼠软骨的病理状况,通过HIF-1α通路抑制KOA大鼠软骨细胞凋亡。 展开更多
关键词 补肾痹通方 膝骨关节炎 HIF-1α信号通路 凋亡 炎症
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基于ECM代谢平衡探讨补肾痹通方协同MSCs抑制Wnt通路对软骨保护的影响
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作者 邓迎杰 向文远 +2 位作者 热米拉·艾买提 张文豪 方锐 《新疆医科大学学报》 2026年第2期160-165,170,共7页
目的探讨补肾痹通方(BSBT)联合间充质干细胞(MSCs)通过调控Wnt通路对膝骨关节炎(KOA)关节软骨的保护作用机制。方法将40只SD大鼠均分为CON、KOA、MSCs、BSBT、BSBT+MSCs组,除CON组以外,其余4组采用改良Hulth法构建KOA大鼠模型。造模成功... 目的探讨补肾痹通方(BSBT)联合间充质干细胞(MSCs)通过调控Wnt通路对膝骨关节炎(KOA)关节软骨的保护作用机制。方法将40只SD大鼠均分为CON、KOA、MSCs、BSBT、BSBT+MSCs组,除CON组以外,其余4组采用改良Hulth法构建KOA大鼠模型。造模成功后,KOA组(予以4 mL/100 g生理盐水灌胃)、MSCs组(予以1×10^(7)/mL间充质干细胞0.1 mL关节腔内注射)、BSBT组(予以BSBT 32.68 g/kg灌胃)及BSBT+MSCs组(予以1×10^(7)/mL间充质干细胞0.1 mL关节腔注射,且给予BSBT 32.68 g/kg灌胃),除CON组外其余各组每天灌胃1次,持续3周。苏木精-伊红(HE)和番红固绿染色观察关节软骨病理变化;免疫组化检测Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)表达;免疫印迹法(WB)检测无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)、β-连环蛋白(β-catenin)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)表达水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清Ⅱ型胶原C端交联肽(CTX-Ⅱ)、白细胞介素-6(IL-6)水平;生化检测血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果与CON组相比,KOA组关节软骨表面破坏、细胞减少、潮线消失,CollagenⅡ表达降低(P<0.05),Wnt1、β-catenin、GSK-3β表达水平及CTX-Ⅱ、IL-6、MDA水平升高(P<0.05),SOD水平降低(P<0.05)。与KOA组比较,MSCs组、BSBT组及BSBT+MSCs组软骨表面缺损减轻、潮线完整性改善、细胞数量增加,CollagenⅡ表达升高(P<0.05),Wnt1、β-catenin、GSK-3β表达水平及CTX-Ⅱ、IL-6、MDA水平降低(P<0.05),SOD水平升高(P<0.05)。BSBT+MSCs组以上指标改善优于MSCs、BSBT组(P<0.05)。结论BSBT联合MSCs可能经Wnt通路调控氧化应激与细胞外基质(ECM)生成,保护KOA大鼠关节软骨。 展开更多
关键词 补肾痹通方 膝骨关节炎 间充质干细胞 WNT信号通路 细胞外基质降解
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基于JAK2/STAT3信号通路探讨补肾痹通方抑制ECM降解及炎症反应对骨关节炎大鼠软骨保护的作用
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作者 向文远 邓迎杰 +2 位作者 热米拉·艾买提 张文豪 方锐 《新疆医科大学学报》 2026年第2期145-152,共8页
目的基于Janus激酶(JAK)2/信号转导与转录激活因子(STAT)3信号通路探讨补肾痹通方(BSBT)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞ECM降解及炎症反应的抑制作用,阐明其保护软骨细胞的分子机制。方法将大鼠软骨细胞随机分为CON、OA、BSBT-... 目的基于Janus激酶(JAK)2/信号转导与转录激活因子(STAT)3信号通路探讨补肾痹通方(BSBT)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞ECM降解及炎症反应的抑制作用,阐明其保护软骨细胞的分子机制。方法将大鼠软骨细胞随机分为CON、OA、BSBT-L、BSBT-H、BSBT-H+Colivelin组,除CON组外,其余4组采用IL-1β(10 ng/mL)干预大鼠软骨细胞构建骨关节炎(OA)炎症模型。BSBT-L组(予以5%BSBT含药血清)、BSBT-H组(予以15%BSBT含药血清)、BSBT-H+Colivelin组(予以15%BSBT含药血清和0.5μmol/L Colivelin同时处理),OA组和CON组不处理,各组干预48 h。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、Ⅱ型胶原C端交联肽(CTX-Ⅱ)、基质金属蛋白酶-13(MMP13)水平;免疫荧光检测Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)表达;蛋白质免疫印迹(WB)检测Y框蛋白9(SOX9)、p-JAK/JAK、p-STAT/STAT的表达。结果与CON组相比,OA组软骨细胞增殖率、SOX9和CollagenⅡ蛋白表达降低(P<0.05),而细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、MMP13、CTX-Ⅱ水平及p-JAK/JAK、p-STAT/STAT蛋白表达升高(P<0.05)。与OA组相比,BSBT-L组和BSBT-H组细胞中SOX9、CollagenⅡ表达升高(P<0.05)。p-J AK2、p-STAT3表达降低(P<0.05);与BSBT-H组比较,BSBT-H+Colivelin组SOX9表达降低(P<0.05),p-JAK2、p-STAT3表达升高(P<0.05)。结论BSBT可通过抑制JAK2/STAT3信号通路,减轻由IL-1β诱发的软骨细胞炎症反应,同时促进软骨细胞的增殖与分化,从而改善骨关节炎软骨细胞的损伤。 展开更多
关键词 补肾痹通方 骨关节炎 软骨细胞 JAK2/STAT3信号通路 细胞外基质降解
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补肾痹通方调控Hippo/YAP通路治疗膝骨关节炎大鼠的作用机制
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作者 王鹏光 李逸统 +2 位作者 热米拉·艾买提 牟利民 方锐 《中国中医骨伤科杂志》 2026年第3期7-15,共9页
目的:探讨补肾痹通方调控Hippo/YAP信号通路对膝骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡的影响。方法:将60只体重200 g左右的SD大鼠,采用随机数字表法分为补肾痹痛方低剂量组(BSBTF-L组,21.25 g/kg)、补肾痹痛方高剂量组(BSBTF-H组,42.50 g/kg)、补... 目的:探讨补肾痹通方调控Hippo/YAP信号通路对膝骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡的影响。方法:将60只体重200 g左右的SD大鼠,采用随机数字表法分为补肾痹痛方低剂量组(BSBTF-L组,21.25 g/kg)、补肾痹痛方高剂量组(BSBTF-H组,42.50 g/kg)、补肾痹痛方高剂量(42.50 g/kg)+VTPF(YAP抑制剂,10 mg/kg)组、假手术组、模型组,每组各12只;用Huhth法诱导大鼠膝骨关节炎模型,造模4周后开始灌胃给药4周,观察大鼠一般生活情况和X线检查结果;HE染色和番红O固绿染色观察膝关节软骨组织病变情况;采用ELISA法检测血清中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)与肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;免疫组化检测p-YAP、YAP蛋白表达;qPCR法检测膝关节软骨组织中YAP、ADAMTS-5、MMP-13有关的mRNA表达水平;Western Blot法检测p-YAP、YAP、CTGF蛋白表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠精神不振,运动量小,纳差;X线检查结果表明关节间隙明显变窄甚至消失,胫骨平台表面变粗糙,股骨远端硬化,伴有骨赘形成,软骨组织严重破坏;p-YAP蛋白表达降低,IL-1β、IL-6、TNF-α水平,YAP、CTGF蛋白表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,BSBTF-L组和BSBTF-H组对应指标的变化趋势与上述情况相反,差异有统计学意义(P<0.05),并且剂量越高,效果越明显。与补肾痹痛方高剂量组相比,补肾痹痛方高剂量+VTPF组的YAP和p-YAP表达量几乎无变化,但IL-1β、IL-6、TNF-α水平,ADAMTS-5、MMP-13有关的mRNA表达水平及CTGF蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾痹通方可能通过激活Hippo/YAP信号通路来延缓膝骨关节炎大鼠的软骨退化。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 补肾痹通方 河马信号通路 关节软骨 软骨基质
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基于层次分析法-批评矩阵法结合正交设计优选鼻通方提取工艺
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作者 王婷婷 王红丽 +3 位作者 王悦悦 罗燕燕 赵爱军 马琴国 《中医药导报》 2025年第12期110-114,148,共6页
目的:优选鼻通方的提取工艺。方法:以料液比、提取温度、超声时间为考察因素,运用正交试验优化炒苍耳子油最佳提取工艺;以料液比、提取时间、提取次数为考察因素,运用层次分析法(AHP)-批评矩阵法(CRITIC)混合加权法计算毛蕊异黄酮葡萄... 目的:优选鼻通方的提取工艺。方法:以料液比、提取温度、超声时间为考察因素,运用正交试验优化炒苍耳子油最佳提取工艺;以料液比、提取时间、提取次数为考察因素,运用层次分析法(AHP)-批评矩阵法(CRITIC)混合加权法计算毛蕊异黄酮葡萄糖苷、升麻素苷及浸膏得率的权重系数,并结合正交试验结果优选鼻通方的最佳水提工艺。结果:炒苍耳子油最佳提取工艺为提取溶剂无水乙醇,料液比1∶12(g/mL),提取温度70℃,超声时间50 min。AHP-CRITIC混合加权法优选最佳水提工艺为加8倍量水,提取3次,60 min/次。结论:AHP-CRITIC混合加权法可用于鼻通方提取工艺多指标的权重建立,并为后续鼻通丸新剂型的开发提供依据。 展开更多
关键词 鼻通方 层次分析法-批评矩阵法 权重分析 正交试验 提取工艺
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基于TLR4/NF-κB信号通路探讨补肾痹通方联合间充质干细胞修复膝骨关节炎关节软骨的作用机制 被引量:1
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作者 向文远 邓迎杰 方锐 《新疆医科大学学报》 2025年第10期1448-1455,共8页
目的基于Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路探究补肾痹通方(BSBT)联合间充质干细胞(MSCs)对膝骨关节炎(KOA)关节软骨修复作用的影响。方法选取2月龄SD大鼠50只,随机分为CON、M-KOA、M-MSC、M-F、M-MSC-F组,每组10只。除CON组... 目的基于Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路探究补肾痹通方(BSBT)联合间充质干细胞(MSCs)对膝骨关节炎(KOA)关节软骨修复作用的影响。方法选取2月龄SD大鼠50只,随机分为CON、M-KOA、M-MSC、M-F、M-MSC-F组,每组10只。除CON组外,其余4组采用改良Hulth法构建大鼠膝骨关节炎模型。造模成功后,M-KOA组(予以4 mL/100 g生理盐水灌胃)、M-MSC组(予以1×10^(7)/mL间充质干细胞0.1 mL关节腔内注射)、M-F组(予以BSBT 32.68 g/kg灌胃)及M-MSC-F组(予以1×10^(7)/mL间充质干细胞0.1 mL关节腔注射,且给予BSBT 32.68 g/kg灌胃),除CON组外其余各组每天灌胃1次,持续3周。苏木精-伊红(HE)和甲苯胺蓝染色观察软骨组织病理变化;蛋白质免疫印迹(WB)法检测软骨组织β-连环蛋白(β-catenin)、SRY盒转录因子9(SOX9)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、TLR4、NF-κB p65蛋白表达量情况;免疫荧光观察软骨组织Ⅱ型胶原蛋白(Collagen II)、骨形态发生蛋白7(BMP-7)荧光强度变化;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量。结果与CON组比较,M-KOA组大鼠软骨边缘损伤严重,细胞排列紊乱,出现大量炎性细胞浸润;软骨组织中Collagen II、BMP-7荧光表达下降(P<0.05),SOX9蛋白表达降低(P<0.05),β-catenin、RUNX2、TLR4和NF-κB p65蛋白表达升高(P<0.05);血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高(P<0.05)。与M-KOA组相比,M-MSC组、M-F组、M-MSC-F组大鼠软骨组织边缘损伤明显缓解,细胞排列较整齐,炎性细胞浸润情况明显减少;软骨组织中Collagen II、BMP-7荧光表达上升(P<0.05),SOX9蛋白表达增高(P<0.05),β-catenin、RUNX2、TLR4和NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.05);血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低(P<0.05);且M-MSC-F组联合干预效果优于M-MSC组、M-F组。结论BSBT联合MSCs能有效改善KOA大鼠软骨的病理状况,抑制TLR4/NF-κB信号通路,缓解软骨的炎症损伤,达到治疗KOA的作用。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 补肾痹通方 TLR4/NF-κB信号通路 间充质干细胞 软骨修复
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寒湿痹痛方外敷联合本体感觉神经肌肉促进技术治疗老年膝骨关节炎寒湿痹阻证的临床研究 被引量:1
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作者 刘伟 颜纯淳 +6 位作者 于功昌 杨苓 翟劲草 夏锐 马晓雪 师彬 孙晋海 《中医正骨》 2025年第4期41-49,54,共10页
目的:观察寒湿痹痛方外敷联合本体感觉神经肌肉促进技术(proprioceptive neuromuscular facilitation,PNF)治疗老年膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)寒湿痹阻证的临床疗效和安全性。方法:将符合要求的78例老年KOA寒湿痹阻证患者随... 目的:观察寒湿痹痛方外敷联合本体感觉神经肌肉促进技术(proprioceptive neuromuscular facilitation,PNF)治疗老年膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)寒湿痹阻证的临床疗效和安全性。方法:将符合要求的78例老年KOA寒湿痹阻证患者随机分为2组,每组39例,分别采用寒湿痹痛方外敷联合PNF治疗(联合PNF组)和单纯PNF治疗(PNF组)。分别于治疗前与治疗结束后,记录并比较2组患者的西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(Western Ontario and McMaster Universities osteoarthritis index,WOMAC)疼痛、僵硬和关节功能评分,膝关节屈曲与伸展峰值力矩,膝关节屈曲角度及下楼梯步态参数。观察并发症发生情况。结果:①WOMAC评分。治疗结束后,2组患者WOMAC疼痛评分、僵硬评分及关节功能评分均低于治疗前(疼痛评分:t=16.400,P=0.000;t=11.273,P=0.000;僵硬评分:t=9.159,P=0.000;t=4.117,P=0.000;关节功能评分:t=10.076,P=0.000;t=7.392,P=0.000),联合PNF组患者WOMAC疼痛评分、僵硬评分及关节功能评分均低于PNF组(t=17.577,P=0.000;t=8.354,P=0.000;t=5.753,P=0.000)。②膝关节屈曲与伸展峰值力矩。治疗结束后,2组患者膝关节屈曲峰值力矩与治疗前的差异均无统计学意义(t=1.435,P=0.156;t=0.769,P=0.445),2组患者膝关节屈曲峰值力矩的差异无统计学意义(t=1.229,P=0.224),2组患者膝关节伸展峰值力矩均大于治疗前(t=7.317,P=0.000;t=3.286,P=0.002),联合PNF组患者膝关节伸展峰值力矩大于PNF组(t=2.695,P=0.009)。③膝关节屈曲角度。治疗结束后,2组患者膝关节屈曲角度均大于治疗前(t=4.655,P=0.000;t=4.870,P=0.000),2组患者膝关节屈曲角度的差异无统计学意义(t=1.025,P=0.309)。④下楼梯步态参数。治疗结束后,联合PNF组患者膝关节内收峰值力矩小于治疗前(t=31.379,P=0.000),PNF组患者膝关节内收峰值力矩与治疗前的差异无统计学意义(t=1.493,P=0.140),联合PNF组患者膝关节内收峰值力矩小于PNF组(t=20.033,P=0.000)。治疗结束后,2组患者内外和前后方向动态稳度值小于治疗前(内外方向:t=4.994,P=0.000;t=2.402,P=0.019;前后方向:t=5.700,P=0.000;t=2.101,P=0.040),联合PNF组患者内外和前后方向动态稳度值小于PNF组(t=2.933,P=0.005;t=2.499,P=0.015)。⑤安全性。2组患者均未发生膝关节肿胀、感染、局部皮疹或瘀斑等并发症。结论:寒湿痹痛方外敷联合PNF治疗KOA寒湿痹阻证,可有效缓解膝关节疼痛、僵硬症状,增强伸膝肌力,促进膝关节功能恢复,提高下楼梯时的步态稳定性,疗效优于单纯采用PNF治疗,但二者在膝关节屈曲角度改善及安全性方面相当。 展开更多
关键词 骨关节炎 寒湿痹阻证 敷贴疗法 寒湿痹痛方 本体感觉 神经肌肉促进技术 老年人 随机对照试验专题
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补肾痹通方通过β-catenin/SOX9轴调控炎症-氧化应激网络促进膝骨关节炎软骨修复的机制研究
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作者 向文远 邓迎杰 方锐 《新疆医科大学学报》 2025年第11期1499-1505,共7页
目的探讨补肾痹通方(BSBT)通过调节β-连环蛋白(β-catenin)/SRY盒转录因子9(SOX9)信号轴改善膝骨关节炎(KOA)软骨损伤的分子机制。方法将50只SD大鼠平均分为CON、M-KOA、M-F-LC、M-F-MC及M-F-HC组,除CON组以外,其余4组采用改良Hulth法... 目的探讨补肾痹通方(BSBT)通过调节β-连环蛋白(β-catenin)/SRY盒转录因子9(SOX9)信号轴改善膝骨关节炎(KOA)软骨损伤的分子机制。方法将50只SD大鼠平均分为CON、M-KOA、M-F-LC、M-F-MC及M-F-HC组,除CON组以外,其余4组采用改良Hulth法构建KOA大鼠模型,造模成功后,M-KOA组(予以2 mL/100 g生理盐水灌胃)、M-F-LC组(予以BSBT 8.17 g/kg灌胃)、M-F-MC组(予以BSBT 16.34 g/kg灌胃)、M-F-HC组(予以BSBT 32.68 g/kg灌胃),除CON组外其余各组每天灌胃1次,持续3周。苏木精-伊红(HE)和番红固绿染色观察软骨组织形态变化;蛋白质免疫印迹(WB)和实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测软骨组织中SOX9、β-catenin、II型胶原蛋白α1链(COL2A1)、Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达;ELISA检测血清炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅱ型胶原羧基端交联肽(CTX-II)水平;生化检测血清氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量。结果与M-KOA组相比,M-F-MC组和M-F-HC组显著改善软骨病理损伤,降低β-catenin和RUNX2表达(P<0.05),上调SOX9和COL2A1表达(P<0.05);同时TNF-α、IL-1β、IL-6、CTX-II水平均降低,TGF-β1水平升高,并降低MDA含量,增强SOD和GSH活性(P<0.05)。结论补肾痹通方促进软骨修复,可能通过调控β-catenin/SOX9信号通路,抑制炎症反应与氧化应激。本研究为中医药治疗KOA的分子机制提供了实验依据。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 补肾痹通方 β-catenin/SOX9信号通路 炎症反应 氧化应激 软骨修复
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电针联合自拟痹通散方外敷治疗湿热痹阻型膝骨关节炎的临床效果
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作者 杜国凯 武鑫卉 +5 位作者 丑丽梅 巴战生 付万海 裴刚 孙殿统 李海虹 《中国社区医师》 2025年第32期73-75,共3页
目的:探讨电针联合自拟痹通散方外敷治疗湿热痹阻型膝骨关节炎的临床效果。方法:选取2023年1月—2025年1月肃南县人民医院收治的湿热痹阻型膝骨关节炎患者120例作为观察对象,依据随机数字表法分为电针组与联合组,各60例。两组患者均给... 目的:探讨电针联合自拟痹通散方外敷治疗湿热痹阻型膝骨关节炎的临床效果。方法:选取2023年1月—2025年1月肃南县人民医院收治的湿热痹阻型膝骨关节炎患者120例作为观察对象,依据随机数字表法分为电针组与联合组,各60例。两组患者均给予常规治疗,电针组采用电针治疗,联合组在电针治疗基础上给予自拟痹通散方外敷治疗。比较两组治疗效果。结果:治疗后,两组疼痛、僵硬、日常活动功能评分降低,且联合组低于电针组(P<0.001)。治疗后,两组膝关节液炎性因子水平、中医证候积分降低,且联合组低于电针组(P<0.001)。联合组治疗总有效率较电针组高(P=0.023)。结论:电针联合自拟痹通散方外敷能够减轻湿热痹阻型膝骨关节炎患者的临床症状,改善膝关节功能,降低关节液炎性因子水平。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 湿热痹阻 电针 痹通散 外敷 膝关节功能 炎性因子
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补肾痹通方联合骨髓间充质干细胞干预膝骨关节炎的效果及其作用机制研究
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作者 向文远 易林 +2 位作者 张文豪 邓迎杰 方锐 《中医正骨》 2025年第9期16-25,共10页
目的:探讨补肾痹通方联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMMSC)干预膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的效果及其作用机制。方法:①细胞实验。将软骨细胞接种于96孔Transwell小室的下室中,分为空白对照组、模... 目的:探讨补肾痹通方联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMMSC)干预膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的效果及其作用机制。方法:①细胞实验。将软骨细胞接种于96孔Transwell小室的下室中,分为空白对照组、模型组、补肾痹通方含药血清组、BMMSC组和联合干预组,除空白对照组外,其余4组均加入终浓度为10 ng·mL^(-1)的白细胞介素-1β,诱导KOA细胞模型。诱导结束后,在Transwell小室的上室中,补肾痹通方含药血清组加入含15%补肾痹通方含药血清的培养基,BMMSC组加入等量的BMMSC悬液,联合干预组加入含15%补肾痹通方含药血清的培养基及等量的BMMSC悬液,空白对照组和模型组加入等量的空白培养基。继续培养24 h后,取出Transwell小室的上室,统计各组软骨细胞数量,计算各组软骨细胞相对迁移率。将软骨细胞接种于96孔细胞培养板中,采用相同的分组、造模与干预方式,继续培养24 h后,采用流式细胞术检测各组软骨细胞的凋亡率,采用Western Blot法检测各组软骨细胞B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma-2 associated X protein,BAX)、B淋巴细胞瘤(B-cell lymphoma,Bcl)-2、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved-cysteine aspartic acid specific protease-3,cleaved-Caspase-3)等细胞凋亡相关基因的蛋白表达量。②动物实验。将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、BMMSC组和联合干预组,每组10只。模型组、BMMSC组、联合干预组采用改良Hulth法建立大鼠右侧KOA模型,假手术组大鼠切开右侧膝关节皮肤及皮下组织、暴露膝关节腔后缝合。造模4周后,向BMMSC组、联合干预组大鼠右侧膝关节腔内注射100μL BMMSC悬液(细胞数量约为200个·μL^(-1)),向假手术组、模型组大鼠右侧膝关节腔内注射100μL生理盐水,各组大鼠每周注射1次,连续注射4周。联合干预组按照生药16.35 g·kg^(-1)·d^(-1)给予补肾痹通方药液灌胃,分2次早晚灌服,连续灌胃4周。干预结束后,每组随机选取4只大鼠,分离右侧膝关节,观察大鼠膝关节软骨组织病理变化;其余6只大鼠,分离大鼠右侧膝关节软骨组织,检测大鼠膝关节软骨组织中Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)4、髓系分化初级反应蛋白质88(myeloid differentiation primary response protein 88,MyD88)、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65的mRNA表达量以及TLR4、MyD88、NF-κB p65、磷酸化核因子κB(phosphorylated nuclear factor-κB,p-NF-κB)p65的蛋白表达量。结果:①补肾痹通方含药血清联合BMMSC对软骨细胞迁移活性影响的分析结果。模型组软骨细胞相对迁移率低于空白对照组(P=0.000),补肾痹通方含药血清组、BMMSC组、联合干预组软骨细胞相对迁移率均高于模型组(P=0.000,P=0.010,P=0.016),联合干预组软骨细胞相对迁移率高于补肾痹通方含药血清组和BMMSC组(P=0.000,P=0.012)。②补肾痹通方含药血清联合BMMSC对软骨细胞凋亡影响的分析结果。模型组软骨细胞凋亡率高于空白对照组(P=0.000),补肾痹通方含药血清组、BMMSC组、联合干预组软骨细胞凋亡率均低于模型组(P=0.000,P=0.010,P=0.016),联合干预组软骨细胞凋亡率低于补肾痹通方含药血清组和BMMSC组(P=0.000,P=0.000)。模型组软骨细胞BAX、cleaved-Caspase-3的蛋白相对表达量及BAX与Bcl-2蛋白相对表达量的比值均高于空白对照组(P=0.000,P=0.000,P=0.000),Bcl-2蛋白相对表达量低于空白对照组(P=0.000);补肾痹通方含药血清组、BMMSC组、联合干预组软骨细胞BAX、cleaved-Caspase-3的蛋白相对表达量及BAX与Bcl-2蛋白相对表达量的比值均低于模型组(BAX:P=0.000,P=0.010,P=0.016;cleaved-Caspase-3:P=0.000,P=0.010,P=0.000;BAX与Bcl-2的比值:P=0.000,P=0.010,P=0.000),Bcl-2蛋白相对表达量高于模型组(P=0.000,P=0.000,P=0.001);联合干预组软骨细胞BAX、cleaved-Caspase-3的蛋白相对表达量及BAX与Bcl-2蛋白相对表达量的比值均低于补肾痹通方含药血清组和BMMSC组(P=0.000,P=0.020;P=0.002,P=0.022;P=0.000,P=0.000),Bcl-2蛋白相对表达量高于补肾痹通方含药血清组和BMMSC组(P=0.010,P=0.049)。③大鼠膝关节软骨组织病理学观察结果。模型组大鼠膝关节软骨表面粗糙,有裂隙和褶皱,潮线不完整,软骨下骨不规则增厚,软骨细胞大小不一、分布不均匀、排列不规则;BMMSC组和联合干预组大鼠膝关节软骨的退变情况较模型组改善,且联合干预组较BMMSC组改善更明显。④大鼠膝关节软骨组织中TLR4-MyD88-NF-κB信号通路相关基因的mRNA和蛋白表达量检测结果。模型组大鼠膝关节软骨组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65的mRNA相对表达量均高于假手术组(P=0.000,P=0.000,P=0.000),BMMSC组和联合干预组大鼠膝关节软骨组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65的mRNA相对表达量均低于模型组(P=0.000,P=0.011,P=0.038;P=0.000,P=0.000,P=0.001),联合干预组大鼠膝关节软骨组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65的mRNA相对表达量均低于BMMSC组(P=0.001,P=0.039,P=0.045)。4组大鼠膝关节软骨组织中NF-κB p65的蛋白相对表达量的组间差异无统计学意义(F=1.797,P=0.226)。模型组大鼠膝关节软骨组织中TLR4、MyD88、p-NF-κB p65的蛋白相对表达量均高于假手术组(P=0.000,P=0.000,P=0.000),BMMSC组和联合干预组大鼠膝关节软骨组织中TLR4、MyD88、p-NF-κB p65的蛋白相对表达量均低于模型组(P=0.022,P=0.025,P=0.026;P=0.000,P=0.000,P=0.000),联合干预组大鼠膝关节软骨组织中TLR4、MyD88、p-NF-κB p65的蛋白相对表达量均低于BMMSC组(P=0.011,P=0.003,P=0.025)。结论:补肾痹通方联合BMMSC干预KOA,能够促进软骨组织的修复,其作用机制与抑制TLR4-MyD88-NF-κB信号通路的激活及软骨细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 骨关节炎 补肾痹通方 间质干细胞 骨髓 软骨细胞 细胞凋亡 类Toll受体 髓系分化初级反应蛋白质88 NF-κB 动物实验
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鼻通喷雾剂的质量标准研究 被引量:5
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作者 张何 史公良 +4 位作者 张景云 韩健 何晓明 崔培红 赵余庆 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1495-1497,共3页
目的建立鼻通喷雾剂的质量标准。方法对制剂中细辛、菊花和冰片采用薄层色谱法进行定性鉴别;采用HPLC法测定制剂中欧前胡素。结果薄层色谱法能检出细辛、菊花和冰片;欧前胡素在0.07232~0.3616μg与峰面积具有良好的线性关系,平均回收率... 目的建立鼻通喷雾剂的质量标准。方法对制剂中细辛、菊花和冰片采用薄层色谱法进行定性鉴别;采用HPLC法测定制剂中欧前胡素。结果薄层色谱法能检出细辛、菊花和冰片;欧前胡素在0.07232~0.3616μg与峰面积具有良好的线性关系,平均回收率为98.59%,RSD为1.04%。结论建立的方法简便、准确、可靠,重现性好,可作为该制剂的质量标准。 展开更多
关键词 鼻通喷雾剂 薄层色谱 高效液相色谱 欧前胡素
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双藤痹痛凝胶膏剂对胶原诱导性关节炎模型大鼠血浆炎性因子和滑膜组织相关因子的影响 被引量:5
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作者 严国鸿 张玉琴 +3 位作者 林雄 黄燕 翁淑琴 徐伟 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2018年第1期43-47,共5页
目的观察双藤痹痛凝胶膏剂对胶原诱导性关节炎(CIA)模型大鼠血浆炎性细胞因子和滑膜组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(My D88)、核因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨其相关作用机制。方法大鼠尾部皮下注射胶原乳剂制作CIA模型。大... 目的观察双藤痹痛凝胶膏剂对胶原诱导性关节炎(CIA)模型大鼠血浆炎性细胞因子和滑膜组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(My D88)、核因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨其相关作用机制。方法大鼠尾部皮下注射胶原乳剂制作CIA模型。大鼠随机分为正常组、模型组和双藤痹痛凝胶高、低剂量组,ELISA检测血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β及IL-6的含量,RT-PCR检测滑膜组织TLR4、My D88、NF-κB的mRNA表达,Western blot检测滑膜组织TLR4、My D88、NF-κB的蛋白表达。结果与模型组比较,双藤痹痛凝胶高、低剂量组大鼠血浆TNF-α、IL-1β及IL-6含量显著降低,滑膜组织TLR4、My D88、NF-κB mRNA和蛋白表达明显降低。结论双藤痹痛凝胶膏剂可能是通过抑制炎症反应、调节滑膜组织TLR4/NF-κB信号通路相关靶点表达发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 双藤痹痛凝胶膏剂 胶原诱导性关节炎 Toll样受体4 髓样分化因子88 核因子-κB 大鼠
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痹痛巴布剂中多元复合透皮吸收促进剂的优选 被引量:8
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作者 李智勇 罗霄山 +2 位作者 孙冬梅 王洛临 罗文汇 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第10期42-45,共4页
目的:优选痹痛巴布剂中多元复合透皮促进剂(MCPE)。方法:采用Frans扩散池法进行体外透皮吸收试验,以单位面积累积释放量为指标,采用单因素试验考察1%冰片(BO),1.5%氮酮(AZ),5%丙二醇(PG)及1%薄荷脑(MT)对痹痛巴布剂中桂皮醛体外经皮渗... 目的:优选痹痛巴布剂中多元复合透皮促进剂(MCPE)。方法:采用Frans扩散池法进行体外透皮吸收试验,以单位面积累积释放量为指标,采用单因素试验考察1%冰片(BO),1.5%氮酮(AZ),5%丙二醇(PG)及1%薄荷脑(MT)对痹痛巴布剂中桂皮醛体外经皮渗透的影响;以透皮速率、外观及初黏力的综合评分为指标,通过U7(74)均匀设计法优化MCPE的配比。结果:1%MT,1%BO,5%PG及1.5%AZ对痹痛巴布剂中桂皮醛的透皮渗透均具有不同程度的促进作用;MCPE最佳BO-AZ-PG-MT配比为1.33%∶1.90%∶6.40%∶1.30%。结论:优选的MCPE可明显提高痹痛巴布剂的透皮速率常数,同时对其外观质量及初黏力的影响较小。 展开更多
关键词 痹痛巴布剂 经皮给药 多元复合透皮吸收促进剂 均匀设计
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均匀设计法优选双藤痹痛凝胶膏剂的基质处方 被引量:8
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作者 严国鸿 潘旭东 +3 位作者 李煌 褚克丹 徐伟 夏裕发 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2014年第15期11-14,共4页
目的:优选双藤痹痛凝胶膏剂的基质处方。方法:以初黏力、剥离强度和综合感观评分为综合评价指标,选择聚丙烯酸钠(NP700)为骨架材料,高岭土为填充剂,卡波姆940、聚乙烯醇(PVA-124)和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为增黏剂,甘油为保湿剂,甘羟铝... 目的:优选双藤痹痛凝胶膏剂的基质处方。方法:以初黏力、剥离强度和综合感观评分为综合评价指标,选择聚丙烯酸钠(NP700)为骨架材料,高岭土为填充剂,卡波姆940、聚乙烯醇(PVA-124)和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为增黏剂,甘油为保湿剂,甘羟铝为交联剂,柠檬酸为交联调节剂,蓖麻油为软化剂,采用均匀设计优选双藤痹痛凝胶膏剂的基质处方。结果:最佳基质处方质量比NP700∶卡波姆940∶PVA-124∶CMC-Na∶高岭土∶甘油∶甘羟铝∶柠檬酸∶蓖麻油=1.68∶0.43∶0.1∶0.33∶1.08∶12.0∶0.09∶0.14∶0.05;初黏力12.1 mm,剥离强度34.56 s,综合感官得分27.7。结论:制备的双藤痹痛凝胶膏剂外观光滑平整,具有适宜的黏附性,无膜残留,皮肤追随性较好。 展开更多
关键词 均匀设计 双藤痹痛凝胶膏剂 基质处方 初黏力 剥离强度 综合感观评分
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风湿痹痛胶囊质量标准 被引量:7
16
作者 黄木土 林兰兰 +2 位作者 谢新民 肖俊峰 韩丽萍 《医药导报》 CAS 2017年第7期786-789,共4页
目的建立风湿痹痛胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱法对风湿痹痛胶囊中羌活、独活、防风进行定性鉴别;薄层色谱法对黑顺片进行乌头碱限量检查;采用高效液相色谱法测定制剂中羌活主要成分异欧前胡素的含量。结果薄层法色谱鉴别专属性强... 目的建立风湿痹痛胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱法对风湿痹痛胶囊中羌活、独活、防风进行定性鉴别;薄层色谱法对黑顺片进行乌头碱限量检查;采用高效液相色谱法测定制剂中羌活主要成分异欧前胡素的含量。结果薄层法色谱鉴别专属性强,斑点清晰,阴性无干扰;乌头碱限量符合《中华人民共和国药典》2010年版要求;异欧前胡素在3.668 96~183.448 00μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=1),平均加样回收率96.42%,RSD=2.64%。结论该方法专属性强,稳定性好,重复性好,可有效控制风湿痹痛胶囊质量。 展开更多
关键词 风湿痹痛胶囊 羌活 色谱法 薄层 色谱法 高效液相
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无机陶瓷膜微滤耦合超声澄清痹通药酒提取液的研究 被引量:5
17
作者 潘林梅 黄敏燕 郭立玮 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1631-1634,共4页
目的研究无机陶瓷膜微滤耦合超声技术在痹通药酒澄清过滤中的应用。方法以膜渗透通量、膜污染阻力分布等为指标,考察间歇超声、连续超声与未耦合超声在痹通药酒澄清滤过中的差异,进而对操作条件进行优化研究。结果连续超声可显著增强膜... 目的研究无机陶瓷膜微滤耦合超声技术在痹通药酒澄清过滤中的应用。方法以膜渗透通量、膜污染阻力分布等为指标,考察间歇超声、连续超声与未耦合超声在痹通药酒澄清滤过中的差异,进而对操作条件进行优化研究。结果连续超声可显著增强膜的渗透性能,渗透通量高达173 L/(m2.h),通量提高率31.6%,同时还能有效降低膜污染阻力,尤其对膜表面沉积层,降幅达50%以上。一定范围内,超声对膜过程的强化与操作压力呈正比,与操作温度呈反比。结论陶瓷膜微滤过程耦合超声技术是一种安全有效的膜分离手段。 展开更多
关键词 痹通药酒 无机陶瓷膜微滤 超声 耦合
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不同剂量^(60)Co辐照对风湿痹痛胶囊中异欧前胡素含量的影响 被引量:5
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作者 黄木土 谢新民 +2 位作者 张美 林兰兰 韩丽萍 《医药导报》 CAS 北大核心 2018年第2期217-219,共3页
目的建立风湿痹痛胶囊中异欧前胡素的含量测定方法,并考察不同剂量^(60)Co辐照对其含量的影响。方法Agilent C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(41∶59)为流动相,检测波长为310 nm,流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃。... 目的建立风湿痹痛胶囊中异欧前胡素的含量测定方法,并考察不同剂量^(60)Co辐照对其含量的影响。方法Agilent C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(41∶59)为流动相,检测波长为310 nm,流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃。结果异欧前胡素在3.668 96~183.448μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=1.000 0),平均加样回收率96.42%,RSD=2.61%;辐照剂量2,5和10 kGy对该成分的含量未引起明显变化。结论 HPLC法对风湿痹痛胶囊中异欧前胡素含量测定准确、可行,^(60)Co辐照分虽为10 kGy以下对该制剂中异欧前胡素没有显著影响。 展开更多
关键词 风湿痹痛胶囊 60Co辐照 异欧前胡素
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基于NLRP3介导的细胞焦亡探讨痹通方含药血清对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞损伤的保护作用及机制 被引量:5
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作者 齐庆 孙蓬远 +5 位作者 许诺 关蕊 郑建南 赵夜雨 于静 高明利 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第10期44-47,I0006-I0010,共9页
目的探讨痹通方含药血清对脂多糖(LPS)诱导的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)的细胞焦亡的保护作用机制及对NLRP3通路的影响。方法SD大鼠随机分成3组:空白对照组,痹通方低、高剂量组分别给予4.2 g/(kg·d)、16.8 g/(kg·d)... 目的探讨痹通方含药血清对脂多糖(LPS)诱导的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)的细胞焦亡的保护作用机制及对NLRP3通路的影响。方法SD大鼠随机分成3组:空白对照组,痹通方低、高剂量组分别给予4.2 g/(kg·d)、16.8 g/(kg·d)灌胃;空白对照组给予等量蒸馏水灌胃。连续灌胃10 d后制备含药血清。将细胞分为5组:空白对照组,LPS处理组,痹通方含药血清低、高剂量组,MCC950组。收集上述各组细胞,CCK8检测细胞活力,RT-qPCR检测各组细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-18、IL-1β、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、MIP-1α基因表达水平及Western blotting检测AIM2、ASC、Caspase-1、IL-18、IL-1β、cleaved-GSDMD、GSDMD、NLRP3蛋白表达。免疫荧光染色法检测NLRP3表达情况。结果与空白组比较,LPS处理组细胞活力下降(P<0.01),TNF-α、IL-18、IL-1β、MCP-1、MIP-1αmRNA表达升高(P<0.01),AIM2、ASC、Caspase-1、IL-18、IL-1β、cleaved-GSDMD、GSDMD、NLRP3蛋白表达升高(P<0.01);免疫荧光结果显示,与空白对照比较,模型组NLRP3荧光强度显著升高(P<0.01)。与LPS处理组相比,给予NLRP3抑制剂MCC950组和痹通方含药血清组均可改善上述指标变化。结论痹通方能有效抑制NLRP3炎症小体表达,减少MH7A细胞焦亡及改善炎症损伤,其机制可能与调控NLRP3通路相关。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 MH7A细胞 细胞焦亡 痹通方 NLRP3
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筋骨痹痛汤药物血清对白细胞介素-1β诱导的兔软骨细胞凋亡的保护作用 被引量:3
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作者 肖龙 袁海洲 +3 位作者 钟沁 黄剑 冼华 黄英如 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期342-347,共6页
目的观察筋骨痹痛汤药物血清对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的兔软骨细胞Bcl-2、Bax表达及细胞凋亡的影响,探讨筋骨痹痛汤治疗骨性关节炎的机制。方法随机取雄性成年新西兰兔8只分成4组,分别灌服生理盐水、补肝肾中药(骨碎补、续断和淫羊... 目的观察筋骨痹痛汤药物血清对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的兔软骨细胞Bcl-2、Bax表达及细胞凋亡的影响,探讨筋骨痹痛汤治疗骨性关节炎的机制。方法随机取雄性成年新西兰兔8只分成4组,分别灌服生理盐水、补肝肾中药(骨碎补、续断和淫羊霍)、独活寄生汤和筋骨痹痛汤,制得空白血清和药物血清。分离制备幼兔软骨细胞,采用甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光法鉴定软骨细胞。取第3代软骨细胞,随机分5组实验:空白组(A组)、模型组(B组)、补肝肾中药对照组(C组)、独活寄生汤对照组(D组)、筋骨痹痛汤组(E组)。A组用含10%空白血清的DMEM培养36h,其余各组均先采用含IL-1β的DMEM诱导培养12h,然后B、C、D、E组分别给予含10%空白血清、10%补肝肾中药药物血清、10%独活寄生汤药物血清、10%筋骨痹痛汤药物血清的DMEM培养24h。实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和免疫印迹法检测兔软骨细胞Bcl-2和Bax的mRNA和蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡比例。结果经鉴定分离制备的细胞为软骨细胞。软骨细胞培养24h后,C、D、E组Bcl-2mRNA和蛋白表达高于B组,D、E组高于C组,E组高于D组,差异均有统计学意义(P<0.05);Bax mRNA和蛋白表达,以及软骨细胞凋亡率,C、D、E组低于B组,D、E组低于C组,E组低于D组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论筋骨痹痛汤药物血清对IL-1β诱导的兔软骨细胞凋亡具有明显保护作用,其机制可能是通过促进Bcl-2表达和抑制Bax表达,调节Bcl-2与Bax的比例来实现。 展开更多
关键词 筋骨痹痛汤血清 软骨细胞 Bcl-2 Bax 免疫印迹法 流式细胞术
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